2013.09.08.

Vércsoport-meghatározás.
Véralvadási vizsgálatok.

Vércsoportok
• vércsoport-antigének (agglutinogének):
– vvt-membrán külső felszínén
– vércsoportrendszer: vércsoport Ag-k egy genetikailag elkülönült csoportja,
szorosan kapcsolt génekhez kötődik

• antitestek (agglutininek, izohaemagglutininek):

– immunglobulin ellenanyagok (immunreakciót képesek kiváltani)
– vérplazmában (és savóban) vannak jelen
– lehetnek:
• természetes (reguláris) antitestek → pl. anti-A, anti-B
– minden olyan ember plazmájában kötelezően jelen vannak, aki nem
hordozza az adott vércsoport-Ag-t
– azonos struktúrák élelemben és baktériumokban
– születés után 2-8 hónappal jelennek meg
• immun- (irreguláris) antitestek → pl. anti-D
– csak akkor van jelen, ha már találkozott az adott Ag-nel

1
 2013.09.08.

AB0-vércsoportrendszer
• antigének (agglutinogének, vvt-k felszínén) →
– kémiailag glikoproteinek és glikolipidek → szénhidrát-lánc alapján több féle:
• H-antigén
– 0 vércsoportúakon ez van jelen
– extrém ritka esetben ez is hiányzik: Bombay-vércsoport (plazmájukban
anti-H-At-k vannak)
• A-antigén → A és AB vércsoportban van jelen
• B-antigén → B és AB vércsoportban van jelen
– kodomináns öröklődés

• antitestek (agglutininek, plazmában) →

– főleg IgM (placentán nem jut át)
– Landsteiner-szabály:
• a saját vvt-ről hiányzó A- vagy B-Ag elleni At a savóban jelen van
• a saját vvt-n meglévő Ag ellen nincs At (tolerancia)

AB0-vércsoportrendszer

Vércsoport Antigén (vvt felszínén) Antitest (plazmában): IgM

0 H-Ag anti-A
anti-B
A A-Ag anti-B
B B-Ag anti-A
AB A-Ag nincs anti-A
B-Ag nincs anti-B

O: univerzális donor
AB: univerzális recipiens

2
 2013.09.08.

Rh (Rhesus) vércsoportrendszer
• antigénjei (agglutinogének, vvt-ken):
– kémiailag fehérjék
– 3 allél génpárral öröklődnek →
• (d) / D → de kis d-Ag nincsen (anti-d sincsen)
• c/C
• e/E
– domináns öröklődés
– D-gén terméke erős immunogén
• D-antigént hordozók: Rh pozitív
• D-antigént nem hordozók: Rh negatív

• antitestjei (agglutininek, plazmában):

– immunantitestek
– nagy részük IgG (monomer) → átjut a placentán
– immunizáció többféle képpen létrejöhet:
• vérátömlesztéssel (Rh- -nak Rh+ vért)
• Rh- anya Rh+ terhessége (szülés/vetélés során a vérük találkozhat)

Rh-vércsoportrendszer

Vércsoport Antigén (vvt felszínén) Antitest (plazmában): IgG

Rh-pozitív D-Ag nincs anti-D

Rh-negatív nincs D-Ag lehet anti-D

(csak ha már immunizálódott)

3
 2013.09.08.

Rh-összeférhetetlenség
• Rh- anya Rh+ magzata esetén jöhet létre
– ha már találkozott az anya a D-Ag-nel (Rh-izoimmunizáció) → anti-D-At
– általában a második Rh+-magzatnál jelentkezik

• mechanizmus:
– IgG-antitestek átjutnak a placentán
– Rh+ magzat esetén reagálnak a vvt-ivel:
• haemolysis
• erythroblastosis foetalis (kompenzatórikus intenzív vvt-képzés)
• hydrops foetus universalis (súlyos esetben az egész magzat oedemás lesz)

• megelőzés (Rh-profilaxis): első terhesség után anti-D-At (immunglobulin) injekció

az anyának (intramuscularisan)

