immune complex captured on the microparticles.
It is used together with product calibrators for
Anti-HBs
Antibody to Hepatitis B the relative light units (RLUs) generated during the
Surface Antigen (CLIA)
Order Information
Catalog No. Package Size
Anti-HBs111 2×50 tests
Anti-HBs112 2×100 tests
Intended Use
The CL-series Anti-HBs assay is a Chemiluminescent
Immunoassay (CLIA) for the quantitative
determination of antibody to hepatitis B surface
antigen (Anti-HBs) in human serum or plasma.
Summary
After the infection of Hepatitis B virus (HBV),
Hepatitis B surface antigen (HBsAg) is the first
serological marker to appear in blood. The increase
in antibody to HBsAg (anti-HBs) accompanied with
decrease in HBsAg might indicate convalescence or
recovery from HBV infection. Anti-HBs assay is
often used to monitor the clinical status of Hepatitis
B infected individuals. Detection of anti-HBs in an
asymptomatic individual may indicate previous
exposure to HBV1.
Hepatitis B vaccine can stimulate immune system to
produce anti-HBs for preventing HBV
infection.1Anti-HBs assay is commonly used to
monitor the efficacy of Hepatitis B vaccination. The
presence of anti-HBs is important for protection
against Hepatitis B virus (HBV) infection 2.
Antibody to HBsAg is mainly generated against the
HBsAg determinant “a”. HBsAg is rarely detected
with Anti-HBs at the same time, except for HBV
immune escape mutants during chronic infection3.
Assay Principles
The CL-series Anti-HBs assay is a two-site sandwich
assay to determine the level of antibody to hepatitis
B surface antigen (Anti-HBs).
In the first step, sample, paramagnetic
microparticles coated with hepatitis B surface
antigen (HBsAg), and alkaline phosphatase (ALP)
labeled HBsAg are added into a reaction vessel.
After incubation, antibody to hepatitis B surface
antigen (Anti-HBs) in sample will bind to HBsAg
coated on microparticles and HBsAg labeled with
ALP to form sandwich complex (Microparticles
-HBsAg-Anti-HBs-(HBsAg-ALP). Afterwards, the
reaction vessel will be placed under the magnetic
field. microparticles are magnetically captured while
other unbound substances are removed by washing.
In the second step, the substrate solution is added
to the reaction vessel. It is catalyzed by ALP in the
P/N: 046-003267-00 (7.0) English-1
Reaction Vessel
The resulting chemiluminescent reaction is
measured as relative light units (RLUs) by a
photomultiplier built into the system. The amount of
Anti-HBs present in the sample is proportional to
reaction. The Anti-HBs concentration can be
determined via a calibration curve, which is built on
an encoded Master Calibration Curve and three level
product calibrators.
Reagent Components
The reagent kit is composed of two components: Ra
and Rb. The component cannot be exchanged, and
the detailed information of each component is listed
below：
Paramagnetic microparticles coated
Ra with hepatitis B surface antigen in
TRIS buffer containing preservative.
Alkaline phosphatase labeled hepatitis
Rb B surface antigen in diluent containing
preservative.
The position of each component is shown in the
figure below (front view on the left and top view on
the right):
Storage Stability
The unopened Anti-HBs (CLIA) reagent kit is stable
up to the expiration date as indicated on the label
when stored at 2~8°C. The actual expiration date is
stated on the label.
The Anti-HBs (CLIA) reagent kit can be stored
onboard at 2~8°C, and used for a maximum of 28
days after opening for use.
Reagent Preparation
Ra: Ready to use
Rb: Ready to use
Materials required but not provided
Mindray CL-series Chemiluminescence
Immunoassay Analyzer
Cat. No. Anti-HBs211: Anti-HBs Calibrators,
1×2.0mL for each level of calibrator C0, C1 and C2
Cat. No. Anti-HBsN311: Anti-HBs Negative Control
3×2.0mL
Cat. No. Anti-HBsN312: Anti-HBs Negative Control,
6×2.0mL
Cat. No. Anti-HBsP311: Anti-HBs Positive Control,
3×2.0mL
Cat. No. Anti-HBsP312: Anti-HBs Positive Control,
6×2.0mL
Cat. No. CS511: Substrate Solution, 4×115mL
Cat. No. WB411: Wash Buffer, 1x10 L
Anti-HBs Page 1 of 2
pack.
Instrument System
Mindray CL-series Chemiluminescence
Immunoassay Analyzer
Specimen Collection and Preparation
Human serum is recommended for this assay.
Centrifuge the specimen at 3500 rpm for a
minimum of 10 minutes after clot formation is
complete. Specimen should be tested as soon as
possible after sample collection and pre-analytical
treatment. Test the specimen within two hours after
centrifugation. If testing is not completed within 8
hours, transfer the supernatant into tubes for
storage. Specimen should be tightly capped and
refrigerated at 2~8°C. If testing will be delayed for
more than 14 days, specimens should be frozen at
-20°C or below.
Avoid repeated freeze and thaw cycles, which may
cause sample deterioration. Specimen can be used
after a maximum of five cycles of freeze and thaw.
Do not use specimen with the following conditions:
 heat inactivated
 grossly hemolyzed
 obvious microbial contamination
 visible fibrin or other cell debris
Assay Procedure
For optimal performance of this assay, operators
should read the related system operation manual
carefully to get sufficient information, such as
operation instructions, sample preservation and
management, safety precautions, and maintenance.
Prepare all required materials for the assay as well.
Before loading the Anti-HBs reagent kit on the
instrument for the first time, invert unopened
reagent bottle gently for at least 30 times to
resuspend the microparticles, which have settled
during shipment or storage. Visually inspect the
bottle to ensure the microparticles have been
homogenized. If the microparticles remain adhered
to the bottle, continue inverting until the
microparticles have been completely mixed. If the
microparticles cannot be homogenized, it is
recommended not to use this bottle of reagent.
Contact Mindray Customer Service for help. Do not
invert opened reagent bottle.
This assay requires 50 μL of sample volume for a
single test. This volume does not include the dead
volume of the sample container. Additional volume
is required when performing additional tests from
the same sample. Operators should refer to the
system operation manual and specific requirement
of the assay to determine the minimum sample
volume.
Calibration
CL-series Anti-HBs has been calibrated against WHO
2nd International Standard anti-HBs antibody
(NIBSC Code: 07/164).
The specific information of master calibration curve
of Anti-HBs reagent kit is stored in the
two-dimensional barcode attached in the reagent
the calibration of the specific reagent lot. When
performing the calibration, scan the information of
master calibration curve from the barcode into the
system first, and then use the three level product
calibrators. Valid calibration curve is required before
any Anti-HBs test. Recalibration is recommended
every 4 weeks, or when a new reagent lot is used, or
the quality controls are out of specified ranges. For
detailed instruction of calibration, refer to the
system operation manual.
Quality Control
It is recommended that quality controls should be
run once every 24 hours if the tests are in use, or
after every calibration. The quality control
frequency should be adapted to each laboratory’s
individual requirements. The recommended two
levels of quality controls for this assay are Mindray
Anti-HBs Negative Control and Anti-HBs Positive
Control.
Quality control results should be within the
acceptable ranges. If a control is out of its specified
range, the associated test results are invalid and the
samples must system operation manual to check
the assay system. If the quality control results are
still out of the specified range, please contact
Mindray Customer Service for help.
Calculation
The analyzer automatically calculates the analyte
concentration of each sample on the basis of master
calibration curve read from the barcode, and a
4-Parameter Logistic Curve Fitting (4PLC) with the
relative light units (RLUs) generated from three
level product calibrators of defined concentrations.
The results are shown in the unit of mIU/mL.
Dilution
Samples with Anti-HBs concentrations above the
upper limit can be diluted with Mindray Sample
Diluent. The recommended dilution is 1:40 (either
automatically by the analyzer or manually). The
concentration of the diluted sample must be > 10
IU/mL. After manual dilution, multiply the result by
the dilution factor. After automated dilution by the
analyzers, the system automatically multiply the
result by the dilution factor when calculating the
sample concentration.
Reference Range
Two kinds of recognized Anti-HBs assay kits were
used to select 414 Anti-HBs non-reactive samples
and 314 Anti-HBs reactive samples. These samples
were tested by Anti-HBs kit on Mindray CL-2000i
system. Data were analyzed with statistical analysis
software (ROC curve). The specificity and sensitivity
can vary according to selected Cutoff value. A Cutoff
of10 mIU/mL with the best balanced specificity and
sensitivity were determined as the Cutoff of Mindray
Anti-HBs kit.
Samples tested with Anti-HBs kit on Mindray
CL2000i system with a concentration less than
cutoff (10 mIU/mL) is considered as Anti-HBs
non-reactive; with a concentration larger than or
equal to cutoff, is considered as Anti-HBs reactive.
2018-10
 concentration sample (<5 mIU/mL) at different
Interpretation of Results Precision ratios, generating a series of dilutions. The total
Anti-HBs of each dilution was determined using the
1. Samples with anti-HBs concentration of <10 The CL-series Anti-HBs assay is designed to have a
Mindray CL-Series Anti-HBs Assay. Linearity was
mIU/mL are Non-reactive. These samples are precision of ≤10% (within-device CV). Precision
demonstrated in the range of 5.00 mIU/mL to
considered as negative for anti-HBs, and do not was determined by following National Committee
200.00 mIU/mL，the correlation coefficient r is ≥
need further testing. for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) Protocol
0.9900. The linearity data are summarized in the
2. Samples with anti-HBs concentration of ≥10 EP5-A24. Two levels of quality controls were tested
table below.
mIU/mL are Initially Reactive. in duplicate in two separate runs per day, for a total
of 20 days, using a single lot of reagents and a Anti-HBs
3. Initially Reactive samples with anti-HBs 1 2 3 4 5 6
single calibration curve. The precision data are (mIU/mL)
concentration between 10 and 100 mIU/mL summarized in the table below.
need to be retested. Samples should be Expected 1,59 53,59 106,04 164,03 219,80 276,12
transferred to a centrifuge tube and centrifuged Mean Within-
Within- Between- Bibliography
at≥10,000 RCF (Relative Centrifugal Force) for Sample Anti-HBs Device
(mIU/mL) Run CV Run CV Measure 1,59 55,22 110,45 165,67 220,90 276,12
10 minutes, and retested in duplicate. CV 1. Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P,
Initially Reactive samples with anti-HBs Negative et al. Persistence of vaccine-induced antibodies
8.22 2.70% 2.15% 5.08%
concentration of <10 mIU/mL in both retests are Control to hepatitis B surface antigen and the need for
negative for anti-HBs.
Method Comparison
booster vaccination in adult subjects. Postgrad
Positive 1.97% 3.94% 5.65%
Initially Reactive samples with anti-HBs 257.09 The Mindray CL-Series Anti-HBs Assay was Med J 1987; 63(S2):129-135.
Control
concentration of >10 mIU/mL in either of the compared to a commercially available diagnostic kit 2. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune
retests are Repeatedly Positive for anti-HBs. in a correlation study. The statistical data obtained response to hepatitis B revaccination. J Med
Specificity by Deming computing mode are shown in the table Virol 1988;24: 377-384.
Repeatedly reactive samples as well as Initially
Reactive samples with a concentration ≥100 below. 3. Lada O, Benhamou Y, Poynard T, et al.
Hemoglobin up to 500 mg/dL, bilirubin up to 20
mIU/mL must be confirmed according to the mg/dL, triglycerides up to 1500 mg/dL, and total Concentrat Correlatio Coexistence of hepatitis B surface antigen
recommended confirmatory algorithms. protein up to 10 g/dL will not interfere with the ion Range Slope Intercept n (Anti-HBs) and anti-HBs antibodies in chronic
CL-series Anti-HBs assay. These substances show (mIU/mL) Coefficient hepatitis B virus carriers: influence of “a”
determinant variants. J Virol 2006; 80:
Limitation of Measurement less than 10% interference at indicated 0~1000 1.45 1.90 0.949 2968-2975.
concentrations. mIU/mL
The upper limit of this assay is 1000 mIU/mL. A Mindray Anti-HBs kit was evaluated for potential 4. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
specimen with an anti-HBs concentration lower than cross-reactive substances from individuals with Precision Performance of Quantitative
the upper limit can be quantitatively determined, medical conditions unrelated to HBV infection. At Warnings and Precautions Measurement Method; Approved Guideline
while specimen with a concentration higher than the least 5 samples containing each of the potentially –Second Edition.
upper limit will be reported as >1000 mIU/mL or 1. For in vitro diagnostic use only.
interfering pathogens of the following (HAV, HCV,
diluting the samples with Mindray Sample Diluent. HEV, HGV, HIV-1/2, TP, EBV, RV, CMV, HSV-1, Toxo 2. Follow all the rules in handling laboratory
The concentration of anti-HBs in a given specimen Rubella, E.coli, Yeast, and lentivirus）are tested by reagents and take necessary safety © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
can vary, depending on manufacturers’ Mindray Anti-HBs and a reference method. All precautions. Co., Ltd.
measurement systems. It is due to the differences results are consistent on both Mindray and the 3. Due to the differences in methodology and All rights Reserved
in assay methods, calibration, and reagent reference measurement procedure. antibody specificity, test results of the same
specificity. The assay results should be used in sample may be different when using reagent Manufacturer: Shenzhen Mindray Bio-Medical
414 specimens have been claimed Anti-HBs
conjunction with other data, such as symptoms, kits from different manufacturers on Mindray Electronics Co., Ltd.
negative by reference methods. Mindray Anti-HBs
results of other tests, and clinical history, etc to assay on CL-2000i system has detected 407 system, or using Mindray reagent kits on other Address: Mindray building, Keji 12th Road South,
make clinical decisions. samples as negative and 7 samples as positive. The systems. Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
negative coincidence rate is 98.30%. 4. Do not use reagent kits beyond the expiration 518057 P.R.China
Performance Characteristics date. E-mail Address: service@mindray.com.cn
Hook Effect 5. Do not use reagents mixed from different reagent Tel: +86-755-26582888
lots. Fax: +86-755-26582680
Sensitivity There is no high dose hook effect at an Anti-HBs 6. Always keep the reagent pack in the upright
concentration up to 70, 000 mIU/mL. position to ensure no microparticle has been
The Anti-HBs (CLIA) reagent kit has an analytical
lost prior to use.
sensitivity of ≤2.0 mIU/mL. Analytical sensitivity is
defined as the lowest concentration of analyte that Accuracy 7. Reagent pack opened for more than 28 days is
can be differentiated from a sample with no analyte. not recommended for use.
It is measured as the Anti-HBs concentration at two Two trueness controls with defined values traceable
to the International Standard were used to verify 8. Reliability of assay results cannot be guaranteed
standard deviations above the mean RLU from 20 if the instructions in this package insert are not
measurements of an analyte-free sample. the accuracy of this assay. The results showed that
the relative deviation was less than ±10%. The followed.
314 specimens have been claimed to be anti-HBs results are listed in the following table. 9. All the specimen and reaction wastes should be
positive by reference methods. Mindray Anti-HBs considered potentially biohazard. Specimens
assay on CL-2000i system has detected 308 Measured Defined Relative and reaction wastes should be handled in
samples as positive and 6 samples as negative. The Sample Anti-HBs Anti-HBs
Deviation compliance with the local regulations and
positive coincidence rate is 98.10%. (mIU/mL) (mIU/mL) guidelines.
Level 1 21.16 20.36 3.94% 10. The Material Safety Data Sheet (MSDS) is
Reportable Range available upon request.

