Tel: 508-660-2221

Fax: 508-660-2224 Glycohemoglobin Reagent Set

E-mail: info@htmed.com Catalog №
Web˖ http://htidiagnostics.com HT-G130E-40
High Technology, Inc HT-G130E-80

MỤC ĐÍCH SỬ DỤNG
Để xác định định lượng Glycohemoglobin (HbA1) trong máu bằng hạt Latex trao đổi cation. Xét nghiệm này được
sử dụng để theo dõi việc kiểm soát đường huyết trong thời gian dài ở bệnh nhân đái tháo đường.
TÓM TẮT VÀ GIẢI THÍCH XÉT NGHIỆM
Trong suốt vòng đời tuần hoàn của hồng cầu, glycohemoglobin được hình thành liên tục bằng cách thêm glucose
vào đầu N của chuỗi beta hemoglobin. Quá trình này, không phải là enzym, phản ánh mức độ tiếp xúc trung bình
của hemoglobin với glucose trong một thời gian dài. Trong một nghiên cứu cổ điển, Trivelli và cộng sự cho thấy
glycohemoglobin ở bệnh nhân tiểu đường tăng gấp 2-3 lần so với mức được tìm thấy ở người bình thường. Một số
nhà nghiên cứu đã khuyến cáo rằng glycohemoglobin đóng vai trò như một chỉ số kiểm soát chuyển hóa ở bệnh
nhân tiểu đường, vì mức glycohemoglobin đạt đến giá trị bình thường đối với bệnh nhân tiểu đường trong việc kiểm
soát chuyển hóa.
Glycohemoglobin đã được định nghĩa về mặt hoạt động là hemoglobin "phân đoạn nhanh" (HbA1a, A1b và A1c.
HbA1c kết hợp mạnh hơn với glucose và bao gồm 70% hemoglobin glycosyl hóa, trong khi HbA1a và A1b chiếm
20% hemoglobin được glycosyl hóa. Khi đo HbA1, các giá trị cao hơn 2-4% so với giá trị HbA1c.) Rửa giải đầu tiên
trong quá trình sắc ký cột với nhựa trao đổi cation. Hemoglobin không glycosyl hóa, bao gồm phần lớn huyết sắc tố
đã được chỉ định là HbA0. Quy trình glycohemoglobin hiện tại sử dụng nhựa trao đổi cation liên kết yếu để tách
nhanh glycohemoglobin (phân đoạn nhanh) khỏi hemoglobin không glycosyl hóa. Hơn 80% phần glycohemoglobin
không bền được loại bỏ trong bước tách của quy trình này do có hệ thống đệm borat.
NGUYÊN TẮC
Chế phẩm tan máu của máu toàn phần được trộn liên tục trong năm phút với nhựa trao đổi cation liên kết yếu.
Trong thời gian này, HbA0 liên kết với nhựa. Sau thời gian trộn, một bộ lọc được sử dụng để tách phần nổi phía
trên có chứa glycohemoglobin khỏi nhựa. (Lưu ý: Sự liên kết này phụ thuộc vào nhiệt độ. Do đó, cần có một tiêu
chuẩn trong mỗi lần chạy.) Phần trăm glycohemoglobin được xác định bằng cách đo độ hấp thụ ở bước sóng 415
nm (chấp nhận được từ 405-420 nm) của phần glycohemoglobin và tổng phần hemoglobin. Tỷ lệ của hai độ hấp thụ
cho ra phần trăm glycohemoglobin.
THUỐC THỬ
Test Kit containing:
1 x 120ml Bottle 8mg/ml Cation-exchange Resin in a borate buffer, pH 6.9.
1 x 30ml Bottle Glycohemoglobin Lysing Resin, 10mM Potassium Cyanide, surfactant added.
Glycohemoglobin standard set to approximately 10% glycohemoglobin. Check vial label for the exact setpoint value.
40 serum separators.
CHUẨN BỊ THUỐC THỬ
Pha lại lọ tiêu chuẩn bằng 1,0ml nước khử ion. Nhẹ nhàng trộn trong 10 phút hoặc cho đến khi tất cả nguyên liệu
tan hết.
LƯU TRỮ THUỐC THỬ
1. Bảo quản thuốc thử ở nhiệt độ phòng (21-26 ° C).
2. Chất chuẩn đã pha nên được bảo quản trong tủ lạnh (2-8 ° C) và đậy kín. Tiêu chuẩn duy trì giá trị được ấn định
trong ít nhất 30 ngày ở 2-8 ° C.
NGÀY HẾT HẠN
Tất cả các thuốc thử đều ổn định đến ngày hết hạn ghi trên nhãn. Không sử dụng thuốc thử đã quá hạn sử dụng.
KHẢO SÁT THUỐC THỬ
Những thay đổi về hình thức bên ngoài của thuốc thử hoặc giá trị của vật liệu đối chứng không thuộc nhà sản xuất
phạm vi chấp nhận được có thể là dấu hiệu cho thấy tính không ổn định của thuốc thử.
1. Phân phối 5,0ml nước khử ion vào ống nhựa hoặc thủy tinh có nhãn: Tiêu chuẩn, Kiểm soát, v.v.
2. Cho 20 ul dịch huyết cầu (từ bước A3) vào ống dung dịch pha loãng huyết sắc tố toàn phần đã được dán nhãn