Vércsoport-meghatározás
• lényege az antigén-antitest reakció (immunkomplex-képződés)
• antitestek hatásai:
– in vitro → agglutináció (vvt-k szemcsékké csapódnak össze)
– in vivo → haemolysis

• minden transzfúzió-kéréskor kell (akkor is, ha ismert a vércsoport)

• szintjei:
– vércsoport meghatározása (betegágy mellett + véradóban)
• AB0
– 1 oldalas  vvt-k Ag-jeit ellenőrizzük ismert tesztsavókkal
– 2 oldalas  savóban lévő At-ket is ellenőrizzük
(ismert vércsoportú teszt-vvt-kkel)
• Rh
• ritkább vércsoportok, vérkeresés
– kersztpróba
– biológiai próba

4
 2013.09.08.

AB0-vércsoport meghatározása
• csempe feliratozása
– beteg adatai
– tesztsavók sorrendje → mindig ugyanaz, érdemes az At-ket is felírni
• 0: 0 vércsoportú savó (anti-A + anti-B)
• A: A vércsoportú savó (anti-B)
• B: B vércsoportú savó (anti-A)
• K: kontroll (1 csepp fiz. só)

• savók kicseppentése: anti-AB (0 alá), anti-B (A alá), anti-A (B alá), kontroll

• mindegyik alá 1 csepp fiz. só
• majd abba 1 csepp vér (így kb. 20 %-os szuszpenziót kapunk)
• a szuszpenziókat összekeverjük a tesztsavókkal
– keverőpálcával, injekciós tű műanyag védőjével, ampulla fejével, tárgylemez sarkával...
– fontos: minden keverés után keverő pálca törlése (különben összekeverednének a savók is)
• döntögetjük (30°-ban)
• 5 perc után olvassuk le (szobahőn)

AB0-vércsoport meghatározása
• értékelés:

– 0: sehol nem agglutinál

– AB: mindenhol (kivéve K)
– A: 0-nál és B-nél agglutinál
– B: 0-nál és A-nál agglutinál

– ha a kontroll agglutinál  nem elfogadható (meg kell ismételni)

– ál-pozitív lehet:
• beszáradás
• pénztekercs (sympexis) képződés  1 csepp fiz. sót rácseppentve a sympexis oldódik, az
agglutináció nem

5
 2013.09.08.

Rh-vércsoport meghatározása
• feliratozás:
– beteg adatai
– minták és reagensek: anti-D, kontroll
• anti-D savó kicseppentése anti-D alá (ezt nem kell tovább higítani fiz. sóval)
• kontroll alá 1 csepp fiz. só
• mindkettőhöz 1 csepp vér ujjbegyből (kb. 50 %-os vvt-szuszpenzió)
• vércseppet összekeverjük az anti-D-vel (keverés után pálca törlése), majd a
kontrollal
• inkubáció 37 °C-on (20 min) nedves kamrában → IgG hőoptimuma 37 °C
• leolvasás
– meleg vizes palackon (IgG) vagy IgM-et használva szobahőn: 3 perc múlva
– ha nem előmelegített palackon dolgozunk, 20 perc inkubáció is szükséges lehet
(nedves kamrában)

Rh-vércsoport meghatározása

• értékelés:
– ha anti-D agglutinál  Rh-pozitív (csak a nagy D Ag tekintetében)
– ha anti-D nem agglutinál  Rh-negatív (csak a nagy D Ag tekintetében)
– ha a kontroll agglutinál  nem elfogadható (meg kell ismételni)

• ál-pozitív lehet:
– beszáradás
– pénztekercs (sympexis) képződés  1 csepp fiz. sót rácseppentve a sympexis
oldódik, az agglutináció nem

6
 2013.09.08.

