Nghiên cứu vai trò của Allicin tách từ tỏi Việt

Nam trong quá trình điều hoà đáp ứng viêm

thông qua thụ thể Dectin - 1

Nguyễn Thị Hoàng Lan Quỳnh

Trường Đại học Khoa học Tự nhiên

Luận văn ThS Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm
Mã số 60 42 01 14
Người hướng dẫn: TS.Trịnh Tất Cường
Năm bảo vệ: 2013

Abstract. Tổng quan về vai trò của hệ thống miễn dịch đối với bảo vệ cơ thể. Trình
bày khái niệm viêm, nhiễm trùng nặng và choáng nhiễm trùng cũng như miễn dịch
bẩm sinh của vật chủ đáp ứng quá trình nhiễm vi khuẩn. Tìm hiểu cây tỏi và vai trò
của Allicin trong qúa trình chống viêm. Nghiên cứu khả năng điều hòa của Allicin
trong quá trình sản xuất cytokine tiền viêm và quá trình tạo phản ứng oxy hóa trong
BMDM thông qua cấu tử đặc hiệu của Dectin-1. Đánh giá hiệu quả điều trị của Allicin
trong chuột bị nhiễm trùng nặng và choáng nhiễm trùng gây ra bởi zymosan. Đưa ra
kết quả và thảo luận: khả năng sống của tế bào không bị ảnh hưởng bởi Allicin; đánh
giá khả năng zymosan kích thích tế bào BMDM sinh cytokine; ...

Keywords. Sinh học thực nghiệm; Sinh học; Allicin; Tỏi Việt Nam; Thụ thể Dectin -1

Content
MỞ ĐẦU

Các nghiên cứu gần đây đã công bố Allicin: Có khả năng chống viêm nhiễm mạnh, tăng
cường hoạt tính của các tế bào trong quá trình thực bào, tăng cường hoạt tính của các tế bào
giết tự nhiên, ức chế sự phát triển của vi sinh vật gây bệnh, ức chế sự phát triển của những tế
bào ung thư [28, 44]. Rất nhiều công bố và các công ty trên thế giới đã sản xuất Allicin từ
việc tạo quá trình xúc tác giữa Alliin với enzym allinase có sẵn trong tỏi. Bằng việc sử dụng
Allicin chiết xuất từ Alliin có sẵn trong tỏi, các công ty trên thế giới đã sản xuất được rất
nhiều loại thực phẩm chức năng cao cấp với nhiều tác dụng sinh học quí.

Dựa vào những tín hiệu của thụ thể Dectin-1, một số hợp chất tách chiết từ thực vật đã
được chứng minh có khả năng điều hòa được đáp ứng viêm và điều trị hiệu quả chuột bị
nhiễm khuẩn nặng và choáng nhiễm trùng. Chẳng hạn, các chất tách chiết từ nhân sâm Hàn
Quốc như Rb1, Rb2, Rc, hợp chất K (C-K) đã được công bố có khả năng điều hòa các tín hiệu
viêm như cytokine, quá trình phosphoryl hóa MAPK (mitogen activated protein kinase), phản
ứng oxy hóa (ROS) thông qua tín hiệu của thụ thể Dectin-1. Tuy nhiên, các chất này có nguồn
gốc từ nhân sâm nên rất đắt. Do vậy, việc tìm kiếm các chất có hoạt tính dược học đối với khả
năng chống viêm vẫn đang là vấn đề cấp bách để có thể thay thế một số thuốc đang sử dụng
hiện nay, cũng như góp phần làm giảm bớt tỷ lệ tử vong và giá thành điều trị của bệnh nhiễm
trùng nặng và choáng nhiễm trùng.

