1370 中国临床药理学杂志

第 35 卷 第 13 期 2019 年 7 月（ 总第 291 期）

依那西普预充液与复溶冻干粉注射液的
生物等效性研究
Bioequivalence between etanercept prefilled syringe and reconstituted lyophilized
powder for injection dosage forms

HUIFEN FAYE WANG， 摘要： 目的 确证依那西普预充液（ PFS  ） 和复溶冻干粉注射液（ LYO  ） 的生物

ＲOBEＲT Ｒ LABADIE， 等效性，并评估依那西普 PFS 在中国健康男性受试者中的安全性和耐受性。

JOANNE SALAGEANU 方法 一项随机、开放、双向交叉设计的研究，共纳入 50 位健康受试者。在受试

者腹部皮下单次注射 50 mg 的依那西普 PFS  （ 受试组） 或 LYO  （ 参比组） 后，评
估 2 组间的生物等效性。连续收集受试者用药后 2 周内的血液样本，用酶联免
疫吸附实验测定血清样本中依那西普的浓度，用标准非房室模型法计算药代动
（ 辉瑞公司，格罗顿 06340，美国）
力学参数。主要研究终点为初始至终末采血时间点内的浓度 － 时间曲线下面积
（ AUC last ） 和血清峰浓度（ C max ） 。结果 50 名受试者中有 48 名完成研究。受试
组与参比组 AUC last 和 C max 的校正几何平均数比例 （ 90% 的置信区间） 分别为
HUIFEN FAYE WANG1 ，
119. 2% （ 114. 1% ～ 124. 6% ） 和 115. 8% （ 109. 6% ～ 122. 4% ） ，完全位于已制定
ＲOBEＲT Ｒ LABADIE1 ，
2 种剂型的依那西普均是安
的 80% ～ 125% 的生物等效性范围内。在本研究中，
JOANNE SALAGEANU1
全的，具有良好的耐受性。结论 在中国健康受试者腹部皮下注射等量的依那
 
西普时，PFS 和 LYO 剂型间具有生物等效性。由此预测，等剂量的 2 种剂型具
有同等的治疗效果，可以互换使用。
（ Pfizer Inc. ，Groton 06340，USA） 关键词： 依那西普； 复溶冻干粉注射液； 预充注射液； 中国健康受试者； 生物等效性
DOI： 10. 13699 / j. cnki. 1001 － 6821. 2019. 13. 015
中图分类号： Ｒ97 文献标志码： A
文章编号： 1001 － 6821（ 2019） 13 － 1370 － 04

Abstract： Objective To establish the bioequivalence between etaner-

cept prefilled syringe （ PFS  ） and reconstituted lyophilized powder for
injection （ LYO  ） dosage forms and to evaluate the safety and tolerability
of etanercept in healthy Chinese male subjects. Methods This rando-
mized，open － label，two － way crossover study in 50 healthy subjects
evaluated the bioequivalence between the etanercept PFS  （ test） and the
LYO  （ reference） formulations following single 50 mg subcutaneous in-
jections in the abdomen. Serial pharmacokinetic blood samples were col-
lected for up to two weeks postdose and serum specimens were analyzed
for etanercept using an enzyme － linked immunosorbent assay. Pharmaco-
kinetic parameters were determined using standard non － compartmental
methods. The primary endpoints were area under the serum concentration
收稿日期： 2019 － 04 － 19
定稿日期： 2019 － 05 － 26 － time curve from time zero to the time of the last quantifiable concentra-
作者简介： HUIFEN FAYE WANG（ 1961 － ） ，女， tion （ AUC last ） and maximum serum concentration （ C max ） . Ｒesults Of
博士，主要从事临床药理研究
the 50 subjects enrolled 48 subjects completed the study. The 90% con-
通信作者： HUIFEN FAYE WANG
Tel： （ + 1） 8604415063 fidence intervals for the ratios of adjusted geometric means of AUC last and
E － mail： huifen. f. wang@ pfizer. com C max were 119. 2% （ 114. 1% ，124. 6% ） and 115. 8% （ 109. 6% ，
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Vol. 35 No. 13 July 2019（ Serial No. 291）

122. 4% ） ，respectively，between the test and reference formulations and were completely contained within the estab-
lished bioequivalence limits of 80% to 125% . The two etanercept formulations were safe and well tolerated in this study.
Conclusion Etanercept PFS  was bioequivalent to the LYO  dosage form at an equivalent dose when administered
subcutaneous injections in the abdomen of healthy Chinese subjects. At equivalent doses，both formulations are antici-
pated to be therapeutically equivalent and treatment could be switched between these two dosage forms.
Key words： etanercept； reconstituted lyophilized powder； prefilled syringe； healthy Chinese subject； bioequivalence