Serafol tesztlap
• AB0- és Rh-vércsoport gyors meghatározása
• minta: 1-1 csepp vér
• adatok: beteg neve, kódja (születési idő v. TAJ), mai dátum, aláírás
• felül 3 mező: anti-A, anti-B, anti-D (Rh)  rajta vannak az antitestek (anti-
D is IgM, így szobahőn leolvasható)
• alul a kontroll  nincs rajta At (csak a só + vér megy rá)
• mindre először 1 csepp fiz. só, majd 1 csepp vér
• utána összekeverjük
• 1 perc után olvassuk le

Véralvadás

7
 2013.09.08.

Véralvadás (haemostasis)
• haemostasis: véralvadás, vérzéscsillapító folyamatok
• követelmények:
– gyorsan aktiválódjon
– de csak akkor és csak a kellő ideig  gátló (antikoaguláns) mechanizmusok
és negatív feedback-ek
– eredeti állapot helyreállítása  fibrionlízis, szöveti regeneráció

• véralvadás során a folyékony vér géllé dermed

– alapja: a fibrinogén (F I) oldhatatlan fibrinpolimerré alakul
– többlépcsős reakciósorozat végeredménye
– alvadék (thrombus), vérlepény: az alvadás során kialakult fibrinhálózat +
közéjük bezárt vérsejtek
– kémcsőben ezek után a vérsavó (serum) marad vissza (fibrinogénmentes
vérplazma)

Haemostasis elemei
• véralvadáshoz szükséges:
– intakt érrendszer (érfal)
– thrombocyták (szám és funkció)
– plazmatikus alvadás (koagulációs enzimek)

• kontroll mechanizmusok (inhibitorok)

• fibrinolítikus rendszer  vévéralvadás után az eredeti állapot

helyreállításának (thrombus eltüntetésének) folyamata

8
 2013.09.08.

érfalsérülés

szöveti faktor (thromboplastin)

szabad kollagén reflex

vWF-letapadás

TXA2,
tct-aktiváció 5-HT vazokonstrikció

Ca2+,
foszfolipid

véralvadási faktorok aktivációja

Érreakciók
• érfal simaizomelemei összehúzódnak (vazokonstrikció)
• mechanizmusok:
– neurogén reflex: sérülés  stressz-reakció  szimpatikus aktiváció 
noradrenalin, adrenalin

– miogén reflex: sérülés  simaizomdepolarizáció  vazokonstrikció

(összehúzódás)

– lokális, humorális faktorok: sérülés  szabad kollagén  tct-adhézió

(GP-Ib-R)  vazoaktív anyagok felszabadulása (TXA2, szerotonin) 
vazokonstrikció (összehúzódás)

9
 2013.09.08.

Thrombocyta-reakciók
• endothel-sérülés  szabad kollagén  vWF letapad  tct-adhézió
– membrán aktiválódik, granulumok kiürülnek 
• ADP  további tct-ket aktivál
• szerotonin (ST, 5-HT)  vazokonstrikció  vérzéscsillapító hatás,
valamint a tct-dugó elmosását is gátolja
– thromboxán A2 (TXA2)  tct-aktiváció, vazokonstrikció
– membrán foszfolpidek (PL) kifelé fordulnak („thrombocyta III. faktor”)
 alvadási faktorok aktivációja
– GP-IIb-IIIa  tct-aggregáció

• folyamat leállítása:
– prosztaciklin (PGI2)  endothelsejtekben képződik
– cAMP, cGMP, NO

Plazmatikus alvadás
• előfázis → Xa kialakulásáig
– extrinsic út:
• szöveti sérülés → szöveti faktor (TF, szöveti thromboplastin (TPL)) → VII. faktor
aktiváció (VIIa)
• VIIa aktiválja a X. faktort
– intrinsic út:
• sérülés → szabad kollagén → magas molekulatömegű kininogén (HMWK) kötődik
hozzá → prekallikreinből (PK) kallikreint hoz létre → aktiválja a XII-es faktort
• XIIa, valamint a már kialakult fibrin aktiválja a XI. faktort (ez komplexet alkot a
kininogénnel), valamint az V-re, VIII-ra is hat
• XIa → aktiválja a IX-es faktort
• IXa → aktiválja a X-es faktort (a felszínt a VIIIa hozza létre)
• közös út (főfázis) → thrombin, fibrin kialakulása
– Xa hatására a prothrombin (II) thrombinná alakul (a felszínt az Va hozza létre)
– thrombin → fibrinogént (I) fibrinné alakítja → polimerizáció
– XIII-as faktor → fibrinstabilizáló faktor
• utófázis (1-3 óra) → az alvadt vér zsugorodása (retrakció), a szérum keletkezése

10
 2013.09.08.

