A vérkészítmények kivizsgálása (fertőző ágens

konfirmáló vizsgálatok) II.

Transzfúzióval átvihető fertőzések és az átvitel
csökkentésének lehetőségei

Transzfúziós tanfolyam rezidenseknek

Dr. Barabás Éva
2021.03.02.
 A vérkészítmények kivizsgálása II.

A fertőző ágens konfirmáló vizsgálatok

A fertőző ágens szűrővizsgálat & konfirmálás koncepciója

IA-szűrővizsgálat
KÉSZÍTMÉNY BIHA

HIV, HBV, HCV, TP

Reaktív Tp
Nem reaktív
HIV
VÉRADÓ OKÉ HBV
HCV

Negatív NAT-szűrővizsgálat
VÉRADÓ KIZÁRVA

Konfirmálás

Kétes Reaktív Nem reaktív

Pozitív
KÉSZÍTMÉNY BIHA KÉSZÍTMÉNY OKÉ
Konfirmálási algoritmus 1. és 2. tesztkérdés

HIV1/2 ag/ab Combo HIV NAT

anti-HCV Parvo B19 NAT
HBsAg
Szűrő-IA reaktív anti-TP HAV NAT Szűrő-NAT reaktív HCV NAT
HBV NAT
anti-HBc

KONF-NAT KONF-NAT

Pozitív Negatív Pozitív Negatív

anti-HBc HIV1/2 ag/ab Combo

anti-HCV
HBsAg

Véradó kizárva Véradó kizárva Diszkrepancia

KONF-IA

Pozitív Kétes Negatív Véradó OK

 A szűrővizsgálatban reaktív és a
konfirmáltan pozitív véradók száma 2018
Véradók száma (fő)
1000000
383282

100000

10000

1000 488
202 240
142
Logaritmikus skála

100 66 52
43

10
2
1
Összes HIV ag/ab anti-HCV HBsAg anti-Tp
szűrővizsgálat
Összes Szűrővizsgálatban reaktív Konfirmáltan pozitív
 Konfirmáltan pozitív donorok száma 2011-2018
Véradók száma (fő) A determináltsági együttható (R2 ) alapján a HBsAg konfirmáltan pozitív
véradók számának csökkenéséhez az idő múlása 97%-ban járul hozzá, míg a
140 HCV konfirmáltan pozitív véradók számának csökkenéséhez csak 73%-ban.

120

100

80 R² = 0,7289

60
R² = 0,9719
40

20

0
2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018
a-HCV HBsAg a-Tp HIV Lineáris (a-HCV) Lineáris (HBsAg)
Transzfúzióval átvihető fertőzések
 Transzfúzióval átvihető
fertőzések(TTI)
HIV-1

66 fertőző ágens: Leishmania sp.

• Vírusok
• Baktériumok
• Protozoa
• Prionok Treponema pallidum

• 3,5 milliárd ember él endémiás területen

• 2 milliárd ember potenciálisan fertőzött az 5 hepatitis vírussal (HAV,
HCV, HBV, HEV, HGV)
• Évente 0,5 milliárd ember fertőződik maláriával, illetve Dengue vírussal
• Globális különbségek – szűrővizsgálati stratégia
Virális TTI fertőzések-klasszikus vírusok:
 Hepatitis-B
 Globális prevalencia=240 millió
 Incidencia=4 millió/év
 Hazai prevalencia <1%
 Védőoltás van
 TTI poszttranszfúziós hepatitis B
 OVSZ szűrés: HBsAg 1982, anti-HBc 2000
 Teszt (OVSZ): HBsAg IA, HBsAg konf. IA, anti-HBc IA, NAT
 Terápia: pegylált interferon, nukleozid-analógok

HBV: https://microbiologyinfo.com/hepatitis-b-virus-structure-epidemiology-symptoms-pathogenesis-diagnosis-treatment-and-vaccines/
Virális TTI fertőzések-klasszikus vírusok:
 Humán Immundeficiencia vírus-1 és (HIV-2)
 Globális prevalencia=35 millió
 Incidencia=2,3 millió/év
 Hazai P=3567 fő; I=223 (2017)
 TTI poszttranszfúziós HIV fertőzés
 OVSZ szűrés: anti-HIV 1986. Nincs dokumentált átvitel!
 Teszt (OVSZ): HIV-1/2 at, ag kombinált IA, HIV-1/2 at LIA, NAT
 Terápia: nagy hatékonyságú antiretrovirális kezelés (HAART)