Reportable range is defined by the analytical Level 2 150.91 146.8 2.80%

sensitivity and the upper limit of the master Graphical Symbols
calibration curve. The reportable range of Anti-HBs
(CLIA) reagent kit is 2.0~1000.0 mIU/mL (or the Linearity
upper limit is up to 40000 mIU /mL for 40‑ fold
diluted samples). A high concentration Anti-HBs sample
(approximately 250 mIU/mL) was mixed with a low

P/N: 046-003267-00 (7.0) English-1 Anti-HBs Page 2 of 2 2018-10


Anti-HBs
Антитела к поверхностному
антигену вируса гепатита B
(ХЛИА)
Информация для заказа
№ по каталогу Размер упаковки
Anti-HBs111 2×50 тестов
Anti-HBs112 2×100 тестов
Предусмотренное использование
Анализ на анти-HBs серии CL представляет собой
хемилюминесцентный иммуноанализ (ХЛИА) для
количественного определения уровня антител к
поверхностному антигену вируса гепатита B
(анти-HBs) в сыворотке или плазме крови человека.
Сводка
После заражения вирусом гепатита В (HBV)
поверхностный антиген вируса гепатита B (HBsAg)
является первым серологическим маркером, который
появляется в крови. Увеличение числа антител к HBsAg
(анти-HBs), сопровождающееся уменьшением HBsAg,
может указывать на выздоровление или восстановление
после заражения HBV. Анализ на анти-HBs часто
используется для отслеживания клинического состояния
пациентов, инфицированных вирусом гепатита B.
Обнаружение анти-HBs у пациента без симптомов может
указывать на воздействие вируса HBV в прошлом. 1
Вакцина против вируса гепатита В может
стимулировать выработку анти-HBs в иммунной
системе для предотвращения заражения HBV1. Анализ
на анти-HBs обычно используется для контроля
эффективности вакцинации против вируса гепатита B.
Наличие анти-HBs играет важную роль в защите от
заражения вирусом гепатита B (HBV)2.
Антитела к HBsAg главным образом вырабатываются
против детерминанты «a» HBsAg. HBsAg редко
обнаруживается одновременно с анти-HBs, за
исключением ускользающих от иммунного ответа
мутантов вируса HBV во время хронической инфекции3.
Принципы анализа
Анализ на анти-HBs серии CL представляет собой
двухэтапный сэндвич-анализ для определения
уровня антител к поверхностному антигену вируса
гепатита B (Anti-HBs).
На первом этапе в реакционную емкость вводят пробу,
парамагнитные микрочастицы, покрытые поверхностным
антигеном вируса гепатита В (HBsAg) и меченный
щелочной фосфатазой (ЩФ) HBsAg. После инкубации
антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В
(анти-HBs) в пробе связываются с HBsAg, покрывающим
микрочастицы, и меченным ЩФ HBsAg с образованием
сэндвич-комплекса (микрочастицы – HBsAg – анти-HBs –
(HBsAg – ЩФ). После этого реакционная емкость
подвергается действию магнитного поля. Микрочастицы
захватываются магнитом, в то время как остальные
несвязанные вещества удаляются промыванием.
На втором этапе раствор субстрата добавляется в
реакционную ячейку. Он катализируется щелочной
фосфатазой в иммунном комплексе, находящемся на
микрочастицах. Полученная хемилюминесцентная
реакция измеряется в относительных световых
единицах (ОСЕ) при помощи встроенного в систему
фотоумножителя. Количество анти-HBs в пробе
пропорционально количеству относительных световых
№ по каталогу:046-003267-00(7.0)Русский-2
единиц (ОСЕ), образованных в ходе реакции.
Концентрацию анти-HBs можно определить с помощью
калибровочной кривой, которая строится на базе
кодированной основной калибровочной кривой и трех
уровней калибраторов продукта.
Компоненты реактива
Набор реактивов состоит из двух компонентов: Ra и
Rb. Компоненты не могут быть заменены; подробная
информация о каждом компоненте приведена ниже:
Парамагнитные микрочастицы, покрытые
Ra поверхностным антигеном гепатита В в
ТРИС-буфере с консервантами.
Поверхностный антиген гепатита В,
Rb меченный щелочной фосфатазой,
в разбавителе с консервантом.
Расположение каждого компонента показано на
рисунке ниже (вид спереди слева и вид сверху
справа):
Стабильность при хранении
Невскрытый набор реактивов для анализа на
анти-HBs (ХЛИА) остается стабильным до истечения
срока годности, указанного на этикетке, при
температуре хранения 2~8 °C. Дата окончания срока
годности указана на этикетке.
Набор реактивов для анализа на анти-HBs (ХЛИА)
может храниться в аппарате при температуре 2~8 °C
и использоваться в течение не более 28 суток после
вскрытия.
Подготовка реактивов
Ra: Готовый к использованию
Rb (отрицательный контроль разбавителя): Готовый
к использованию
Необходимые материалы, не
входящие в комплект поставки
Анализатор Mindray серии CL для
хемилюминесцентного иммуноанализа
№ по каталогу Anti-HBs211: калибраторы для анализа
на анти-HBs, по 2,0 мл на каждый уровень
концентрации калибратора (с нулевой
концентрацией, концентрацией C1 и концентрацией
C2)
№ по каталогу Anti-HBsN311: отрицательный
контроль для анализа на анти-HBs, 3×2,0 мл
№ по каталогу Anti-HBsN312: отрицательный
контроль для анализа на анти-HBs, 6×2,0 мл
№ по каталогу Anti-HBsP311: положительный
контроль для анализа на анти-HBs, 3×2,0 мл
№ по каталогу Anti-HBsP312: положительный
контроль для анализа на анти-HBs, 6×2,0 мл
№ по каталогу CS511: раствор субстрата, 4 × 115 мл
№ по каталогу WB411: промывочный буфер, 1 × 10 л
реакционная емкость
Используемое оборудование
Анализатор Mindray серии CL для
хемилюминесцентного иммуноанализа
Анти-HBs Стр. 1 из 2
Забор и подготовка образцов проведением каждого исследования на анти-HBs.
Для данного анализа рекомендуется использовать
образцы человеческой плазмы. Образец
Повторную калибровку рекомендуется проводить
каждые 4 недели или при использовании новой
партии реактивов, или в том случае, если результаты
центрифугируют при 3500 об/мин в течение не менее
10 минут до полного образования тромба в пробирке.
контроля качества находятся вне указанных
диапазонов. Детальный порядок калибровки изложен
Анализ должен быть проведен как можно скорее
после взятия проб и предварительной обработки.
в руководстве пользователя.
Анализ образца выполняется в течение двух часов
Контроль качества
после центрифугирования. Если анализ не проведен в
течение 8 часов, перелейте надосадочную жидкость в Рекомендуется проводить контроль качества не реже
пробирки для хранения. Образец должен быть плотно одного раза в сутки при использовании анализов, или
закупорен и помещен в холодильник для хранения после каждой калибровки. Частоту контроля качества
при температуре 2~8 °C. Если анализ не проведен в следует адаптировать к индивидуальным
требованиям каждой лаборатории. Рекомендуемыми
течение более 14 дней, образцы должны быть
заморожены при температуре -20 °C или ниже. средствами для двухуровневого контроля качества
данного анализа являются отрицательный контроль
Избегайте многократного размораживания и
для анализа на анти-HBs и положительный контроль
замораживания проб, т. к. это может привести к их
для анализа на анти-HBs компании Mindray.
разложению. Образец может быть использован после не
более пяти циклов размораживания и замораживания. Показатели контроля качества должны находиться в
допустимых пределах. Если показатели контроля
Не используйте образец, если он:
качества выходят за рамки нормальных значений,
 термически инактивирован; результаты анализов являются недостоверными, и
 сильно гемолизирован; необходимо изучить руководство по эксплуатации
системы для ее проверки. Если показатели контроля
 имеет признаки загрязнения микроорганизмами;
качества повторно выходят за границы нормы,
 содержит фибрин или другой клеточный мусор. свяжитесь с Отделом обслуживания клиентов
компании Mindray.
Методика выполнения анализа
Для качественного выполнения анализа пользователь Вычисление результатов
должен внимательно ознакомиться с соответствующим Анализатор автоматически рассчитывает
руководством по эксплуатации системы, чтобы концентрацию аналита в каждой пробе по данным
получить необходимые сведения, представленные в
основной калибровочной кривой, считанной со
инструкциях по эксплуатации, инструкциях по
штрих-кода, и выполняет подгонку данных к
подготовке и хранению проб, инструкциях по технике логистической кривой на основе 4 параметров с
безопасности и инструкциях по обслуживанию относительными световыми единицами, полученными
устройства. Также необходимо приготовить все для трех уровней калибраторов продукта с
материалы для проведения анализа. определенными значениями концентрации.
Перед первой загрузкой набора реактивов для анализа Результаты отображаются в мМЕ/мл.
на анти-HBs в аппарат закрытый флакон с реактивом
Разведение
следует осторожно перевернуть не менее 30 раз для
ресуспендирования микрочастиц, которые осели при Пробы с концентрацией анти-HBs выше верхнего
транспортировке или хранении. Осмотрите флакон, предела можно развести с помощью разбавителя проб
чтобы убедиться в том, что микрочастицы компании Mindray. Рекомендуемая пропорция
гомогенизированы. Если микрочастицы остаются на разведения — 1:40 (разводится вручную или
стенках флакона, следует продолжить переворачивать автоматически в анализаторе). Концентрация
флакон до полного перемешивания микрочастиц. Если разбавленной пробы должна быть >10 МЕ/мл. После
гомогенизировать микрочастицы не удается, разведения вручную нужно умножить результат на
использовать данный флакон с реактивом не
коэффициент разведения. После автоматического
рекомендуется. Для помощи свяжитесь с отделом разведения в анализаторе результат будет
обслуживания клиентов Mindray. Не переворачивайте автоматически умножен системой на коэффициент
открытые флаконы с реактивами.
разведения при расчете концентрации образца.
Для проведения анализа требуется 50 мкл пробы на
один тест. Данный объем не включает мертвое Номинальный диапазон
пространство контейнера с образцом. Дополнительный Для выбора 414 проб, не реагирующих на анти-HBs, и
объем требуется для проведения дополнительных
314 проб, реагирующих на анти-HBs, были
тестов с образцом. Оператору рекомендуется
использованы два типа признанных наборов для
ознакомиться с руководством пользователя системы и анализа на анти-HBs. Эти пробы были
особыми требованиями к анализу для определения протестированы с использованием набора для
минимального объема образца. анализа на анти-HBs и системы CL-2000i
компании Mindray. Данные анализировались с
Калибровка помощью программного обеспечения для
Анализ на анти-HBs серии CL откалиброван по статистического анализа (кривая ROC).
вторичному международному стандартному образцу Специфичность и чувствительность могут
ВОЗ для антител к анти-HBs (код NIBSC: 07/164). варьироваться в зависимости от выбранного значения
отсечки. В качестве отсечки набора для анализа на
Конкретная информация об основной калибровочной
анти-HBs компании Mindray была определена отсечка,
кривой набора реактивов для анализа на анти-HBs
равная 10 мМЕ/мл, с оптимальными
содержится в двумерном штрих-коде на упаковке
сбалансированными значениями специфичности и
реактивов. Она используется совместно с
чувствительности.
калибраторами продукта для калибровки конкретной
партии реактивов. При выполнении калибровки Пробы, протестированные с помощью набора для
анализа на анти-HBs на системе CL2000i компании
сначала отсканируйте информацию основной
калибровочной кривой со штрих-кода, а затем Mindray, и имеющие концентрацию меньше отсечки
используйте калибраторы продукта на трех уровнях. (10 мМЕ / мл), считаются нереактивными к анти-HBs;
Правильная калибровочная кривая необходима пред пробы с концентрацией больше или равной отсечке,
2018-10
считаются реактивными к анти-HBs. анализа на анти-HBs (ХЛИА) составляет Уровень 2 150,91 146,8 2,80%
2,0–1000,0 мМЕ/мл (или верхний предел достигает
Интерпретация результатов 40000 мМЕ/мл для проб, разведенных 40 раз).
Линейность
1. Пробы с концентрацией анти-HBs <10 мМЕ/мл не Проба с высокой концентрацией анти-HBs (примерно
дают реакции. Эти пробы считаются Точность
250 мМЕ/мл) была смешана с пробой с низкой
отрицательными на анти-HBc и не нуждаются в Прецизионность анализа на анти-HBs серии CL
концентрацией анти-HBs (<5 мМЕ/мл) в различных
дополнительной проверке. составляет ≤10% (коэффициент вариации для одного
пропорциях в серии разведений. Концентрация
устройства). Прецизионность определялась в
2. Пробы с концентрацией анти-HBs ≥10 мМЕ/мл анти-HBs в каждом разведении определялась
соответствии с Протоколом Национального комитета
считаются первоначально реактивными. с использованием анализа на анти-HBs Mindray серии
по клиническим и лабораторным стандартам (NCCLS)
3. Первоначально реактивные пробы с CL. Линейность была продемонстрирована для
EP5-A24. Двухэтапный контроль качества
концентрацией от 10 до 100 мМЕ/мл при анализе диапазона от 5,00 мМЕ/мл до 200,00 мМЕ/мл,
тестировался в двух независимых испытаниях в
коэффициент корреляции r составляет ≥0,9900. Библиография
на анти-HBs нуждаются в повторном анализе. течение 20 дней с использованием одной партии
Пробы необходимо переносить в пробирку для Данные линейности представлены в таблице ниже. 1. Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P, et
реактивов и единой калибровочной кривой. Значения
центрифугирования и центрифугировать при al. Persistence of vaccine-induced antibodies to
погрешности приведены в таблице ниже. Анти-HBs
относительной центробежной силе (RCF) ≥10 000 1 2 3 4 5 6 hepatitis B surface antigen and the need for booster
(мМЕ/мл) vaccination in adult subjects. Postgrad Med J 1987;
в течение 10 минут, после чего исследовать В Межсе- В пределах
повторно в двух параллельных анализах. Средний пределах рийный коэффицие Расчетный 1,59 53,59 106,04 164,03 219,80 276,12 63(S2):129-135.
Проба анти-HBs коэффи- Коэффи- нта Измеренный 1,59 55,22 110,45 165,67 220,90 276,12 2. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune response
Первоначально реактивные пробы с концентрацией
(мМЕ/мл) циент циент вариации to hepatitis B revaccination. J Med Virol 1988;24:
анти-HBs <10 мМЕ/мл при повторных анализах
считаются отрицательными к анти-HBs. вариации вариации устройства Сравнение методов 377-384.

Первоначально реактивные пробы с концентрацией Отрица- Анализ на анти-HBs серии CL компании Mindray 3. Lada O, Benhamou Y, Poynard T, et al. Coexistence
анти-HBs >10 мМЕ/мл по результатам любого из тельный 8,22 2,70% 2,15% 5,08% сравнивался с имеющимся на рынке диагностическим of hepatitis B surface antigen (Anti-HBs) and
повторных анализов считаются повторно контроль набором в исследовании корреляции. Статистические anti-HBs antibodies in chronic hepatitis B virus
положительными к анти-HBs. Положи- данные, полученные в режиме расчетов Deming, carriers: influence of “a” determinant variants. J
тельный 257,09 1,97% 3,94% 5,65% представлены в таблице ниже. Virol 2006; 80: 2968-2975.
Повторно реактивные пробы, а также первоначально
реактивные пробы с концентрацией ≥100 мМЕ/мл контроль 4. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
Диапазон
должны быть подтверждены в соответствии с Коэффициент Precision Performance of Quantitative
концентрации Угол Отрезок
рекомендуемыми алгоритмами подтверждения. Специфичность корреляции Measurement Method; Approved Guideline –
(мМЕ/мл)
Second Edition.
Уровни гемоглобина до 500 мг/дл, билирубина до 0–1000 мМЕ/мл 1,45 1,90 0,949
Ограничение измерений 20 мг/дл, триглицеридов до 1500 мг/дл и общего
Верхний предел для данного анализа составляет белка до 10 г/дл не влияют на результаты анализа на © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co.,
анти-HBs серии CL (ХЛИА). При использовании этих
Предостережения и меры Ltd.
1000 мМЕ/мл. Образец с концентрацией анти-HBs
ниже верхнего предела определяется количественно, веществ интерференция при указанной концентрации предосторожности Все права защищены
а образец с концентрацией выше верхнего предела составляет менее 10%. 1. Только для диагностики in vitro.
Производитель: Shenzhen Mindray Bio-Medical
определяется как значение >1000 мМЕ/мл или Набор для анализа на анти-HBs Mindray был оценен 2. Соблюдайте правила обращения Electronics Co., Ltd.
разводится с помощью разбавителя проб компании на наличие потенциальных перекрестно-реактивных с лабораторными реактивами и правила техники
Mindray. веществ у людей с заболеваниями, не связанными с Адрес: Mindray Building, Keji 12th Road South, Hi-tech
безопасности.
HBV-инфекцией. Не менее 5 проб, содержащих Industrial Park, Nanshan, Shenzhen, 518057 P.R.China
Концентрация анти-HBs в данном образце может 3. Результаты тестов могут различаться
варьироваться в зависимости от аналитических каждый из потенциально интерферирующих Адрес электронной почты:
в соответствии с разностью применяемых
систем производителей. Причиной являются патогенов (вирус гепатита А, вирус гепатита С, вирус service@mindray.com.cn
методик и специфичностью антител, также
различия в методиках анализа, калибровке и гепатита Е, HGV, ВИЧ типов 1/2, БТ, вирус Teл.: +86-755-26582888
результаты тестов могут различаться при
специфичности реактивов. При принятии Эпштейна-Барр, RV, цитомегаловирус, вирус простого
использовании диагностических реактивов Факс: +86-755-26582680
клинических решений результаты анализа должны герпеса 1 типа, токсо, краснуха, кишечная палочка,
других производителей при использовании
сопоставляться с другими данными, такими как молочница и лентивирус), было проанализировано с
диагностических устройств Mindray, или
симптомы, результаты других исследований, помощью набора реактивов Mindray для анализа
использовании диагностических наборов
анамнез и др. на анти-HBs и эталонного метода. Все результаты
Mindray в других диагностических устройствах.
теста Mindray согласуются с результатами
контрольного теста. 4. Не используйте набор реактивов по истечении
Эксплуатационные характеристики
срока годности.
414 образцов признаны отрицательными к анти-HBs
Чувствительность на основании данных, полученных контрольными 5. Не смешивайте реактивы из разных партий
методами. В результате анализа на анти-HBs в реактивов.
Аналитическая чувствительность набора реактивов
для анализа на анти-HBs (ХЛИА) составляет системе Mindray CL-2000i 407 проб были определены 6. Всегда держите упаковку с реактивами в
≤2,0 мМЕ/мл. Аналитическая чувствительность как отрицательные и 7 проб были определены как вертикальном положении, чтобы предотвратить
определяется как минимальная концентрация положительные. Процент совпадений по утечку микрочастиц до использования.
аналита, которая может выявляться в сравнении отрицательным результатам составил 98,30%.
7. Не рекомендуется использовать упаковку
с пробой, не содержащей аналита. Она определяется реактивов, вскрытую более 28 суток назад.
как концентрация анти-HBs, на два стандартных Хук-эффект
отклонения превышающая среднее количество ОСЕ, 8. Не гарантируется точность результатов при
При концентрации анти-HBs до 70 000 мМЕ/мл
полученных при 20 измерениях пробы, не несоблюдении инструкции по использованию.
хук-эффект отсутствует.
содержащей аналита. 9. Все образцы и отходы лабораторной
314 образцов признаны положительными к анти-HBs Точность диагностики являются потенциально
на основании данных, полученных контрольными биологически опасными веществами. Хранение
Для подтверждения точности данного анализа
методами. Анализ на анти-HBs в системе Mindray образцов и отходов лабораторной диагностики
использовались два контроля точности с заданными
должно осуществляться в соответствии с
CL-2000i определил 308 проб как положительные и 6 значениями, прослеживаемыми до международного
локальными нормативными актами и
проб как отрицательные. Процент совпадений по стандарта. Относительное отклонение составило
инструкциями.
положительным результатам — 98,10%. менее ± 10%. Результаты представлены в следующей
таблице. 10. Паспорт безопасной эксплуатации материалов
Регистрируемый диапазон измерений (MSDS) предоставляются по запросу.
Измерен. Заданный
Регистрируемый диапазон определяется Относительное
Проба анти-HBs анти-HBs Графические символы
аналитической чувствительностью и верхним отклонение
(мМЕ/мл) (мМЕ/мл)
пределом основной калибровочной кривой.
Регистрируемый диапазон для набора реактивов для Уровень 1 21,16 20,36 3,94%