Extrinsic út: Intrinsic út:

szöveti faktor szabad kollagén (felszín)
(thromboplasztin, TF, TPL) HMWK
PL (tct. 3. faktor)
PK
VII VIIa XII XIIa

XI XIa

IX IXa + VIIIa

Közös út (főfázis): X Xa + Va

II (prothrombin) IIa (thrombin)

I (fibrinogén) Ia (fibrin)
XIIIa
polimerizáció

stabil polimer

Extrinsic út: Intrinsic út:

szöveti faktor szabad kollagén (felszín)
(thromboplasztin, TF, TPL) HMWK
PL (tct. 3. faktor)
PK
VII VIIa XII XIIa

XI XIa

Ca2+, PL IX IXa + VIIIa

Ca2+, PL

Közös út (főfázis): X Xa + Va
Ca2+, PL
II (prothrombin) IIa (thrombin)
Ca2+
I (fibrinogén) Ia (fibrin)
XIIIa
polimerizáció

stabil polimer

11
 2013.09.08.

Véralvadási faktorok szintézise

• nagy részüket a máj szintetizálja
• K-vitamin (fillokinon):
– zsírban oldódó vitamin
– kofaktor a g-karboxilezés során → g-karboxi-glutamát (Gla)
– nincs receptora!
– Gla fehérjék → fokozott Ca2+-kötésre képesek
– K-vitamin-függő faktorok:
• prothrombin (II), VII, IX, X → prokoaguláns faktorok
• protein C, protein S → antikoaguláns faktorok
– K-vitamin antagonisták (kumarinok) → gátolják a K-vitamin-epoxid
visszaredukálódását → megakadályozzák a véralvadást
• acenokumarol (Syncumar)
• warfarin (Warfarin orion, patkányméreg)

Véralvasást gátló mechanizmusok

• antithrombin III (AT-III)  thrombin (IIa), VIIa, IXa, Xa, XIa, XIIa, kallikrein, plazmin
inaktiválása
• heparin  AT-III-mal komplexet képezve biztosítja annak hatását
• thrombomodulin  thrombin megkötése, protein C aktiválása
• protein C + S  VIIIa inaktiválása, Va inaktiválása, plazminogén aktivátor
inhibítorok gátlása (plazmin aktiválása)
• TFPI (szöveti faktor inhibitor)  szöveti faktor (TF) gátlása
• prosztaciklin (PGI2, endothelsejtekből)  tct-aggregáció gátlása

• fibrinolízis 
– eredeti állapot helyreállítása (thrombus eltüntetése)
– plazmin  thrombin (IIa), V, VIII. alvadási faktorok gátlása, fibrinthrombus
feloldása
– FDP gátolja a trombin képződését

12
 2013.09.08.

Véralvadásgátló szerek
• in vivo és in vitro is:
– heparin  hatása antagonizálható protamin-szulfáttal
– hirudin
• in vivo:
– K-vitamin-antagonisták (kumarinok)
– tct-aggregáció-gátlók:
• COX-gátlók (TXA2-út gátlása)  acetil-szalicilsav (Aspirin)
• prosztaciklin-analóg (Epoprostenol)
• ADP-út gátlása  Clopidogrel (Plavix), Ticlopidin
• GP II/b/IIIa receptor antagonisták  pl. antitestek
• in vitro  Ca2+-kelátképzők:
– citrát
– oxalát
– EDTA

Haemostasis zavarai
• kórosan fokozott (thrombophiliák):
– V. faktor Leiden-mutációja (aktivált protein C (APC) rezisztencia)
– protein C hiány
– protein S hiány
– antithrombin III hiány
– protrombin dimorfizmus
– TFPI (szöveti faktor inhibitor) hibája

• kórosan csökkent:
– tct-rendellenességek
– plazmatikus alvadás zavarai (coagulopathiák) → pl. VIII-as vagy IX-es
faktir hiánya

13
 2013.09.08.

