Professional Documents
Culture Documents
MAGISTRSKA NALOGA
Izola, 2022
ZAHVALA
Rada bi se zahvalila mentorici izr. prof. dr. Zali Jenko Pražnikar za vso pomoč in izjemno
odzivnost pri pripravi naloge, somentorici dr. Katji Bezek za priložnost za sodelovanje v
klinični študiji in vso pomoč pri zbiranju podatkov ter somentorju doc. dr. Andreju Gregoriju
za predano znanje na področju poznavanja gob. Posebna zahvala gre tudi podjetju
MycoMedica, d.o.o. za podporo pri izpeljavi klinične študije in možnosti sodelovanja.
Hvala tudi vsem mojim bližnjim za podporo tekom vseh študijskih let in tudi med pisanjem
magistrske naloge, ko je vsaka motivacijska beseda prišla še kako prav. Zahvalila bi se
predvsem za zaupanje vame in spodbudo tudi, ko kaj ni šlo po načrtih.
IZJAVA O AVTORSTVU
Spodaj podpisana Dominika Češek izjavljam, da:
Izola, 04.09.2022
Podpis študentke:
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Leto 2022
UDK 613.2
Jezik slv
besedila
Jezik slv/eng
povzetkov
I
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Year 2022
UDC 613.2
Language slv
Abstract slv/eng
language
Abstract Diet is one of the important factors that affect gut microbiota composition. The
purpose of the Master's thesis was to research effects of dietary
supplementation with mushroom Hericium erinaceus on gut microbiota
composition of adults. In the Master's thesis we analysed data from double
blind, randomised, placebo-controlled clinical study with title »Effects of
medicinal mushroom Hericium erinaceus on health«. 33 recruited volunteers,
randomly assigned into experimental and control group, were consuming
dietary supplement with the mushroom or placebo in duration of 8 weeks.
Participants were healthy, aged over 54 years, without known fungus allergy
and without antibiotic therapy in last 3 months before the start of the study. Gut
microbiota composition data was obtained with analysis of 2 stool samples
from baseline and 8 week phase. Results showed significant difference between
groups in one bacteria genera share along with intervention which affected the
shares of four bacteria genera. Participants gender and age influenced effect of
the dietary supplement in the experimental group. Gut microbiota in the control
group was unstable during the study. Results are showing that besides diet in
some cases we can also affect gut microbiota with consuming dietary
supplements.
II
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
KAZALO VSEBINE
KLJUČNE INFORMACIJE O DELU .................................................................................. I
KEY WORDS DOCUMENTATION .................................................................................. II
KAZALO VSEBINE ......................................................................................................... III
KAZALO SLIK.................................................................................................................. V
KAZALO PREGLEDNIC..................................................................................................VI
SEZNAM KRATIC ......................................................................................................... VII
1 UVOD..........................................................................................................................1
1.1 Črevesna mikrobiota ............................................................................................. 1
1.1.1 Vloge črevesne mikrobiote ............................................................................. 1
1.1.2 Sestava črevesne mikrobiote........................................................................... 2
1.1.3 Dejavniki vpliva na sestavo črevesne mikrobiote............................................. 4
1.2 Goba resasti bradovec ........................................................................................... 4
1.2.1 Hranilna vrednost........................................................................................... 5
1.2.2 Bioaktivne komponente.................................................................................. 5
1.2.3 Rezultati študij vpliva HE na zdravje na živalskih modelih .............................. 6
1.2.4 Rezultati kliničnih študij vpliva HE na zdravje ................................................ 7
1.3 Uravnavanje črevesne mikrobiote z gobo resasti bradovec ...................................... 8
1.3.1 Rezultati in vitro študij ................................................................................... 8
1.3.2 Rezultati študij na živalskih modelih............................................................... 9
1.3.3 Rezultati kliničnih študij................................................................................. 9
2 NAMEN, HIPOTEZE .................................................................................................11
3 METODE DELA IN MATERIALI .............................................................................12
3.1 Vzorec preiskovancev ......................................................................................... 12
3.2 Potek študije ....................................................................................................... 13
3.3 Analiza ocene telesne sestave .............................................................................. 14
3.4 Analiza prehranskih navad .................................................................................. 14
3.5 Analiza črevesne mikrobiote................................................................................ 15
3.6 Statistična obdelava podatkov.............................................................................. 15
3.7 Pregled literature................................................................................................. 16
4 REZULTATI ..............................................................................................................17
4.1 Analiza antropometričnih podatkov ..................................................................... 17
4.2 Analiza prehranskih navad .................................................................................. 18
III
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
IV
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
KAZALO SLIK
Slika 1: Povzetek ključnih vlog črevesne mikrobiote ........................................................... 2
Slika 2: Pregled ugodnih učinkov HE na živalskih modelih .................................................. 7
Slika 3: Prikaz načrta in poteka klinične študije ................................................................. 14
Slika 4: Graf primerjave ITM v posamezni skupini pred in po intervenciji .......................... 17
Slika 5: Graf primerjave dnevnega energijskega vnosa v posamezni skupini pred in po
intervenciji........................................................................................................ 18
Slika 6: Graf primerjave hranilnega vnosa v posamezni skupini pred in po intervenciji ....... 19
Slika 7: Graf relativne zastopanosti bakterijskih debel pred intervencijo ............................. 20
Slika 8: Graf relativne zastopanosti bakterijskih rodov pred intervencijo............................. 21
Slika 9: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih debel v eksperimentalni skupini
pred in po intervenciji........................................................................................ 22
Slika 10: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih rodov v eksperimentalni skupini
pred in po intervenciji........................................................................................ 24
Slika 11: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterij na nivoju debel med eksperimentalno
in kontrolno skupino tekom intervencije............................................................. 25
Slika 12: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterij na nivoju rodov med eksperimentalno
in kontrolno skupino tekom intervencije............................................................. 26
Slika 13: Graf primerjave spremembe alfa diverzitete v eksperimentalni in kontrolni skupini
......................................................................................................................... 27
Slika 14: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih debel v kontrolni skupini pred in
po študiji........................................................................................................... 29
Slika 15: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih rodov v kontrolni skupini pred in
po študiji........................................................................................................... 31
V
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
KAZALO PREGLEDNIC
Preglednica 1: Pregled dejavnikov vpliva na sestavo črevesne mikrobiote............................. 4
Preglednica 2: Skupine bioaktivnih komponent in njihovi predstavniki v HE ........................ 6
Preglednica 3: Opisna statistika antropometričnih parametrov in dnevnega energijskega vnosa
glede na spol .............................................................................................. 12
Preglednica 4: Opisna statistika antropometričnih parametrov in dnevnega energijskega vnosa
glede na skupino......................................................................................... 12
Preglednica 5: Opisna statistika antropometričnih parametrov glede na skupino pred in po
intervenciji ................................................................................................. 17
Preglednica 6: Opisna statistika energijskega in hranilnega vnosa glede na skupino pred in po
intervenciji ................................................................................................. 18
Preglednica 7: Pregled sprememb relativne zastopanosti bakterijskih rodov pred in po
intervenciji v eksperimentalni skupini ......................................................... 23
Preglednica 8: Pregled statistično značilnih sprememb relativne zastopanosti manj zastopanih
bakterijskih rodov in družine pred in po intervenciji v eksperimentalni skupini
.................................................................................................................. 24
Preglednica 9: Pregled sprememb relativne zastopanosti bakterijskih rodov pred in po študiji v
kontrolni skupini ........................................................................................ 30
VI
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
SEZNAM KRATIC
DNA Deoxyribonucleic acid, deoksiribonukleinska kislina
IL Interleukin, interlevkin
MO Microorganisms, mikroorganizmi
VII
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
1 UVOD
Ključne vloge črevesne mikrobiote zajemajo proizvodnjo različnih metabolitov, npr. vitaminov
in kratkoverižnih maščobnih kislin (angl. »short-chain fatty acids« – v nadaljevanju SCFA),
ohranjanje epitelne pregrade, zaviranje pritrjevanja patogenih MO na črevesno površino,
razgradnjo neprebavljivih ogljikovih hidratov in uravnavanje imunskega sistema (Sánchez idr.,
2016). Mehanizmi, ki so pomembni za proizvodnjo hranil in uravnavanje energije , so
proizvodnja SCFA in vitaminov ter vplivi MO na vire in porabo energije, hormone v črevesju
ter sitost (Flint idr., 2012). V kolikor pride v teh povezavah do motenj, lahko privede do razvoja
debelosti in metabolnega sindroma (Flint idr., 2012). Koristni MO sodelujejo tudi pri zaviranju
rasti patogenih MO s proizvodnjo SCFA, uravnavanjem črevesnega pH, sproščanjem
bakteriocinov in tekmovanjem za substrate (Flint idr., 2012). V kolikor je ravnovesje MO
porušeno, lahko pride do povečane rasti patogenih MO, kar vpliva na proizvodnjo toksinov,
preraščanje MO v tkiva ter s tem povezano vnetje (Flint idr., 2012). Prebavni sistem (angl.
»gastrointestinal tract« – v nadaljevanju GIT) v zdravem stanju ima pomembno imunsko
funkcijo, pri kateri sodelujejo MO z uravnavanjem provnetnih in protivnetnih signalov (Flint
idr., 2012). V kolikor ta povezava ne deluje optimalno, pride do vnetja in možnih motenj v
imunskem odzivu, ki se lahko razvijejo v kronično vnetno črevesno bolezen (Flint idr., 2012).