№ по каталогу:046-003267-00(7.0)Русский-2 Анти-HBs Стр. 2 из 2 2018-10


Anti-HBs
Anticorpo contra o antígeno
de superfície da hepatite B
(CLIA)
Informações do pedido
Número de Tamanho de
catálogo embalagem
Anti-HBs111 2 ×50 testes
Anti-HBs112 2 ×100 testes
Uso pretendido
O ensaio de anti-HBs da série CL éum Imunoensaio
quimioluminescente (CLIA) para a determinação
quantitativa de anticorpo contra o antí geno de
superfície da hepatite B (anti-HBs) sérico ou
plasmático humano.
Resumo
Após a infecç ão do ví rus da hepatite B (VHB), o
antígeno de superfí cie da hepatite B (HBsAg) é o
primeiro marcador sorológico a aparecer no sangue.
O aumento de anticorpos contra HBsAg (anti-HBs)
acompanhado com a diminuição de HBsAg pode
indicar a convalescença ou a recuperaç ão de infecção
por HBV. O ensaio de Anti-HBs é frequentemente
usado para monitorar o status clí nico dos indivíduos
infectados por hepatite B. A detecção de anti-HBs em
um indiví duo assintomático pode indicar uma
exposição anterior ao HBV. 1
A vacina contra hepatite B pode estimular o sistema
imunológico a produzir anti-HBs para prevenir a
infecção por HBV1. O ensaio de anti-HBs é
comumente usado para monitorar a eficácia de
vacinação contra hepatite B. A presença de anti-HBs
é importante para proteção contra infecção pelo
vírus da hepatite B (HBV).2
O anticorpo contra HBsAg égerado principalmente
contra o fator determinante "a" de HBsAg. O HBsAg
é raramente detectado ao mesmo tempo com
anti-HBs, exceto para mutantes de escape
imunológico do HBV durante a infecção crônica.3
Princí
pios do ensaio
O ensaio de anti-HBs da série CL é um ensaio
sanduíche de dois centros para determinar o nível
de anticorpo contra o antí geno de superfície da
hepatite B (anti-HBs).
Na primeira etapa, a amostra, as micropartí culas
paramagnéticas revestidas com antí geno de superfície
da hepatite B (HBsAg) e HBsAg identificada como
fosfatase alcalina (ALP) são condicionados em um
frasco de reação. Após a incubaç
ão, o anticorpo contra
o antígeno de superfície da hepatite B (anti-HBs) na
amostra vai se ligar a HBsAg revestido com
micropartículas e HBsAg identificado com ALP para
formar o complexo sanduí che (Micropartí culas
-HBsAg-Anti-HBs-(HBsAg-ALP). Em seguida, o frasco
de reaç ão será colocado no campo magnético.
As micropartículas são capturadas magneticamente
enquanto outras substâncias não ligadas são
removidas por lavagem.
N/P: 046-003267-00 (7.0) Português-3
Na segunda etapa, a solução do substrato é
adicionada ao veí culo de reação. Ela é catalisada
pela ALP no complexo imunológico capturado em
micropartí culas. A reação de quimiluminescência
resultante émedida como unidades de luz relativas
(RLUs) por um fotomultiplicador integrado no
sistema. A quantidade de anti-HBs presente na
amostra é proporcional nas unidades de luz
relativas (RLUs) geradas durante a reação.
A concentração de anti-HBs pode ser determinada
por meio de uma curva de calibração, que é
construí da sobre uma curva de calibração principal
codificada e três calibradores no ní
vel do produto.
Componentes reagentes
O kit de reagentes é composto por dois
componentes: Ra e Rb. O componente não pode ser
trocado, e as informações detalhadas de cada
componente são listadas abaixo:
Micropartículas paramagnéticas
revestidas com antí geno de superfí
cie
Ra
da hepatite B no tampão TRIS com
conservante.
Antígeno de superfí cie da hepatite B
Rb identificado com fosfatase alcalina em
diluente com conservante.
A posição de cada componente émostrada na figura
abaixo (vista frontal à esquerda e vista superior à
direita):
Estabilidade de armazenamento
O kit de reagente anti-HBs (CLIA) fechado fica
estável atéa data de vencimento indicada no rótulo
quando armazenado em temperaturas entre 2 °C e
8 °C. A data de validade real éindicada no rótulo.
O kit de reagentes anti-HBs (CLIA) pode ser
armazenado onboard e usado por no máximo
28 dias após a abertura em 2~8 °C.
Preparação do reagente
Ra: Pronto para usar
Rb: Pronto para usar
Materiais necessários, mas não
fornecidos
Analisador de Imunoensaio Quimioluminescente da
série CL da Mindray
Cat. N° Anti-HBs211: Calibradores de anti-HBs,
1 × 2,0 mL para cada ní
vel de calibrador C0, C1 e
C2
Cat. N°Anti-HBsN311: Controle negativo anti-HBs,
3×2,0 mL
Cat. N°Anti-HBsN312: Controle negativo anti-HBs,
6×2,0 mL
Cat. N° Anti-HBsP311: Controle positivo anti-HBs,
3×2,0 mL
Cat. N° Anti-HBsP312: Controle positivo anti-HBs,
Anti-HBs Página 1 de 2
6×2,0 mL
Cat. N°CS511: Solução de substrato, 4 × 115 mL
Cat. N°WB411: Tampão de lavagem, 1 x 10 L
Frasco de reação
Sistema do equipamento
Analisador de Imunoensaio Quimioluminescente da
série CL da Mindray
Coleta e preparação do espécime
O soro humano é recomendável para este ensaio.
Centrifugue a amostra a 3.500 rpm por no mí nimo
10 minutos após a formação do coágulo ser
concluída. A amostra deve ser testada assim que
possível após a coleta da amostra e o tratamento
pré-analítico. Teste a amostra dentro de duas horas
após a centrifugação. Caso o teste não seja
concluído em 8 horas, transfira o sobrenadante para
tubos para armazenamento. A amostra deve ser
fechada e refrigerada a 2~8°C. Se os testes forem
ser atrasados por mais de 14 dias, as amostras
deverão ser congeladas a -20°C ou abaixo.
Evite ciclos repetidos de congelamento e
descongelamento, que podem deteriorar a amostra.
A amostra pode ser usada depois de, no máximo,
cinco ciclos de congelamento e descongelamento.
Não use a amostra com as seguintes condições:
 Inativada por calor
 Maciçamente hemolisada
 Com contaminação microbiana evidente
 Com fibrina ou outros resí
duos celulares visí
veis
Procedimento do ensaio
Para obter o procedimento de ensaio ideal, os
operadores devem ler o manual de operaç ão do
sistema relacionado com atenç ão, para obter
informações suficientes, como instruções de operação,
preservaç ão e administraç ão da amostra, precauções
de seguranç a e manutenç ão. Prepare todos os
materiais necessários para o ensaio também.
Antes de carregar o kit de reagentes de anti-HBs no
instrumento pela primeira vez, inverta o frasco
fechado do reagente suavemente por pelo menos
30 vezes para ressuspensão das micropartí culas,
que se acomodaram durante a remessa ou
armazenamento. Inspecione visualmente o frasco
para assegurar que as micropartí culas estão
homogeneizadas. Se as micropartículas
permanecerem coladas no frasco, continue
invertendo até que elas sejam totalmente
misturadas. Se não for possí vel homogeneizar as
micropartículas de novo, érecomendável não usar
esse frasco de reagente. Entre em contato com o
Serviço de Atendimento da Mindray para obter
ajuda. Não inverta o frasco do reagente aberto.
Este ensaio requer 50 μL de volume de amostra
para um único teste. Esse volume não inclui o
volume morto do contêiner da amostra. Um volume
adicional é necessário ao realizar mais testes da
mesma amostra. Os operadores devem consultar o
manual de operação do sistema e o requisito
específico do ensaio para determinar o volume
mínimo da amostra.
Calibração
O anti-HBs da série CL foi calibrado de acordo com a
2 a norma internacional de anticorpos anti-HBs da
OMS (código NIBSC: 07/164).
As informações especí
da curva de
ficas do kit de reagente
calibração principal anti-HBs
são armazenadas no código de barras
bidimensional colado no pacote do reagente. Ele é
usado com os calibradores do produto para a
calibração do lote do reagente especí fico. Ao
realizar a calibração, verifique as informações da
curva de calibração principal do código de barras no
sistema primeiro, e depois use os calibradores do
produto em três ní veis. A curva de calibração válida
é necessária antes de qualquer teste anti-HBs.
A recalibração érecomendável a cada 4 semanas ou
quando um novo lote de reagente é usado, ou os
controles de qualidade estão fora do intervalo
especificado. Para obter instruções detalhadas de
calibração, consulte o manual de operação do
sistema.
Controle de qualidade
Recomenda-se que os controles de qualidade sejam
executados uma vez a cada 24 horas, se os testes
estiverem em uso, ou após cada calibração.
A frequência de controle de qualidade deve ser
adaptada aos requisitos individuais de cada
laboratório. Os dois ní veis recomendados de
controles de qualidade para este ensaio são
Controle negativo anti-HBs e Controle positivo
anti-HBs da Mindray.
Os resultados do controle de qualidade devem estar
dentro dos intervalos aceitáveis. Se um controle
estiver fora do intervalo especificado, os resultados
do teste associado serão inválidos e as amostras
precisarão ser testadas novamente. Se os
resultados do controle de qualidade ainda estiverem
fora do intervalo especificado, entre em contato
com o Serviço de Atendimento da Mindray para
obter ajuda.
Cálculo
O analisador calcula automaticamente a
concentração de analito de cada amostra com base
na curva de calibração principal do código de barras,
e um Ajuste da curva logí stica de 4 parâmetros
(4PLC) com as unidades de luz relativas (RLUs)
geradas dos calibradores do produto em três ní veis
das concentrações definidas. Os resultados são
mostrados na unidade de mIU/mL.
Diluição
Amostras com concentrações de anti-HBs acima do
limite superior podem ser diluídas com o Diluente da
Amostra da Mindray. A diluição recomendada é1:40
(realizada manualmente ou automaticamente pelo
analisador). A concentração da amostra diluí da
deve ser > 10 IU/mL. Após a diluição manual,
multiplique o resultado pelo fator de diluição. Após a
diluição automática realizada pelo analisador, o
sistema multiplica automaticamente o resultado
pelo fator de diluição ao calcular a concentração da
amostra.
Faixa de referência
Dois tipos de kits de ensaio de anti-HBs
reconhecidos foram utilizados para selecionar 414
amostras de anti-HBs não reativas e 314 amostras
2018-10
de anti-HBs reativas. Essas amostras foram concentração de anti-HBs em dois desvios-padrão Exatidão micropartí
cula seja perdida antes do uso.
testadas pelo kit de anti-HBs no sistema Mindray acima da média de RLU de 20 medições de uma
Dois controles de veracidade com valores 7. Não érecomendável usar o pacote de reagente
CL-2000i. Os dados foram analisados com o amostra sem analito.
rastreáveis definidos de acordo com o padrão aberto a mais de 28 dias.
software de análise estatí stica (curva ROC).
314 amostras foram consideradas positivas para internacional foram usados para verificar a exatidão
A especificidade e a sensibilidade podem variar de 8. A confiabilidade dos resultados do ensaio não
anti-HBs por métodos de referência. O ensaio de desse ensaio. Os resultados mostraram que o
acordo com o valor de corte selecionado. Um ponto poderá ser garantida se as instruções no
anti-HBs da Mindray no sistema CL-2000i detectou desvio relativo foi menor que ±10%. Os resultados
de corte de 10 mIU/mL com a melhor especificidade encarte deste pacote não forem seguidas.
308 amostras como positivas e 6 amostras como estão listados na tabela a seguir.
e sensibilidade equilibradas foi determinado como o 9. Todos os espécimes e dejetos de reação devem
negativas. A taxa de coincidência positiva é
ponto de corte do kit de anti-HBs da Mindray. Anti-HBs Anti-HBs ser considerados potencialmente perigosos. As
de 98,10%. Desvio
As amostras testadas com o kit de anti-HBs no Amostra medido definido amostras e os dejetos de reação devem ser
Relativo
sistema Mindray CL2000i com uma concentração Intervalo para relatório (mIU/mL) (mIU/mL) manuseados de acordo com os regulamentos e
inferior ao ponto de corte (10 mIU/mL) são O intervalo para relatório é definido pela Ní
vel 1 21,16 20,36 3,94% diretrizes locais.
consideradas não reativas para anti-HBs; com uma sensibilidade analí
tica e o limite superior da curva Ní
vel 2 150,91 146,8 2,80% 10. A folha de dados de segurança de material
concentração maior que ou igual ao limite, são de calibração principal. A faixa de relato do kit (MSDS) estádisponível mediante solicitação.
consideradas reativas para anti-HBs. de reagentes de anti-HBs (CLIA) é Linearidade
2,0~1000,0 mIU/mL (ou o limite superior éde até Sí
mbolos Gráficos
Interpretação dos resultados 40.000 mIU/mL para amostras diluí das 40 vezes). Uma amostra com alta concentração de anti-HBs
(aproximadamente 250 mIU/mL) foi misturada com
1. As amostras com concentração de anti-HBs
Precisão uma amostra de baixa concentração (<5 mIU/mL)
<10 mIU/mL são não reativas. Essas amostras
em proporções diferentes, gerando uma série de
são considerados negativas para anti-HBs, O ensaio de anti-HBs da série CL foi projetado para diluições. O total de anti-HBs de cada diluição foi
e não precisam de mais testes. ter uma precisão de ≤10% (dentro do CV do determinado com o uso do Ensaio de anti-HBs da
2. As amostras com COI de anti-HBs ≥10 mIU/mL dispositivo). A precisão foi determinada de acordo série CL da Mindray. A linearidade foi demonstrada
são inicialmente reativas. com o ComitêNacional para Normas de Laboratórios no intervalo de 5,00 mIU/mL a 200,00 mIU/mL, o
Clínicos (NCCLS), Protocolo EP5-A24. Dois níveis de coeficiente de correlação é ≥0,9900. Os dados de
3. As amostras inicialmente reativas com controles de qualidade foram testados em duplicata linearidade estão resumidos na tabela abaixo.
concentração de anti-HBs entre 10 e em duas execuções separadas por dia, em um total
100 mIU/mL precisam ser repetidas. As de 20 dias, usando um único lote de reagentes e Anti-HBs
amostras devem ser transferidas a um tubo de 1 2 3 4 5 6
uma única curva de calibração. Os dados de (mIU/mL) Bibliografia
centrifugação e centrifugadas a ≥10.000 RCF precisão estão resumidos na tabela abaixo.
(força centrí
fuga relativa) por 10 minutos, e Esperado 1,59 53,59 106,04 164,03 219,80 276,12 1. Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P,
retestadas em duplicata. Média de Dentro Entre o Dentro do et al. Persistence of vaccine-induced antibodies
Amostra anti-HBs do CV da CV da CV do to hepatitis B surface antigen and the need for
As amostras inicialmente reativas com Medido 1,59 55,22 110,45 165,67 220,90 276,12
(mIU/mL) execução execução dispositivo booster vaccination in adult subjects. Postgrad
concentração de anti-HBs <10 mIU/mL em ambos
Controle Med J 1987; 63(S2):129-135.
os retestes são negativas para anti-HBs. 8,22 2,70% 2,15% 5,08%
negativo Comparação de métodos 2. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune
As amostras inicialmente reativas com
concentração de anti-HBs >10 mIU/mL em um dos Controle O Ensaio de Anti-HBs da série CL da Mindray foi response to hepatitis B revaccination. J Med
257,09 1,97% 3,94% 5,65% Virol 1988;24: 377-384.
retestes são repetidamente positivas para anti-HBs. positivo comparado com um kit de diagnóstico
comercialmente disponí vel em um estudo de 3. Lada O, Benhamou Y, Poynard T, et al.
As amostras várias vezes reativas, bem como as Especificidade correlação. Os dados estatí
sticos obtidos pelo modo Coexistence of hepatitis B surface antigen
amostras inicialmente reativas com concentração de computação Deming são mostrados na tabela
Hemoglobina até 500 mg/dL, bilirrubina até (Anti-HBs) and anti-HBs antibodies in chronic
≥100 mIU/mL devem ser confirmadas de acordo abaixo.
20 mg/dL, triglicérides até 1500 mg/dL e proteí na hepatitis B virus carriers: influence of “a”
com os algoritmos confirmatórios recomendados.
total até10 g/dL não vão interferir com o ensaio de Intervalo de Coeficiente determinant variants. J Virol 2006; 80:
anti-HBs da série CL. Essas substâncias mostram Intercep- 2968-2975.
Limitação de medida concentração Inclinação
tação
de
menos de 10% de interferência nas concentrações (mIU/mL) correlação 4. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
O limite superior deste ensaio éde 1.000 mIU/mL. indicadas. Precision Performance of Quantitative
Uma amostra com concentração de anti-HBs menor 0~1000 mIU/mL 1,45 1,90 0,949
O Kit de anti-HBs da Mindray foi avaliado quanto a Measurement Method; Approved Guideline –
que o limite superior pode ser quantitativamente
determinado, enquanto a amostra com uma possí veis substâncias com reação cruzada em Second Edition.
concentração mais alta do que o limite superior será indivíduos com condições médicas não relacionadas Avisos e precauções
relatado como >1.000 mIU/mL ou diluindo a à infecção por HBV. Pelo menos 5 amostras © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
contendo cada um dos patógenos potencialmente 1. Apenas para diagnóstico in vitro.
amostra com o Diluente de amostra da Mindray. Co., Ltd.
interferentes seguintes (HAV, HCV, HEV, HGV, 2. Siga todas as regras ao manusear reagentes de
A concentração de anti-HBs em uma determinada HIV-1/2, TP, EBV, RV, CMV, HSV-1, Toxo Rubella, Todos os direitos reservados
laboratório e adote as precauções de
amostra pode variar, dependendo dos sistemas de E.coli, Yeast e lentiví
rus) são testadas pelo anti-HBs segurança necessárias. Fabricante: Shenzhen Mindray Bio-Medical
medição dos fabricantes. Isso édevido a diferenças da Mindray e um método de referência. Todos os Electronics Co., Ltd.
em métodos de ensaio, calibração e especificidade resultados são consistentes no procedimento de 3. Devido às diferenças na metodologia e
do reagente. Os resultados do ensaio devem ser especificidade do anticorpo, os resultados de Endereço: Mindray building, Keji 12th Road South,
medição da Mindray e de referência.
usados em conjunto com outros dados, como teste da mesma amostra podem ser diferentes Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
sintomas, resultados de outros testes, histórico 414 amostras foram consideradas negativas para durante o uso de kits de reagentes de 518057 P.R.China
clí
nico etc. para tomar decisões clí
nicas. anti-HBs por métodos de referência. O ensaio de fabricantes diferentes no sistema da Mindray Endereço de e-mail: service@mindray.com.cn
anti-HBs da Mindray no sistema CL-2000i detectou ou com o uso de kits de reagentes da Mindray
Caracterí
sticas de desempenho 407 amostras como negativas e 7 amostras como em outros sistemas. Tel: +86-755-26582888
positivas. A taxa de coincidência negativa é Fax: +86-755-26582680
de 98,30%. 4. Não use kits de reagentes com a data de
Sensibilid.
expiração vencida.
O kit de reagente anti-HBs (CLIA) tem uma Efeito de gancho 5. Não use reagentes misturados de lotes
sensibilidade analítica de ≤2,0 mIU/mL. A
Não há nenhum efeito de gancho de dose alta em diferentes.
sensibilidade analí
tica édefinida como a mais baixa
concentração de analito que pode ser diferenciada uma concentração de anti-HBs de até 6. Sempre mantenha o pacote de reagente na
de uma amostra sem analitos. Ela émedida como a 70.000 mIU/mL. posição vertical para assegurar que nenhuma