在中国大陆类风湿关节炎 （ ＲA） 和强直性脊柱炎 疱疹感染史； ⑧已知有未经治疗或未充分治疗的隐匿

（ AS） 的发病率分别约为 0. 2% ～ 0. 4% ［1］和 0. 3% ［2］。 性或活动性肺结核病史，或依据恰当的中国肺结核筛
本研究在中国健康男性受试者腹部皮下单次注射依 选标准，发现有活动性或隐匿性肺结核感染的证据；
那西普预充注射剂 （ PFS ） 或瓶装冻干粉剂 （ LYO ）
 
⑨曾有机会性感染的病史； ⑩在第 1 次使用研究药物
剂型 50 mg 后，评价 2 种剂型之间的生物等效性。 前 28 d 内，曾接种减毒活疫苗，或在研究期间或最后
1 次用药的 28 d 内准备接种疫苗。
材料、对象与方法 3 分组、治疗方法与血样采集
本方案是一项开放、单剂量、随机、双向交叉设计
1 药物与仪器 的单中心临床研究。
依那西普注射用冻干粉 （ 参比药物，LYO ） ，规 
在给药前 1 天，受试者需入住临床研究中心。 在
格： 每瓶 25 mg，批号： F85516，注射用依那西普灌装注 试验第 1 阶段，受试者被随机分配进入以下 2 组： 在
射液 （ 受 试 药 物，PFS ） 规 格： 每 瓶 50 mg，批 号：

受试 者 右 上 腹 部 位 皮 下 分 别 单 剂 注 射 依 那 西 普
12 － 004622，均由美国辉瑞公司提供。 （ PFS  ） 50 mg 和依那西普 （ LYO  ） 50 mg（ 2 瓶 ） ，
2瓶
SPECTＲAmax  340PC 分光光度计，Molecular De- LYO  分 2 次注射，间隔时间不超过 1 min，注射部位
vices 产品； ELx405 平板清洗仪，BIO － TEK Instruments 约相距 2 cm。在试验第 2 阶段，
2 组受试者交叉接受
产品。 另外一种药物。2 次给药间隔至少 28 d。
2 受试者选择 在每个研究阶段，在第 0 h（ 给药前 ） 和给药后第
本研究经北京大学第一医院国家药物临床试验 6，
12， 24，
48，
60，
72，
96， 264 和 336 h 采集血样 （ 6
168，
伦理委员会批准。 所有受试者签署知情同意书。50 mL） ，以便能提供至少 2 mL 血清用于依那西普药代
名健康中国男性受试者，受试者年龄 （ 25. 8 ± 4. 9） 岁， 动力学（ PK） 分析。
体重（ 65. 4 ± 5. 4） kg，身高 （ 171. 5 ± 5. 2） cm 和体重指 4 测定方法
－2
数（ BMI） （ 22. 2 ± 1. 2） kg·m 。 本研究血清样本中依那西普浓度由美国 Celerion
入选 标 准 18 ～ 40 岁，BMI 为 19. 0 ～ 24. 0 实验室（ Lincoln，Nebraska，USA） 按照申办方的标准操
－2
kg·m ，体重≥50 kg，愿意并能够遵从定期的访视， 作规程，使用经过验证的、敏感和特异性酶联免疫吸
服从治疗计划、实验室检查以及其他研究流程。 附实验（ ELISA） 进行测定。
排除标准 ①严重临床疾病史，过敏史或任何异 血样品处理
在本研究方案的指定的时间采集
常的相关记录； ②有滥用药物，或过量饮酒、吸烟的相 血样至适当标记的不含抗凝剂的试管中，以提供血清
关记录； ③ 在 14 d 内或 5 个半衰期内 （ 以较长者为 用于依那西普 PK 分析。在采集血样后 1 h 内，于4 ℃
－1
准） 曾使用处方或非处方药物 / 膳食补充剂，或在 90 d 下，以 3000 ～ 3500 r·min 离心 10 min。将分离的血
内或 5 个半衰期内 （ 以较长者为准 ） 曾接受试验药物 清等分为 2 份（ 每份至少 1 mL） ，置于 － 80 ℃ 保存，直
或试验生物制剂的治疗，或在第 1 次使用研究药物前 至分析。
28 d 内曾使用过中草药或中草药补充剂 ； ④对依那西 5 方法学评价
普或其中的任何赋形剂有过敏史，肝素过敏史或患有 标准曲线采用 4 参数的逻辑回归算法 （ 未加权 ）
4
肝素诱导性血小板减少症，对乳胶过敏或可能过敏； 拟合，使 校 准 标 准 范 围 适 合 为 391. 0 ～ 2. 5 × 10
⑤在过去 3 个月内，曾有明显的临床感染，或在过去 7 pg·mL － 1 。分析 方 法 的 定 量 下 限 （ LLOQ） 为 391. 0
d 内，曾遭受过任何感染； ⑥复发及潜在感染性疾病 pg·mL － 1 ，定量上限 （ ULOQ） 为 2. 5 × 10 4 pg·mL － 1 。
史； ⑦播散的单纯疱疹感染史，复发史，或播散的带状 样本 最 小 稀 释 度 为 1 ∶ 5。 血 清 依 那 西 普 浓 度 超 过
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ULOQ的临床样本需稀释到校准范围内再测定； 血清
依那 西 普 浓 度 低 于 LLOQ 的 样 本 需 报 告 为 低 于
LLOQ。低浓度、中浓度、高浓度质控（ QC） 样本和 2 份
稀 释 QC 样 本 进 行 分 析 的 日 间 测 试 精 确 度 在
－ 6. 6% ～ 3. 6% 。分析精确度表示为 QC 样本和稀释
QC 样本 的 平 均 估 计 浓 度 的 日 间 百 分 比 变 异 系 数
（ CV% ） ≤8. 1% 。
6 统计学处理
各项 PK 参数计算均根据实际样本采集时间并用 图1 中国健康男性受试者皮下单次注射依那西普后的平均
电子非房室模型分析软件 （ eNCA 版本 2. 2. 4） 进行计 血药浓度 － 时间曲线（ x珋± s）
算。低于 LLOQ 的样本在 PK 分析时设定为 0。 用血 Figure 1 Serum concentration － time profiles of etanercept