Tuy nhiên, kể cả trên thế giới và trong nước chưa có nghiên cứu nào đi sâu vào đánh giá
vai trò của Allicin đối với con đường tín hiệu thụ thể Dectin-1 trong quá trình điều hòa những
phản ứng viêm quá mức ở vật chủ. Đặc biệt, Việt Nam là một quốc gia có khí hậu nhiệt đới
gió mùa, nóng và ẩm, lượng dân số vào loại cao nhất thế giới nên khả năng mắc các bệnh
nhiễm trùng nặng và choáng nhiễm trùng do viêm (inflammation) là rất cao. Cho đến nay, thì
nhiễm trùng nặng và choáng nhiễm trùng vẫn là một trong các nguyên nhân chính của những
ca tử vong ở các bệnh nhân cần chăm sóc đặc biệt (ICU). Các trường hợp này vẫn tiếp tục gia
tăng rộng khắp trên cả thế giới. Với thực trạng hiện nay, thị trường trong nước vẫn chủ yếu là
thuốc nhập ngoại, giá thành rất đắt và luôn bị phụ thuộc vào các công ty nước ngoài trong khi
đó Việt nam lại có một tài nguyên vô cùng đa dạng về thực vật mà khả năng ứng dụng vào
dược học là vô cùng phong phú. Ngoài ra việc sử dụng thuốc một cách tự ý đặc biệt là kháng
sinh để chống các bệnh nhiễm trùng vẫn đang là một vấn đề cần được giải quyết. Do vậy, việc
tìm kiếm phương pháp và tá dược chữa bệnh là một vấn đề cần thiết và cấp bách để điều trị
hiệu quả quá trình viêm hệ thống, và sẽ hỗ trợ cải thiện được khả năng điều trị của bệnh nhân
bị nhiễm trùng nặng và choáng nhiễm trùng. Xuất phát từ cơ sở khoa học thực tiễn trên chúng
tôi tiến hành đề tài: “ Nghiên cứu vai trò của Allicin tách từ tỏi Việt Nam trong quá trình
điều hoà đáp ứng viêm thông qua thụ thể Dectin – 1” .
 Mục tiêu đề tài

1. Mục tiêu chung

- Đánh giá được 1 phần hoạt tính dược học của Allicin như một loại thuốc trong quá trình
điều hóa đáp ứng viêm.

2. Nội dung

- Có qui trình sản xuất Allicin từ tỏi

- Xác định được chức năng điều hòa quá trình đáp ứng viêm của Allicin tổng hợp từ Alliin
trong tỏi

- Đánh giá được hiệu quả của Allicin trong quá trình điều trị chuột bị nhiễm trùng nặng và
choáng nhiễm trùng

Reference
TÀI LIỆU THAM KHẢO

TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT

1. Đặng Diễm Hồng, Hoàng Minh Hiền, Nguyễn Minh Thanh, Châu Văn Minh,
Nguyễn Trọng Thông (2008), “Nghiên cứu khả năng kháng viêm từ rong tảo biển
Việt Nam”, Tạp chí Hoá học, 46(5A):Tr 81-90.

2. Đỗ Tất Lợi (2000), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học Hà Nội.

3. Đỗ Thị Oanh, Phạm Thanh Kỳ , Nguyễn Thị Bích Hằng , Nguyễn Trọng Thông, Phạm Thị
Vân Anh (2010), “Nghiên cứu tác dụng chống viêm và bảo vệ gan của cao sói rừng
(Sapium sebiferum) trên thực nghiệm, Tạp chí Dược học, 50(411): Tr 36-39.

4. Hà Vân Oanh , Phạm Xuân Sinh , Nguyễn Thai An , Nguyễn Trọng Thông, Phạm Thị Vân
Anh (2010), “Nghiên cứu tác dụng chống viêm của cao lỏng lá bạch đông (Clerodendrum
Chinese var. simplex (Mold) SL Chen) trên thực nghiệm”, Tạp chí Dược học, 50(414):
Tr 20-23.

5. Nguyễn Thị Bích Hằng , Phạm Thanh Kỳ, Nguyễn Trọng Thông , Phạm Thị Vân Anh ,
Nguyễn Thị Hoa Hiên (2009), “Nghiên cứu tác dụng chống viêm của cao lỏng lá vọng
cách (Premna corymbosa Rotteneen) thựcc nghiệm”, Tạp chí Dược học, 48(389):
Tr 22-24.

TÀI LIỆU TIẾNG ANH

6. Ahn, J. Y., Song, J. Y., Yun, Y. S., Jeong, G., Choi, I.S., et al. (2006),
 “Protection of Staphylococcus aureus infected septic mice by suppression of Early acute
inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan”, FEMS Immunology and
Medical Microbiology, 46:p 187-197.

7. Annane, D., Sebille, V., Bellissant, E., the Ger-Inf Study Group (2006), “Effects of low
dose corticosteroids in septic shock patients with or without early acute respiratory
distress syndrome”, Crit Care Med, 34:p 22-30.

8. Ariizumi,K.,Shen,G.L., Shikano, S., Xu, S., Ritter, R., Kumamoto, T.Edelbaum, D.,
Morita, A., Bergstresser, P.R., Takashima, A (2000), “Identification of a novel,
dendritic cell-associated molecule, dectin-1, by subtractive cDNA cloning”, Journal
of Biological Chemistry, 275:p 20157- 20167.