N/P: 046-003267-00 (7.0) Português-3 Anti-HBs Página 2 de 2 2018-10


Anti-HBs
Anticuerpo contra el
antígeno de superficie de la
hepatitis B (CLIA)
Información para pedidos
N.ºde catálogo Tamaño del paquete
Anti-HBs111 2 ×50 ensayos
Anti-HBs112 2 ×100 ensayos
Uso previsto
El ensayo de anti-HBs que se realiza en la serie CL
es un inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA)
para la determinación cuantitativa del anticuerpo
contra el antígeno de superficie de la hepatitis B
(anti-HBs) en plasma o suero de origen humano.
Resumen
Después de la infección con el virus de la hepatitis B
(VHB), el antí geno de superficie del virus de la
hepatitis B (HBsAg) es el primer marcador serológico
que aparece en la sangre. El aumento de anticuerpos
contra HBsAg (anti-HBs) acompañado con una
disminución de HBsAg podrí a indicar convalecencia o
recuperación de la infección por VHB. El ensayo de
anti-HBs se suele utilizar para supervisar el estado
clí
nico de los individuos infectados con hepatitis B. La
detección de anti-HBs en un paciente asintomático
podría indicar una exposición anterior al VHB. 1
La vacuna de la hepatitis B puede estimular al sistema
inmunológico a producir anti-HBs para prevenir la
infección por VHB.1 El ensayo de anti-HBs se utiliza,
por lo general, para supervisar la eficacia de la
vacunación contra la hepatitis B. La presencia de
anti-HBs es importante para la protección contra la
infección del virus de la hepatitis B (VHB).2
Los anticuerpos contra HBsAg se generan
principalmente contra el determinante HBsAg "a".
Rara vez se detectan al mismo tiempo HBsAg con
anti-HBs, excepto en los casos de infección crónica
con cepas mutantes de escape inmune del VHB. 3
Principios del ensayo
El ensayo de anti-HBs que se realiza en la serie CL
es un ensayo de dos lugares, tipo “sándwich”, para
determinar el nivel de anticuerpos contra el
antígeno de superficie de la hepatitis B (anti-HBs).
En el primer paso, se agregan al vaso de reacción la
muestra, las micropartículas paramagnéticas
recubiertas con el antígeno de superficie de la hepatitis
B (HBsAg) y el HBsAg etiquetado con fosfatasa alcalina
(ALP). Después de la incubación, los anticuerpos contra
el antí
geno de superficie de la hepatitis B (anti-HBs) en
la muestra se unen a las micropartí culas recubiertas de
HBsAg y al HBsAg etiquetado con ALP para formar un
complejo tipo “sándwich” (micropartículas
-HBsAg-Anti-HBs-(HBsAg-ALP). Después, el vaso de
reacción se situará bajo el campo magnético. Las
micropartículas se capturan magnéticamente y las
sustancias sin unir se eliminan por lavado.
En el segundo paso, la solución de substrato se añade al
vaso de reacción. Se cataliza con ALP en el
P/N: 046-003267-00 (7.0) Español-4
inmunocomplejo capturado en las micropartí culas. La
reacción quimioluminiscente resultante se mide como
unidades de luz relativas (RLU) con el fotomultiplicador
integrado en el sistema. La cantidad de anti-HBs
presentes en la muestra es proporcional a las unidades
de luz relativas (RLU) generadas durante la reacción. La
concentración de anti-HBs se puede determinar a
través de una curva de calibración, que estáintegrada
en una curva de calibración principal codificada y en
calibradores de producto de tres niveles.
Componentes reactivos
El kit de reactivos está formado por dos
componentes: Ra y Rb. Los componentes no pueden
intercambiarse, y la información detallada de cada
componente se enumera a continuación:
Micropartí
culas paramagnéticas recubiertas
Ra con antí
genos de superficie de la hepatitis B
en amortiguador TRIS con conservante.
Antígeno de superficie de la hepatitis B
Rb etiquetado con fosfatasa alcalina en
diluyente con conservante.
La posición de cada componente se muestra en la
siguiente figura (vista delantera a la izquierda y
vista superior a la derecha):
Estabilidad de almacenamiento
El kit de reactivos anti-HBs (CLIA) sin abrir es
estable hasta la fecha de caducidad indicada en la
etiqueta cuando se almacena a entre 2 y 8 ºC. La
fecha de vencimiento real se indica en la etiqueta.
El kit de reactivo del anti-HBs (CLIA) se puede
almacenar a entre 2 y 8 ºC en el analizador y usarse
por un máximo de 28 dí as después de abierto.
Preparación del reactivo
Ra: Listo para usar
Rb: Listo para usar
Materiales necesarios, pero no
suministrados
Analizador para inmunoensayo de
quimioluminiscencia serie CL de Mindray
N.º Cat. Anti-HBs211: Calibradores de anti-HBs,
1 x 2 ml para cada nivel de calibrador C0, C1 y C2
N.º Cat. Anti-HBsN311: Control negativo de
anti-HBs, 3 x 2 ml
N.º Cat. Anti-HBsN312: Control negativo de
anti-HBs, 6 x 2 ml
N.ºCat. Anti-HBsP311: Control positivo de anti-HBs,
3 x 2 ml
N.ºCat. Anti-HBsP312: Control positivo de anti-HBs,
6 x 2 ml
N.ºCat. CS511: Solución de sustrato, 4 x 115 ml
N.ºCat. WB411: Amortiguador de lavado; 1 x 10 l
Vaso de reacción
Anti-HBs Página 1 de 2
Sistema del instrumento
Analizador para inmunoensayo
quimioluminiscencia serie CL de Mindray
de
Preparación y obtención de muestras
Se recomienda suero humano para este ensayo.
Centrifugue la muestra a 3500 rpm durante un
mí nimo de 10 minutos después de completada la
formación del coágulo. La muestra se debe analizar
con la mayor brevedad posible después de su
obtención y el tratamiento preanalí tico. Realice el
análisis de la muestra dentro de las dos horas
posteriores a la centrifugación. Si el análisis no se
completa en un lapso de 8 horas, transfiera el
sobrenadante a tubos para su almacenamiento. Las
muestras deberán cerrarse perfectamente y
refrigerarse a entre 2 y 8 ºC. Si el análisis se retrasa
durante más de 14 dí as, las muestras deben
congelarse a -20 ºC o a una temperatura inferior.
Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación
que puedan causar el deterioro de la muestra. La
muestra se puede usar después de un máximo de cinco
ciclos de congelación y descongelación.
No utilice muestras en las siguientes condiciones:
 inactivadas con calor
 muy hemolizadas
 con contaminación microbiana evidente
 con fibrinas u otros restos celulares visibles
Procedimiento de ensayo
Para obtener resultados óptimos con este ensayo, los
operadores deben leer detenidamente el manual de
funcionamiento del sistema para informarse bien
sobre las instrucciones de funcionamiento, el control
y la conservación de las muestras, las precauciones
de seguridad y el mantenimiento. Prepare también
todos los materiales necesarios para el ensayo.
Antes de introducir el kit de reactivo del anti-HBs en el
instrumento por primera vez, el frasco de reactivo sin
abrir debe invertirse suavemente al menos 30 veces
para volver a suspender las micropartí culas que se
hayan asentado durante el enví o o almacenamiento.
Inspeccione visualmente el frasco para confirmar que
las micropartículas queden completamente
homogéneas. Si las micropartí culas permanecen
adheridas al frasco, continúe invirtiéndolo hasta que
se mezclen por completo. Si las micropartí culas no se
pueden homogeneizar, se recomienda no usar ese
frasco de reactivo. Póngase en contacto con el
servicio de atención al cliente de Mindray. No vuelque
los frascos de reactivo abiertos.
Para este ensayo se necesita una muestra con un
volumen de 50 μl para una sola prueba. Este
volumen no incluye el volumen muerto del
contenedor de la muestra. Si se realizan más
análisis de la misma muestra, se necesita un
volumen adicional. Los operadores deben consultar
el manual de funcionamiento del sistema y el
requisito especí
fico del ensayo para determinar el
volumen mí nimo de muestra.
Calibración
El anti-HBs que se realiza en la serie CL ha sido
calibrado conforme al Segundo estándar
internacional de anticuerpos anti-HBs de la OMS
(Código NIBSC: 07/164).
La información especí fica de la curva de calibración
principal del kit de reactivos de anti-HBs se
almacena en el código de barras bidimensional
adherido al paquete de reactivos. Se usa junto con
calibradores de producto para la calibración del lote
de reactivos especí fico. Cuando se realiza la
calibración, en primer lugar, escanee la información
de la curva de calibración principal del código de
barras en el sistema y, a continuación, use los
calibradores de producto de tres niveles. Antes de
realizar cualquier prueba de anti-HBs, es necesario
obtener una curva de calibración válida. Se
recomienda repetir la calibración cada 4 semanas,
cuando se use un nuevo lote de reactivos o cuando
los controles de calidad no se ajusten a los
intervalos de valores especificados. Para obtener
instrucciones detalladas de la calibración, consulte
el manual de funcionamiento del sistema.
Control de calidad
Se recomienda que los controles de calidad se
ejecuten cada 24 horas si las pruebas están en uso
o después de cada calibración. La frecuencia del
control de calidad se debe adaptar a los requisitos
individuales de cada laboratorio. Los dos niveles de
controles de calidad recomendados para este
ensayo son control negativo de anti-HBs y control
positivo de anti-HBs de Mindray.
Los resultados de los controles de calidad deben
ajustarse a los intervalos admisibles. Si un control
se encuentra fuera del intervalo especificado, los
resultados de la prueba asociada no serán válidos y
las muestras deberán volver a analizarse. Es posible
que se deba realizar otra calibración. Consulte el
manual de funcionamiento para revisar el sistema
de ensayo. Si los resultados de los controles de
calidad siguen sin ajustarse al intervalo especificado,
póngase en contacto con el servicio de atención al
cliente de Mindray.
Cálculo
El analizador calcula automáticamente la
concentración de analitos de cada muestra a partir
de la lectura de la curva de calibración principal en el
código de barras, y una función logí stica de 4
parámetros (4PLC) con las unidades de luz relativas
(RLU) generadas desde los calibradores de producto
de tres niveles de las concentraciones definidas. Los
resultados se muestran en unidades de mIU/ml.
Dilución
Las muestras con concentraciones de anti-HBs que
superen el lí mite superior se pueden diluir con el
diluyente de muestras de Mindray. La dilución
recomendada es de 1:40 (ya sea manual o automática
mediante el analizador). La concentración de la
muestra diluida debe ser > 10 IU/ml. Después de la
dilución manual, multiplique el resultado por el factor
de dilución. Después de que los analizadores realizan
la dilución automática, el sistema automáticamente
multiplica el resultado por el factor de dilución cuando
calcula la concentración de la muestra.
Intervalo de referencia
Se utilizaron dos tipos de kits reconocidos de ensayo
de anti-HBs para seleccionar 414 muestras anti-HBs
no reactivas y 314 muestras anti-HBs reactivas. Estas
2018-10
muestras se analizaron utilizando el kit de anti-HBs que no contiene analitos. Se mide como la negativa es 98,30%. 4. No use kits de reactivos con la fecha de
en el sistema CL-2000i de Mindray. Los datos se concentración de anti-HBs con las dos desviaciones caducidad vencida.
analizaron con software de análisis estadí stico (curva estándares superiores a la media de RLU calculada Efecto gancho
5. No use reactivos mezclados de distintos lotes.
ROC). La especificidad y la sensibilidad pueden variar con 20 mediciones de una muestra sin analitos. No se observóningún efecto gancho de alta dosis a
de acuerdo con el valor de corte seleccionado. Para el 6. Mantenga el paquete de reactivos siempre en
314 muestras han resultado ser anti-HBs positivas una concentración de anti-HBs de hasta posición vertical para garantizar que no se
kit de anti-HBs de Mindray, se determinóun valor de 70,000 mIU/ml.
según los métodos de referencia. El ensayo de pierdan micropartículas antes de su uso.
corte de 10 mIU/ml con la especificidad y sensibilidad
anti-HBs realizado en el sistema CL-2000i de
más equilibradas. Exactitud 7. No se recomienda usar paquetes de reactivos
Mindray detectó 308 muestras positivas y
Las muestras probadas con el kit anti-HBs del abiertos más de 28 dí
as.
6 muestras negativas. El índice de coincidencia Se usaron dos controles con valores trazables
sistema CL2000i de Mindray con una concentración positiva es 98,10%. definidos conforme al estándar internacional para 8. La fiabilidad de los resultados del ensayo no se
inferior al corte (10 mIU/ml) se consideran anti-HBs verificar la precisión de este ensayo. Los resultados puede garantizar si no se siguen las
no reactivas; con una concentración mayor o igual Intervalo posible demostraron que la desviación relativa era inferior a instrucciones de este prospecto.
al corte, se consideran anti-HBs reactivas. El intervalo de notificación se define por la sensibilidad ±10%. Los resultados se enumeran en la siguiente 9. Los residuos de las reacciones y las muestras
analítica y el límite superior de la curva de calibración tabla. deben tratarse como riesgos biológicos
Interpretación de los resultados principal. El intervalo de notificación del kit de reactivos potenciales. Las muestras y los residuos de las
Anti-HBs Anti-HBs
1. Las muestras con concentración de anti-HBs de anti-HBs (CLIA) es de entre 2 y 1000 mIU/ml (o el Desviación reacciones deben manejarse en cumplimiento
Muestra medido definido
<10 mIU/ml se consideran no reactivas. Estas lí
mite superior puede llegar hasta 40,000 mIU/ml para Relativa de las normativas y directrices locales.
(mIU/ml) (mIU/ml)
muestras se consideran negativas para el muestras diluidas 40 veces). 10. La hoja de datos de seguridad de los materiales
anti-HBs, y no se requiere la realización de más Nivel 1 21.16 20.36 3,94% (MSDS) estádisponible previa solicitud.
análisis. Precisión Nivel 2 150.91 146.8 2,80%
2. Las muestras con concentración de anti-HBs El ensayo de anti-HBs que se realiza en la serie CL Sí
mbolos gráficos
≥10 mIU/ml son inicialmente reactivas. está diseñado para una precisión de ≤10 % Linealidad
(conforme al CV del dispositivo). La precisión se Una muestra con alta concentración de anti-HBs
3. Las muestras inicialmente reactivas con una determinó siguiendo los estándares del protocolo
concentración de anti-HBs de entre 10 y (aproximadamente, 250 mIU/ml) se mezcló con
EP5-A24 del National Committee for Clinical una muestra de baja concentración (<5 mIU/ml) en
100 mIU/ml tienen que volver a analizarse. Las Laboratory Standards (NCCLS). Se probaron dos
muestras deben transferirse a un tubo de diferentes proporciones, y se generaron una serie
niveles de controles de calidad en duplicado en dos de diluciones. El anti-HBs total de cada dilución se
centrifugado y centrifugarse a ≥10,000 RCF series independientes por dí a, durante un total de
(fuerza centrí
fuga relativa) durante 10 minutos, calculóusando el ensayo de anti-HBs que se realizó
20 dí as, usando un único lote de reactivo y una en la serie CL de Mindray. Se demostró que la
y volver a analizarse dos veces. curva de calibración. Los datos de precisión se linealidad se ajustaba al intervalo de 5.00 mIU/ml a
Las muestras inicialmente reactivas con una resumen en la siguiente tabla. 200 mIU/ml, y el coeficiente de correlación r es
concentración de anti-HBs <10 mIU/ml en ambos ≥0.9900. Los datos de linealidad se resumen en la
Conforme
análisis son negativas para anti-HBs. Media de CV Conforme siguiente tabla.
Muestra anti-HBs
al
Ejecución al CV del
Bibliografí
a
Las muestras inicialmente reactivas con una Ejecución Anti-HBs
(mIU/ml) del CV dispositivo 1. Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P,
concentración de anti-HBs >10 mIU/ml en del CV 1 2 3 4 5 6
(mIU/ml) et al. Persistence of vaccine-induced antibodies
cualquiera de los análisis son repetidamente Control
Valor to hepatitis B surface antigen and the need for
positivas para anti-HBs. 8.22 2,70% 2,15% 5,08%
negativo 1.59 53.59 106.04 164.03 219.80 276.12 booster vaccination in adult subjects. Postgrad
previsto de
Las muestras repetidamente reactivas, asícomo las Control Med J 1987; 63(S2):129-135.
muestras inicialmente reactivas con una 257.09 1,97% 3,94% 5,65% Valor
positivo 1.59 55.22 110.45 165.67 220.90 276.12 2. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune
concentración ≥ 100 mIU/ml deben confirmarse medido de
response to hepatitis B revaccination. J Med
según los algoritmos de confirmación recomendados. Especificidad Virol 1988;24: 377-384.
Comparación de métodos
Las concentraciones de hemoglobina de hasta 3. Lada O, Benhamou Y, Poynard T, et al.
Lí
mite de la medición El ensayo de anti-HBs que se realizóen la serie CL
500 mg/dl, bilirrubina de hasta 20 mg/dl, Coexistence of hepatitis B surface antigen
El lí
mite superior de este ensayo es de 1000 mIU/ml. de Mindray se comparó con un kit de diagnóstico (anti-HBs) and anti-HBs antibodies in chronic
triglicéridos de hasta 1500 mg/dl y proteí
na total de
Una muestra con una concentración de anti-HBs disponible comercialmente en un estudio de hepatitis B virus carriers: influence of “a”
hasta 10 g/dl no interfieren con el ensayo de
inferior al lí
mite superior puede determinarse en correlación. Los datos estadí
sticos obtenidos por el determinant variants. J Virol 2006; 80:
anti-HBs que se realiza en la serie CL. Estas
términos cuantitativos, mientras que la muestra con modo de cálculo Deming se muestran en la 2968-2975.
sustancias muestran interferencias inferiores al
una concentración mayor al lí mite superior se siguiente tabla.
10 % en las concentraciones indicadas. 4. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, N•o. 25, Evaluation of
registra como >1000 mIU/ml o se diluyen las Intervalo de Coeficiente
El kit anti-HBs de Mindray se evaluó en busca de Precision Performance of Quantitative
muestras con diluyente para muestras Mindray. concentración Pendiente Origen de
sustancias que pudieran causar una reactividad Measurement Method; Approved Guideline –
La concentración de anti-HBs en una muestra dada cruzada potencial, en individuos con afecciones (mIU/ml) correlación Segunda edición.
puede variar, según los sistemas de medición de los médicas no relacionadas con la infección del VHB. 0~1000 mIU/ml 1.45 1.90 0.949
fabricantes. Esto se debe a las diferencias en los Con el ensayo de anti-HBs de Mindray y un método © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
métodos de ensayo, la calibración y la especificidad de referencia, se probaron al menos 5 muestras,
del reactivo. Los resultados de los ensayos deberán
Advertencias y precauciones Co., Ltd.
cada una de las cuales contení a los siguientes
usarse junto con otros datos, como sí ntomas, patógenos con posibilidad de interferir: VHA, VHC, 1. Exclusivo para uso diagnóstico in vitro. Todos los derechos reservados
resultados de otros análisis, historia clínica, etc., VHE, VHG, VIH-1/2, TP, VEB, RV, CMV, VHS-1, 2. Siga todas las reglas para manipular los Fabricante: Shenzhen Mindray Bio-Medical
para tomar decisiones clí nicas. toxoplasmosis, rubeola, E. coli, levadura y lentivirus. reactivos de laboratorio y tome todas las Electronics Co., Ltd.
Todos los resultados son coherentes tanto en el precauciones de seguridad necesarias.
Caracterí
sticas de rendimiento Dirección: Mindray building, Keji 12th Road South,
procedimiento de medición de referencia como en el 3. Debido a las diferencias de metodologí a y la Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
sistema de Mindray. especificidad de los anticuerpos, los resultados
Sensibilidad 518057 P.R.China
414 muestras han resultado ser anti-HBs negativas de los ensayos de la misma muestra pueden
El kit de reactivos de anti-HBs (CLIA) tiene una ser diferentes si se usan kits de reactivos de Dirección de correo electrónico:
según los métodos de referencia. El ensayo de
sensibilidad analítica de ≤2 mIU/ml. La sensibilidad otros fabricantes en el sistema Mindray o si se service@mindray.com.cn
anti-HBs realizado en el sistema CL-2000i de
analítica se define como la concentración más baja Mindray detectó 407 muestras negativas y usan kits de reactivos Mindray en otros Tel.: +86-755-26582888
de analitos que puede diferenciarse de una muestra 7 muestras positivas. El índice de coincidencia sistemas.
Fax: +86-755-26582680

