Professional Documents
Culture Documents
بررسی مقاله
تهیه گیاهان دارویی :روشهای اساسی استخراج و تفکیک برای اهداف آزمایشی
2
عبداللهی ر .ابوبکر ، 1ماین الحقة
1
گروه فارماکولوژی و من مقدمه
درمان ،دانشکده آماده سازی گیاهان دارویی برای مقاص?د آزمایش?ی گ?ام اولی?ه و کلی?دی در دس?تیابی ب?ه نت?ایج
Act
،علوم دارویی تحقیقات با کیفیت است .این شامل استخراج و تعیین کیفیت و کمیت ترکیبات زیست فعال قب??ل
،دانشگاه بایرو از انجام آزمایش بیولوژیکی مورد نظر است .ه?دف اص?لی این مطالع??ه ارزی?ابی روش ه?ای
A bstr
کانو ،نیجریه ،واحد
2 مختلف مورد استفاده در تهیه و غربالگری گیاهان دارویی در تحقیقات روزانه ما بود .اگرچه
فارماکولوژی ،دانشکده عص??ارهها ،فراکس??یونهای فع??ال زیس??تی ی??ا ترکیب??ات بهدس ?تآمده از گیاه??ان دارویی ب??رای
پزشکی و سالمت دفاع، اهداف متفاوتی استفاده میشوند ،تکنیکهای مربوط به تولید آنها صرفنظر از آزمایشهای
?ت بیولوژیکی مورد نظر ،عموما ً یکسان است .مراح??ل اص??لی در دس??تیابی ب??ه مولک??ول زیس?
دفاع ملی
فعال با کیفیت عبارتند از انتخاب حالل مناسب ،روشه??ای اس?تخراج ،روشه?ای غرب??الگری
،دانشگاه مالزی
فیتوشیمیایی ،روشهای شکنش و تکنیکهای شناسایی .روان بودن این روش ه??ا و نقش??ه راه
کواالالمپور ،مالزی
دقیقی که دنبال می ش??ود ص?رفا ً ب??ه ط??راحی تحقی??ق بس??تگی دارد .حالله??ایی ک??ه معم??والً در
اس??تخراج گیاه??ان دارویی اس??تفاده میش??وند ،حالله??ای قط??بی (مانن??د آب ،الکله??ا) ،قط??بی
هستند .به )هگزان ،اتر ،کلروفرم n-مانند( متوسط (مانند استون ،دی کلرومتان) و غیرقطبی
ط???ور کلی ،روش ه???ای اس???تخراج عبارتن???د از خیس???اندن ،هض???م ،جوش???انده ،انفوزی???ون،
پرکوالس??یون ،اس??تخراج سوکس??له ،اس??تخراج س??طحی ،اس??تخراج ب??ه کم??ک اولتراس??وند و
استخراج با کمک مایکروویو .تفکیک و خالص سازی مواد فیتوشیمیایی با استفاده از تکنیک
ه??ای مختل??ف کروم??اتوگرافی مانن??د کروم??اتوگرافی کاغ??ذی ،کروم??اتوگرافی الی??ه ن??ازک،
کروم??اتوگرافی گ??ازی و کروم??اتوگرافی م??ایع ب??ا ک??ارایی ب??اال ب??ه دس??ت می آی??د .در نه??ایت،
ترکیب??ات بهدس?تآمده ب??ا اس??تفاده از تکنیکه??ای شناس??ایی متن?وع مانن??د طیفس??نجی ج??رمی،
طیفس??نجی م??ادون قرم??ز ،طیفس??نجی ف??رابنفش و طیفس??نجی تش??دید مغناطیس??ی هس??تهای
مشخص میشوند .متعاقباً ،روشهای مختلفی که در باال توضیح داده شد را میتوان ب??ا توج??ه
به آزمایشهای بیولوژیکی مورد نظر گروهبندی و مورد بحث ق??رار داد ت??ا محقق??ان ج??وان را
.راهنمایی کند و آنها را متمرکزتر کند
کلمات کلیدی :کروماتوگرافی ،استخراج ،شکنش ،جداسازی ،گیاهان دارویی K
ت????اریخ دری????افت:
.1398/07/14
ب??????ازبینی ش??????ده:
با استخراج ،شکنش ،و جداسازی از
.1398/09/10
پ?????ذیرش-10-14 :
م
?????.2019ت?????اریخ
انتش????????????????????ار:
29/01/2020.
گیاه??ان دارویی ب??رای مص??رف مس??تقیم ب??ه عن??وان ت??رکیب زیس??ت فع??ال در ص??ورت ل??زوم عالوه ب??ر این ،ش??امل
داروی گیاهی یا سنتی استخراج و فرآوری می ش??وند تعیین کمیت و کیفیت ترکیب??ات فع??ال زیس??تی اس??ت ??]5-1[ .اخ??یراً
و یا ب??رای مقاص??د آزمایش??ی تهی??ه می ش??وند .مفه??وم تهی??ه گی??اه گیاه به عنوان منبع
دارویی برای اهداف آزمایش?ی ش??امل جم?ع آوری مناس??ب و ب?ه
موقع گیاه ،احراز هویت توسط متخصص ،خشک ک??ردن ک??افی ،آدرس مکاتبات :پروفسور ماینول هاک
و آسیاب می شود .این پیگیری می شود ،واحد فارماکولوژی ،دانشکده پزشکی و بهداشت دفاعی
کواالالمپور، Kem Sungai Besi، 57000 ،دانشگاه دفاع ملی مالزی
به این مقاله به صورت آنالین دسترسی داشته باشید .مالزی
:کد پاسخ سریع : runurono@gmail.comایمیل
: www.jpbsonline.orgوب سایت
1
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
تغییر دهند و بسازند .و آثار جدید تحت شرایط یکسان مجوز ترکیبات اولیه گیاه .اینها عمدتا ً اجزای تغذی??ه ای گیاه??ان مانن??د
.دارند قندهای معمولی ،اسید آمینه ،پروتئین ها و کلروفیل هستند .اینها
خواص دارویی کمی دارند یا اصالً ندارند ]6،7[ .ترکیبات ثانویه
تماس بگیرید : reprints@medknow.comبرای چاپ مجدد با
گی??اه .اینه??ا همچ??نین ب??ه عن??وان مت??ابولیت ه??ای ثانوی??ه مانن??د
آلکالوئیدها ،ترپنوئیدها ،ساپونین ها ،ترکیبات فنلی ،فالونوئیدها
آم??اده س??ازی AR، Haque M.نحوه استناد به این مقاله :اب??وبکر
و تانن ه?ا ش?ناخته می ش??وند .اینه??ا مس?ئول بس??یاری از فع??الیت
گیاهان دارویی :روش های اساس??ی اس??تخراج و تفکی??ک ب??رای
های بیولوژیکی یا دارویی هستند ]6،7[ .تقسیم بندی ه??دایت ش??ده
.؛ . J Pharm Bioall Sci 202010-12:1اهداف آزمایشی
زیست سنجی .این شامل استخراج م??واد گی??اهی و ب??ه دنب??ال آن
پزشکی ب??ه دلی??ل منش??اء ط??بیعی ،در دس??ترس ب??ودن در جوام??ع
آزمایش برای فع??الیت بیول??وژیکی اس??ت .هنگ??امی ک??ه عص??اره
Wolters Kluwer - Medknowمجله داروسازی و علوم زیستی | منتشر شده توسط © 2020 م
محلی ،ارزان ت?ر ب?ودن خری?د ،س?هولت م?دیریت و ش?اید کم?تر و
دردسرساز بودن ،محبوبیت بین المللی پیدا می کند .همچنین در رد آزم??ایش ق??رار گ??رفت ک??ه از نظ??ر بیول??وژیکی فع??ال اس??ت،
ص??ورت ب??روز ع??وارض ج??انبی متع??دد و مق??اومت دارویی، مرحل??ه بع??دی این اس??ت ک??ه ب??ا ش??کنش ادام??ه دهی??د .پس از آن،
[]5-1
داروه??ای گی??اهی میتوان??د درم??ان ج??ایگزین مفی??دی باش??د. بخش ه??ای مختل??ف ب??ه دس??ت آم??ده ب??رای فع??الیت بیول??وژیکی
استخراج گیاهان دارویی فرآیند جداسازی مواد فع??ال گی??اهی ی??ا آزم???ایش می ش???وند .همچ???نین ،پرب???ازده ت???رین بخش ب???رای
متابولیت های ثانویه مانند آلکالوئی??دها ،فالونوئی??دها ،ت??رپن ه??ا، جداسازی ترکیب گرفته می شود .در نه??ایت ،ت??رکیب ج??دا ش??ده
س??اپونین ه??ا ،اس??تروئیدها و گلیکوزی??دها از م??واد بی اث??ر ی??ا []1،5،8
شناسایی و ب??رای فع??الیت بیول??وژیکی آزم??ایش می ش??ود.
