Professional Documents
Culture Documents
2. PROCESSOS DE FERMENTACIÓ 26
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 1 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
2.3. Llevats 31
2.3.1. El pa 31
2.3.2. La cervesa 33
2.3.3. El vi 35
3. MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL 39
3.2.2. Tetraciclines 42
4. EL LABORATORI DE MICROBIOLOGIA 43
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 2 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
BIBLIOGRAFÍA 57
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 3 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 4 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
En relació amb l’ésser humà, podem parlar de microorganismes patògens, que són els que
produeixen toxicitat en l’ésser humà; i de microorganismes beneficiosos. Dins els microorganismes
beneficiosos s’engloben tots aquells que mantenen una relació de simbiosi amb l’ésser humà, com
els microorganismes intestinals que ens permeten fer el procés digestiu complert; així com els
microorganismes que fem servir a nivell industrial per a la producció d’aliments, medicaments, etc.
La taxonomia és la branca de la biologia que classifica els éssers vius en diferents grups segons
les semblances existents en les seves característiques morfològiques, fisiològiques i genètiques. La
classificació taxonòmica de les espècies, en aquest cas dels microorganismes, ens permet estudiar-
los de forma separada i actuar en conseqüència dissenyant medicaments i processos industrials per
a lluitar contra les infeccions o extreure’n el màxim benefici de producció.
- Moneres: és un regne format de manera exclusiva per bacteris procariotes (sense nucli
diferenciat), cosa que els diferencia de tota la resta d’éssers vius. Poden colonitzar una gran
varietat d’hàbitats, des de la superfície del sòl fins als cossos d’altres éssers vius. Al ser
organismes molt simples morfològicament parlant, es reprodueixen molt ràpid i, per tant, els
mecanismes evolutius actuen en poc temps, per la qual cosa es poden adaptar fàcilment a
qualsevol medi i generar una gran quantitat d’espècies.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 5 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Protoctists: són formes eucariotes de vida simple i unicel·lular, que poden viure aïllats o
formar associacions cel·lulars. La majoria són, per tant, microscòpics, però les comunitats que
formen poden arribar a veure’s a simple vista degut a la seva mida. Existeixen dos fílums:
● Algues: són totes organismes fotosintètics que poden viure de forma aïllada o formant
associacions visibles a simple vista. Viuen en ambients aquàtics de tota mena i
contribueixen a la oxigenació de l’aigua. A la vista, poden ser de diversos colors a banda
del verd, ja que les diferents espècies poden tenir diferents pigments fotosintètics.
- Fongs: són éssers vius eucariotes i heteròtrofs que poden ser unicel·lulars i pluricel·lulars. Els
seus hàbitats són molt variats, però la majoria viuen al sòl i actuen com a descomponedors.
D’altres viuen a l’aigua, com a paràsits de plantes i animals o establint relacions de simbiosi,
com en el cas dels líquens. Els fongs es classifiquen en tres fílums: els llevats, les floridures i
els bolets.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 6 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Fins als anys '90, el regne es va considerar la categoria sistemàtica més inclusiva (l'alcalde) dins
del sistema de classificació taxonòmica. No obstant això, el coneixement de l'estructura molecular
de les proteïnes, el genoma i, sobretot, la seqüenciació de certs gens va demostrar que certes
organismes agrupades fins a aquell moment dins d'alguns regnes, particularment el Monera,
presentaven diferències tan grans entre elles que no Justificaven la inclusió en el mateix grup. Així
doncs, actualment la categoria sistemàtica més inclusiva és el domini, i existeixen 3: Eubacteria,
Archaea i Eukarya. Els dos primers correspondrien a les "móneres" és a dir, microorganismes
procariotes i el darrer, Eukarya correspondria a tots els microorganismes i organismes eucariotes.
Els bacteris són organismes procariotes (sense nucli cel·lular) i unicel·lulars. Es consideren els
éssers vius més petits que existeixen, ja que la seva mida es troba entre 1 i 10 μm1. Constitueixen
un regne taxonòmic per sí sols, ja que les seves característiques no es repeteixen en cap altre
organisme; tot i així, existeix una gran varietat entre espècies, ja que cada una està adaptada a
ambients molt diversos.
Els bacteris es poden classificar de moltes maneres, però una de les distincions habituals és
segons la seva forma:
- Cocs: tenen forma arrodonida o esfèrica. Els cocs no acostumen a viure aïllats, sinó que
s'agrupen formant estructures bacterianes com els diplococs, tetracocs, sarcines,
estreptococs i estafilococs.
- Bacils: són cèl·lules allargades. No tenen una estructura multicel·lular determinada, com els
cocs, però en determinades condicions poden formar parelles, cadenes allargades o
disposicions paral·leles.
1
1 μm = 1 micròmetre = 10-3 mm = 10-6 m
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 7 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Espirils: són bacils molt allargats que agafen forma d'espiral. No formen agrupacions; són
sempre cèl·lules individuals.
A més, dins els organismes que podem trobar als aliments en trobarem
d’altres que no es consideren microorganismes, ja que són visibles a simple
vista, com és el cas dels metazous. L’ordre d’estudi no correspondrà a l’ordre
-
taxonòmic, sinó al de freqüència de la seva presència en els aliments.
-
- Vibrions: són bacteris amb forma de coma, que tampoc formen agrupacions.
Un bacteri és una sola cèl·lula formada essencialment per una paret bacteriana, una membrana
plasmàtica i el DNA que està contingut al seu citoplasma. No tenen orgànuls cel·lulars ni nucli. A
més, tots els bacteris disposen de ribosomes.
A banda d’aquestes estructures indispensables, els bacteris poden tenir cilis, fímbries, inclusions,
plasmidis i mesosomes. Alguns bacteris també tenen la possibilitat de formar càpsules i espores.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 8 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Nucleoide: és una sola molècula d’ADN circular de doble cadena que constitueix el material
genètic propi del bacteri. Al no disposar de nucli, es troba aglutinat a una zona del citoplasma.
- Citoplasma: és el medi que constitueix l’interior de la cèl·lula en sí. Està format principalment
per aigua i conté els elements cel·lulars en suspensió, així com els nutrients i productes de
rebuig en dissolució.
- Ribosomes: són els únics orgànuls cel·lulars que contenen els bacteris. Es troben surant al
citoplasma i la seva funció és sintetitzar proteïnes.
- Membrana plasmàtica: és una capa de lípids i proteïnes que envolta i delimita el citoplasma,
formant així els límits de la cèl·lula. A diferència del que es pugui pensar, no és una capa llisa
i recta, sinó que està totalment arrugada; aquestes arrugues s’anomenen mesosomes, i
serveixen per a augmentar la superfície de membrana del bacteri. D’aquesta manera, hi ha
més espai per a que el bacteri realitzi totes aquelles funcions vitals lligades a la membrana
cel·lular.
