Professional Documents
Culture Documents
همزمان استخراج و تصفیه از آلکالوئیدها از جانب سوفورا طعم می دهد آیت .توسط به کمک
مایکروویو Fآبدار دو فاز استخراج با اتانول /آمونیاک سولفات سیستم
ب،ج⇑،
ج
،شیائوکین لیو ب _ کیانگ وان ب _ شوهائو وو ب _ پنگ لیو _ وی ژانگ یک ،دن زو ب _ هواجون پنکه
ج
جیمز ز .زبانه
آ مدرسه از پایه ای دوره های آموزشی ،گوانگدونگ دارویی دانشگاه ،گوانگژو ،510006چین
ب دانشکده از داروخانه ،گوانگدونگ دارویی دانشگاه ،گوانگژو ،510006چین
یونایتد پادشاهی WV1 1LY،ج مدرسه از داروسازی ،دانشکده از علوم پایه و مهندسی ،دانشگاه از ولورهمپتون ،ولورهمپتون
n f oتFی FمFن Fج Fل Fه من rآF آ Fج Fتی rآ Fب Fس FتFیF
:مقاله تاریخ
یک روش سریع و موثر برای ادغام استخراج و تصFFفیه بFFرای آلکالوئیFFدها از سFFوفورا سFFنت آیت.
اخذ شده 16دسامبر 2013
بر اسFاس رانFدمان بFاال اسFتخراج بFه ) (MAATPEتوسط استخراج دو فازی آبی به کمک مایکروویو
اخذ شده که در تجدید نظر شده
سیسFFتم دو فFFاز آبی (ATPE).و اثFFر اختالط زدایی دو فFFاز آبی اسFFتخراج ) (MAEکمFFک مFFایکروویو
است فرم 11نوامبر 2014پذیرفته
اتانول /سولفات آمونیFFاک از انتخFFاب شد هفت تFFرکیب از سیسFFتم هFFای اتFFانول /نمFFک ،و (ATPS)،
شده 13نوامبر 2014 خواص استخراج آن به تفصیل مورد بررسی قرار گرفت .کلید عوامل ،برای مثال ،را ترکیبات از
در دسترس برخط 6دسامبر 2014 حالل به مواد نسبت ،و را استخراج درجه حFFرارت بFFرای بهینFFه سFFازی شFFرایط تجFFربی بFFا ATPS،
:کلید واژه ها انتخاب شدند .بر اساس نتایج آزمایش تک عاملی .شرایط بهینFFه ) (RSMاستفاده از روش سطح پاسخ
آبدار دو فاز سیستم های به ( (NH ) SO 18%اتانول ( %28وزنی/وزنی) و ATPS:شده نهایی عبارت بودند از موقعیت های 4 2 4
نسبت حالل به ماده ،60:1درجه حرارت دمای 90درجه سانتیگراد ،زمان استخراج )،وزنی/وزنی
کمک مایکروویو آبدار دو فاز
برتر بود .استفاده كردن آ تنها حالل ،نه MAEنسبت به 5. MAATPEدقیقه و قدرت مایکروویو 780وات
استخراج
آلکالوئیدها فقط که در استخراج بازده ولی همچنین کFه در ناخالصی محتFوا .عالوه بFر این ،مقایسFه کFرد با را
آیتSophora Flavescens . نشان داده شده کمتر ناخالصی ها ،آ بهFFتر ، MAATPکه در را دو قدم حالت ATPEو MAEترکیبی از
مکانیسم ها عملکFFرد ( 78/63 F± 45/0میلیگFFرم بFر گFFرم) و بازیFFابی بFFاالتر ( 09/92 F± 14/0درصFFد) در
بFFرای توضFFیح MAATPEیک مدل استخراج چند فازی پیوسته loids.استخراج و خالصسازی قلیایی
فقFFط نمی توانFFد ATPSنشFFان داد کFFه تعامFFل بین مFFایکروویو و . MAATPEاستخراج پیشنهاد شد سازوکار
باعث ایجاد گیاه شFFود سلول پFFارگی ولی همچFFنین سFFرعت بخشFFیدن مخلFFوط کFFردن ،در حFFال بهبFFود
MAATPEجابجایی عظیم از جانب جامد-مایع استخراج به مایع – تصFFفیه مFFایع روشهFFای سادهشFFده
نیز به کاهش وقوع ضرر کمک کردند استخراج بهره وری ،و کFFاهش ناخالصی به هFFدف اجFFزای
تشکیل دهنده
همه حقوق رزرو شده BVالزویر © 2014
.است
1. معرفی یک طب سنتی چینی ،معموالً برای درمFان هپFFاتیت ویروسFی اسFتفاده می شFFود ،سFرطان ،میوکFاردیت
ویروسFFی ،خFFونریزی گوارشFFی و پوست بیمFFاری هFFایی ماننFFد اگزمFFا ،کولFFپیت و پسFFوریازیس [. F ]1
سوفورا طعم می دهد آیت .همچنین با نام کوشن ،متعلق به لگو -گیاه کوچک سوفورا .به عنوان آلکالوئیدها و فالونوئیدها هستند گزارش شFFده است را عمFFده فعFFال اجFFزای تشFFکیل دهنFFده از این گیFFاه؛
آلکالوئیدها ،که در خاص ،دارند جذب کرد افFFزایش می یابد توجه به آنها بFFاال دارویی فعFFالیت هFFا،
طعم می دهد آیت . F ]20-6،17-2[ .اکسFFی -تشک و تشک هسFFتند S.ریشFFه ،بFFرگ هFFا و گFFل هFFای
که نمایشگاه آرام بخش ،ضد درد و دیگر مرکزی عصبی سیسFFتم بFFازداری اثFFرات مانند خFFوب
شناخته شده مانند را اصلی آلکالوئیدها که در را عصاره ،و دارند بوده بFFه طFور گسFترده ای اسFFتفاده
مانند تب بر ،ضد تومور ،و ضد میوکارد اقدامات [ . ]16-1بنابراین دور ،بیشتر نسبت به .تا