غیرفعال با استفاده از حالل مناسب و روش استخراج استاندارد و آزم??ایش ض??د TLCبیواتوگرافی .این فرآیندی اس??ت ک??ه از
است .مواد گیاهی با محتوای باالی ترکیبات فنلی و فالونوئی??دها میکروبی برای تعیین هویت ت??رکیب اس??تخراج ش??ده و همچ??نین
دارای خواص آنتی اکسیدانی هس??تند و از این رو ب??رای درم??ان فعالیت ضد میکروبی آن استفاده می کن??د ]5,9[ .انگش??ت نگ??اری
بیم??اری ه??ای مرتب??ط ب??ا اف??زایش س??ن مانن??د بیم??اری آلزایم??ر، در گیاه????ان دارویی .این ش????امل اس????تفاده از تکنی????ک ه????ای
[]2،5
پارکینسونیس??م ،اض??طراب و افس??ردگی اس??تفاده می ش??وند. کروم???اتوگرافی ،تکنی???ک ه???ای شناس???ایی و تجزی???ه و تحلی???ل
چن???دین روش در اس???تخراج گیاه???ان دارویی مانن???د خیس???اندن، شیمیایی برای مشخص کردن یک ترکیب فعال دارویی از ی??ک
تزریق ،جوشانده ،نفوذ ،هض?م و اس?تخراج سوکس?له ،اس?تخراج گی??اه دارویی اس??ت ]4،5[ .ایمونواس??ی _ این فرآین??د شناس??ایی
سطحی ،استخراج ب??ه کم??ک اولتراس??وند و اس??تخراج ب??ه کم??ک مولک??ول فع??ال زیس??تی و همچ??نین فع??الیت بیول??وژیکی آن از
م??ایکروویو اس??تفاده ش??د .عالوه ب??ر این ،کروم??اتوگرافی الی??ه طری??ق واکنش ایم??نی ،اتص??ال گیرن??ده و واکنش ه??ای آن??زیمی
(HPLC)،کروماتوگرافی مایع با ک??ارایی ب?اال (TLC)،نازک است .عصاره و متابولیت های ثانویه با وزن مولکولی کم ابت??دا
در ) (GCو کروماتوگرافی گازی ) (PCکروماتوگرافی کاغذی با آنتی بادی مونوکلونال برای تشخیص اتصال دارو ب??ه گیرن??ده
[]5-1
جداسازی و خالص سازی متابولیت های ثانویه استفاده شد. تعامل دارند .به دنبال آن ،از روش ایمونواسی مرتب??ط ب??ا آن??زیم
انتخاب ی??ک روش اس??تخراج مناس??ب ب??ه م??اهیت م??واد گی??اهی، برای تعیین فعالیت های آنزیمی آن استفاده می شود(ELISA) .
[]5
حالل ،دم??ا و ج??یره حالل ب??ه نمون??ه ، pHحالل م??ورد اس??تفاده
بس???تگی دارد .همچ???نین بس???تگی ب???ه اس???تفاده م???ورد نظ???ر از
محصوالت نهایی دارد ??]5-1[ .این مطالعه با هدف ارزی?ابی حالل _ اجاق گازها از عمل
های مختلف استخراج ،روش های اس??تخراج ،تفکی??ک ،خ??الص حالل م??ورد اس??تفاده ب??رای اس??تخراج گیاه??ان دارویی ب??ه ن??ام
س??ازی ،غرب??الگری فیتوش??یمیایی و شناس??ایی ترکیب??ات زیس??ت قاعدگی نیز شناخته می شود .انتخاب حالل به نوع گیاه ،بخش??ی
.فعال در گیاهان دارویی انجام شد از گیاهی که باید استخراج شود ،ماهیت ترکیب??ات فع??ال زیس??تی
تعریف اصطالحات و در دسترس بودن حالل بس??تگی دارد .ب??ه ط??ور کلی از حالل
گیاه دارویی .به گیاهی اطالق می شود که دارای مواد فع??ال ی??ا های قط??بی مانن??د آب ،مت??انول و ات??انول در اس??تخراج ترکیب??ات
متابولیت های ثانویه است که دارای فعالیت بیولوژیکی هس??تند. قطبی استفاده می شود ،در حالی که حالل های غیر قطبی مانند
یک گیاه کامل ممکن است از نظر دارویی فعال باشد ی??ا بخش??ی قط??بی هگ??زان و دی کلرومت??ان در اس??تخراج ترکیب??ات غ??یر
داروی گیاهی .اینها فرآورده ه??ای دارویی []4،6،7
از گیاه باشد. استفاده می شوند ???]3،5،10[ .در طول اس??تخراج م??ایع-م??ایع ،روش
هستند که ش??امل م??واد م??وثره ب??ه دس??ت آم??ده از گیاه??ان گی??اهی مرسوم انتخاب دو حالل قابل ام??تزاج مانن??د آب-دی کلرومت??ان،
هستند .این محصول را می توان از کل گیاه یا هر قس??متی تهی??ه آب-ات??ر و آب-هگ??زان اس??ت .در تم??ام ترکیب??ات ،آب ب??ه دلی??ل
ک??رد .ف??رآورده ه??ای حاص??ل از گیاه??ان گی??اهی ف??رعی مانن??د قطبیت باال و قابلیت اختالط با حالل آلی وجود دارد .ترکیبی که
روغن ،ص??مغ و س??ایر ترش??حات ن??یز ج??زو داروه??ای گی??اهی قرار است با استفاده از استخراج مایع-مایع استخراج ش??ود بای??د
قاعدگی .این یک مایع ی??ا ی??ک حالل []4،6،7
محسوب می شوند. در حالل آلی محل???ول باش???د ام???ا ن???ه در آب ب???رای س???هولت
[
مناسب است که برای فرآیند استخراج موثر انتخاب شده است. ?تخراج جداسازی ??]11[ .عالوه بر این ،حالل مورد اس??تفاده در اس?
]2،3مارک _ این یک ماده دارویی نامحلول یا بی اثر اس??ت ک??ه هگزان که کمترین قطبی است تا n-با توجه به قطبیت آنها ،از
میسل .این ترکیبی []2،3
در پایان فرآیند استخراج باقی می ماند. آب قط??بی ت??رین طبق??ه بن??دی می ش??ود ??]3،5،10[ .م??وارد زی??ر 11
[]2،3
از م??واد دارویی اس??تخراج ش??ده و حالل اس??تخراج اس??ت.
2 Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
حالل مختل??ف اس??تخراج هس??تند ک??ه ب??ر اس??اس ت??رتیب اف??زایش یک ترکیب بسیار پایدار است و با اسیدها ،بازه??ا و فل??زات
:قطبیت مرتب شده اند
[]3،9
واکنش نمی دهد ]3،12،13[ .معایب .در طبیعت بسیار فرار و
Solvents []3،12،13
قابل اشتعال است.
n-Hexane مایع ی?ونی (حالل س?بز) .این ی?ک حالل منحص?ر ب?ه )(v
قطبیت فرد برای استخراج است و بسیار قطبی و بسیار پای??دار در
1. برابر حرارت است .حتی در دمای 3000درج??ه س??انتی گ??راد می
2. نفت اتر 0.117
تواند در حالت مایع باقی بماند و در جاهایی که دم??ای ب??اال
3. دی اتیل اتر 0.117 قابل استفاده است قابل اس??تفاده اس??ت .ام??تزاج پ??ذیری ف??وق
4. اتیل استات 0.228 الع??اده ای ب??ا آب و س??ایر حالل ه??ا دارد و در اس??تخراج
5. کلروفرم 0.259 ترکیب??ات قط??بی بس??یار مناس??ب اس??ت ]14[ .مزای??ا .دارای
6. دی کلرومتان 0.309 حالل عالی است که مایکروویو را جذب و انتق??ال می ده??د
7. استون 0.355 و از این رو برای استخراج ب?ه کم?ک م??ایکروویو مناس??ب
8. بوتانولn - 0.586 است .غیر قابل اشتعال است و برای استخراج مایع-مایع و
9. اتانول 0.654 بسیار قطبی مفید است ]14[ .عیب .برای تهیه تنتور ایده آل
10. متانول 0.762 []14
نیست.
11. آب 1000
عواملی که در انتخاب حالل های استخراج باید در نظر گرفته
در طول شکنش ،حالل انتخاب شده با توجه ب??ه ت??رتیب اف??زایش شوند
هگ??زان ،کم??ترین قط??بی ب??ه آب ب??ا n-قط??بیت ،ب??ا ش??روع از
هنگام انتخاب حالل استخراج باید فاکتورهای مختلفی را ک??ه در
باالترین قطبیت اض??افه می ش??ود ??]3،9[ .اگ??ر محققی بخواه??د پنج []3،9،15
گ?زینش پ?ذیری (i) .زیر برشمرده شده در نظر گرفت.
