‫تولید مورفین مصنوعی‬

‫جفت شدن یک مشتق جدید و فعال مورفین‬

‫چکیده‬

‫یک مشتق مرفین جدید‪ ،‬از نظر دارویی فعال‪- 6 ،‬سوکسینیل مورفین‪ ،‬سنتز شد‪ .‬خواص این ترکیب و شواهدی برای‬
‫ساختار آن ارائه شده است‪ .‬سوکسینیل مورفین به صورت کوواالنسی با اتیالمینو سفاروز جفت شد ‪ .‬مورفین ‪ -‬سفاروز‬
‫حاوی حداکثر ‪ 40‬گرم مورفین‪ ،‬انقباض الکتریکی ایلورن خوکچه هندی جدا شده را مسدود نکرد ‪ ،‬اما پس از‬
‫هیدرولیز قلیایی دانه‌های حاوی ‪ pg 2‬مورفین‪ ،‬مایع رویی کامالً انقباض را مسدود کرد‪ .‬نالوکسان آنتی بادی های‬
‫مورفین از جلو خارج شد سرو توسط مورفین‪ -‬سفاروز ‪ ،‬اما نه توسط اتیالرنینوسفاروز ‪ ،‬که شواهدی از خالی بودن‬
‫دانه‌ها برای کروماتوگرافی آمنیتی ارائه می‌دهد‪.‬‬

‫یکی از مهمترین مشکالت حل نشده در مطالعه نحوه عملکرد مواد مخدر وجود و ماهیت گیرنده احتمالی این داروها‬
‫در سیستم عصبی مرکزی است‪ .‬توضیح ماهیت بسیار استریو اختصاصی اثر ضد درد مواد مخدر و تبدیل آنها به‬
‫آنتاگونیست های خاص و قوی توسط تغییرات ساختاری نسبتا ً جزئی بدون فرض گیرنده های خاص دشوار است‪.‬‬
‫‪ Affnity‬با موفقیت در جداسازی و خالص سازی آنزیم ها و گیرنده های هورمونی به کار گرفته شده است (‪ .)1‬برای‬
‫اینکه ما بتوانیم از این تکنیک قدرتمند در جستجوی گیرنده های مواد افیونی استفاده کنیم‪ ،‬مشتق مورفین جدید‪-6 ،‬‬
‫سوکسینیل مورفین را سنتز کردیم و این ترکیب فعال دارویی را با دانه های سفاروز جفت کردیم ‪ .‬تنها مرجع یافت شده‬
‫در مورد سوکسینیالسیون مورفین‪ ،‬گزارشی در سال ‪ 1875‬توسط بکت و رایت (‪ )2‬بود که مورفین را با اسید‬
‫سوکسینیک در ‪ 0 180‬درمان کردند و معتقد بودند که بر اساس تجزیه و تحلیل اولیه و ناپدید شدن مورفین‪ ،‬یک دی‬
‫سوکسینیل مورفین به دست آورده اند‪ .‬گروه های فنلی‬
‫ما شواهدی را برای ساختار ‪- 6‬سوکسینیل مورفین و ماهیت کوواالنسی پیوند ایجاد شده در هنگام جفت شدن ‪-6‬‬
‫سوکسینیل مورفین به سفاروز ارائه می کنیم ‪ .‬سودمندی دانه‌های مرفین ‪ -‬سفاروز برای کروماتوگرافی آمنیتی با‬
‫استفاده از آنتی‌بادی‌های مورفین به‌عنوان مدلی از یک گیرنده مواد افیونی خاص نشان داده شد‪.‬‬