شده مانند اولیه عناصر که در فرآورده های دارویی به اشکال مختلف ماننFد شFFیاف رای هFFا ،کپسFول
20آلکالوئیدها دارند بوده جدا شده از جانب
ها ،قرص ها و کرم ها [ . F]24-1،21عالوه بر این ،آلکالوئیدها همچنین به دلیل وجFFود حشFFرات بFFه
عنوان آفت کش سبز در کشاورزی استفاده می شود .اثFرات کشFنده [ . F]25،26تقاضFای زیFاد بFرای
* متناظر نویسنده در :دانشکده از داروخانه ،گوانگدونگ آلکالوئیFFدها در بFFازار کت رانFFدن بFFه عالوه تحقیقFFات هFFدف در را بهبFFود از مFFواد و روش ها بFFرای
.دارویی دانشگاه ،گوانگژو ،510006چین استخراج و تصفیه
استخراج می شFFوند روش هFFای con-معموالً از طریق S. flavescens Ait.آلکالوئیدها در
مرسFFوم ،ماننFFد اسFFتخراج خیسFFاندن بFFا حالل ،رفالکس حFFرارتی اسFتخراج ،و اسFتخراج سوکسFله [
، F ]1،27که مشمول قابل توجه کمبودها ،شامل را طوالنی روند ،را باال هزینه حالل هFFای آلی،
بازیافت کم و باقیمانده حالل های سمی در محصوالت و غFFیره .رویکردهFFای مختلFFف ،از جملFFه
اولتراسونیک ،مایکروویو ،سیال فوق بحرانی و یونی مایع جاذب بوده اند
http://dx.doi.org/10.1016/j.seppur.2014.11.014 1383-5866/
Vباالی
پایین a V
mT
× 100% ð2 :و را مدل بود توضیح داد توسط را ذیل درجه دوم معادله
¼ ð % Þبهبود þm
mT Þ
B
X
3 3
X ایکس
3 3
ایکس
است را جمع تعداد از آلکالوئیدها استخراج شده است از جانب را گیاه m eجایی که
Y ¼b0þ b iX i þ b ii X þ
2
b ij X i X j ð3
i
Þ
m Bاست را تعداد از آلکالوئیدها استخراج شده است که در را باال فاز ،و m T؛) ( mمواد
.است را تعداد از آلکالوئیدها که در را پایین فاز
من من j ¼ i þ 1من ¼ 1
¼ ¼
1 1
هستند ورودی متغیرها ،که بر واکنش X i _ X jجایی که
هستند را ضرایب از را خطی ،درجه دوم ،و b ijو _ ، b iiاست را رهگیری ب من Y ; b 0تابع
2.6. HPLC تحلیل و بررسی .را اثر متقابل مدت ،اصطالح ،به ترتیب
جدول 2
را اثر از را تمرکز از اتانول بر استخراج از آلکالوئیدها
C )(%
EtOH C )(% 10 دی جی (
(NH4) 2SO4
مخلوط کردن فاز نسبت آ ) (mg/gبازده بهبود )(%
)) 4 (s/cm ⁄
زمان (ها)
اکسی جمع اکسی جمع
ماترین ⁄⁄آلکالوئیدها ماترین ⁄⁄آلکالوئیدها
20 20 48.44 137 0.48 3.17 45.42 14.17 21.91
22 20 54.64 66 0.72 14.50 48.69 67.09 76.10
25 20 60.16 40 0.94 20.47 61.91 85.18 90.43
28 20 64.14 23 1.16 18.47 54.63 87.11 91.58
30 20 85.48 15 1.38 17.35 47.1 91.17 93.74
*
.اینجا است را رسانایی تفاوت بین را باال و پایین فاز D k
⁄⁄
.آی تی نشان می دهد جمع آلکالوئیدها ،شامل اکسی ماترین آنها معنی است یکسان مانند جدول 3
جدول 3
را اثر از را تمرکز از بر استخراج از آلکالوئیدها
(NH 4 ) 2 SO 4
)C (NH4) 2SO4 (% )C EtOH (% 10 دی جی ( مخلوط کردن فاز نسبت آ ) (mg/gبازده بهبود )(%
)) (s/cm
4الف
زمان (ها)
اکسی جمع اکسی جمع
ماترین ب
آلکالوئیدها ماترین ب
آلکالوئیدها
18 25 58.15 64 1.05 13.47 50.70 68.52 73.39
20 25 59.42 41 0.95 17.81 60.45 80.63 88.72
22 25 61.18 33 0.82 16.98 58.95 80.82 88.41
24 25 63.08 32 0.63 16.31 53.96 80.07 82.02
آ
.اینجا است را رسانایی تفاوت بین را باال و پایین فاز
Dk
سوفوریدین ،ماترین و سوفوکارپین ، N-oxysophocarpine،ب آی تی نشان می دهد آلکالوئیدهای کل شامل اکسی ماترین
1
جدول 5
برای واکنش سطح مدل از را استخراج بازده از جمع آلکالوئیدها ) (ANOVAتحلیل و بررسی از واریانس
منبع مجموع از مربع d منظور داشتن اف ارزش P -value قابل توجه
ها مربع الف
f
40
3.2. فاز نمودارها از را انتخاب شد ها ATPS /(NHشکل .1نمودارهای فاز سیستم های اتانول 4 ) 2 SO 4 و اتانول /K 2
5
80
Partion coeficient
4
60
Recovery
3
40
2
20 1
0
0
/(N Hاتانول ) 2S
/Kاتانول /Kاتانول
4
/شکل .2 .را بازیابی ها (آ) و تقسیم بندی ضرایب ک (ب) از اکسی ماترین و تشک که در اتانول ( NH4 ) 2SO4 / Kو اتانول 2 HPO 4 سیستم های زیر
.را شرایط از ( %25وزن/وزن) نمک و %25اتانول ( %وزن/وزن) در اتاق درجه حرارت
بود به تصویر کشیده شده است ( شکل 3الف) مستقر بر را ابر و منحنی / ( NH4 ) 2SO4اتانول
