Bioinspirované mikro- a nanosystémy:

možnosti jejich aplikací v katalýze a medicíně

Miloš Sedlák

Univerzita Pardubice
Fakulta chemicko-technologická
Ústav organické chemie a technologie

Centralizovaný rozvojový projekt MŠMT č. C29:

„Integrovaný systém vzdělávání v oblasti výskytu a eliminace reziduí léčiv v životním prostředí“
Bioinspirované organicko-anorganické hybridní materiály

Biomimetická mineralizace

2
 Některé přírodní biominerály CaCO3

Coccolith Perleť Ušeně mořské Perleťový korál

(kalcit – trigonální systém) (aragonit – ortorombický systém) (vaterit – hexagonální systém)

Sedlák M., Kašparová P.: Vesmír, 2003, 82,616.

3
 Princip funkce molekulárního nástroje
při mineralizačním experimentu

= hydrofilní, vysoká afinita k minerálu

“rukojeť“ = hydrofilní, zanedbatelná afinita k minerálu
“čelo”
Amfifilní chování při kontaktu s
povrchem minerálu
umožňuje - řídit velikost a tvar částic
- stabilizovat koloidní systém

+
minerální superstruktura

kontrola modifikace krystalu

4
= minerál bez šablony se šablonou
 Syntéza série modifikovaných
hydrofilních blokových kopolymerů
Polymerní templáty pro biomimetický růst minerálních krystalů

Cl
m - PEG O CH2 m-PEG O
O
(5000 g mol–1) O

Polyethyleneimine
(700, 2000 g mol–1)

OH R(H) R(H)
OH H H BrCH2COOH O N N
m - PEG x N y
O N N
m - PEG PO 3H2
x N y SO 2 NH
O CH3N =C=S R(H)
NH2 PEG-b-PEI-R
PEG-b-PEI

R: –CH2COOH, –(CH2)2PO3H2, –(CH2)3SO3H, CH3N=C(SH)–

Sedlák M., Cölfen H., Antonietti M.: Macromol. Chem. Phys. 1998, 199, 247. 5
Provedení mineralizačního experimentu

6
Sedlák M., Cölfen H., Antonietti M.: Macromol. Chem. Phys. 1998, 199, 247.
 Vliv přítomnosti polymerního templátu
s různými funkčními skupinami na morfologii
krystalů síranu barnatého
2µm

0.5µ
m

PEG-b-PEI-SO3H PEG-b-PMAA-Asp

0.5µm 2µm

bez aditiva
2µ
m

PEG-b-PEI-COOH PEG-b-PEI-PO3H2

Sedlák M., Cölfen H.: Macromol. Chem. Phys. 2001, 202, 587 -597. 7
 Vliv polymerního templátu modifikovaného chirálními ligandy
na morfologii a resoluci vínanu vápenatého
OH R(H) R(H)
O N N
O n x N y
O OH NH NH2
PEG-b-PEI-R R(H)
H H CO
N H
HO H
H OH N
H OH H

PEG-b-PEI-L-Glukonát. PEG-b-PEI-L-Histidin.

H
HO O O
CO
N H Samotný CaT
H HO OH

PEG-b-PEI-L-Prolin. PEG-b-PEI-L-Askorbát.

8
Mastai Y., Sedlák M., Cölfen H., Antonietti M.: Chem. Eur. J. 2002, 8, 2429-2437.
 Další možnosti využití templátů
Příprava a charakterizace „nanorobotu“ určeného k vychytávání
HN Chol
cholesterolu z vodného prostředí
H3C
CH3 O
CH3 H
CH3 O N NH2
CH3 H3C O N
H3C H H
~112 O
O mPEG-b-PLL n
H H
Cl O TEA mPEG-b-PLL-Chol
NH
Chol

– sledováno zvyšování velikosti micel - zachytávání molekul cholesterolu prostřednictvím

nekovalentních interakcí
HRTEM
Počet
Velikost
zachycených Velikost
micel
molekul micel
Polymer (nm)
cholesterolu (nm)
polymer
na molekulu polymer
+ zachycený chol.
polymeru
mPEG-b-PLL8.5-Chol3 6.5 28 257

PLL3-b-PEG-b-PLL4-Chol6 21 51 274

mPEG-NH-Chol1 6.7 16 202

Drabinová E.; Cölfen.; Sedlák, M.: připraveno k publikování.