Pri normalni motiliteti črevesia so vključeni metaboliti, proizvedeni s pomočjo MO iz
neprebavljivih ogljikovih hidratov, npr. SCFA in plini (Flint idr., 2012). V kolikor pride do
motenj v uravnavanju plinov, se lahko razvije sindrom razdražljivega črevesja, za katerega je
značilno zaprtje, diareja in napihnjenost (Flint idr., 2012). Aktivnost MO v črevesju je
pomembna tudi pri metabolizmu maščob in holesterola, zato lahko motnje vplivajo na zdravje
srčno-žilnega sistema (Flint idr., 2012). Ostale spremembe v sestavi črevesne mikrobiote na
nivoju ljudi in živali so lahko povezane tudi z drugimi kroničnimi boleznimi, npr. aterosklerozo,
hipertenzijo, sladkorno boleznijo tipa 2, srčno odpovedjo in kronično ledvično boleznijo (Tang,
Kitai in Hazen, 2018).
1
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Slika 1: Povzetek ključnih vlog črevesne mikrobiote (povzeto po Singh idr., 2020)
2
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Sestava črevesne mikrobiote se v veliki meri spreminja v treh življenjskih obdobjih, tj. od
rojstva do zaključka obdobja dojenja, od zaključka obdobja dojenja do uvajanja hrane in v
starosti (Flint idr., 2012). Prve bakterije, ki kolonizirajo črevesje ob rojstvu, so fakultativni
anaerobi (Eggesbø idr., 2011), ki proizvajajo anaerobne pogoje, pomembne za rast obligatornih
anaerobov, predvsem bakterij iz rodov Bifidobacterium in Bacteroides (Flint idr., 2012).
Dojenčki, rojeni po naravni poti, imajo 3 dni po rojstvu večjo količino in raznolikost bakterij iz
rodu Bificobaterium kot dojenčki, rojeni s pomočjo carskega reza (Biasucci idr., 2010; Huurre
idr., 2008). V obdobju razvoja dojenčkov na sestavo mikrobiote vpliva tudi sama prehrana, in
sicer imajo dojeni dojenčki bolj stabilno, manj raznoliko bakterijsko združbo (Fallani idr., 2010;
Klaassens idr., 2009) z večjim deležem bakterij iz rodu Bifidobacterium v primerjavi z dojenčki,
hranjenimi z mlečno formulo (Fallani idr., 2010; Harmsen idr., 2000; Roger in McCartney,
2010). Po začetku uvajanja goste hrane se sestava črevesne mikrobiote začne razvijati v smer
sestave črevesne mikrobiote odraslih, za katero je na splošno značilna večja raznolikost (Favier,
Vaughan, De Vos in Akkermans, 2002; Roger in McCartney, 2010) in večja količina
anaerobnih bakterij iz debla Firmicutes (Fallani idr., 2011). Kljub raznolikosti na nivoju
filotipov, so določene vrste pogosto zaznane v večjih koncentracijah v večini vzorcev blata
odraslih (Flint idr., 2012), profili mikrobiote iz vzorcev blata pri zdravih odraslih pa kažejo na
precejšnjo stabilnost tudi skozi čas (Costello idr., 2009; Franks idr., 1998; Zoetendal,
Akkermans in De Vos, 1998). Relativno stabilna mikrobiota odraslih se kaže predvsem na
nivoju trdoživosti MO, v kolikor ni prisotnih ekstremnih zunanjih pritiskov (Faith idr., 2013).
3
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Aktualne študije poročajo o več različnih zunanjih dejavnikih, ki lahko vplivajo na sestavo in
funkcije črevesne mikrobiote, vključno s starostjo in spolom gostitelja, življenjskim okoljem,
načinom prehrane, patološkimi stanji ter farmakološkimi zdravljenji (Nie, Chen, Hu, Fan in
Nie, 2019; Wen in Duffy, 2017). Notranji dejavniki, ki pomembno vplivajo na okolje v črevesju
in posledično sestavo črevesne mikrobiote ter s tem povezane spremembe, pa zajemajo pH,
raven kisika in koncentracijo žolčnih kislin (Flint idr., 2012).
Preglednica 1: Pregled dejavnikov vpliva na sestavo črevesne mikrobiote (povzeto po Flint idr., 2012; Wen
in Duffy, 2017)
Prehrana je obravnavana kot najbolj pomemben dejavnik, saj vpliva tako na sestavo, kot tudi
na raznolikost črevesne mikrobiote (Makki, Deehan, Walter in Bäckhed, 2018). Prav tako so
številne klinične študije potrdile vpliv izbranih prehranskih komponent (Flint idr., 2012). Kljub
temu da imajo spremembe v načinu prehrane potencial za uravnavanje sestav e in funkcije
črevesne mikrobiote v roku nekaj dni, je točen časovni okvir odvisen od vsakega posameznika
(Walker idr., 2011). Nekatere spremembe v prehrani lahko povzročijo hitre spremembe v
sestavi črevesne mikrobiote, nekatere od teh sprememb v mikrobioti pa je težko povrniti v
prvotno sestavo (Šikić Pogačar in Mičetić Turk, 2020). Vnos posameznih hranil lahko vpliva
na posamezne rodove bakterij pri odraslih, kar je pokazala študija, izvedena s strani Wu idr.
(2011), v kateri so bile bakterije iz rodu Prevotella povezane z vnosom prehranskih vlaknin,
bakterije iz rodu Bacteroides pa z visokim vnosom beljakovin. Manjši vnos ogljikovih hidratov
vpliva na znižanje zastopanosti bakterij, ki razgrajujejo prehranske vlaknine, npr. bakterije iz
rodov Ruminoccocus, Eubacterium, Clostridium in Bifidobacterium (Mardinoglu idr., 2018).
Spremembe v vnosu neprebavljivih ogljikovih hidratov vplivajo na sestavo mikrobiote v blatu,
vendar ti odzivi niso univerzalni in nanje vpliva začetna sestava črevesne mikrobiote
posameznika (Flint idr., 2012).
4
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Ena izmed vrst gob z ugodnimi učinki je tudi bela mesnata goba resasti bradovec (Hericium
erinaceus – v nadaljevanju HE), ki spada med šibke parazite in večinoma uspeva na odmrlem
lesu in razpokah živega lesa listavcev (Boddy, Crockatt in Ainsworth, 2011). Druga
poimenovanja za gobo so Yamabushitake na Japonskem in Houtou na Kitajskem (Yang idr.,
2021). Spada v družino Hericiaceae (Li idr., 2021) in je na splošno gojena v veliki meri,
posebno v azijskih državah kot del tradicionalne kitajske medicine (Tian idr., 2022), uporabi pa
se jo v obliki funkcionalnega živila (npr. pijače, fermentirane pijače, piškoti, aditiv za kruh)
(Diling, Chaoqun idr., 2017; Friedman, 2015) ali prehranskega dopolnila (He idr., 2017).
Trosnjak HE vsebuje 61,1 % ogljikovih hidratov, 20,8 % beljakovin, 5,1 % maščobe, 6,8 %
pepela, 6,2 % vode, energijska vrednost pa se giba okrog 1565 kJ/100 g (Cohen idr., 2014). V
primerjavi s trosnjakom, biomasa micelija vsebuje 42,9 % ogljikovih hidratov, 42,5 %
beljakovin, 6,3 % maščobe, 4,4 % pepela, 3,9 % vode, energijska vrednost pa znaša 1665 kJ/100
g. Tako trosnjak, kot tudi biomasa micelija vsebujeta različne vrednosti makro- in
mikroelementov (kalcij, krom, kobalt, baker, železo, magnezij, mangan, molibden, fosfor,
selen, natrij, žveplo, cink), prisotne pa so tudi nizke vrednosti potencialno toksičnih elementov
(aluminij, kadmij, nikelj, titan) (Cohen idr., 2014), kar je zelo odvisno od samega rastišča.
Izmed makro- in mikroelementov so v suhi masi v največjem deležu prisotni kalij (22,1 mg/100
g suhe mase), fosfor (3,62 mg/100 g suhe mase), magnezij (1,92 mg/100 g suhe mase) in kalcij
(1,35 mg/100 g suhe mase) (Nile in Park, 2014). Zaradi vsebovanih hranil in bioaktivnih
komponent lahko trosnjak in biomasa micelija služita kot prehranski vir in kot nutracev tik
(Friedman, 2015).
HE vsebuje približno 70 različnih sekundarnih metabolitov (Khan, Tania, Liu in Rahman, 2013;
Li idr., 2021; Wang, Hu, Wang, Chen in Chia, 2004), posamezne skupine so predstavljene v
preglednici 2.
5
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Preglednica 2: Skupine bioaktivnih komponent in njihovi predstavniki v HE (povzeto po Khan idr., 2013)
V tradicionalni medicini se HE omenja kot hrana za nevrone, saj bi naj imel nevroprotektivno
delovanje. Slednje je potrdila ena izmed študij, v kateri so mišim z induciranimi učnimi in
spominskimi deficiti 23 dni dodajali v prehrano prah HE (Mori, Obara, Moriya, Inatomi in
Nakahata, 2011). Pokazalo se je izboljšanje kognitivnih deficitov, kar bi lahko predstavljalo
6
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
podlago za terapijo pri kognitivnih disfunkcijah (Mori idr., 2011). V študijah so se pokazale
tudi značilnosti antitumorskega delovanja posameznih bioaktivnih komponent, ki zajemajo
mehanizme zavora rasti posameznih rakavih celic in rasti tumorjev (Friedman, 2015; Wang,
Hu, Su in Lee, 2001). Poleg tega so se pokazali tudi hipoglikemični učinki, ki so bili dokazani
na podganah s sladkorno boleznijo. Podgane so 28 dni uživale ekstrakt HE, učinek pa je bil
viden v znižanju serumske glukoze in povečanju količine inzulina v primerjavi s podganami v
kontrolni skupini (Liang, Guo, Xie in Zhao, 2013). Študije poročajo tudi o hepatoprotektivnih
učinkih HE, ki bi naj bili povezani z antioksidativno aktivnostjo polisaharidnih komponent
(Choi idr., 2005; Friedman, 2015; Han, Ye in Wang, 2013). Študija, v kateri so raziskovali vpliv
uživanja HE na lipidne parametre v krvi pri podganah, je pokazala znižanje koncentracije
celokupnega holesterola, LDL holesterola, trigliceridov in povečanje koncentracije HDL
holesterola v primerjavi s kontrolno skupino (Yang, Park in Song, 2003). Pokazali so se tudi
zaščitni učinki pri želodčnih razjedah in sicer so pri podganah zaznali mehanizme zaščitne
aktivnosti pred poškodbami želodčne sluznice, poleg tega ni prišlo do znižanja antioksidativnih
encimov (Wong idr., 2013). V študiji na miših, kjer so preiskovali učinke ekstrakta HE v
povezavi z utrujenostjo po telesni aktivnosti, se je pokazala znižana stopnja utrujenosti in
povečana raven glikogena v mišicah (Liu, Du, Wang in Yu, 2015). Slednje bi se ob potrditvi
učinka v kliničnih študijah, lahko uporabilo tudi v športni prehrani (Friedman, 2015). Ostali
ugodni učinki se kažejo tudi pri ishemiji (Friedman, 2015). Na sliki 2 so povzeti glavni učinki
HE in učinkov bioaktivnih komponent v različnih oblikah, ki so bili glede na pregled literature
potrjeni na živalskih modelih.