HIV-1: https://www.researchgate.net/figure/HIV-virion-structure-Schematic-representation-of-a-mature-HIV-virion-detailing-the_fig1_232319855
Virális TTI fertőzések-klasszikus vírusok:
 Hepatitis-C
 Globális prevalencia= 150 millió
 Incidencia=3-4 millió
 Hazai P<1%
 TTI poszttranszfúziós hepatitis C
 OVSZ szűrés: 1992 anti-HCV
 Teszt (OVSZ): anti-HCV at IA, anti-HCV at LIA, NAT
 Terápia: IFN mentes kombinációs terápia proteáz gátlóval (>90%
vírusmentesség)

HCV: https://gut.bmj.com/content/57/12/1728
Egyéb virális TTI fertőzések:
 Parvovírus-B19 (1974)
 Erythema infectiosum (5. betegség)
 Vírus titer extrém magas lehet
 Klinikai relevancia 106 IU/ml felett
 A populációban magas a neutralizáló ab cirkuláció
 Immunszuprimált betegeknél súlyos tünetek, hemolitikus
anaemiában hemolitikus krízis
 Teszt (OVSZ): NAT

PB19: https://www.istockphoto.com/vector/diagram-of-parvo-virus-b19-particle-structure-gm940226286-257041281
Egyéb virális TTI fertőzések:

 Hepatitis-A
 Védőoltás van
 Transzfúziós átvitel ritka, de jól dokumentált esetek
 TTI poszttranszfúziós hepatitis A
 Teszt (OVSZ): NAT

HAV: http://www.medical-labs.net/hepatitis-a-virus-hav-structure-2263/
Egyéb virális TTI fertőzések:

 Hepatitis-E-vírus
 Víz, nem kellően átsült sertéstermék, transzfúzió
 Eu: nagy gyakoriság a donációkban (1:800-5000), de kevés
megerősített recipiens eset
 Poszttraszfúziós cirrózis immunszuprimált, hematológiai
betegekben
 2017 Hollandia szűrés
 Teszt (OVSZ): N/A

HEV: https://vajiramias.com/current-affairs/hepatitis-e-virus/5c19277c2099377308fff9ad/
Újonnan feltűnt virális TTI fertőzések:
3. tesztkérdés

 Vektorokkal (szúnyog, kullancs) terjedő vírusok: WNV, USUV,

ZIKV, DENV, CHIKV

Több vektor faj (szúnyog, kullancs) világszerte elterjedt

Éghajlat változás (melegedés) növeli az elterjedési területet

Humán fertőzések száma (incidencia) folyamatosan

növekszik

Transzfúziós kockázat nő

Migrációs kockázat!
A nyugat-nílusi láz vírus (WNV):
WNV

Hazai eset: 224 (2018)

36 (2019)
Vektor dalos szúnyog, foltos
szúnyog (+ több faj)
Gazda Madár, ló, ember
Inkubációs idő 2-14 nap
Tünetmentes fertőzés 80%

Vakcina Humán nincs

Trafó eset Hazai nincs
USA több 10 (100?)
Teszt (OVSZ) NAT 1. hazai megerősített USUV 2018!
 1 behurcolt (2019) 44 behurcolt (2019) 5 behurcolt (2019)

Rutin véradó szűrés: NAT NAT

 TTI-baktériumok

Jolanta Korsak: Transfusion-Associated Bacterial Sepsis in Severe Sepsis and Septic Shock - Understanding a Serious Killer, 2012
Protozoon parazita TTI fertőzések:
MALÁRIA BABEZIÓZIS TRYPANOSOMIASIS LEISHMANIASIS
(AM, Chagas)

Incidencia/év 200-300 Mó 1000-3000 6-7 Mó 1 Mó

Hazai eset Néhány N/A N/A Néhány

behurcolt behurcolt
Kórokozó Plasmodium B. microti T. cruzi L. sp.
sp. (B. divergens)
Vektor Anopheles sp. Szarvaskullancs Rablópoloska Lepkeszúnyog

Endémiás terület tróp, szubtróp, É-Am. (Eu) Kö-Am. EU medit, Kö-

Görögo D-Am. Ke, D-Am
Rutin véradó - NAT NAT -
szűrés
Prion TTI fertőzések:
Fehérjetermészetű fertőző ágens

CJD (Creutzfeld-Jacob betegség, szubakut szivacsos agysorvadás)

Ok: Genetikai? Fertőzés?
Mo I=15 (2014) sporadikus előfordulás

vCJD (a szarvasmarhák szubakut szivacsos agysorvadásának humán

formája
Egyesült Királyság: 1993. a járvány csúcsa, 174 Hu eset
Ok: fertőzés táplálék útján, szigorú megelőző intézkedések
4 TTI eset

Nincs megfelelő érzékenységű szűrőteszt.

Donor kizárás, akik EK-ban éltek min. 1 évet 1980-1996
Az átvitel csökkentésének lehetőségei
A TTI fertőzés átviteli kockázata akkor
a legnagyobb, ha...

