Καλλιέργεια

‘Άσκηση στην ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑ

Αρμακόλα Ειρήνη & Βογιατζή
Νικολέτα
Βυ1

Καλλιέργεια 1
 Ορισμός καλλιέργειας
• Καλλιέργεια είναι η απομόνωση ενός η πολλών
μικροβίων
• Σκοπός καλλιέργειας είναι :
 Απομόνωση μικροβίων

 Η Ταυτοποίηση τους (δηλαδή ποιο μικρόβιο είναι)

 Το αντιβιόγραμμα (test) ευαισθησίας στα

ΑΝΤΙΒΙΟΤΙΚΑ και δείχνει αν το μικρόβιο είναι η
δεν είναι ευαίσθητο στα Αντιβιοτικά και σε ποια
ακριβώς

Καλλιέργεια 2
 Είδη
καλλιέργειας
 Στείρα χαρακτηρίζουμε μια καλλιέργεια στην
οποία δεν έχει αναπτυχθεί κανένα μικρόβιο.
 Αρνητική χαρακτηρίζουμε την καλλιέργεια στην
οποία ο αριθμός των μικροβίων που θα
αναπτυχθεί δεν αξιολογείται διότι είναι πολύ
μικρός ανάλογα με το υλικό που καλλιεργήθηκε.

 Εμβολιασμός είναι η τοποθέτηση πολύ μικρής

ποσότητας μολυσμένου υλικού σε θρεπτικά υλικά,
με αποτέλεσμα την ανάπτυξη και των
πολλαπλασιασμό των Μικροβίων.
Καλλιέργεια 3
Τι απαιτείται για μια καλλιέργεια ;
• Για μια καλλιέργεια απαιτείται :
1. Λυχνία Bunsen
2. Κρικοφόρος Στυλεός
3. Βαμβακοφόρος Στυλεός
4. Σιφώνια Pasteur
5. Σιφώνια κοινά αριθμημένα
6. Σωληνάρια αποστειρωμένα
7. Θρεπτικά υλικά
8. Το προς καλλιέργειαν υλικό

Καλλιέργεια 4
 Τρόποι λήψεων δειγμάτων για
καλλιέργεια
I. Δείγμα Αίματος για καλλιέργεια
Λαμβάνεται κατά κανόνα από κλινικό Ιατρό με
αποστειρωμένη σύριγγα και βελόνη κατά κανόνα την
ώρα που ανέρχεται ο πυρετός (γιατί τότε θεωρητικά
έχουμε την πιο μεγάλη συγκέντρωση μικροβίων). Η
ποσότητα του αίματος ανέρχεται στα 10 ml για 100
ml ζωμού (ενώ στα παιδιά λιγότερο αίμα και
λιγότερος ζωμός).

Καλλιέργεια 5
 Τρόποι λήψεων δειγμάτων για
καλλιέργεια
II. Δείγμα Ρινικού Εκκρίματος
Γίνεται με Βαμβακοφόρο Στυλεό. Ο άρρωστος
κάθεται σε μια καρέκλα ενώ με το αριστερό χέρι
κρατάμε το πρόσωπο του και ταυτόχρονα
σπρώχνουμε ελαφρά το κεφάλι του προς τα πίσω.
Στην συνέχεια βάζουμε τον Βαμβακοφόρο Στυλεό
στην μύτη, πρώτα στο ένα ρουθούνι και έπειτα στο
άλλο. Ο Βαμβακοφόρος Στυλεός μπαίνει στην μύτη
τόσο, όσο ο άρρωστος αρχίζει και μας προτρέπει
να σταματήσουμε. Στην συνέχεια το υλικό ή το
εμβολιάζουμε η το τοποθετούμε σε υλικό STUART.

Καλλιέργεια 6
 ΤΡΟΠΟΙ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΣΕ ΥΓΡΑ
ΘΡΕΠΤΙΚΑ ΥΛΙΚΑ
Λέγονται κοινώς ζωμοί και φέρονται είτε σε σωληνάρια με
περιεκτικότητα 5-10 ml είτε σε φιαλίδια με περιεκτικότατα 30-
50-100 ml.
O Εμβολιασμός τους μπορεί να γίνει :
o Με σιφώνιο Pasteur
o Με Βαμβακοφόρο Στυλεό ή
o Με κρικοφόρο Στυλεό
Η εκλογή του ενός από τα παραπάνω θα γίνει ανάλογα με την
σύσταση του υλικού.
Π.χ. ‘Aν το υλικό είναι στερεό-πολτώδες τότε χρησιμοποιούμε
Κρικοφόρο Στυλεό, ενώ αν το υλικό είναι ρευστό
χρησιμοποιούμε ανάλογα Βαμβακοφόρο Στυλεό ή Σιφώνιο
PASTEUR