7
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
bila dodana silicijev dioksid in maščoba, so se v primerjavi s kontrolno skupino pokazale višje
točke na testih kognitivne funkcije (Mori, Inatomi, Ouchi, Azumi in Tuchida, 2008). Poleg tega
so preverili tudi varnost prehranskega dopolnila, ki ni imelo resnih stranskih učinkov (Mori idr.,
2008). V študiji, kjer so sodelovali pacienti z diagnosticirano blago obliko Alzheimerjeve
bolezni, so preučevali vpliv uživanja 49-tedenskega uživanja kapsul z micelijem HE (Li idr.,
2020). Eksperimentalna skupina je uživala kapsule s 350 mg micelija HE in 5 mg erinacina A
(Li idr., 2020). Po daljšem obdobju uživanja so se v eksperimentalni skupini pokazali boljši
rezultati vprašalnikov, ki so namenjeni raziskovanju kognitivnih sposobnosti in boljša
kontrastna občutljivost, v primerjavi s kontrolno skupino (Li idr., 2020). Študija je pokazala
tudi varnost prehranskega dopolnila, saj ni bilo zabeleženih resnejših stranskih učinkov v
obdobju uživanja (Li idr., 2020).
Nekaj kliničnih študij je bilo izvedenih tudi na področju duševnih motenj, predvsem depresije.
Študija, v kateri je sodelovalo 77 preiskovancev s prekomerno hranjenostjo ali debelostjo, ki so
8 tednov uživali 1200 mg ekstrakta HE v obliki kapsul, je pokazala izboljšanje simptomov
depresije in tesnobe, poleg tega je ugodno vplivalo tudi na motnje s spancem. Kljub temu ni
bilo potrjeno ali so ti učinki posledica placebo učinka zaradi jemanja prehranskega dopolnila
(Vigna idr., 2019). Poleg omenjene študije je bila izvedena še študija, ki je upoštevala protokol
placebo kontrole. V tej študiji so raziskovali učinek HE na depresijo, menopavzo in kvaliteto
spanca z uporabo epidemioloških vprašalnikov (Nagano idr., 2010). Preiskovanke v
eksperimentalni skupini so 4 tedne uživale 0,5 g posušenega trosnjaka HE in rezultati v
primerjavi s kontrolno skupino so pokazali nižje točke pri analizi simptomov in čustvenih stanj
pri depresiji, kar kaže na potencialno uporabo za uravnavanje depresije (Nagano idr., 2010).
In vitro modeli GIT fermentacije so razviti kot pomembno orodje za raziskovanje učinka
prebiotičnih substratov na sestavo in metabolno aktivnost MO v črevesni mikrobioti (Pham in
8
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Mohajeri, 2018). V študiji, izvedeni s strani Mitsou idr. (2020), so preučevali učinke z β-glukani
bogatih gob na sestavo črevesne mikrobiote in proizvodnjo metabolitov v in vitro sistemu.
Sistem je bil sestavljen iz fermentiranih kultur, vcepljenih z vzorci blata zdravih preiskovancev
nad 65 letom starosti (Mitsou idr., 2020). Rezultati v HE so pokazali najvišje induciranje SCFA
izmed izbranih gob (Mitsou idr., 2020).
V študiji, izvedeni s strani Xie idr. (2021), so raziskovali učinek 7-dnevnega uživanja HE v
obliki prehranskega dopolnila na sestavo črevesne mikrobiote pri 13 zdravih mlajših odraslih s
povprečno starostjo 30 let. Prvi del študije je vključeval 7-dnevno obdobje, v katerem
preiskovanci niso spreminjali svojih prehranskih navad in po tem času so oddali prvi vzorec
blata. Po tem je sledilo 7-dnevno obdobje uživanja prehranskega dopolnila s HE (1 g HE v
obliki praška, 3-krat dnevno), po katerem so ponovno oddali vzorec blata. Po obdobju uživanja
prehranskega dopolnila je sledilo obdobje brez uživanja prehranskega dopolnila, na koncu
katerega so oddali zadnji vzorec blata. Sestava črevesne mikrobiote je bila profilirana s 16S
ribosomalnim RNA genskim sekvenciranjem (Xie idr., 2021). Rezultati so pokazali, da je
uživanje povečalo alfa diverziteto znotraj črevesne mikrobiote s povečanjem relativne
9
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
10
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
2 NAMEN, HIPOTEZE
Aktualne študije na področju prehrane se vedno bolj usmerjajo v raziskovanje pomena črevesne
mikrobiote v povezavi z zdravjem različnih organizmov in prehranskih dejavnikov, ki vplivajo
na sestavo le-te. Pri pregledu literature na temo vpliva uživanja HE na črevesno mikrobioto
ljudi, smo opazili, da je bilo na ljudeh izvedenih manj študij v primerjavi s številom študij, ki
so testirale učinke na drugih vrstah organizmov.
11
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Vključitveni kriteriji pri izbiri preiskovancev so bili naslednji: starost nad 55 let, optimalno
zdravstveno stanje brez težjih kroničnih bolezni in brez zgodovine transplantacije tkiv/organov,
brez znanih alergij na glive in brez zdravljenja z antibiotiki v preteklih 3 mesecih. Zaradi slabše
odzivnosti preiskovancev so bili sprejeti tudi preiskovanci, ki so glede na starost bili izven
vključitvenih kriterijev (n = 1 s starostjo 54 let, n = 1 s starostjo 77 let). Po pregledu
vključitvenih kriterijev iz anketnega vprašalnika in izboru so bili preiskovanci naključno
razdeljeni v eksperimetalno (n = 18) in kontrolno skupino (n = 15). Skupini sta bili uravnoteženi
glede na spol (33,3 % M in 66,7 % Ž), starost, ITM in glede na dnevni energijski vnos. V
nobenem izmed naštetih parametrov nismo zaznali statistično značilne razlike med skupinama,
kar je prikazano v preglednici 4.
Eksperimentalna Kontrolna
skupina (n = 18) skupina (n = 15) P vrednost
Spremenljivka
Povprečje ± SD Povprečje ± SD
Starost (leta) 63,1 ± 6,7 62,6 ± 7,2 0,799
ITM (kg/m 2) 25,0 ± 3,8 25,7 ± 3,2 0,574
Energijski vnos
(kJ/dan) 8221,5 ± 3245,5 7663,8 ± 2166,1 0,691
Legenda: ITM, indeks telesne mase; n, skupno število; SD, standardni odklon.
12
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
13
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
14
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Za vsak izbran parameter je bila na začetku preverjena normalnost porazdelitve, za kar smo
zaradi velikosti vzorca preiskovancev uporabili Shapiro-Wilkov test in koeficienta asimetrije
(angl. skewness) in sploščenosti (angl. kurtosis). Za ugotavljanje normalnosti porazdelitve smo
pri Shapiro-Wilk testu uporabili vrednost p > 0,05, pri koeficientu asimetrije in sploščenosti pa
vrednosti med -1 in 1. V nadaljevanju smo za določanje statistično značilnih razlik uporabili
vrednost p < 0,05.
Raziskovali smo primerjavo deležev bakterij na nivoju debel in rodov pred in po intervenciji
znotraj eksperimentalne skupine, ki je uživala prehransko dopolnilo s HE in znotraj kontrolne
skupine, ki je uživala placebo prehransko dopolnilo. Za spremenljivke, ki so bile normalno
porazdeljene, smo uporabili parametrični parni t-test, za spremenljivke, ki niso bile normalno
porazdeljene, pa smo uporabili neparametrični Wilcoxonov test predznačenih rangov. V
nadaljevanju smo raziskovali ali obstajajo statistično značilne razlike v spremembi zastopanosti
bakterij na nivoju debel in rodov med intervencijama v eksperimentalni in kontrolni skupini.