- Paret cel·lular: és una capa rígida i dura que envolta la membrana plasmàtica i protegeix el
bacteri dels agents externs, a la vegada que actua de filtre a l’hora d’incorporar molècules
provinents de l’exterior a la cèl·lula. Hi ha dos tipus de bacteris segons la seva paret cel·lular:
● Gram positius: reaccionen a la tinció de Gram2. La paret gram positiva està formada
només per una capa de peptidoglicans que envolta la paret cel·lular. Per aquest motiu,
el tint de Gram reacciona directament amb aquesta capa i els bacteris es veuen blaus.
2
Producte de color vermell que tenyeix de blau un tipus de proteïna anomenada peptidoglicà
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 9 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
● Gram negatius: no reaccionen a la tinció de Gram. La paret gram negativa conté una
bicapa de fosfolípids (igual que la membrana plasmàtica) sobre la capa de
peptidoglicans. Els fosfolípids no reaccionen davant del tint ni el deixen passar a fins a
la capa de peptidoglicans, per la qual cosa els bacteris conserven el color vermell del
tint.
- Plasmidis: són molècules d’ADN circular de doble cadena molt petites i que no són pròpies
del bacteri. Els plasmidis contenen gens que el bacteri expressarà com si fossin seus, ja siguin
perjudicials o beneficiosos per a ell.
- Flagel: és una estructura de proteïnes amb moviment rotatori que permet moure’s al bacteri.
En pot tenir un o molts.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 10 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Fímbries: són tubs de proteïna, buits per dins, que serveixen per a comunicar els citoplasmes
de dos bacteris. Es fan servir per a intercanviar-se material genètic, com en el cas dels
plasmidis, però el bacteri també els utilitza per a fixar-se a una superfície.
- Càpsula: és la capa més externa del bacteri, però només la presenten algunes espècies. Està
formada per diferents productes de rebuig cel·lular, per tant, el seu gruix és variable segons
el bacteri. Serveix com a capa protectora contra la dessecació o contra l’acció del sistema
immunitari de l’hoste en el cas dels patògens.
- Espores: són formacions dures i resistents que permeten al bacteri protegir-se de condicions
adverses com la calor, la pressió, la sequedat o les radiacions. No tenen funció reproductora
com en altres espècies. N’hi ha dos tipus:
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 11 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Hi ha una gran quantitat d'espècies diferents de bacteris, de manera que també presenten una
gran quantitat de metabolismes diferents, adaptats al seu hàbitat. Poden fer servir com a font de
carboni pràcticament qualsevol molècula orgànica i alguns fins i tot de matèria inorgànica. L'energia
la poden obtenir tant de la llum com de les reaccions químiques d'oxidació, cosa que contribueix a
que, entre totes les espècies bacterianes, presentin una gran varietat d'enzims diferents.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 12 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Tinguin el metabolisme que tinguin, els bacteris també es poden distingir segons si fan servir
l’oxigen en el seu metabolisme o no. Segons això, distingim diversos tipus de bacteris:
- Aerobis: fan servir l’oxigen en el seu metabolisme (és a dir, usen l’oxigen en el procés
respiratori), per tant, no poden viure en absència d’oxigen. Ex: gènere Pseudomonas i
Bacillus. Dins d’aquest grup tindríem els els bacteris microaeròfils que necessiten petites
quantitats d'oxigen per sobreviure (concentracions entre el 2-10%) però no resisteixen
tensions parcials altes d’aquest gas (el nivell d'oxigen atmosfèric és del 21%), per tant viuen
en interfases en que l’oxigen és present però no abundant. Ex: gènere Spirillum,
Campylobacter.
La manera bàsica que tenen els bacteris de reproduir-se és la bipartició: el bacteri fa una còpia
del seu material genètic (plasmidis inclosos) i parteix el citoplasma en dos, de manera que cada
cèl·lula filla s'ha endut un lot complet de material genètic. Aquest procés, si es realitza en condicions
ambientals òptimes i de disponibilitat d'aliment, es pot arribar a completar cada 20 minuts, de
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 13 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
manera que en poc temps podem tenir una gran quantitat de bacteris. Això és molt útil per a la
investigació i per a fer servir els bacteris com a productors d'enzims i proteïnes d'ús comercial, ja
que podem obtenir una gran quantitat de producte en poca estona.
A banda de la bipartició, els bacteris tenen uns sistemes de reproducció parasexual per a
incorporar ADN de fora. Aquests tres mecanismes són:
- Transducció: un virus que ha infectat un bacteri de forma lisogènica pot endur-se'n part del
genoma bacterià amb els virions un cop surt de la cèl·lula. Quan aquest virus infecti un altre
bacteri, li injectarà el seu genoma amb la part de genoma bacterià que s'ha endut, de manera
que el bacteri infectat incorporarà els dos genomes al seu nucleoide.
- Transformació: un bacteri pot captar ADN que trobi lliure al medi i incorporar-lo al seu
genoma o deixar-lo com a plasmidi lliure al citoplasma.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 14 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Els virus són estructures infeccioses organitzades, formades pel material genètic i unes proteïnes
que l'envolten i el protegeixen. No disposen de metabolisme propi, la seva capacitat de relació es
limita a infectar una cèl·lula i són incapaços de reproduir-se per si sols, de manera que no poden ser
considerats estructures vives. Una partícula vírica rep el nom de virió i és totalment inert: és
senzillament un conjunt de proteïnes i material genètic agrupat.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 15 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
la cèl·lula, per a duplicar el seu propi genoma i per a poder formar la càpsida .
- Càpsida: és la capa de proteïnes (capsòmers) que envolta i protegeix el material genètic del
virus, així com les poques proteïnes que pugui necessitar.
- Embolcall extern: només és propi d'alguns tipus de Il·lustració SEQ Il·lustració \* ARABIC 6.
Estructura dels virus. FONT: pròpia
virus. Consisteix en una membrana plasmàtica que agafen de la cèl·lula infectada quan són
alliberats. Substitueixen les proteïnes de membrana de la cèl·lula per les seves pròpies per a
poder seguir sent infecciosos.
Els virus es classifiquen de diferent manera segons el criteri que es faci servir:
- Segons el genoma: en aquests casos té molta importància si la cadena present en el virus
és la cadena negativa (no es pot transcriure o traduir directament) o positiva (codifica
directament la proteïna).