Καλλιέργεια 7
 ΤΡΟΠΟΙ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑΣ ΣΕ ΛΟΞΑ
ΘΡΕΠΤΙΚΑ ΥΛΙΚΑ
Τα Λοξά θρεπτικά υλικά φέρονται συνήθως σε
σωληνάρια και λιγότερο σε φιαλίδια, όπου το
στερεό θρεπτικό υλικό αφέθηκε να πήξει σε
κεκλιμένη θέση
Ο Εμβολιασμός σ αυτά μπορεί να γίνει :
o Με σιφώνιο PASTEUR
o Με Βαμβακοφόρο Στυλεό
o Με Κρικοφόρο Στυλεό ή
o Με Ακίδα

Καλλιέργεια 8
 ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΣΕ ΤΡΥΒΛΙΑ

Τα τρυβλία κατά κανόνα περιέχουν στερεό θρεπτικό υλικό σε

ποσότητα περίπου 15 ml ( πρέπει το υλικό να καλύπτει τη μισή
χωρητικότητα του τρυβλίου). Το τρυβλίο με τη στερεή πλάκα του
θρεπτικού υλικού, πρέπει οπωσδήποτε πριν χρησιμοποιηθεί να είναι
στεγνό. Τοποθετούμε το κάλυμμα του τρυβλίου στο δάπεδο το
κλιβάνου ως έχει. Το άλλο μέρος που περιέχει το υλικό
τοποθετείται κατά τέτοιον τρόπο, ώστε το ένα άκρο των χειλέων
που ακουμπά στο κάλυμμα ενώ το άλλο μισό στο δάπεδο του
κλιβάνου. Απαιτείται αρκετή ώρα. Αν τοποθετήσουμε το τρυβλίο
στον κλίβανο ως έχει πρέπει η θερμοκρασία του κλιβάνου να είναι
μεγαλύτερη από 37C. Υπενθυμίζεται ότι κάθε τρυβλίο αποτελείται
από τα δύο επίπεδα κυλινδρικά μέρη, δηλαδή τη βάση που περιέχει
το υλικό και το κάλυμμα που είναι φαρδύτερο και μέσα σ΄αυτό
μπαίνει η βάση. Η επίστρωση, δηλαδή ο Εμβολιασμός του προς
προς το καλλιέργειαν υλικό στα τρυβλία γίνεται ανάλογα με το τι
επιδιώκουμε να πετύχουμε.

Καλλιέργεια 9
 Eπώαση Καλλιεργειών
• Γίνεται κατά κανόνα σε κλίβανο 37C οπού η
θερμοκρασία διατηρείται σταθερή.
Υπάρχουν δύο είδη Μικροβίων
o Ψυχρόφιλα και
o Θερμόφιλα
Επίσης ανάλογα με το περιβάλλον που ευνοεί την
ανάπτυξη των Μικροβίων τα διακρίνουμε σε Αερόβια
και Αναερόβια.
Ο χρόνος επώασης μιας καλλιέργειας κυμαίνεται από
24-48 ή περισσότερες ώρες. Αν αναπτυχθεί Μικρόβιο
μέσα σε 24 ώρες η καλλιέργεια θεωρείται θετική αν
δεν αναπτυχθεί θεωρείται αρνητική.

Καλλιέργεια 10
 Χρώση κατά GRAM
Η χρώση κατά GRAM γίνεται κατά κανόνα
σε κάθε θετικό καλλιέργημα αφενός για να
καθορίσουμε τη μορφολογία του
Μικροβίου που αναπτύχθηκε( π.χ. αν είναι
Κόκκοι, ή Βακτηρίδια ή Κοκκοβακτηρίδια.
Και αφετέρου αν ανήκει στα θετικά η
αρνητικά κατά GRAM Μικρόβια.

Καλλιέργεια 11
 Αποστείρωση
Αποστείρωση είναι η καταστροφή των Μικροβίων και των
σπόρων τους.
Δηλαδή ένα αντικείμενο είναι Αποστειρωμένο και δεν
φέρει επάνω του κανένα ίχνος μολυσματικού αιτίου
(Μικρόβια, μύκητες και σπόρους Μικροβίων )
Ο έλεγχος της Αποστείρωσης πρέπει να γίνεται στα
δέματα Αποστείρωσης πριν να χρησιμοποιηθούν.
Αυτό αφορά
i. Τις ενδείξεις των ταινιών που φέρουν τις χημικές
ουσίες και τους βιολογικούς δείκτες.
ii. Τα ενδεικτικά όργανα των κλιβάνων, τα οποία πρέπει
να συγκρίνονται με τις ενδείξεις προτύπων οργάνων.

Καλλιέργεια 12
 ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ
 Μικροβιολογία Ι (Β’ Τάξη 1ου κύκλου)

 Επίτομη Γενική Μικροβιολογία (Τόμος Ι)

 Επίτομη Γενική Μικροβιολογία (Τόμος 2)

 www.google.com

Καλλιέργεια 13
ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑ-ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ
ΑΡΜΑΚΟΛΑ ΕΙΡΗΝΗ

&

ΒΟΓΙΑΤΖΗ ΝΙΚΟΛΕΤΑ

Καλλιέργεια 14