 Metalochromní enzymy – biomimetická katalýza
asymetrická Henryho reakce

L X L
M M X
L X L
H2 O
O C
N R2 N
HC O
L X
M O O
L X R2
1
R
R2
H

L L X
OH O M X M
L L
O O O O
1 N
R O N N
1 O
H R 1 O R
2
R H H
R2 R2

10
Evans, D. A.; Seidel, D.; Rueping, M.; Lam, H. W.; Shaw, J.T.; Downey, C. W. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125, 12692–12693.
Vysoce účinné homogenní katalyzátory
Henryho reakce

11
 Farmakologicky významné sloučeniny
založené na enantioselektivní Henryho reakci

OH
H
N

HO
OH

(R) Isoprenalin antiastmatikum

 Henry reakce:
stereoselektivní syntéza klíčového meziproduktu léčiva
Fosamprenavir (komplex Cu2+/midazolin-4-on)

Léčba HIV infekce: peptidomimetický inhibitor HIV-proteáz

Panov, I.; Drabina, P.; Hanusek, J.; Sedlák, M.: Synlett 2013, 24, 1280 – 1282. 13
 Recyklovatelné katalyzátory Henryho reakce – pro udržitelné technologie

Příprava katalyzátoru koordinací ligandu na polymerní měďnatou sůl

Bhosale D.S.;Drabina P.; Palarčík J.; Hanusek J.; Sedlák M.:Tetrahedron Asymmetry 2014, 25, 334–339.
14
 DLS charakterizace katalyzátoru v ethanolu (96%)

PEG-b-PGACu-L-1

Distribuce hydrodynamické velikosti micel PEG-b-PGACu-L-1 závisí na koncentraci:

25 mg·ml–1 : 189 ± 33 nm
2,5 mg·ml–1: 134 ± 16 nm
15
 Enantioselektivní katalýza Henryho reakce: srovnání katalyzátorů

20 mol % Cu(II)
H
N N
O O
H3 C C 2 N
H i Pr
O Cu
H3 C

O
Pokus Katalyzátor L-1/Cu(OAc)2 PEG-b-PG-CuL-1 C CH3
O

R konverzeb eec konverzeb eec L-1/Cu(OAc)2

(%) (%) (%) (%)
1 Ph 97 92 98 84
O H O
2 2-MeOC6H4 97 92 96 90 O N NH2
H3C N
3 4-ClC6H4 97 90 91 84 110 H 8

4 4-BrC6H4 97 92 89 61
O O O O
5 4-PhC6H4 97 92 98 78 2
Cu
6 t-Bu 87 96 70 92 CH3
N N i Pr

aHomogenní
N O
katalyzátor H
bVýtěžky izolovaného produktu po chromatografickém čištění
cStanoveno HPLC na koloně Chiracel OD-H
PEG-b-PG-CuL-1
(6,92% Cu(II)
16
 Princip recyklace katalyzátoru

O H O
O N NH2
H3C N
110 H 8

Organic layer
O O O O
2
Cu
CH3
N N i Pr

N O
H

Ověření recyklovatelnosti katalyzátoru pro reakci MeNO2 s 2-MeOC6H4CHO

17
Bhosale D.S.;Drabina P.; Palarčík J.; Hanusek J.; Sedlák M.:Tetrahedron Asymmetry 2014, 25, 334–339.
Nosiče založené na síťovaných perlových kopolymerech styrenu

Botnavé

Makroporézní

Kristensen T. E.; Hansen, T.: Eur. J. Org. Chem. 2010, 3179-3204

18
 Imobilizace ligandu na polymerní nosiče

Testování katalyzátorů připravených z komerčních polymerů :

Za 1 týden dosaženo pouze 5% konverze !

Polymerní matrice komerčních polymerů výrazně zpomaluje difuzi reaktantů.

