水中大腸桿菌群檢測方法

-- 濾膜法
 使用濾膜截取水中細菌，再利用選擇性
01 培養基培養，藉此了解水中微生物含量
。
02 本實驗使用 m-Endo 培養基，該培養基
主要用以培養或分離出飲用水中好氧或
兼性厭氧、革蘭氏染色陰性 G(-) 、不
濾膜法原理 產孢子之大腸桿菌群（ Coliform grou
03 p ）。

大腸桿菌群能利用此培養基所供應的乳
糖作為碳源，則可以產生酸性物質與
eosin 及 methylene blue 作用，形成深色
而且帶有綠色金屬光澤的菌落。若無法
綠色金屬光澤
利用乳糖的菌則只能形成一般白色或半
濾膜法原理
• LES Endo agar 培養基（又名 m - Endo agar LES 培養基） ：
每一公升之 LES Endo agar 培養基含下列成份：
• 酵母抽出物（ Yeast extract ）　　　　　　　　 　　　 1.2 g
• 胰化酪蛋白腖（ Casitone 或 Trypticase ）　　　　　　 3.7 g
• 胰化蛋白腖（ Tryptose ）　　　　　　　　　　　　　 7.5 g
• 硫化蛋白腖（ Thiopeptone 或 Thiotone ）　　　　　 　 3.7 g
• 乳糖（ Lactose ）　　　　　　　　　　　　　　　 　 9.4 g
• 磷酸氫二鉀（ K2HPO4 ）　　　　　　　　　　　　　 3.3 g
• 磷酸二氫鉀（ KH2PO4 ）　　　　　　　　　　　　 　 1.0 g
• 氯化鈉（ NaCl ）　　　　　　　　　　　　　　　　 3.7 g
• 去氧膽酸鈉（ Sodium desoxycholate ）　　　　　　　 0.1 g
• 硫酸月桂酸鈉（ Sodium lauryl sulfate ）　　　　　 　 0.05 g
• 亞硫酸鈉（ Na2SO3 ）　　　　　　　　　　　　　 　 1.6 g
• 鹼性洋紅（ Basic fuchsin ）　　　　　　　　　　　 　 0.8 g
• 瓊脂（ Agar ）　　　　　　　　　　　　　　　　　 15.0 g
 大腸桿菌 --- 濾膜法實驗步驟
1. 將水樣稀釋至適當的稀釋倍數。
2. 取 10-100mL 水樣進行過濾（濾紙的格線面朝上），將濾
膜上截留之細菌培養於含有乳糖的 m-Endo 培養基上，並
使濾膜與培養基完全貼合。
3. 於 35±1℃ 培養 24±2 小時後觀察並計數。
4. 計算具綠色金屬光澤的菌落數。
綠色金屬光澤
（所有缺乏金屬光澤的菌落，應判定為非大腸桿菌群。）
此培養皿產生了多少個大腸桿菌群菌落？
 大腸桿菌 --- 濾膜法結果計算

所計大腸桿菌群菌落數目 100
大腸桿菌數(CFU/100mL) 
過濾之水樣含量(ml)

其中： CFU 為 Colony-Forming Unit

總大腸桿菌群
糞便型大腸桿菌群
大腸桿菌（ E-coli ）
 今天的實驗內容
• 各組同學分析成功湖，系池及飲料水樣。
• 請將水樣以 10 倍序列稀釋法稀釋後，水樣濃度為 1X ， 10X ， 100X
， 1000X 。
• 選取適當稀釋度的水樣過濾後分析，水樣過濾體積為 50ml 。
• 星期二中午 12:00 ，助教會開放三樓實驗室，請同學來觀察計數菌
落。
01 問題與討論

One Three

請計算水樣中可培養 請上台灣環保署的
大腸桿菌的數量，並 網站查詢，使用濾
討論稀釋對於計數結 膜法偵測水中糞便
果的影響。 型大腸桿菌及大腸
Two 桿菌時所使用的選 Four
擇性培養基為何？
根據本次實驗分析 請討論利用多管發酵法
數據，請問成功湖 與濾膜法分析水樣中大
水是否可作為飲用 腸桿菌之優缺點。
水源 ? 為什麼 ?
值週組工作

• 擦拭實驗桌
• 倒垃圾
• 關燈、關風扇電源
• 協助準備實驗材料
Thanks
For Your
Watching