清浓度 － 时间数据的标准非房室模型法计算每位受 following single subcutaneous doses in healthy Chinese male sub-
jects （ x珋± s）
试者的依那西普 PK 参数。 使用线性 / 对数梯形法确
定 AUC last 。用公式 AUC last + （ C last / k el ） 计算 AUC inf 值，
3 生物等效性评价
其中 C last 为对数 － 线性回归分析估算得到的末次检测
在 90% CI 内，受试 / 参比的 AUClast 和 Cmax 的校正几
时间点的血清浓度预测值，k el 为通过对数 － 线性浓
何平均值比例分别为 119. 2% 和 115. 8% ，均完全处于
度 － 时间曲线进行回归分析所得到的最终速率常数。
80% ～ 125% ，表明依那西普 （ PFS ） 50 mg 与依那西普
用公式 log e 2 / k el 计算 t1 /2 。AUC inf 和 t1 /2 仅在观察到有 （ LYO ） 2 × 25 mg 在 皮 下 注 射 时 具 有 生 物 等 效 性。
良好的表征终端相时才予以报告。 良好的表征终端 AUCinf 的研究结果几乎和 AUClast 的研究结果相同，校正
相定义为至少具有 3 个数据点，对数 － 线性回归统计 几何平均值比例为 119. 3% ，
也完全位于 80% ～ 125% 。
2
的拟合 优 度 判 定 系 数 （ r ） ≥ 0. 9，以 及 外 推 部 分 占 4 安全性评价
AUC inf 的百分比（ AUC extrap% ） ≤20% 。 有 2 名受试者在注射 LYO  后发生不良事件； 2
将序列、阶段以及治疗作为固定效应，并将序列 例均出现血肌酸磷酸激酶中度增高，系由剧烈运动造
之中的受试者作为随机效应，使用混合效应模式分析 成，与研究治疗无关，并且该指标在研究完成之前已
依那西普自然对数转化的 AUC inf 、AUC last 和 C max 。 从 恢复正常。有 3 名受试者在注射 PFS  后发生不良事
该模型中获取校正平均值差异的估计值 （ 受试组 － 参 件； 其中 2 例在注射部位出现结节，
1 例出现皮疹，均
比组） 以及相应的 90% 置信区间 （ CI） 。 对 校 正 平 均 为轻度不良事件，且仅注射部位出现的结节被认为和
值差异以及 不 同 90 % CI 进 行 幂 计 算 ，从 而 估 计 校 研究药物相关。 仅有 1 名受试者因出现皮疹而退出
正几何平均值的比例 （ 受试组 － 参比组 ） 以及 90 % 研究。 本 研 究 中 单 次 皮 下 注 射 依 那 西 普 （ PFS  和
CI 的比例 。 如果 90 % CI 下的 AUC last 和 C max 校正几 LYO  ） 50 mg 是安全的，且耐受性良好。
何平均值比例能够完 全 处 于 80 % ～ 125 % 内 ，则 生
表1 皮下单次注射依那西普后的血清药代动力学参数
物 等 效 性 成 立 。 使 用 描 述 性 统 计 法 ，对 包 括
Table 1 Descriptive summary of serum etanercept pharmacokine-
AUC inf 、AUC last 、C max 、t max 、CL / F、Vz / F 和 t1 /2 在 内 的
tic parameters following single subcutaneous doses
PK 参数进行汇总 。 Parameter Ｒeference Test
N，n 48， 47 49， 49
C max （ mg·L － 1 ） * 2. 8（ 29. 0） 3. 2（ 30. 0）
结 果 t max （ h） ＊＊ 48. 2（ 24. 0 － 72. 1） 60. 0（ 23. 9 － 96. 0）
AUC last （ mg·L － 1 ·h） * 409. 7（ 25. 0） 484. 0（ 24. 0）
AUC inf （ mg·L － 1 ·h） * 439. 2（ 25. 0） 519. 1（ 23. 0）
1 血清浓度 － 时间曲线 t1 /2 （ h） # 77. 0 ± 11. 6 78. 9 ± 9. 6
有 2 名受试者退出研究，其中 1 例未接受任何研 CL / F（ mL·h － 1 ） * 113. 8（ 25. 0） 96. 3（ 23. 0）
Vz / F（ L） * 12. 5（ 28. 0） 10. 9（ 30. 0）
究药物，另 1 例在注射 PFS  后退出研究。2 组依那西
N： Number of subjects in the treatment group and contributing to the mean；
普的平均血药浓度 － 时间曲线，见图 1。 n： Number of subjects where t1 /2 ，AUC inf ，CL / F and Vz / F were repo-
2 药代动力学参数 rtable； *
： Geometric mean （ geometric % CV ） ； #
： Arithmetic mean ±
2 组依那西普的 PK 参数，见表 1。 standard deviation（ x珋± s） ； ＊＊ ： Median （ range）
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Vol. 35 No. 13 July 2019（ Serial No. 291）

