Textbook Nanostructures For Novel Therapy Synthesis Characterization and Applications A Volume in Micro and Nano Technologies Alexandru Mihai Grumezescu and Denisa Ficai Eds Ebook All Chapter PDF

Nanostructures for Novel Therapy.
Synthesis, Characterization and

Applications. A volume in Micro and
Nano Technologies Alexandru Mihai
Grumezescu And Denisa Ficai (Eds.)
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Nanostructures in Therapeutic Medicine Series
Nanostructures
for Novel Therapy
Synthesis, Characterization
and Applications
Edited by
Denisa Ficai
University Politehnica of Bucharest, Bucharest, Romania
Alexandru Mihai Grumezescu

Elsevier
Radarweg 29, PO Box 211, 1000 AE Amsterdam, Netherlands
The Boulevard, Langford Lane, Kidlington, Oxford OX5 1GB, United Kingdom
50 Hampshire Street, 5th Floor, Cambridge, MA 02139, United States
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ISBN: 978-0-323-46142-9
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Publisher: Matthew Deans

Acquisition Editor: Simon Holt
Editorial Project Manager: Sabrina Webber
Production Project Manager: Julie-Ann Stansfield
Designer: Greg Harris
Typeset by Thomson Digital

List of Contributors
Giorgia Adamo
University of Palermo, Palermo, Italy
Andreea Aiacoboae
Parvez Alam
University of Edinburgh, Edinburgh, United Kingdom;
Abo Akademi University, Turku, Finland
Ecaterina Andronescu
Hiromichi Aono
Ehime University, Matsuyama, Japan
Ilaria Armentano
Tuscia University, Viterbo, Italy
Danielle C. Arruda
Minas Gerais Federal University, Belo Horizonte, Brasil
Petar A. Atanasov
Bulgarian Academy of Sciences, Sofia, Bulgaria
Fatemeh Atyabi
Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran
Muhammad A. Azmi
Isra University Karachi Campus, Karachi, Pakistan
Patrick Babczyk
Bonn-Rhine-Sieg University of Applied Sciences, Rheinbach, Germany
Jalal Barzin
Iran Polymer & Petrochemical Institute, Tehran, Iran
Gamze Bektas
Private Clinic, Istanbul, Turkey
Luciano A. Benedini
Southern National University, Bahía Blanca, Argentina
Pascal Bigey
CNRS UMR 8258; INSERM UMR-S 1022; Paris Descartes University; Chimie ParisTech;
Paris, France
Fernanda B. Borghi-Pangoni
State University of Maringá, Maringá, Brazil
Lydia M. Bouchet
National University of Cordoba, Córdoba, Argentina
xxi
xxii List of Contributors
Verónica Brunetti
Marcos L. Bruschi
Simona Campora
Christine Charrueau
Paris, France
Murthy Y. Chavali
Technology and Research University, Guntur, India
Mariana C. Chifiriuc
Research Institute of the University of Bucharest (ICUB), Bucharest, Romania
Anı Cinpolat
Carmen Curutiu
Noelia L. D’Elía
Nily Dan
Drexel University, Philadelphia, PA, United States
Sabrina B. de Souza Ferreira
Corinne Dejous
University of Bordeaux, Bordeaux, France
Tanmoy K. Dey
University of Calcutta, Kolkata, India
Pubali Dhar
Vijaya R. Dirisala
Slavomira Doktorovova
University of Coimbra, Coimbra, Portugal
Surbhi Dubey
Dr. Hari Singh Gour Central University, Sagar, India
Fatma Elsayed
Fuyuaki Endo
Keio University, Yokohama, Japan
List of Contributors xxiii
Virginie Escriou
Paris, France
Abdol-Rahim Faramarzi
Eliana D. Farias
Eelna Fortunati
University of Perugia, Terni, Italy
Irina Gheorghe
Tania Gheorghe
Giulio Ghersi
Mohsen Gorji
Amirkabir University of Technology, Tehran, Iran
Alexandru Mihai Grumezescu
Research Institute of the University of Bucharest (ICUB), Bucharest, Romania;
Hamida Hallil
Céline Hoffmann
Paris, France
Alina M. Holban
University Politehnica of Bucharest, Bucharest, Romania;
Atsushi Hotta
Daniel Iglesias
University of Trieste, Trieste, Italy
Cristina Ş. Iosub
Mariana V. Junqueira
Josè M. Kenny
Institute of Polymer Science and Technology, CSIC, Madrid, Spain
xxiv List of Contributors
Somayeh Khezrian
University of Tehran, Tehran, Iran
Sepideh Khoee
University of Tehran, Tehran, Iran
Stephanie E. Klein
Sengo Kobayashi
Naruki Kurokawa
Iulia I. Lungu
Tomoki Maeda
Silvia Marchesan
University of Trieste, Trieste, Italy
Sabata Martino
University of Perugia, Perugia, Italy
Samantha Mattioli
Paula V. Messina
Hamid Mobedi
Nishi Mody
Francesco Morena
University of Perugia, Perugia, Italy
Fatemeh Mottaghitalab
Deboshree Mukherjee