thích hợp. Pha trộn.
3. Điều chỉnh thiết bị về độ hấp thụ 0 ở bước sóng 415nm (chấp nhận được từ 405-420nm) với nước khử ion làm
mẫu trắng.
4. Đọc và ghi lại các giá trị độ hấp thụ cho Tiêu chuẩn, Kiểm soát, v.v ... Những giá trị này dành cho tổng lượng
hemoglobin.
LƯU Ý: Xét nghiệm glycohemoglobin này nên được thực hiện ở nhiệt độ phòng, 21-26 ° C. Các sản phẩm phản ứng cuối cùng
cho glycohemoglobin và tổng số hemoglobin xuất hiện khá ổn định. Tuy nhiên, các mẫu thử phải được đọc trong vòng một giờ
trước khi sự bay hơi trở nên đáng kể.
Tiêu chuẩn glycohemoglobin đông khô nên được đưa vào mỗi khi xét nghiệm bệnh phẩm của bệnh nhân. Nó phải được xử lý
theo cách tương tự như bệnh phẩm của bệnh nhân bao gồm cả quy trình tán huyết. Thực hiện theo các hướng dẫn đi kèm với
dụng cụ và hộp thuốc thử được sử dụng trong xét nghiệm.
GIỚI HẠN
1. Xét nghiệm này không nên được sử dụng để chẩn đoán bệnh đái tháo đường.
2. Phương pháp này có thể bị ảnh hưởng bởi nhiệt độ. Các bệnh phẩm của bệnh nhân phải luôn được thử nghiệm với thiết bị
hiệu chuẩn đi kèm trong quá trình chạy để loại bỏ ảnh hưởng của nhiệt độ.
3. HbS và HbC được glycosyl hóa liên kết chặt chẽ hơn HbA và tạo ra các giá trị thấp hơn. Các bệnh hemoglobin khác (ví dụ,
bệnh betathalassemia và bệnh thiếu máu tán huyết cũng tạo ra kết quả thấp hơn.)
4. Kết quả có thể không nhất quán ở những bệnh nhân có các tình trạng sau: nghiện thuốc phiện, nhiễm độc chì, nhiễm độc
niệu (carbamyl hóa Hb), nghiện rượu, uống aspirin liều lớn.
5. Những điều cần lưu ý có thể gây ra kết quả không chính xác là dùng pipet không đúng cách, trộn không đầy đủ và dụng cụ
được hiệu chuẩn kém.
KIỂM SOÁT CHẤT LƯỢNG
Độ tin cậy của các kết quả xét nghiệm phải được theo dõi bất cứ khi nào các mẫu bệnh phẩm được xét nghiệm bằng cách sử
dụng vật liệu kiểm tra chất lượng và tiêu chuẩn được phân tích theo cách tương tự được sử dụng cho các ẩn số. Chúng tôi đề
nghị sử dụng các chất kiểm soát glycohemoglobin có bán trên thị trường với phạm vi khảo nghiệm. Nếu các đối chứng không
nằm trong phạm vi thử nghiệm, các giá trị bệnh nhân từ lần chạy đó sẽ không được báo cáo. Việc chạy phải được lặp lại, đảm
bảo rằng tất cả các hướng dẫn trộn và xử lý được tuân thủ nghiêm ngặt.
Độ tuyến tính của xét nghiệm phải được xác minh bằng bộ kiểm tra độ tuyến tính thương mại, hoặc các dung dịch pha loãng
của mẫu cao, ít nhất sáu tháng một lần.
TÍNH TOÁN
Kết quả cho ẩn số và điều khiển được tính như sau:
Đối với mỗi mẫu, hãy tính tỷ lệ (R) của độ hấp thụ glycohemoglobin trên tổng độ hấp thụ của hemoglobin. Sử dụng phương
trình sau để xác định nồng độ chưa biết:
Unknown (%) = R (Unk) x Std Conc. (%)
R (Std)
Ví dụ: Một chất chuẩn chứa 10,0% glycohemoglobin có Abs. = 0,490 đối với phần glycohemoglobin và Abs. = 0,560 cho tổng
phần hemoglobin. Một mẫu không xác định có glycohemoglobin Abs. = 0,750 và tổng lượng hemoglobin Abs. = 0,625. Nồng độ
glycohemoglobin chưa biết là:
Standard R = 0,490 = 0,875
0,560
Unknown R = 0,750 = 1.200
0,625
Unknown % = 1.200 x 10,0% = 13,7%
0,875
CÁC GIÁ TRỊ DỰ KIẾN
Bình thường: 6,0 - 8,3%
Phạm vi bình thường đại diện cho khoảng tin cậy 95% đối với 75 đối tượng có giá trị đường huyết bình thường và không có tiền
sử bệnh tiểu đường. Mỗi phòng thí nghiệm nên thiết lập các giá trị kỳ vọng của riêng mình. Khi sử dụng Hb glycated để theo dõi
bệnh nhân đái tháo đường, kết quả nên được diễn giải riêng lẻ. Có nghĩa là, bệnh nhân nên được giám sát chống lại anh ta
hoặc chính mình. Có khoảng thời gian trễ 3-4 tuần trước khi% glycohemoglobin phản ánh những thay đổi về mức đường huyết.

