Professional Documents
Culture Documents
1. MATERIAL INVENTARIABLE
O material inventariable é de longa duración, alto precio e susceptible a reparación. Inclúense
neste apartado todos os equipos básicos de laboratorio e os equipos específicos.
1.1. Os equipos básicos de laboratorio
● As balanzas
A operación que realizamos coa balanza a denominamos pesada, aínda que en
realidade non obtemos unha lectura de peso senón de masa.
Características:
○ Exactitude: Indícanos en que medida se aproxima o valor medido ao real. Se a
exactitude é alta, o erro é pequeno
○ Precisión: É a capacidade de dar o mesmo resultado para unha mesma medición
repetida en varias ocasións
○ Sensibilidade: Informa da cantidade máis pequena que é capaz de medir.
○ Capacidade de carga: Cantidade máxima que é capaz de medir
Tipos:
Segundo o mecanismo da balanza distinguimos:
○ Balanza mecánica: Utilizan un mecanismo de palanca ou muelle que transforma
a forza do obxecto a pesar nun desplazamento que é compensado mediante
unhas masas coñecidas. Poden ser:
■ Granatario ou balanza granataria
■ De platillo único
■ Mecánicas analíticas
○ Balanzas electrónicas: Dispoñen dun platillo no que se coloca a substancia que
se vai pesar. Utilizan un electroimán para xerar a forza que contrarreste a mostra
que se pretende medir, e dan o resultado medindo a forza necesaria para
equilibrar a balanza.
No seu diseño requieren dunha cabina pechada para que as correntes de aire
non afecten a súa lectura. Esta cabina se abre e se pecha para colocar a mostra
e logo tomar a medición.
Segundo a súa sensibilidade se poden clasificar en:
○ Ultramicrobalanzas, miden ata 0,1μg
○ Microbalanzas, ata 1 μg
○ Semimicrobalanzas, ata 0,01 μg
○ Balanzas analíticas, ata 0,1 mg
○ Balanzas de precisión, poden ter distintas sensibilidades, entre 0,001g e1g.
Recomendacións para o uso correcto:
○ Colocación da balanza: Situar a balanza en soportes sólidos que eviten e
absorban as vibracións
■ Non deben colocarse en zonas de vibración
■ Evitar correntes de aire
■ Temperatura e humidade constante
■ Debe quedar perfectamente nivelada, aínda que algunhas dispoñen de un
sistema de nivelación (burbulla de aire) que debe comprobarse antes de
realizar a pesada.
○ Conexión de balanza: É necesario conectala uns 30 minutos antes de empezar
a utilizala de modo que se quente e alcanza a exactitude para a que está
deseñada
○ Verificación diaria da exactitude:
■ Efectuarse a pesada dunha pesa de calibración
■ Compróbase que a lectura que ofrece a balanza se atopa no seus límites
de incertidume
○ Modo stand by: Recoméndase que mentras non se use se manteña nese modo,
así se evita ter que esperar o tempo de quentamento cando se necesita efectuar
unha pesada.
○ Operacións de limpeza e mantemento: De forma periódica.
Operación de pesada:
1. Tarar a balanza
2. Depositar o produto (sobre un obxecto ou recipiente, centrada, con espátula ou
pipeta..)
3. Anotar el resultado
Débese ter en conta a capacidade de carga da balanza e non sobrepesala.
A pesada pódese realizar por distintos métodos:
○ Directa: Tárase a balanza co recipiente que vai conter a substancia que se vai
pesar e pésase.
○ Indirecta: Recórrese a métodos indirectos cando é imposible realizar unha
medición directa, o cal pode ocorrer se o peso que se quere medir é demasiado
grande ou demasiado pequeno ou se hai un obstáculo de outra natureza que
impiden o pesaxe.
Ex: Doble pesada: Antes e despois da extración, e ver cal é a diferenza de peso,
que corresponderá ao produto evaporado.