CSIR-Indian Institute of Chemical Technology, Hyderabad, India
Alieh Naraghi
Shahid Rajaee Teacher Training University, Tehran, Iran
Sampath K. Nune
Elena Olăreţ
List of Contributors xxv
Saeed Olyaee
Shahid Rajaee Teacher Training University, Tehran, Iran
Ulvan Ozad
Near East University Hospital, Nicosia, North Cyprus
Debjyoti Paul
Vincent Raimbault
LAAS-CNRS, Toulouse, France
Krupanidhi S. Rama
Bolla G. Rao
Ali Rastegari
Benjaram M. Reddy
Nicoletta Rescignano
Institute of Polymer Science and Technology, CSIC, Madrid, Spain
Zumreta Rizvanovic
Rajagopalan Rukkumani
Pondicherry University, Kalapet, India
Avneet Saini
Panjab University, Chandigarh, India
Dorothee Schipper
Margit Schulze
Kaneez F. Shad
University of Technology Sydney (UTS), Sydney, NSW, Australia
Rajeev Sharma
Ranjita Shegokar
Freie Universität Berlin, Berlin, Germany
Jalpa Soni
Indian Institute of Science Education and Research, Kolkata, India
Eliana B. Souto
University of Coimbra, Coimbra, Portugal
xxvi List of Contributors
Miriam C. Strumia
Hiromichi Takebe
Edda Tobiasch
Luigi Torre
Gaurav Verma
Panjab University, Chandigarh, India
George Vlasceanu
Suresh P. Vyas
Jatinder Vir Yakhmi
Homi Bhabha National Institute, Anushaktinagar, India
Saeki Yamamuro
Foreword of the Series
Material science and engineering at the nanoscale have brought revolutionary advances to the bio-
medical sciences, overturning many of the known traditional approaches. Nanotechnology has driven
many of the most successful innovative technologies, and their impressive record of accomplishment
has made nanostructures promising candidates for future therapy. The advantages that nanomaterials
have already provided to therapeutics, such as targeted and controlled delivery, wide accessibility, high
specificity, low side effects, improved efficiency, and impressive versatility are currently considered
key elements in designing personalized medicine approaches for prophylaxis, diagnosis, and therapy.
Therapeutic nanostructures can be highly diverse, and their unique properties have led to the devel-
opment of highly specialized biosensors, more efficient drug delivery vehicles, and controlled release
targeting systems to fight severe or incurable diseases, such as cancer, infections, and cardiovascular
disease.
In view of the astounding progress made in the field of therapeutic nanotechnology, and its rapidly
progressing expansion, this book aims to collect together in one place all the most recent and innovative
aspects regarding the impact of nanomaterials in both current and future therapy. The book is organized
in five volumes, covering the main areas that are relevant for the design and implementation of nano-
structures in medical therapies.
The first volume, Nanostructures for Novel Therapy: Synthesis, Characterization, and Applications
describes methods to obtain and characterize nanosystems, emphasizing their biomedical applications.
Special attention in this volume was paid to modern synthesis methods to reduce side effects and limit
the toxicity of nanomaterials in biomedical applications. Numerous examples of nanostructures de-
signed for therapy, as well as the most efficient synthesis and characterization routes for these materials
are clearly described and critically analyzed.
The second volume, entitled Nanostructures for Drug Delivery covers one of the most widely uti-
lized and investigated applications of nanomaterials in the biomedical field, namely drug delivery. The
design of nanoscale agents in order to specifically and safely carry therapeutic agents to their final
destination is an intriguing approach to future targeted therapeutics. This approach could provide a
treatment for previously incurable diseases, as well as reducing the side effects of current drugs. Many
highly active drugs are severely limited by side effects related to their unspecific sites of action. This
book introduces the readers to the amazing field of nanomedicine by discussing the versatility and va-
riety of nanovehicles for drug delivery and targeting. Moreover, readers will find numerous examples,
and will learn about the currently used or investigational drug delivery agents for therapy, prophylaxis,
and diagnosis.