Izbirali smo med statističnimi metodami, ki ugotavljajo razlike med dvema neodvisnima
skupinama. Za spremenljivke z normalno porazdelitvijo smo uporabili parametrični t-test
neodvisnih vzorcev, za spremenljivke, ki niso bile normalno porazdeljene , pa neparametrični
Mann-Whitneyev U test. Za iskanje morebitnih povezav med spremenljivkama starost in spol
in njunim vplivom na učinek prehranskega dopolnila s HE v eksperimentalni skupini smo
15
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
16
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
4 REZULTATI
30,0
Indeks telesne mase (kg/m2)
29,0
28,0
27,0
26,0
Pred
25,0
Potem
24,0
23,0
22,0
Eksperimentalna skupina Kontrolna skupina
Skupina
17
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Preglednica 6: Opisna statistika energijskega in hranilnega vnosa glede na skupino pred in po intervenciji
14000,0
12000,0
Povprečni dnevni vnos (kJ/dan)
10000,0
8000,0
Pred
6000,0 Potem
4000,0
2000,0
0,0
Eksperimentalna skupina Skupina Kontrolna skupina
Slika 5: Graf primerjave dnevnega energijskega vnosa v posamezni skupini pred in po intervenciji
18
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
325,0
300,0
275,0
Povprečni vnos (g/dan)
250,0
Eksperimentalna
225,0
200,0 skupina_pred
175,0 Eksperimentalna
150,0 skupina_potem
125,0
100,0 Kontrolna skupina_pred
75,0
50,0
25,0
* Kontrolna skupina_potem
0,0
OH PV B M
Vnos hranila
19
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
80
70
Relativna zastopanost (%)
60
50
40
30
20 *
10
*
0
Bakterijsko deblo
20
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Na nivoju rodov bakterij sta Mahnič in Rupnik (2018) pridobila rezultate za 253 različnih
rodov, od tega je analiza posameznih rodov pokazala visoko konsistenco z rezultati literature,
ki kažejo na to, da bakterije iz rodov Bacteroides, Faecalibacterium in Roseburia lahko tvorijo
jedro črevesne mikrobiote (Mahnič in Rupnik, 2018). V primerjavi s tujimi študijami analize
črevesne mikrobiote glede izpolnjevanja kriterijev za uvrščanje v jedro mikrobiote, so bakterije
iz rodu Faecalibacterium izpolnjevale pogoje v vseh 4 izbranih študijah, medtem ko so
bakterije iz rodu Bacteroides in Roseburia izpolnjevale pogoje v 3 od 4 izbranih študij (Falony
idr., 2016; Huse, Ye, Zhou in Fodor, 2012; Qin idr., 2010; Zhang idr., 2014).
Iz naših podatkov smo pridobili rezultate za 254 različnih bakterijskih rodov. Pri sami analizi
smo izpostavljenost rodov določali glede na zastopanost vsaj pri 10 % preiskovancev in glede
na relativno zastopanost pri vsaj 1 %. Bakterijskih rodov, ki so izpolnjevali oba pogoja, je bilo
15 in so prikazani na sliki 8. Kljub temu da pri rezultatih študije nismo določali jedra
mikrobiote, lahko vidimo podobnost rezultatov glede na relativno zastopanost bakterij iz rodov
Bacteroides in Faecalibacterium. Bakterije iz omenjenih dveh debel so bile prisotne pred
intervencijo v največjem deležu v eksperimentalni (28,6 %; 13,0 %) in kontrolni skupini (23,8
%; 8,9 %). Sledijo bakterije iz rodu Alistipes (v obeh skupinah 5,5 %), Sutterella, Clostridia
UCG-014 in ostalih rodov, ki so razvidni s slike 8. Med skupinama je bilo zaznati statistično
značilno razliko v deležu bakterij iz rodu Clostridia UCG-014 (p = 0,030). V nadaljevanju
poglavja Rezultati bodo predstavljeni tudi bakterijski rodovi, ki niso izpolnjevali prej naštetih
pogojev, vendar so se njihovi deleži tekom intervencije spremenili.
60
Relativna zastopanost (%)
50
40
30
20
10 *
0
Bakterijski rod
21
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
75,0
70,0
65,0
Relativna zastopanost (%)
60,0
55,0
50,0
45,0
40,0
35,0
30,0
25,0
20,0
15,0
10,0
5,0
0,0
Bakterijsko deblo
Pred Potem
Slika 9: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih debel v eksperimentalni skupini pred in po
intervenciji
22
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
23
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
65,0
60,0
55,0
50,0
45,0
40,0
35,0
30,0
25,0
20,0
15,0
10,0
5,0
0,0
Bakterijski rod
Pred Potem
Slika 10: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih rodov v eksperimentalni skupini pred in po
intervenciji
24
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
V sklopu same intervencije nas je zanimala primerjava deležev bakterij med eksperimentalno
in kontrolno skupino pred in po intervenciji na različnih nivojih. Posamezni deleži bakterij na
nivoju debel v obeh skupinah so primerljivi, kar je vidno na sliki 11. Iz deležev smo preračunali
razliko med končnim in začetnim stanjem ter raziskovali razlike med skupinama. Na nivoju
debel bakterij je bila le ena spremenljivka v obeh skupinah normalno porazdeljena in sicer
razlika med končnim in začetnim deležem bakterij iz debla Firmicutes, zato smo za to
spremenljivko uporabili t-test neodvisnih vzorcev za ugotavljanje statistično značilnih razlik
med eksperimentalno in kontrolno skupino tekom intervencije. T-test neodvisnih vzorcev ni
pokazal statistično značilne razlike (p = 0,873). Za razlike deležev bakterij iz ostalih debel
bakterij, ki niso bile normalno porazdeljene, smo uporabili Mann-Whitneyev U test, ki za
nobeno spremenljivko ni pokazal statistično značilnih razlik: Bacteroidota (p = 0,720),
Proteobacteria (p = 0,282), Verrucomicrobiota (p = 0,521), Actinobacteria (p = 0,206),
Desulfobacterota (p = 0,234) in Cyanobacteria (p = 0,234).
75,0
70,0
65,0
60,0
55,0
Relativna zastopanost (%)
50,0
45,0
40,0
35,0
Eksperimentalna skupina_pred
30,0
Eksperimentalna skupina_potem
25,0
Kontrolna skupina_pred
20,0
Kontrolna skupina_potem
15,0
10,0
5,0
0,0
Bakterijsko deblo
Slika 11: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterij na nivoju debel med eksperimentalno in
kontrolno skupino tekom intervencije
25
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
55,0
50,0
45,0
Reltivna zastopanost (%)
40,0 Eksperimentalna
skupina_pred
35,0
30,0 Eksperimentalna
skupina_potem
25,0
20,0 Kontrolna
15,0 skupina_pred
10,0 Kontrolna
5,0 skupina_potem
0,0
Bakterijski rod
Slika 12: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterij na nivoju rodov med eksperimentalno in
kontrolno skupino tekom intervencije
Na nivoju bakterijskih rodov smo upoštevali tudi tiste bakterijske rodove, ki niso bili zastopani
v vsaj 1 % relativne zastopanosti, v kolikor je prišlo do učinka intervencije na dotičen
bakterijski rod. To je veljalo za bakterije iz družine Flavobacteriaceae, za katerega so rezultati
Mann-Whitneyevega U testa pokazali statistično značilno razliko v povprečni vrednosti rangov
(U = 66,000; p = 0,003).
26
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Pri raziskovanju alfa diverzitete oz. pestrosti črevesne mikrobne združbe so rezultati pokazali
znižanje pestrosti v eksperimentalni skupini in minimalno povečanje pestrosti v kontrolni
skupini, kar je razvidno iz slike 13. Analiza je bila izvedena na 17 vzorcih iz eksperimentalne
skupine in 15 vzorcih iz kontrolne skupine.
Slika 13: Graf primerjave spremembe alfa diverzitete v eksperimentalni in kontrolni skupini
27
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
večji kot pri moškem spolu (6,80). Na nivoju bakterijskih rodov nismo zaznali vpliva spola na
učinek intervencije.
Na nivoju debel bakterij so deleži posameznih debel v kontrolni skupini pred in po zaključku
študije primerljivi, kar je prikazano na sliki 14. Po pregledu normalnosti porazdelitve
spremenljivk smo za ugotavljanje statistično značilnih sprememb uporabili parni t-test za delež
bakterij iz debla Firmicutes. Parni t-test ni pokazal statistično značilne razlike (p = 0,964). Za
deleže bakterij iz ostalih debel, ki niso bile normalno porazdeljene, smo uporabili Wilcoxonov
test predznačenih rangov, ki ni pokazal statistično značilnih razlik med začetnim in končnim
deležem bakterij: Bacteroidota (p = 0,078), Proteobacteria (p = 0,140), Verrumicrobiota (p =
0,211), Actinobacteria (p = 0,394), Desulfobacteria (p = 0,211) in Cyanobacteria (p = 0,263).
Ker nismo zaznali značilnih sprememb na nivoju bakterijskih debel, lahko sklepamo, da je
črevesna mikrobna združba dokaj stabilna v nekem časovnem intervalu.
28
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
70,0
65,0
60,0
Bakterijsko deblo
Pred Potem
Slika 14: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih debel v kontrolni skupini pred in po študiji
29
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Preglednica 9: Pregled sprememb relativne zastopanosti bakterijskih rodov pred in po študiji v kontrolni
skupini
30
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
prevladujejo beljakovine živalskega izvora in nasičene maščobne kisline (Wu idr., 2011), višje
vrednosti deleža teh bakterij pa so značilne za zahodnjaški način prehrane (Lin idr., 2013).
70,0
65,0 *
Relativna zastopanost (%)
60,0
55,0
50,0
45,0
40,0
35,0
30,0
25,0
20,0
15,0
10,0 *
5,0
0,0
Bakterijski rod
Pred Potem
Slika 15: Graf primerjave relativne zastopanosti bakterijskih rodov v kontrolni skupini pred in po študiji
31
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
5 RAZPRAVA
Namen magistrske naloge je bil ugotoviti, kako uživanje prehranskega dopolnila s HE vpliva
na sestavo črevesne mikrobiote, pridobljene rezultate pa smo primerjali s podatki iz kontrolne
skupine. Vključeni preiskovanci v klinični študiji so bile zdrave, odrasle osebe nad 54. letom
starosti brez znanih alergij na glive, ki niso bile zdravljene z antibiotiki v zadnjih 3 mesecih
pred začetkom študije. Zaradi slabše odzivnosti pri zbiranju prijav za sodelovanje v klinični
študiji, so bili sprejeti tudi preiskovanci, ki niso ustrezali vsem vključitvenim kriterijem (dva
preiskovanca nista izpolnjevala vključitvenega pogoja starosti). Za obdobje 8 tednov so bili
naključno razdeljeni v eksperimentalno skupino, ki je uživala prehransko dopolnilo s HE in
kontrolno skupino, ki je uživala placebo prehransko dopolnilo. V sklopu analize sestave
črevesne mikrobiote je bilo analiziranih 32 vzorcev blata, ker ena preiskovanka iz
eksperimentalne skupine svojega vzorca pred začetkom in po intervenciji ni oddala.