Thrombocyták rendellenességei
• thrombocytopaeniák  alacsony thrombocytaszám
– csökkent termelés
– fokozott pusztulás

• thrombastheniák  thrombocyta-funkció zavarai

– veleszületett:
• Glanzmann-thrombastenia (GP IIb/IIIa)
• Bernard-Soulier syndroma (GP Ib)
• denz granulumok hiánya
– szerzett:
• gyógyszer okozta
• veseelégtelenség
• májbetegség

Coagulopathiák
• veleszületett:
– hemophilia:
• A (VIII)
• B (IX)
• C (XI)
– gátlótestes haemophilia
– von Willebrand betegség (pseudohaemophilia)
• több formája van
• tct-funkciók sérülnek (vWF kell a kitapadásukhoz)
• plazmatikus alvadás is sérül (vWF a VIII-as faktor carrier molekulája)
– afibrinogenaemia, hypofibrinogenaemia, dysfibrinogenaemia

• szerzett:
– K-vitamin-hiány (pl. zsírfelszívódási zavar esetén)
– heparin és thrombolitikus kezelés
– DIC (disszeminált intravascularis coagulopathia)

14
 2013.09.08.

Vérzési idő
• cél: kapillárisokban bekövetkező vérmegállás vizsgálata
– thrombocyták (elsősorban a thrombocytaszám és -funkció)
– érreakciók (vascularis rezisztencia)
– szöveti tromboplasztin (TF, TPL) aktivitása
• mérése: in vivo teszt!
– ujjbegyet megszúrjuk
– 20-30 másodpercenként leitatjuk
– vérzési idő: ameddig a sebzésből vér szivárog (perc)
• értékelés:
– normálisan 2-4 perc (túlnyomás esetén: 5 perc)
– 5 percen túl kóros (túlnyomás esetén: 9 percen túl)
• kóros érték:
– tct-paenia
– tct. funkciós zavar (thrombasthaeniák)
– von Willebrand-betegség
– haemophilia A (mechanizmusa nem teljesen tisztázott)

Alvadási idő
• véralvadás intrinsic (és közös) útjáról ad tájékoztató jellegű felvilágosítást

• mérése: óraüvegen
– minta: ujjbegyből
– 3-4 csepp vért óraüvegre
– 37 ºC-on
– nem kell semmilyen reagens
– 20 sec-ként vékon üvegpálcát húzunk át a vércseppen
– alvadási idő: vérvételtől az első fibrinszál megjelenéséig eltelt idő
(perc)

• értékelés: normálisan 5-10 perc (hőmérsékletet emelve rövidül)

15
 2013.09.08.

Prothrombin-idő (PI), Quick-teszt

• extrinsic és közös út működésére utal (főleg a II, V, VII, X. faktor aktivitásától
függ)
• meghatározása
– óraüvegen, 37 ºC-on
– minta: oxalátos vérplazma (0,1 ml, automata pipettával)
– reagens: thromboplastin (III. faktor) + Ca2+ (IV. faktor) + heparin-inaktiváló
ágens  TECHNOPLASTIN® HIS reagens (0,2 ml, automata pipettával)
– reagens hozzáadásakor elindítjuk a stoppert  üvegpálcát húzogatva várjuk
az első fibrinszál megjelenését
– PI (prothrombin-idő)  a reagens hozzáadásától az első fibrinszál
megjelenéséig eltelt idő
• értékelés:
– értéke reagensfüggő: 15-20 sec (a gyakorlaton használt TECHNOPLASTIN® HIS
reagens esetén normálisan 16 sec)
– standardizállt kifejezési módja az INR (international normalized ratio) 
értéke nem reagensfüggő