P/N: 046-003267-00 (7.0) Español-4 Anti-HBs Página 2 de 2 2018-10


Anti-HBs
Anticorpo anti-antigene di
superficie dell'epatite B
(CLIA)
Informazioni per gli ordini
Numero di Dimensione della
catalogo confezione
Anti-HBs111 2×50 test
Anti-HBs112 2×100 test
Uso designato
Il dosaggio per Anti-HBs serie CL èun immunodosaggio
chemiluminescente (CLIA) per la determinazione
quantitativa dell'anticorpo per l'antigene di superficie
dell'epatite B (Anti-HBs) nel plasma o nel siero umani.
Riepilogo
Dopo l'infezione da virus dell'epatite B (HBV),
l'antigene di superficie dell'epatite B (HBsAg) è il
primo marker sierologico a comparire nel sangue.
L'aumento dell'anticorpo anti-HBsAg (anti-HBs)
accompagnato da una riduzione dell'HBsAg
potrebbero indicare la convalescenza o il recupero
dal virus dell'epatite B. Il dosaggio per anti-HBs è
spesso utilizzato per monitorare lo stato clinico di
individui infetti da epatite B. Il rilevamento di
anti-HBs in un soggetto asintomatico può indicare
precedente esposizione all'HBV1.
Il vaccino contro l'epatite B puòstimolare il sistema
immunitario a produrre l'anti-HBs per la
prevenzione dell'infezione da HBV.1 Il dosaggio per
anti-HBs è comunemente utilizzato per monitorare
l'efficacia della vaccinazione contro l'epatite B.
La presenza di anti-HBs è importante per la
protezione dal virus dell'epatite B (HBV) 2.
L'anticorpo anti-HBsAg è principalmente generato
contro il determinante "a" dell'HBsAg HBsAg è
raramente rilevato in concomitanza con anti-HBs,
tranne che nei casi di escape mutant immunitari di
HBV nel corso dell'infezione cronica3.
Principio del dosaggio
Il dosaggio per Anti-HBs serie CL è un dosaggio
sandwich a due siti per la determinazione del livello
dell'anticorpo anti-antigene superficiale dell'epatite
B (anti-HBs).
Nella prima fase, il campione, le microparticelle
paramagnetiche rivestite con antigene di superficie
dell'epatite B (HBsAg) e HBsAg marcato con
fosfatasi alcalina (ALP) sono aggiunti in un
contenitore di reazione. Dopo l'incubazione,
anticorpo anti-antigene di superficie dell'epatite B
(anti-HBs) nel campione si lega all'HBsAg rivestito
sulle microparticelle e HBsAg marcato con ALP
formano il complesso a sandwich (microparticelle -
HBsAg-anti -HbS- (HbsAg-ALP). In seguito, il
contenitore di reazione viene collocato sotto il
campo magnetico. Le microparticelle sono catturate
magneticamente mentre le sostanze non legate
sono rimosse mediante lavaggio.
Nella seconda fase, nel recipiente di reazione viene
aggiunta la soluzione substrato. Viene è catalizzato
P/N: 046-003267-00 (7.0) Italiano-5
dall'ALP nell'immunocomplesso catturato sulle
microparticelle. La reazione chemiluminescente
risultante viene misurata come unità relative di luce
(RLU) da un fotomoltiplicatore integrato nel sistema. La
quantità di Anti-HBs presente nel campione è
proporzionale alle unitàrelative di luce (RLU) generate
durante la reazione. È possibile determinare la
concentrazione anti-HBs tramite una curva di
calibrazione, costruita su una curva di calibrazione
master codificata e calibratori di prodotto a tre livelli.
Componenti del reagente
Il kit di reagenti ècomposto da due componenti: RA
e Rb. Il componente non puòessere scambiato e le
informazioni dettagliate di ciascun componente
sono riportate di seguito:
Microparticelle paramagnetiche rivestite
Ra con antigeni di superficie dell'epatite B in
tampone TRIS con conservante.
Antigene di superficie dell'epatite B
Rb
marcato con fosfatasi alcalina in diluente
con conservante.
La posizione di ciascun componente èillustrata nella
figura seguente (vista frontale a sinistra e vista
dall'alto a destra):
Stabilità di conservazione
Il reagente per anti-HBs (CLIA) rimane stabile fino
alla data di scadenza indicata sull'etichetta con fiala
sigillata conservata a una temperatura di 2~8 °C, la
data di scadenza effettiva èriportata sull'etichetta.
Il kit di reagenti per Anti-HBs (CLIA) può essere
conservato nel dispositivo a 2~8 °C e utilizzato per
un massimo di 28 giorni dopo l'apertura.
Preparazione del reagente
Ra: Pronto per l'uso
Rb: Pronto per l'uso
Materiale necessario ma non fornito
Analizzatore per immunodosaggio
chemiluminescente Mindray serie CL
N. cat. Anti-HBs211: Calibratori per Anti-HBs,
1×2,0 ml per ciascun livello del calibratore C0, C1 e
C2
N. cat. Anti-HBsN311: Controllo negativo per
Anti-HBs - 3×2,0 ml
N. cat. Anti-HBsN312: Controllo negativo per
Anti-HBs, 6×2,0 ml
N. cat. Anti-HBsP311: Controllo positivo per
Anti-HBs, 3×2,0 ml
N. cat. Anti-HBsP312: Controllo positivo per
Anti-HBs, 6×2,0 ml
N. cat. CS511: Soluzione substrato, 4×115 ml
N. cat. WB411: Tampone di lavaggio, 1X10 l
Contenitore di reazione
Sistema dello strumento
Anti-HBs Pagina 1 di 2
Analizzatore per immunodosaggio
chemiluminescente Mindray serie CL
Prelievo e preparazione dei campioni
Per questo dosaggio si consigliano campioni di siero
umano. Centrifugare il campione a 3500 giri/min per
almeno 10 minuti dopo l'avvenuta formazione di
coaguli. Il campione deve essere testato il prima
possibile una volta effettuato il prelievo e prima del
trattamento analitico. Testare il campione entro due
ore dopo la centrifugazione. Se l'analisi non viene
eseguita entro 8 ore, trasferire il supernatante in
provette per la conservazione. Chiudere
ermeticamente il campione e refrigerarlo a 2~8 °C.
Se l'analisi viene ritardata per più di 14 giorni,
congelare i campioni a -20 ºC o a temperatura
inferiore.
Evitare di ripetere i cicli di congelamento e
scongelamento che potrebbero causare
deterioramento del campione. Il campione può
essere utilizzato dopo al massimo cinque cicli di
congelamento e scongelamento.
Non utilizzare il campione nelle seguenti condizioni:
 disattivati con calore
 emolizzati grossolanamente
 evidente contaminazione microbica
 fibrina o altri corpi estranei cellulari visibili
Procedura di dosaggio
Per garantire le prestazioni ottimali di questo
dosaggio, gli operatori sono tenuti a leggere
attentamente il relativo manuale operativo del
sistema per ottenere informazioni sufficienti
riguardanti istruzioni d'uso, trattamento e
conservazione del campione, precauzioni di
sicurezza e manutenzione. Preparare inoltre tutti i
materiali necessari per il dosaggio.
Prima di caricare per la prima volta il kit di reagenti
per Anti-HBs sullo strumento, è necessario
capovolgere delicatamente il flacone di reagente
sigillato per almeno 30 volte in modo da
risospendere le microparticelle depositatesi durante
la spedizione o la conservazione. Ispezionare
visivamente il flacone per assicurarsi che le
microparticelle siano omogenee. Se le
microparticelle rimangono attaccate al flacone,
continuare a capovolgerlo finché non sono
completamente mescolate. Se non è possibile
rendere omogenee le microparticelle, si consiglia di
non utilizzare il flacone di reagente. Contattare il
servizio clienti Mindray per ricevere assistenza. Non
capovolgere il flacone di reagente aperto.
Questo dosaggio richiede 50 μl in volume di
campione per un singolo test. Tale volume non
comprende il volume morto del contenitore del
campione. Quando si realizzano ulteriori test sullo
stesso campione, è necessario un volume
supplementare. Gli operatori sono tenuti a fare
riferimento al manuale operativo del sistema e ai
requisiti specifici del dosaggio per stabilire il volume
minimo del campione.
Calibrazione
L'anti-HBs della serie CL èstato calibrato rispetto al
2nd International Standard anti-HBs antibody
dell'OMS (codice NIBSC: 07/164).
Le informazioni specifiche relative alla curva di
calibrazione master del kit di reagenti per Anti-HBs
sono contenute nel codice a barre bidimensionale
allegato alla confezione dei reagenti. È utilizzato
insieme ai calibratori del prodotto per la calibrazione
del lotto di reagenti specifico. Durante la calibrazione,
effettuare una scansione del codice a barre
contenente le informazioni relative alla curva di
calibrazione master e successivamente utilizzare i
calibratori di prodotto a tre livelli. Prima di qualsiasi
test per Anti-HBs èrichiesta una curva di calibrazione
valida. Si consiglia la ricalibrazione ogni 4 settimane,
oppure quando si utilizza un nuovo lotto di reagenti o
i controlli qualità non rientrano negli intervalli
specificati. Per istruzioni dettagliate sulla calibrazione,
consultare il manuale operativo del sistema.
Controllo qualità
Si raccomanda di eseguire i controlli qualità una
volta ogni 24 ore se i test sono in uso, o dopo ogni
calibrazione. La frequenza del controllo qualitàdeve
essere adattato ai requisiti del singolo laboratorio. I
due livelli consigliati di controlli qualitativi per
questo dosaggio sono Controllo negativo per
Anti-HBs e Controllo positivo per Anti-HBs Mindray.
I risultati del controllo qualitàdevono rientrare negli
intervalli accettabili. Se un controllo non rientra nel
suo intervallo specificato, i risultati del test associati
non sono validi e il campione deve essere
nuovamente testato. Se i risultati del controllo
qualità non rientrano ancora nell'intervallo
specificato, contattare il servizio clienti Mindray per
ricevere assistenza.
Calcolo
L'analizzatore calcola automaticamente la
concentrazione di analita in ogni campione sulla
base della curva di calibrazione master letta dal
codice a barre e un adeguamento alla curva logistica
a 4 parametri (4PLC) con le unità relative di luce
(RLU) generate dai calibratori di prodotto a tre livelli
delle concentrazioni definite. I risultati sono indicati
in miU/ml.
Diluizione
I campioni con concentrazioni di anti-HBs al di sopra del
limite superiore possono essere diluiti con il diluente
campione Mindray. La diluizione consigliata è di 1:40
(eseguita automaticamente dall'analizzatore o
manualmente). La concentrazione del campione diluito
deve essere >10 iU/ml. Al termine della diluizione
manuale, moltiplicare il risultato per il fattore di
diluizione. Al termine della diluizione eseguita
automaticamente dall'analizzatore, il sistema moltiplica
automaticamente il risultato per il fattore di diluizione
durante il calcolo della concentrazione del campione.
Intervallo di riferimento
Sono stati utilizzati due tipi di kit per dosaggio per
anti-HBs riconosciti per selezionare 414 campioni di
anti-HBs non reattivo e 314 campioni reattivi
anti-HBs. I campioni sono stati testati mediante il kit
per anti-HBs sul sistema Mindray CL-2000i. I dati
sono stati analizzati mediante il software per l'analisi
statistica (curva ROC). La specificità e la sensibilità
possono variare in base al valore di cut-off
selezionato. Un cut-off di 10 miU/ml con specificitàe
sensibilitàmigliori bilanciate èstato determinati come
cut-off del kit per anti-HBs Mindray.
I campioni analizzati con il kit per anti-HBs sul
sistema CL2000i Mindray con una concentrazione
inferiore al cut-off (10 miU/ml) sono considerati non
2018-10
reattivi per anti-HBs; con una concentrazione
maggiore o uguale a cut-off, sono considerati
reattivi per anti-HBs.
Interpretazione dei risultati
1. I campioni con una concentrazione di anti-HBs
<10 miU/ml sono Non reattivi. Tali campioni
sono considerati negativi per Anti-HBs e non
sono necessarie ulteriori analisi.
2. I campioni con una concentrazione di anti-HBs
≥10 miU/ml sono Inizialmente reattivi.
3. I campioni Inizialmente reattivi con
concentrazione di anti-HBs tra 10 e 100 devono
essere testati nuovamente. I campioni devono
essere trasferiti in una provetta per centrifuga
ed essere centrifugati una forza centrifuga
relativa (Relative Centrifugal Force, RCF)
≥10.000 per 10 minuti, quindi ritestati in
duplicato.
I campioni Inizialmente reattivi con
concentrazione di anti-HBs <10 miU/ml in entrambi
i test ripetuti sono negativi per l'anticorpo anti-HBs.
I campioni Inizialmente reattivi con una
concentrazione di anti-HBs >10 miU/ml in entrambi
i nuovi test sono Ripetutamente positivi per
l'anti-HBs.
I campioni ripetutamente reattivi e quelli
Inizialmente reattivi con una concentrazione ≥100
miU/ml devono essere confermati secondo le
modalitàpreviste dagli algoritmi di conferma.
Limitazione della misurazione
Il limite superiore di questo dosaggio è1000 miU/ml.
Un campione con una concentrazione di anti-HBs
inferiore al limite superiore puòessere determinato
in maniera quantitativa, mentre un campione con
una concentrazione superiore al limite superiore
sarà segnalato come >1.000 miU/ml o diluendo i
campioni con il diluente campione Mindray.
La concentrazione di anti-HBs in un determinato
campione puòvariare a seconda dei produttori dei
sistemi di misura. Èdovuta alle differenze di metodi
di dosaggio, calibrazione e specificitàdei reagenti. I
risultati del dosaggio vanno utilizzati insieme ad altri
dati, quali sintomi, risultati di altre analisi, anamnesi
clinica, ecc. per prendere le decisioni cliniche.
Caratteristiche di rendimento
Sensibilità
Il kit di reagenti per Anti-HBs (CLIA) ha una
sensibilità analitica ≤2,0 miU/ml. La sensibilità
analitica èdefinita come la concentrazione minima
di analita che può essere differenziata da un
campione privo di analita. È definita come la
concentrazione di anti-HBs a due deviazioni
standard superiori al valore RLU medio da 20
misurazioni di campione privo di analita.
314 campioni sono stati dichiarati positivi per anti-HBs
dai metodi di riferimento. Il dosaggio per anti-HBs
Mindray sul sistema CL-2000i ha rilevato 308 campioni
come positivi e 6 campioni come negativi.
La coincidenza di risultati positivi èdel 98,10%.
Intervallo segnalabile
L'intervallo segnalabile è definito dalla sensibilità
analitica e dal limite superiore della curva di
calibrazione master. L'intervallo segnalabile del kit Linearità
di reagenti per anti-HBs (CLIA) è 2,0 ~1000,0
Un campione di Anti-HBs ad alta concentrazione
miU/ml (o il limite superiore èfino a 40.000 miU/ml
(circa 250 miU/ml) è stato miscelato con un
per 40 volte i campioni diluiti).
campione a bassa concentrazione (<5 miU/ml) con
rapporti diversi per generare una serie di diluizioni.
Precisione L'Anti-HBs totale di ciascuna diluizione è stato
Il dosaggio per anti-HBs della serie CL èprogettato determinato utilizzando il dosaggio per Anti-HBs
per garantire una precisione ≤10% (CV serie CL Mindray. La linearità è stata dimostrata
intra-dispositivo). La precisione èstata determinata nell’intervallo da 5,00 miU/ml a 200,00 miU/ml, il
seguendo il protocollo EP5-A2 del National coefficiente di correlazione r è ≥0,9900. I dati sulla
linearitàsono riepilogati nella tabella seguente.
Committee for Clinical Laboratory Standards
Bibliografia
(NCCLS)4. I due livelli di controlli qualitàsono stati Valore
testati in duplicato in due cicli separati al giorno, per Anti-HBs 1 2 3 4 5 6 1. Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P,
un totale di 20 giorni, utilizzando un singolo lotto di (miU/ml) et al. Persistence of vaccine-induced antibodies
reagenti e una singola curva di calibrazione. I dati to hepatitis B surface antigen and the need for
sulla precisione sono riepilogati nella tabella di CT 1,59 53,59 106,04 164,03 219,80 276,12 booster vaccination in adult subjects. Postgrad
seguito. Med J 1987; 63(S2):129-135.
Media CV CV tra CT 1,59 55,22 110,45 165,67 220,90 276,12 2. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune
CV inter-
Campione anti-HBs durante cicli response to hepatitis B revaccination. J Med
dispositivo
(miU/ml) il ciclo diversi Virol 1988;24: 377-384.
una
Controllo Metodo di confronto 3. Lada O, Benhamou Y, Poynard T, et al.
8,22 2,70% 2,15% 5,08%
negativo Il dosaggio per Anti-HBs serie CL Mindray è stato Coexistence of hepatitis B surface antigen
confrontato con un kit diagnostico disponibile in (Anti-HBs) and anti-HBs antibodies in chronic
Controllo hepatitis B virus carriers: influence of “a”
257,09 1,97% 3,94% 5,65% commercio durante uno studio di correlazione. I dati
positivo determinant variants. J Virol 2006; 80:
statistici ottenuti tramite il metodo di elaborazione
2968-2975.
Deming sono riportati nella tabella di seguito.
Specificità Intervallo di 4. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
L'emoglobina fino a 500 mg/dl, la bilirubina fino a 20 Intercet- Coefficiente di Precision Performance of Quantitative
concentrazione Pendenza
mg/dl, i trigliceridi fino a 1500 mg/dl e la proteina tazione correlazione Measurement Method; Approved Guideline –
(miU/ml)
totale fino a 10 g/dl non interferiranno con il Second Edition.
dosaggio per Anti-HBs serie CL. Tali sostanze 0~1000 miU/ml 1,45 1,90 0,949
mostrano interferenze inferiori al 10% alle © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
concentrazioni indicate. Precauzioni e avvertenze Co., Ltd.
Il kit per Anti-HBs Mindray è stato valutato per la 1. Solo per uso diagnostico in vitro. Tutti i diritti riservati
presenza di sostanze a potenziale reattivitàcrociata
2. Seguire tutte le regole riguardanti la Produttore: Shenzhen Mindray Bio-Medical
da persone con condizioni mediche non correlate
manipolazione dei reagenti di laboratorio e Electronics Co., Ltd.
all’infezione da HBV. Almeno 5 campioni, ciascuno
adottare le necessarie precauzioni di sicurezza. Indirizzo: Mindray Building, Keji 12th Road South,
contenente un patogeno potenzialmente causa di
interferenza tra quelle qui indicate (HAV, HCV, HEV, 3. A causa delle differenze nella metodologia e Hi-tech Industrial Park, Nanshan, ShenZhen
HGV, HIV-1/2, TP, EBV, RV, CMV, HSV-1, Toxo, nella specificitàdell'anticorpo, i risultati del test 518057, Cina
Rubella E.coli, lieviti e lentivirus), sono stati testati dello stesso campione possono essere differenti Indirizzo e-mail: service@mindray.com.cn
con il dosaggio per anti-HBs Mindray e un metodo di quando si utilizzano kit di reagenti di produttori
Tel: +86-755-26582888
riferimento. Tutti i risultati sono coerenti con la diversi sul sistema Mindray, oppure quando si
procedura di misurazione Mindray e di riferimento. usano i kit di reagenti Mindray su altri sistemi. Fax: +86-755-26582680
414 campioni sono stati dichiarati negativi per 4. Non utilizzare i kit di reagenti dopo la data di
anti-HBs dai metodi di riferimento. Il dosaggio per scadenza.
anti-HBs Mindray sul sistema CL-2000i ha rilevato 407 5. Non miscelare reagenti di lotti diversi.
campioni come negativi e 7 campioni come positivi.
6. Mantenere sempre la confezione del reagente in
La coincidenza di risultati negativi èdel 98,30%.
posizione eretta per evitare la perdita di
microparticelle prima dell'uso.
Effetto a gancio
7. Non si consiglia l'utilizzo di una confezione di
Non vi èalcun effetto a gancio a dose elevata a una reagente aperta da oltre 28 giorni.
concentrazione di anti-HBs fino a un massimo di
8. L'affidabilità dei risultati del dosaggio non può
70.000 miU/ml.
essere garantita se non si seguono le istruzioni
del presente foglietto illustrativo.
Accuratezza
9. Tutti i campioni e i rifiuti della reazione sono da
Sono stati utilizzati due controlli di veridicità con considerarsi come potenzialmente a rischio
valori tracciabili rispetto allo standard biologico. I campioni e i rifiuti della reazione
internazionale per verificare l'accuratezza di questo devono essere manipolati in conformità alle
dosaggio. I risultati hanno mostrato una deviazione normative e linee guida locali.
relativa inferiore a ±10%. I risultati sono riportati
nella tabella seguente. 10. La scheda sulla sicurezza dei materiali (MSDS) è
disponibile su richiesta.
Valore Valore
anti-HBs Anti-HBs Relativo
Campione Simboli grafici
misurato definito Deviazione
(miU/ml) (miU/ml)
Livello 1 21,16 20,36 3,94%
Livello 2 150,91 146,8 2,80%

