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영양소의 검출 반응

이 실험은
기본적인 영양소 검출 방법으로 S.S.S실험으로 3대 영양소인 포도당, 단백질, 지
방, 탄수화물(녹말), 에 대해서 4종 지시약을 사용하여 정색 반응을 해 본다.

준비물: 3ml 비닐스포이트, 1ml 비닐스포이트, 녹말 용액, 포도당(사과즙)용액, 단

백질용액(알부민 or 물에 희석한 달걀흰자), 증류수, 지방(식용유: 알코올 또는, 벤
젠으로 희석한 것), 아이오딘용액(요오드-요오드화칼륨 용액), 수단Ⅲ용액, 베네딕
트 용액, 뷰렛 용액(수산화나트륨+황산구리 용액), 유성펜 or 라벨지, 24홈판, 12홈
판, 영양소 검출 반응판.

포도당용액, 단백질(알부민or 펩톤)용액, 녹말용액 - 냉장보관 필수

구입 후 바로 사용하시는 게 좋고요. 수업 일을 늦추시려면 냉장보관 하셔야 합니
다.

별도준비물: 가열장치(핫플레이트 or 삼발이, 알콜램프, 세라믹안전망, 점화기), 막

대형 디지털온도계, 가위. 이온음료, 우유, 사람 입안의 침.

지시약과 영양소 용액의 양은 최소 한 방울로도 반응시켜 결과를 찾을 수 있으나

실험설명 자료를 살펴보시고 실험자가 선택하여 하십시오.

과정 및 방법
준비 1
1. 준비된 영양소와 지시약을 12홈판에 꽂아 정리하여 놓는다.

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2. 비닐스포이트에 영양소와 검출할 지시약 명을 표기하여 24홈판에 각각 꽂아 세

워둔다.

3. 황산구리(CuSO4) 용액을 수산화나트륨 (NaOH)용액에 부어넣고 섞어 뷰렛용액

을 만들어 놓는다.

준비 2
1. 영양소 검출 표를 깔고 그 위에 24홈판을 올려놓는다.

2. 수단 반응, 베네딕트 반응은 미리 표기해 놓은 3ml 스포이트로 영양소 용액을

0.5ml 씩 빨아들여 24홈판에 세워 준비해 놓는다.

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3. 뷰렛 반응과 아이오딘 반응의 영양소는 24홈판의 남은 2줄홈에 반응표의 칸에

맞게 0.5ml씩 떨어뜨려 놓는다.

실험 1 - 베네딕트 반응
1. 준비 2-2번에서 미리 준비해 놓은 3ml 스포이트를 가위로 1mm눈금 부분을 잘
라내고 그 안에 베네딕트 지시약 용액 1ml를 넣어 준비한다. 지시약은 정색 반응이
므로 용액의 양을 네 곳 모두 같게 넣어야 한다.

2. 준비된 가열장치에 중탕 반응시키며 색깔의 변화를 관찰한다. (가열장치가 없을

경우 50ml 비커에 뜨거운 물을 준비하여 스포이트를 담가 놓는다.)

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3. 반응하여 나타난 색깔과 영양소의 명을 보고서에 표기해 놓는다.

4. 반응이 끝난 스포이트에 용액을 24홈판에 영양소 명에 맞는 홈에 따라 놓는다.

실험 2 - 수단 반응
1. 미리 준비해 놓은 3ml 스포이트를 가위로 1mm눈금 부분을 잘라낸다.

2. 그 안에 수단Ⅲ용액 1ml를 넣어 흔들어 주면서 반응을 관찰해 본다.

3. 반응하여 나타난 색깔과 영양소의 명을 보고서에 표기해 놓는다.

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4. 반응이 끝난 스포이트에 용액을 24홈판에 영양소 명에 맞는 홈에 따라 놓는다.

실험 3 – 뷰렛 반응
1. 준비 2-3에서 미리 영양소를 0.5ml씩 넣어놓은 24홈판의 뷰렛 반응줄 홈에 뷰
렛용액을 1ml씩 떨어뜨려 주면서 반응을 관찰해 본다.

2. 24홈판을 바닥에 문지르듯 몇 차례 흔들어본다.

3. 반응하여 나타난 색깔과 영양소의 명을 보고서에 표기해 놓는다.