V slovenski populaciji imamo na voljo malo podatkov o sestavi črevesne mikrobiote v odrasli
populaciji, zato smo primerjali pridobljene podatke o relativni zastopanosti bakterij na nivoju
debel in rodov s podatki, ki sta jih v svoji študiji pridobila Mahnič in Rupnik (2018). Ugotovili
smo, da so največji delež v relativni zastopanosti bakterij na nivoju debel zajemale bakterije iz
debel Firmicutes in Bacteroidota, tako pri podatkih iz naše študije, kot tudi iz študije v
slovenski kohorti. Deleži najpogosteje zastopanih bakterijskih debel sovpadajo tudi s podatki
iz literature, ki navajajo, da 90 % vseh MO v črevesni mikrobioti zdrave osebe predstavljajo
bakterije iz omenjenih dveh bakterijskih debel (Tremaroli in Backhed, 2012). Tretje
32
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
33
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Pri opazovanju morebitnih razlik tekom intervencije med skupinama, kjer smo opazovali
primerjavo razlike deležev relativne zastopanosti bakterij na nivoju d ebel in rodov, nismo
zaznali statistično značilnih razlik med eksperimentalno in kontrolno skupino na nivoju
bakterijskih debel. Tudi na nivoju bakterijskih rodov, ki so bili prisotni v vsaj 1 % relativne
zastopanosti nismo zaznali razlike med skupinama. Statistično značilno razliko med skupinama
smo zaznali samo v primeru bakterij iz družine Flavobacteriaceae (p = 0,003). Za bakterije iz
te družine je znano, da pozitivno korelirajo s točkami MedDiet, ki ponazarja upoštevanje
mediteranskega načina prehrane, ki ima pomembno zaščitno vlogo v preventivi pred različnimi
boleznimi, vključno z debelostjo (Palmas idr., 2021). Poleg tega aktualne študije kažejo, da
polifenoli in prehranske vlaknine v sklopu mediteranske prehrane pozitivno vplivajo na
spremembo črevesne mikrobiote (Gutiérrez-Díaz, Fernández-Navarro, Sánchez, Margolles in
González, 2016), kar se je pokazalo tudi v povečanju relativne zastopanosti bakterij iz rodu
Flavobacterium po dodajanju kvercetina pri miših z inducirano nealkoholno zamaščenostjo
jeter (Porras idr., 2017). Na podlagi tega je pomembno izpostaviti, da lahko uživanje HE vpliva
na relativno zastopanost bakterij iz družine Flavobacteriaceae v primerjavi s kontrolno
skupino, kar ima pomembno vlogo pri oblikovanju optimalnega načina prehrane v povezavi z
ohranjanjem metabolnega zdravja. Glede na to, da se je pojavila razlika med skupinama samo
v primeru enega manj zastopanega bakterijskega rodu, lahko prvo hipotezo ovržem o, kljub
temu da je prišlo do spremembe v pestrosti črevesne mikrobne združbe. Glede na to, da je nižja
pestrost črevesne mikrobne združbe povezana s parametri inzulinske rezistence, slabšo kontrolo
ravni glukoze v krvi, sistemskim vnetjem (Zouiouich idr., 2021) in drugimi parametri
metabolnega zdravja, je intervencija, ki lahko vpliva na povečanje pestrosti črevesne mikrobne
združbe, ena izmed potencialnih mehanizmov za izboljšavo metabolnega zdravja.
34
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Rezultate smo primerjali tudi z rezultati pilotne študije, ki so jo izvedli Xie idr. (2021), v kateri
se je na nivoju rodov povečala relativna zastopanost koristnih bakterij, npr. bakterij iz rodu
Bifidobacterium in Bacteroides, prišlo pa je tudi do povečanja relativne zastopanosti bakterij,
ki proizvajajo SCFA, npr. bakterije iz rodu Roseburia in Faecalibacterium (Xie, idr., 2021). V
naših primerih je prišlo v eksperimentalni skupini po intervenciji do znižanja količine bakterij
iz rodu Bacteroides in Faecalibacterium ter do nespremenjene vrednosti bakterij iz rodu
Roseburia, a nobena sprememba ni bila statistično značilna. Študiji je bilo sicer težje primerjati,
ker nista imeli podobnega protokola poteka študije, tj. primerjalna študija je imela zelo majhen
vzorec preiskovancev, katerega povprečna starost je bila precej nižja, obdobje uživanja
prehranskega dopolnila je bilo 7 tednov krajše, ni imela kontrolne skupine z uporabo placebo
prehranskega dopolnila in med podatki o značilnostih prehranskega dopolnila ni bilo določeno,
za kakšno količino bioaktivnih komponent iz HE je šlo.
Na samo sestavo črevesne mikrobiote lahko vpliva tudi spol in sicer literatura navaja razlike
med moškim in ženskim spolom v sestavi mikrobne združbe v različnih življenjskih obdobjih.
V obdobju 20-89. leta starosti, Oki idr. (2016) navajajo večjo količino bakterij iz družine
Prevotellaceae pri moških in večjo količino bakterij iz družine Ruminococcaceae pri ženskah
v japonski populaciji. Takagi idr. (2018) pa v japonski populaciji navajajo višje količine bakterij
iz rodov Prevotella, Megamonas, Megasphaera, Fusobacterium pri moških in višje količine
bakterij iz rodov Ruminococcus, Bifidobacterium in Akkermansia pri ženskah v primerjavi z
nasprotnim spolom. V sklopu klinične študije smo raziskovali tudi, če lahko spol in starost
preiskovancev v eksperimentalni skupini vplivata na učinek prehranskega dopolnila s HE.
Razlike med moškim in ženskim spolom v vplivu na intervencijo so se pokazale pri bakterijah
iz debla Actinobacteria (p = 0,023) in debla Bacteroidota (p = 0,016), pri bakterijskih rodovih
pa nismo zaznali statistično značilnih razlik. Pri bakterijah iz debla Actinobacteria je bil
povprečen rang pri ženskem spolu večji kot pri moškem, kar se je pokazalo tudi pri bakterijah
iz debla Bacteroidota. Podatki iz literature za bakterije iz debla Actinobacteria navajajo večjo
relativno zastopanost pri ženskem spolu v italijanski populaciji (Borgo idr., 2018). Poleg tega
navajajo nižjo relativno zastopanost bakterij iz debla Bacteroidota pri ženskem spolu v ameriški
populaciji (Dominianni idr., 2015), medtem ko španska študija ni pokazala razlik med spoloma
v raznolikosti mikrobne združbe, tudi na nivoju bakterijskih debel (Haro idr., 2016), vendar je
podatke iz literature težje primerjati z rezultati zaradi različnih protokolov analize vzorcev in
različnih značilnosti preiskovancev v vzorcih. Tudi starost ima pomembno vlogo pri sestavi
črevesne mikrobiote, glede na to, da se najbolj vidno spreminja razmerje deležev bakterij iz
debla Firmicutes in Bacteroidota z naraščanjem starosti. Literatura navaja višje deleže bakterij
iz debla Firmicutes pri mlajših posameznikih in višje deleže bakterij iz rodu Bacteroidota v
starejši populaciji (Mariat idr., 2009). Rezultati vpliva starosti na učinek intervencije so
pokazali šibko negativno povezavo med starostjo in razliko deleža bakterij iz debla Firmicutes
(p = 0,048) in šibko pozitivno povezavo med starostjo in razliko deleža bakterij iz rodu
Lachnospiraceae NK4A136 (p = 0,011). Hipotezo o vplivu starosti in spola na učinek
intervencije lahko na podlagi predstavljenih podatkov o razlikah potrdimo.
35
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
V sklopu zadnje hipoteze nas je zanimalo ali je bila sestava črevesne mikrobiote v kontrolni
skupini, ki je uživala placebo prehransko dopolnilo v obdobju 8 tednov , stabilna. Na nivoju
debel ni prišlo do statistično značilnih razlik med začetnim in končnim stanjem relativne
zastopanosti bakterij. Na nivoju rodov je prišlo do statistično značilne razlike v de ležu bakterij
iz rodu Bacteroides (p = 0,018) in Parabacteroides (p = 0,041). Dejavnikov za spremembo je
lahko več, zato je težje določiti samo enega, ki bi lahko bil ključen za to spremembo v času
intervencije. Na podlagi rezultatov lahko ovržemo zadnjo hipotezo.
Pri primerjavi rezultatov iz izvedene klinične študije z rezultati iz literature se je pojavilo kar
nekaj izzivov. Že na nivoju raziskovanja vpliva uživanja HE na živalskih modelih se je pojavila
težava pri interpretaciji rezultatov zaradi različno zastavljenih protokolov študije. Podobna
težava se je pojavila tudi pri primerjavi sestave črevesne mikrobiote na živalskih modelih po
uživanju HE, ker so različni protokoli uporabljali različne metod ologije analize črevesne
mikrobiote. Zaradi uporabe različne tehnologije za analizo bakterijske zastopanosti in
posploševanja rezultatov študij, ki so izvedene na različnih populacijah in geografskih
lokacijah, lahko pride do težav pri interpretaciji rezultatov študij in nevarnosti izkrivljanja
realnosti podatkov (Mueller idr., 2006). Na nivoju kliničnih študij so teme raziskovanja
usmerjene predvsem v raziskovanje vpliva uživanja HE v povezavi z morebitno
nevroprotektivno vlogo na nivoju depresije, tesnobe, kognitivnih motenj in upada, zato ni na
voljo veliko študij o vplivu uživanja HE na ostale parametre zdravja. Podobna težava se po javlja
tudi v kategoriji raziskovanja vpliva uživanja HE na sestavo črevesne mikrobiote, kjer je na
voljo še manj študij. Poleg tega lahko še en izziv na vseh nivojih študij predstavljajo primerjave
različnih uporabljenih prehranskih oblik HE v protokolih študij – funkcionalna živila ali
prehranska dopolnila, različne oblike ekstraktov, uporabljene izolirane različne bioaktivne
komponente v različnih količinah, itd.