● Virus d'ARN: poden ser de cadena simple (positiva o negativa) o de cadena doble.
● Virus d'ADN: poden ser de cadena simple (positiva o negativa) o de cadena doble.
- Segons l'estructura:
● Polièdrics: la càpsida té forma de poliedre, generalment d'icosaedre.
● Helicoïdals: el material genètic es situa formant una hèlix i les proteïnes recobreixen
cada volta de la hèlix per dalt i per baix.
● Complexos: disposen d'un cap polièdric i una cua helicoïdal.
- Segons l'organisme al que infecten: existeixen virus animals, virus vegetals i bacteriòfags.
- Segons l'embolcall:
● Coberts: amb embolcall extern.
● Nus: sense embolcall extern.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 16 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Quan un virus envaeix una cèl·lula, pot seguir dues vies diferents:
- Via lítica:
b) El virus fa arribar el seu material genètic dins la cèl·lula, ja sigui per injecció o per
entrada directa del virió gràcies a l'endocitosi. Si la càpsida ha entrat a la cèl·lula,
desapareix per a deixar lliure el material genètic.
c) El genoma víric es duplica i es transcriu a ARNm per a formar les proteïnes del virus.
Dins aquestes proteïnes, hi trobem factors d'inhibició que aturen els processos
cel·lulars normals. Aquesta fase s'anomena fase d'eclipsi, ja que no veiem virions dins
la cèl·lula.
d) Les proteïnes del virus produïdes s'acoblen entre elles formant una gran quantitat de
virions.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 17 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Via lisogènica:
a) El virus infecta la cèl·lula de manera habitual, tant per endocitosi com per injecció.
c) El bacteri es reprodueix amb normalitat, transferint còpies del seu ADN propi i de
l’ADN del virus a les seves cèl·lules filles. Aquest procés es pot allargar durant moltes
generacions, produint una gran quantitat de cèl·lules infectades.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 18 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Els fongs són organismes eucariotes heteròtrofs. Disposen de tots els orgànuls presents a les
cèl·lules animals, així com una membrana nuclear que conté l’ADN. A diferència del que es creu
habitualment, els fongs no són vegetals, per tant, no fan la fotosíntesi. En canvi, sí tenen paret
cel·lular rígida i són immòbils.
Poden viure de forma paràsita, simbiont o saprofítica3, i s’alimenten de les substàncies que hi ha
dissoltes al líquid del medi que els envolta. També poden segregar enzims digestius per a degradar
la matèria abans d’incorporar-la, per la qual cosa són bons descomponedors.
Dins els fongs, trobem organismes unicel·lulars, com els llevats; i pluricel·lulars, com les floridures
i els bolets pròpiament dits. Els òrgans de les floridures estan constituïts en forma d’hifes, unes
estructures allargades d’uns centímetres de longitud. Un conjunt d’hifes forma un miceli, dels quals
n’hi ha dos tipus:
3
Descomponedors del sòl
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 19 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Llevats Floridures
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 20 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Les algues conformen un grup molt gran d’organismes unicel·lulars eucariotes. Tot i així, a nivell
alimentari, també es consideren algues tots aquells bacteris fotosintètics que formen part del
fitoplàncton i que, per tant, són procariotes. Moltes espècies d’algues conformen estructures
d’associacions cel·lulars, però no poden ser considerades pluricel·lulars perquè les cèl·lules no estan
especialitzades en cap funció dins un organisme més gran.
Les cèl·lules de les algues són vegetals: tenen paret cel·lular, vacuoles i cloroplasts. La seva
nutrició és autòtrofa fotosintètica, i en alguns casos viuen en simbiosi amb altres organismes. La
reproducció és normalment asexual per bipartició, fragmentació o espores. Hi ha algun grup que és
capaç de reproduir-se sexualment.
Les algues no afecten de forma directa en l’alimentació humana (algunes fins i tot són
comestibles), però sí ho poden fer a través dels peixos i els mariscs per la cadena alimentària.
Algunes algues són tòxiques per als humans, com la Gambierdiscus toxicus.
Els protozous són organismes unicel·lulars eucariotes dels quals existeix una gran diversitat, però
abunden en climes càlids i humits. Són heteròtrofs, per la qual cosa les seves cèl·lules tenen
estructura de cèl·lula animal. La majoria presenten estructures externes per al desplaçament i
l’adhesió a superfícies com els pseudòpodes, els cilis i els flagels.
- Reproducció asexual: els individus adults reben el nom de trofozoït. Si les condicions no són
favorables per a la reproducció, formen quists, recoberts d’una membrana compacta que els
protegeix de les inclemències del medi. Quan les condicions són favorables, es reprodueixen
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 21 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
per gemmació4 donant lloc a un merozoït, que madurarà o s’enquistarà segons les condicions
ambientals.
- Reproducció sexual: dos trofozoïts formen gàmetes diferents, que es fusionen formant el
zigot. Aquest zigot es pot enquistar en forma d’ooquist si les condicions no són favorables; o
formar esporozoïts si les condicions són favorables, per tal de madurar després fins a
trofozoïts.
Tipus de protozous
Existeixen molts tipus de protozous, alguns dels quals són paràsits per als
humans. Dins aquest grup, els més importants són:
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 22 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Flagel·lats: presenten nombrosos flagels, llargs i ondulats. Són molt mòbils. Exemple: Giardia
lamblia.
- Altres: no tenen ni pseudòpodes, ni flagels, ni cilis, per la qual cosa no tenen mobilitat pròpia.
Exemple: Toxoplasma gondii.
Els metazous són organismes pluricel·lulars, per la qual cosa les cèl·lules es troben diferenciades
morfològica i fisiològicament. Alguns d’ells són perfectament visibles a simple vista, però també n’hi
ha de microscòpics. Dins aquesta classificació, els grups que tenen importància a nivell alimentari
són els platihelmints i els nematodes. D’aquestes espècies, només alguns helmints són paràsits per
als humans, que pot actuar com a hoste definitiu o transitori5.
- Platihelmints: són els coneguts com cucs plans, en forma de cinta. N’hi
ha de dos tipus:
5
Hoste que allotja el paràsit a l’espera de que aquest infecti la seva espècie definitiva.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 23 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Nematodes: són cucs prims, allargats i cilíndrics, de forma contínua (no segmentats), que
presenten dimorfisme sexual. Exemple: Anisakis simplex.
Els platihelmints i els nematodes són cucs heteròtrofs que no tenen apèndix articulats, és a dir,
sense potes ni antenes. Les dimensions són molt variables, i poden mesurar des de pocs
micròmetres fins a diversos metres de llargada.
