Imunológia

prof. MVDr. Ľ.Tkáčiková, PhD.

2022/2023

ludmila.tkacikova@uvlf.sk
Podmienky na udelenie zápočtu:
§ Účasť na cvičeniach
Ø Študijný poriadok UVLF v Košiciach, čl. 16. bod 1:
§ Študentovi môžu chýbať z príslušného predmetu tri cvičenia za
semester, z toho jedno cvičenie môže vynechať bez náhrady, ostatné si
musí nahradiť, spravidla v prvých troch týždňoch od ukončenia
semestra. Študentovi môžu byť udelené maximálne dva náhradné
termíny na absolvovanie dvoch chýbajúcich cvičení a seminárov
z jedného predmetu.
§ Absolvovanie 2 kontrolných testov z praktickej časti
v 7. a 13. týždni
§ Každý test má 20 otázok
Ø 15 otázok s možnosťou výberu z viacerých odpovedí (1 správna
odpoveď = 1 bod).
Ø 5 otázok dopisovacích (1 správna odpoveď = 1 bod).
§ Min. počet správnych odpovedí (bodov) je 11, t.j. > 51 %
2
Záverečné hodnotenie
1. Do výsledného hodnotenia sa započítavajú výsledky
kontrolných testov (40 %) a písomného testu (60
%).
Tabuľka na prepočet bodov za zápočet :
2021/22 2022/23
body body
Min. 16 53 % Min. 22
§ Študenti, ktorí majú uznaní 17 57 % 23
zápočet z akad. roku 2021/22 18 60 % 24
19 63 % 25
budú hodnotení podľa %
20 67 % 27
úspešnosti ich kontrolných testov. 21 70 % 28
§ Príklad: 22 73 % 29
23 77 % 31
18 bodov = 60 % úspešnosť 24 80 % 32
= 24 bodov 25 83 % 33
26 87 % 35
27 90 % 36
28 93 % 37 3
29 97 % 39
Max. 30 100 % Max. 40
Záverečné hodnotenie
1. Do výsledného hodnotenia sa započítavajú výsledky
kontrolných testov (40 %) a písomného testu (60
%).
2. Záverečný test (51 otázok = 60 bodov)
Ø Test môže písať len študent prihlásený v AIS.
Ø V záverečnom teste je 51 otázok z toho:
Ø 45 otázok s možnosťou výberu z viacerých odpovedí (1 správna
odpoveď = 1 bod)
Ø 5 otázok doplňovacích (1 správna odpoveď = 1 bod)
Ø 1 otázka, kde je treba napísať dlhšiu odpoveď (napr. opísať
klasickú cestu aktivácie komplementu) hodnotená 1-10 bodmi
Ø Časový limit 60 minút.
Ø Na úspešné absolvovanie testu je potrebných minimálne 31
4
bodov.
 Záverečné hodnotenie IMUNOLÓGIE pre
študentov VVL a HP

Počet bodov

Minimum Maximum
Zápočtové testy (každý má 20 otázok z praktickej časti) 2 x 11 = 22 40
min. počet správnych odpovedí v jednom teste je 11 (>51 %) (100 %)

Test z teoretickej časti (51 otázok) 31 60

min. počet správnych odpovedí v teste je 31 (>51 %) (100 %)
Spolu 53 100
(>53 %) (100 %)
Odporúčaná
literatúra:

6
Imunológia
Prof. MVDr. Ľudmila Tkáčiková, PhD.

1. Imunitný systém – vlastnosti a štruktúra.

Charakteristika a vlastnosti antigénu.
Charakteristika protilátok.
2. Orgány imunitného systému. Bunky imunitného systému.
3. Mechanizmy nešpecifickej imunity: Komplement.