حالل را در حین شکنش انتخ??اب کن??د ،روش معم??ول این اس??ت
توانایی یک حالل انتخ??ابی ب??رای اس??تخراج م??اده فع??ال و ت??رک
دو حالل ب?ا )،هگزان ،کلروفرم ( n-که دو حالل با قطبیت کم
ایمنی .حالل ایده آل برای استخراج باید غیر ). (IIماده بی اثر
و یکی ب??ا قط?بیت )بوت??انول ، n-دی کلرومتان( قطبیت متوسط
هزینه .باید تا ح??د امک??ان ). (iiiسمی و غیر قابل اشتعال باشد
.پایین انتخاب کند .باالترین قطبیت (آب)
واکنش پذیری .حالل مناسب استخراج نباید ). (IVارزان باشد
بازی??ابی .حالل اس??تخراج بای??د ب??ه ). (vبا عصاره واکنش دهد
_ از اقدامات s solventخصوصیات _ از ویسکوزیته .باید ). (viسرعت بازیابی و از عصاره جدا شود
آب .این حالل قط???بی ت???رین حالل اس???ت و در اس???تخراج )(i دمای ). (viiویسکوزیته پایینی داشته باشد تا به راحتی نفوذ کند
[]9،12
طیف گسترده ای از ترکیبات قطبی استفاده می ش??ود. از جوش .دمای جوش حالل بای??د ت??ا ح??د امک??ان پ??ایین باش??د ت??ا
مزایا .طیف وسیعی از مواد را حل می کن??د .ارزان ،غ??یر
[]3،9،15
تخریب در اثر حرارت جلوگیری شود.
سمی ،غیر قابل اشتعال و بسیار قطبی است ]9،12[ .معایب .
باعث رشد ب??اکتری ه??ا و کپ??ک ه??ا می ش??ود .ممکن اس??ت _ _ استفاده شده در عمل _ از پزشكان پزشكي Mروش های
باعث هیدرولیز شود و مقدار زی??ادی گرم?ا ب?رای متمرک?ز تع??داد زی??ادی روش از نظ??ر ف??نی در اس??تخراج گیاه??ان دارویی
کردن آن مورد نیاز است استفاده شد .برخی از روشهای جدی??دتر هن??وز در ح??ال تکام??ل
[]9،12
استخراج کردن. [
هستند ،در حالی که روشهای موج??ود در ح??ال تغی??یر هس??تند.
الکل .همچنین ماهیت قطبی دارد ،با آب قابل اختالط است )(ii ??]2،5انتخاب یک روش استخراج مناسب بسیار حی??اتی اس??ت ک??ه
[
و می تواند متابولیت های ثانویه قطبی را اس??تخراج کن??د. .در برخی موارد به استفاده مورد نظر از عصاره بستگی دارد
]9،12مزایا .در غلظت ب??االی 20درص??د خ??ود نگهدارن??ده
عواملی که در انتخاب روش استخراج باید در نظر گرفته شود
است .در غلظت کم غیر سمی است و برای تغلیظ عص??اره
به مقدار کمی گرما نیاز است ]9،12[ .معایب .چربی ها ،لثه پایداری در برابر گرم??ا .م??واد گی??اهی پای??دار در براب??ر )الف(
[]9،12
ها و موم را حل نمی کند .قابل اشتعال و فرار است. حرارت با استفاده از استخراج سوکس?له ی??ا اس??تخراج ب?ه کم??ک
مایکروویو اس??تخراج میش??وند ،در ح??الی ک??ه م??واد گی??اهی ک??ه
کلروفرم .این یک حالل غیر قط??بی اس??ت و در اس??تخراج )(iii
پایداری حرارتی ندارند ب??ا اس??تفاده از خیس??اندن ی??ا نف??وذ ک??ردن
ترکیباتی مانند ترپنوئیدها ،فالونوئیدها ،چربی ها و روغن
اس???تخراج میش???وند( ?????]2،11[ .ب) م???اهیت حالل .اگ???ر حالل
ها مفی??د اس??ت ]3،12،13[ .مزای??ا .بی رن??گ ،ب??وی ش??یرین و
استخراج آب باشد ،خیساندن روش مناسبی است اما ب??رای نف??وذ
محلول در الکل است .همچ?نین ب?ه خ?وبی ج?ذب و در ب?دن
حالل ف??رار و اس??تخراج سوکس??له مناس??ب ت??ر اس??ت( ??]2،11[ .ج)
متابولیزه می شود ]3،12،13[ .معایب .خاصیت آرام بخشی و
هزینه دارو .داروهای ارزان با اس??تفاده از خیس??اندن اس??تخراج
[]3،12،13
سرطان زایی دارد.
می شوند ،در حالی که داروهای گران قیمت ترجیحا ً ب??ا اس??تفاده
ات??ر .این ی??ک حالل غ??یر قط??بی اس??ت و در اس??تخراج )(iv از پرکوالس??یون اس??تخراج می ش??وند( ????]2،11[ .د) م??دت زم??ان
ترکیب??اتی مانن??د آلکالوئی??دها ،ترپنوئی??دها ،کوم??ارین ه??ا و استخراج .خیساندن برای مواد گیاهی که نی?از ب?ه ق?رار گ?رفتن
اسیدهای چرب مفید است ]3،12،13[ .مزای??ا .قاب?ل اختالط ب??ا در معرض طوالنی م??دت ب??ا قاع??دگی دارن??د مناس??ب اس??ت ،در
آب ،نقطه ج??وش پ??ایین و ط??بیعت بی م??زه اس??ت .همچ??نین حالی که تکنیک هایی مانند اس??تخراج ب??ه کم??ک م??ایکروویو ی??ا
Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020 3
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
تزریق .این یک فرآین??د اس??تخراج مانن??د خیس??اندن اس?ت(ii) . استخراج سوکس??له .این فرآین??د در غ??یر این ص??ورت ب??ه )(vi
مواد دارویی را به صورت پودر ریز آس??یاب می کنن??د و عن??وان اس??تخراج م??داوم گ??رم ش??ناخته می ش??ود .دس??تگاه
س??پس در ظ??رف تم??یزی ق??رار می دهن??د .س??پس حالل استخراج کننده سوکسله نام دارد که از شیشه س??اخته ش??ده
استخراج سرد یا گرم روی مواد دارویی ریخته می شود، است .از یک فالس??ک ت??ه گ??رد ،محفظ??ه اس??تخراج ،لول??ه
[
خیس می شود و برای مدت کوتاهی نگهداری می شود. سیفون و کندانسور در باال تش??کیل ش??ده اس??ت .ی??ک م??اده
??]3،11-1این روش برای استخراج ترکیبات زیست فعال ک??ه گیاهی خش??ک ،آس??یاب ش??ده و ری??ز پ??ودر ش??ده در داخ??ل
ب??ه راح??تی محل??ول هس??تند مناس??ب اس??ت .عالوه ب??ر این، کیسه متخلخل (انگشت) که از یک پارچ??ه تم??یز ی??ا کاغ??ذ
روش مناسبی برای تهی??ه عص??اره ت??ازه قب??ل از مص??رف صافی قوی تشکیل شده است قرار داده می ش??ود و محکم
است .نسبت حالل به نمونه معموالً 4:1یا 16:1بسته ب??ه بس??ته می ش??ود ???]4،11،17،18-1[ .حالل اس??تخراج در فالس??ک
[]3،11-1
کاربرد مورد نظر است. پایینی ریخته می شود و سپس انگشتانه ب??ه داخ??ل محفظ??ه
گوارش .این یک روش استخراج است که شامل اس??تفاده )(iii استخراج ریخته می شود .سپس حالل از فالس??ک پ??ایینی
از حرارت متوسط در طول فرآیند استخراج اس??ت .حالل ح??رارت داده می ش??ود ،تبخ??یر می ش??ود و از کندانس??ور
استخراج ش?ده در ی?ک ظ??رف تم?یز و ب?ه دنب??ال آن م??واد عب??ور می کن??د و در آنج??ا م??تراکم می ش??ود و ب??ه س??مت
دارویی پودر شده ریخته می شود .مخلوط را روی حم??ام محفظ??ه اس??تخراج جری??ان می یاب??د و ب??ا تم??اس دارو را
آب یا در کوره ای با دمای حدود 50درجه سانتیگراد قرار استخراج می کند .در نتیجه ،هنگامی ک??ه س??طح حالل در
می دهند ?]1،3،11[ .در طول فرآیند استخراج حرارت اعمال محفظه استخراج به باالی سیفون می رسد ،حالل و م??واد
ش??د ت??ا ویس??کوزیته حالل اس??تخراج ک??اهش یاب??د و ح??ذف []4،11،17،18-1
گیاهی استخراج شده به فالسک برمی گردند.
