BIOQUÍMICA

SEMINARI
ACTIVITAT
ENZIMÀTICA
CINÈTICA ENZIMÀTICA

EQUACIÓ DE MICHAELIS-MENTEN

Vmax [S]
V=
Km + [S]

La constant de Michaelis Km és la concentració de substrat a la qual la velocitat de la reacció

enzimàtica és la meitat de la Vmax.

És una mesura de l’afinitat de l’enzim pel seu substrat.

EXERCICI 1

1. Un enzim catalitza una reacció amb una velocitat màxima de 5 mmols/minut, essent la
seva Km pel substrat de 0.5 mM.

Si l’enzim es troba en presència d’una concentració de 500 mM de substrat, quina quantitat de

substrat es transformarà en 10 minuts?
CINÈTICA ENZIMÀTICA

REPRESENTACIÓ DE LINEWEAVER-BURK

Representació dels dobles inversos: es representa l’invers de la velocitat en front l’invers de la

concentració de substrat.

Representa una línia recta (y = ax + b)

y= 1/v
x= 1/[S]

El punt de tall entre la recta i l’eix d’ordenades

(x=0) és equivalent a 1/Vmax.

El punt de tall entre la recta i l’eix d'abscisses

(y=0) equival a -1/Km.
Per resoldre els exercicis 2 i 3 és necessari fer la representació gràfica dels valors
segons el model de Lineweaver-Burk i obtenir l’equació de la recta resultant.

EXERCICI 2

S’ha determinat la velocitat inicial d’una reacció amb el següents resultats:

[S] (mmol/L) V (mmol/min)

2 2,5
3,3 3,1
5 3,6
10 4,2

Determina la Km i la Vmax amb la linearització de Lineweaver-Burk.

INHIBICIÓ ENZIMÀTICA

INHIBICIÓ COMPETITIVA:
L’inhibidor competeix pel centre d’unió al substrat.

En presència d’un inhibidor competitiu,

la Km augmenta i la Vmax no es veu afectada.

INHIBICIÓ ACOMPETITIVA:
L’inhibidor s’uneix al complex ES i no a l’enzim lliure.

En presència d’un inhibidor acompetitiu,

la Km disminueix (augment aparent de l’afinitat)
i la Vmax disminueix.
INHIBICIÓ ENZIMÀTICA

INHIBICIÓ NO COMPETITIVA:
L’inhibidor s’uneix a l’enzim lliure o al complex ES, però no competeix pel substrat.

En presència d’un inhibidor no competitiu,

la Km no es veu afectada i la Vmax disminueix.
EXERCICI 3

S’ha estudiat la cinètica d’un enzim en absència i presència d’un inhibidor:

V (mmol/min)
[S] (mmol/L) Sense inhibidor Inhibidor

0,71 0,20 0,18

0,40 0,18 0,15
0,31 0,16 0,12
0,098 0,12 0,08
0,066 0,10 0,055
0,040 0,070 0,038

a) Determina la Km i la Vmax en absència i presència de l’inhibidor.

b) Quin tipus d’inhibició es produeix? Raona la resposta.