Replikacija DNK

REPLIKACIJA DNK

Ćeliski ciklus je život ćelije između dve deobe, pri čemu je i

deoba uključena u ciklus.
Ćelijski ciklus se sastoji od 2 faze interfaze i same deobe.
Ćelijski ciklus

G1 Presintetički period koji

obuhvata, s jedne strane, rast ćelije
do veličine koja odgovara datoj vrsti
ćelija i, sa druge strane, procese koji
pripremaju jedro da uđe u S-fazu.
Zbog rasta ćelije sinteza proteina u
citoplazmi je u ovoj fazi vrlo
intezivna. U ovoj fazi svaki

Cit
G1 predsintetički period hromozom se sastoji od jedne
oki (rast ćelije) hromatide, odnosno jednog molekula
nez
Telo a DNK.
faza
Anafaza
M
S Sintetički period S Sintetički period – replikacija DNK
(Udvajanje hromatida) udvajanje centriola
Metafaza
aza
ometaf G2 Postsintetički period je period u
P r
a za kome se ćelija priprema da uđe u
P ro f G2 postsintetički period deobu. Pošto se odvija posle
(prirema ćelija za deobu)
replikacije, (svaki hromozom se
sastoji od 2 hromatide) u ovoj fazi
je količina DNK u ćeliji duplo veća
nego u G1 fazi. Posle G2 faze ćelija
ulazi u deobu.
M- faza . Deoba ćelije.
Mitoza ukoliko se radi o deobi
Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

 Udvajanje molekula DNK

 Replikacija prethodi ćelijskoj deobi

(mitozi, mejozi, prostoj deobi)

 Odvija se u interfazi i to u S periodu

ćelijskog ciklusa
G1
 Postiže se genetički kontinuitet;
novonastale ćelije imaju kvantitativno i
kvalitativno istu DNK

Cit
G1 predsintetički period
oki (rast ćelije)
n eza
Telo
faza
Anafaza
S Sintetički period
M M
REPLIKACIJA
Metafaza (Udvajanje hromatida)
za
metafa
P ro
a
r o faz G2 postsintetički period
P
(prirema ćelija za deobu)

G2
Mitotičke deobe ćelija
Ćelijski ciklus

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Replikacija DNK

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

2. razdvajanje lanaca pri čemu će svaki

1. roditeljski molekul DNK poslužiti kao matrica za sintezu novog 3. dva novonastala molekula DNK
lanca (komplementarno sparivanje baza)

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

 Semikonzervativna; svaki novi molekul DNK sastoji se

od jednog starog i jednog novog lanca

 Bidirekciona

 Odvija se u 5’ – 3’ pravcu

 Sinteza se vrši sa matričnog ili roditeljskog lanca

Novi lanac Novi lanac

Stari lanac Stari lanac

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Roditeljski molekul
DNK

Razdvajanje lanaca
pri čemu će svaki
poslužiti kao matrica
za sintezu novog lanca

Sparivanje komplementarnih baza

Replikaciona viljuška
Dva novonastala molekula DNK

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK
Replikacija kao semikonzervativni proces

Replikaciona viljuška

Dodavanje
novih
nukleotida

Stari Novi
lanac lanac
Stari Novi Novi Stari
lanac lanac lanac lanac
Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Stari lanac Novi lanac Stari lanac Novi lanac

Fosfodiestarska
veza

DNK Polimeraza
III

Novi nukleotidi uvek se dodaju na 3’ kraj rastućeg lanac.

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

 Kod prokariota replikacija počinje na određenom mestu i odvija se istovremeno u oba smera i teče istom
brzinom.
 Tokom replikacije kod prokariota hromozom sadrži dve replikatorne viljuške.
 Proces se završava u terminacionom regionu, koji se nalazi nasuprot mestu početka replikacije.

Terminacioni Mesto početka Dve replikacione

region replikacije viljuške

1 2

Bidirekciona
replikacija

4 Dva novonastala
3 Replikacija kod prokariota
molekula DNK

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Replikatorna viljuška

Prepisivanje matričnih
lanaca

Dva novonastala
molekula DNK

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Kod eukariota replikacija počinje na više mesta istovremeno u oba smera.

Odvija se 10 – 20 puta sporije nego kod prokariota zbog složene organizacije hromatinskog materijala.