7
4. Mechanizmy nešpecifickej imunity: Fagocytóza. Cytotoxické bunkové reakcie
(NK bunky).
5. MHC molekuly, prezentácia antigénov, cytokíny.
6. Mechanizmy špecifickej imunity: T-lymfocyty a špecifická bunková imunita.
7. Mechanizmy špecifickej imunity: B-lymfocyty a humorálna imunita.
8. Humorálna immunita: biologické účinky protilátok.
9. Mechanizmy zápalu a jeho funkčné prejavy.
10. Imunitný systém a infekcia. Imunitný systém a obrana proti baktériám,
vírusom a jedno a mnohobunkovým parazitom.
11. Mechanizmy vzniku hypersenzitívnych reakcií. Mechanizmy vzniku
autoimunitných ochorení.
12. Imunomodulácia: imunostimulácia a imunosupresia.
13. Imunoprofylaxia: vakcíny.
 Imunitný systém
– vlastnosti a štruktúra
Skriptá:
Ľ.Tkáčiková: Veterinárska imunológia, 2019, kapitola 1

Dopisovacia otázka za max. 10 bodov:

1. Imunitný systém.
• Charakterizujte imunitný systém ako informačný, difúzny a účelný systém.
• Charakterizujte vrodenú a získanú (adaptívnu) imunitu.
• Charakterizujte zložky vrodenej a získanej imunity.

8
Imunitný systém
– vlastnosti a štruktúra
§ Cieľom fungovania imunitného systému je udržanie
podmienok stáleho vnútorného prostredia, t. j.
homeostázy.

9
Úlohy imunitného systému:
Rozpoznať: Zabezpečiť:
§ Neškodné ↔ nebezpečné § Obranyschopnosť
§ Vlastné ↔ cudzie § Autotoleranciu
§ Správne ↔ nesprávne § Imunitný dohľad
(surveillance)

Nemal by poškodzovať vlastný

organizmus !!!
§ Hypersenzitívne reakcie
§ Autoimunitné reakcie 10
 Imunitný systém je:
1. informačný systém
Ligand

Reakcia na podnety prostredníctvom

receptorov

Bunka 1 Bunka 2
Kvalitatívne a kvantitatívne
vyhodnotenie

Odpoveď príslušnou efektorovou Receptor

aktivitou 11
Imunitný systém ako informačný
systém
§ Bunky obvykle reagujú na viacero signálov, ktoré sú
obvykle súčasťou tzv. multi-signálových komplexov.

Ligandy

Bunka Bunka
2 Bunka
Bunka 1 Bunka 2 2
Bunka 2
Bunka
2 2

Receptory 12
Efektorové
Aktivácia Proliferácia a diferenciácia funkcie
Imunitný systém ako informačný
systém
§ V imunitnom systéme je typická amplifikácia signálov.

Stimul

13
Amplifikácia signálov
Imunitný systém ako informačný
systém
§ Spätná negatívna regulácia – prítomnosť daných signálov
má viesť k potlačeniu aktivity imunitného systému.

Bunka 1 Bunka 2

Aktivácia
Supresia 14
Efektorové
Aktivácia funkcie
Imunitný systém je:
1. informačný systém
2. difúzny systém

§ sústava orgánov, tkanív, buniek a sekrétovaných

molekúl, ktoré svojím koordinovaným účinkom
zabezpečujú imunitu

15
 Imunitný systém je:
1. informačný systém
2. difúzny systém
3. účelný systém
§ Imunitná odpoveď vznikne iba v prípade jej nevyhnutnej
potreby
Tolerancia
Imunologická privilegovanosť –
– Imunitné reakcie na slizničných
povrchoch tela sú skôr
v niektorých častiach tela, ktoré
nasmerované k tolerancii než
majú nízku schopnosť reparácie,
k vzniku zápalovej imunitnej
ako napr. v CNS môžu niektoré
odpovede – veľké množstvo
imunitné mechanizmy chýbať. 16
podnetov, avšak obvykle
neškodných.
Čo je „vlastné“

čo „cudzie“ ?

17
 Mechanizmy imunity
Vrodené (nešpecifické) Získané (špecifické)
§ Nie sú špecifické iba pre určité § Pôsobia len proti tomu
antigény antigénu, ktorý ich aktivoval -
sú špecifické
§ Sú vždy pripravené rýchlo
reagovať na prítomnosť § Vznikajú až po kontakte s
antigénov daným antigénom

§ Aktiváciu nepodmieňuje § Na ich vytvorenie je potrebný

predchádzajúci kontakt s daným čas – 10-15 dní
antigéno, t.j. nemajú
imunologickú pamäť § Majú imunologickú pamäť