 A donor kórokozó hordozó

• szerokonverzió előtt
• tünetmentes állapotban
• új kórokozó
• új variáns
A TTI fertőzés „sikerét” befolyásolja:

 A recipiens fogékonysága a fertőzésre

• pillanatnyi immunstátusz
• neutralizáló antitestek
• milyen vérkészítményt kap
• minimális fertőző dózis (HBV <20 IU/ml,
PB19 >106 IU/ml)
A téma jelentősége

Az allogén vér potenciálisan fertőző,

minimalizálni kell a transzfúzióval átvihető
fertőzések kockázatát.
A kockázat csökkentésére többlépcsős
stratégiai rendszer áll rendelkezésünkre.
A TTI kockázat csökkentése
OVSZ többlépcsős stratégia:
1. Egységes szervezet és működés
2. Donorszelekció
3. Laboratóriumi szűrővizsgálatok
4. Vérkészítmények kockázat csökkentése
5. Donorállomány egészségmegőrzése és pótlása
 OVSZ gyógyszergyár
 1998. július 1. – OVSZ megalakulás, centralizáció
 2001-től GMP (Helyes Gyártási Gyakorlat)
 Központi eljárási utasítások és helyi szabványos műveleti
utasítások (SOP rendszer)
 Standardizált technológiák, automatizált rendszerek
 Jártassági körvizsgálatok
 Auditok: belső, külső
Egységes informatikai rendszer
 2008: eProgesa bevezetése
 EU irányelveknek megfelel
 Országos hálózatba integrálja a beteg- és donor- adatok
nyilvántartását
 Támogatja az egységes elvek mentén megvalósuló
 vérkészítmény előállítást
 vérgazdálkodást
 betegellátást
II. A TTI kockázat csökkentése
OVSZ többlépcsős stratégia:
1. Egységes szervezet és működés
2. Donorszelekció
3. Laboratóriumi szűrővizsgálatok
4. Vérkészítmények kockázat csökkentése
5. Donorállomány egészségmegőrzése
 Ki az ideális véradó?
A donorszelekció fontossága
1. Önkéntesen, segítő szándékkal érkezik
2. A vérét alkalmasnak tartja arra, hogy betegeknek beadják
gyógyítási célból
3. Életkor: 18-65 év között
4. Testtömeg: ≥50 kg
5. A donor kérdőívet állapotának megfelelően tölti ki: életvitelére,
betegségeire, gyógyszerszedési szokásaira nézve.
6. Donorkivizsgáló szakember dönt a véradási alkalmaságról

Célcsoportunk epidemiológiai jellemzői várhatóan

különböznek az általános populációtól
 HBsAg prevalencia Európában
Általános populáció 2005–2015 Első véradók 2014

https://ecdc.europa.eu/en/all-topics-z/hepatitis-b/tools/hepatitis-b-prevalence-database/studies-
Systematic review on hepatitis B and C prevalence in the EU/EEA, ECDC 2016
first-time-blood-donors
 HBV kötelező védőoltás
Intézkedés:
• 1999. 14 éves kor
• 2009. 13 év kor

De:
• 3 oltás helyett 2
• Az anti-HBs szint nincs mérve
• A szexuális aktivitás 13 éves kor előtt kezdődik.

Következmény:
• Atípusos áttöréses fertőzés alacsony vírus kópiaszám, szerológiai
markerek nélkül.
 Anti-HCV prevalencia Európában
Általános populáció 2005–2015 Első véradók 2014

https://ecdc.europa.eu/en/all-topics-z/hepatitis-c/tools/hepatitis-c-prevalence-
Systematic review on hepatitis B and C prevalence in the EU/EEA, ECDC 2016
database/studies-first-time-blood-donors
A droghasználat hatása a HCV átfertőzöttségre

Dudás Mária és mts. OEK 2015

II. A TTI kockázat csökkentése
OVSZ többlépcsős stratégia:
1. Egységes szervezet és működés
2. Donorszelekció
3. Laboratóriumi szűrővizsgálatok
4. Vérkészítmények kockázat csökkentése
5. Donorállomány egészségmegőrzése és pótlása
 IA szűrővizsgálat
SZŰRŐVIZSGÁLATI EREDMÉNY

NEM REAKTÍV REAKTÍV

SZ-IA cut-off
Érzékenység: minden olyan mintát
kiszűrjön, amely a kimutatandó fertőző
Fajlagosság: csak azt a mintát szűrje ki,
ágenst (a kimutathatósági határ felett)
amely a kimutatandó fertőző ágenst
tartalmazza (100%).
tartalmazza. (99,5-99,9%).
A fertőzötteket kiszűrje.
Minél több nem fertőzöttet „átengedjen”.