○ Por diferenza: Tárase a balanza co recipiente e pésase a substancia, recuperate
a substancia e se volve a pesar o recipiente cos restos que quedaran. A diferenza
entre ambas lecturas é o peso da substancias sacada.
● Pipetas automáticas ou micropipetas
Son sistemas de pipetea automáticos de gran precisión, nos cales o líquido cárgase en
puntas de plástico desfeitables.
As micropipetas se nomean segundo o máximo volume que admiten. As micropipetas
usan puntas desfeitables de plástico, estas adoitan seguir un código de cor, en función
do volumen que miden.
As puntas desfeitables de plástico adoitan seguir un código de cor.
Tipos:
Existen varios tipos de micropipetas:
○ Fixas: Solo poden dispensar o seu volume nominal
○ Con rango de volumes
○ Manuais: Débese establecer antes de usalas
Segundo as puntas que admiten:
○ Sinxelas: Só acollen unha punta cada vez
○ Multicanais: Permiten incorporar diversas puntas e succionar cunha soa
operación o mesmo volume en todas elas.
Combitips: Permiten cargar un certo volume e realizar unha serie de descargas sen
necesidade de cambiar a punta.
Os enxuages previos:
○ 2 enxuages da punta antes de proceder ao pipeteo
Realízase cheando e vaciando a punta co líquido que se vai pipetear; o líquido
empregado para o enjuague pódese devolver ao recipiente ou desfeitar.
Esta operación serve para:
○ Equilibrar a capa de líquido que se adhiere ao interior da punta e crear superficies
de contacto idénticas para todas as alícuotas
○ Adaptar o aire que hai na pipeta á temperatura da mostra
○ Axuda a neutralizar os efectos capilares en pipetas de microvolume
Técnica directa de pipeteo:
1.
2. Seleccionamos unha pipeta adecuada ao volume que necesitamos dispensar.
Colocamos a punta da pipeta directamente da caixa de almacenamento.
3. Co pulgar, presionamos o émbolo ata o primeiro tope.
4. Introducimos verticalmente a punta no líquido. Non se pode introducir moi
profundo xa que a presión pode facer que entre líquido na punta, pero tampouco
pouco profundo xa que pode entrar aire.
5. Soltamos lentamente o émbolo ata a súa posición inicial
6. Sacamos a punta do líquido, tocando as paredes do recipiente para deixar nel os
excesos de líquido do exterior da punta.
7. Dispensamos o líquido no recipiente correspondente, presionando o émbolo ata o
primeiro tope e despois ata o segundo (purgar).
8. Sacamos a punta do recipiente tocando as paredes e deixamos o émbolo na súa
posición inicial.
Os equipos de calor
Estufas: Son equipos similares aos fornos domésticos. Polo xeral, a temperatura e o tempo
pódense programar segundo os requerimentos da operación que se levará a cabo. Todos eles
incorporan termómetros que indican a temperatura; é necesario vixiar periódicamente as
temperaturas para garantir que o equipo funciona correctamente. Distinguimos 3 tipos:
● Estufas de cultivos ou de incubación: Utilizanse en microbioloxía para conseguer as
condicións ambientais óptimas para o crecemento de microorganismos.
● Estufas de desecación e esterilización: Úsanse para eliminar a humidade de distintas
substancias que se someten a temperaturas de entre 105ºC e 110ºC; cando se usan a
250ºC conseguen esterilizar por calor. Dispoñen dun sistema de ventilación interior para
que a temperatura se distribúa de modo uniforme
● Muflas: Son estufas capaces de conseguir temperaturas moi altas, de entre 200ºC e
1400ºC. As súas resistencias quentan moi deprisa, axudadas polo revestimento polo
revestimento interno, que é de material refractario. Úsanse para calcinar mostras, aínda
que tamén serven para outros tratamentos térmicos e para operacións de secado.