Estructuralment, estan formats d’una cutícula o tegument que els protegeix del medi extern.
Algunes espècies tenen ventoses i ganxos en aquesta cutícula per a poder adherir-se a superfícies.
Sota la cutícula, hi ha una capa de teixit muscular que es contrau i permet el moviment. Disposen
d’un aparell digestiu primitiu que consisteix en un tub llarg amb obertures a l’exterior (boca i anus).
També tenen un sistema nerviós primitiu format per una sèrie de ganglis nerviosos i nervis que es
disposen longitudinalment al llarg del cos del cuc.
El seu aparell reproductor està molt desenvolupat i es poden reproduir adaptant-se a les diverses
condicions que els ofereixen els seus hostes. La reproducció es ovípara, i les diferents espècies
poden presentar dimorfisme sexual6, hermafroditisme7 o altres condicions sexuals.
Els prions es van descobrir l’any 1985, quan es va detectar, a Anglaterra, una malaltia del bestiar
que es va anomenar encefalopatia espongiforme bovina (BSE), més coneguda com la malaltia de les
vaques boges. Com el seu nom indica, és una malaltia del sistema nerviós central que destrueix les
neurones, deixant el cervell amb forats com si es tractés d’una esponja. Aquesta malaltia tenia grans
semblances amb l’scarpie de les ovelles.
6
Els individus dels dos sexes presenten diferències morfològiques al seu cos.
7
Un sol individu presenta òrgans dels dos sexes.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 24 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Les investigacions dutes a terme per Stanley Prusiner l’any 1982 (Premi Nobel de Medicina 1997)
van arribar a la conclusió de que els prions són un tipus d’agent infecciós que consisteixen
únicament en una proteïna defectuosa. Per tant, son estructures molt més simples que els virus i,
per tant, no es consideren éssers vius. El seu mecanisme d’acció es basa en el contacte entre un prió
(proteïna defectuosa, PrPsc) i la seva corresponent proteïna correcta (PrPc) present en els individus
sans. Quan s’estableix aquest contacte, la proteïna correcta es contagia de l’error del prió i es
converteix en una proteïna defectuosa (nou prió, PrPsc), per la qual cosa es multiplica
exponencialment el nombre d’agents infecciosos. Aquestes proteïnes defectuoses tendeixen a
agrupar-se entre elles i formar grans precipitats que destrueixen la funcionalitat de les neurones.
Tal com es va descobrir amb la BSE, el contagi es va produir quan les vaques van consumir pinso
elaborat amb restes d’ovelles mortes infectades d’scarpie que no havia estat convenientment
tractat per a eliminar els prions. A partir de les vaques, el prió podia passar també als humans,
donant lloc a la malaltia de Creutzfeldt-Jakob. Els seus efectes són canvis en la conducta, manca de
coordinació muscular, demència i, finalment, la mort. Els teixits més sensibles de contagi són el
cervell i la medul·la espinal.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 25 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
2. PROCESSOS DE FERMENTACIÓ
Una fermentació és una reacció bioquímica en la qual un compost orgànic és descompost sense
que hi intervingui l’oxigen. Aquest procés l’ha de dur a terme un sistema enzimàtic on hi intervenen
diversos enzims coordinats, que s’encarregaran d’extreure els electrons del compost original i
traslladar-los fins a un compost orgànic que actuarà com a acceptor final. Aquest moviment
d’electrons implica que es tracti de reaccions d’oxidació-reducció exotèrmiques, per la qual cosa
produeixen energia que s’aprofita per a dur a terme les diferents funcions vitals.
Existeix una gran varietat de bacteris que utilitzen glúcids com a font principal de carboni i energia
per donar lloc a àcid làctic. Són sempre bacils o cocs Gram positius anaerobis; la majoria poden viure
en presència d’oxigen, però alguns són anaerobis estrictes. A diferència de la majoria de bacteris,
tots ells són catalasa negatius8, és a dir, no contenen aquest enzim. Obtenen l’energia de la
fermentació làctica dels glúcids (qualsevol d’ells és fermentable en anaerobiosi).
- Bacteris homofermentatius: la reacció de fermentació és una via directa que només produeix
àcid làctic. Exemples: Streptococcus sp., Pediococcus sp.
8
La catalasa és un enzim que degrada el H2O2 (aigua oxigenada) en H2 i O2. És present en la majoria de bacteris.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 26 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
sp.), mentre que si poden fer també la via directa s’anomenen heterofermentatius
facultatius, com els Lactobacillus sp.
Els productes làctics són tots aquells que es produeixen mitjançant la fermentació làctica de la
llet per part dels bacteris dels gèneres Streptococcus i Lactobacillus. Per a la realització de diferents
productes es faran servir cultius específics d’aquests bacteris, que dependran del gust i l’aroma que
desitgem en el producte final.
Iogurt
1. Llet a 80-90ºC durant 30 minuts. S'eliminen tots els microorganismes excepte els
termoresistents.
2. A 40-45ºC (temperatura ideal de fermentació).
3. S'afegeix cultiu iniciador al 2% de Streptococcus salivarius termophilus i Lactobacillus
delbrueckii bulgaricus en quantitats iguals.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 27 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
4. Directament a l'envàs o en fermentadors industrials. Dura unes 4 hores, durant les quals
la glucosa es converteix en àcid làctic i el pH passa de 6,5 a 4,2. La caseïna coagula a
pH 4,6.
5. La fermentació acaba a un pH al voltant de 4. Refredat fins a 15-20 ºC.
6. S'afegeixen fruites, aromatitzants, saboritzants i altres additius.
7. Refredat fins a menys de 5 ºC per a aturar la fermentació. Es conserva fins a tres
setmanes gràcies al pH àcid, que és hostil per als microorganismes patògens. Poden
créixer llevats i floridures.
A banda del iogurt, es poden obtenir altres productes a partir de la llet fermentada:
- Llet acidòfila: és una llet amarga i espessa, baixa en greix i que es pot conservar durant més
temps que la llet normal. Per a obtenir-la, es fa servir Lactobacillus acidophilus, un
homofermentador que fa una reacció de fermentació molt lenta.
- Bioiogurts: realment no són iogurts, sinó llet fermentada amb Lactobacillus acidophilus,
Bifidobacterium sp. i Streptococcus salivarius, que donarà el gust a iogurt d’aquest producte.
- Quefir: és una llet fermentada produïda per bacteris que generen àcid làctic i llevats que
produeixen alcohol. Aquesta microflora es troba en uns grànuls pastosos procedents de la
llet de cabra, que es barregen amb la llet i la fermenten a gran velocitat.