فرافکنی بیرون از جانب شکل( 3 .الف) .شکل( 3 .ب) نشان داد که را نسبت فاز z ،را محور
های اشباع در این نمودار فاز ،یک آبی شفاف دو منطقه فاز در مقایسه با دو منطقه دیگر نشFFان
داده شد ،یعنی منطقه تک فاز و ناحیه اشباع .را نقطه عطف بین تک فاز و آبی دو منطقه فاز در ATPSوابسته بFFود .یافته هFFای آزمFFایش اسFFتخراج نشFFان داد که ATPSبه شدت به ترکیبات a
نقطه ابر تعیین شد .نقطه عطف از دو فاز آبی تا ناحیه اشباع ثبت شد زمانی که بارش نمFک مشFاهده را در منطقه 1.2-0.7نشان داد که آسان تر بود برای عملیات های بعدی (مثالً دمیکس aنسبت فاز
شFFد .داده هFFای جمعی نشFFان داد که اتFFانول غلظت ها از جFFانب ( ٪11.4وزن/وزن) به ٪54.1 کردن بین باال ،گیاه ،و فازهای پایین ،فازهای مربوط به جمع آوری ،فیلتراسیون و غیره) پس از
غلظت از ( ٪2.1وزنی) تا ( ٪30.6وزنی/وزنی) بود مناسب ( (NH 4 ) 2 SO 4وزن/وزن) و MAATPE.آن
.برای استخراج ATPS،به طور خالصه ،به دلیل خواص اسFFتخراج بهFFتر آن ،مانند محFFدوده وسFFیع تFFر تشFFکیل
-میتوانست بودن شناسه ATPSکه در را ترکیبی از فاز نسبت یک ،بهتر نسبت فاز مناسب تر ،را باالتر توانایی از بهبود ،و را بزرگتر تقسیم بندی ضFFریب مقایسFFه کFFرد
) ( Rما اخیر تحقیق و بررسی نشان داد که را بهبود MAATPE.مشخص شده است برای سیسFFتم مانند آ حالل تهویه بFFرای اسFFتخراج از / ( NH4 ) 2SO4هFFا ،را اتFFانول ATPSبه دیگر
با اتانول تمرکز ATPSچه زمانی ATPE [52] .بود نه را فقط واکنش به را انتخاب از اعمال -کاتیون که در به عالوه تحقیقات MAATPEآلکالوئیدها است بیشتر سازگار به
تمرکز از ( %18وزن/وزن) بود استفاده شده برای (NH 4 ) 2 SO 4از ( %38وزن/وزن) و
برای به دست آوردن جداسازی فاز در زیر بسیار زیاد بود وجود aرا نسبت فاز MAATPE، 3.5. بهينه سازي از MAATPE شرایط
داشتن آ کوچکتر فاز (NH 4 ) 2 SO 4 ، ATPS،مواد گیاهی پس از تنظیم غلظت از اتانول و
نسبت یک ،آ بهتر استخراج و غنی سازی میتوانست بودن به دست آورد مانند خوب مانند آ
کاهش استفاده از اتانول و عملیاتی سهولت برای این دلیل ،آ سه بعدی نمودار بود کشیده شده (
][1 ATPSبهينه سازي از ترکیبات از را
شکل 3ب) توسط اضافه كردن را فاز نسبت آ مانند مستقر بر را راهنمایی -با توجه به نسبت فاز ATPS،که در هدایت آ سیستماتیک مطالعه از
در غلظت اتFFانول یFافت شFد ATPS .نوار وسFیعی از ترکیبFFات aذکر شده در باال ،مشخص شد که
آ تک عاملی آزمایش ٪ (w/w).غلظت (NH 4 ) 2 SO 4 24-18غلظت ( ٪30-20وزنی) و
بود انجام بیرون و را نتایج
50
20
Ethanol concentrtion
40
15
30 10
/شکل .3 .را فاز نمودار از اتانول ( NH4 .و آن توزیع از فاز نسبت آ (ب) در اتاق درجه حرارت آ
) ( ) 2SO4
1
در جFFدول 2و 3ارائFFه شFFده اسFFت .غلظت اتFFانول 25درصد بود انتخFFاب شد ناشFFی از به را بFFاال
مانند شکل 7 .نشان می دهد ،آ باال بازده و آ بFه طFور نسFبی بFاال بهبFود از اکسFیمFاترینوتوتFالدر 100
بازده و به طور نسبی باال بهبود که در استخراج اکسی ماترین و آلکالوئیدهای کل این انتخFFاب نFFیز
درجه سانتیگراد یFافت شFد .دمFای بFاالتر (بFاالی 100درجFه سFانتیگراد) بFاعث کFاهش قابFل توجFه
به نمFFایش گذاشFFته آ فFFاز جFFیره آ کFه در وسط منطقFFه ،با آ بFFه طFFور نسFFبی زمFFان دمیکس کFFردن
از 20درصد (وزنی/وزنی) انتخاب شد که (NH 4 ) 2 SO 4سریعتر به طور مشابه ،غلظت عملکرد کل شد .آلکالوئیدها به دلیل تغییر در پایداری شیمیایی ،برجسته کردن تیکوالر حساسFFیت از
.مطابق با نتایج است را فاز جیره آ و مخلوط کردن زمان .اکسی ماترین به باال دما []58
نتایج آزمایش تک عFFاملی می توانFFد خالصFه شFFود افFزایش یافتFه است مانند بFه شFرح زیFر
؛)% (w/wبنابراین (NH ) 20 ،است :اتانول( %25 ،وزن/وزن) و 4 2 4
را اندازه از ماتریس مواد مش ;80را حالل بFFه مFFواد نسبت از ;50:1را مFFایکروویو قFFدرت،
را اثر از مایکروویو قدرت و استخراج درجه حرارت 3.5.3. 780وات; را استخراج درجه حرارت 100 ،درجه سFFانتیگراد؛ و را اسFFتخراج زمFFان از 5دقیقFFه.