19
 Suspenzní polymerace
příprava perlového nosiče PS-VBC-TEG

Kopolymerace:
styren,
4-vinylbenzychlorid,
tetra(ethylenglylol)-bis(4-vinylbenzyl) ether

20
Androvič, L.; Drabina, P.; Panov, I.; Frumarová, B.; Kalendová, A.; Sedlák, M. Tetrahedron: Asymmetry 2014, 25, 775–780.
 Charakterizace připraveného perlového polymeru
PS-VBC-TEG

Obsah chloru: 5,84 %; 1,65 mmol/g

Velikost kuliček: 200 – 800 µm

Botnavost: EtOH – 11 ml·g–1

THF – 22 ml·g–1
DMSO – 18 ml·g–1

21
 Ramanova spektroskopie
a) Připravený polymer PS-VBC-TEG

b) Ligand zakotvený polymeru PS-VBC-TEG

5,21 % Cu(II)
c) Komplex zakotveny PS-VBC-TEG (katalyzátor)

N N
H
polymer

22
 Enantioselektivní katalýza Henryho reakce: srovnání katalyzátorů
20 mol % Cu(II)

Pokus Katalyzátor Aa B

R konverzeb eec konverzeb eec

(%) (%) (%) (%)

1 Ph 94 91 >99 86
2 2-MeOC6H4 >99 95 96 90 Katalyzátor A
3 4-NCC6H4 – – >99 82
4 4-ClC6H4 – – >99 84
5 4-PhC6H4 – – >99 76
6 2-NO2C6H4 – – >99 82
7 4-NO2C6H4 >99 98 >99 79
8 n-Bu >99 93 >99 90

9 t-Bu 92 93 98 93

10 c-C6H11 96 97 97 96
Katalyzátor B
a n-PrOH,r.t., 24–72 h (Arai, OL 2007)
b Výtěžkyizolovaného produktu po chromatografickém čištění
c Stanoveno HPLC na koloně Chiracel OD-H
23
 Ověření recyklovatelnosti katalyzátoru
pro reakci MeNO2 s t-C4H9CHO

Katalyzátor lze recyklovat nejméně 5 × bez poklesu výtěžku a bez ztráty enantioselektivity

24
Androvič, L.; Drabina, P.; Panov, I.; Frumarová, B.; Kalendová, A.; Sedlák, M. Tetrahedron: Asymmetry 2014, 25, 775–780.
 Příprava nanočástic Fe3O4@SiO2-NH2
1. Hydrofilní nanočástice Fe3O4 (FeSO4/NaOH, NaNO3, citronan sodný, 100 °C)

Fe2+ + 2OH– → Fe(OH)2

3Fe(OH)2 + ½ O 2 → Fe(OH)2 + 2FeOOH + H2O
Fe(OH)2 + 2FeOOH → Fe3O4 + 2H2O

2. „Core-shell“ nanočástice Fe3O4@ SiO2 (sol-gel metoda)

3. Nanočástice Fe3O4@ SiO2 –NH2

McCarhy S.A.; Davies G-L., Gunko Y.K.: Nature Protocols 2012, 7, 1677–1693.
Příprava magneticky separovatelného katalyzátoru

O OH
O O O OH
O O
pyridine
O Si NH2 + O O Si N O
OH 48 h, 25 °C H
O O
O
Fe3O4@SiO2–NH2 Fe3O4@SiO2–(COOH)2
2+
O O– Cu
– CuCO3
O O
O
O Si N O
H Fe3O4@SiO2–(COO)2Cu
O
 Charakterizace katalyzátoru Fe3O4@SiO2(COO)2CuL-1

Histogram distribuce hydrodynamické velikosti částic (DLS)

115 ± 34 nm
Fe3O4@SiO2(COO)2CuL-1

Ethanol; 0.01mg/ml

Morfologie částic

Fe3O4@SiO2(COO)CuL-1 (SEM)

Částice mají sférický charakter, 10 m2/g (BET)

vysycháním roztoku nanočástic vznikají aglomeráty
 Enantioselektivní katalýza Henryho reakce: srovnání katalyzátorů

5 mol % Cu(II)