Formatge
El formatge és una quallada consolidada formada a partir del sòlid de la llet en la que els greixos
es troben atrapats dins les molècules de caseïna coagulada. Existeix una gran varietat de formatges
arreu del món, i cada una té el seu procés d’elaboració concret, però totes elles es basen en tallar
la llet i eliminar-ne l’aigua i la lactosa, que formaran el sèrum. Segons el contingut en aigua del
formatge, els microorganismes que intervinguin en el procés i el grau de maduració, obtindrem una
varietat o una altra.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 28 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
7. Premsat del
8. Salat 6. Separació 5. Quallat
quall
9. Maduració
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 29 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Els bacteris de l’àcid làctic també es poden fer servir per a l’elaboració de productes no làctics,
com és el cas de les olives verdes en conserva. Per a preparar-les, es segueixen els següents passos:
1. Tractament
2. Rentat
dels fruits
4. Fermentació
3. Salmorra
en salmorra
Els bacteris de l’àcid làctic es poden combinar amb floridures per a fabricar
certs productes làctics, com és el cas dels formatges blaus (roquefort, cabrales,
gorgonzola, etc.).
Il·lustració SEQ
Il·lustració \* ARABIC 13.
Formatge.
FONT: CITATION Ser141
C/ Pelai, 42 93 318\l24 36 (Ser141)
3082
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 30 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
El roquefort és un formatge blau que s’elabora a partir de llet d’ovella, i rep aquest nom perquè
la seva maduració es fa a les coves de la zona de Roquefort, a França. És un formatge tou, cremós,
amb taques verd-blavoses que són en realitat colònies de la floridura Penicillium roqueforti.
Per a la seva elaboració, es fabrica primer el formatge a partir de llet d’ovella i per fermentació
amb Lactobacillus i enzims proteolítics. Quan el quall està format, es poden injectar directament les
floridures si la producció és industrial, però si la producció és artesanal, es deixen els formatges a
les coves i es deixa que la floridura vagi caient de les parets de la gruta i vagi colonitzant el formatge
de fora cap a dins.
2.3. Llevats
2.3.1. El pa
El pa és un producte fermentat i cuit derivat de la farina. La major part del pa s’elabora amb
farina de blat, que està formada per midó, aigua, gluten, sucres, matèria grassa i minerals. Quan
s’amassa amb aigua forma una pasta bastant flexible, capaç de resistir la presència dels gasos que
es formen durant la fermentació. Per a obtenir el pa en la seva forma comestible, aquesta massa es
cou a altes temperatures.
La massa fermentada
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 31 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Manera tradicional: la massa s’elabora en vàries etapes que consisteixen en barrejar una
massa antiga ja fermentada amb una massa nova. La primera massa de farina i aigua es deixa
reposar entre 12 i 24 hores, després de les quals es barreja amb més aigua i més farina.
Aquesta segona massa es torna a deixar reposar de 12 a 24 hores. Passat aquest temps, la
massa fermentada es torna a barrejar amb més aigua i més farina i es deixa de nou en repòs
durant un dia. D’aquesta manera, en cada etapa aportem nova microflora natural i nous
nutrients.
Farina + Farina +
Farina +
aigua + 12-24 aigua +
aigua 12-24h 12-24h
massa 1 h massa 2
(massa 1)
(massa 2) (massa 3)
- Forma intermitja: es prepara una massa amb farina i aigua que es deixa fermentar durant
vàries hores. Cada certa estona, se li afegeixen petites quantitats de llevats.
- Forma directa: el pa s’elabora sense massa fermentada. La pasta de farina i aigua es conrea
de forma massiva amb llevats i es cuina. D’aquesta manera, el pa és més lleuger però no
conté els aromes naturals de les fermentacions llargues.
Un cop es faci la cocció de la massa, el CO2 quedarà retingut formant els espais buits de l’interior
del pa cuit, mentre que els llevats i l’etanol seran destruïts.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 32 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
2.3.2. La cervesa
La cervesa és una beguda fermentada a base de cereals, generalment ordi, en que els sucres
presents en la pasta de cereal (malta) passen per un procés de fermentació alcohòlica i es produeix
etanol i CO2.
9. Pasteurització i 7. 6.
8. Filtrat Fermentació Fermentació
envasat
secundària principal
1. Els grans d’ordi es posen en aigua per a hidratar-los i deixar que germinin. Això
genera enzims amilases i proteases que actuen com a endosperma per a aportar les
reserves de nutrients i energia a la planta. Aquest creixement s’atura fornejant, cosa
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 33 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
9
Els sucres reaccionen espontàniament (sense presència d’enzims) amb les proteïnes i els canvien l’estructura
molecular; el producte resultant és d’un color marronós.
10
Els llevats morts precipiten al fons de la cuba de fermentació.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 34 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
2.3.3. El vi
- Fermentació alcohòlica: els llevats transformen els sucres del raïm en alcohol, CO2 i altres
productes que contribueixen a l’aroma del vi. És la fermentació més habitual.
- Fermentació malolàctica: es fa en alguns vins concrets. L’àcid màlic del suc es transforma en
àcid làctic i CO2, de manera que disminueix l’acidesa del vi. Es fa amb Il·lustració SEQ
Il·lustració \*
bacteris làctics anaerobis. ARABIC 14. Vi
FONT: CITATION
Ser141 \l 3082
- Segona fermentació alcohòlica: és necessària per a elaborar vins escumosos i caves. Per a
(Ser141)
començar-la, s’ha d’afegir més most, sucre i llevat a la cuba o ampolla a volum constant, de
manera que la pressió creix, el CO2 es manté i s’obté l’efervescència del producte.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 35 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
1. Es forma el most, un suc amb alt contingut en sucre (es pot afegir més sucre o
aigua si convé).
2. Es limita l’oxidació del most i inhibeix el creixement de llevats i bacteris no
productors d’alcohol.
3. Llevats Saccharomyces cerevisiae i Saccharomyces uvarum. La soca de cada
espècie i les condicions de fermentació dependran del tipus de vi.
4. El temps serà des d’uns dies fins a un mes, i la temperatura depèn del tipus de vi:
22-28 ºC per als negres i 12-18 ºC per als blancs. Els llevats van floculant.
5. Un cop fermentat, el vi es deixa durant mesos o anys en barrils de fusta per a que
adquireixi el seu aroma característic. Les reaccions que es donen són canvis enzimàtics,
físics i químics, així com reacció amb els productes de la fusta del barril.