Glede na omenjene rezultate študije, bi se tudi protokol izvedene študije dalo izboljšati.
Smiselno bi bilo analizirati tretji vzorec blata po določenem času po zaključku uživanja
prehranskega dopolnila s HE. Naslednjo omejitev v študiji predstavlja majhen vzorec, ki smo
ga s težavo pridobili zaradi zbiranja prijav v času svetovne epidemije COVID-19. Velikost
vzorca vpliva tudi na izbor statističnih testov, saj so bili uporabljeni tudi statistični testi, ki so
bolj zanesljivi v primeru večjih vzorcev, npr. nad 50 preiskovancev.
36
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
6 ZAKLJUČEK
Pregled študij na temo vpliva uživanja HE na zdravje in sestavo črevesne mikrobiote na nivoju
različnih organizmov kaže na nekonsistentne rezultate. Posamezni ugodni učinki uživanja HE
na zdravje se kažejo na nivoju živalskih modelov, saj je bilo v sklopu posameznih študij
pokazanih nekaj ugodnih učinkov na zdravje, npr. nevroprotektivna vloga, ki se raziskuje tudi
na nivoju kliničnih študij. Glede na nekonsistentnost rezultatov manjšega števila študij na temo
vpliva uživanja HE na sestavo črevesne mikrobiote na nivoju živalskih modelov in kliničnih
študij je trenutno težko trditi, da ima uživanje HE ugodne učinke na sestavo črevesne
mikrobiote.
Vsekakor je potrebno v prihodnje izvesti večje število študij, ki b odo imele primerljive
protokole poteka študije in primerljive metode analize črevesne mikrobiote z namenom večje
primerljivosti rezultatov, ki je dodatno otežena s specifičnimi značilnostmi sestav e črevesne
mikrobiote glede na lokacijo izvedbe študije in vzorca zajetih preiskovancev. Trenutno n i
dovolj podatkov, da bi lahko oblikovali priporočila za vnos prehranskega dopolnila s HE z
namenom ugodnega vpliva na sestavo črevesne mikrobiote in povezanih ugodnih učinkov na
zdravje.
37
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
7 VIRI
Bäckhed, F., Ley, R. E., Sonnenburg, J. L., Peterson, D. A. in Gorson, J. I. (2005). Host -
bacterial mutualism in the human intestine. Science, 307(5717), 1915-1920.
https://doi.org/10.1126/science.1104816.
Balan, V., Munafo, J. P., Pattathil, S., Merritt, B. B., Venketachalam, S. in Ng, W. O. (2018).
Protocols to evaluate the nutritional and potential health benefits of edible mushrooms.
Current biotechnology, 7(8), 34-58.
https://doi.org/10.2174/2211550105666160503170750
Biasucci, G. Rubini, M., Riboni, S., Morelli, L., Bessi, E. in Retetangos, C. (2010). Mode of
delivery affects the bacterial community in the newborn gut. Early human development,
86(suppl. 1), 13-15. https://doi.org/10.1016/j.earlhumdev.2010.01.004.
Booijink, C. C. G. M., El-Aidy, S., Rajilić-Stojanović, M., Heilig, H. G. H. J., Troost, F. J.,
Smidt, H., ... Zoetendal, E. G. (2010). High temporal and inter-individual variation
detected in the human ileal microbiota. Environmental microbiology, 12(12), 3213-
3227. https://doi.org/10.1111/j.14622920.2010.02294.x.
Borgo, F., Garbossa, S., Riva, A., Severgnini, M., Luigiano, C., Benetti, A., ... Borghi, E.
(2018). Body mass index and sex affect diverse microbial niches within the gut.
Frontiers in microbiology, 9, 213. https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.00213
Bui, T. P. N., Shetty, S. A., Lagkouvardos, I., Ritari, J., Chamlagain, B., Douillard, F. P., ... de
Vos, W. M. (2016). Comparative genomics and physiology of the butyrate-producing
bacterium Intestinimonas butyriciproducens. Environmental microbiology reports, 8(6),
1024-1037. https://doi.org/10.1111/1758-2229.12483.
Caitriona, M. G. in Paul, D. C. (2013). Role of the gut microbiota in health and chronic
gastrointestinal disease: understanding a hidden metabolic organ. Therapeutic advances
in gastroenterology, 6(4), 295-308. https://doi.org/10.1177/1756283X13482996
Camilleri, M., Lee, J. S., Viramontes, B., Bharucha, A. E. in Tangalos, E. G. (2000). Insights
into the pathophysiology and mechanisms of constipation, irritable bowel syndrome,
and diverticulosis in older people. Journal of the American geriatrics society, 48(9),
1142-1150. https://doi.org/10.1111/j.1532-5415.2000.tb04793.x.
Chen, Y., Zhou, J. in Wang, L. (2021). Role and mechanism of gut microbiota in human disease.
Frontiers in cellular and infection microbiology, 11.
https://doi.org/10.3389/fcimb.2021.625913.
Choi, W. S., Kim, C. J., Park, B. S., Lee, S. E., Takeoka, G. R., Kim, D. G., ... Kim, J. H. (2005).
Inhibitory effect on proliferation of vascular smooth muscle cells and protective effect
on CCl(4)-induced hepatic damage of HEAI extract. Journal of ethnopharmacology,
100(1-2), 176-179. https://doi.org/10.1016/j.jep.2005.02.037.
38
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Claesson, M. J., Cusack, S., O'Sullivan, O., Greene-Diniz, R., de Weerd, H., Flannery, E., ...
O'Toole, P. W. (2010). Composition, variability, and temporal stability of the intestinal
microbiota of the elderly. Proceedings of the National academy of sciences of the United
States of America, 108(1), 4586-4591. https://doi.org/10.1073/pnas.1000097107
Cohen, N., Cohen, J., Asatiani, M. D., Varshney, V. K., Yu, H. T., Yang, Y. C., ... Wasser, S.
P. (2014). Chemical composition and nutritional and medicinal value of fruit bodies and
submerged cultured mycelia of culinary-medicinal higher Basidiomycetes mushrooms.
International journal of medicinal mushrooms, 16(3), 273-291.
https://doi.org/10.1615/intjmedmushr.v16.i3.80.
Di Rienzi, S. C., Sharon, I., Wrighton, K. C., Koren, O. M., Hug, L. A., Thomas, B. C., ... Ley,
R. E. (2013). The human gut and groundwater harbor non -photosynthetic bacteria
belonging to a new candidate phylum sibling to Cyanobacteria. Elife, 2.
https://doi.org/10.7554/eLife.01102.
Diling, C., Chaoqun, Z., Jian, Y., Jian, L., Jiyan, S., Yizhen, X. in Guoxiao, L. (2017).
Immunomodulatory activities of a fungal protein extracted from Hericium erinaceus
through regulating the gut microbiota. Frontiers in immunology, 8, 666.
https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00666.
Diling, C., Xin, Y., Chaoqun, Z., Jian, Y., Xiaocui, T., Jun, C., Ou, S. in Yizhen, X. (2017).
Extracts from Hericium erinaceus relieve inflammatory bowel disease by regulating
immunity and gut microbiota. Oncotarget, 8(49), 85838-85857.
https://doi.org/10.18632/oncotarget.20689
Dominianni, C., Sinha, R., Goedert, J. J., Pei, Z., Yang, L., Hayes, R. B. in Ahn, J. (2015). Sex,
body mass index, and dietary fiber intake influence the human gut microbiome. PloS
one, 10(4). https://doi.org/10.1371/journal.pone.0124599.
Eggesbø, M., Moen, B., Peddada, S., Baird, D., Rugtveit, J., Midtvedt, T., ... Rudi, K. (2011).
Development of gut microbiota in infants not exposed to medical interventions. Journal
of pathology, microbiology and immunology, 119 (1), 17-35.
https://doi.org/10.1111/j.1600-0463.2010.02688.x
Faith, J. J., Guruge, J. L., Charbonneau, M., Subramanian, S., Seedorf, H., Goodman, A. L., ...
Gordon, J. I. (2013). The long-term stability of the human gut microbiota. Science,
341(6141). https://doi.org/DOI:10.1126/science.1237439
Fallani, M., Amarri, S., Uusijarvi, A., Adam, R., Khanna, S., Aguilera, M., ... The infabio team
(2011). Determinants of the human infant intestinal microbiota after the introduction of
first complementary foods in infant samples from five European centres. Microbiology
(reading), 157(5), 1385-1392. https://doi.org/10.1099/mic.0.042143-0.
Fallani, M., Young, D., Scott, J., Norin, E., Amarri, S., Adam, R., ... Other members of the
INFABIO team (2010). Intestinal microbiota of 6-week-old infants across Europe:
geographic influence beyond delivery mode, breast-feeding, and antibiotics. Journal of
pediatric gastroenterology and nutrition, 51(1), 77-84.
https://doi.org/10.1097/MPG.0b013e3181d1b11e.
39
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Falony, G., Jossens, M., Vieira-Silva, S., Wang, J., Darzi, Y., Faust, K., ... Raes, J. (2016).
Population-level analysis of gut microbiome variation. Science, 352(6285), 560-564.
https://doi.org/10.1126/science.aad3503.
Flint, H. J., Scott, K. P., Louis, P. in Duncan, S. H. (2012). The role of the gut microbiota in
nutrition and health. Nature reviews gastroenterology & hepatology, 9(10), 577-589.
https://doi.org/10.1038/nrgastro.2012.156.