‫مواد و روش ها‬

 ‫مواد‪ .‬مورفین سولفات از ‪ Merck & Co., Rahway, NJ‬تهیه شد‪ .‬دی هیدرومورفین با هیدروژنه کردن سولفات‬
‫مرفین در آب در دمای اتاق و فشار اتمسفر با کاتالیزور پاالدیوم روی زغال چوب تهیه شد‪ .‬دی هیدرومورفین‬
‫رادیواکتیو با تریتیاسیون کاتالیزوری مرفین ( ‪ ).New England Nuclear Corp., Boston, Mass‬تهیه شد ‪ .‬آفنوز‬
‫‪ ( 101‬اتیل آمینو سفاروز ) از آزمایشگاه های ‪ ،Bio-Rad‬ریچموند‪ ،‬کالیفرنیا‪ ،‬و کربودی ایمید محلول در آب ‪I- ،‬‬
‫‪ ، ethyl-3 (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide‬از شرکت ‪Pierce Chemical، Rockford، Ill. Silicic‬‬
‫‪ -acid‬خریداری شد‪ .‬صفحات الیه نازک پوشش داده شده ( ‪ )Silplate F-22‬از ‪Brinkmann Instrument Co.,‬‬
‫‪ Westbury, NY‬خریداری شد‪.‬‬
‫مواد و روش ها‪ .‬گروه‌های فنلی آزاد با معرف فنل فولین اندازه‌گیری شدند ‪ ،‬همانطور که لوری و همکاران برای‬
‫پروتئین‌ها توضیح دادند‪ .)3( .‬طیف سنجی فرابنفش در آب با ‪ pH 2‬با اسپکتروفتومتر زایس انجام شد‪ .‬طیف‌سنجی‬
‫مادون قرمز توسط دکتر گیزال ویتز ‪ ،‬با اسپکتروفتومتر ‪ Perkin Elmer‬مدل ‪ 421‬و طیف‌سنجی جرمی توسط دکتر‬
‫‪ ، R. Servis‬با طیف‌سنج جرمی ‪ Finnigan‬مدل ‪ 1015‬در پتانسیل یونیزاسیون ‪ eV 70‬انجام شد ‪ .‬شمارش‬
‫رادیواکتیو محلول‌های آبی و سوسپانسیون‌های دانه‌ها در ‪ ، Aquasol‬یک سیال سوسوزن مبتنی بر تولوئن و قابل‬
‫امتزاج با آب (‪ ).New England Nuclear Corp‬در یک شمارنده سوسوزن مایع پاکارد بود‪.‬‬

‫نتایج‬

‫سنتز ‪ -6‬سوکسینیل مورفین‬

‫رفالکس مورفین‬

‫رفلکس مرفین یا دی هیدرومورفین با انیدرید سوکسینیک اضافی در بریزن منجر به سوکسینیالسیون انتخابی گروه ‪-6‬‬
‫هیدروکسیل می شود‪ .‬پایه عاری از مورفین (‪ 1‬گرم) و سوکسینیک انیدرید (‪ 1‬گرم) در بنزن (‪ 20‬میلی لیتر) در یک‬
‫فالسک ‪ 100‬میلی لیتری مجهز به کندانسور و گوشته گرم کننده قرار می گیرند‪ .‬پس از ‪ 2‬ساعت حرارت در دمای‬
‫رفالکس‪ ،‬انیدرید سوکسینیک اضافی (‪ 1‬گرم) اضافه می شود و رفالکس به مدت ‪ 1‬ساعت ادامه می یابد‪ .‬مخلوط‬
‫واکنش اجازه داده می شود تا تا دمای اتاق خنک شود‪ ،‬بنزن تخلیه شده و دور ریخته می شود و بنزن باقیمانده در‬
‫جریان نیتروژن تبخیر می شود‪ .‬باقیمانده در ‪ 10‬میلی لیتر آب حل می شود و با ‪ N HCI 2‬به ‪ PH 2‬می رسد‪ .‬پس از‬
‫فیلتراسیون برای حذف مقدار کمی از مواد نامحلول در اسید‪ pH ،‬را با ‪ 2.5‬نیوتن ‪ NaOH‬به ‪ 9‬رسانده و محلول را‬
‫برای حذف مورفین واکنش نداده فیلتر می کنند‪ PH .‬در حدود ‪ 5‬تنظیم می شود‪ ،‬در نتیجه ‪-6‬سوکسینیل مورفین در‬
‫حالی که یک شب در یخچال می ایستد متبلور می شود‪ .‬کریستال ها با فیلتراسیون برداشت شده و روی کلرید کلسیم‬
‫تحت فشار کاهش یافته خشک می شوند‪ .‬بازده ‪ -6‬سوکسینیل مورفین ‪ 60‬تا ‪ 70‬درصد نظری است‪ .‬برای تهیه‬
‫سوکسینیل رادیواکتیو دی هیدرومورفین ‪ ،‬واکنش با ‪ 1‬گرم [‪ ] 3H-7،8‬دی هیدرومورفین (‪ / PCi 2-1‬انجام می شود‪..‬‬