El principal producte alimentari que es fabrica amb bacteris de l’àcid acètic és el vinagre. Per a
obtenir vinagre, primer s’ha d’elaborar la mare del vinagre a partir de la fermentació alcohòlica dels
sucres en etanol, i posteriorment l’etanol s’oxida a àcid acètic per part dels bacteris dels gèneres
Acetobacter i Gluconobacter, ambdós anaerobis estrictes i Gram negatius:
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 36 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Els vinagres comercials es dilueixen per a reduir-ne l’acidesa, respectant un contingut mínim
d’àcid acètic d’entre el 4 i el 6 %. A banda de com a condiment, es pot fer servir com a agent
conservador (E-260) per a plats preparats, ja que és un bon antifúngic.
Existeixen diferents mètodes d’acetificació que es diferencien segons com s’uneixen els tres
components principals, l’etanol, els bacteris i l’oxigen:
- Mètodes d’Orleans: amb aquests mètodes, es fa una oxidació inicial en uns barrils airejats
que permeten la circulació constant d’oxigen. Un cop es crea una capa de bacteris a la
superfície, s’aprofiten per a generar noves tandes de vinagre.
Taula 11. Procés d'elaboració del vinagre pels mètodes d'Orleans. FONT: pròpia
- Mètodes moderns: aquests mètodes impliquen velocitats d’acetificació més ràpides que
s’aconsegueixen utilitzant l’acetificació submergida. En aquest procés, els bacteris creixen
suspesos en un medi que s’oxigena amb l’aire a través de màquines industrials, com
l’acetificador de Frings.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 37 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
En la cultura occidental s’han fet servir poc aquestes fermentacions, però a altres cultures són
bastant habituals. És el cas del tempeh, un dels aliments fermentats més populars a Indonèsia, ja
que representa una font important de proteïnes, calories i vitamines.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 38 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
3. MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
Dins de tots els sistemes biològics que s’utilitzen actualment en la indústria, els microorganismes
són, sens dubte, els més usats per a diferents tipus de processos i sistemes industrials. Els
microorganismes utilitzats en aquests processos estan seleccionats de la gran varietat de
microorganismes que existeixen a la natura, i en molts casos s’han millorat genèticament per a
incrementar la seva productivitat o permetre’ls fer processos bioquímics que originalment són
incapaços de dur a terme.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 39 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 40 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
L’àcid cítric és un àcid orgànic, present de forma natural en moltes fruites i verdures, que es
produeix industrialment per a ser utilitzat com a additiu alimentari. A diferència d’altres àcids
orgànics, la seva producció és única i exclusivament a través de microorganismes, en concret, de
fongs micelians Aspergillus niger, que l’excreten en quantitats importants.
6. Tractament i 5. Precipitació de
4. Centrifugació
cristal·lització l'àcid cítric
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 41 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
6. Es tracta amb carbó actiu per a eliminar les impureses i es concentra per
cristal·lització.
3.2.2. Tetraciclines
Les tetraciclines són un dels grups d’antibiòtics més utilitzats avui en dia, que s’obté de diferents
espècies del gènere bacterià Streptomyces, tot i que algunes ja es produeixen de forma sintètica.
Són antibiòtics d’ampli espectre, efectives contra bacteris Gram positius i negatius, ja que actuen
directament sobre els ribosomes.
La ruta metabòlica que fan servir els Streptomyces per a produir tetraciclines és molt llarga,
complexa, i exclusiva d’aquest gènere bacterià. La seva producció a nivell industrial, per tant,
necessita aquests bacteris de manera indispensable:
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 42 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
4. EL LABORATORI DE MICROBIOLOGIA
A nivell de control alimentari, la presa de mostres és un procés molt elaborat que depèn de tota
una sèrie de paràmetres estadístics. El càlcul d’aquests paràmetres determinarà el nombre de
mostres i la forma en que s’han de prendre per tal d’assegurar que els resultats d’aquest control
siguin fiables i representatius del lot d’aliments que s’està analitzant.
A l’hora de prendre una mostra concreta, les mostres microbiològiques es poden prendre de
qualsevol objecte, aliment o residu susceptible de contenir microorganismes. D’aquest objecte se’n
pot agafar directament una porció sòlida o líquida (per exemple, una porció d’aliment) o se’n pot
fer un frotis11 amb un bastonet de cotó estèril. En ambdós casos, la mostra s’haurà de dipositar en
un recipient estèril fins al moment de l’anàlisi.
En el cas de les mostres líquides, és important homogeneïtzar-les per tal que els microorganismes
estiguin ben repartits per tota la solució i un petit volum de mostra sigui representatiu de tot el
líquid. En el cas de les mostres sòlides, si l’objecte d’origen és gran, convé agafar diverses porcions
de mostra de diferents parts, ja que els microorganismes poden no estar distribuïts homogèniament
per tota la superfície o interior de l’objecte.
11
Passar un bastonet de cotó estèril per la superfície a analitzar
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 43 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
serà més fàcil contar colònies en placa. Es pot fer servir tant per a mostres sòlides com líquides; fins
i tot es poden diluir els frotis dipositant el bastonet de cotó en el medi de dilució.
El banc de dilucions més habitual és el 1/10 – 1/100 – 1/1000 més un blanc. La solució 1/10 es
prepara diluint 1 g o 1 mL de mostra en 9 mL de diluent. A partir d’aquí, agafarem una part de solució
concentrada per cada 9 parts de diluent per tal d’elaborar la següent dilució. Les més habituals al
laboratori són:
Dilucions de 1 mL Dilucions de 10 mL
DILUCIÓ
Solució anterior Diluent Solució anterior Diluent
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 44 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
El blanc s’elabora sempre amb 9 mL del mateix medi de dilució que s’ha fet servir per a la resta
de dilucions i 1 mL d’aigua destil·lada. És molt important que tant el medi de dilucions com l’aigua
destil·lada que es fan servir per a fer el banc de dilucions siguin estèrils, per la qual cosa és necessari
autoclavar-ho tot abans de fer el banc de dilucions. En cas contrari, podrien aparèixer molts altres
microorganismes a banda dels que ens interessa analitzar.
Un medi de cultiu és una preparació composta per un conjunt de substàncies nutritives especials
per al creixement de microorganismes al laboratori. La principal necessitat serà aigua, acompanyada
de fonts de carboni (sucres simples, CO2 o metà), fonts de nitrogen (aminoàcids, peptones o nitrats),
fonts de sobre i fòsfor i ions metàl·lics.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 45 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
A aquestes substàncies bàsiques, se li poden afegir tota una sèrie de substàncies més
específiques dependents de les necessitats metabòliques de cada microorganisme. Això fa que,
actualment, existeixi una gran varietat de medis de cultiu:
- Medis no selectius: són medis per al creixement general de la majoria de bacteris. N’hi ha de
dos tipus:
● Medis líquids: aigua de peptona, extractes de carn, clorur sòdic i aigua. També
s’anomenen brous nutritius.