실험 4 – 아이오딘 반응
1. 준비 2-3번에서 미리 영양소를 0.5ml씩 넣어놓은 24홈판의 아이오딘 반응줄 홈
에 아이오딘용액을 1ml씩 떨어뜨려 주면서 반응을 관찰해 본다.

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2. 24홈판을 바닥에 문지르듯 몇 차례 흔들어본다.

3. 반응하여 나타난 색깔과 영양소의 명을 보고서에 표기해 놓는다.

결과보기
수단반응, 베네딕트반응에서 반응된 비닐스포이트 안의 용액을 24홈판에 부어놓고
4가지 지시약으로 반응된 영양소의 색을 비교해본다.

원리
다. 뷰렛 반응 : 뷰렛 용액을 검출할 용액위에 2~3방울 정도 떨어뜨려 반응 시킨
후 관찰한다.(침전된 용액을 흔들어서 사용한다.) 뷰렛 시약은 단백질의 종류에 따
라 청색, 청자색 또는 보라색으로 된다. 카아바밀기(-CONH2)가 2개 이상 결합된
물질(뷰렛이나 옥사미드)은 알카리 용액에서 구리이온(Cu2+)과 반응하여 보라색을

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띠는 양성 반응을 한다. 한편 단백질은 많은 수의 펩티드 결합을 포함하고 있으므

로 강한 뷰렛반응을 한다.

*펩티드(Peptide, 펩타이드)는 아미노산의 중합체이다. 보통 소수의 아미노산이 연

결된 형태를 펩티드라 부르고 많은 아미노산이 연결되면 단백질로 부른다. 이러한
펩티드 및 단백질 구조에서 아미노산 간의 연결은 아미드 결합 또는 펩티드 결합으
로 이루어져 있다. 펩티드 결합이란 카르복실기(-COOH)와 아미노기(NH2-) 사이에
물이 빠져나가고 -CO-NH- 형태를 이루는 결합이다.)

라. 요오드 반응 : 요오드-요오드화칼륨 용액을 검출할 용액위에 2~3방울 정도 떨

어뜨려 반응시킨다. 묽은 요오드 용액을 조금 사용하면 청남색이 나타나지만, 진한
녹말 용액에 진한 요오드 용액을 사용하면 검게 나타나 정확한 색깔 변화를 관찰할
수 없다.

마. 수단 반응 : 수단Ⅲ 용액을 검출할 용액위에 2~3방울 정도 떨어뜨려 반응시킨

다. 버터나 마아가린 등의 고체 지방을 알코올, 벤젠 등의 유기 용매에 녹인 후 사
용한다. 시약은 지방과 반응하면 선홍색으로 나타나고, 지방이 없으면 반응하지 않
고 시약이 확산된다.

바. 베네딕트 반응
※ 베네딕트 용액의 반응은 Cu(OH)2를 환원시켜 황적색의 산화 제1구리(Cu2O)로
변하는 반응이다. 단당류 또는 이당류에 베네딕트 용액을 넣고 가열하면 녹색, 황
적색, 적색 등으로 변한다.

다당류란 탄수화물의 단위체로 다당류(녹말·셀룰로스 등)를 산 또는 효소로 가수분

해했을 때 생기는 당류이다. 중요한 것으로는 글루코스·프룩토스·마노스·갈락토스·
리보스 등이 있다.

일반적으로 단맛이 나는 무색 결정으로, 물에는 녹고, 에탄올과 에테르에는 녹지

않는다. 최저 2개의 하이드록시기와 이에 인접하는 카보닐기를 가지며, 대부분은
Cn(H2O)n의 일반식으로 나타낼 수가 있는데, 탄소의 수에 따라 삼탄당(트리스)·오
탄당(펜토스)·육탄당(헥소스) 등으로 나눈다. 또 카보닐기가 알데하이드기이면 알도
스, 케톤기이면 케토스라고 한다. 비대칭 탄소원자를 가지며, 많은 입체이성질체가
있으므로 광학활성을 가져 D, L의 2계열로 나눈다. 가장 간단한 알도스인 글리세린
알데하이드에 대해 우선성(右旋性)인 것을 D형, 이것에서 유도되는 당을 D계열이라
하고, 그 대칭체를 L계열이라 한다.