‫کروماتوگرافی‬
‫‪1835‬‬
‫برای جداسازی ‪- 6‬سوکسینیل مورفین از مورفین توسط کروماتوگرافی الیه نازک‪ ،‬بهترین حالل اتانول است –‬
 ‫‪.Biochemistry: Simon et al 1836‬‬

‫شکل‪ .1 .‬طیف مادون قرمز مرفین (‪ )A‬و ‪-6‬سوکسینیل مورفین (‪.)B‬‬

‫دی اکسان ‪ -‬بنزن ‪ -‬هیدروکسید آمونیوم ‪ ،5 :50 :5 :40‬یک اصالح ‪-‬‬

‫کاتیون حالل ‪ S3‬کوچین و دالی (‪ )4‬که در آن ‪ RF‬مرفین ‪ 0.56‬و ‪ succinylmorphine 0.14-6‬است‪ .‬ترکیبات‬
‫هیدروژنه مربوطه دارای مقادیر ‪ RF 0.53‬و ‪ 0.10‬هستند‪ .‬در حالل ‪ S2‬کوچین و دالی‪ ،‬مرفین دارای ‪ RF 0.52‬و ‪-6‬‬
‫‪ succinylmorphine 0.60‬است‪.‬‬
‫محصول سنتز و متبلور شده همانطور که در باال توضیح داده شد معموالً حاوی کمتر از ‪ ٪2‬مورفین (یا دی‬
‫هیدرومورفین ) است‪ ،‬همانطور که از توزیع رادیواکتیویته بر روی کروماتوگرام های ‪ succinyl- [7,8-8 H ]-6‬دی‬
‫هیدرومورفین مشخص می شود ‪.‬‬
‫تحلیل و بررسی‪ .‬تجزیه و تحلیل ابتدایی * ‪-6‬سوکسینیل مورفین‪ ،‬خشک شده تحت فشار کاهش یافته در ‪ 0 60‬بیش از‬
‫‪ ،P205‬نشان داد‪ .C 62.3، H 6.25، N 3.7 :‬محاسبه شده برای ‪C21H23N06.H20: C 62.6، H‬‬
‫‪.N 3.5 ،6.2‬‬

‫پذیری‬ ‫انحالل‬

‫‪ -‬سوکسینیل‬

‫مورفین نقطه‬

‫ذوب مشخصی ندارد اما باالی ‪ 0 200‬تجزیه می شود ‪ .‬در آب کمتر از ‪ pH 3‬و ‪ pH‬باالتر از ‪ 8.5‬بسیار محلول‬
‫است‪ ،‬اما بین این مقادیر ‪ 0.2 mg/ml( pH‬در ‪ 0 2‬و ‪ mg/ml 0.5‬در ‪ ) 0 25‬بسیار کمتر محلول است‪ ،‬مطابق با‬
‫ساختار زوئیتریون آن‪ .‬این ترکیب در تمام حالل های آلی آزمایش شده به قدری محلول است‪.‬‬
‫شواهدی برای ساختار ‪-6‬سوکسینیل مورفین‬
‫شواهدی مبنی بر اینکه مولکول مرفین با سوکسینات استری شده است و استری شدن منحصراً در موقعیت ‪ 6‬رخ داده‬
‫است به شرح زیر است‪ ( :‬من ) واکنش ‪- 6‬سوکسینیل مورفین با معرف فنل فولین بازیابی کمی گروه های فنلی آزاد را‬
‫نشان داد‪ )ii( .‬هنگامی که ما سعی کردیم سوکسینیل کنیم لوورفانول ‪ ،‬که فاقد گروه ‪-6‬هیدروکسیل است‪ ،‬تنها‬
‫لوورفانول واکنش نداده بازیافت شد‪ )iii( .‬تیتراسیون ‪ -6‬سوکسینیل مورفین با ‪ NaOH‬وجود یک گروه قابل تیتر را‬
‫نشان داد ‪،‬‬