متابولیت های ثانویه اف?زایش یاب?د .این روش ب?رای م?واد کل فرآیند به طور مکرر ادامه مییابد تا زم??انی ک??ه دارو
گیاهی که هستند مناسب است به طور کام??ل اس??تخراج ش??ود ،نقطهای ک??ه حاللی ک??ه از
[]1،3،11
به راحتی قابل حل محفظ??ه اس??تخراج ج??اری میش??ود ،باقیمان??دهای ب??اقی
جوشانده .این فرآین??دی اس?ت ک??ه ش?امل اس??تخراج م??داوم )(iv نمیگذارد .این روش برای م??واد گی??اهی ک??ه ت??ا ح??دی در
گرم با استفاده از حجم مشخص??ی از آب ب??ه عن??وان حالل حالل انتخ??ابی محل??ول هس??تند و ب??رای م??واد گی??اهی ب??ا
است .یک ماده گیاهی خش??ک ،آس??یاب ش??ده و پ??ودر ش??ده ناخالصی های نامحلول مناسب است .ب??ا این ح??ال ،روش
در یک ظرف تمیز قرار داده می شود .س??پس آب ریخت??ه مناسبی برای م??واد گی??اهی قاب??ل انعط??اف نیس??ت .مزای??ا .
و هم زده می شود .سپس حرارت در طول فرآین??د اعم??ال مقدار زیادی دارو را می توان با مق??دار کم??تری از حالل
می ش??ود ت??ا اس??تخراج را تس??ریع کن??د ??]3،11-1[ .این فرآین??د استخراج کرد .همچنین ب??رای م??واد گی??اهی ک??ه در براب??ر
2 Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
حرارت پایدار هستند ن??یز قاب??ل اس??تفاده اس??ت .نی??ازی ب??ه _ _ روشهای غربالگری فسفر هیتوشیمی
فیلتراسیون نیست و مقدار زی?ادی گرم??ا می توان??د اعم??ال غربالگری های فیتوشیمیایی آزمایش ه??ای اولی??ه ای هس??تند ک??ه
شود ]4،11،17،18-1[ .معایب .تک??ان دادن منظم امک??ان پ??ذیر برای تشخیص وجود متابولیت های اولی??ه و ثانوی??ه در عص??اره
نیست و روش برای آن مناسب نیست انجام می شوند .چندین تجزیه و تحلیل کیفی ش??رح داده ش??ده در
[]4،11،17،18-1
مواد قابل حرارت پذیری زیر برای تش?خیص وج?ود آلکالوئی?دها ،فالونوئی?دها ،ت?انن ه?ا،
استخراج به کم??ک م??ایکروویو .این یکی از روش ه??ای )(vii ساپونین ه?ا ،فالون ه?ا ،اس?ترول ه?ا ،ت?رپن ه?ا ،گلیکوزی?دهای
پیش??رفته اس??تخراج در تهی??ه گیاه??ان دارویی اس??ت .این [
قلبی ،پروتئین ،کربوهیدرات ها و چربی ها استفاده شده است.
تکنی??ک از مکانیس??م چ??رخش دوقط??بی و انتق??ال ی??ونی ب??ا ]21-3،19
Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020 3
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
تست استروئیدها و تری ترپنوئیدها آزمایش ژالتین .محلولی از عصاره گیاه در لوله آزمایش قرار
آزمون لیبرمن بورچارد .این روش برای عصاره الکلی )الف( داده شد و سپس 2میلی لیتر محلول ژالتین 1درصد ق??رار داده
استفاده می شود .عصاره باید ابتدا از طریق تبخیر خشک شود، شد و تکان داده شد .ظاهر رسوب سفید نشان دهن??ده وج??ود فن??ل
سپس دوباره ب??ا کلروف??رم اس??تخراج ش??ود .چن??د قط??ره انی??دریت اس??ت( ??]21-3،19[ .د) آزم??ایش مع??رف م??ایر (آزم??ایش یدی??د جی??وه
استیک و سپس اسید سولفوریک از کن??ار لول??ه آزم??ایش اض??افه پتاسیم) .به محلول عصاره گی??اه 1 ،میلی لی??تر از مع??رف م??ایر
کنید .تشکیل حلقه بنفش ت??ا آبی رن?گ در مح?ل اتص?ال دو م?ایع در محلول اسیدی اض??افه ش??د .تجلی رس??وب س??فید نش??ان دهن??ده
نش???ان دهن???ده وج???ود اس???تروئیدها ب???ود( ????]22-3،19[ .ب) آزم???ون
[]21-3،19
وجود ترکیبات فنلی است.
سالکوفسکی 1 .میلی لی??تر محل??ول از عص??اره گرفت??ه ش??د و 2
تست پروتئین
میلی لیتر کلروفرم اضافه شد ،تکان داده شد و ص?اف ش?د .چن?د
قطره اسید سولفوریک غلیظ به فیلتر اضافه شد ،تک??ان داده ش??د آزمایش بیورت .مقداری عص??اره گرفت??ه ش??د و محل??ول )الف(
و اجازه داده شد بمان??د .ایج??اد رس??وب زرد طالیی نش??ان دهن??ده هیدروکسید سدیم 4درصد از دارو تولی??د ش??د .ب??ه دنب??ال آن ٪1
[]22-3،19
وجود تری ترپن ها است. س??ولفیت مس اض??افه می ش??ود .ظ??اهر رن??گ بنفش داللت ب??ر
وجود پیوند پپتیدی دارد( ???]21-3،19[ .ب) آزمایش نین هی??درین 1 .
تست تانن میلی لیتر از عص?اره گرفت?ه ش??د و در لول??ه آزم?ایش ق?رار داده
یک پوست کوبنده طالیی Gold Beater .تست پوستی )الف( شد .سپس 25/0درصد معرف نین هیدرین اضافه و تک??ان داده
از پوس???ت گ???او ب???ه دس???ت آم???د .پوس???ت گل???د بی???تر در اس???ید شد .سپس مخلوط به مدت چند دقیقه جوشانده شد .تشکیل رن??گ
هیدروکلریک %2خیسانده شد و با آب مقطر شسته ش??د .س??پس آبی نش????ان دهن????ده وج????ود پروت????ئین اس????ت( .ج) آزم????ایش
به مدت 5دقیقه در محلول عصاره قرار داده شد و با آب مقطر زانتوپروتئیک 1 .میلی لیتر از عصاره گرفت??ه ش??ده و در لول??ه
شسته شد .در نهایت در محلول سولفات آهن %1قرار داده شد. آزمایش قرار داده شد .سپس چند قطره اس??ید نیتری??ک اض??افه و
اگر پوست کوبنده طالیی به قه??وه ای ی??ا س??یاه تغی??یر کن??د ،ت??انن تکان داده ش??د .ظه??ور رن??گ زرد نش??ان دهن??ده وج??ود پروت??ئین
وجود دارد( ?]21-3،19[ .ب) آزمایش ژالتین 1 .میلی لیتر عصاره
[]21-3،19
است.
گرفته شد و در لوله آزمایش قرار داده شد .سپس محلول ژالتین
1درصد حاوی کلرید سدیم را اضافه ک?رده و تک?ان داد .ظ?اهر _ _ ف عمل و روشهای تصفیه
[]22-3،19
رسوب سفید نشان دهنده وجود تانن است.
فرکشناسیون فرآیند جداسازی عصاره های گیاهی به بخش های
تست فالونوئیدها مختلف است .بیشتر فراکسیون ها را به بخش ه??ایی متش??کل از
آزمایش شینودا 1 .میلی لیتر از عصاره گرفته شد و در )الف( تعدادی ت??رکیب ج??دا می کن??د .این فرآین??د ت??ا زم??انی ک??ه ت??رکیب
لوله آزمایش قرار داده ش?د .س?پس چن?د قط?ره اس?ید کلری?دریک خالص جدا شود ادامه می یابد ???]4،8،23[ .هنگامی که چن??دین حالل
غلی??ظ ب??ه آن اض??افه ش??د و س??پس 0.5میلی گ??رم تراش??کاری برای شکنش مورد نیاز است ،آنها باید بر اساس ترتیب افزایش
اض??افه ش??د و تک??ان داده ش??د .ظه??ور رن?گ mRimandoium قطبیت اضافه شوند .تکنیک های شکنش اساس ?ا ً ب??ه روش ه??ای
ص??ورتی نش??ان دهن??ده وج??ود فالونوئی??دها اس??ت( ???]21-3،19[ .ب) .فیزیکی یا شیمیایی طبقه بندی می شوند
آزمایش اس?تات س??رب .ب?رای تش??خیص وج?ود فالونوئی?دها1 ، روش های شیمیایی
میلی لیتر عصاره گرفت?ه ش??د و در لول??ه آزم?ایش ق?رار گ??رفت. این روش استخراج بر اساس نوع گ??روه ه?ای ع??املی اس??ت ک?ه
سپس چند قطره استات سرب اضافه کرده و تکان دهید .تش??کیل ی??ک ت??رکیب در مخل??وط داده ش??ده دارد .جداس??ازی ی??ا خ??الص
رسوب زرد نشان دهنده وج??ود فالونوئی??دها اس??ت( ??]21-3،19[ .ج) سازی را می توان با واکنش های شیمیایی با استفاده از مع??رف
آزمایش معرف قلیایی 1 .میلی لیتر از عصاره گرفته ش??د و در []4
های مناسب به دست آورد.