利益冲突 本研究由辉瑞公司主办。Huifen Faye Wang、

Ｒobert Ｒ． LaBadie 和 Joanne Salageanu 均为辉瑞公司员工。研
讨 论
究主办方辉瑞公司以及文稿作者均参与了研究设计、数据收
集、结果分析和解读、以及文稿的撰写，并共同决定将本文投稿
［3］
依那西普的 PK 特征已在健康受试者 、ＲA、AS 发表。
［4 － 8］
及银屑病患者中有过详细描述 ，但种族 / 族裔对
依那西普 PK 的影响尚未明确。在一项含非白种人患 参考文献：
［4］
者人数较少的分析中 ，非白种人 ＲA 患者的 CL / F ［1 ］ 中华医学会风湿病学分会 . 类风湿关节炎 诊 断 及 治 疗 指 南

值比白种人 ＲA 患者高 38% 。在另一项人群 PK 分析 ［J］． 中华风湿病学杂志， 14（ 4） ： 265 － 270.

2010，
［2 ］ 中华医学会风湿病学分会 . 强直性脊柱炎 诊 断 及 治 疗 指 南
中，白种人的表观分布容积稍大于非白种人，造成这
［J］． 中华风湿病学杂志， 14（ 8） ： 557 － 559.
2010，
一差异的原因可能是由于白种人的体重较高，因为体
［3 ］ KOＲTH － BＲADLEY J M，ＲUBIN A S，HANNA Ｒ K，et al. The
重是依那西普人群 PK 分析中 CL / F 和 Vz / F 的重要 pharmacokinetics of etanercept in healthy volunteers ［J］. Ann
［9］
协变量 。KAWAI 等［10］比较分析了 3 个独立的临床 34（ 2） ： 161 － 164.
Pharmacother，2000，