9. Attele, A.S., Wu, J.A., Yuan, C.S. (1999), Ginseng pharmacology: “Multiple constituents
and multiple actions”, Biochemical Pharmacology, 58: p1685-1693.

10. Babior, B.M. (1999), NADPH oxidase: an update. Blood, 93:p146476.

11. Bailey, J.M. (1991), “New mechanisms for effects of anti-inflammatory glucocorticoids”,
Biofactors, 3:p 97-102.

12. Barnes, P.J., Karin, M. (1997), “Nuclear factor-kappaB: A pivotal transcription factor in
chronic inflammatory disease”, The England new journal of medicine, 336:p 1066-
1071.

13. Bauer, S., Kirschning, C.J., Häcker, H., Redecke, V., Hausmann, S., Akira, S., Wagner,
H., Lipford, G.B. (2001), “Human TLR9 confers responsiveness to bacterial DNA
via species-specific CpG motif recognition”, Proc Natl Acad Sci, 98:p 9237–9242.

14. Bedard, K., Krause, K-H. (2007), “The NOX family of ROS-generating NADPH
oxidases: physiology and pathophysiology”, Physiol Rev, 87: p245–313.

15. Blanqué R, Meakin C, Millet S, Gardner CR (1998), “Selective enhancement of LPS-

induced serum TNF-alpha production by carrageenan pretreatment in mice”, General
Pharmacology, 31(2):p301-6.

16. Brown GD (2006), “Dectin-1: a signaling non-TLR pattern-recognition receptor”,

Nature, 6: p33-43.
17. Briegel, J., Kellermann, W., Forst, H., Haller, M., Bittl, M., Hoffmann, G.E., et al.
(1994), “Low-dose hydrocortisone infusion attenuates the systemic inflammatory
response syndrome. The phospholipase A2 study group”, Clin Invest, 72:p 782-
7.

18. Boguski MS (2002), “News and views comparative genomics: The mouse that roared”,
Nature, 420:p 515-516.

19. Brown, G.D., Gordon, S. (2001), “Immune recognition. A new receptor for beta-
glucans”, Nature, 413: p36-37.

20. Brown, G.D. (2006), “Dectin-1: a signaling non-TLR pattern-recognition receptor”,

Natrure, 6:p 33-43.

21. Cohen J., (2002), “The immunopathogenesis of sepsis”, Nature, 420: 885–91.

22. Choi, K.T. (2008), “Botanical characteristics, pharmacological effects and medicinal
components of Korean Panax ginseng C A Meyer”, Acta Pharmacol Sin, 29:
p1109–1118.

23. Clark, A.R. (2007), “Anti-inflammatory functions of glucocorticoid-induced genes”,

Molecular and Cellular Endocrinology, 275: p79-97.

24. Cuong, T.T., et al. (2009), “Glucocorticoid receptor agonist compound K regulates dectin-
1-dependent inflammatory signaling through inhibition of reactive oxygen species”,
Life Sciences, 85: 625-633.

25. Cuzzocrea, S., Di, Paola. R., Mazzon, E., Patel, N.S., Genovese, T., Muia, C., Crisafulli,
C., Caputi, A.P., et al. Thiemermann,C.,et al. (2006), “Erythropoietin reduces the
development of nonseptic shock induced by zymosan in mice”, Critical Care
Medicine, 34: p1168-1177.

26. Cuzzocrea, S., Filippelli, A., Zingarelli, B., Falciani, M., Caputi, A.P., Rossi,

F., et al. (1997), “ Role of nitric oxide in a nonseptic shock model induced by
zymosan in the rat”, Shock, 7: p351-357.

27. Dang, P.M., Stensballe, A., Boussetta, T., Raad, H., Dewas, C., Kroviarski Y,

Hayem G, Jensen ON, Gougerot-Pocidalo MA, El-Benna J. (2006), “A specific

p47phox-serine phosphorylated by convergent MAPKs mediates neutrophil NADPH
 oxidase priming at inflammatory sites”, Journal of Clinical Investigation, 116:p2033-
2043.

28. Dipaolo, J.A, Carrathers, C (1960), “ The Effect of Allicin from Garlic on Tumor
Growth”, Cancer Research, (20): p431-434

29. Donini, M., Zenaro, E., Tamassia, N., Dusi, S. (2007), “NADPH oxidase of human
dendritic cells: role in Candida albicans killing and regulation by interferons, dectin-1
and CD206”, European Journal of Immunology, 37: p1194-203.