شکل 6 .نشان می دهد را اثر از را مایکروویو قدرت بر را بازده و بازیابی اکسی مFFاترین ترکیبات انتخاب شFده است بFود کFه در خط با را مقیFFاس هFFای از ، ATPSدر میان اینها شرایط
و آلکالوئیدهای کل عملکرد Fباال و بهبFود بFود بFه دسFت آورد در را قFFدرت از 780دبلیو بFFا این RSMپیش تعیین شده آنها متغیرهFFایی بودنFد کFه بFه هم مرتبFط بودند اسFتخراج و نیFاز بFه تأیید
حال ،را اثر قدرت مایکروویو بر عملکرد و بازیابی بود که نیست قابFFل توجه کFFه در کFFاربردی بیشتر است .حالل به مواد نسبت بود ثابت شد بستن به را باال مقیاس ،ترک اتاق برای
.مقررات
Total alkaloids Oxymatrine
70 )(a
100
Total alkaloids Oxymatrine )(b
60
90
50
80
Recovery
40
Yied
30 70
20
60
10
50
0 40 60 80 100 120 40 60 80 100 120
ذره اندازه (مش) ذره اندازه (مش)
شکل .4 .را اثر از را ذره اندازه بر را بازده (آ) و بهبود (ب) از اکسی ماترین و جمع آلکالوئیدها
60 90
50
80
Recovery
40
Yied
30 70
20
60
10
0 50
10:1 20:1 30:1 40:1 50:1 60:1 10:1 20:1 30:1 40:1 50:1 60:1
) (ml:gحالل به ماده نسبت ) (ml:gحالل به ماده نسبت
شکل .5 .را اثر از حالل به ماده نسبت بر را بازده (آ) و بهبود (ب) از اکسی ماترین و جمع آلکالوئیدها
1
70 )(a Alkaloids Oxymatrine 100 )(b Alkaloids Oxymatrine
60
90
50
80
Recovery
40
Yield
70
30
60
20
10
750 800 850 900 950 1000 1050 1100 1150 50
750 800 850 900 950 1000 1050 1100 1150
) (Wمایکروویو توان
) (Wمایکروویو توان
شکل .6 .را اثر از مایکروویو قدرت بر را بازده (آ) و بهبود (ب) از اکسی ماترین و جمع آلکالوئیدها
60
90
50
80
Recovery
40
Yield
70
30
20 60
10 50
60 70 80 90 100 110 120 60 70 80 90 100 110 120
شکل .7 .را اثر از استخراج درجه حرارت بر را بازده (آ) و بهبود (ب) از اکسی ماترین و جمع آلکالوئیدها
Alkaloids Oxymatrine
70 )(a 100 )(b Alkaloids Oxymatrine
60 95
50 90
Recovery
40 85
Yield
30 80
20 75
10
70
0 2 4 6 8 10 12 14 16
0 2 4 6 8 10 12 14 16
استخراج زمان (دقیقه)
استخراج زمان (دقیقه)
شکل .8 .را اثر از استخراج زمان بر را بازده (آ) و بهبود (ب) از اکسی ماترین و آلکالوئیدها
بهبود مایکروویو قFFدرت ورودی ،یعFFنی را اسFFتخراج دمFFا بFFاعث از بین رفتن ناپایFFدار مFFواد در
به تعیین کنید را بهترین ترکیبی از استخراج متغیرها برای را بازده و بهبود از آلکالوئیدها از
عصاره می شود [ F]58؛ از این رو ،شایسته تحلیFل بیشFتر اسFت .بFه گFزارش مرکز کFFامپوزیت
.جانب اس .طعم می دهد آیت
بود معرفی کرد RSMنشان داده شده که در جدول ، 4را ) (CCDطرح
تحلیل و HPLCهمه تجربی داده ها بود به دست آمده از جانب آ -30اجرای آزمایش توسط
بررسی (مانند نشان داده شده که در شکل ) 9 .را بازده از جمع آلکالوئیدها
1
1 مسFتقر بر آن قطFFبیت [ ATPS . F]31،32به اثر گرمایی ،تولید شده توسط تعامل مایکروویو با
80
Top phase برای جمع آلکالوئیدها ( بFFازده 64.39 ،میلی گFFرم بFFر val- uesبر این اساس ،را پیش بینی کرد
60 گرم و را بهبود ٪94.52 ،بود یافت که در آ واکنش به ما آزمایشگاه اعتبار سنجی اسFFتفاده
3 درجه سانتیگراد .مطابق با مقادیر پیش X 4 = 90و X 1 = 28٪، X 2 = 18٪، X 3 = 60:1،كردن
m
40 2
بینی شده در جدول . 6به دلیل قیمت باالی اتFFانول و از پیش تعFیین شFده مقیFFاس از را ترکیبFFات و
20
4 56 .مطالعه بود توصیه شده RSMاستخراج مزاج توره ،نه به عالوه
0
40 1
تجربه دو فرآیند را ایجاد کرد :استخراج جامد-مایع آلکالوئیدها از ماتریکس گیاهی بFFه MAATPE
20 2