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카보닐기는 보통 유리하지 않고, 오각형의 푸라노스나 육각형의 피라노스로 고리

모양 구조를 이루고 있다. 고리를 형성할 때 카보닐탄소에 생기는 하이드록시기에
관하여 α 및 β의 이성질체가 생긴다. D계열에서도 보다 큰 우선성을 가지는 것을
α형, 다른 것을 β형이라 하고, L계열에서는 보다 큰 좌선성을 가지는 것을 α형, 다
른 것을 β형이라 한다. 결정상태에서는 α나 β 중 어느 쪽 형을 취하나 용액 속에서
는 α와 β 사이에 평형이 성립되고, 시간이 지남에 따라 회전편광세기가 변하면서
일정한 값에 도달하게 된다. 이 현상을 광회전성(光回轉性)이라 한다.

카보닐기를 가지므로 암모니아성 은액(銀液)이나 펠링액을 환원시킨다. 또 페닐하

이드라진과 오사존을 만들며, 알코올기를 가지기 때문에 산과 에스터를 만든다. 산
성 용액에서는 탈수가 일어나고, 알칼리성 용액에서는 에피머화가 일어난다. 약한
산화에 의해서는 산의 락톤이 생기고, 강한 산화에서는 다이카복실산이 생긴다. 환
원하면 알코올로 변한다. 올리고당·다당류·글리코시드 등의 구성당으로 생물계에 널
리 존재하지만, 유리형으로서는 드물다. 천연물로부터 추출하여 얻을 수 있고, 올리
고당·다당류 등을 가수분해하여도 얻을 수 있으며, 화학적으로 합성할 수도 있다.
단당류 2개 이상이 글리코시드 결합하여 큰 분자를 만들고 있는 당류를 통틀어 일
컫는 말이다.

분자량은 수천에서 100만을 넘는 것까지 있다. 단당류의 2분자에서 몇 분자 축합

한 것은 올리고당류라고 하여 구별한다. 다당류는 생물계에 널리 존재하며 종류도
다양하나, 일반적으로 생물체의 구성성분이거나 에너지 저장체로서 존재한다. 셀룰
로스는 전자(前者)의 예이고, 녹말(식물의 경우)이나 글리코겐(동물의 경우)은 후자
의 예이다. 고등동물의 경우 글리코겐을 제외한 다당류는 대부분 결합조직 속에 존
재한다.

다당류는 또 단백질이나 지질(脂質)과 결합하여 생물학적으로 특이한 성질의 발현

에 관여하는 일이 많다. 예를 들면, 세포 표면의 어떤 특수한 구조를 만들고 있어,
세포 표면의 특성에 관여하고 있거나 혈액형 물질에서는 혈액형 활성(活性)에 관여
하고 있다. 다당류를 통일적으로 분류하기는 곤란하나, 화학구조에 근거를 두어 구
성당이 한 종류인 단순다당류와 두 종류 이상인 복합다당류로 크게 나눌 수 있다.

※ 기존실험은 반응을 빠르게 보기위해 시험관을 가열하였다. 가열시 튀는(돌비) 현

상이 일어나 실험자의 안전이 요구 되었기에, 이 실험에서는 시험관대신 비닐 스포
이트를 사용 약 80℃~100℃에서 중탕한다.

다른 방법!
불을 사용한다는 것은 모든 실험에서 부담이 되듯 이를 개선할 방법을 찾다가, 중

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탕이라면 뜨거운 물에 시험관을 담가 반응을 시키면 되겠다 싶어, 냉-온수기의 약

80℃~100℃ 물을 사용하여 중탕을 시켜 색이 변화하는 결과를 얻어내었다. 이는
온도가 반응 속도를 조절해 주는 것으로 보고 실험 한 것이며, 완전한 검증은 받지
는 못하였으나 노력해 볼만하다.

결과보기
반응시켜 관찰한 결과의 색과 그 영양소는 무엇인지 표에 써 넣으시오.