لوله آزمایش قرار داده شد .سپس چند قطره محلول هیدروکس??ید روش های فیزیکی
سدیم اضافه و تکان داده شد .ظه??ور رن??گ زرد تن??د ک??ه پس از روش ه??ای ف??یزیکی م??ورد اس??تفاده در جداس??ازی ترکیب??ات از
افزودن اسید رقیق به بی رنگ تبدیل می ش??ود داللت ب?ر وج??ود مخل???وط ه???ا ش???امل روش قی???ف جداس???ازی ،تکنی???ک ه???ای
.دارد کروماتوگرافی ،تقطیر جزء به جزء ،تبلور کس??ری ،آزادس??ازی
[]22-3،19
از فالونوئیدها جزئی و
تست فنل []4
تصعید.
آزمایش کلرید آهن 1 .میلی لیتر محلول عص??اره گرفت??ه )الف( )(a روش قیف جداسازی هنگامی که چه??ار حالل مختلف
شد و در لول??ه آزم??ایش ق??رار داده ش??د .س??پس محل??ول ژالتین 1 انتخ??اب می )بوت??انول n-هگ??زان ،کلروف??رم ،اس??تون و ( n-
درصد حاوی کلرید سدیم اضافه و تکان داده شد .تش??کیل رن??گ شوند ،شکنش با مرطوب کردن یا انحالل کامل عصاره خ??ام ب??ا
آبی مای?ل ب?ه س?یاه نش??ان دهن??ده وج?ود فن?ل اس?ت( ??]21-3،19[ .ب) 250میلی لیتر آب آغ??از می ش?ود .ب??ه دنب??ال آن ب??ه داخ??ل ی??ک
آزمایش استات سرب 1 .میلی لیتر محلول عصاره گرفته شد و قیف جداکننده منتقل میشود ،تکان داده میشود و اجازه میدهد
در لوله آزمایش قرار داده شد .سپس 1میلی لیتر محل??ول الکلی هگ??زان n- ،تا ته نشین شود .عالوه بر این ،به 250میلی لی??تر
اضافه شد و سپس با اسید سولفوریک 20درصد رقیق ش??د .در کمترین حالل قطبی اضافه شد و تکان داده شد .محتوا می تواند
نهایت محلول هیدروکسید سدیم اضافه شد .تشکیل رن??گ قرم??ز ته نشین شود و پایین قیف جداکننده باز ش??ود ت??ا الی??ه آبی ح??ذف
مای??ل ب??ه آبی نش??ان دهن??ده وج??ود فن??ل ه??ا اس??ت( ???]21-3،19[ .ج)
2 Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
شود .محتوای باقیمانده در قی??ف جداکنن??ده در ی??ک ظ??رف تم??یز یعنی جذب ،تقس?یم ،می?ل ترکی?بی ،تب?ادل ی?ونی ی?ا ح?ذف ان?دازه
هگزان بدست آی??د ??]1،5،8،24[ .حجم مس??اوی n-ریخته شد تا کسر PC،درگیر شدند ?]1،4،5،23،24[ .تکنیکهای کروماتوگرافی شامل
هگزان دوب??اره اض??افه ش??د ،تک??ان داده ش??د و ج??دا ش??د .این n- کروم??اتوگرافی م??ایع (CC)،کروم??اتوگرافی س??تونی TLC،
هگزان و تک??ان n-افزودن ادامه داشت تا اینکه پس از افزودن است HPLC ]1،4،5،8،23،24[ .و (LC)، GC
دادن مقدار معقولی از عصاره به نظر نمی رسید که ب??ه قس??مت
، n-هگ??زان منتق??ل ش??ود ]1،5،8،24[ .چرخ??ه مش??ابهی ب??رای کلروف??رم ،اس??تون n- مکانیسم های جداسازی در کروماتوگرافی
n-بوت??انول انج??ام ش??د ت??ا فراکس??یون ه??ای کلروف??رم ،اس??تون و )(i کروماتوگرافی جذبی جداسازی بر اس??اس ب??رهمکنش
بوتانول بدست آید .بخش ب??اقی مان??ده پس از تفکی??ک ب??ه عن??وان بین ترکیباتی که ق?رار اس?ت ج?دا ش?وند و ف?از س?اکن انج?ام می
نامیده می شود ،زیرا ابت??دا عص??اره ) (RAFکسر آبی باقیمانده شود .در این حالت ،فاز ساکن ترکیب??ات را از طری??ق نیروه??ای
.خام بود جاذبه آبگریز و غیر کوواالنس??ی وان??دروالس می کش??د و ح??ذف
در آب حل می شود]1،5،8،24[ . می کند .ترکیبی که به صورت سست متصل اس??ت ابت??دا توس??ط
[]1،5،24
فاز متحرک شسته می شود.
)(b تقطیر کسری .این فرآیند جداسازی یا خالص س??ازی
ترکیب???ات از ی???ک مخل???وط اس???ت .معم???والً ب???رای جداس???ازی )(ii کروماتوگرافی پارتیشن .ترکیب??ات ب??ا اف??زودن دو ی??ا
هیدروکربن هایی مانن??د نفت خ??ام ،س??یترال و اک??الیپتول اس??تفاده چند حالل غیر قاب??ل ام??تزاج در مخل??وط ی??ک عص??اره ج??دا می
می شود .خالص سازی ب??ر اس??اس تف??اوت در نق??اط ج??وش آنه??ا شوند .هر ترکیب ب??ا ح??ل ش??دن در قس??متی از حالل ک??ه محل??ول
حاصل می شود .دستگاه تقطیر کسری به گون??ه ای س??اخته ش??ده است از مخلوط جدا می شود ??]1،5،24[ .متعاقب?ا ،مایع??ات غیرقاب?ل
است که با اعم?ال ح?رارت ه?ر ت?رکیب تبخ?یر ش?ده و در نقط?ه اختالط ب??ا اس??تفاده از قی??ف جداکنن??ده ب??رای ب??ه دس??ت آوردن
جوش خود جدا می شود .در نتیجه ،ه??ر ت??رکیب تک??ه تک??ه ش??ده ترکیب??ات جداگان??ه ج??دا می ش??وند .کروم??اتوگرافی پارتیش??ن ب??ه
متراکم شده و به عنوان یک موجودیت جداگانه از طریق چندین عنوان مایع /مایع شناخته می شود
سیفون متصل به جدایش ،جدایی]1،5،24[ .
[]4
دستگاه تقطیر کسری )(iii کروماتوگرافی می??ل ترکی??بی .ف??از ث??ابت ی??ک لیگان??د
)(c کریستالیزاسیون کس??ری .تع??داد زی??ادی از ترکیب??اتی است که در یک ستون جداکننده قرار گرفته است .فاز متح??رک
که به طور طبیعی در عصاره های گیاهی وجود دارند ،م??اهیت اعمال شده ،ترکیباتی را ک?ه هیچ تم?ایلی ب?ه ف?از س??اکن ندارن??د،
کریستالی دارند .جداسازی از طری??ق تش??کیل کریس??تال در حین شسته است .به این ترتیب ،ترکیبات ب??ا می??ل ترکی??بی ب??اال ب??رای
تغلیظ عصاره با استفاده از آن حاصل می شود []1،5،24
فاز ساکن جذب و جدا می شوند.
[]4
گرما یا تبرید )(iv کروم??اتوگرافی تب??ادل ی??ونی مفه??وم تب??ادل ی??ونی در
)(d رهایی کسری .این روش برای جداس??ازی ترکیب??اتی جداسازی ترکیبات قطبی بر اساس نوع بار آنها مفی??د اس??ت .ب??ه
که به راحتی می توانند از مخلوط رسوب تش??کیل دهن?د مناس??ب این ت??رتیب باره??ای مش??ابه ج??ذب می ش??وند ،در ح??الی ک??ه ب??ر
است .رسوب معموالً با تغییر ترکیبات به شکل نمک آنها ایج??اد خالف بارهای دفع شده .مواد مشابه بار به یکدیگر جذب شده و
می شود .آزادسازی کسری معموالً در تصفیه کاربرد دارد []1،5،24
از مخلوط یا عصاره جدا می شوند.