فاز پایین ،و استخراج مایع-مایع از پایین به فاز باال ( شکل 10ب) .در فرآیند فFFوق ،را نمک بFFازی
0 کرد دو نقش ها که در را بهبود از مخلوط کردن و جذب کننده مایکروویو .به دلیFFل رسFFانایی بFFاالتر،
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 نمک محلول می تواند جداسازی از اتانول قابل اختالط را تسهیل کنFFد .این یFFک بخش کلیFFدی در فFFاز
پایین داشت ،جایی که جامد-مایع استخراج می شود .بین ماده گیاهی و فاز غنی از نمFFک رخ داد .بFFه
حفظ زمان (دقیقه)
دلیل رسانایی باالتر از فاز پایین ،مایکروویو می توانFFد بFFاعث گرمFFایش داخلی قFFوی تFFر و تحریFFک
مولکولی شود ،و در نتیجه ،تجزیه فعل و انفعال ضعیف آلکا را تسهیل کرد .با ماتریس لویFد می کنFد
کرومFFFاتوگرام ها از را اسFFFتخراج کFFFردن از . HPLCشFFFکل9 . و حذف مورد هدف را سرعت می بخشد ترکیبات و ناخالصی ها [ . F ]31،35،37برعکس ،اتFFا -من
– MAATPE: 1آلکالوئیدها از جانب سوفورا Fطعم می دهد آیت .توسط نه باال فاز ،داشتن آ پایین تر هدایت ،انجام داد نه مشارکت بیشتر بFه اسFتخراج جامFد-مFایع .بFا این
MAATPEحال ،هنوز هم می تواند به عنوان عمFل کند تصFFفیه در طFول اسFFتخراج مFFایع-مFFایع در
متیل سیتیزین؛ -N-سوفوریدین Oxymatrine; 2 - N-oxysophocarpine; 3 - 5 F– 4
را آلکالوئیFدها بFود اسFتخراج شFده است ترجیحا از جFانب را گیFاه دارویی به فFاز pro- cess،
– 5ماترین; – 6سوفوکارپین پایین ،و برای تصفیه به فاز بFاال مهFاجرت کردنFد .یFون .بنFابراین ،در میFان فازهFای چندگانFه فFوق،
انتقال جرم تعادل ها از را آلکالوئیدها بود در نظر گرفتFFه شFFده یکی از را کلید صFFورت -تورها
برای را بهبود از را استخراج بازده و تصفیه
-بهبود .در آ مسلم -قطعی باال درجه حرارت ،را مایع – مایع استخراج
بین 43.84تا 63.95میلی گرم بر گرم و بازیFFابی کFFل قلیFFایی از %65.37بFFه %94.45می رسFFد.
نتایج و مقادیر برازش شدند از پسرفت ضرایب بود محاسFبه شد توسط را طFراحی-کارشFناس نسFخه
نرم افزار ;8.0متغیر پاسخ و متغیرهای آزمون هستند مربوط توسط را ذیل مرتبه دوم چند جملFFه
:ای معادله
Y ð mg = g Þ¼ 62 : 01 þ 1 : 55 X 1 þ 0 : 76 X 2 þ 2 : 68 x 3 þ 0 : 31 x 4 -
0 : 87 X 1 X 2
þ 1 : 00 X 1 X 3 — 2 : 42 x 1 x 4 — 1 : 02 X 2 X 3 — 0 : 13 X 2 X 4
- 1 : 48 × 3 × 4
— 2 : 32 x21 — 1 : 362x 2 - 1 : 722 x 3 — 2 :235 x 4 ð R ¼ 0 : 9336 Þ
ð5
Þ
است که ارائه می کند آ قابل اعتماد R2 = 0.9336بیان شده در معادله ( )5دارای RSMمدل
پویشFFگر به عوامل و آنها فعFFل و انفعFFاالت ،که بFFود نه ممکن است به شناسFFایی اسFFتفاده كFFردن
(X 1خطی ضرایب X 4 ,و X 1 , X 2 , X 3آزمایش تک عاملی ( جدول .) 5در بین چهار متغیر
متقابل ضریب ) , X 4 و را چهار ) ( X 1 X 2را اثر
-بود یافت قابل توجه ( ص < .)0.001را گناه ) ( X 2 , X 2 ، X 2شدید شرایط
1 2 4
به عنوان مهمترین متغیرها تعیین شدند متغیرها برای را بازده از X 4و gle، X 1 ، X 2متغیرهای این می تواند به طور مداوم Fآلکالوئیدها را از کف غنی از نمک خارج کند وارد فاز بFFاالیی غFFنی
RSMبا یکدیگر در تعامل بودند .بنابراین مطالعه ، X 1 ، X 2آلکالوئیدها را ترکیب بندی متغیرها از اتانول شوید .تشکیل یک آلکالوئید غFFنی سFFازی این تعادل بFFه نفFFع خFFود بFFود کFFه میتFFوان آن را
ها را دیگر تعامل -اقFFدامات ،بFFا اينكه ATPSفوق العاده بود ملي مهم برای را بهينه سازي از .بیشتر تقویت کرد مایکروویو تحریک
بود هنوز به طور نسبی مهم و کمک کرد به را X 1 X 2 ،کمتر قابل توجه که در مقایسه با تغییراتی را در مورفولوژی سطح ایجاد کرد .نمونه های گیFFاهی شFFکل ، MAATPE 11دوم