요오드반응 베네딕트반응 수단Ⅲ반응 뷰렛반응

증 류 수

우 유

달걀흰자

이온음료

식 용 유

포 도 당

녹 말

tip
탄수화물은 생체의 에너지원으로 또 몸의 구성성분으로 쓰인다. 단당류, 이당류,
다당류로 나뉘며 단당류와 이당류 중 알데히드기(R-CHO)와 케톤기(R-CO-R')의
존재에 따라 환원당과 비환원당으로 나누어진다.
베네딕트 반응은 시약 속의 CuSO4의 Cu가 탄수화물의 알데히드기와 반응하여
Cu2O가 생성되어 적갈색의 침전이 생기는 데 이것으로 탄수화물의 존재를 확인할
수 있다. 포도당에 베네딕트 시약을 넣고 가열하면 포도당은 적갈색으로 정색반응
을 하나 다른 영양소는 반응하지 않는다. 비환원성인 탄수화물인 녹말에 요오드 반
응을 시키면 녹말은 남색으로 반응한다. 단백질은 분자량이 수천에서 수천만에 이
르는 고분자 화합물로 펩티드결합으로 이루어져 있고 생체 내에서 원형질의 구성성
분이 될 뿐만 아니라 효소나 항체의 주성분이 되기도 한다. 카아바밀기(-CONH2)
가 2개 이상 결합된 물질이 알칼리 용액에서 황산구리의 구리이온과 결합하여 뷰렛
반응을 시키면 자색을 띤 정색반응을 하므로 펩티드결합을 많이 가진 단백질의 검
출반응에 이용한다. 지질은 체내에서 열량이 제일 큰 에너지원으로 이용되기도 하
고 지방으로 합성되어 지방조직에 저장되기도 한다. 지방은 수단Ⅲ용액에 넣고 흔

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들면 적색으로 착색된다.

영양소 검출방법 제시된 지시 색

포도당 베네딕트 용액(가열) 황적색, 적갈색 등

녹말 요오드 용액 청남색, 청자색, 남색 등

지방 수단Ⅲ 용액 선홍색, 적색

뷰렛 용액 보라색, 자색 등
단백질
크산토프로테인 용액 황색

지시약 만드는 법
가. 베네딕트 용액
만드는 법: 증류수 800mL에 탄산나트륨(NaCO3) 결정 200g과 구연산나트륨
(C6H5Na3O7) 173g을 800mL의 물에 녹인다. 이 때 약간 가열하여 주면 빨리 녹
는다. 또 다른 용기에 증류수 100mL에 황산구리(CuSO4)을 17.3g을 녹인다. 이
두 용액을 섞은 후 증류수를 부어 1L가 되게 한다. 시약은 옅은 청색이다.

나. 요오드-요오드화칼륨 용액(요오드 용액)

만드는 법 : 증류수 25mL에 요오드화칼륨(KI) 3g을 용해시키고 다른 용기에 다시
증류수 200mL에 요오드 0.6g을 녹인 후 두 용액을 잘 흔들어 섞은 후 갈색병에
보관한다. 시약은 황갈색이다.

다. 뷰렛 용액
만드는 법 : 황산구리(CuSO4) 2.5g을 증류수 1L에 녹여 0.01M 용액을 만든다.
수산화나트륨(NaOH) 440g을 증류수에 녹여 1L 용액(10M)을 만든다. 사용하기
직전 수산화나트륨 용액 1000mL에 약 2.5mL의 황산구리 용액을 혼합하여 사용
한다. 뷰렛 시약은 5% 수산화나트륨 용액과 1% 황산구리 용액을 각각 만들어
놓고 사용할 때 함께 넣어주어도 된다.

라. 수단 Ⅲ 용액
만드는 법: 클로로포름에 수단Ⅲ을 포화 상태가 되도록 용해시킨 후, 이 용액
50mL에 메탄올 50mL을 넣어 혼합한다. 또는(수단Ⅲ 분말 0.1g을 95% 에탄올
10mL에 녹인 후, 글리세린10mL1를 넣어 혼합한다.) 시약은 불투명한 진홍색이다.

검출할 영양소 용액 만들기

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녹 말 용액: 가용성 녹말을 1% 정도의 농도가 되도록 증류수에 녹여 끓여서 식힌

후 사용한다.

포도당 용액: 포도당을 1% 정도의 농도가 되도록 증류수에 녹여 사용한다.

단백질 용액: 알부민이나 젤라틴을 따뜻한 물에 녹여 사용하거나, 달걀흰자를 물로

2~3배 희석하여 사용한다.

식용유: 벤젠으로 2배 희석하여 사용한다.

* 주의 -안전에 주의 합니다.

참사이언스몰 동영상 참고, 실험설명 자료실에서 내용 다운받으세요.

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