Precaucións:
○ Evitar tocar as superficies quentes
○ Usar guantes e pinzas
○ Non sobrepasar a temperatura de traballo do sistema
○ Mantemento
Baños termostáticos:
Proporcionan un quentamento indirecto: o equipo quente un elemento intermedio no que se
coloca un recipiente co producto. Este sistema evita que a fonte de calor actúa directamente
sobre o recipiente e permite un quentamento homoxéneo e controlado.
Baño María: Baño termostático máis habitual. Consiste nun recipiente metálico conectado a
unha fonte de calor que se chea de auga. A súa principal aplicación é manter unha temperatura
adecuada e constante inferior a 100ºC
Precaucións:
● Equipo ben equilibrado e situado. Non sobrepasar o volume máximo que admita.
● Evitar chear demasiado o recipiente a introducir
● Evitar que o recipiente flote libremento, hai que fixalo con pinzas como mínimo
● O vidro dos recipientes e das varillas debe ser de borosilicato
Placas calefactoras:
Aparatos que proporcionan calor seco. As máis habituais son as placas
calefactoras-axitadoras, que ademais de quentar axitan o produto mediante un imán que se
sumerxe no recipiente e que é sometido a un campo magnético. As súas principais aplicacións
son facilitar a disolución dunha mostra, acelerar reaccións e incubar cultivos microbianos.
Termobloques:
Equipos que quentan uniformemento un bloque metálico no que hai unha serie de cavidades,
dentro das cales se colocan recipientes coa substancia que se vai quentar.
Mechero Bunsen:
O mecheiro bunsen consta de un tubo de metal corto e vertical que se conecta a unha fonte de
gas e proporciona unha chama quente, constante e sen fume.
Na zona inferior do tubo hai un orificio que permite a entrada de aire; a intensidade da chama
se regula mediante un aro que pecha ou abre o orificio de forma total ou parcial.
Precaucións:
● Abrindo o gas lentamente para evitar que sala de golpe, cando o vamos a encender
● Verificar sempre que o gas está totalmente pechado cando o apagamos
Autoclave:
O principal equipo que aplica calor húmido é o autoclave, que é un equipo que consta dun
recipiente de paredes gruesas con tapa hermética, en cuxo interior hai unha resilla para situar
os obxectos e un recipiente con auga destilada, que se convertirá en vapor. Ten mandos para
programar a temperatura e a presión do seu interior, e o tempo do proceso. Ademais, dispón
dunha válvula de seguridade por se a presión interior elévase demasiado
O autoclave quenta a auga destilada do seu interior para que se convirta en vapor. Este vapor
de auga produce un aumento de presión no interior do autoclave, ata os niveis que
marcaramos. O aumento da presión fai que aumente a temperatura de ebullición da auga e,
polo tanto, que o vapor de auga teña unha temperatura máia elevada que si a presión fora a
atmosférica, chegando ata uns 121ºC. Para conseguir esta temperatura adoita axustarse o
autoclave a 103 kPa de presión interior.
Os equipos de frío:
Equipos de frío para conservación
● As neveiras (4/6ºC)
● Os conxeladores (-18/-20C)
● Os ultraconxeladores (cercanas a -70ºC)
Todos eles incorporan termómetros que indican a temperatura interior, é necesario manter un
control e rexistro desta Tª ao longo do tempo para garantir o correcto funcionamento do equipo.
Placas frías:
Ademais de na conservación, pode aplicarse con outros obxectivos no laboratorio como a
confección de bloques de parafina nos laboratorios de anatomía patolóxica.
