Mô hình đánh giá độc tính In vitro

In vitro là mô hình đánh giá trên các mô hoặc các tế bào được nuôi cấy trong môi trường
nhân tạo bên ngoài cơ thể. Hiện nay, mô hình này được ứng dụng rộng rãi trong các
nghiên cứu sinh học phân tử, đánh giá độc tính của hoá chất, sản xuất dược phẩm, thụ
tinh trong ống nghiệm và chẩn đoán. Vể quá trình đánh giá độc tính trên tế bào, các tế
bào được nuôi cấy cho đến khi ổn định, rồi phơi nhiễm với hoá chất ở các nồng độ khác
nhau nhằm xác định các mức độ ảnh hưởng của hoá chất lên sức sống và sự tồn tại của tế
bào. Ảnh hưởng của hoá chất lên các loại tế bào khác nhau là khác nhau vì vậy các nhà
nghiên cứu thường sử dụng một dòng tế bào nhất định cho một đánh giá độc tính của họ
để đảm bảo tính đồng nhất và chính xác.
Dòng tế bào gốc phôi thận người HEK293T
Tế bào gốc phôi thận người HEK293 hay còn gọi là tế bào 293 có nguồn gốc từ thận của
một phôi thai bị bỏ và được tích hợp một đoạn DNA có kích thước 4kbp của virus adeno
5 (Ad5) vào nhiễm sắc thể 19. Đoạn DNA của virus chứa các gen mã hoá cho hai loại
protein E1A và E1B. Hai protein này ức chế quá trình apoptosis, can thiệp vào con đường
phiên mã và kiểm soát chu kỳ tế bào do đó có thể nuôi cấy liên tục các tế bào HEK293. 1,2
HEK293T là một biến thể của dòng tế bào HEK293, biểu hiện alen nhạy cảm với nhiệt
độ của kháng nguyên T SV403. Hiện nay vẫn còn tranh cãi về nguồn gốc của các tế bào
HEK293 ban đầu. Theo báo cáo của nhóm nghiên cứu của Gerry Shaw năm 2002, tế bào
HEK293 biểu hiện các tiểu đơn vị của sợi thần kinh (NF) NF-L, NF-M, NF-H và α-
internexin cũng như nhiều protein khác thường được tìm thấy trong tế bào thần kinh 4.
Tuy nhiên theo báo cáo năm 2016 của nhóm nghiên cứu của Masakazu Inada, dòng tế
bào HEK293 cũng biểu hiện các protein trong các tế bào trung mô và biểu mô 5. Tế bào
HEK293 cũng như HEK293T mang đặc điểm hình thái là biểu mô 5. Ngoài những ứng
dụng về nghiên cứu biểu hiện gen và sản xuất retrovirus tái tổ hợp, dòng tế bào
HEK293T còn được sử dụng để đánh giá độc tính của hoá chất. Ví dụ một nghiên cứu
đánh giá độc tính được thực hiện vào năm 2016 bởi một nhóm các nhà khoa học Trung
Quốc đã sử dụng dòng tế bào HEK 293T để đánh giá ảnh hưởng của các hạt nano bạc
(AgNP). Các tế bào được nuôi cấy ở đĩa 96 giếng và được phơi nhiễm với các nồng độ
khác nhau của dung dịch AgNP (10, 20 và 40 μg / mL) trong 24h. Sau đó, họ sử dụng
phương pháp kiểm tra MTT để đánh giá khả năng sống sót của tế bào, kết quả là khả
năng sống của tế bào giảm khi tăng nồng độ AgNP và khả năng sống sót của tế bào là
khoảng 69,07% so với đối chứng khi nồng độ AgNPs đạt 40 μg / mL.
Dòng tế bào STO
STO là một dòng tế bào được hình thành từ nguyên bào sợi của chuột lai Sandos (SIM),
kháng 6-thioguanine và ouabain. Nó thiếu hoạt tính hypoxanthine guanine
phosphoribosyltransferase và do đó có khả năng kháng 6-thioguanine và ouabain, nhưng
nhạy cảm với sự chọn lọc hypoxanthine, aminoprotein và thymidine. Tế bào STO có thể
tiếp tục tăng sinh trong ống nghiệm do bản chất bất tử của chúng. Chúng cũng được biết
là sẽ ngừng tăng sinh sau khi điều trị bằng chất ức chế phân bào như mitomycin C
(MMC). Dòng tế bào STO thường được sử dụng để nuôi tế bào gốc phôi (ES) và duy trì
chúng ở trạng thái không biệt hóa. Về bản chất, chúng là các nguyên bào sợi phôi của
chuột.