H
N N
Pokus Katalyzátor L-1/Cu(OAc)2 Fe3O4@SiO2(COO)2CuL-1 O O
H3C C 2 N
H i Pr
O Cu
H3 C
R konverzeb (%) eec konverzeb (%) eec
O
(%) (%)
C CH3
1 Ph 97 92 93 87 O

2 2-MeOC6H4 97 92 99 87
3 4-ClC6H4 97 90 90 80 L-1/Cu(OAc)2
4 4-BrC6H4 97 92 90 73

5 4-PhC6H4 97 92 99 83
6 cyklohexyl 86 92 82 91
7 n-Butyl 82 87 87 94
8 t-Butyl 87 96 88 94

aHomogenní katalyzátor
bVýtěžkyizolovaného produktu po chromatografickém čištění
cStanoveno HPLC na koloně Chiracel OD-H
Fe3O4@SiO2(COO)2CuL-1
28
Příprava meziproduktu syntézy (R)-Salmeterolu
(antiastmatikum)
 Princip recyklace katalyzátoru

Ověření recyklovatelnosti katalyzátoru pro reakci MeNO2 s 2-MeOC6H4CHO

 Závislost konverze na množství katalyzátoru
pro reakci MeNO2 s 2-MeOC6H4CHO (10 °C)

(■) 0.12 mg/ml

(▲) 0.5 mg/ml Závislost hydrodynamické velikosti

(••) 5 mg/ml
částic katalyzátoru
Fe3O4@SiO2–(COO)2CuL-1
ο) 12 mg/ml
(ο na jeho koncentraci v reakčním prostředí:

⇒ tvorba agregátů

mg/ml mol % nm h
Fe3O4@SiO2– Fe3O4@SiO2– hydrodynamic half-life of
(COO)2CuL-1 (COO)2CuL-1 size reaction
distribution
0.12 0.05 115 ± 34 (a) >80
0.5 0.2 450 ± 39 (b) 16
1.2 0.5 593 ± 27 (c) 14
5 2 774 ± 46 (d) 23
12 5 834 ± 92 (e) 40
3.32* 5* homogenní 3*
katalyzátor
Nanosystémy pro transport léčiv
potenciální medicinální aplikace

32
 3

Systemické fungální infekce

Imunosupresivní pacienti :
1
– těžká základní choroba (leukemie, AIDS)
– po podávání imunosupresivních léků
(širokospektrá antibiotika a chemoterapeutika)
– důsledek invazivní medicíny:
průnik mikroorganismů do krevního řečiště
překonání přirozených barier
(kardiální chirurgie, katetrizace, infuse)
 Amfotericin B (AMB)
OH
H3C OH
O OH

HO O OH OH OH OH O
CH3 CO2H
H
H3C

O O CH3
OH
OH NH2
Polyenové makrocyclické antifungální antibiotikum

Izolace: 1955 Streptomyces nodosus M4575

Trejo, W.; Bennett, R. J. Bacteriol. 1963, 85, 436.

Absolutní konfigurace: 1970

Mechlinski, W.;et al Tetrahedron Lett. 1970,11, 3873.

Totální syntéza: 1987

Nicolaou. K.C.;et al J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 2821.
 Směrovaný β-glukosidáza senzitivní konjugát
AMB – star poly(ethylenglykol) (AMB4-sPEG)

O-CO-NH-AMB
O-CO-NH-AMB

OH
O O OH
HO O O
HO HN O HO
OH HO NH
OH
O O spojka
O
O O n
n
O O

O n O
O nO O-CO-NH-AMB
O-CO-NH-AMB HN
HN
OH OH
O O O O
HO HO
HO HO OH
OH

molekulární spínač

Sedlák M., Drabina P., Bílková E., Šimůnek P., Buchta V. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2008, 18 , 2952.
Princip cíleného uvolnění AMB z polymerního nosiče
O-CO-NH-AMB
AMB-HN-OC O