Franceschi, C., Bonafè, M., Valensin, S., Olivieri, F., De Luca, M., Ottaviani, E. in De
Benedictis, G. (2000). Inflamm-aging. An evolutionary perspective on
immunosenescence. Annals of the New York academy of sciences, 908, 244-254.
https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.2000.tb06651.x.
Gentile, C. L. in Weir, T. L. (2018). The gut microbiota at the intersection of diet and human
health. Science, 362(6416), 776-780. https://doi.org/10.1126/science.aau5812.
Harmsen, H. J., Wildeboer-Veloo, A. C., Raangs, G. C., Wagendorp, A. A., Klijn, N., Bindels,
J. G. in Welling, G. W. (2000). Analysis of intestinal flora development in breast-fed
and formula-fed infants by using molecular identification and detection meth ods.
Journal of pediatric gastroenterology and nutrition, 30 (1), 61-71.
https://doi.org/10.1097/00005176-200001000-00019.
Haro, C., Rangel-Zúñiga, O. A., Alcalá-Díaz, J. F., Gómez-Delgado, F., Pérez-Martínez, P.,
Delgado-Lista, J, ... Camargo, A. (2016). Intestinal microbiota is influenced by gender
and body mass index. PloS one, 11(5). https://doi.org/10.1371/journal.pone.0154090
Hayashi, H., Sakamoto, M., Kitahara, M. in Benno, Y. (2003). Molecular analysis of fecal
microbiota in elderly individuals using 16S rDNA library and T-RFLP. Microbiology
and immunology, 47(8), 557-570. https://doi.org/10.1111/j.1348-0421.2003.tb03418.x.
He, X., Wang, X., Fang, J., Chang, Y., Ning, N., Guo, H., ... Zhao, Z. (2017). Structures,
biological activities, and industrial applications of the polysaccharides from Hericium
40
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Huse, S. M., Ye, Y., Zhou, Y. in Fodor, A. A. (2012). A core human microbiome as viewed
through 16S rRNA sequence clusters. PloS ONE, 7(6).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0034242
Huurre, A. A., Kalliomäki, M., Rautava, S., Rinne, M., Salminen, S. in Isolauri, E. (2008).
Mode of delivery - effects on gut microbiota and humoral immunity. Neonatology,
93(4), 236-240. https://doi.org/10.1159/000111102.
Inserra, A., Choo, J. M., Lewis, M. D., Rogers, G. B., Wong, M. L. in Licinio, J. (2019). Mice
lacking Casp1, Ifngr and Nos2 genes exhibit altered depressiveand anxiety -like
behaviour, and gut microbiome composition. Scientific reports, 9.
https://doi.org/10.1038/s41598-018-38055-8
Jin, M., Zhu, Y., Shao, D., Zhao, K., Xu, C., Li, Q., ... Shi, J. (2017). Effects of polysaccharide
from mycelia of Ganoderma lucidum on intestinal barrier functions of rats. International
journal of biological macromolecules, 94, 1-9.
https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2016.09.099
Khan, M. A., Tania, M., Liu, R. in Rahman, M. M. (2013). Hericium erinaceus: an edible
mushroom with medicinal values. Journal of complementary and integrative medicine,
10(1). https://doi.org/10.1515/jcim-2013-0001
Klaassens, E. S., Boesten, R. J., Haarman, M., Knol, J., Schuren, F. H., Vaughan, E. E. in de
Vos, W. M. (2009). Mixed-species genomic microarray analysis of fecal samples
reveals differential transcriptional responses of bifidobacteria in breast- and formula-
fed infants. Applied and environmental microbiology, 75(9), 2668-2676.
https://doi.org10.1128/AEM.02492-08/
Kleessen, B., Sykura, B., Zunft, H. J. in Blaut, M. (1997). Effects of inulin and lactose on fecal
microflora, microbial activity, and bowel habit in elderly constipated persons. American
journal of clinical nutrition, 65(5), 1397-1402. https://doi.org/10.1093/ajcn/65.5.1397.
Li, I. C., Chang, H. H., Lin, C. H., Chen, W. P., Lu, T. H., Lee, L. Y., ... Lin , D. P. C. (2020).
Prevention of early Alzheimer’s disease by erinacine a-enriched Hericium erinaceus
mycelia pilot double-blind placebo-controlled study. Frontiers in aging neuroscience,
12, 155. https://doi.org/10.3389/fnagi.2020.00155
Li, I. C., Lee, L. Y., Tzeng, T. T., Chen, W. P., Chen, Y. P., Shiao, Y. J., ... Chen, C. C. (2018).
Neurohealth properties of Hericium erinaceus mycelia enriched with erinacines.
Behavioural neurology, e5802634. https://doi.org/10.1155/2018/5802634
41
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Li, M., Yu, L., Zhao, J., Zhang, H., Chen, W., Zhai, Q. in Tian, F. (2021). Role of dietary edible
mushrooms in the modulation of gut microbiota. Journal of functional foods, 83.
https://doi.org/10.1016/j.jff.2021.104538
Liang, B., Guo, Z., Xie, F. in Zhao, A. (2013). Antihyperglycemic and antihyperlipidemic
activities of aqueous extract of Hericium erinaceus in experimental diabetic rats. BMC
Complementary medicine and therapies, 13, 253. https://doi.org/10.1186/1472-6882-
13-253.
Liang, J., Zhang, M., Wang, X., Ren, Y., Yue, T. Wang, Z., ... Gao, Z. (2021). Edible fungal
polysaccharides, the gut microbiota, and host health. Carbohydrate polymers, 273.
https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2021.118558
Lin, A., Bik, E. M., Costello, E. K., Dethlefsen, L., Haque, R., Relman, D. A., ... Singh, U.
(2013). Distinct distal gut microbiome diversity and composition in healthy children
from Bangladesh and the United States. PloS ONE, 8(1).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0053838.
Liu, J., Du, C., Wang, Y. in Yu, Z. (2015). Anti-fatigue activities of polysaccharides extracted
from Hericium erinaceus. Experimental and therapeutic medicine, 9(2), 483-487.
https://doi.org/10.3892/etm.2014.2139.
Liu, J., Wang, W., Hu, Q., Wu, X., Xu, H., Su, A., Xie, M. in Yang, W. (2022). Bioactivities
and molecular mechanisms of polysaccharides from Hericium erinaceus. Journal of
future foods, 2(2), 103-111. https://doi.org/10.1016/j.jfutfo.2022.03.007
Ma, B., Liang, J., Dai, M., Wang, J., Luo, J., Zhang, Z. in Jing, J. (2019). Altered gut microbiota
in chinese children with autism spectrum disorders. Frontiers in cellular and infection
microbiology, 9(40). https://doi.org/10.3389/fcimb.2019.00040.
Mahnič, A. in Rupnik, M. (2018). Different host factors are associated with patterns in bacterial
and fungal gut microbiota in Slovenian healthy cohort. PloS ONE, 13(12).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0209209
Makki, K., Deehan, E. C., Walter, J. in Bäckhed, F. (2018). The impact of dieta ry fiber on gut
microbiota in host health and disease. Cell host & microbe, 23(6), 705-715.
https://doi.org/10.1016/j.chom.2018.05.012
Mardinoglu, A., Wu, H., Bjornson, E., Zhang, C., Hakkarainen, A., Räsänen, S. M., ... Borén,
J. (2018). An integrated understanding of the rapid metabolic benefits of a carbohydrate-
restricted diet on hepatic steatosis in humans. Cell metabolism, 27(3), 559-571.
https://doi.org/10.1016/j.cmet.2018.01.005.
Mariat, D., Firmesse, O., Levenez, F., Guimarăes, V. D., Sokol, H., Doré, J., ... Furet, J. P.
(2009). The Firmicutes/Bacteroidetes ratio of the human microbiota changes with age.
BMC Microbiology, 9. https://doi.org/10.1186/1471-2180-9-123
Mitsou, E. K., Saxami, G., Stamoulou, E., Kerezoudi, E., Terzi, E., Koutrotsios, G., ...
Kyriacour, A. (2020). Effects of rich in B-glucans edible mushrooms on aging gut
42
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Mori, K., Inatomi, S., Ouchi, K., Azumi, Y. in Tuchida, T. (2008). Improving effects of the
mushroom Yamabushitake (Hericium erinaceus) on mild cognitive impairment: a
double-blind placebo-controlled clinical trial. Phytotherapy research, 23(3), 367-372.
https://doi.org/10.1002/ptr.2634
Mori, K., Obara, Y., Moriya, T., Inatomi, S. in Nakahata, N. (2011). Effects of Hericium
erinaceus on amyloid β(25-35) peptide-induced learning and memory deficits in mice.
Biomedical research journal, 32(1), 67-72. https://doi.org/10.2220/biomedres.32.67.
Mueller, S., Saunier, K., Hanisch, C., Norin, E., Alm, L., Midtvedt, T., ... Blaut, M. (2006).
Differences in fecal microbiota in different European study populations in relation to
age, gender, and country: a cross-sectional study. Applied and environmental
microbiology, 72(2), 1027-1033. https://doi.org/10.1128/AEM.72.2.1027-1033.2006.
Nagano, M., Shimizu, K., Kondo, R., Hayashi, C., Sato, D., Kitagawa, K., ... Ohnuki, K. (2010).
Reduction of depression and anxiety by 4 weeks Hericium erinaceus intake. Biomedical
research, 31(4), 231-237. https://doi.org/10.2220/biomedres.31.231.
Nie, Q., Chen, H., Hu, J., Fan, S. in Nie, S. (2019). Dietary compounds and traditional Chinese
medicine ameliorate type 2 diabetes by modulating gut microbiota. Critical reviews in
food science and nutrition, 59(6), 848-863.
https://doi.org/10.1080/10408398.2018.1536646.