● Medis sòlids: formats pels mateixos compostos que els medis líquids però solidificats
amb agar-agar. S’anomenen agars nutritius.
- Medis d’enriquiment: són medis líquids que es fan servir per a augmentar el nombre de
bacteris presents en una mostra i així fer-ne més fàcil l’estudi. Són especialment útils per a
mostres on hi ha un nombre de bacteris molt reduït.
- Medis selectius: aquests medis es fan servir per a separar cultius on hi ha una gran varietat
de bacteris i microorganismes i seleccionar-ne només un d’ells. Aquests medis són molt
variats, ja que han de contenir substàncies o condicions que afavoreixin el creixement d’uns
microorganismes i impedeixin a la vegada el creixement dels altres.
- Medis selectius i diferencials: en alguns casos, un sol medi és selectiu i diferencial a la vegada,
quan permet el creixement de només alguns tipus de bacteris que, a més, formen colònies
característiques.
- Medis de cultiu anaerobis: si els bacteris que s’han de cultivar són anaerobis estrictes,
necessiten uns medis i unes condicions de cultiu especials. En aquest cas, es fan servir medis
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 46 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
amb substàncies reductores, que eliminen l’oxigen de l’aire, i es segellen els recipients de
cultiu amb agar-agar solidificat o parafina.
Aquests medis de cultiu s’hauran de disposar en les condicions de creixement òptimes de cada
microorganisme. La temperatura dependrà de si els microorganismes són psicròfils ( <20ºC),
mesòfils (20 – 45 ºC) i termòfils ( >45 ºC); així com la humitat. El pH generalment es situa al voltant
de la neutralitat, tot i que en alguns casos es pot afegir un tampó per a estabilitzar-lo si els
microorganismes tenen pH òptims àcids o bàsics. La salinitat també dependrà de les condicions
òptimes de creixement del bacteri, però normalment es fan servir condicions d’equilibri osmòtic.
Cultius en placa
Per a fer un cultiu en placa, es fan servir plaques de Petri amb tapa. Es prepara l’agar líquid i se’n
dipositen entre 10 i 15 mL a la placa, que després es deixen solidificar i assecar en condicions estèrils
(es poden autoclavar posteriorment). Un cop disposem de la placa estèril, ja podem realitzar el
sembrat de microorganismes:
- Tècnica de Barry: la mostra a cultivar s’afegeix a l’agar quan encara està fos, per a que
solidifiqui amb la mostra a dins. S’homogeneïtza bé la barreja, s’aboca a la placa de Petri i es
deixa solidificar. És una tècnica molt utilitzada amb floridures i llevats.
- Conreu amb nansa de Digralsky: un cop l’agar ja està esterilitzat i solidificat, s’inoculen 0,1
mL de mostra amb una pipeta i s’estén per tota la placa amb la nansa, de forma que la mostra
quedi repartida per tota la superfície.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 47 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Conreu per esgotament en estria: també es realitza sobre agar solidificat. En aquest cas, es
fa servir la nansa de Kolle12 flamejada per tal d’esterilitzar-la. Amb aquesta nansa, s’agafa una
quantitat petita de mostra i es diposita a un dels extrems superiors de la placa. A partir d’aquí,
aquesta mostra s’arrossega per tota la placa en zig-zag sense aixecar la nansa, de forma que
a mida que anem avançant, la concentració de bacteris serà molt menor perquè els hem anat
deixant pel camí.
12
Nansa amb un filament de ferro al final que acaba en forma de cèrcol.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 48 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Cultius en tub
- Agar inclinat: es dipositen uns 5 mL d’agar líquid en un tub d’assaig i es deixen solidificar amb
el tub inclinat. Un cop solidificat, es flameja una nansa de Kolle per a esterilitzar-la i s’agafa
una petita quantitat de mostra. Es reparteix per la superfície de l’agar en zig-zag com si es
tractés d’una placa.
- Picadura: es fa servir el mateix medi solidificat en tub, però aquest cop en vertical. L’inòcul
es fa amb una agulla directament al centre de l’agar.
- Medi semisòlid: es fa servir una proporció d’agar menor en aigua per a que no solidifiqui,
cosa que permet veure la mobilitat dels bacteris. L’inòcul es posa en un extrem d’un tub en
forma de U i es deixa incubar. Si al cap d’unes 48 hores s’observen bacteris a l’altra banda del
tub, voldrà dir que són mòbils, mentre que si es queden a la banda inoculada, significarà que
són immòbils.
- Cultiu en tub: els bacteris es cultiven en agar líquid, i aquest es deixa solidificar barrejat amb
l’inòcul per a evitar la difusió d’oxigen. El tub s’ha de sacsejar bé per a evitar que quedin
bombolles d’aire, ja que els bacteris que es solen cultivar amb aquest mètode són anaerobis
estrictes.
Per a fer recompte de poblacions es fan servir els cultius en placa de Petri; es farà servir una placa
de Petri degudament marcada per a cada dilució. Les plaques s’incuben en una estufa de cultiu a la
temperatura i temps necessaris per al creixement de cada microorganisme; finalitzat aquest temps
tindrem les plaques amb diverses colònies.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 49 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Per tal de comptar els microorganismes, es fan servir només les plaques que tenen entre 30 i 300
colònies, a les quals s’aplica la següent fórmula:
1 1
𝑁=𝑛· ·
𝑑 𝑖
on N= nº de UFC13
n = nº de colònies a la placa
i = quantitat inoculada (en mL)
d = dilució de la placa escollida (en decimal, número entre 0 i 1)
Exemple:
Hem escollit una placa de dilució 1/100 () amb 41 colònies, a la qual vam inocular 0,1 mL de
dilució:
És a dir, que en 1 mL de mostra, hi haurà 41.000 bacteris capaços de formar una colònia (bacteris
viables).
13
Unitats Formadores de Colònia. És la mesura del nombre de bacteris en una mostra.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 50 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Aleshores, a cada un dels tubs d’un mateix grup se li inocula 1 mL d’una de les dilucions.
D’aquesta manera, si fem grups de cinc tubs, hi haurà cinc tubs amb dilució 1/10, cinc tubs amb
dilució 1/100 i cinc tubs amb dilució 1/1000.
Es deixen incubar els tubs a la temperatura de creixement del bacteri durant un cert temps.