که بود باال تنها X 4 ،نشان داد را اهمیت از X 1 X 4بازده از آلکالوئیدها ( ص < .)0.01را اثر مایکروویو را نشان می دهد به سوی را مورفولFFوژی ها از را گیFFاه دارویی مFFاتریس کFFه در
زمانی روشن می شود که برهمکنش با ترکیب بندی ها وجود داشFFته باشد در نظFFر گرفتFFه شFFده. جمFFع آوری شFFده ،دو MAATPEمقایسFFه ،را مFFور فوولFFوژی مFFواد FمFFاتریس گیFFاهی پس از
( بیشتر از با اتانول تعامل داشت نمک ) ( X1بهطورهمافزاییبااتانول ، X4 ،نشان داد که دمای استخراج تیمارهای استخراج مرسوم و بدون درمان همانطور کFFه ارائFFه شFFده اسFFت ،توسFFط میکروسFFکوپ
مهمترین X 4و MAATPE. X 1 ، X 2 ،را قادر می سازد را اتانول تصفیه که در ) X 2 میکFFFرو نمودارها نشFFFان داده شFFFده است که . SEMمشFFFاهده شد ) (SEMالکFFFترونی روبشی
متغیرهای فرآیند توصیف شده هستند در باال ،از آنجایی که هر دو را استخراج بازده و بازیFFابی منتج شد که در ریز ترک ها بر را سلول سطح ماتریس ،در حFFالی کFه اسFتخراج هFFای MAATPE
به دنبال آن لغو توسط را استخراج درجه ATPS [38-51،28،52-59] ،بستگی دارد ترکیب می توانFد بFاعث شFود MAAPEمعمFولی نشFان می دهد انقبFاض سFطحی این بFه این دلیFل بFود که
حرارت ،که بود به طور مستقیم مربوط پFFارگی سFFلولی [ . F ]59عالوه بFFر گرمFFایش داخلی ،مFFایکروویو با بFFاالتر فرکFFانس میتوانست
سرعت بخشیدن را دوقطبی چرخش و
جدول 6
را پیش بینی کرد و تجربی نتایج از را پاسخ برای آلکالوئیدها زیر حالت مطلوب شرایط
) (mg/gبازده ) (%بهبود
مشخص )RSD (%
منظور پیش مشخص )RSD (%
مقدار پیش
داشتن بینی متوسط a
بینی
ارزش a
کرد کرد
64.17 0.71 0.45±63.73 64.39 92.15 0.15 0.14±92.09 94.52
63.66 92.06
64.10 92.31
63.01 91.90 1
63.72 92.09
63.31 92.02
Top phase
Liquid-liquid extraction
Microwave
Interface
Herb powder
Solid-liquid extraction
Bottom
)(a )ب(
دیداری توزیع از سه فاز؛ (ب) را مداوم استخراج چند فازی مدل برای )آ( MAATPE:شکل .10 .شماتیک نمودارها از را چند فازی روند از
MAATPE استخراج و تصفیه
؛ حرارت رفالکس استخراج )آ( : MAATPEشکل .11 .را تصاویر از را گیاه دارویی توسط الکترون اسکن کردن میکروسکوپ
(.ب)؛ خیساندن استخراج (ج)؛ استخراج نشده (د)
،برخFFورد ،داشFFتن یFFک اثFFر هم افFFزایی در مFFورد از بین رفتن مکFFانیکی تFFوربین عالوه بFFر این شرایط را بهینه کرد ،در حالی که RSMتحت انجام شد . MAATPEبه ترتیب / ATPS،اتانول
است )ثانیه MAATPE (45از Demix- ingهمچنین شتاب گرفت مخلوط کردن MAATPE طبق پروتکل های اخیر [ ATPE،پیروی کرد اتانول یا آب قبل از MAEاز MAE-ATPE
میکس سریع ) [60] .دقیقه ATPE (1.5بسیار سریعتر نسبت به .تا را خود جوش دمیکس کردن یFFک مرحلFFه ای بFه طFرز جFFالبی . F]51،28 MAATPEنتایج جدول 7نشان می دهد که عالمت
ممکن است کمک کند به ویژه به یک تصفیه کارآمدتر بFFا بازیFFابی بFFاالتر چFFه زمFFانی را رسFFانایی در حالی که MAE-ATPE،بهبود یافته را استخراج بازده مقایسه کرد به را دو قدم( Fتک حالل)
بین دو فاز است ) ( D kتفاوت بازیابی یکسان باقی ماند .همانطور که در شکل 12نشان داده شده است 6 ،آلکالوئیFFد بFFه نFFام اکسFFی
افزایش یافت ،مانند نشان داده شده که در جدول 2و . 3را مخلوط کردن اثر زیر شناسایی( . N-oxysophocarpine، sophoridine، N-methylcytisineماترین وجود دارد
پیش فFرآوری قبFل pleشرایط به کمک مایکروویو می تواند به طور قابل توجهی سودمند باشد بFFا MAATPE.ماترین و سوفوکارپین در فاز باالی استخراج یFFون توسط LC-MS)،شده توسط