P/N: 046-003267-00 (7.0) Italiano-5 Anti-HBs Pagina 2 di 2 2018-10

 bulunan Anti-HBs miktarı, reaksiyon sırasında Mindray CL Serisi Kemilüminesans İmmünolojik ana kalibrasyon eğrisi bilgilerini tarayarak sisteme

Anti-HBs üretilen bağıl ışık birimleri (RLU'lar) ile orantılıdır.

Anti-HBs konsantrasyonu; kodlanmış bir Ana
Kalibrasyon Eğrisi ve üç düzeyli ürün kalibratörleri
Tayin Analizörü

Numune Alma ve Hazırlama

aktarın ve sonra üç düzeyli ürün kalibratörlerini
kullanın. Herhangi bir Anti-HBs testinden önce
geçerli kalibrasyon eğrisi gerekir. Her 4 haftada bir
Hepatit B Yüzey Antijeni ile elde edilen bir kalibrasyon eğrisi yoluyla veya yeni bir reaktif lotu kullanılırken ya da kalite
Bu tayin için insan serumu önerilir. Pıhtı oluşumu
Antikoru (CLIA) belirlenebilir.
tamamlandıktan sonra numuneyi 3500 rpm'de
kontrolleri belirtilen aralıklar dışında olduğunda
yeniden kalibrasyon önerilir. Kalibrasyonla ilgili
minimum 10 dakika boyunca santrifüjleyin. ayrıntılı talimatlar için sistem kullanım kılavuzuna
Reaktif Bileşenleri Numune, numune alındıktan ve analiz öncesi başvurun.
Sipariş Bilgileri Reaktif kiti iki bileşenden oluşmaktadır: Ra ve Rb. işlemden sonra en kısa sürede test edilmelidir.
Katalog No. Ambalaj Boyutu Bileşenler birbiriyle değiştirilemez; aşağıda her Numuneyi santrifügasyondan sonra iki saat içinde
bileşenle ilgili ayrıntılı bilgi verilmiştir: test edin. Test 8 saat içinde tamamlanmazsa üst fazı
Kalite Kontrol
Anti-HBs111 2×50 test
saklamak için tüplere aktarın. Numune kapağı sıkıca Testler kullanımdaysa her 24 saatte bir veya her
Anti-HBs112 2×100 test Koruyucu içeren TRIS tamponu içinde kapatılarak 2~8°C'de soğutulmalıdır. Test 14 kalibrasyondan sonra kalite kontrollerinin
Ra hepatit B yüzey antijeniyle kaplı günden uzun süreyle ertelenecekse çalıştırılması önerilir. Kalite kontrol sıklığı her
paramanyetik mikropartiküller. numuneler -20°C veya daha düşük bir sıcaklıkta laboratuvarın kendi özel gereksinimlerine göre
Kullanım Amacı
Koruyucu iç eren seyreltici içinde alkalen dondurulmalıdır. uyarlanmalıdır. Bu tayin için önerilen iki kalite
CL Serisi Anti-HBs tayini, insan serumu ya da Rb
fosfataz ile işaretli hepatit B yüzey antijeni. kontrol düzeyi Mindray Anti-HBs Negatif Kontrol ve
plazmasında hepatit B yüzey antijeni antikorunun Numunede bozulmaya neden olabilecek tekrarlı
Anti-HBs Pozitif Kontroldür.
(Anti-HBs) kantitatif tayinine yönelik bir Her bir bileşenin pozisyonu aşağıdaki şekilde dondurma ve çözdürme döngülerinden kaçının.
Kemilüminesans İmmünolojik Tayindir (CLIA). gösterilmektedir (solda önden görünüm ve sağda Numune en fazla beş dondurma ve çözdürme Kalite kontrol sonuçları kabul edilebilir aralıklar
üstten görünüm): döngüsünden sonra kullanılabilir. dahilinde olmalıdır. Bir kontrol belirtilen aralığının
dışındaysa ilişkili test sonuçları geçersiz olur ve
Özet Aşağıdaki özellikleri taşıyan numuneleri kullanmayın:
numunelerin yeniden test edilmesi gerekir. Kalite
Hepatit B virüsü (HBV) enfeksiyonundan sonra  ısıyla inaktive edilmiş kontrol sonuçları halen belirtilen aralık dışındaysa
kanda görünen ilk serolojik belirteçHepatit B yüzey  kabaca hemolize edilmiş yardım için lütfen Mindray Müşteri Hizmetleri ile
antijenidir (HBsAg). HBsAg antikoru (anti-HBs) iletişime geçin.
düzeyindeki artış ile birlikte görülen HBsAg  açık şekilde mikrobiyal kontaminasyona maruz
düzeyindeki azalma, nekahete veya HBV kalmış
Hesaplama
enfeksiyonunda iyileşmeye işaret edebilir. Anti-HBs  gözle görünür fibrin veya başka hücre kalıntıları
tayini genellikle Hepatit B ile enfekte kişilerin klinik içeren Analizör her bir numunenin analit
durumunu izlemek için kullanılır. Asemptomatik bir Saklama Stabilitesi konsantrasyonunu, barkoddan okunan ana
kişide anti-HBs saptanması, kişinin daha önce kalibrasyon eğrisine ve tanımlanan konsantrasyon
Açılmamış Anti-HBs (CLIA) reaktif kiti, 2~8°C'de Tayin Prosedürü değerlerindeki üç düzeyli ürün kalibratörlerinden
HBV'ye maruz kalmış olduğunu gösterebilir 1. saklandığında etikette belirtilen son kullanma
Bu tayinden en iyi performansın alınabilmesi için oluşturulan bağıl ışık birimleri (RLU'lar) ile 4
Hepatit B aşısı, bağışıklık sistemini uyararak HBV tarihine kadar stabildir. Gerçek son kullanma tarihi
operatörler ilgili sistem kullanım kılavuzunu dikkatle Parametreli Lojistik Eğri Uydurmaya (4PLC) dayalı
enfeksiyonunu önlemek için anti-HBs üretmesini etiket üzerinde belirtilmektedir.
okuyarak kullanım talimatları, numunenin olarak otomatik olarak hesaplar. Sonuçlar mIU/ml
sağlayabilir.1Anti-HBs tayini, Hepatit B aşısının Anti-HBs (CLIA) reaktif kiti cihaz üzerinde 2~8°C'de muhafazası ve yönetimi, güvenlik önlemleri ve birimi cinsinden gösterilir.
etkililiğini izlemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. saklanabilir ve açıldıktan sonra en fazla 28 gün bakım gibi konularda yeterli bilgi edinmelidir. Tayin
Anti-HBs varlığı, Hepatit B virüsü (HBV) süreyle kullanılabilir.
enfeksiyonundan korunma için önemlidir 2.
için gerekli tüm malzemeleri de hazırlayın. Seyreltme
Anti-HBs reaktif kitini cihaza ilk kez yüklemeden Anti-HBs konsantrasyonları üst sınırı aşan
HBsAg antikoru esas olarak HBsAg'nin "a" Reaktiflerin Hazırlanması önce açılmamış reaktif şişesini en az 30 kez yavaşça numuneler, Mindray Numune Seyreltici ile
determinantına karşı üretilir. Kronik enfeksiyon baş aşağı çevirerek nakliye veya saklama sırasında
Ra: Kullanıma hazır seyreltilebilir. Önerilen seyreltme oranı 1:40'tır
sırasında HBV immün kaçak mutantları hariç olmak çökelen mikropartikülleri yeniden süspansiyon
üzere HBsAg nadiren Anti-HBs ile aynı anda birlikte Rb: Kullanıma hazır (analizörle otomatik olarak veya manuel olarak).
haline getirin. Şişeyi görsel olarak incelemek Seyreltilmiş numunenin konsantrasyonu > 10 IU/ml
saptanır3. suretiyle mikropartiküllerin homojen bir hale olmalıdır. Manuel seyreltme işleminden sonra
Gereken fakat temin edilmeyen geldiğinden emin olun. Mikropartiküller şişeye sonucu seyreltme faktörüyle çarpın. Analizörlerle
Tayin Prensipleri malzemeler yapışmış halde kalıyorsa mikropartiküller tamamen otomatik seyreltme yapıldıktan sonra sistem,
CL Serisi Anti-HBs tayini, hepatit B yüzey antijeni karışana kadar baş aşağı çevirmeye devam edin. numune konsantrasyonunu hesaplarken sonucu
Mindray CL Serisi Kemilüminesans İmmünolojik
antikorunun (Anti-HBs) düzeyini belirlemeye Mikropartiküller homojen bir hale getirilemiyorsa bu otomatik olarak seyreltme faktörüyle çarpar.
Tayin Analizörü
yönelik iki bölgeli bir sandviçtayindir. reaktif şişesinin kullanılmaması önerilir. Yardım için
Kat. No. Anti-HBs211: Anti-HBs Kalibratörleri, Mindray Müşteri Hizmetleri ile iletişime geçin. Açık
İlk adımda numune, hepatit B yüzey antijeni (HBsAg) kalibratör C0, C1 ve C2'nin her bir düzeyi için
Referans Aralığı
bir reaktif şişesini baş aşağı çevirmeyin.
ile kaplı paramanyetik mikropartiküller ve alkalen 1×2,0 ml 414 Anti-HBs reaktif olmayan numuneyi ve 314
fosfataz (ALP) ile işaretli HBsAg bir reaksiyon kabına Bu tayinde, tek bir test için 50 μL numune hacmi
Anti-HBs reaktif numuneyi seçmek için iki farklı tür
eklenir. İnkübasyondan sonra numunedeki hepatit B Kat. No. Anti-HBsN311: Anti-HBs Negatif Kontrol gerekir. Bu hacim, numune kabının ölü hacmini
tanınan Anti-HBs tayin kiti kullanılmıştır. Bu
yüzey antijeni antikoru (Anti-HBs); mikropartiküller 3×2,0 ml içermez. Aynı numuneden ek testler yaparken ilave
numuneler Mindray CL-2000i sisteminde Anti-HBs
üzerine kaplı HBsAg'ye ve ALP ile işaretli HBsAg'ye hacim gerekir. Operatörler, minimum numune
Kat. No. Anti-HBsN312: Anti-HBs Negatif Kontrol, kiti kullanılarak test edilmiştir. Veriler, istatistiksel
bağlanarak sandviç kompleks oluşturur 6×2,0 ml hacmini belirlemek için sistem kullanım kılavuzuna
analiz yazılımı kullanılarak analiz edilmiştir (ROC
(Mikropartiküller -HBsAg-Anti-HBs-(HBsAg-ALP). ve tayine özgü gereksinimlere başvurmalıdır.
Kat. No. Anti-HBsP311: Anti-HBs Pozitif Kontrol, eğrisi). Spesifite ve sensitivite seçilen Kesme
Daha sonra reaksiyon kabı manyetik alanın altına değerine bağlı olarak değişiklik gösterebilir. En iyi
3×2,0 ml
yerleştirilir. Mikropartiküller manyetik olarak Kalibrasyon dengeli spesifite ve sensitiviteye sahip 10
yakalanırken diğer bağlı olmayan maddeler Kat. No. Anti-HBsP312: Anti-HBs Pozitif Kontrol, mIU/ml'lik bir Kesme Değeri, Mindray Anti-HBs
CL Serisi Anti-HBs, WHO 2. Uluslararası Standardı
yıkamayla uzaklaştırılır. 6×2,0 ml kitinin Kesme Değeri olarak belirlenmiştir.
Anti-HBs Antikoru (NIBSC Kodu: 07/164)
İkinci adımda, substrat çözeltisi reaksiyon kabına Kat. No. CS511: Substrat Çözeltisi, 4×115 ml standardına göre kalibre edilmiştir. Mindray CL2000i sisteminde Anti-HBs kiti
ilave edilir. Mikropartiküllerin üzerinde yakalanan Kat. No. WB411: Yıkama Tamponu, 1×10 l kullanılarak test edilen ve konsantrasyonu kesme
Anti-HBs reaktif kitinin ana kalibrasyon eğrisine
immün komplekste ALP tarafından katalize edilir. ilişkin spesifik bilgiler reaktif paketine eklenen iki değerinden (10 mIU/ml) daha düşük olan
Ortaya çıkan kemilüminesans reaksiyonu, sisteme Reaksiyon Kabı
boyutlu barkodda saklanır. Spesifik reaktif lotunun numuneler Anti-HBs reaktif değil olarak
entegre edilmiş bir fotomultiplikatör ile bağıl ışık kalibrasyonu için ürün kalibratörleri ile birlikte değerlendirilir; kesme değerine eşit veya daha
birimleri (RLU'lar) cinsinden ölçülür. Numune içinde Cihaz Sistemi kullanılır. Kalibrasyonu yaparken önce barkoddaki yüksek bir konsantrasyona sahip olan numuneler