INR (international normalized ratio)

• prothrombin idő standardizállt kifejezési módja
• kiszámítása: INR = PRISI
– PR (protrombin ráta) = beteg plazmájából mért PI (sec) / normál
referencia plazmából mért PI (sec)
– ISI (International sensitivity index): az adott reagensre jellemző adat,
korrekciós téynező
– TECHNOPLASTIN® HIS reagens ISI-je: 1,29

• nincs mértékegysége

• értékelés:
– nem alvadásgátolt vér esetén normál értéke: 1-1,25
– per os véralvadásgátló kezelés során 2-3 közötti a célérték
– műbillentyűvel rendelkező betegeknél még magasabb

16
 2013.09.08.

PI, INR
• prothrombin idő és INR jelentősége:
– INR emelkedik:
• K vitamin dependens faktorok csökkenése (II, VII, X) → per os
véralvadásgátló kezelés (pl. Syncumar) monitorozása
• fibrinogén-hiány
• májbetegség
• DIC
– heparin-kezelés nem befolyásolja

• prothrombin idő egyéb kifejezési formái:

– protrombin index (%): normál plazmából mért PI (s) * 100 / vizsgált
plazmából mért PI (s)
– protrombin aktivitás: a kapott protrombin időt összehasonlítjuk
ugyanazzal a reagenssel mért, normál és higított plazma protrombin
idejével (hány %-os higításnak felel meg)

APTI (aktivált parciális

thromboplasztin idő, PTT)
• utal: intrinsic és közös út
• reagens: parciális thromboplastin + felszín aktivátor (kaolin) + Ca2+
• normál érték: 27-33 sec
• emelkedik:
– heparin terápia
– hemofília A, B
– Von Willebrand-betegség (mivel a vWF a VIII-as faktor carrier
molekulája)
– keringő antikoaguláns
– DIC
– XI-es XII-es , X –es fakt. 
– fibrinogén 

17
 2013.09.08.

Thrombin idő (TI)

• utal: fibrinogén-fibrin átalakulás (polimerizáció)
• reagens: meghatározott menny. thrombin
• referencia tartomány: 21-25 sec
• emelkedik:
– heparin hatás (heparin jelenlétének kimutatására érzékenyebb, mint
az APTI (de kezelés kontrolljára nem jó, mert mérhetetlen))
– FDP 
– DIC
– hypofibrinogenaemia

Fibrinolízis
• eredeti állapot helyreállításának (thrombus eltüntetésének) folyamata
• plazmin (fibrinolizin) végzi 
– thrombin (IIa), V, VIII. alvadási faktorok gátlása
– fibrinthrombus feloldása  fibrin degradációs termékek (FDP)
keletkeznek, pl. D-dimer

• szabályozása:
– plazminogén-aktivátorok indítják el
» szöveti típusú aktivátorok (tissue plasminogene activator, tPA)
» urokináz (UK) típusú aktivátorok
» véralvadási kaszkád egyes elemei (pl. XIIa, kallikrein)
» bakteriális eredetű anyagok  pl. streptokináz (SK)
– plazminogén-aktivátor-inhibitorok  plazminogén aktivátorok gátlása
– plazmin-inhibitor (a2-antiplazmin)  fibrinolízis lefékezése

18
 2013.09.08.

Fibrinolízis kilikai jelentősége

• diagnosztikus (D-dimer):
– emelkedik:
• thrombemboliás esemény (mély venás thrombosis, tüdőembolia, szívinfarktus,
agyinfarktus (ischaemiás stroke))
• tumorok
• infekciók
• autoimmun betegségek
– drága és nem specifikus vizsgálat (tüdőembolia kizárására jó, de nem tökéletes)

• terápiás (fibrinolítikus kezelés):

– rt-PA (rekombináns szöveti plazminogén aktivátor)
– streptokináz (SK)
– urokináz (UK)

19