The third volume, Nanostructures for Antimicrobial Therapy highlights the impressive progress
made by nanotechnology in the design of novel antimicrobial approaches. Since microbial resistance to
antibiotics is a very real and worrying issue growing throughout the world, the development of more ef-
ficient antimicrobial agents has a high priority to allow control of infections in the future. Antimicrobial
nanosystems have proved to be highly efficient against drug-resistant microorganisms, are able to fight
biofilm-associated infections and control the social behavior of microbial communities. Nanostructures
xxvii
xxviii Foreword of the Series
can also reduce microbial virulence factors and reduce pathogenesis mechanisms thus offering a prom-
ising alternative for future therapy.
The fourth volume, entitled Nanostructures for Cancer Therapy covers the applications of nano-
medicine in cancer diagnosis and treatment. The use of nanoparticles for cancer therapy is not in itself
a new approach, but numerous advances have been recently made in this area, and the aim of this book
is to cover the most interesting new approaches in the management of this deadly disease. Nanosized
drugs are currently believed to represent the most efficient approach in cancer chemotherapy, and this
volume provides coverage of the latest novel findings, while also discussing possible improvements in
more established types of nanosystems to increase the efficiency of cancer therapy.
Last but not least, the fifth volume of this series entitled Nanostructures for Oral Medicine covers
the progress made in applications of nanotechnology in treating various diseases of the oral cavity and
in dentistry. Readers will have the chance to learn about the most efficient modern materials used to
treat or to prevent widely encountered oral diseases, such as gingivitis, periodontitis, caries, and dental
plaque. Moreover, restorative dentistry also now makes wide use of nanomaterials.
Overall, this book series will provide a state-of-the-art compendium of knowledge, and a crys-
tal ball to see into the future of biomedical nanotechology and nanomedicine. It will appeal to
researchers, clinicians, engineers, pharmacologists, pharmacists, oncologists, infectious disease ex-
perts, and dentists. More many interested general readers may discover the impact, current progress
and future applications of nanotechnology in therapeutics and diagnosis. Taken together, nanoscale
approaches will improve the efficiency of personalized medicine for better management of diseases
in the 21st century.
Michael R. Hamblin
Wellman Center for Photomedicine, Massachusetts General Hospital, Boston, MA, United States
Department of Dermatology, Harvard Medical School, Boston, MA, United States
Harvard-MIT Division of Health Sciences and Technology, Cambridge, MA, United States
Preface
ABOUT THE SERIES (VOLUMES I–V)

In our permanently changing world, novel therapeutics are constantly required to manage health and
well-being of population. Although numerous diseases are currently considered incurable, impressive
progress made in biomedicine and associated fields, such as chemistry, physics, engineering, pharmacol-
ogy, and materials science, offers a new light to the therapeutics domain. In this context, most physicists
and researchers believe that a personalized and adequate treatment may significantly improve the outcome
of severe diseases and ensure a faster healing. Nanotechnology offers great perspectives for personalized
medicine, since nanostructured therapeutics proved their efficiency and amazing impact in improving
therapy, prophylaxis, and diagnosis. The emerging field of nanosized materials has numerous applications
in the biomedical field, especially in therapy. This series of five volumes came out by the need of learning
about recent progress of the science of nanostructured materials to improve current therapy and led to the
next level. The books offer an interesting and updated perspective regarding applications of nanomaterials
in therapy of most-investigated and difficult-to-treat diseases, such as cancer and severe infections. The
presentation approach of each chapter contained in these five volumes is clear and easy to understand by
most readers and interesting for biomedical specialists, researchers, and engineers. The series is organized
in an attractive manner for students and academics on the field, starting with a volume dealing with the
synthesis, characterization, and main applications of nanostructures, emphasizing on their impact in ther-
apy. Next volume reveals the most recent progress made on a very investigated field, which is considered
a key element in personalized medicine and future therapy, namely nanostructured drug-delivery systems.
Their impact in antimicrobial therapy is also widely discussed and suggestive examples are given and
explained. Moreover, a whole volume is dedicated to the management of the disease of the century—can-
cer—revealing the huge value added by the utilization of nanosystems in the therapy of this deadly dis-
ease. Important aspects related to improved diagnosis and prophylaxis are highlighted. In the last volume,
the progress and novel applications of nanotechnology in oral medicine are dissected. The field of oral
diseases represents a wide-interest and priority field since both physicists and researchers believe that they
can be prevented and treated more easily with targeting systems and nanofunctional prosthetics. All chap-
ters are clearly illustrated to highlight important or more difficult-to-understand aspects and suggestive
examples are often enumerated in organized tables, which are explained and discussed. Overall, the series
contains very recent but accessible information regarding the progress of nanostructures in therapeutics
and gives a novel perspective about future therapy of severe diseases.