P/N: 046-003267-00 (7.0) Türkçe-6 Anti-HBs Sayfa 1 / 2 2018-10

ise Anti-HBs reaktif olarak değerlendirilir. 2,0~1000,0 mIU/ml'dir (veya 40 kat seyreltilmiş Doğrusallık Grafiksel Semboller
numuneler için üst sınır en fazla
Yüksek konsantrasyonda bir Anti-HBs numunesi
Sonuçların Yorumlanması 40.000 mIU/ml'dir).
(yaklaşık 250 mIU/ml) düşük konsantrasyonda bir
1. Anti-HBs konsantrasyonu < 10 mIU/ml olan numune (< 5 mIU/ml) ile farklı oranlarda
Hassasiyet karıştırılarak bir dizi dilüsyon üretilmiştir. Her bir
numuneler Reaktif Değildir. Bu numuneler
anti-HBs için negatif olarak değerlendirilir ve ek CL Serisi Anti-HBs tayini, hassasiyeti ≤ %10 (cihaz dilüsyonun Anti-HBs düzeyi Mindray CL Serisi
test gerektirmez. içi CV) olacak şekilde tasarlanmıştır. Hassasiyet, Anti-HBs Tayini kullanılarak belirlenmiştir.
Klinik Laboratuvar Standartları Ulusal Komitesi Doğrusallık 5,00 mIU/ml ila 200,00 mIU/ml
2. Anti-HBs konsantrasyonu ≥ 10 mIU/ml olan aralığında gösterilmiştir, korelasyon katsayısı r,
(NCCLS) Protokolü EP5-A2 dikkate alınarak
numuneler Başlangıçta Reaktiftir. belirlenmiştir4. İki kalite kontrolü seviyesi, tek bir ≥ 0,9900'dür. Doğrusallık verileri aşağıdaki tabloda
3. Anti-HBs konsantrasyonu 10 ile 100 mIU/ml reaktif lotu ve tek bir kalibrasyon eğrisi kullanılarak, özetlenmektedir.
arasında olan Başlangıçta Reaktif numunelerin toplam 20 gün boyunca gün başına iki ayrı
çalışmada iki kopya halinde test edilmiştir. Anti-HBs
yeniden test edilmesi gerekir. Numunelerin bir 1 2 3 4 5 6
santrifüj tüpüne alınarak ≥ 10.000 RCF'de Hassasiyet verileri aşağıdaki tabloda
(mIU/ml) Bibliyografya
(Bağıl Santrifügal Kuvvet) 10 dakika boyunca özetlenmektedir. 1. Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P,
Beklenen 1,59 53,59 106,04 164,03 219,80 276,12
santrifüjlenmesi ve tekrarlı olarak yeniden test et al. Persistence of vaccine-induced antibodies
edilmesi gerekir. Ortalama to hepatitis B surface antigen and the need for
Çalışma Çalışma Cihaz
Numune Anti-HBs Ölçülen 1,59 55,22 110,45 165,67 220,90 276,12 booster vaccination in adult subjects. Postgrad
Her iki yeniden testte de anti-HBs konsantrasyonu içi CV arası CV içi CV
(mIU/ml) Med J 1987; 63(S2):129-135.
< 10 mIU/ml olan Başlangıçta Reaktif numuneler
Negatif
anti-HBs için negatiftir. 8,22 2.70% 2.15% 5.08% Yöntem Karşılaştırması 2. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune
Kontrol
response to hepatitis B revaccination. J Med
Yeniden testlerin herhangi birinde anti-HBs Mindray CL Serisi Anti-HBs Tayini, bir korelasyon
Pozitif Virol 1988;24: 377-384.
konsantrasyonu > 10 mIU/ml olan Başlangıçta 257,09 1.97% 3.94% 5.65% çalışmasında piyasadan elde edilebilen bir tanı
Kontrol
Reaktif numuneler anti-HBs için Tekrarlı Pozitiftir. kitiyle karşılaştırılmıştır. Deming hesaplaması 3. Lada O, Benhamou Y, Poynard T, et al.
kullanılarak elde edilen istatistiksel veriler aşağıdaki Coexistence of hepatitis B surface antigen
Tekrarlı reaktif numuneler ve konsantrasyonu Spesifite
tabloda gösterilmektedir. (Anti-HBs) and anti-HBs antibodies in chronic
≥ 100 mIU/ml olan Başlangıçta Reaktif numuneler
500 mg/dl'ye kadar hemoglobin, 20 mg/dl'ye kadar hepatitis B virus carriers: influence of "a"
önerilen doğrulama algoritmalarına göre
bilirubin, 1500 mg/dl'ye kadar trigliseridler ve Konsantrasyon Korelasyon determinant variants. J Virol 2006;
doğrulanmalıdır. Eğim Kesen
10 g/dl'ye kadar total protein CL Serisi Anti-HBs Aralığı (mIU/ml) Katsayısı 80: 2968-2975.
tayinine etki etmez. Bu maddeler, belirtilen 0~1000 mIU/ml 1,45 1,90 0,949 4. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
Ölçüm Sınırlaması
konsantrasyonlarda %10'dan az enterferans Precision Performance of Quantitative
Bu tayinin üst sınırı 1000 mIU/ml'dir. Üst sınırdan göstermektedir. Measurement Method; Approved Guideline –
daha düşük anti-HBs konsantrasyonuna sahip Uyarı ve Önlemler
Mindray Anti-HBs kiti, HBV enfeksiyonuyla ilişkili Second Edition.
numune kantitatif olarak belirlenebilirken üst sınırın 1. Sadece in vitro diagnostik kullanım içindir.
olmayan tıbbi rahatsızlıkları bulunan kişilerden
üzerinde bir konsantrasyona sahip olan bir numune >
alınan potansiyel çapraz reaktif maddeler açısından 2. Laboratuvar reaktiflerinin kullanımı sırasında © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
1000 mIU/ml olarak rapor edilir veya numuneler
değerlendirilmiştir. Potansiyel olarak enterferansa tüm kurallara uyun ve gerekli güvenlik Co., Ltd.
Mindray Numune Seyreltici ile seyreltilir.
neden olan patojenlerin her birini içeren en az önlemlerini alın.
Belirli bir numunedeki anti-HBs konsantrasyonu, 5 numune (HAV, HCV, HEV, HGV, HIV-1/2, TP, EBV, Tüm hakları saklıdır
3. Metodoloji ve antikor spesifitesindeki
üreticinin ölçüm sistemlerine bağlı olarak değişiklik RV, CMV, HSV-1, Toxo Rubella, E.coli, Mantar ve Üretici: Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
farklılıklar nedeniyle, farklı üreticilerin reaktif
gösterebilir. Bu durum tayin yöntemleri, kalibrasyon lentivirüs) Mindray Anti-HBs ve bir referans yöntem Co., Ltd.
kitleri Mindray sisteminde kullanıldığında veya
ve reaktif spesifitesi farklılıklarından ile test edilir. Tüm sonuçlar hem Mindray, hem de
Mindray reaktifleri başka sistemlerde Adres: Mindray building, Keji 12th Road South,
kaynaklanmaktadır. Klinik kararlar alınırken tayin referans ölçüm prosedüründe tutarlılık
kullanıldığında, aynı numunenin test sonuçları Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen,
sonuçları diğer verilerle (semptomlar, diğer testlerin göstermektedir.
farklı olabilir. 518057 Çin
sonuçları, klinik hikaye vs.) birlikte
Referans yöntemler kullanılarak 414 numunenin
değerlendirilerek kullanılmalıdır. 4. Reaktif kitlerini, son kullanma tarihinden sonra E-posta Adresi: service@mindray.com.cn
Anti-HBs negatif olduğu ileri sürülmüştür. CL-2000i
kullanmayın.
sisteminde Mindray Anti-HBs tayini kullanılarak Tel: +86-755-26582888
Performans Özellikleri 407 numune negatif, 7 numune ise pozitif olarak 5. Farklı reaktif lotlarından karıştırılmış reaktifleri
Faks: +86-755-26582680
bulunmuştur. Negatif tesadüf oranı %98,30'dur. kullanmayın.
Sensitivt. 6. Kullanım öncesi hiçbir mikropartikül
Anti-HBs (CLIA) reaktif kitinin analitik duyarlılığı Hook Etkisi kaybedilmemesini sağlamak için reaktif
≤ 2,0 mIU/ml'dir. Analitik duyarlılık, hiç analit 70,000 mIU/ml'ye kadar Anti-HBs paketini her zaman dik pozisyonda tutun.
içermeyen bir numuneden ayırt edilebilen en düşük konsantrasyonlarında yüksek doz hook etkisi 7. 28 günden fazla açık kalmış reaktif paketinin
analit konsantrasyonu olarak tanımlanır. Analit bulunmamaktadır. kullanılmaması önerilir.
içermeyen bir numunenin 20 ölçümünden elde
edilen ortalama RLU değerinin üzerinde çıkan iki 8. Bu prospektüsteki talimatlara uyulmadığı
Doğruluk takdirde tayin sonuçlarının güvenilirliği garanti
standart sapmadaki Anti-HBs konsantrasyonu
olarak ölçülür. Bu tayinin doğruluğunu teyit etmek için Uluslararası edilemez.
Standarda izlenebilir tanımlı değerlere sahip iki
Referans yöntemler kullanılarak 314 numunenin 9. Tüm numune ve reaksiyon atıkları potansiyel
gerçeklik kontrolü kullanılmıştır. Sonuçlar, bağıl
anti-HBs pozitif olduğu ileri sürülmüştür. CL-2000i olarak biyolojik tehlikeli madde kabul
sapmanın ±%10'dan küçük olduğunu göstermiştir.
sisteminde Mindray Anti-HBs tayini kullanılarak edilmelidir. Numuneler ve reaksiyon atıkları
Sonuçlar aşağıdaki tabloda listelenmektedir.
308 numune pozitif, 6 numune ise negatif olarak yerel düzenlemelere ve yönetmeliklere uygun
bulunmuştur. Pozitif tesadüf oranı %98,10'dur. Ölçülen Tanımlanan olarak işlenmelidir.
Bağıl
Numune Anti-HBs Anti-HBs 10. Madde Güvenliği Veri Sayfası (MSDS) istek
Sapma
Rapor Edilebilir Aralık (mIU/ml) (mIU/ml) üzerine temin edilir.
Rapor edilebilir aralık, ana kalibrasyon eğrisinin üst Seviye 1 21,16 20,36 3.94%
sınırı ve analitik duyarlılık ile tanımlanır. Anti-HBs Seviye 2 150,91 146,8 2.80%
(CLIA) reaktif kitinin rapor edilebilir aralığı