‫* انجام شده توسط ‪.Schwarzkopf Microanalytical Laboratory, Woodside, NY 11377‬‬

 ‫‪ .Proc‬نات‪ .‬آکادمی علمی )‪USA 69 (1972‬‬
‫با ‪ ،PK 4.2‬معمولی از یک گروه کربوکسیل‪ )'it( .‬هیدرولیز اسیدی ‪ -6‬سوکسینیل مورفین باعث تولید مورفین می‬
‫شود‪ ،‬همانطور که توسط کروماتوگرافی الیه نازک مشخص می شود‪ )v( .‬طیف ‪ -UV 6‬سوکسینیل مورفین از مورفین‬
‫قابل تشخیص نیست‪ ،‬که در آن کروموفور مسئول پیک در ‪ 285‬نانومتر حلقه فنلی است‪ .‬این شواهد دیگری برای عدم‬
‫واکنش در این سایت است‪ )vi( .‬بخشهایی از طیف مادون قرمز ‪-6‬سوکسینیل مورفین و مورفین در شکل ‪ 1‬نشان داده‬
‫شده است ‪ .‬گروه سوکسینیل با یک قله کششی جدید در ‪ 1700‬سانتی متر در لیتر و با قله های مشخصه یک گروه‬
‫‪ COO‬در ‪ 1615‬و ‪ 1380‬سانتی متر در لیتر نشان داده می شود‪ )vii( .‬طیف سنجی جرمی ‪succinylmorphine-6‬‬
‫قطعات اولیه را در )‪ m/e 41 (100%)، 44 (50%)، 266 (17%)، 384 (M-1) (5%‬و ‪ )+M( 385‬داد‪.)%2( .‬‬
‫اوج در ‪ 385‬با وزن مولکولی محاسبه شده برای ‪ succinylmorphine-6‬مطابقت دارد‪ .‬قله های دیگر مطابق با یک‬
‫طرح تکه تکه شدن مورد انتظار برای ‪-6‬سوکسینیل مورفین هستند‪.‬‬
‫فارماکولوژی ‪ -6‬سوکسینیل مورفین‬
‫در آزمایش‌های اولیه‪-6 ،‬سوکسینیل‌مورفین در موش‌ها به اندازه مورفین با توجه به تولید واکنش ‪ Straub‬و بیش فعالی‬
‫فعال بود‪ .‬همچنین انقباض الکتریکی ایلئوم خوکچه هندی را مهار کرد‪ .‬مطالعات فارماکولوژیک مفصل در جای‬
‫دیگری منتشر خواهد شد‪.‬‬
‫جفت شدن ‪ 6‬سوکسینیل مورفین به سفاروز‬
‫‪ Affnose 101‬یک آماده سازی تجاری در دسترس است که در آن بازوهای جانبی اتیلن دیامین به دانه های‬
‫‪ ( Sepharose 4B‬اتیالمینو‪-‬سپاروز ) وارد شده است ‪ .‬جفت شدن گروه‌های آمنیتی به مهره‌ها با استفاده از بازوهای‬
‫جانبی با طول‌های مختلف توسط )‪ Cuatrecasas (5‬برای جلوگیری از مهار فضایی اتصال آنزیم‌ها و گیرنده‌ها در‬
‫طول کروماتوگرافی آمنیتی ضروری بود‪ .‬ما معموالً با مشتقات رادیواکتیو دی هیدرو ‪ -6‬سوکسینیل مورفین برای‬
‫تسهیل تعیین تعداد باقی مانده های مورفین متصل شده‪ ،‬جفت شده ایم ‪ .‬واکنش با روشی شبیه به آنچه توسط‬
‫)‪ Cuatrecasas (5‬برای جفت کردن سوکسینیل استرادیول به سفاروز توصیف شده بود انجام شد ‪6Succinyl-[7,8- .‬‬
‫‪50 mg( 8 Hldihydromorphine‬؛ ‪ )gCi /mg 1‬در ‪ 20‬میلی لیتر ‪ 120-1‬حل شد‪ .‬محلول به ‪ 12‬میلی لیتر از‬
‫دانه های ‪ Affnose 101‬ته نشین شده اضافه شد‪ .‬دانه ها با ‪ 20‬حجم ‪N NaCl - 0.01 N Tris • HOI، pH 7 0.1‬‬
‫شسته شده بودند تا سدیم آزید حذف شود (برای جلوگیری از رشد باکتری ها وجود دارد)‪pH .‬‬