OH
OH β −glukosidase
O OH
O O HO
HO HO HO
H2O OH
HO HN O
OH HN O

O sPEG
1,6- elimination O sPEG
AMB4–sPEG
OH
CH2

– CO2
AMB-NH 2 AMB-NH-CO-OH O
HO
H2O HN O
HN O
O sPEG
O sPEG

konjugát (C) enzym (E) C-E C…E uvolnění

 Testování konjugátu AMB4-sPEG „in vitro“ –
enzymatická hydrolýza
Konjugát relativně stabilní ve fosfátovém pufru: pH = 7,4; c = 0,04 M,
37 °C, 24h (odšt ěpuje se méně než 5 mol % AMB)

O-CO-NH-AMB
OH

OH β −glukosidase
O O AMB-NH 2
HO H2O HO + glukose
HO HN O
OH HN O
+ CO2
O sPEG
AMB4–sPEG O sPEG

Záznam časové změny UV-vis: enzymatická hydrolýza konjugátu (3 × 10–6 M);

β-glukosidáza (Aspergillus niger. E.C.3.1.1.21) (2 mg /1 ml; 66.6 units/g);
fosfátový pufr (pH = 7,4; 2 × 10–2 M); 37 °C. (uvoln ění AMB potvrzeno též HPLC)
Inset: kinetická závislost absorbance na čase při 409 nm [τ1/2 = (103 ± 4)s].
 Onemocnění tuberkulózou (TBC)
TBC – nejrozšířenější a nejnebezpečnější infekční onemocnění
Podle WHO – ročně nově diagnostikováno 9 mil. lidí a 1,5 mil. zemře

Nejohroženější skupiny lidí – HIV infekční,

– maligně nemocní
– diabetici
– závislí na alkoholu a tabáku
– postižení silikózou
– geneticky predisponovaní

Původce – Mycobacterium tuberculosis popř. Mtb - komplex

Formy TBC
– plicní (nejčastější : Mtb nejlépe roste ve tkáních bohatých na kyslík)
– mimoplicní

WHO report 2012; http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/75938/1/9789241564502_eng.pdf 38

 Prevence a léčba TBC

– Vakcinace: aplikace oslabeného kmenu M. bovis (BCG vakcína)

– Léčba: užívání antituberkulotik (5 skupin)

Perorální antituberkulotika první volby

WHO report 2008; http://whqlibdoc.who.int/publications/2008/9789241547581_eng.pdf 39

 Současné trendy ve strategii léčby TBC
– použití léčiv s dlouhodobým účinkem
(slow-acting drugs)
– Potenciál v aplikaci konjugátů antituberkulotik s biokompatibilními polymery

Silva, M.; Lara, A. S.; Leite, C. Q. F.; Ferreira, E. I. Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 2001, 334, 189.

H H
C N
HN N C N
O
O
H
O N NH2
H3 C O N
~112 H ~5
O

HN O

Konjugát INH s blokovým kopolymerem mPEG b poly L Lys

Imramovský, A.; Grusová, L.; Beneš, L.; Pejchal, V.; Sedlák, M. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012, 22, 5952.
 Syntéza konjugátu INH mPEG-b-polyLys

Distribuce velikostí částic (DLS)

M = 6 700 g·mol–1 Ve vodě – vznik micelárního systému

173 ± 41 nm (0.1mg/ml)

Charakterizace konjugátu: 1H 13C NMR, IR, GPC, RTG-práškovou difrakcí, DLS

Imramovský, A.; Grusová, L.; Beneš, L.; Pejchal, V.; Sedlák, M. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012, 22, 5952.

5
 Uvolňování INH z polymerního nosiče za podmínek in vitro

Fosfátový pufr pH = 7,4; (1·10–1 mol·l–1); 37 °C, za 24h uvoln ěno cca 13 % INH

H H
C N
HN N C N
O
H O
O N NH2
H3C O N H
~112
O H ~5 N O

H
N
H2 N C N
O

Acetátový pufr pH = 4; (2·10–1 mol·l–1); 37 °C, za 24h uvoln ěno cca 26% INH

Imramovský, A.; Grusová, L.; Beneš, L.; Pejchal, V.; Sedlák, M. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012, 22, 5952.