Kinetohor Centromera

Mesta početka replikacije Mesta početka replikacije

Replikativni mehurovi Replikativni mehurovi

Završena replikacija

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Veći broj enzima i proteinskih faktora koji regulišu replikaciju čine replizom

Osnovni enzimi pri replikaciji DNK Uloga:

Helikaze raskida H veze i otvara lanac

imaju i Prokariote i Eukariote, uloga

Topoizomeraze im je da smanjuju tenziju uvrtanja
D.N.K.

RNK primaza sinteza RNK početnica

DNK polimeraza I uklanja poslednji ribonukleotid

DNK polimeraza III sinteza novih lanaca DNK

Rnaza uklanja prajmere

DNK ligaza spajanje Okazaki fragmenata

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

DNK helikaze katalizuju razdvajanje dva DNK lanca raskidajući vodonične veze i omogućavaju stvaranje
replikacione viljuške.

Replikaciona viljuška

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Raskidaju
Raskidaju vodonične
vodonične veze
veze
topoizomeraza između
između lanaca čime se lanci
lanaca čime se lanci
razdvajaju
razdvajaju ii obrazuju
obrazuju sese
replikativne
replikativne viljuške.
viljuške.
Enzimi
Enzimi koji
koji smanjuju
smanjuju
tenziju
tenziju uvrtanja
uvrtanja helikaza
DNK
DNK

SSB
SSB proteini
proteini nakon
nakon otvaranja
otvaranja
replikacione
replikacione viljuške, sprečavaju
viljuške, sprečavaju
da
da se
se ponovo
ponovo uspostave
uspostave
vodonične
vodonične veze
veze između
između
razdvojenih lanaca
razdvojenih lanaca

SSB proteini

Smer odvijanja DNK

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Replikaciona viljuška je asimetrična. Oba lanca DNK se sintetišu u smeru 5’ 3’ i istovremeno, s tim što se
jedan sintetiše kontinuirano i naziva se vodeći lanac.
Drugi lanac sintetiše se diskontinuirano, u vidu fragmenata koji se naknadno povezuju, usled čega se
završava sa zakašnjenjem i naziva zaostajući lanac.

Smer odvijanja DNK

Vodeći lanac

Zaostajući lanac

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Sintezu oba lanca obavlja DNK polimeraza III tek pošto se veže za roditeljski lanac koji služi kao
matrica. Ovaj enzim ne može da se veže za ogoljeni lanac-matricu već zahteva postojanje začetnika –
prajmera.
Začetnik je kratki lanac RNK i njegovu sintezu katalizuje enzim primaza.
Prajmer je neophodan za oba lanca DNK.
Primaza
RNK Prajmer

RNK Prajmer

Primaza
Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Ulogu da dodaje nove nukleotide u vodećem lancu ima DNK polimeraza III koja po principu
komplementarnosti baza kontinuirano dodaje nove nukleotide u 5’- 3’ pravcu
DNK poli III je osnovni enzim polimerizacije prokariota čija je glavna uloga da sintetiše vodeći lanac
(i veći deo zaostajućeg lanca), pošto ima veliku brzinu ugranivanja nukleotida (1000nukleotida/s).

DNK polimeraza III

Smer odvijanja DNK

DNK polimeraza III

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Zaostajući lanac sintetiše u vidu delova od po nekoliko stotina do nekoliko hiljada nukleotida koji se
nazivaju Okazakijevi fragmenti. Stvaranje fragmenata vrši DNK poli III.

DNK polimeraza III

Smer odvijanja DNK

Okazakijev fragment

RNK prajmer

RNK prajmer

DNK polimeraza III

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Rnaza služi za uklanjanje ribonukleotida iz Okazakijevih fragmenata u zaostajućem lancu

Uklanjanje RNK Nedostajuća

prajmera vrši Rnaza fosfodiestarska veza

RNK prajmer

RNK prajmer
DNK polimeraza III

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Okazakijeve fragmente, po završetku sinteze, međusobno povezuje enzim ligaza izgrađujući

fosfodiestarsku vezu između nukleotida.

Ligaza

Molekularna biologija
REPLIKACIJA DNK

Replikacija je veoma tačan proces, pri čemu se nakon završene replikacije greške
su retke; jedan pogrešan nukleotid na 105 nukleotida

Nakon delovanja DNK polimeraze III; jedan pogrešan nukleotid na 10 7 nukleotida

Nakon delovanja postreplikativne reparacije jedan pogrešan nukleotid na 10 10

nukleotida

Greške u replikaciji (MUTACIJE) su veoma bitan izvor genetičke varijabilnosti

Molekularna biologija