‫‪ 0.1‬میلی لیتر ‪ 0.1‬میلی لیتر‬

‫دانه های تخت‬

‫‪ 0.2‬میلی لیتر ‪ Sup. 0.5pg r%bxone +0.5#g‬ناتوکسون‬

‫شکل‪ . 2 .‬اثر مرفین ‪ -‬سفاروز بر انقباضات ایلئوم خوکچه هندی جدا شده بر اثر تحریک الکتریکی‪ .‬ایلئوم در ‪0.2‬‬
‫هرتز‪ 40 ،‬ولت و مدت زمان جریان ‪ 0.4‬میلی ثانیه تحریک شد ‪ ،.Sup .‬کسر رویی از دانه های هیدرولیز شده‪.‬‬
‫‪ .Proc‬نات‪ .‬آکادمی علمی )‪USA 69 (1972‬‬
‫از مخلوط واکنش به ‪ 5‬تنظیم شد و ‪ 250‬میلی گرم ‪-I‬اتیل‪ carbodiimide )dimethylaminopropyl-3(-3-‬به‬
‫آرامی در مدت ‪ 5‬دقیقه اضافه شد‪ pH .‬به طور مکرر کنترل شد و در صورت نیاز با ‪ N HCI 0.1‬به ‪ 5‬تنظیم شد‪ ،‬به‬
‫خصوص در ‪ 60-30‬دقیقه اول‪ .‬واکنش به مدت ‪ 20‬ساعت در دمای اتاق ادامه یافت‪ .‬مخلوط در یک ستون‬
 ‫کروماتوگرافی ریخته شد و دانه ها به طور متوالی با ‪ 1‬لیتر ‪ ،NaCl 0.1 N - O.01 N Tris • HCI pH 7‬با ‪100‬‬
‫میلی لیتر ‪ NaCl 1 N‬و در نهایت با ‪ 1‬لیتر بیشتر از ‪ N 0.1‬شسته شدند‪ .NaCl —0.01 N Tris • HCI .‬هیچ‬
‫رادیواکتیویتی در ‪ 100‬میلی لیتر آخرین شستشو پس از لیوفیلیزاسیون و حل مجدد باقیمانده در ‪ 1‬میلی لیتر بافر‬
‫مشاهده نشد‪ .‬بازده دی هیدرومورفین رادیواکتیو محدود شده ‪ 0.5-0.3‬گرم مول در میلی لیتر از دانه های ته نشین‬
‫شده بود ‪ .‬دانه ها در یخچال نگهداری شدند و برای جلوگیری از آلودگی باکتریایی‪ ،‬آزید سدیم (‪ 0.025‬درصد) به آن‬
‫اضافه شد‪ .‬بالفاصله قبل از استفاده‪ ،‬دانه ها با حداقل ‪ 20‬حجم بافر شسته شدند تا سدیم آزید و هر گونه رادیواکتیویتی‬
‫که ممکن بود منتشر شده باشد حذف شود‪.‬‬
‫شواهدی برای اتصال کوواالنسی مرفین به سفاروز‬
‫در محدوده ‪ pH‬خنثی مرفین ‪ -‬سفاروز کامالً پایدار است‪ .‬غلظت نمک تا ‪ 1‬موالر باعث آزاد شدن فینی بیشتر نمی‬
‫شود ‪ .‬این مشاهدات شواهدی را علیه اتصال توسط پیوند یونی ارائه می دهد‪ .‬هنگامی که واکنش جفت شدن بدون‬
‫افزودن کربودییمید انجام می شود ‪ ،‬هیچ رادیواکتیویتی با مهره های شسته شده باقی نمی ماند‪ .‬کربودییمیدها برای‬
‫ترویج تشکیل پیوندهای کوواالنسی (به عنوان مثال‪ ،‬استری‪ ،‬پپتیدی) شناخته شده اند‪ .‬درمان مورفین ‪ -‬سفاروز با‬
‫قلیایی رقیق یا هیدروکسیل آمین خنثی منجر به انتشار کمی رادیواکتیویته در مایع رویی می شود‪.‬‬
‫اثر مرفین ‪ -‬سفاروز بر ایلئوم خوکچه هندی مدت‌هاست که مشخص شده است که مورفین و مواد مخدر مرتبط با‬
‫انقباض الکتریکی ایلئوم خوکچه هندی جدا شده را در غلظت‌های کمتر از ‪ PM 0.1‬مسدود می‌کنند (‪ .)7 ،6‬این اثر‬
‫مسکن های مخدر به خوبی با قدرت فارماکولوژیک آنها در حیوانات همبستگی دارد و توسط آنتاگونیست های مخدر‬
‫معکوس می شود (‪.)8‬‬
‫با همکاری دکتر ‪ ، S. Ehrenpreis‬اثر مرفین متصل به سفاروز را بر ایلئوم خوکچه هندی مطالعه کردیم‪ .‬شکل ‪2‬‬