Oki, K., Toyama, M., Banno, T., Chonan, O., Benno, Y. in Watanabe, K. (2016).
Comprehensive analysis of the fecal microbiota of healthy Japanese adults reveals a new
bacterial lineage associated with a phenotype characterized by a high frequency of
bowel movements and a lean body type. BMC microbiology, 16.
https://doi.org/10.1186/s12866-016-0898-x
Palmas, V., Pisanu, S., Madau, V., Casula, E., Deledda, A., Cusano, R., ... Velluzzi, F. (2021).
Gut microbiota markers associated with obesity and overweight in Italian adults.
Scientific reports, 11. https://doi.org/10.1038/s41598-021-84928-w
43
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Porras, D., Nistal, E., Martínez-Flórez, S., Pisonero-Vaquero, S., Olcoz, J. L., Jover, R., ...
Sánchez-Campos, S. (2017). Protective effect of quercetin on high-fat diet-induced non-
alcoholic fatty liver disease in mice is mediated by modulating intestinal microbiota
imbalance and related gut-liver axis activation. Free radical biology & medicine, 102,
188-202. http://doi.org/10.1016/j.freeradbiomed.2016.11.037
Qin, J., Li, R., Raes, J., Arumugam, M., Burgdorf, K. S., Manichanh, C., ... Wang, J. (2010). A
human gut microbial gene catalogue established by metagenomic sequencing. Nature,
464, 59-65. https://doi.org/10.1038/nature08821
Quast, C., Pruesse, E., Yilmaz, P., Gerken, J., Schweer, T., Yarza, P., Pe plies, J. in Glöckner,
F. O. (2013). The SILVA ribosomal RNA gene database project: improved data
processing and web-based tools. Nucleic acids research, 41, 590-596.
https://doi.org/10.1093/nar/gks1219.
Ren, Y., Geng, Y., Du, Y., Li, W., Lu, Z.-M., Xu, H.-Y., ... Xu, Z. H. (2018). Polysaccharide
of Hericium erinaceus attenuates colitis in C57BL/6 mice via regulation of oxidative
stress, inflammation-related signaling pathways and modulating the composition of the
gut microbiota. The journal of nutritional biochemistry, 57, 67-76.
https://doi.org/10.1016/j.jnutbio.2018.03.005
Sánchez, B., Delgado, S., Blanco-Míguez, A., Lourenço, A., Gueimonde, M. in Margolles, A.
(2017). Probiotics, gut microbiota, and their influence on host health and disease.
Molecular nutrition & food research, 61(1). https://doi.org/10.1002/mnfr.201600240
Shao, S., Wang, D., Zheng, W., Li, X., Zhang, H., Zhao, D. in Wang, M. (2019). A unique
polysaccharide from Hericium erinaceus mycelium ameliorates acetic acid -induced
ulcerative colitis rats by modulating the composition of the gut microbiota, short chain
fatty acids levels and GPR41/43 respectors. International immunopharmacology, 71,
411-422. https://doi.org/10.1016/j.intimp.2019.02.038
Singh, R., Zogg, H., Wei, L., Barlett, A., Ghoshai, U., Rajender, S., ... Ro, S. (2021). Gut
microbial dysbiosis in the pathogenesis of gastrointestinal dysmotility and metabolic
44
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Šikić Pogačar, M. in Mičetić Turk, D. (2020). The influence of dietary compounds on gut
microbiota. Slovenian medical journal, 90(3-4).
https://doi.org/10.6016/ZdravVestn.3005
Takagi, T., Naito, Y., Inoue, R., Kashiwagi, S., Uchiyama, K., Mizushima, K., ... Itoh, Y.
(2018). Differences in gut microbiota associated with age, sex, and stool consistency in
healthy Japanese subjects. Journal of gastroenterology, 54, 53-63.
https://doi.org/10.1007/s00535-018-1488-5
Tang, W. H. W., Kitai, T. in Hazen, S. L. (2018). Gut microbiota in cardiovascu lar health and
disease. Circulation research, 120(7), 1183-1196.
https://doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.309715
Thompson, L. R., Sanders, J. G., McDonalds, D., Amir, A., Ladau, J., Locey, K. J., ... The Earth
microbiome project consortium. (2017). A communal catalogue reveals Earth’s
multiscale microbial diversity. Nature, 551(7681), 457-463.
https://doi.org/10.1038/nature24621.
Tian, B., Geng, Y., Xu, T., Zou, X., Mao, R., Pi, X., ... Sun, P. (2022). Digestive characteristics
of Hericium erinaceus polysaccharides and their positive effects on fecal microbiota of
male and female volunteers during in vitro fermentation. Frontiers in nutrition, 9.
https://doi.org/10.3389/fnut.2022.858585.
Tremaroli, V. in Backhed, F. (2012). Functional interactions between the gut microbiota and
host metabolism. Nature, 489(7415), 242-249. https://doi.org/10.1038/nature11552.
Vigna, L., Morelli, F., Agnelli, G. M., Napolitano, F., Ratto, D., Occhinegro, A., ... Rossi, P.
(2019). Hericium erinaceus improves mood and sleep disorders in patients affected by
overweight or obesity: could circulating pro-BDNF and BDNF be potential biomarkers?
Evidence-based complementary and alternative medicine, 21, 1-12.
https://doi.org/10.1155/2019/7861297
Walker, A. W., Ince, J., Duncan, S. H., Webster, L. M., Holtrop, G., Ze, X., ... Flint, H. J.
(2011). Dominant and diet-responsive groups of bacteria within the human colonic
microbiota. Multidisciplinary journal of microbial ecology, 5(2), 220-230.
https://doi.org/10.1038/ismej.2010.118.
Wang, J. C., Hu, S. H., Su, S. H. in Lee, T. M. (2001). Antitumor and immunoenhancing
activities of polysaccharide from culture broth of Hericium spp. The Kaohsiung journal
of medical sciences, 17(9), 461-467. Pridobljeno 17. 07. 2022 s
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11842649/
Wang, J. C., Hu, S. H., Wang, J. T., Chen, K. S. in Chia, Y. C. (2004). Hypoglycemic effect of
extract of Hericium erinaceus. Journal of the science of food and agriculture, 85(4),
641-646. https://doi.org/10.1002/jsfa.1928
45
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Wasser, S. P. (2010). Medical mushrooms science: history, current status, future trends, and
unsolved problems. International journal of medicinal mushrooms, 12 , 1-16.
https://doi.org/10.1615/IntJMedMushr.v12.i1.10
Wen, L. in Duffy, A. (2017). Factors influencing the gut microbiota, inflammation, and type 2
diabetes. The journal of nutrition, 147(7), 1468-1475.
https://doi.org/10.3945/jn.116.240754
Wong, J: Y., Abdulla, M. A., Raman, J., Phan, C. W., Kuppusamy, U. R., Golbabapour, S., ...
Sabaratnam, V. (2013). Gastroprotective effects of lLon’s mane mushroom hericium
erinaceus (bull.:fr.) pers. (aphyllophoromycetideae) extract against ethanol-induced
ulcer in rats. Evidence-based complementary and alternative medicine, 1.
https://doi.org/10.1155/2013/492976
Wu, G. D., Chen, J., Hoffmann, C., Bittinger, K., Chen, Y. Y., Keilbaugh, S. A., ... Lewis, J.
D. (2011). Linking long-term dietary patterns with gut microbial enterotypes. Science,
334(6052), 105-108. https://doi.org/10.1126/science.1208344
Xie, X. Q., Genge, Y., Guan, Q., Ren, Q., Guo, L., Lv, Q., ... Xu, Z. H. (2021). Influence of
short-term consumption of hericium erinaceus on serum biochemical markers and the
changes of the gut microbiota: a pilot study. Nutrients, 13, 1008.
https://doi.org/10.3390/nu13031008
Xu, X., Xu, P., Ma, C., Tazhangng, J. in Zhang, X. (2013). Gut microbiota, host health, and
polysaccharides. Biotechonology advances, 31(2), 318-337.
https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2012.12.009
Yadav, M., Kumar Verma, M. in Singh Chauhan, N. (2017). A review of metabolic potential
of human gut microbiome in human nutrition. Archives of microbiology, 200, 203-217.
https://doi.org/10.1007/s00203-017-1459-x.
Yang, Y., Ye, H., Zhao, C., Ren, L., Wang, C., Georgiev, M. I., Xiao in Zhang, T. (2021). Value
added immunoregulatory polysaccharides of Hericium erinaceus and their effect on the
46
Češek D. Magistrska naloga.
Dietetika, UP Fakulteta za vede o zdravju, 2022
Yin, C., Noratto, G. D., Fan, X., Chen, Z., Yao, F., Shi, D. in Gao, H. (2020). The impact of
mushroom polysaccharides on gut microbiota and its beneficial effects to host: a review.
Carbohydrate polymers, 250. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2020.116942.
Zhang, J., Guo, Z., Qi Lim, A. A., Zheng, Y., Koh, E. Y., Ho, D., ... Zhang, H. (2014).
Mongolians core gut microbiota and its correlation with seasonal dietary changes.
Scientific reports, 4. https://doi.org/10.1038/srep05001
Zoetendal, E. G., Raes, J., van den Bogert, B., Arumugam, M., Booijink, C. C. G. M., Troost,
F. J., ... Kleerebezem, M. (2012). The human small intestinal microbiota is driven by
rapid uptake and conversion of simple carbohydrates. Multidisciplinary journal of
microbial ecology, 6, 1415-1426. https://doi.org/10.1038/ismej.2011.212
Zouiouich, S., Loftfield, E., Huybrechts, I., Viallon, V., Louca, P., Vogtmann, E., ... Gunter,
M. J. (2021). Markers of metabolic health and gut microbiome diversity: findings from
two population-based cohort studies. Diabetologia, 64, 1749-1759.
https://doi.org/10.1007/s00125-021-05464-w
47