Replikacija,

transkripcija i
translacija
Vladimir ormaz IV5
ore
Nikolaevi
orde
nikolaeviIV5

Centralna dogma u biosintezi proteina

Replikacija

Transkripcija

Translacija

DNK
iRNK
Ribozom

Polipeptid
(protein)
Replikacija udvajanje genetskog materijala
Transkripcija prepisivanje genetske informacije sa DNK na iRNK
Translacija prevoenje genetske informacije u redosled AK u proteinu

Struktura nukleinskih kiselina

Citozin (C)

Guanin (G)

Uracil (U)

5 kraj lanca

Timin (T)

Adenin (A)
3,5
fosfodiestarska
veza

Pentoze

3 kraj
lanca
Riboza

Dezoksiriboza

Struktura nukleinskih kiselina

Razlike u strukturi DNK i RNK molekula
DNK
Dupli heliks
eer
dezoksiriboza

Komplementarnost baza : A T (U)

G - C

RNK
Monolanci
raznih oblika

5 kraj

Adenin

Timin
3 kraj

eer riboza

Sadri
Sadri
pirimidinsku bazu pirimidinsku
bazu uracil
timin
umesto timina
Vei molekul od
RNK

leb

li
a
M

leb

i
lik
e
V

Manji molekul
od DNK

3 kraj

Guanin

Citozin
5 kraj

Organizacija
eukariotske
DNK

Superspiralizovane
petlje

Nukleofilamenti
Hromatida

Centromera

Solenoidna
stuktura

(hromatinska vlakna
debljine 30nm)

Metafazni
hromozom

DNK
dvostruki heliks

Nukleozomi

Histoni

REPLIKACIJA
REPLIKACIJA
Semikonzervativna replikacija- jedan lanac novog
molekula DNK je novosintetisan, a drugi potie od
roditelja
Faze replikacije:
1)Odmotavanje duplog heliksa DNK i separacija lanaca
2)Kopiranje oba lanca DNK

REPLIKACIJA
REPLIKACIJA
Prokariote

Eukariote
Novosintetisani lanci

Dve cirkularne
DNK

Ori
OriC C

Replikaciona
viljuska
Novosintetisani
lanci

Originalni lanac

Roditeljski lanci
Mesta poetka replikacije

Replikaciona viljuska Replikacioni baloni

Stvaranje
Stvaranjereplikacione
replikacioneviljuke
viljuke
Ori
OriCCregion
region
Mesta za vezivanje DnaA proteina

DnaA protein prepoznaju specifine

nukleotidne sekvence koje odreuju
mesto inicijacije replikacije

DnaA protein
ATP
Primaza

DNK helikaza

DnaA protein

SSB
DNK helikaza
ATP
SSB proteini + primaza
ATP

Primaza (RNK polimeraza) sinetie kratke

delove RNK, komplementarne i antiparalelne
u odnosu na DNK matricu

DNK helikaza dri lance DNK odvojene

u cilju odmotavanja duplog heliksa

SSB proteini dre lance DNK odvojene

i tite DNK od nukleaze

Inicijacija
Inicijacijareplikacije
replikacije
DNK polimeraza III

Topoizomeraza

BITNO!!!
Proces sinteze ovog
(komplementarnog lanca
DNK) zahteva prisustvo
kraeg lanca RNK (RNK
prajmer)

RNK prajmer
RNK prajmer
DNK helikaza
SSB proteini
Primaza (RNK polimeraza)

Primazom ine primaza,

helikaza i nekoliko drugih proteina
koji pomau aktivnost helikaze

DNK
DNKpolimeraze
polimeraze
3 kraj
5 kraj

Pol III

matrica
DNK

Glavni enzim koji katalizuje vezivanje

dNTP u rastui lanac DNK je:
a)DNK polimeraza
b)RNK polimeraza
c)DNK ligaza
d)Reverzna transkriptaza

3 kraj

-Kopiraju lanac DNK sa visokim stepenom tanosti

- Sintetiu polinukleotidne lance samo u pravcu 5
- Ne mogu da otponu sintezu DNK lanca
Kod prokariota postoje tri vrste DNK polimeraza
(pol I, pol II i pol III).