DỤNG CỤ HIỆU SUẤT

Sử dụng máy quang phổ có thể đọc ở bước sóng 415nm với độ tuyến tính đến ít nhất 1,5 đơn vị OD. (Có thể chấp 1. Độ tuyến tính: Xét nghiệm glycohemoglobin cho thấy độ tuyến tính đối với mức glycohemoglobin trong khoảng 4,0% -20%.
nhận được 405-420 nm.) 2. So sánh: Một nghiên cứu trên các mẫu người bình thường và bất thường giữa quy trình glycohemoglobin này và quy trình
cột được sử dụng rộng rãi đã mang lại hệ số tương quan là 0,970 và phương trình hồi quy tuyến tính là y = 1,10x-3,00.
CÁC BIỆN PHÁP PHÒNG NGỪA (n = 36, phạm vi = 5,9-14,2%)
1. Thuốc thử này chỉ dùng để chẩn đoán trong ống nghiệm. 3. Độ chính xác:
2. Không sử dụng bên trong hoặc bên ngoài cho người hoặc động vật. Trong vòng Run: Độ chính xác của xét nghiệm nội bộ được thiết lập bằng cách xét nghiệm máu có nồng độ
glycohemoglobin bình thường và tăng cao hai mươi lần mỗi lần.
3. Không được ăn. Không trộn lẫn với axit nếu không khí HCN có thể thoát ra.
Level Mean Std. Dev. % CV.
Bình thường 7.7 0.24 3.1
THU THẬP VÀ CHUẨN BỊ CỤ THỂ Bất thường 12,8 0.21 1,6
Sự chuẩn bị đặc biệt của bệnh nhân là không cần thiết. Không bắt buộc phải nhịn ăn mẫu. Không cần chất phụ gia
hoặc chất bảo quản đặc biệt nào ngoài chất chống đông máu. Lấy máu tĩnh mạch bằng EDTA bằng kỹ thuật vô Chạy để chạy: Độ chính xác giữa các lần chạy được thiết lập bằng cách xét nghiệm máu với mức glycohemoglobin bình
trùng. Tất cả các mẫu vật của con người phải được coi là có khả năng gây nguy hiểm sinh học. Do đó, nên sử dụng thường và tăng cao trong mười lần chạy được tiến hành trong khoảng thời gian năm ngày.
các biện pháp phòng ngừa chung khi xử lý mẫu (găng tay, quần áo phòng thí nghiệm, tránh tạo ra bình xịt, v.v.). Level Mean Std. Dev. % CV.
Bình thường 8,0 0.32 4,0
LƯU TRỮ
Glycohemoglobin trong máu toàn phần được thu thập bằng EDTA ổn định trong một tuần ở 2- 8 ° C. Bất thường 14,8 0.45 3,0