P/N: 046-003267-00 (7.0) Türkçe-6 Anti-HBs Sayfa 2 / 2 2018-10


Anti-HBs
Anticorps anti-antigène
de surface de l'hépatite B
(CLIA)
Informations de commande
N°de référence Taille du paquet
Anti-HBs111 2×50 tests
Anti-HBs112 2×100 tests
Usage prévu
Le dosage d'anti-HBs série CL est un dosage
immunologique par chimiluminescence (CLIA) pour
la détermination quantitative des anticorps
anti-antigène de surface de l'hépatite B (Anti-HBs)
dans le sérum ou le plasma humain.
Résumé
Après l'infection par le virus de l'hépatite B (VHB),
l'antigène de surface de l'hépatite B (HBsAg) est le
premier marqueur sérologique àapparaî tre dans le
sang. L'augmentation des anticorps anti-HBsAg
(anti-HBs) accompagnée d'une diminution de
l'HBsAg peut indiquer une convalescence ou une
récupération de l'infection par le VHB. Le dosage
d'anti-HBs est souvent utilisé pour surveiller l'état
clinique des patients infectés par l'hépatite B. La
détection d'anticorps anti-HBs chez une personne
asymptomatique peut indiquer une précédente
exposition au VHB. 1
Le vaccin contre l'hépatite B peut stimuler le système
immunitaire de sorte qu'il produise des anti-HBs en
prévention de l'infection par le VHB1. Le dosage
d'anti-HBs est couramment utilisé pour surveiller
l'efficacité de la vaccination contre l'hépatite B. La
présence d'anticorps anti-HBs est importante pour la
protection contre le virus de l'hépatite B (VHB)2.
Les anticorps anti-HBsAg sont principalement générés
contre le déterminant HBsAg «a ». L'HBsAg est
rarement détectéavec des anticorps anti-HBs en même
temps, sauf pour des mutations d'échappement
immunes au VHB lors d'une infection chronique3.
Principes du dosage
Le dosage d'anti-HBs série CL est un dosage en
sandwich en deux étapes pour déterminer le niveau des
anticorps anti-antigène de surface de l'hépatite B.
Dans une première étape, l'échantillon, des
microparticules paramagnétiques recouvertes
d'antigène de surface de l'hépatite B (HBsAg) et
l'HBsAg marquéàla phosphatase alcaline (PhoA) sont
ajoutés dans une cuve de réaction. Après l'incubation,
les anticorps anti-antigène de surface de l'hépatite B
(anti-HBs) dans l'échantillon se lient à l'HBsAg
recouvrant les microparticules et l'HBsAg marquéàla
PhoA pour former le complexe en sandwich
(microparticules-HBsAg-Anti-HBs-(HBsAg-PhoA)). Par
la suite, la cuve de réaction (le récipient de réaction)
sera placée sous le champ magnétique. Les
microparticules sont magnétiquement capturées
tandis que d'autres substances non liées sont
éliminées par lavage.
Dans la deuxième étape, la solution de substrat est
Réf.: 046-003267-00 (7.0) Français-7
ajoutée dans le récipient de réaction. Elle est
catalysée par la PhoA du complexe immun capturé
sur les microparticules. La réaction
chimiluminescence résultante est mesurée en unités
relatives de lumière (RLU) par un photomultiplicateur
intégréau système. La quantitéd'anti-HBs présente
dans l'échantillon est proportionnelle aux unités
relatives de lumière (RLU) produites au cours de la
réaction. La concentration d'anti-HBs peut être
déterminée au moyen d'une courbe d'étalonnage, qui
repose sur une courbe de calibration principale
encodée et trois niveaux de calibrateurs de produit.
Composants du réactif
Le kit de réactif est composéde deux éléments: Ra
et Rb. Le composant ne peut pas être remplacé, et
les informations détaillées de chaque composant
sont indiquées ci-dessous:
Microparticules paramagnétiques
recouvertes d'antigène de surface de
Ra
l'hépatite B dans un tampon TRIS avec
conservateur.
Antigène de surface de l'hépatite B
Rb
marquéàla phosphatase alcaline dans un
diluant avec conservateur.
La position de chaque composant est représentée
sur la figure ci-dessous (vue avant sur la gauche et
vue de dessus àdroite):
Stabilité de stockage
Le kit de réactif d'anti-HBs (CLIA) non ouvert est
stable jusqu'à la date de péremption indiquée sur
l'étiquette lorsqu'il est conservéà2~8 °C. La date
de péremption est indiquée sur l'étiquette.
Le kit de réactif d'anti-HBs (CLIA) peut être
conservé à bord à 2~8 °C et utilisé pendant
28 jours maximum après ouverture.
Préparation du réactif
Ra: prêt àl'emploi
Rb: prêt àl'emploi
Matériel nécessaire mais non fourni
Analyseur de dosage immunologique
chimiluminescence Mindray série CL
N° de réf. anti-HBs211: calibrateurs d'anti-HBs,
1×2,0 ml pour chacun des niveaux de calibrateurs
C0, C1 et C2
N° de réf. anti-HBsN311: contrôle négatif
d'anti-HBs, 3×2,0 ml
N° de réf. anti-HBsN312: contrôle négatif
d'anti-HBs, 6×2,0 ml
N° de réf. d'anti-HBsP311: contrôle positif
d'anti-HBs, 3×2,0 ml
N° de réf. d'anti-HBsP312: contrôle positif
d'anti-HBs, 6×2,0 ml
N°de réf. CS511: solution de substrat, 4×115 ml
N°de réf. WB411: tampon de lavage, 1x10 l
Anti-HBs Page 1 sur 2
Cuve de réaction
de Système de l'instrument
Analyseur de dosage immunologique
chimiluminescence Mindray série CL
par
Prélèvement et préparation des
échantillons
Le sérum humain est recommandépour ce dosage.
Centrifugez l'échantillon à 3 500 tr/min pendant un
minimum de 10 minutes après la formation du caillot.
L'échantillon doit être testédès que possible après le
prélèvement et le traitement pré-analytique. Testez
l'échantillon dans les deux heures suivant la
centrifugation. Si le test n'est pas effectuédans les
8 heures, transférez le surnageant dans des tubes de
stockage. L'échantillon doit être hermétiquement
fermé et réfrigéré à 2~8 °C. Si le test doit être
retardé pendant plus de 14 jours, les échantillons
doivent être congelés à-20 °C ou moins.
Evitez les cycles de gel et de dégel sous peine de
détériorer les échantillons. Les échantillons peuvent
être utilisés après un maximum de cinq cycles de gel
et de dégel.
N'utilisez pas les échantillons présentant les
caractéristiques suivantes:
 Inactivés par la chaleur
 Grossièrement hémolysés
 Contamination microbienne évidente
 Fibrine ou autres débris cellulaires visibles
Procédure du dosage
Pour des performances optimales de ce dosage, les
opérateurs doivent lire attentivement le manuel
d'utilisation du système concerné afin d'obtenir
suffisamment d'informations, telles que les
instructions de fonctionnement, la préservation et la
gestion des échantillons, les précautions de sécurité
et la maintenance. Préparez également tout le
matériel requis pour le test.
Avant de charger le kit de réactif d'anti-HBs sur
l'instrument pour la première fois, retournez
délicatement le flacon de réactif non ouvert au
moins 30 fois pour remettre en suspension les
microparticules qui se sont déposées pendant le
transport ou le stockage. Inspectez visuellement le
flacon pour vous assurer que les microparticules ont
été homogénéisées. Si les microparticules restent
collées au flacon, continuez àle retourner jusqu'àce
que les microparticules soient complètement
mélangées. Si les microparticules ne peuvent pas
par
être homogénéisées, il est recommandéde ne pas
utiliser ce flacon de réactif. Contactez le service
clientèle de Mindray pour obtenir de l'aide. Ne pas
retourner un flacon de réactif ouvert.
Ce dosage nécessite 50 μl de volume d'échantillon
pour un seul test. Ce volume ne comprend pas le
volume mort du récipient d'échantillon. Un volume
supplémentaire est nécessaire lors de l'exécution de
tests supplémentaires du même échantillon. Les
opérateurs doivent se référer au manuel
d'utilisation du système et aux exigences
spécifiques du dosage afin de déterminer le volume
d'échantillon minimal.
Etalonnage
L'anti-HBs série CL a été calibré selon la 2e norme
internationale de l'OMS relative aux anticorps
anti-HBs (code NIBSC: 07/164).
Les informations spécifiques de la courbe de calibration
principale du kit de réactif d'anti-HBs sont enregistrées
dans le code àbarres àdeux dimensions apposésur la
cartouche de réactif. Elles sont utilisées avec les
calibrateurs de produit pour calibrer le lot de réactif
spécifique. Lors de la calibration, commencez par
numériser les informations de la courbe de calibration
principale du code à barres dans le système, puis
utilisez les calibrateurs de produit àtrois niveaux. Une
courbe d'étalonnage valide est nécessaire avant tout
test d'anti-HBs. Une nouvelle calibration est
recommandée toutes les 4 semaines, quand un
nouveau lot de réactif est utiliséou quand les contrôles
qualité sont hors des plages spécifiées. Pour des
instructions détaillées sur la calibration, reportez-vous
au manuel d'utilisation du système.
Contrôle de qualité
Il est recommandéque les contrôles qualitésoient
exécutés une fois toutes les 24 heures si les tests
sont utilisés, ou après chaque calibration. La
fréquence du contrôle qualitédoit être adaptée aux
exigences individuelles de chaque laboratoire. Les
contrôles qualitéàdeux niveaux recommandés pour
ce dosage sont le contrôle négatif d'anti-HBs et le
contrôle positif d'anti-HBs Mindray.
Les résultats du contrôle qualitédoivent être dans les
plages acceptables. Si un contrôle est hors de la plage
spécifiée, les résultats de test associés ne sont pas
valides et les échantillons doivent être testés ànouveau.
Si les résultats du contrôle qualitésont toujours hors de
la plage spécifiée, veuillez contacter le service clientèle
de Mindray pour obtenir de l'aide.
Calcul
L'analyseur calcule automatiquement la
concentration en analyte de chaque échantillon sur la
courbe de calibration principale lue àpartir du code à
barres, et un modèle logistique àquatre paramètres
(4PLC) avec les unités relatives de lumière (RLU) est
généré à partir des calibrateurs de produit à trois
niveaux de concentrations déterminées. Les résultats
sont présentés dans l'unitémIU/ml.
Dilution
Les échantillons présentant une concentration en
anti-Hbs dépassant la limite supérieure peuvent être
dilués àl'aide du diluant pour échantillons Mindray. Une
dilution (automatisée par l'analyseur ou manuelle) au
1:40 est recommandée. La concentration de
l'échantillon dilué doit être > 10 IU/ml. Après une
dilution manuelle, multipliez le résultat par le facteur de
dilution. Après une dilution automatisée par les
analyseurs, le système multiplie automatiquement le
résultat par le facteur de dilution lors du calcul de la
concentration de l'échantillon.
Plage de référence
Deux types de kits de dosage d'anti-HBs reconnus ont
été utilisés pour sélectionner 414 échantillons
d'anti-HBs non réactifs et 314 échantillons d'anti-HBs
réactifs. Ces échantillons ont été testés avec le kit
anti-HBs Mindray CL-2000i. Les données ont été
analysées avec un logiciel d'analyse statistique
(courbe ROC). La spécificitéet la sensibilitépeuvent
varier en fonction de la valeur limite sélectionnée. La
valeur limite du kit d'anti-HBs Mindray avec le
meilleur équilibre entre spécificitéet sensibilitéa été
fixée à10 IU/ml.
2018-10
Les échantillons testés avec le kit d'anti-HBs sur le Plage rapportable Anti-HBs Anti-HBs conformément aux directives et règlements
système Mindray CL2000i à une concentration Ecart locaux.
La plage rapportable est définie par la sensibilité Echantillon mesuré défini
inférieure àla valeur limite (10 IU/ml) sont considérés relatif
analytique et la limite supérieure de la courbe de (mIU/ml) (mIU/ml) 10. La fiche d'information sur la sécuritédu matériel
comme non réactifs àl'anti-HBs ; si la concentration (FDSM) est disponible sur demande.
calibration principale. La plage rapportable du kit de Niveau 1 21,16 20,36 3,94%
est supérieure ou égale à la valeur limite, ils sont
réactif d'anti-HBs (CLIA) est 2,0~1 000,0 mIU/ml
considérés comme réactifs àl'anti-HBs. Niveau 2 150,91 146,8 2,80%
(ou la limite supérieure peut atteindre Symboles graphiques
jusqu'à40 000 mIU/ml pour les échantillons dilués
Interprétation des résultats 40 fois). Linéarité
1. Les échantillons avec une concentration d'anti-HBs Un échantillon d'anti-HBs à haute concentration
< 10 mIU/ml sont non réactifs. Ces échantillons Précision (environ 250 mIU/ml) a été mélangé à un
sont considérés comme négatifs pour l'anti-HBs et Le dosage d'anti-HBs série CL est conçu pour avoir échantillon à faible concentration (< 5 mIU/ml) à
ne nécessitent pas d'autres tests. une précision ≤ 10 % (CV dans l'appareil). La des rapports différents, générant ainsi une série de
2. Les échantillons avec une concentration d'anti-HBs précision a été déterminée en suivant le dilutions. La quantitétotale en anti-HBs de chaque
≥ 10 mIU/ml sont initialement réactifs. protocole EP5-A2 du Comité national pour les dilution a été déterminée à l'aide du dosage
normes de laboratoire cliniques (NCCLS) 4. Deux d'anti-HBs Mindray série CL. La linéarité a été
3. Les échantillons initialement réactifs avec une
niveaux de contrôles qualité ont été testés en démontrée dans la plage de 5,00 mIU/ml à
concentration d'anti-HBs comprise entre 10 et
double dans deux séries distinctes par jour, sur 200,00 mIU/ml, et le coefficient de corrélation r est
100 mIU/ml doivent être testés à nouveau. Les
un total de 20 jours, en utilisant un seul lot de ≥ 0,9900. Les données de linéarité sont résumées
échantillons doivent être transférés vers un tube à
centrifuger et centrifugés à ≥ 10 000 FCR (force réactifs et une courbe de calibration unique. Les dans le tableau ci-dessous. Bibliographie
centrifuge relative) pendant 10 minutes, puis à données de précision sont résumées dans le tableau Anti-HBs 1. Ambrosch F, Frisch-Niggemeyer W, Kremsner P,
ci-dessous. 1 2 3 4 5 6
nouveau testés en double. (mIU/ml) et al. Persistence of vaccine-induced antibodies
CV au Prévu 1,59 53,59 106,04 164,03 219,80 276,12 to hepatitis B surface antigen and the need for
Les échantillons initialement réactifs avec une Anti-HBs CV entre
Echan- sein CV dans booster vaccination in adult subjects. Postgrad
concentration d'anti-HBs < 10 mIU/ml dans les moyen les Mesuré 1,59 55,22 110,45 165,67 220,90 276,12
tillon d'une l'appareil Med J 1987; 63(S2):129-135.
deux tests répétés (tests de confirmation) sont (mIU/ml) analyses
négatifs pour l'anti-HBs. analyse 2. Jilg W, Schmidt M, Deinhardt F. Immune
Méthode de comparaison response to hepatitis B revaccination. J Med
Les échantillons initialement réactifs avec une Contrôle
8,22 2,70% 2,15% 5,08% Le dosage d'anti-HBs Mindray série CL a été Virol 1988;24: 377-384.
concentration d'anti-HBs > 10 mIU/ml dans l'un des négatif
comparéàun kit de diagnostics disponible dans le 3. Lada O, Benhamou Y, Poynard T, et al.
tests répétés sont positifs répétables pour l'anti-HBs. Contrôle
257,09 1,97% 3,94% 5,65% commerce dans une étude de corrélation. Les Coexistence of hepatitis B surface antigen
Les échantillons réactifs répétables ainsi que les positif données statistiques obtenues selon le mode de (Anti-HBs) and anti-HBs antibodies in chronic
échantillons initialement réactifs avec une calcul Deming sont présentées dans le tableau hepatitis B virus carriers: influence of “a”
concentration ≥ 100 mIU/ml doivent être confirmés Spécificité ci-dessous. determinant variants. J Virol 2006; 80:
conformément aux algorithmes confirmatoires
L'hémoglobine jusqu'à 500 mg/dl, la bilirubine Plage de 2968-2975.
recommandés. Inter- Coefficient de
jusqu'à 20 mg/dl, les triglycérides jusqu'à concentration Pente 4. CLSI. EP5-A2: Vol. 24, No. 25, Evaluation of
section corrélation
1 500 mg/dl et la protéine totale jusqu'à 10 g/dl (mIU/ml) Precision Performance of Quantitative
Limitation de la mesure n'interfèrent pas avec le dosage d'anti-HBs série CL.
0~1 000 mIU/ml 1,45 1,90 0,949 Measurement Method; Approved Guideline –
La limite supérieure de ce dosage est de 1 000 mIU/ml. Ces substances présentent moins de 10 %
Second Edition.
Un échantillon avec une concentration d'anti-HBs d'interférences aux concentrations indiquées.
inférieure à la limite supérieure peut être déterminé Le kit d'anti-HBs Mindray a été évalué pour une
Avertissements et précautions
quantitativement, tandis qu'un échantillon avec une 1. Pour le diagnostic in vitro uniquement. © 2017 Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics
potentielle réactivité croisée avec des substances
concentration plus élevée que la limite supérieure sera Co., Ltd.
provenant de personnes atteintes de maladies non 2. Suivez toutes les règles de manipulation de
signalé comme > 1 000 mIU/ml. Il est également liées à l'infection par le VHB. Au moins Tous droits réservés
réactifs de laboratoire et prenez les précautions
possible de diluer les échantillons à l'aide du diluant 5 échantillons contenant chacun un pathogène Fabricant: Shenzhen Mindray Bio-Medical
de sécuriténécessaires.
pour échantillons Mindray. potentiellement interférent (VHA, VHC, VHE, VHG, Electronics Co., Ltd.
3. En raison des différences dans les méthodes et
La concentration d'anti-HBs dans un échantillon donné VIH-1/2, TP, EBV, RV, CMV, HSV-1, toxoplasmose,
la spécificitédes anticorps, les résultats de test Adresse: Mindray Building, Keji 12th Road South,
peut varier en fonction des systèmes de mesure des rubéole, E.coli, levure et lentivirus) sont testés avec
d'un même échantillon peuvent être différents Hi-tech Industrial Park, Nanshan, Shenzhen 518057,
fabricants. Cela est dû à des différences dans les le kit d'anti-HBs Mindray et une méthode de
en utilisant des kits de réactif de fabricants République populaire de Chine
méthodes de dosage, la calibration et la spécificitédu référence. Tous les résultats sont cohérents sur la
différents sur le système Mindray, ou en Courriel: service@mindray.com.cn
réactif. Les résultats du dosage doivent être utilisés procédure de mesure Mindray et la procédure de
utilisant des kits de réactif Mindray sur d'autres
avec d'autres données, comme les symptômes, les référence. Tél.: +86-755-26582888
systèmes.
résultats d'autres tests, les antécédents cliniques, etc., 414 échantillons ont été déclarés négatifs en Fax: +86-755-26582680
pour la prise de décisions cliniques. 4. N'utilisez pas les kits de réactif au-delà de la
anti-HBs par les méthodes de référence. Le dosage
date de péremption.
d'anti-HBs Mindray sur le système CL-2000i a
Caractéristiques des performances détecté 407 échantillons comme négatifs et 5. N'utilisez pas de réactifs provenant de différents
7 échantillons comme positifs. Le taux de lots de réactif.
Sensibilité coïncidence négatif est 98,30%. 6. Maintenez toujours la cartouche de réactif en
Le kit de réactif d'anti-HBs (CLIA) a une sensibilité position verticale afin de vous assurer
analytique ≤ 2,0 mIU/ml. La sensibilité analytique Effet crochet qu'aucune microparticule n'a été perdue avant
est définie comme la plus faible concentration Il n'y a pas d'effet crochet à une concentration utilisation.
d'analyte qui peut être distinguée à partir d'un d'anti-HBs jusqu'à70 000 mIU/ml. 7. Il n'est pas recommandé d'utiliser une
échantillon qui ne contient pas d'analyte. Elle est cartouche de réactif ouverte depuis plus de
mesurée comme la concentration d'anti-HBs àdeux Exactitude 28 jours.
écarts types au-dessus de la RLU moyenne issue de Deux contrôles de justesse avec des valeurs définies
20 mesures d'un échantillon sans analyte. 8. La fiabilitédes résultats du dosage ne peut être
traçables selon la norme internationale ont été garantie si les instructions de cette notice ne
314 échantillons ont été déclarés positifs en utilisés pour vérifier l'exactitude de ce dosage. Les sont pas respectées.
anti-HBs par les méthodes de référence. Le dosage résultats ont montréque l'écart relatif est inférieur
9. Tous les échantillons et déchets de réactions
d'anti-HBs Mindray sur le système CL-2000i a à±10 %. Les résultats sont résumés dans le
doivent être considérés comme potentiellement
détecté 308 échantillons comme positifs et tableau suivant.
6 échantillons comme négatifs. Le taux de à risque biologique. Les échantillons et les
coïncidence positif est 98,10%. déchets de réactions doivent être manipulés

Réf.: 046-003267-00 (7.0) Français-7 Anti-HBs Page 2 sur 2 2018-10