pirofosfat
dolazei deoksiribonukleotid
trifosfat

5 kraj

Razlike
RazlikeDNK
DNKpolimeraze
polimerazeIIi iDNK
DNKpolimeraze
polimerazeIII
III
DNK
DNKpolimeraza
polimerazaI I
- -uklanja
uklanjaRNK
RNKprajmer
prajmer55 33egzonukleaznom
egzonukleaznomaktivnou
aktivnou
praznine
koje
nastaju
uklanjanjem
RNK
- -popunjava
popunjava praznine koje nastaju uklanjanjem RNKprajmera,
prajmera,ugradnjom
ugradnjomdNTP
dNTP

DNK
DNKpolimeraza
polimerazaIII
III
-glavni
enzimu ureplikaciji
replikacijiodgovoran
odgovoranzazaelongaciju
elongacijulanca
lancaDNK
DNK
-glavnienzim
nepravilno
sparene
nukleotide
3
5
egzonukleaznom
- -uklanja
uklanja nepravilno sparene nukleotide 3 5 egzonukleaznomaktivnocu
aktivnocui inananjihova
njihova
mesta
mestaugrauje
ugraujekomplementarne
komplementarnenukleotide
nukleotide

Faza
Fazaelongacije
elongacijelanca
lancaDNK
DNK
DNK polimeraza I

DNK polimeraza III

Vodei lanac
RNK prajmer
Koji se uklanja

Prvi RNK prajmer

koji se uklanja

Okazaki jevi
fragmenti Drugi RNK
prajmer

Lanac koji zaostaje

DNK polimeraza III
DNK polimeraza I

Faza
Fazaterminacije
terminacijereplikacije
replikacije
DNK polimeraza III

DNK ligaza

Novo sintetisani DNK

2.RNK prajmer

3.RNK prajmer

DNK polimeraza III

TRANSKRIPCIJA
TRANSKRIPCIJA
-Prepisivanje redosleda nukleotida sa lanca DNK (biosinteza RNK)
-Selektivan proces
-RNK transkripti podleu post-transkripcionim modifikacijama

Tipovi RNK:
Ribozomske RNK (rRNK)
Transportna RNK (tRNK)
Informaciona RNK (iRNK)

gen

Kodirajua sekvenca ili

sence lanac

DNK
3

Lanac matrica ili

antisence lanac

kodoni

RNK
5

RNK transkript

Razlike replikacije i transkripcije:

1.Transkripcija zapoinje istovremeno na vie razliitih mesta
i kod prokariota i kod eukariota
2. U eliji ima mnogo vie RNK polimeraze u odnosu na DNK polimerazu
3. RNK polimeraza je mnogo sporija od DNK polimeraze
4. Tanost polimerizacije RNK je mnogo manja
5. RNK polimeraza ima sposobnost da zapone sintezu novog lanca RNK

Ribozomalna
RibozomalnaRNK
RNK

Velika
subjedinica

Mala
subjedinica

Transportna
TransportnaRNK
RNK

Katalitiko
mesto

-Dihidrouridin
- Inozin

Akceptorski
krak

-Ribotimidin
- Pseudouridin

tRNK/AK
vezujua
mesta

D petlja

TC petlja

Varijabilna
petlja
Antikodon
Kodon
iRNK
vezana AK

antikodon

Informaciona
InformacionaRNK
RNK

Prokariotska iRNK
-policistronska
-odmah podlee
translaciji

Eukariotska iRNK
-monocistronska
-post-transkripcione
modifikacije pre
translacije

-nema kapu na 5 kraju

- nema poli-A rep na 3
- ima ajn-Dalgarnov niz
- nema introna

-ima kapu na 5 kraju

- ima poli-A- rep
-nema ajn-Dalgarnov niz
- primarni transkript ima
introna

ajn-Dalgarnov niz
5 kapa

Gppp
5-kraj

Kodirajui region

AGGA AUG
Start kodon
Nekodirajii region

UAA

pApApApApApA-OH

3-kraj
Stop kodon

Inicijacija
Inicijacijatranskripcije
transkripcije
RNK polimeraza

antisense lanac
sense lanac

Sigma faktor

Promoter

- 35 sekvenca

Pribnovljev blok

sekvenca u okviru promotornog regiona

koju prepoznaje RNK polimeraza

nukleotid od koga
poinje transkripciaja

Sekvenca u okviru promotor

regiona koju prepoznaje
holoenzim RNK-polimeraze
Pribnovljev
blok

- 35
sekvenca
5

T T G AC A

-25 baza

T AT AA T

Start
transkripcije
-10 baza

DNK
3

DNK
3

Sekvenca u okviru promotor regiona

koju prepoznaje RNK-polimeraza II
Hognesov
CAAT
blok
blok
(TATA)
40 baza

Start
transkripcije

25 baza

3
5

Elongacija
Elongacijatranskripcije
transkripcije
RNK polimeraza

TRANSKRIPCIJA
iRNK
DNK
DNK

poetak sinteze i RNK

odvajanje sigma faktora

RNK nukleotidi
RNK polimeraza

3 kraj lanca
Transkripcioni
balon

smer transkripcije
DNK antisense
traka

Terminacija
Terminacijatranskripcije
transkripcije
faktor zavisna terminacija

faktor

DNK

Terminacioni protein ( protein)