Bombas de vacío
Mediante estas bombas pódese facer o vacío ou reducir a presión no interior de un instrumento
ou de un dispositivo formado por varios deles. Os instrumentos dentro dos cales pódese crear
o vacío deben dispoñer de:
● Un sistema hermético de peche
● Unha tubuladura á que conectar o tubo de caucho e, a súa vez, vai conectando á bomba
Ex: Matraz kitasato (tubuladura lateral para conectar o tubo que vai a bomba)
4. A auga
As propiedades da auga
A molécula da auga está composta por dous átomos de hidróxeno e un de osíxeno, dispostos
de tal maneira que forman un ángulo de 105º co osíxeno no vértice. Na molécula, os electróns
dispoñense cerca deste vértice, de forma que a molécula queda coas cargas negativas nese
vértice e as positivas no outro extremo, é dicir, é unha molécula polar. A causa desta
polaridade, entre as distintas moléculas de auga fórmanse unións mediante pontes de
hidróxeno. Estas unións son débiles e se rompen e se volven a formar con frecuencia na auga
líquida.
Estas características químicas fan que a auga sexa un excelente disolvente. De feito, a auga
dise que é o disolvente universal, xa que pode disolver substancias polares ou con carga iónica
Clasificación da auga dacordo á súa dureza
A auga dura ou calcárea é aquela que contén un alto nivel de sales de magnesio e calcio.
A dureza da auga exprésase normalmente como cantidade equivalente de carbonato de calcio
e se calcula a partir da suma das concentración de calcio e magnesio. Existen:
● Auga branda
● Auga levemente dura
● Auga moderadamente dura
● Auga dura
● Auga moi dura
Clasificación da auga dacordo a súa calidade fisicoquímica
Tendo en conta diversos parámetros fisicoquímicos, distinguen 4 tipos de auga (I, II, III e IV,
sendo a I a máis pura e a IV a menos pura):
● Tipos III e IV ou de grado laboratorio: Aclarado final do material de vidro, porbas
cualitativas e preparación dalgúns reactivos.
● Tipo II ou de grado analítico: Úsase na maioría dos analizadores automáticos e para
preparar a maioría dos medios de cultivo e reactivos.
● Tipo I ou ultrapura: Para cultivos celulares, absorción atómica e HPLC.
Para que a auga manteña o seu nivel de calidade é necesario aplicar os procedementos de
almacenamento e manexo que corresponda.
Clasificación da auga segundo a súa calidade microbiolóxica
Clasifícase en tipo A, B e C.
Filtración:
Paso previo antes de aplicar calquera outro medio de purificación. O procedemento máis
común é empregar un filtro de partículas que impide o paso de sólidos e a coontinuación filtro
de carbón activo que adsorben gran parte das substancias orgánicas disoltas na auga. O
carbón activo está tratado para incrementar a súa capacidade de adsorber, o cal consíguese
facendoo máis poroso.
Ósmose inversa
Consiste en aplicar presión sobre unha disolución concentrada separada mediante unha
membrana semipermeable doutra solución menos concentrada. Ao aplicar a presión
conséguese que pase auga pura e se separe da auga con maior concentración de substancias.
Pódese dicir que ocorre o contrario que nunha ósmose, xa que mentras na ósmose o equilibrio
conséguese polo paso de auga dende a disolución diluida á concentrada, na ósmose inversa
conséguese polo paso de auga dende a disolución concentrada á diluida.
Tamaño de poro nas membranas moi pequeno: 0,0005 um de diámetro.
É un procedemento relativamente barato e é eficaz para moitos usos do laboratorio, o que o
convirte no método de elección para a purificación de auga a gran escala.
O equipo de ósmose inversa pode ter varias configuracións, dependendo da calidade da auga
de alimentación, pero todos posúen unha ou varias membranas semipermeables a través das
cales circula a auga.
Débese limpar o sistema periódicamente, xa que as membranas se van colmatando.
Destilación:
Permite separar substancias en función dos seus puntos de ebullición. O proceso básico para
purificar auga mediante destilación consiste en quentar a auga de orixe, unha vez se alcanza o
punto de ebullición da auga, esta comeza a evaporarse e os seu vapores se recollen e arrefrían
para que volvan a estado líquido. O produto resultante é auga destilada, e no recipiente de
orixe quedarán as impurezas.