‫نشان می دهد که مورفین چسبانده شده به دانه ها هیچ تأثیری بر انقباض ایلئوم خوکچه هندی ندارد‪ ،‬و همچنین با‬
‫مقادیری از دانه های حاوی ‪ pg 40‬مورفین مهاری وجود ندارد‪ .‬پس از تیمار دانه های حاوی ‪ 2‬گرم مورفین با ‪1/0‬‬
‫نیتروژن ‪ NaOH‬به مدت ‪ 15‬دقیقه‪ ،‬مایع رویی کامالً انقباض را مسدود کرد‪ .‬این بلوک به آسانی توسط آنتاگونیست‬
‫خاص مورفین‪ ،‬نالوکسان‪ ،‬معکوس شد (شکل ‪.)2‬‬
‫اتصال اختصاصی آنتی بادی های مرفین به دانه های سفاروز ‪rnorphine -‬‬
‫مورفین‪ -‬دانه‌های سفاروز و آمینو اتیل سفاروز (که با مورفین جفت نشده‌اند) یک شبه با آنتی سرم مورفین به‌دست‌آمده‬
‫از دکتر ‪ S. Spector‬انکوبه شدند‪ .‬مقدار کمی از مایعات رویی برای آنتی بادی باقیمانده با توانایی آنها برای اتصال‬
‫تریتیات مورد آزمایش قرار گرفت‪ .‬دی هیدرومورفین ‪ ،‬همانطور که توسط اسپکتور و پارکر (‪ )9‬توضیح داده شده‬
‫است‪ .‬مرفین ‪ -‬سفاروز بیش از ‪ 90‬درصد از آنتی بادی را از محلول حذف کرد‪ ،‬در حالی که هیچ کاهشی در آنتی‬
‫بادی ها در مایع رویی از آمینو اتیل سفاروز مشاهده نشد ‪.‬‬
‫‪1837‬‬ ‫تشکیل مورفین ‪ -‬سفاروز‬
‫بحث‬
‫سوکسینیالسیون اختصاصی گروه ‪- 6‬هیدروکسیل مرفین منجر به مشتقی می شود که برای جفت شدن مورفین به‬
‫ماتریس های جامد برای کروماتوگرافی تمایلی و پروتئین ها برای تهیه آنتی بادی مفید است‪ .‬یک مزیت مهم ‪-6‬‬
‫سوکسینیل مورفین در دسترس بودن تمام گروه های عاملی ضروری برای فعالیت دارویی است‪ .‬جفت شدن از طریق‬
‫گروه ‪ 6‬هیدروکسیل انجام می شود که برای فعالیت دارویی غیر ضروری است‪ .‬لوورفانول که فاقد گروه الکل در‬
‫موقعیت ‪ 6‬است‪ ،‬در واقع مسکن قوی تری نسبت به مورفین است (‪ Eddy .)10‬و )‪ Howes (11‬نشان دادند که وقتی‬
‫گروه ‪- 6‬هیدروکسیل موجود در مرفین با گروه های متیل یا استیل پوشانده شود‪ ،‬فعالیت دارویی افزایش می یابد‪.‬‬
‫دلیل استری شدن خاص در گروه ‪- 6‬هیدروکسیل به طور کامل شناخته نشده است‪ ،‬اما ممکن است از هیدرولیز انتخابی‬
‫سریع یک استر ‪-3،6‬دی سوکسینیل ناشی شود‪ .‬بنابراین‪ ،‬تیمار ‪-3،6‬دی استیل مورفین (هروئین) با آب جوش یا با‬
‫هیدروکسیل آمین (‪- 6 )12 ،11‬استیل مورفین را به دست می دهد‪ .‬وجود یک گروه کربوکسیل آزاد در یک مولکول‪،‬‬
‫پیوندهای استری مجاور را تثبیت می کند ‪ ،‬به خصوص زمانی که حلقه واسطه ‪ 5‬یا ‪ 6‬عضوی امکان پذیر باشد‪ .‬این‬
‫اثر ممکن است برش هیدرولیتیک ‪- 3‬سوکسینیل استر را سرعت بخشد‪ ،‬به طوری که به سرعت در آب در دمای اتاق‬
‫رخ می دهد‪ .‬در حالی که ‪-6‬سوکسینیل استر احتماالً نسبت به استیل استر مربوطه نیز حساس تر است‪ ،‬به وضوح در‬
‫آب در دمای معمولی و ‪ pH‬زنده می ماند‪.‬‬
‫اتصال خاص آنتی بادی های مرفین توسط دانه های مرفین‪ -‬سفاروز شواهدی را برای مفید بودن این دانه ها برای‬
‫کروماتوگرافی آمنیتی ارائه می ده‬