Antigén je označenie pre akúkoľvek látku, 18

ktorú imunitný systém rozpoznáva ako cudziu (non-self),
a na prítomnosť ktorej reaguje
 ZLOŽKY IMUNITNÉHO SYSTÉMU:

NEŠPECIFICKÉ / VRODENÉ ŠPECIFICKÉ / ZÍSKANÉ

§ HUMORÁLNE: § HUMORÁLNE:
§ komplementové zložky § Protilátky (Ab)
§ cytokíny (napr. interferóny, IFN) /imunoglobulíny (Ig)
§ antimikrobiálne peptidy (napr.
lyzozým)
§ proteíny akútnej fázy (APP)

§ BUNKOVÉ: § BUNKOVÉ:
§ Leukocyty (NE, Eo, Ba, Mo, § T- a B-lymfocyty
NK (natural killers) bunky)
§ Mastocyty, makrofágy,
dendritové bunky 19
 Imunitná odpoveď
Mechanizmy Mechanizmy
vrodenej imunity získanej (adaptívnej) imunity
Infekcia Infekcia

Rozpoznanie pomocou Nahromadenie a Transport antigénov do sekundárnych

už pripravených aktivácia fagocytov lymfoidných orgánov (napr. uzlín)
efektorových molekúl

Zápal a aktivácia Aktivácia špecifických

Odstránenie patogéna ďalších efektorových B- a T-lymfocytov
buniek

Klonálna expanzia pomocných a

Odstránenie patogéna cytotoxických T-lymfocytov a
plazmatických buniek (tvorba
protilátok)
20

Odstránenie patogéna
 Intracelulárne mikroorganizmy (vírusy a niektoré
baktérie a protozoá)
Extracelulárne mikroorganizmy (väčšina baktérií,
Infekcia plesne, protozoá a helminty)

Vrodená imunita Získaná (adaptívna) imunita

Extralulárne alebo
Intracelulárne Extracelulárne Intracelulárne
intracelulárne
patogény patogény patogény
patogény

NK bunky Fagocyty Pomocné Th bunky Cytotoxické

Komplement (cytokíny) Tc bunky

B bunky
a protilátky

Deštrukcia Deštrukcia Deštrukcia Deštrukcia

patogéna patogéna patogéna patogéna 21
 Intracelulárne mikroorganizmy (vírusy a niektoré
baktérie a protozoá)
Extracelulárne mikroorganizmy (väčšina baktérií,
Infekcia plesne, protozoá a helminty)

Vrodená imunita Získaná (adaptívna) imunita

Extralulárne alebo
Intracelulárne
intracelulárne
patogény
patogény

Bunková (celulárna) imunita Pomocné Th bunky Cytotoxické

T lymfocyty (cytokíny) Tc bunky

B bunky
Protilátková (humorálna) imunita a protilátky

22
Imunitná odpoveď
Prospešná
§ poskytuje ochranu – imunitu
§ je inertná – tolerancia

Patologická
§ Neprimeraná (hyper-) reaktivita
§ Autoimunitné reakcie
§ Hypersenzitívne reakcie

§ Nedostatočná (hypo-) reaktivita – imunodeficiencia

§ Primárne immunodeficiencie (PID) – vrodené genetické
defekty
23
§ Sekundárne imunodeficiencie (SID) – vznikajú v priebehu
individuálneho života v dôsledku pôsobenia rôznych vplyvov
(napr. infekcie)
Špecifická imunita

Fyziologicky získaná

24
§ Pasívne: prenosom protilátok z matky na potomstvo
§ Aktívne: po prekonaní infekcie

Umelo navodená

§ Pasívne: prenosom protilátok (antiséra) z imunného na

vnímavého jedinca
§ Aktívne: po podaní antigénu – vakcíny
Porovnanie
pasívne a aktívne vzniknutej imunity
Pasívna imunita
§ Výhoda

25
§ Prenos protilátok zabezpečí okamžitú ochranu.
§ Nevýhoda
§ Protilátky sú postupne rozložené, preto táto imunita slabne,
jedninec je preto pri reinfekcii vnímavým.