.از را کمی تحلیل و بررسی HPLC، MAATPEتوجه به را پFFاکی ها از را عصFFاره ،تجزیFFه و تحلیFFل کFFرد بFFا کرومFFاتوگرام
عصاره ای با مقدار بیشتری بدست آورد مواد تشکیل دهنده در محتوای باالتر و ناخالصFFی کمFFتر،
3.8. مقایسه از ناهمسان استخراج مواد و روش ها با استفاده از تنها اتانول ،تا حدودی ارائه شده است نتایج MAE-ATPE،در حالی که رویکردهای
تFFرکیب را اسFFتخراج و تصFFفیه کFFه در یکی گFFام. MAATPE، ،مشابه ،اما با ناخالصی بیشتر
اسFFتخراج - binesیFFک رویکFFرد نسFFبتا جدیFFد اسFFت .این کFFام ، MAATPEدر مطالعFFات ما نشان داده شده را بهFترین کFارایی در میFان را سه مFواد و روش ها مانند نشFان داده شFده کFه در
یک MAATPEمطالعه مقایسه ای MAATPE،برای اعتبار سنجی MAE.و ، ATPEمعمولی ،جدول . 7بدین ترتیب
و /ATPSآب ATPS،بود انجام بیرون استفاده كردن MAE-ATPEمرحله ای با دو قدم
1
جدول 7
.را نتایج از استخراج شده است آلکالوئیدها از جانب سوفورا طعم می دهد آیت .توسط ناهمسان مواد و روش ها
روش حالت استخراج کردن ) (mg/gبازده نسبت فامیلی بهبود )(% نسبت فامیلی
حالل ) (%خلوص
الف الف
) (%خلوص
MAE-ATPE 1 ATPEنگاه قبل به + ATPSاب
20.50 30.44 91.85 70.33
MAE-ATPE 2 ATPEنگاه قبل به + ATPSاتانول
53.04 40.67 89.51 56.21
MAATPE
همزمان ATPS 63.78 – 92.09 69.54
سوفوریدین ،تشک ،و ، N-oxysophocarpine،آ را نسبت فامیلی خلوص از جمع آلکالوئیدها است را نسبت از را اوج حوزه از اکسی ماترین
متیل سیتیزین بدون آن استاندارد N-سوفوکارپین به را جمع اوج حوزه بجز
سپاسگزاریها
280 1
MAATPE
و )Z1-E301شFFماره (2008این کار توسFFط پFFروژه علم و فنFFاوری حمFFایت شد از گوانگژو
240
2 3 .صندوق توسعه دانشکده پروژه از گوانگدونگ دارویی دانشگاه (خیر )52104109
4 5 6
200
آ
160 منابع
MAE با اتانول مخدوش شد به
m
ATPE
120
][1 )،ریشه ( Sophorae Flavescentisکمیسیون فارماکوپه چینی ،کوشن
80 فارماکوپه جمهوری خلق چین ،جلد ،1 .پزشکی چین علوم پایه
ب
، pp. 188-189 .و فن آوری مطبوعات ،پکن2010 ،
40
][2 پیشرفت تحقیق در مورد مواد KL Miao، JZ Zhang، Y. Dong، YF Xi،
MAE با اب مخدوش شد به
0 ATPE شFFیمیایی ترکیبFFات و فارمFFاکولوژی از سFFوفورا طعم دهنFFده هFFا ،
.توسعه دهنده Res. 73-69 )2001( 13نات .تولید
ج ][3 خالصه ترکیب شیمیایی و اثرات HZ Chen، HY Bao، M. Nuo، Y. Ma،
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 Sophora flavescens ، Ginseng Res. 22فارماکولوژیک و مطالعه بالینی
حفظ زمان (دقیقه) (2010) 31-37 .
را نمیتوان اعمال کرد فقط در پیش تیمار نمونه قبFFل از MAATPEروشهای آزمایشی سادهکننده
.تجزیه و تحلیل کمی بلکه که در را صنعتی افزایش مقیاس تولید
، Bioorg.آلکالوئیدها از سوفورا طعم دهنFده ها HBVمربوط ضد آلکالوئیFFFدها کFFFه در سFFFوفورا طعم می دهد آیت .و عFFFزم توسط
. Lett. 16 (2006) 1231- 1235 .پزشکی شیمی مFFویرگی الکFFتروفورز با تقFFویت شFFده در زمینه نمونه پشتهسFFازی،
. Hon, Wai O. Chim, Effects of oxymatrineجان دبلیو هو ،پری ال نگان ][2 .جی .فارم .بیومد .مقعدی 151-146 )2012( 58
شن بر سرطان سلول ها ،ضد سرطان عوامل پزشکی from Ku ][16 ، ZRهFFاو ، XJیانگ ، FMزو ،تی .گونگ ، D.جی اچ روان ،جی .لیو
.شیمی826-823 )2009( 9 . ژانFFگ ،آمFFاده سFFازی و ارزیFFابی از خFFود نانوامولسFFیون شFFده دارو
شFFن ،پFFژوهش پیش رفتن از دارویی اثFFرات از ، XCیانگ [3] YP از تشک ) (SNEDDSتحویل سیستم های
اکسFFی مFFاترین ،چانFFه .جی .بیمارسFFتان فFFارم)2009( 29 .