Fertőzött,
Nem fertőzött, valódi pozitív
valódi negatív donorok
donorok

Szűrő-NAT vizsgálatra
 NAT szűrővizsgálat
SZŰRŐVIZSGÁLATI EREDMÉNY

NEM REAKTÍV REAKTÍV

Sz-NAT cut-off

Fertőzött,
Nem fertőzött, valódi pozitív
valódi negatív donorok
donorok

Fajlagosság: csak azt a mintát szűrje Érzékenység: minden olyan mintát

ki, amely a kimutatandó fertőző kiszűrjön, amely a kimutatandó fertőző
ágenst tartalmazza. (100%). ágenst (a kimutathatósági határ felett)
tartalmazza (100%).
II. A TTI kockázat csökkentése
OVSZ többlépcsős stratégia:
1. Egységes szervezet és működés
2. Donorszelekció
3. Laboratóriumi szűrővizsgálatok
4. Vérkészítmények kockázat csökkentése
5. Donorállomány egészségmegőrzése és pótlása
Vérkészítmények kockázat csökkentése
I. Patogén redukció/inaktiválás
A) Régi módszer: OLDÓSZER-DETERGENS
Redukció: lipidburokkal rendelkező vírusok
Készítmény: plazma
Hátrány: VIII-as faktor és fibrinogén aktivitást csökkentette

B) Új módszerek: FOTOKÉMIAI
Redukció: patogének széles spektruma (burkos és burok nélküli vírusok,
Gram- , Gram+ baktériumok, Spirochaeták, Protozoák. De: Prionok ellen
nem alkalmas!)
Inaktiválás: reziduális limfocita

• MIRASOL: trombocita + plazma + teljes vér

• INTERCEPT: trombocita + plazma
• INTERCEPT RBC: vvs
• THERAFLEX: trombocita + plazma + vvs
MIRASOL PRT System (OVSZ)
2. + fotoszenzitizáló ágens + széles spektrumú UVA+UVB fény (280-400 nm)
6,2 J/ml

35 µl Riboflavin oldat

1/3 E COVID-19
konvaleszcens
plazma

1. Steril összekapcsolás
3. Besugárzás 5 perc

Riboflavin kapcsolódik a nukleinsavhoz

guanin tartalmú bázisok károsítása 4. Alkalmas az azonnali trafóra
Riboflavin és fotodegradációs termékek:
nem toxikusak

Klein SD, Hovenga N, Gilmour D, Marschner S, Goodrich R. Treatment of platelet products with riboflavin and UV light: effectiveness against titer bacterial contamination. J Vis Exp 2015;
(102): 52820. doi: 10.3791/52820 (2015)
Vérkészítmények kockázat csökkentése:
II. Karantén: A donor ismételt véradásáig a plazmák karanténban
vannak

III. Fehérvérsejt-mentesítés (OVSZ indikáció alapján alkalmazza):

Szűrés: A fehérvérsejteket és ezzel a fvs-hez kötött vírusokat
redukálja. (Készítmények kb. 30%-a).
Besugarazás: (előbbi kb. 50%-a). Cél: limfociták és TTI
proliferáció gátlása.

IV. Készítmény-monitorozás (Bact/ALERT, OVSZ rendszeresen

alkalmazza): Baktérium, gomba, mycobaktérium kimutatására.
Trombocita készítmények retrospektív vizsgálata.
Trombocita készítmények retrospektív vizsgálati
eredményei az OVSZ-ben Identifikált baktériumok:

8
Staphylococcus epidermidis
9
> 50%
12
3

3314
2894
2543
2257

Propionibacter sp.
2011 2012 2013 2017

Negatív mintaszám (db) Pozitív mintaszám (db)

Aerob spórás pálca

OVSZK QC Laboratórium adatai

II. A TTI kockázat csökkentése
OVSZ többlépcsős stratégia:
1. Egységes szervezet és működés
2. Donorszelekció
3. Laboratóriumi szűrővizsgálatok
4. Vérkészítmények kockázat csökkentése
5. Donorállomány egészségmegőrzése és pótlása
A donorállomány egészségmegőrzése és pótlása

népegészségügy, OVSZ, Magyar Vöröskereszt

EDUKÁCIÓ = donorrá nevelés
Üzenetünk:

Az OVSZ több oszlopon álló kockázatcsökkentő

stratégiája a legkorszerűbb elveken és módszereken
alapul, amellyel a transzfúzióval átvihető
fertőzések kockázata minimalizálható.
KÖSZÖNÖM A MEGTISZTELŐ
FIGYELMET!

barabas.eva@ovsz.hu