[]4
آلکالوئیدهای دارچین )(v کروم???اتوگرافی ح???ذف ان???دازه این روش جداس???ازی
)(e تصعید .این روش شامل تغی??یر ح??الت جام??د ب??ه گ??از ترکیب??ات را ب?ر اس?اس ان??دازه مولک?ولی آنه??ا ب??ا اعم?ال مش ب??ا
بدون عبور از حالت مایع اس??ت .م??وادی مانن??د ک??افور و روغن قطره???ای مختل???ف در نظ???ر می گ???یرد .همچ???نین ب???ه عن???وان
های فرار با حرارت دادن جدا شده و مستقیما ً به گ??از تب??دیل می فیلتراسیون ژل یا الک مولکولی ش??ناخته می ش?ود ??]1،5،24[ .ابت??دا
[]4
شوند. یک مش با اندازه کوچکتر و سپس با اندازه متوسط و در نهایت
.مش با اندازه منافذ بزرگتر اعمال شد
)(f تکنیک های کروماتوگرافی اینها تکنیک های خاصی
هستند که در جداسازی ترکیبات از مخلوط ها بر اساس ان??دازه، تکنیک های کروماتوگرافی مورد استفاده در جداسازی
شکل و بار آنها استفاده می ش??ود .مفه??وم کروم??اتوگرافی ش??امل ترکیبات از مخلوط یا عصاره ها
استفاده از ف??از متح??رک اس??ت ک??ه حالل اس??تخراج و ف??از ث??ابت )(1 ک??امپیوتر .مکانیس??م جداس??ازی در کروم??اتوگرافی
مانند سیلکا ژل و سفادکس مخلوط با س??ولفات کلس??یم ب??ه عن??وان جذبی این دستگاه شامل یک محفظه شیشه ای و ی??ک ف??از ث??ابت
باین??در اس??ت ??]1،4،5،23،24[ .س??یلیکاژل ب??رای جداس??ازی اس??یدهای است که ی?ک کاغ??ذ ص??افی س??اخته ش?ده از س?لولز اس?ت .کاغ?ذ
آمینه ،قندها ،اسیدهای چرب ،لیپی??دها و آلکالوئی??دها اس??تفاده می صافی از باال آویزان شده و به داخل محفظ??ه شیش??ه ای آوی??زان
در جداسازی پروتئین ه??ا و اس??یدهای آمین??ه . Sephadexشود می شود ]1،5،24[ .مخلوطی که باید جدا شود در پایین کاغذ صافی
قابل استفاده است .آلومینیوم در جداسازی ویتامین ه??ا ،ک??اروتن قرار می گیرد .عالوه بر این ،سپس حالل در ت?ه ظ?رف ریخت?ه
ها ،فنل ها ،استروئیدها و آلکالوئی??دها مفی??د اس??ت .پ??ودر س??لولز می ش??ود ت??ا ب??ه عن??وان ف??از متح??رک عم??ل کن??د .ف??از متح??رک
در جداسازی اسیدهای آمینه ،رن??گ ه??ای غ??ذایی و آلکالوئی??دها بالفاص??له هم??راه ب??ا کاغ??ذ ص??افی ش??روع ب??ه ص??عود می کن??د.
اس????تفاده می ش????ود .س????لیت در جداس????ازی کاتیونه????ای آلی و جداسازی ب??ا ح??رکت رو ب??ه ب??اال ف??از متح??رک از طری??ق عم??ل
اس???تروئیدها ک???اربرد دارد ?????]1،4،8،23[ .مکانیس???مهای مختلفی در مویرگی انج??ام می ش??ود .ترکیب??اتی ک??ه محل??ول هس??تند ب??ا حالل
جداسازی ترکیب??ات ب??ا اس??تفاده از تکنیکه??ای کروم??اتوگرافی، حرکت می کنند و بر اساس حاللیت به کاغذ صافی می چس??بند.
Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020 3
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
[ ??]1،5،24سرعت جداس??ازی بس??تگی ب??ه ن??وع کاغ??ذ ص??افی م??ورد در یک بازه زم?انی جم?ع آوری ش?د .عالوه ب?ر آن ،حالل ه?ای
استفاده دارد .حرکت مایع و فرآیند جداسازی با استفاده از کاغذ بوت??انول و مت??انول ، n-دیگ??ری مانن??د کلروف??رم ،اتی??ل اس??تات
صافی ضخیم سریعتر است ،در حالی ک??ه کاغ??ذ فیل??تر متخلخ??ل اض??افه ش??د .کس??ری از این حالل ه??ا ب??ه ص??ورت جداگان??ه در
ک??ل فرآین??د را کن??د می کن??د .شناس??ایی ه??ر ت??رکیب ج??دا ش??ده ب??ا []1
فواصل زمانی مختلف جمع آوری و در نهایت مشخص شد.
محاسبه ضریب تاخیر انجام می شود که نسبت مسافت طی شده
[]1،5،24
توس??ط ت??رکیب ب??ه مس??افت طی ش??ده توس??ط حالل اس??ت. )(4 جی سی .مکانیسم دخیل پارتیش??ن اس??ت .از دو حالل
مزای??ای این تکنی??ک عبارتن??د از س??ادگی و مق??رون ب??ه ص??رفه غ??یر قاب??ل ام??تزاج اس??تفاده می ش??ود :یکی ب??ه ش??کل گ??از (ف??از
بودن ،بسیار حساس ب??ه مق??دار کمی از م??واد .از مع??ایب آن می متحرک) و دیگری به شکل م??ایع اس??ت ک??ه در س??طح جام??د بی
توان به زم?ان ب?ر ب?ودن و ش?کنندگی کاغ?ذ اش?اره ک?رد ک?ه می
[]1،4،23
اثر ج??ذب می ش??ود ت??ا ب??ه عن??وان ف??از س??اکن عم??ل کن??د.
تواند توسط آن از بین برود موادی که در فاز گازی محلول هستند ،مایع را ت??رک می کنن??د،
مواد شیمیایی]1،5،24[ . به فاز گاز می رون??د و از هم ج??دا می ش??وند .ب??ه همین ت??رتیب،
ترکیباتی که فقط به صورت مایع محل??ول هس??تند در ف??از س??اکن
)(2 این تکنی???ک همچ???نین ش???امل اس???تفاده از _ TLC باقی می مانند ?]1،4،23[ .گاز هلیوم بی اثر به عنوان فاز متحرک،
مکانیس??م ج??ذب ب??رای جداس??ازی ی??ک ت??رکیب از ی??ک مخل??وط با سرعت جریان ثابت استفاده شد .عصاره خام م??ورد تجزی??ه و
اس??ت .جداس??ازی ب??ر اس??اس ب??رهمکنش بین ترکیب??ات در ف??از
[]4،17،23
تحلیل ابتدا با متانول رقیق شده و به سیستم تزری??ق ش??د.
مخلوط و ساکن است .در جداسازی ترکیبات ب??ا وزن مولک??ولی مزایای این روش شامل توانایی جداسازی مواد گیاهی آل??وده ب??ه
کم کاربرد دارد ??]1[ .فاز ثابت معموالً 100گرم سیلیکاژل اس??ت آفتکشهای فرار اس??ت ک??ه در آزمایشه??ای کن??ترل کیفیت ن??یز
که در آب مقطر حل می شود ت??ا دوغ??اب ایج??اد ش??ود .در همین .استفاده میشود
قاب??ل اس??تفاده اس??ت .س??پس Sephadexحال ،در برخی م??وارد )(5 این تکنی??ک از مکانیس???م ج??ذب ب??رای _ HPLC
محلول سیلیکا ژل را در یک صفحه شیش??ه ای ب??ه ابع??اد × 20 دستیابی به جداسازی موثر استفاده می کند .برای پارتیشن بندی
20سانتی متر ریخته تا ضخامت 1.5میلی م??تر ب??ه دس??ت آی??د. ترکیب??ات آلی و مع??دنی مناس??ب اس??ت .ف??از متح??رک ی??ک حالل
س??پس ب??ه م??دت 1س??اعت در دم??ای 105درج??ه س??انتیگراد مناسب است ،در حالی که فاز ثابت ذرات جامد است ک??ه محکم
نگهداری می شود تا جامد شود ??]1،23[ .پس از آن 10 ،میلی لی?تر به هم متصل شده اند .جداسازی از طری??ق ب??رهمکنش ترکیب??ات
عصاره به قسمت پایین صفحه تزری??ق می ش??ود و اج??ازه پخش [
موج??ود در مخل??وط ب??ا ذره جام??د ف??از س??اکن آغ??از می ش??ود.