42
 Návrh konjugátu INH k likvidaci rezistentních ložisek
Využití nanočástic magnetitu

Biokompatibilní, medicinálně využívané

Nanočástice Fe3O4@SiO2

Snadno připravitelné, jednoduché zavedení funkčních skupin

Možnost cíleného transportu aplikací externího magnetického pole

Marszall, M.P. :The Development of Magnetic Drug Delivery and Disposition, The Delivery of Nanoparticles,
Abbass A. Hashim (Ed.), INTECH, Shangai 2012. 43
 Příprava konjugátu Fe3O4@SiO2-INH

1. Aktivace isoniazidu

2. Příprava nanočástic konjugátu Fe3O4@ SiO2 –INH

Sedlák, M.; Bhosale D.S.; L.; Beneš, L.; Palarčík, J.; V.; Kalendová, A.; Královec, K.; Imramovský, A.: Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 4692.

44
 Charakterizace konjugátu Fe3O4@SiO2-INH

RTG difrakce práškového vzorku

(311)

(440)
(220)

(511)
(111)

(400)
(222)
Intensity (a.u.)
(b)

(422)
(a)

10 20 30 40 50 60 70
2Θ (degree)

Difrakční píky Fe3O4@SiO2–INH podobné samotným nanočásticím Fe3O4@SiO2–NH2;

odpovídají klastrům kubických spinelových nanokrystalů Fe3O4 .

Průměrná velikost krystalů Fe3O4 v klastrech a činí 13 nm (Sherrer).

45
 Charakterizace konjugátu Fe3O4@SiO2-INH

FT-IR spektroskopie

Pás 1695 cm–1 odpovídá Fe3O4@SiO2–INH uspořádání: -CO-NH-N=CH-;

Elementární analýza: obsah INH v konjugátu: 3% (210 µmol·g–1).

46
 Charakterizace konjugátu Fe3O4@SiO2-INH

Histogram distribuce hydrodynamické velikosti částic (DLS)

115 ± 34 nm

Morfologie částic Fe3O4@SiO2–INH (SEM)

Částice mají sférický charakter,

vysycháním roztoku nanočástic vznikají aglomeráty

47
 Studium uvolňovaní isoniazidu z Fe3O4@SiO2-INH za podmínek in vitro

Roztok 1·10–2 mol·l–1 HCl;

t1/2 = 65 s (kobs = 1.07·10–2 s–1)

Fosfátový pufr pH = 5.3 (2·10–2 mol·l–1)

t1/2 = 116 s (kobs = 5.98·10–2 s–1).

Fosfátový pufr pH = 7.4 (1·10–1mol·l–1) konjugát stabilní

Sedlák, M.; Bhosale D.S.; L.; Beneš, L.; Palarčík, J.; V.; Kalendová, A.; Královec, K.; Imramovský, A.: Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 4692.

48
 Studium toxicity Fe3O4@SiO2-INH na buněčných kulturách

Testováno na buňkách lidského prsního adenokarcinomu SK-BR-3,

sledována adheze a proliferace buněk pomocí xCELLigence systému

Časová závislost
normalizovaných
CI hodnot pro INH
A pro Fe3O4@SiO2-INH
má podobný charakter

Buněčná toxicita konjugátu je srovnatelná se samotným isoniazidem.

49
 Aplikační možnosti

Kromě případné intravenózní aplikace lze uvažovat i o použití nasálním

(vhodné pro plicní formy TBC)

Sedlák, M.; Bhosale D.S.; L.; Beneš, L.; Palarčík, J.; V.; Kalendová, A.; Královec, K.; Imramovský, A.: Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 4692.

50
 Aplikace magnetických částic Fe3O4@SiO2
v biomedicinálním výzkumu – určování složení proteinů

Jednou z metod určování složení proteinů je založeno na jejich enzymatické fragmentaci

s následnou analýzou pomocí metod hmotnostní spektrometrie.