30. Doyle, S., et al. (2002), IRF3 mediates a TLR3/TLR4- specific antiviral gene
program, Immunity, 17: p251–263.

31. El Benna, J., Faust, L.P., Babior, B.M. (1994), “The phosphorylation of the respiratory
burst oxidase component p47phox during neutrophil activation. Phosphorylation of
sites recognized by protein kinase C and by proline- directed kinases”, Journal
of Biological Chemistry, 269:p 23431-6.

32. Goldstein SA, Shemano I, Daweo R, Betler JM (1967), “Cotton pellet granuloma pouch
method for evaluation anti-inflammatory activity”, Arc International
Pharmcodynamic Therap, 165: p294-301.

33. Heinrich P.Koch- Larry D.Lawson. (2000), p431-434.

34. Iliev DB., et al. (2005), “Endotoxin recognition: in fish or not in fish?”, FEBS Lett, 579:
519–28.

35. Kobori M. (2004), “Wedelolactone suppresses LPS-induced caspase-11 expression by

directly inhibiting the IKK complex”, Cell Death and Differentiation, 11: p123– 130.

36. Lee, M.H., Yuk, J.M., Shin, D.M., Jo, E.K. (2009), “Dectin-1 is inducible and plays an
essential role for mycobacteria-induced innate immune responses in airway epithelial
cells”, J Clin Immunol, 29 (6): p795-805.

37. Mackman N., et al (1991), “Lipopolysaccharide-mediated transcriptional activation of the

human tissue factor gene in THP-1 monocytic cells requires both activator protein 1
and nuclear factor kappa B binding sites”, J Exp Med, 174:p 117–26.

38. Oommen S, Anto RJ, Srinivas G, Karunagaran D (2004), “Allicin (from garlic) induces
caspase-mediated apoptosis in cancer cells”, Eur J Pharmacol, (1-3):p 97-103.
39. Opal SM, Esmon CT. (2003), “Bench-to-bedside review: functional relationships between
coagulation and the innate immune response and their respective roles in the
pathogenesis of sepsis”, Crit Care, 7: p 23–38.

40. Parrillo JE. (2005), “ Severe sepsis and therapy with activated protein C”, N Engl J Med;
353:p 1398–400.

41. Riedemann NC., et al. (2003), “Novel strategies for the treatment of sepsis”, Nat Med,
9:p 17–24.

42. Slofstra SH., et al. (2005), “Low molecular weight heparin attenuates multiple organ
failure in a murine model of disseminated intravascular coagulation”, Crit Care Med,
33:p 1365–70.

43. Sun, L., Zhao, Y. (2007), “The biological role of dectin-1 in immune response”,
International Reviews of Immunology, 26:p 349-364.

44. Sun, L., Wang, X (2003), “Effects of allicin on both telomerase activity and apoptosis in
gastric cancer SGC-7901 cells”, Gastric cancer:p 1930-1934

45. Taylor PR., et al. (2007), “Dectin-1 is required for beta-glucan recognition and control of
fungal infection”, Nature Immunology, 8 (1):p 31–38.

46. Vane J and Botting R (1987), “Inflammation and the mechanism of action of anti-
inflammatory drugs”, The FASEB Journal, 1(2):p 89-96.

47. Wagner H., et al. (1986), “ Coumestans as the Main Active Principles of the Liver Drugs
Eclipta alba and Wedelia calendulacea”, Planta Med, 5: p370-4.

48. Wheeler AP., Bernard GR. (1999), “Treating patients with severe sepsis”, N Engl J Med,
340:p 07–14.

49. Winter CA, Risely EA, Nuss GW (1962), “Carregeenan induced edema in hind paw of
the rat as assay for anti-inflammatory drugs”, Proceedings of the Society for
Experimental Biology and Medicine,111:p 544–547. Clinical Investigation, 116:
p2033-2043.

50. Yang, C-S., et al. (2008), “The ginsenoside metabolite compound K, a novel agonist of
glucocorticoid receptor, induces tolerance to endotoxin-induced lethal shock”, J. Cell.
Mol. Med ,12 (1): p 1-17.
Nguồn trích dẫn qua internet

URL1:http://www.allimax.ca

URL2:http://www.ykhoanet.com/yhoccotruyen/voha/vh062.htm

URL3:http://www.inspiredliving.com/allimax-allicin-garlic

URL4: Http://www.childrenshospital.org/holistic

URL5: Http://www.childrenshospital.org/holistic

URL6: Http://wwang.kfunigraz.ac.at/~katzer/engl/Alli

URL7 : http://www.restekcorp.com