می شود .س?پس ص?فحه ب?ا دقت وارد محفظ?ه جداس?ازی ح?اوی ???]1،4،5،16،23این دس??تگاه از ی??ک مخ??زن حالل ،انژکت??ور نمون??ه،
فاز متحرک می شود و اجازه می دهد به مدت 30دقیق??ه بمان??د. و آشکارساز دیود تش?کیل ش?ده اس??ت HPLC .پمپ فشار ،لوله
ترکیبات موجود در مخلوط بر اساس حاللیت ب??ه م??وقعیت ه??ای جدا HPLCفرآیند با تزریق مخلوطی که قرار است در انتهای
مختلف روی صفحه صعود می کنن??د .ه??ر ت??رکیب ج??دا ش??ده ب??ا شود آغاز می شود .عالوه بر این ،یک حالل مناسب در مخزن
محاسبه ضریب تاخیر آن که عبارت است از نسبت مسافت طی حالل ریخته می شود .اکنون شیر آب باز می ش??ود ت??ا حالل ب??ه
شده توسط ترکیب به مسافت طی شده توسط حالل و مقایس??ه آن سمت پایین حرکت کند و سپس توسط یک پمپ فشار فش??ار داده
با یک ترکیب شناخته شده شناسایی می شود ?]1،5،23،24[ .ترکیبات می شود تا با نمونه تزریق شده مخلوط شود .در نهایت ،مخلوط
لکهدار در موقعیته??ای مختل??ف ب??ا اس??تفاده از ک??اردک خ??رد ب??ه آشکارس??از دی??ود منتق??ل ش??د ،ک??ه ترکیب??ات را ج??دا ک??رد،
میش??وند و در نه??ایت ب??ا اس??تفاده از حالله??ای مختل??ف دوب??اره ض??ایعات را ح??ذف ک??رد و محت??وای نه??ایی را ب??ه واح??دهای
اس??تخراج میش??وند ??]1،23[ .مزای??ای آن عبارتن??د از زم??ان کم??تر، []1،4،5،16،23
پردازش پمپ کرد.
ایج??اد لک??ه ه??ای ش??فاف ،و پای??داری در براب??ر اس??ید ب??ه عن??وان
.حالل
من تکنیک های دندانی
)(3 این ش??امل اس??تفاده از چن??دین مکانیس??م مانن??د CC روش ه???ای مختلفی در شناس???ایی ترکیب???ات عص???اره گیاه???ان
کروم??اتوگرافی ج??ذب ،غرب??ال مولک??ولی و تب??ادل ی??ونی ب??رای دارویی اس?تفاده ش?د .این ش?امل تش?خیص گ?روه ع?املی ،وج?ود
دستیابی به نتیجه مطلوب است ??]1[ .ستون از یک لوله شیش?ه ای پیوندها و حلقه های متعدد ،آرایش هیدروژن و کربن و همچنین
بلند (قطر 50-5میلی متر ،طول 5سانتی متر تا 1متر) با یک توض??یح کام??ل س??اختاری ب??ود ???]1،4،10،17،23[ .تکنیکه??ای م??ورد
شیر آب و فیلتر پشم شیشه در پایین تشکیل شده است .عالوه بر طیفس??نجی ف??رابنفش (MS)،استفاده شامل طیفسنجی جرمی
این ،سیلیکاژل ،آلومینا ،سلولز یا سفادکس به عن??وان ف??از ث??ابت و (NMR)،طیفس??نجی تش??دید مغناطیس??ی هس??تهای (UV)،
اس??تفاده می ش??ود ،در ح??الی ک??ه ف??از متح??رک م??ایع اس??ت .این .است ) (IRطیفسنجی مادون قرمز
فرآیند با بسته بندی 30گرم ژل سیلیکا ( )70/35در یک ستون
شیش??ه ای ش??فاف (ط?ول 80س??انتی م??تر ،قط??ر 5س??انتی م??تر) ام اس این روش در شناس??ایی ترکیب??ات ب??ر اس??اس س??اختار )(i
بدون وارد کردن حباب هوا آغاز می شود .پس از آن ،عص??اره شیمیایی و وزن مولکولی مفید اس?ت .ه?دف تع?یین ت?والی و
ای که باید پارتیشن بندی ش??ود از ب??اال اض??افه می ش??ود .ح??داقل شناسایی ترکیب ناشناخته در یک مخلوط است .م??وادی ک??ه
ابت??دا ب??ه عن??وان ی??ک ف??از متح??رک )هگزان ( n-حالل قطبی معم???والً شناس???ایی می ش???وند ش???امل اولیگونوکلئوتی???دها و
اضافه شد و اج??ازه داده ش??د ب??ه م??دت 1س??اعت در ی?ک س??تون پپتی??دها هس??تند ???]1،4،10،17،23،25[ .این فرآین??د ب??ا بمب??اران ی??ک
هگ?زان n-بسته بماند .پایین ستون باز شد و بخش های مختلف مولکول آلی با یک الکترون آغاز می شود و آن را به ی??ون
های باردار بسیار پرانرژی تب??دیل می کن??د .س??یگنال ب??رای
2 Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
eVاولین بار با استفاده از انرژی یونیزاسیون الکترون 70 قرار گرفتند و در بیشتر موارد ،فعال بودن آنها مشخص شد .ب??ا
شناسایی شد .همچ??نین ،طی?ف ه?ای نمون??ه ب??ه عن?وان پی?ک این وج??ود ،م??یزان م??وفقیت و ص??حت این یافتهه??ا ب??ه دقت در
درصد شناسایی و ثبت می شوند .ترکیبات ب??ر اس??اس ج??رم انتخاب حاللها ،انتخاب و اجرای صحیح روشهای اس??تخراج،
مولکولی نسبی و وزن مولک??ولی آنه??ا شناس??ایی می ش??وند. غربالگری فیتوشیمیایی ،شکنش و تکنیکهای شناسایی بس??تگی
این را می توان با ترسیم جرم یون ه??ای تک??ه تک??ه ش??ده در دارد .در نه???ایت ،درک ص???حیح و اج???رای این تکنی???ک ه???ا
[]1،4،10،17،23،25
برابر بارهای یون منفرد به دست آورد. ضروری اس??ت .پیش??رفت و اص??الح این روش ه??ا ب??ه ص??ورت
اطالعات فراوانی در م??ورد مولک?ول ، MSقابل ذکر است .دوره ای باعث تسهیل فرآیندهای تحقیق و بهبود نتیجه می شود
ه???ای آلی ارائ???ه می ده???د .بن???ابراین یکی از روش ه???ای تصدیق
اس??????تاندارد در ف??????رآوری گیاه??????ان دارویی ،ت??????رکیب تش??کر وی??ژه م??ا از کارکن??ان بخش فارم??اکولوژی و درم??ان و
استMS/HPLC ]4،17،23،25[ . .دانشکده علوم دارویی دانشگاه بایرو ،کانو ،نیجریه است
این روش ب???رای تجزی???ه و تحلی???ل کمی و کیفی _ (ii) UV
.حمایت مالی و حمایت مالی صفر
ترکیب????ات موج????ود در عص????اره گی????اه مناس????ب اس????ت.
متابولیته??ای ثانوی??ه مختلفی مانن??د فنله??ا ،آنتوس??یانینها، تضاد عالقه
تاننه??ا و رنگه??ای پلیم??ری را میت??وان در فرکانسه??ای تداخل منافع وجود ندارد .ار ارجاعات
خاصی شناسایی کرد .محت??وای فنلی ک??ل و س??ایر مت??ابولیت
های ثانویه را می توان با استفاده از این روش ایج??اد ک??رد. 1. Ingle KP، Deshmukh AG، Padole DA، Dudhare MS،
فرک??انس ه??ای خ??اص ب??رای شناس??ایی فالونوئی??دها (320 Moharil MP، Khelurkar VC. فیتوکمیکال ها :روش ه??ای
ن??انومتر) ،ترکیب??ات فنلی ( 280ن??انومتر) ،آنتوس??یانین ه??ا اس??تخراج ،شناس??ایی و تش??خیص ترکیب??ات زیس??ت فع??ال از
.استفاده شد ؛ . J Pharmacogn Phytochem 2017:6عصاره های گیاهی
و اس??یدهای فنولی??ک ( 360ن??انومتر)) [ .ن??انومتر (520 6-32.
]4،10،23،25
2. ازوانیدا ن.ان .مروری بر روش های اس??تخراج در گیاه??ان
)(iii این تکنی??ک بیش??تر ب??ه خ??واص ف??یزیکی _ NMR Medدارویی ،اص??ل ،ق??درت و مح??دودیت .گیاه??ان معطر
مولکول فعال زیستی مانند تع??داد و آرای??ه اتم ک?ربن ،وج?ود .؛ 20154:196
ایزوتوپ های کربن ،اتم هیدروژن و پروتون ها توج??ه می 3. مفهوم استانداردسازی ،استخراج و Pandey A, Tripathi S.
