UNIVERZITET U TUZLI

ZDRAVSTVENI STUDIJ
ODSJEK: MLD
Predmet: Citodijagnostika

VJEŽBA 4 – Bojenje citoloških uzoraka

Osnovno citološko bojenje jeste Papanicolu bojenje, predstavlja shematski slijed boja,
hemikalija i vode a koji služe za prikaz ćelijskih elemenata. Sastoji se od nuklearnog bojenja
po Hariss-hematoksilinu i dva citoplazmatska bojenja Orange-G6 i Eozin-azur-EA31.

Rezultati su sljedeći:
 Jedra se oboje ljubičasto do plavo
 Cijanofilna citoplazma se boji plavo do zeleno
 Eozinofilna citoplazma se boji ružičato
 Keratinizirana citoplazma se boji narandžasto

Postupak rada

1. Potopiti u 96% etanol – 10 minuta

2. Potopiti u destilovanu vodu – 10 sekundi
3. Bojiti po Hariss-hematoksilinu – 20 sec – 2 min
4. Isprati u tekućoj vodi – 10 sekundi
5. Isprati u tekucoj vodi – 10 sekundi
6. Uroniti u amonujačnu vodu – 4 sekunde
7. Isprati u tekućoj vodi – 10 sekundi
8. Uroniti u 96% etanol – 10 sekundi
9. Uroniti u 96% etanol – 10 sekundi
10. Bojiti u soluciji Orange G6 – 2-5 min
11. Uroniti u 96% etanol – 10 sekundi
12. Uroniti u 96% etanol – 10 sekundi
13. Bojiti u soluciji Polihrom 20 sec – 2 min
14. Uroniti u 96% etanol – 10 sekundi
15. Uroniti u 96% etanol – 10 sekundi
16. Uroniti u 100% etanol – 10 sekundi
17. Uroniti u 100% etanol – 10 sekundi
18. Uroniti u ksilen – 10 sekundi
19. Uroniti u ksilen – 10 sekundi
20. Montirati pomoću Kanada balzama

Dodatna bojenja tzv. specijalna bojenja vrše se kada je to neophodno a po nalogu patologa.
Služe za proširenu dijagnostiku i utvrđivanje raznih patoloških stanja, prisustvo
mikroorganizama... Neka od specijalnih bojenja su:

1. May Grünwald-Giemsa bojenje - služi za prikaz bakterija

 2. Schiff PAS bojenje – prikaz bazalne membrane, gljivica, neutralnih mukosupstanci,
polisaharida i koloidnih materija
3. Oil red bojenje – prikaz lipida
4. Mucikarmin Mayer bojenje – prikaz epitelnih mucina
5. Perls Prussian blue bojenje – prikaz željeza

Specijalna bojenja vrše se na citološkim uzorcima koji su prvobitno obojeni po Papanicolau

metodi. Da bi se pristupilo nekom od specijalnih bojenja potrebno je odstraniti boju
prvobitnog metoda prema recepturi za odbojavanje uzoraka uz uoptrebu HCL-a određene
koncentracije.