407-405 .
ژانFFگ ،را ، ZYیو ، WHشو ، QPدونگ ، XQهو ، YYم .هوانگ ][4
ژانگ ،بودن چن ،ام جی ماهی تابه ،پژوهش پیش رفتن از [7] LH
،ژائو PT
در سFFوفورا طعم می دهد آیت .توسط بFFا کFFارایی بFFاال مFFایع
کرومFFاتوگرافی -الکترواسFFپری یونیزاسFFیون پشFFت سFFر هم
1
مستقر بر دارو-فسفولیپید مجتمع تکنیک ،بین المللی جی .فارم. .مقعدی ، Phytochem. 113-105 )2002( 13فشار
290-282 )2010( 386 . ][33 پی آلبرتسون ،تقسFFیم ذرات سFFلولی و مFFاکرومولکول هFFا ،ویFFرایش
][17 لی ،پیشرفت در را تحقیق و آماده سازی از تشک ، LXیانگ SW .سوم ،ویلی ،جدید یورک1986 ،
که در صنعت داروسازی ،تمرین کنید .فارم .کلین .رم( 15 . ][34 آقای کوال ،روندها و آینده چشFFم انFFداز از آبFFدار دو فFFاز اسFFتخراج،
54-52 )2012 . .جداسازی زیستی 189-181 )1990( 1
][18 چنگ ،پژوهش پیش رفتن از فارماکودینامیک از ، Y.مامان FL ][35 هسFFو ،آبFFدار دو فFFاز سیسFFتم هFFای بFFرای زیسFFت ، JTآگهی المFFاس
تشک که در مختلف آماده سازی ،چانه .سنت .ثبت اختراع بیوشیمی .مهنFFدس بیوتکنFFول، Adv. ( 47 .مولکول جدایش ،جدایی
.پزشکی 422–420 )2004( 26 135-89 )1992 .
][19 گائو ،پیشرفت که در ، HMوانگ ، ZMژانگ ، QWمامان Y. ][36 استراتژی های سیستم های دو فFFازی O. Aguilar، M. Rito-Palomares،
مطالعه بر ترکیب کوشن تزریق ،چانه .جی .انقضا سنت. ،آبی برای بازیابی و شناسایی محصوالت بیولوژیکی از گیاهان
.پزشکی فرم345-342 )2012( 18 . .غذا کشاورزی J. Sci. 1392–1385 )2010( 90
][20 سو ،پژوهش پیشرفت Fها که در ، ZYلوگاریتم لی ،اماس جی ][37 رزا ،صFFبح آزودو ،اس .سFFامرفلد ،دبلیو بFFاکر ،آقFFای آیFFرسPA -
استفاده کنید از را کشاورزی قارچ کش بFFاروس ،آبFFدار دو فFFاز اسFFتخراج مانند آ سFFکو کFFه در را تولیFFد
مواد شیمیایی کشاورزی Sophora Flavescens _ )2006( 45 .زیستی صنعت :مقرون به صرفه و محیطی پایداری ،بیوتکنول
583–581 . Adv. 29 (2011) 559-567 .
][21 پیشرفت های اخیر در آفت MX Lu، HP Zeng، XJ Wang، Y. Xie، H. Wang،
. pp. 296-300 .سنتی چینی ،انتشارات پزشکی مردم ،پکن2004 ،
][23 دبلیFFو ژانFFگ ،اچ اچ چن ،ایکس کیFFو لیFFو ،اچ جی فن ،ایکس اچ
با Sophora Flavescensشی ،اس جی لو ،مقایسه استخراج آلکالوئیدها از
کمFFک مFFایکروویو مختلف مFFواد و روش هFFا ،چانFFه .جی .انقضا
.سنت .پزشکی فرم38-34 )2012( 18 .
][24 استخراج سیال فوق بحرانی JY Ling، GY Zhang، ZJ Cui، CK Zhang،
[25] WT شFFکم ،ک .هFFو ،فFFاز جامد اسFFتخراج از تشک و ، MLامFFروز
اکسی ماترین از جانب سوفورا ناپدید شدن آیت اسFFتفاده كFFردن آمینFFو
ایمیدازولیوم پلیمر ،جی 10 .سپتامبر .علمی -1739 )2010( 33
1745 .
][26 استخراج به کمک مایکروویو CH Chan، R. Yusoff، GC Ngoh، FW Kung،
][47 جدایی XQ Liu، W. Zhang، HJ Fan، LP Wang، XW Huang، Y. Feng، D. Zhu،
با استخراج دو فاز آبی ،چانه Sophora flavescens Ait. .آلکالوئیدها در
.مهندس . Proc. 647-641 )2012( 12جی
][48 شیو ،به کمک مایکروویو آبدار دو ، ZLدونگ ، YSاچ .وانگ
PolygonumفFFاز اسFFتخراج پیسFFید ،رسFFوراترول و امFFودین از
توسط اتFFFانول /آمونیFFFوم سFFFولفات سیسFFFتم هFFFایcuspidatum ،
][50 به کمک مایکروویو X. Lin، YZ Wang، XJ Liu، SY Huang، Q. Zeng،