.کند راهبرده??ای غرب??الگری پیش فیتوش??یمیایی ب?رای داروه??ای
مرتب شده اند aهمچنین توضیح داد که چگونه اتم ها در .؛ . J Pharmacogn Phytochem 20149-2:115گیاهی
مولکول []1،4،10،17،23،25 4. دوغ????ری ج .فیتوکمیک????ال ه????ا :روش ه????ای اس????تخراج،
)(iv این روش س??عی می کن??د گ??روه ه??ای ع??املی _ IR ساختارهای اساسی و نح?وه عم?ل ب?ه عن?وان عوام??ل ب??القوه
موجود در یک ترکیب را ارزیابی کند .دانش گ??روه ع??املی ش??یمی درم??انی ،فیتوکمیک??ال ه??ا -چش??م ان??دازی جه??انی از
به تعریف خواص ف??یزیکی و ش??یمیایی ی??ک ت??رکیب کم??ک نقش آنها در تغذیه و س??المت .در :دی??دگاه جه??انی نقش آنه??ا
می کن??د .همچ??نین پیون??دهای منف??رد ،دوگان??ه و چندگان??ه از . Venketeshwer R. Editor. InTech; 2012.در تغذیه و سالمت
طری??ق این فرآین??د شناس??ایی می ش??وند ????]1،4،5،10،23،25[ .این آخرین بازدید 10ژوئن[ : www.intechopen.com.موجود از
تکنیک شامل عبور یک ترکیب آلی از ت??ابش م??ادون قرم??ز 2019].
است که در فرکانسهای خاصی جذب میش??ود .نمونهه??ای 5. Sasidharan S، Chen Y، Saravanan D، Sundram KM، Yoga
مایع با استفاده از صفحات کلرید س??دیم شناس??ایی میش??وند، اس?تخراج ،جداس?ازی و شناس?ایی ترکیب?ات فع?ال Latha L.
در حالی که نمونهه??ای جام??د ب??ا اس??تفاده از برومی??د پتاس??یم . Afr J Tradit Complement Alternزیستی از عصاره گیاهان
آس??یاب ش??ده و فش??رده ش??ده ب??ه ی??ک گلول??ه ن??ازک تع??یین .؛ Med 201110-8:1
میشوند .نتیجه به عنوان یک طیف که درصد عب??ور اس??ت 6. Rungsung W، Ratha KK، Dutta S، Dixit AK، Hazra J.
ثبت می شود .در نهایت ،طی?ف تجزی??ه و تحلی??ل می ش?وند.
. World J Pharmمتابولیتهای ثانویه گیاهان در کشف داروها
پی??ک ه??ای بدس??ت آم??ده در تع??داد م??وج معین ب??ا مرج??ع
.؛ Res 201513-4:604
[]1،4،5،10،23،25
استاندارد مقایسه می شوند.
7. وضعیت فعلی دانش گیاهان مورد استفاده در Sofowora A.
طب سنتی در غرب آفریق??ا :ی??ک رویک??رد پزش??کی و ی??ک
ج نتیجه گیری .؛ . J Ethnopharmacol 198018-2:109ارزیابی شیمیایی
چندین کار بر روی این گیاه دارویی انج??ام ش??ده اس??ت ی??ا ب??رای 8. دوک س???و FE، .اولوفس???دوتر ام ،دای???ان AM،ریمان???دو
بررسی و اثبات ادعای گزارش شده فعالیت بیولوژیکی یا برای جس??توجوی آللوش??یمیایی ب??رنج :نم??ونهای از جداس??ازی
تقلی??د از اس??تفاده دارویی س??نتی آن ب??ر اس??اس بررس??ی ق??ومی .؛ . Agron J 200120-93:16هدایتشده با سنجش زیستی
پزشکی .تعداد زیادی از گیاهان دارویی ب??ا م??وفقیت اس??تخراج، 9. تکنیک های ارزیابی Das K، Tiwari RK، Shrivastava DK.
تک???ه تک???ه و جداس???ازی ش???ده ان???د .عالوه ب???ر این ،ترکیب???ات محصوالت گیاهی دارویی به عنوان عوامل ضد میکروبی:
بهدستآمده از نظر فعالیت بیولوژیکی یا دارویی مورد آزمایش
Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020 3
از[ ]، IP: 80.32.132.150در تاریخ سه شنبه 14دسامبر http://www.jpbsonline.org 2021دانلود رایگان
؛ J Med Plants Res 2010روش های فعلی و روندهای آینده 25. MVS MK، Talluri VP، Rajagopal SV. خالص س??ازی و
11-4:104. شناس??ایی ت??رکیب فع??ال زیس??تی از عص??اره مت??انولی ب??رگ
10. آلتمیمی ع ،لخساس???ی ن ،به???ارلوئی ع ،واتس???ون دی جی، ؛ Millingtonia hortensis linn . Int J Pharm Bio Sci 2015
الیت ف??وت دی .فیتوکمیک??ال ه??ا :اس??تخراج ،جداس??ازی و 58-6:348.
شناس??ایی ترکیب??ات زیس??ت فع??ال از عص??اره ه??ای گی??اهی.
.گیاهان 2017؛ 6:42
11. بررسی استخراج گیاهان دارویی برای Majekodunmi SO.
.؛ . MRJMMS 20157-3:521تحقیقات دارویی
12. Tiwari P، Kumar B، Kaur M، Kaur G، Kaur H.
. Intغرب??الگری و اس??تخراج فیتوش??یمیایی :ی??ک بررسی
.؛ Pharm Sci 2011106-1:98
13. محص??والت گی??اهی ب??ه عن??وان عوام??ل ض??د Cowan MM.
.؛ Clin Microbiol Rev 199982-12:564میکروبی
14. مایعات ی??ونی ب??ه عن??وان حالل س??بز در عص??اره Bhan M.
. Int J Adv Res Dev 2017; 2:10-2.گیری گیاهی
15. ال??ف جی.ان .ب??رای غرب??الگری و جداس??ازی اج??زای ض??د
Jمیکروبی از گیاهان از کدام عصارهگیر باید استفاده کرد؟
.؛ Ethnopharmacol 19988-1 :60
16. Ujang ZB، Subramaniam T، Diah MM، Wahid HB،
تکه تک??ه ک??ردن و . Appleton D.عبدهللا ب.ب ،.راشد ع.ع
خالص سازی زیست فعال طبیعی به دست آمده از عص??اره
. J Biomaterبا فعالیت مهار مالنین Alpinia conchigeraآبی
.؛ Nanobiotechnol 201372-4:265
17. حس????ین م.ع ،الحض????رمی س.س ،ولی ع.م ،الری????امی ق،
الص???باحی ج .جداس???ازی ،تفکی???ک و شناس???ایی ترکیب???ات
رشد Mentha piperita Lشیمیایی از عصارههای خام برگ
. Asian Pac J Trop Biomedیافته در س??لطان نش??ین عم??ان
2014; 4:S368-72.
18. ه???اربورن جی بی .روش ه???ای فیتوش???یمیایی :راهنم???ای
تکنی??ک ه??ای م??درن تجزی??ه و تحلی??ل گیاه??ان .وی??رایش 3
;: Thomson Scienceنیویورک ،نیویورک؛ لن??دن ،انگلس??تان
.ص1998. 9-21 .
19. غربالگری فیتوشیمیایی اولیه Beena P، Rajesh KJ، Arul B.
. Jدر طب س??نتی ب??رای مح??افظت از کبد Cicer arietinum
.؛ Innov Pharm Biol Sci 20169-3:153
20. کت??اب درس??ی فارم??اکوگنوزیTrease GE، Evans WC. .
ویرایش سیزدهم لن??دن ،انگلس??تان؛ تورنت??و ،کان??ادا؛ توکی??و،
.ص: Bailiere Tindall; 1989. 1-200 .ژاپن
21. والیس تی .کت???اب درس???ی فارم???اکوگنوزی .دهلی ،هن???د:
.ص CBS. 1989. 549-356 .ناشران و توزیع کنندگان
22. مقایسه حاللهای مختلف برای پتانسیل Dhawan D, Gupta J.
Datura Metel . Int Jاستخراج فیتوشیمیایی از برگهای گیاه
.؛ Biol Chem 201722-11:17
23. تکنی??ک ه??ای عم??ومی در آن??الیز Banu KS، Cathrine L.
.؛ . Int J Adv Res Chem Sci 201532-2:25فیتوشیمیایی
24. کروماتوگرافی :مبانی و کاربرد تکنیک های Heftmann F.
کروماتوگرافی و الکتروفورتیک .وی??رایش پنجم آمس??تردام،
.ص: Elsevier; 1992. 5-281 .هلند
2 Journal of Pharmacy and Bioallied Sciences ¦ Volume 12 ¦ Issue 1 ¦ January-March 2020