Aktívna imunita
§ Výhoda
§ Je dlhotrvajúca.
§ Nevýhoda
§ Imunita nevznikne okamžite.
 Antigén
Skriptá:
Ľ.Tkáčiková: Veterinárska imunológia, 2019, kapitola 4

Dopisovacia otázka za max. 10 bodov:

5. Antigén.
• Charakterizujte antigén a faktory, ktoré ovplyvňujú jeho imunogénnosť.
• Definujte termíny: epitop; hapten, exoantigén, endoantigén, aloantigén, xenoantigén,
autoantigén, alergén.
• Charakterizujte receptory, ktoré využívajú zložky vrodenej a získanej (adaptívnej)
imunity na rozpoznanie antigénov. 26
• Charakterizujte epitopy rozpoznávané B- a T-lymfocytmi.
ANTIGÉN (Ag)
(antibody generator)
§ Látka, ktorú imunitný systém rozpoznáva a na
prítomnosť ktorej reaguje

27
Antigény
Kompletné antigény - Nekompletné antigény -
IMUNOGÉNY HAPTÉNY
§ majú schopnosť navodiť § nemajú schopnosť navodiť
špecifickú imunitnú špecifickú imunitnú odpoveď
odpoveď = imunogénnosť = NIE sú imunogénne

§ majú schopnosť viazať § majú iba schopné viazať

špecifické protilátky = špecifické protilátky =
antigénnosť antigénnosť

28
 Antigény
Kompletné antigény -
IMUNOGÉNY
§ komplexy pozostávajúce z
makromolekulárneho nosiča a
antigénnych determinant alebo § Epitopy sú imunologicky
epitopov aktívne oblasti imunogénu,
ktoré viažu antigén-špecifické
membránové receptory na
Epitopy lymfocytoch alebo protilátky.
(antigénne determinanty)

Protilátka A § Nie všetky epitopy nájdené v

Antigén komplexnom antigéne sú
Protilátka B rovnako imunogénne, niektoré
sú imunodominantné.
Protilátka C 29
 Antigény
Kompletné antigény - Nekompletné antigény -
IMUNOGÉNY HAPTÉNY
§ komplexy pozostávajúce z § malé molekuly, napr. lieky, alebo
makromolekulárneho nosiča a izolované antigénne epitopy
antigénnych determinant alebo § potrebujú „nosič“ (väčšiu
epitopov molekulu), ktorý sa môže spájať
s hapténom a stimulovať vznik
špecifickej imunitnej odpovede
Epitopy
(antigénne determinanty)
Konjugát
Protilátka A Nosič hapténu s
nosičom
Antigén
Protilátka B Haptén

Protilátka C 30
Kedy to využijeme?
1. Laboratórna diagnostika
Cieľ: Zistiť, či sú v sére špecifické protilátky.

Sérum Haptén V sére sú špecifické

vyšetrovaného protilátky,
pacienta t.j. pacient bol v kontakte s
? daným hapténom !

31
Kedy to využijeme?
1. Laboratórna diagnostika

2. Diagnostika príčiny patologickej imunitnej

odpovede – hypersenzitívnej reakcie

32
Haptén + Proteín (nosič)
Konjugát
hapténu s

§ Penicilín nosičom

§ Streptomycín Alergická
§ Sulfónamidy Kompletný reakcia
§ Niektoré anestetika antigén

33
Faktory, ktoré ovplyvňujú
imunogénnosť
§ Cudzorodosť
§ Veľkosť
§ Chemické zloženie a heterogenita
§ Schopnosť spracovania a prezentácie v molekulách hlavného
histokompatibilného komplexu (MHC) na povrchu buniek.
§ Genotyp príjemcu (napr. MHC molekuly)
§ Dávka antigénu
§ Spôsob podania antigénu
§ Pridávanie látok nazývaných adjuvans, ktoré zvyšujú imunitnú
odpoveď

34
Ako rozpoznáva imunitný systém vlastné
(self) od cudzieho (non-self)?

Odpoveď: Pomocou receptorov

35
Charakteristika receptorov zložiek vrodenej
imunity
§ Vrodený imunitný systém využíva tzv. vzory rozpoznávajúce
receptory (PRR, Pattern Recognition Receptor), ktorých stavba a
funkcia je vysoko konzervovaná.
§ PRR sú umiestnené v bunkových membránach alebo sa nachádzajú
v telových tekutinách (sú solubilné)

§ Odlíšenie potenciálne nebezpečných podnetov od podnetov

neškodných!