研究中健康日本人（ n = 30） 和健康美国人 （ n = 32） 受 ［4 ］ ZHOU H. Clinical pharmacokinetics of etanercept： A fully huma-
nized soluble recombinant tumor necrosis factor receptor fusion pro-
试者通过皮下单次注射依那西普的 PK 参数，但未发
tein ［J］. J Clin Pharmacol，
2005，45（ 5） ： 490 － 497.
现 C max 、t max 、AUC、CL / F 和 t1 /2 等 PK 参 数 的 差 异
［5 ］ YIM D S，ZHOU H，BUCKWALTEＲ M，et al. Population pharma-
（ 均 P ＞ 0. 1） 。 cokinetic analysis and simulation of the time － concentration profile
目前尚无在中国受试者人群中有关依那西普 PK of etanercept in pediatric patients with juvenile rheumatoid arthritis
的报道。但是在中国健康受试者以及中度 AS 患者 ［J］. J Clin Pharmacol，2005，45（ 3） ： 246 － 256.
［11］ ［6 ］ ZHOU H，BUCKWALTEＲ M，BONI J，et al. Population － based
中，曾有另一个 rhTNFＲ － Fc 的人群 PK 分析报告 ，
pharmacokinetics of the soluble TNFr etanercept： A clinical study in
且其估计的人群参数和依那西普在其他种族 / 族裔中
43 patients with ankylosing spondylitis compared with post hoc data
的人群参数报道相似。本研究中依那西普 PK 参数的 from patients with rheumatoid arthritis ［J］. Int J Clin Pharmacol
估值大体与已发表报告中的其他种族人群的结果接 Ther，2004，42（ 5） ： 267 － 276.
近。本研究中依那西普（ PFS  和 LYO  ） 剂型的 CL / F ［7 ］ NESTOＲOV I，ZITNIK Ｒ，DEVＲIES T，et al. Pharmacokinetics of
－1
分别为 （ 117. 2 ± 28. 9） 和 （ 98. 8 ± 23. 0） mL·h ，而 subcutaneously administered etanercept in subjects with psoriasis
［J］. Br J Clin Pharmacol，2006，62（ 4） ： 435 － 445.
其他报告中的美国、日本和韩国人分别为 （ 132 ± 85） ，
［8 ］ ELEWSKI B，LEONAＲDI C，GOTTLIEB A B，et al. Comparison
（ 144. 0 ± 65. 3） ［10］和（ 110 ± 60） mL·h － 1［12］。 这些发 of clinical and pharmacokinetic profiles of etanercept 25 mg twice
现与种族 / 族裔的差异通常不影响生物制剂 PK 参数 weekly and 50 mg once weekly in patients with psoriasis ［J］. Br J
的特性相符。 鉴于依那西普在男性与女性之间没有 156（ 1） ： 138 － 142.
Dermatol，2007，

明显 的 PK 差 异，本 研 究 结 果 同 样 可 以 推 及 于 女 性 ［9 ］ LEE H，KIMKO H，ＲOGGE M，et al. Population pharmacokinetic

and pharmacodynamic modeling of etanercept using logistic regres-
人群。
sion analysis ［J］. Clin Pharmacol Ther，2003，
73（ 4） ： 348 － 365.
本研究结果证明，在中国健康男性受试者腹部皮 ［10］ KAWAI S，SEKINO H，YAMASHITA N，et al. The comparability
下注射等量依那西普（ PFS  和 LYO  ） 的条件下，二者 of etanercept pharmacokinetics in healthy Japanese and American
具有生物等效性。 在等剂量下，
2 种剂型预期具有相 subjects ［J］. J Clin Pharmacol，2006，
46（ 4） ： 418 － 423.

同的治疗效果，并且可以互换使用。在本研究中，该 2 ［11］ FANY Y，LI L J，WANY Ｒ，et al. Population pharmacokinetics of

rhTNFＲ － Fc in healthy Chinese volunteers and in Chinese patients
种剂型的安全性和耐受性均良好 。
with ankylosing spondylitis ［J］. Acta Pharmacologica Sinica，
致谢 首席研究员 Yuan Lyu 医师和北京大学第一医院对
31（ 11） ： 1500 － 1507.
2010，
本研究所作出贡献，美国 Celerion 实验室对 PK 样本中依那西
［12］ GU N，YI S，KIM T E，et al. Comparative pharmacokinetics and
普血清浓 度 测 定 所 提 供 的 技 术 支 持。辉 瑞 公 司 员 工 Bharat
tolerability of branded etanercept （ 25 mg） and its biosimilar （ 25
Damle 博士、Joan Korth Bradley 博士和 Jenny Fu 博士对本研究 mg） ： a randomized，open － label，single － dose，two － sequence，
设计提出的宝贵意见，辉瑞公司员工 Momoko Eda 对生物样品 crossover study in healthy Korean male volunteers ［J］. Clin Ther，
分析进行协助，Yang Wang 在辉瑞公司任职期间为本文稿撰写 33（ 12） ： 2029 － 2037.
2011，
提供帮助。 （ 本文编辑 戴荣源）