Problém separace enzymu po proteolýze byl řešen imobilizací trypsinu na Fe3O4@SiO2

Slováková M., Křížková M., Kupčík R., Bulánek, R., Bílková Z., Sedlák M.: připraveno k publikování 51
 Aplikace magnetických částic Fe3O4@SiO2
v biomedicinálním výzkumu – určování složení proteinů

MS-MALDI spektra po štěpení α-S1-kaseinu Fe3O4@SiO2-NHCO-trypsin,2 h, 25 °C

52
 Aplikace magnetických částic Fe3O4@SiO2
v biomedicinálním výzkumu – určování složení proteinů

Analýza a interpretace MS-MALDI spekter po štěpení α-S1-kaseinu Fe3O4@SiO2-NHCO-trypsin

Missed
m/z m/z Delta Modification
Protein cleavage Peptide sequence
submited matched ppm s
s
α-casein S1 615.329 615.328 1.49 0 (R)LHSMK(E)
910.475 910.474 0.70 0 (K)EGIHAQQK(E)
1267.704 1267.705 -0.06 0 (R)YLGYLEQLLR(L)
1337.682 1337.681 0.88 1 (K)HIQKEDVPSER(Y)
1384.731 1384.730 0.34 0 (R)FFVAPFPEVFGK(E)
1580.828 1580.828 0.14 0 (K)VPQLEIVPNSAEER(L)
1660.794 1660.794 0.03 1Phospho 0 (K)VPQLEIVPNSAEER(L)
1759.941 1759.945 -2.09 0 (K)HQGLPQEVLNENLLR(F)
1871.984 1871.986 -1.20 1 (K)YKVPQLEIVPNSAEER(L)
1927.691 1927.692 -0.43 2Phospho 0 (K)DIGSESTEDQAMEDIK(Q)
1951.950 1951.953 -1.16 1Phospho 1 (K)YKVPQLEIVPNSAEER(L)
2235.232 2235.236 -1.44 1 (K)HPIKHQGLPQEVLNENLLR(F)
2316.134 2316.137 -1.34 0 (K)EPMIGVNQELAYFYPELFR(Q)
3207.586 3207.593 -2.31 1 (K)EGIHAQQKEPMIGVNQELAYFYPELFR(Q)

Slováková M., Křížková M., Kupčík R., Bulánek, R., Bílková Z., Sedlák M.: připraveno k publikování
53
 Aplikace magnetických částic Fe3O4@SiO2
v biomedicinálním výzkumu – určování složení proteinů

výsledky sekvenční analýzy umožňují určit nebo identifikovat jednotlivé proteiny

VÝZKUM ÚLOHY DIAGNOSTIKA

PROTEINŮ PŘI VZNIKU NEMOCÍ SLEDOVÁNÍM
NEMOCÍ BIOMARKERŮ

VÝVOJ NOVÝCH
LÉKŮ

54
 Shrnutí
• Byly připraveny a charakterizovány nové mikro- a nanosystémy
jako recyklovatelné enantioselektivní katalyzátory a nové
transportní systémy vybraných léčiv.

• Vodnými nosiči byly koloidní blokové kopolymery PEGu,

magnetické nanočástice Fe3O4@SiO2 a botnavý kopolymer styrenu.

• Připravené heterogenní katalyzátory splňují řadu požadavků zelené

a udržitelné chemie a představují ekologicky vstřícné systémy s
vysokým aplikačním potenciálem.

• Připravené konjugáty vybraných léčiv představují nové nadějné

formy známých léčiv.

55
 Poděkování
Prof. Dr. Helmut Cölfen Doc. Ing. Jiří Hanusek, Ph.D.
Universität Konstanz Univerzita Pardubice

Dr. Klaus Tauer Doc. Ing. Pavel Drabina, Ph.D.

Max-Planck Institut Univerzita Pardubice
Potsdam
Ing. Eliška Drabinová, Ph.D.
Univerzita Pardubice
Mgr. Ilia Panov, Ph.D.
Karlova Univerzita v Praze

Ing. Jiří Váňa, Ph.D. Lydie, Harmand, Ph.D.

Karlova Univerzita v Praze Univerzita Pardubice
Ing. Ladislav Androvič
Univerzita Pardubice
Mgr. Marcela Slováková, Ph.D.
Dattatry Shivariao Bhosale, MSc. Univerzita Pardubice
Univerzita Pardubice
Děkuji za pozornost