36
 Receptory
Vrodenej imunity
§ PRR (Pattern Recognition
Receptor) – vzory rozpoznávajúce
receptory
§ Rozpoznávajú:
§ štruktúry mikroorganizmov
§ PAMPs (Pathogen-Associated
Molecular Patterns) /MAMPs
(Microbe-Associated Molecular Toll-like receptory (TLR) sú PRR
Patterns) umiestnené v membráne buniek
§ molekuly uvoľnené z poškodených
alebo mŕtvych buniek
§ DAMPs (Damage-Associated
Molecular Patterns)
37
PRRs: Toll-like receptory (TLR)

38
PRRs
§ TLR
§ TLR1- TLR10
§ CLR (C-type lectin receptor):
§ Dektín 1, Dektín 2,…
§ NLR (Nucleotide-binding oligomerisation domain receptor):
§ NOD
§ RLR (RIG-I-like receptor):
§ RIG-1 (Retinoic acid-inducible gene I)

39
 Receptory
Vrodenej imunity Získanej imunity
§ PRR (Pattern Recognition § Antigén-špecifické
Receptor), ktoré receptory na povrchu T- a
rozpoznávajú: B-lymfocytov (TCR, BCR)
§ PAMPs/MAMPs § Protilátky
(Pathogen/Microbe- /imunoglobulíny (Ig)
Associated Molecular
Patterns)

§ DAMPs (Damage-
Associated Molecular
Patterns)

40
 Charakteristika epitopov rozpoznávaných
B-lymfocytmi BCR/mIg
§ B-bunky rozpoznávajú rozpustné antigény, B-bunka
keď sa naviažu na ich na membránu viazanú
protilátku (mIg = BCR).
§ BCR/protilátky sa viažu na epitopy priamo
§ BCR/protilátky viažu proteíny, polysacharidy,
lipidy
§ Veľkosť epitopu nemôže byť
Epitopy väčšia ako veľkosť väzbového
(antigénne determinant) miesta BCR/protilátky
Protilátka A § B-bunkový epitop musí byť
Antigén dostupný, ak má viazať
Protilátka B
protilátku
§ Denaturácia môže zmeniť
Protilátka C štruktúru epitopov 41
Paratopy
(antigen-viažuce miesta
na protilátkach)
 Konformačný
epitop
Antigén
Epitopy
rozpoznávané
protilátkami

Sekvenčný epitop
42
Charakteristika epitopov rozpoznávaných
T-lymfocytmi
§ Receptor T-buniek (TCR)
nerozpoznáva (neviaže) voľné
T-lymfocyt
peptidy!

§ TCR rozpoznáva iba peptidy TCR

(sekvenčné epitopy !) prezentované v Epitop
molekulách hlavného Antigénny
histokompatibilného komplexu peptid
Agretop
(MHC)
MHC

§ Antigénny epitop rozpoznávaný T-

lymfocytom preto musí mať dve Antigén-prezentujúca bunka
odlišné interakčné miesta: (APC)

§ epitop – interaguje s TCR 43

§ agretop – interaguje s molekulou
MHC
 Protilátky (Ab, antibody)/
Imunoglobulíny (Ig)
Skriptá:
Ľ.Tkáčiková: Veterinárska imunológia, 2019, kapitola 12

Dopisovacia otázka za max. 10 bodov:

6. Protilátky.
• Charakterizujte protilátky.
• Opíšte štruktúru protilátok.
• Definujte termíny: paratop, valencia, afinita, avidita, izotyp, alotyp, idiotyp.

44
Protilátky (Ab, antibody)/
Imunoglobulíny (Ig)
§ Sú to proteíny viažuce antigén, ktoré sú prítomné na
membráne B-buniek (BCR/mIg) a sú tiež vylučované
plazmatickými bunkami.

mIg/BCR
§ Protilátka viazaná na membránu (mIg/BCR)
B-cell
udeľuje B bunkám antigénnu špecifickosť.