4. Độ nhạy: Quy trình glycohemoglobin này có độ nhạy là 0,02% glycohemoglobin trên 0,001 đơn vị độ hấp thụ.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Các mẫu bị nhiễm mỡ nghiêm trọng có thể làm tăng kết quả. Người ta đã báo cáo rằng bilirubin máu có thể gây trở
ngại cho các phương pháp trao đổi ion. Manufactured By
Hemoglobin bào thai (HbF) có thể can thiệp vào xét nghiệm này. Các mẫu máu có tổng lượng hemoglobin lớn hơn High Technology, Inc.
18 g / dl nên được pha loãng x 2 với nước khử ion trước khi xét nghiệm. 20 Alice Agnew Dr. EMERGO EUROPE
North Attleboro, MA 02763 USA Prinsessegracht 20
VẬT LIỆU ĐƯỢC CUNG CẤP Tel: 1-508-660-2221 2514 AP The Hague
Tham khảo “Thuốc thử” E-mail: info@htmed.com The Netherlands
www.htmed.com, http://htidiagnostics.com +31 70 345 8570
VẬT LIỆU BẮT BUỘC NHƯNG KHÔNG ĐƯỢC CUNG CẤP
1. 20 ul và 100 ul Micropipettors
2. Pipet hoặc thiết bị phân phối 500 ul, 3 ml và 5 ml
3. Ống thủy tinh 13x100 mm
4. Ống thử bằng thủy tinh hoặc nhựa để chứa 0,6 ml và 5 ml
5. Rocker hoặc Rotator (ví dụ: Miles Inc., Bộ phận chẩn đoán 4651)
6. Tiêu chuẩn glycohemoglobin (Số Cat. G7540-STD)
7. Kiểm soát glycohemoglobin (Cat. Số G7540-2)
8. Nước khử ion
QUY TRÌNH
a. Chuẩn bị Hemoly
1. Phân phối Thuốc thử Lysing 250ul vào các ống có nhãn: Tiêu chuẩn, Kiểm soát, v.v ... Lưu ý: Có thể chấp nhận ống
nhựa hoặc thủy tinh có kích thước thích hợp.
2. Cho 50ul mẫu máu đã trộn đều, mẫu chuẩn hoặc mẫu chứng vào dịch lọc có nhãn thích hợp ống thuốc thử. Pha trộn.
3. Để yên trong 5 phút hoặc cho đến khi rõ ràng là quá trình ly giải hoàn toàn.
b. Chuẩn bị glycohemoglobin
1. Phân phối 1,5ml Nhựa trao đổi Cation Glycohemoglobin vào các ống thủy tinh 13 x 100 mm có dán nhãn:
Tiêu chuẩn, Kiểm soát, v.v. Lưu ý: Trước khi sử dụng, trộn nhựa bằng cách đảo ít nhất 10 lần. Xoay chai sau khi thêm vào
mỗi 5 ống.
2. Thêm 50 ul chất tan huyết (từ bước A3) vào thuốc thử nhựa thông.
3. Đặt các bộ phân tách bộ lọc trong các ống sao cho ống bọc cao su cao hơn mực chất lỏng khoảng 1cm.
4. Đặt các ống này lên máy khuấy hoặc máy quay và trộn liên tục trong 5 phút.
5. Tháo các ống ra khỏi bộ điều chỉnh hoặc bộ quay.
6. Đẩy các bộ phân tách bộ lọc vào các ống cho đến khi nhựa được đóng gói chắc chắn.
7. Phần nổi phía trên có thể được đổ vào một ống khác hoặc trực tiếp vào cuvet để đo độ hấp thụ.
8. Đặt thiết bị ở bước sóng 415 nm (chấp nhận được từ 405-420nm) với nước khử ion làm mẫu trắng.
9. Đọc và ghi lại các giá trị độ hấp thụ cho Tiêu chuẩn, Kiểm soát, v.v. Những giá trị này dành cho glycohemoglobin.

IS-ERUK-G130 Rev.1 2018-04-23 Trang 1

IS-ERUK-G130 Rev.1 2018-04-23 Trang 2