prepoznaje terminacionu sekvencu
na molekuli DNK, destabilizuje vezu
polimeraze i matrice, polimeraza disosuje
i transkripcija se zavrava.

RNK
RNK polimeraza
N

faktor nezavisna terminacija

Stvaranje ukosnice na lancu RNK

destabilie vezu izmeu polimeraze i
matrice, polimeraza disosuje i transkripcija
se zavrava.

G
C
C
G
C
G
A
A
.....NNNN

.
.
.
.
.
.
.
.

C
G
G
C
G
C
U
U

NNNNNN........

Post-transkripcione
Post-transkripcionemodifikacije
modifikacijeiRNK
iRNK
jedro

transkripcija

Primarni transkript (hnRNK) je linearna kopija

transkripcione jedinicei uglavnom predstavlja
funkcionalno neaktivan molekul RNK.

DNK

Modifikacije iRNK

Tri vrste modifikacija hnRNK:

pre-iRNK

iRNK

1. adicija 5 kape
ribozom

2. adicija poli-A repa

translacija

3. isecanje introna

polipeptid

Pre-iRNK 5

Egzon

-poveava stabilnost iRNK

- olakava inicijaciju translacije

Intron

Egzon

Intron

-zatita 3-kraja od egzonukleaza

-olakava transport iRNK u citoplazmu
-olakava translaciju

Egzon

5 kapa

Kodirajui
segment

iRNK

5 kapa

Introni se isecaju a
egzoni spajaju u iRNK
Poli-A rep

Poli-A rep

TRANSLACIJA
TRANSLACIJA
gen

3 Kodirajua

sekvenca

DNK

Lanac
5 matrica

3
kodoni

RNK
5

3
antikodoni

tRNK
aminokiseline

metionin

glicin

polipeptidni lanac

valin

RNK transkript

Komponente
Komponentepotrebne
potrebneza
zaproces
procestranslacije
translacije

-Dihidrouridin
- Inozin

Akceptorski
krak
Aminoacil-tRNK
sintetaza

AK

-Ribotimidin
- Pseudouridin

Adenozin

D petlja

TC petlja

ATP

Adenozin

pirofosfat

Varijabilna
petlja
Antikodon

fosfat
tRNK

Kodon
iRNK

Adenozin

AMP

Aminoacil-tRNK
(aktivirana AK)

Inicijacija
Inicijacijatranslacije
translacije

Inicijacija
Inicijacijatranslacije
translacije

Elongacija
Elongacijatranslacije
translacije

Peptidil-tRNK

ELONGACIJA

amino kraj
polipeptidnog lanca
u
e
ed
sl
a
m
i
z
eu NK i RNK
r
p R
m il t
o
z c
bo noa
i
r i
am

Aminoacil tRNK

A prazna strana

Peptidil-tRNK

ns
ra
T
ja
ci
ka
lo

a
r
T

ija
c
a
it d
p
e
p
ns

neaktivna tRNK

Terminacija
Terminacijatranslacije
translacije

e
polip
etni
nasc

ptid
e
p
i
neaktivna tRNK
pol
i
n
cet
nas
peptidil tRNK
prazna A
strana

ptid

i RNK

NK
R
i

stop kodon (UAA, UAG, UGA)

neaktivni ribozom

Post-translacione
Post-translacionemodifikacije
modifikacije
Osnovni ciljevi post-translacionih modifikacija:
a) stvaranje funkcionalno aktivnog proteina
b) usmeravanje sintetisanog proteina na njegovo mesto delovanja

Proteolitiko razlaganje
1) uklanjanje metionina
2) uklanjanje polipeptida ( tripsinogen
3) uklanjanje signalnih polipeptida

Kovalentne modifikacije
glikozilacija
hidroksilacija
fosforilacija
lipofilne modifikacija
metilacija
sulfatacija
karboksilacija
stvaranje disulfidnih veza

tripsin )

HVALA
NA
PANJI!