§ Protilátky cirkulujúce v krvi, sú efektormi špecifickej

humorálnej imunity

45
Štruktúra imunoglobulínov

46
Štruktúra imunoglobulínov

§ Ťažké (heavy, H) reťazce

§ Ľahké (light, L) reťazce

47
Štruktúra imunoglobulínov
Ťažké (H) reťazce

~ 50 000 Da (445 AA)

§ 5 typov H reťazcov:
§ γ (IgG)
§ μ (IgM)
§ α (IgA)
§ ε (IgE)
48
§ δ (IgD)
Štruktúra imunoglobulínov
Ľahké (L) reťazce

§ ~ 25 000 Da (214 AA)

§ 2 typy L reťazcov: κ (kapa) alebo λ (lambda)

49
Štruktúra imunoglobulínov

§ Ťažké (H) reťazce

§ Ľahké (L) reťazce

§ Disulfidické väzby
§ Medzi-reťazcové
§ Vnútro-reťazcové

50
Doména

10 90

Disulfidická väzba

10 Polypetidový reťazec 90

Cysteín

51
Štruktúra imunoglobulínov

52
§ Disulfidické väzby
§ Medzi-reťazcové
§ Vnútro-reťazcové
\
Štruktúra imunoglobulínov

VH VH
VL VL

53
§ Variabilná časť (VL, VH) CL CL

§ Konštantná časť (CL, CH)

CH CH
§ Pántová časť (nie je v IgM)
Štruktúra imunoglobulínov -
fragmenty

54
Fab – Fragment antigen binding
Fc – fragment, crystallizable
(Fragment viažuci sa na bunky)
Štruktúra imunoglobulínov -
funkcia fragmentov
Špecificita
determinovaná
VH a VL
Fab

55
Väzba antigénu
 Fab fragmenty – CDR

§ Variabilná časť (VL, VH)

§ hypervariabilné oblasti –

56
oblasti determinujúce
komplementaritu (CDR,
Complementarity
Determining Region), ktoré
sú zodpovedné za špecificitu
väzby s antigénom

§ CDR sú oddelené menej

variabilným úsekom
Paratop

Epitop

Antigén

Paratop

57
Väzba medzi protilátkou a antigénom
§ Reverzibilná nekovalentná väzba

nekovalentné väzby
ligand

väzobné
miesto

proteín
58
Fab fragmenty
§ Valencia protilátok
§ Počet väzobných miest pre antigén na molekule
protilátky (2, 4, 10, resp. 5)

Fc Fc

Bivalentná protilátka

pentamér IgM
dimér IgA 59

Polyvalentná protilátka
Fab fragmenty
§ Valencia protilátok

§ Afinita protilátky
§ Sila väzby medzi antigénnym epitopom a paratopom na
protilátke

Afinita é Afinita ê
IgG IgM

60
Fab fragmenty
§ Valencia protilátok
§ Afinita protilátky

§ Avidita protilátok
§ Sila väzby medzi všetkými paratopmi protilátky a
antigénom

IgG IgM
Avidita ê Avidita é

61
Fab fragmenty
§ Valencia protilátok
§ Afinita protilátky
§ Avidita protilátok

§ Krížová

62
reaktivita
§ niektoré protilátky
viažu odlišné
antigény, ktoré
majú podobné
epitopy
 Štruktúra imunoglobulínov -
funkcia fragmentov
Väzba antigénu

Fab

Väzba
komplementu

Fc Väzba na
bunkové
Efektorové funckcie receptory (FcR)
Antigénna charakteristika Ig
§ Izotyp
§ Antigénne determinanty Izotypové determinanty
konštantných častí H
reťazcov, ktoré sú rovnaké IgG IgA
u všetkých jedincov daného
druhu.

64
Izotypy (triedy protilátok)

J-reťazec

J-reťazec J-reťazec

Sekrečná komponenta

§Podtriedy Ig: 65
§IgG : IgG1, … IgG4
§IgA: IgA1, IgA2
Antigénna charakteristika Ig
§ Izotyp
Alotypové determinanty
§ Alotyp
§ Antigénne determinanty IgG IgG
konštantných častí H
reťazcov, ktoré sú
špecifické pre jedincov
daného druhu.

66
Antigénna charakteristika Ig
§ Izotyp
§ Alotyp Idiotypové determinanty

§ Idiotyp IgG IgG

§ Antigénne determinanty
variabilných častí H a L
reťazcov, ktoré sú u
špecifické pre každý
antigén.

67
Ďakujem Vám za pozornosť

68