Passat aquest temps, s’observa en quins tubs han crescut bacteris, ja sigui per l’aparició de terbolesa
o pel canvi de color del medi. Segons el número de tubs on hagin crescut bacteris (positius) i en
quina dilució hagin crescut, es fan servir unes taules on indica el NMP en el mil·lilitre inoculat.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 51 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
Exemple:
Hem fet un cultiu de cinc tubs per dilució pel mètode NMP i hem obtingut els següents resultats:
Dilució 1/10: quatre tubs positius i un tub negatiu
Dilució 1/100: dos tubs positius i tres tubs negatius
Dilució 1/1000: un tub positiu i quatre tubs negatius
Si mirem la taula, tenim una combinació de 4 al primer set, 2 al segon set i 1 al tercer set (4-2-1),
per tant, el NMP és de 0,26 UFC/mL.
- Recompte microscòpic directe: es prepara una portaobjectes marcat amb una quadrícula per
a la seva lectura al microscopi en objectiu d’immersió. Es compta directament el nombre de
bacteris que hi ha en cada quadrat i es multiplica per diversos factors de dilució i ampliació
per a obtenir el nombre de bacteris a la mostra.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 52 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
En alguns casos, a banda de fer el recompte de microorganismes, pot ser interessant també
identificar-los mitjançant observació directa al microscopi. La tinció és un mètode d’identificació
bacteriana que permet distingir unes espècies de les altres, ja que no totes es tenyeixen amb els
mateixos colorants ni de la mateixa manera.
Per tal de fer una tinció, es fa primer un cultiu de microorganismes amb els tints corresponents.
Amb les colònies obtingudes, es prepara una extensió en un porta objectes, es fixa amb calor i
s’observen els bacteris acolorits al microscopi. Existeixen diferents tipus de tinció segons el que
vulguem observar:
- Tinció Gram: és una tinció que permet diferenciar els bacteris amb paret bacteriana Gram
positiva (reaccionen davant del tint) i paret Gram negativa (no reaccionen davant el tint). El
tint és de color vermell i reacciona amb els peptidoglicans de la paret tornant-se blau, de
manera que els bacteris Gram positius es veuran blaus al microscopi i els bacteris Gram
negatius, es veuran vermells.
- Tinció de Ziehl-Neelsen: és una tècnica que tenyeix només bacteris resistents als àcids.
- Tinció de flagels: es fa servir un colorant especial que només tenyeix les proteïnes que formen
els flagels, la qual cosa permet diferenciar-ne el nombre i la disposició.
- Tinció negativa: en aquest cas, el medi es tenyeix de negre però els bacteris no queden
acolorits, de manera que al microscopi es veuen com a punts blancs en un fons negre.
Les proves bioquímiques serveixen per a identificar les espècies de bacteris i diferenciar-les de
les altres segons el seu metabolisme. N’existeixen de molts tipus, però un dels més utilitzats són les
proves enzimàtiques:
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 53 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Oxidasa: la oxidasa és l’enzim que catalitza la transferència d’electrons d’un substrat cap a
l’oxigen durant el procés d’obtenció d’energia per respiració, per la qual cosa és propi dels
microorganismes aerobis o anaerobis facultatius. Per a detectar-lo es fa servir un reactiu
anomenat oxidasa de Kovacs, que es torna púrpura en presència de l’enzim.
2 𝐻2 𝑂2 → 2 𝐻2 𝑂 + 𝑂2
Per a detectar-lo, es posa el bacteri en aigua oxigenada. Si apareixen bombolles (O2) vol dir
que el bacteri disposa d’aquest enzim.
- Coagulasa: és un enzim capaç de coagular el plasma, molt utilitzat per a diferenciar soques
de Staphylococcus aureus. Per a detectar-lo, es posa en contacte el microorganisme amb
plasma, s’incuba a 37ºC i, cada 30 minuts, s’observa si hi ha la formació d’un coàgul, que
indica la presència de l’enzim.
En la majoria d’ocasions, tant les proves de recompte com de detecció de microorganismes són
lentes, i no sempre es disposa del temps necessari per a dur-les a terme, com seria el cas d’un
laboratori d’urgències. És per això que existeixen tècniques més modernes i kits comercials que ens
permeten detectar els microorganismes de forma molt més ràpida.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 54 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Epifluorescència directa (DEFT): és una tècnica molt adequada quan es sospita una
concentració molt alta de bacteris en aliments recent produïts, sobretot en aliments sòlids i
en begudes. La tècnica es basa en l’anàlisi per luminescència d’un filtrat obtingut a partir de
la mostra.
A banda d’aquests mètodes, existeixen kits de detecció ràpida en que tots els reactius i materials
necessaris es comercialitzen junts. Un kit pot servir per a la detecció d’un o diversos
microorganismes en un nombre limitat de mostres, i tenen l’avantatge de que tot el material
necessari per a la detecció del microorganisme està degudament.
Tot el material de laboratori que es fa servir per a l’execució d’aquestes tècniques ha de ser
perfectament estèril per tal d’evitar la interferència d’altres espècies de microorganismes que no
ens interessa analitzar. No és necessari treballar en sales blanques14, però el laboratori ha d’estar
net i s’ha de treballar al voltant d’un encenedor per a mantenir les condicions d’esterilitat.
14
Sales on tot el material, maquinària, elements de construcció i personal està sotmès a processos d’esterilització
absoluta.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 55 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
- Neteja: es retira la brutícia del material mitjançant fregament, aigua i sabó. S’ha de fer
sempre abans de desinfectar o esterilitzar el material.
- Desinfecció: serveix per a destruir les formes vegetatives dels microorganismes patògens. Es
pot fer amb productes com el glutaraldehid, que destrueix totes les formes vegetatives, o
amb productes no tan agressius, com el lleixiu o l’alcohol.
- Esterilització: destrueix tots els microorganismes, fins i tot les espores. Es poden fer servir
aparells, com l’autoclau (vapor d’aigua a pressió) o el forn Pasteur (calor en sec), esterilitzants
químics (òxid d’etilè en forma gasosa) o per incandescència, dipositant el material
directament a la flama.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 56 de 57
CFGS ▪ DIETÉTICA
C05 MICROBIOLOGÍA E HIGIENE ALIMENTARIA
UD1. EL PAPER BENEFICIÓS DELS MICROORGANISMES EN ELS
ALIMENTS
BIBLIOGRAFÍA
BORDONS ALBERT Bioquímica i Microbiologia Industrial [Libro]. - Tarragona : Universitat Rovira i Virgili,
Eina 21, 2001. - Primera. - 84-8424-053-3.
C/ Pelai, 42 93 318 24 36
Principal, 1ª y 2ª Planta cedesca@grupcedesca.com
08001 - Barcelona www.cedesca.com
► Página 57 de 57