‫با همکاری دکتر ‪ ، S. Spector‬ما در حال حاضر در حال آماده سازی آنتی بادی های مورفین مرتبط با آلبومین سرم‬
‫گاوی از طریق گروه ‪ succinyl-6‬هستیم‪ .‬ما از دانه‌های مرفین ‪ -‬سفاروز برای خالص‌سازی آنتی‌بادی‌های مورفین و‬
‫برای جداسازی گیرنده‌های مورفین که گمان می‌رود در مغز حیوانات و سایر بافت‌های واکنش‌دهنده به مورفین‪ ،‬مانند‬
‫ایلئوم خوکچه هندی وجود دارند‪ ،‬استفاده می‌کنیم‪.‬‬
‫ما از دکتر ‪ R. Servis‬برای طیف سنجی جرمی‪ ،‬دکتر ‪ Gisela Witz‬برای طیف سنجی مادون قرمز‪ ،‬دکتر ‪S.‬‬
‫‪ Ehrenpreis‬برای آزمایش با ایلئوم خوکچه هندی و دکتر ‪ S. Spencer‬برای آنتی سرم مورفین تشکر می کنیم‪ .‬از‬
‫کمک فنی عالی خانم جودیت رند با سپاس قدردانی می شود‪ .‬این کار توسط ‪ USPHS Grant MH-10227‬پشتیبانی‬
‫شد‪ .‬دکتر سیمون یک دانشمند شغلی در شورای تحقیقات بهداشت شهر نیویورک است‪.‬‬
‫‪ . Cuatrecasas , P. & Anfinsen, CB (1971) Annu‬کشیش بیوشیم ‪.278-259 ،40 .‬‬
‫‪ ، Beckett, GH & Wright, CRA (1875) J. Chem. soc‬لندن ‪.699-689 ،28‬‬

‫‪ .Lowry, OH, Rosebrough , NJ, Farr, AL & Randall, RJ (1951) J. Biol‬شیمی‪.275-265 ،193 .‬‬
‫‪.Cochin, J. & Daly, JW (1961) Experientia 18, 294-295‬‬
‫‪ .Cuatreca.sas ، P. (1970) J. Biol‬شیمی‪.3065-3059 ,245 .‬‬
‫)‪ Schaumann , W. (1955‬بریت‪ .‬جی فارماکول ‪ .‬شیمادر ‪.461-456 ،10 .‬‬
‫پاتون‪ WDM (1957) ،‬بریتانیا‪ .‬جی فارماکول ‪ .‬شیمادر ‪.127-119 ،12 .‬‬
‫‪ Gyang ، EA‬و )‪ Kosterlitz ، HW (1966‬بریتانیا‪ .‬جی فارماکول ‪.‬‬
‫شیمادر ‪.527-514 ،27 .‬‬
‫‪.Spector, S. & Parker, CW (1970) Science 168, 1347-1348‬‬
‫‪ . Randall, LO & Lehmann, G. (1950) J. Pharmacol‬انقضا اونجا _ ‪.170-163 ،99‬‬
‫‪ . Eddy, NB & Howes , HA (1935) J. Pharmacol‬انقضا اونجا _ ‪.439-430 ،53‬‬
‫‪ . Wright, C. 1. (1941) J. Pharmacol‬انقضا آنها ‪164 ،71‬‬