Alexandru M. Grumezescu
ABOUT VOLUME I
First volume of the series Therapeutic nanostructures introduces the readers in the amazing field of
nanostructured size materials, describing types, synthesis and characterization approaches, and empha-
sizing on their applications. The utility of nanosized materials in the biomedical field is highly influ-
xxix
xxx Preface
enced by the physicochemical properties of nanostructured materials utilized for therapy. Therefore,
knowing their qualities ensure a more successful approach in designing effective agents for the man-
agement of a particular disease. This book offers an updated perspective regarding the most interesting
advances of nanoarchitectured therapeutics, discusses the wide variety of their synthesis routes, prefer-
ential functionalities, and most supported applications for the design of future therapeutics.
Volume I contains 30 chapters, prepared by outstanding international researchers from USA, Brazil,
Argentina, Australia, Portugal, Spain, Finland, France, Italy, Germany, Bulgaria, Romania, Turkey,
Cyprus, Iran, Pakistan, India, Taiwan, China, and Japan.
In Chapter 1, entitled Novel Approaches for Preparation of Nanoparticles, Bolla Govinda Rao
et al., give an overview about new developments in various preparation methodologies for the fabrica-
tion of nanoparticles. Also, this first chapter offers a great introductory basis in the design of functional
nanostructures aimed for particular purposes.
Andreea Aiacoboae et al., in Chapter 2, entitled Applications of Nanoscale Drugs Carriers in the
Treatment of Chronic Diseases, discuss about smart nanosized drug-delivery systems which made or
have the potential to make a great impact in the management of chronic illness. The fact that numerous
nanosystems are able to respond to various stimuli, such as pH, temperature, light, ultrasounds, electri-
cal, and magnetical fields, make them special candidates for targeted and efficient therapy. The chapter
discusses most investigated examples of nanoparticles which are under consideration for nanotherapy,
such as gold nanoparticles (NPs), silver NPs, magnetic NPs, quantum dots, and mesoporous silica NPs,
useful in targeting and delivering applications.
Chapter 3, prepared by Giorgia Adamo et al., entitled Functionalization of Nanoparticles in Specific
Targeting and Mechanism Release, reviews the potential of smart multifunctional nanostructures as
customizable, targeted drug-delivery vehicles capable of carrying large doses of therapeutic agents into
target cells. Covalent and noncovalent chemical linking using different molecules have been reported
for nanoparticles surface functionalization, since this approach confers them specific properties, such
as more specific targeting ability.
In Chapter 4, entitled Fabrication and Characterization of Natural/Synthesized, Micro-, and Nano-
structured Materials for Biomedical Applications, prepared by Hiromichi Takebe et al., is presented
an up-to-date overview about the preparation of modified micro/nanoparticles such as, magnetic ox-
ide nanoparticles for thermal coagulation therapy, iron oxide nanocubes and their shape-induced self-
assembly and micro/submicrosized, imprinted inorganic glasses for nanointegration. This chapter is a
great opportunity to review the properties of most investigated nanosystems for biomedical applications.
In chapter 5, entitled Multifunctional Nanostructured Biopolymeric Materials for Therapeutic
Applications, prepared by Armentano et al., is revealed the current state and future prospects of the new
generation of multifunctional bionanomaterials, based on different natural or synthetic biopolymers,
together with their role in development of personalized therapy.
Chapter 6, entitled Polymeric Pharmaceutical Nanoparticles Developed by Electrospray, prepared
by Faramarzi et al., gives an overview about advantages and disadvantages, basic principles and pro-
duction methods of electrospray based approaches.
Debjyoti Paul et al., in Chapter 7, entitled Nanoformulation and Administration of PUFA-Rich
Systems for Applications in Modern Healthcare, explore the realms of nanotechnology that deals with
the fabrication methods of polyunsaturated fatty acids (PUFA) rich nanoformulations, the holistic
changes in stability, bioavailability, and bioactivity as a consequence of different administration routes
(oral, topical, and parenteral) of such nanosystems.
Preface xxxi
Naruki Kurokawa et al., in Chapter 8, entitled Electrospinning and Surface Modification Methods
for Functionalized Cell Scaffolds, present an extensive overview of effective techniques for making
optimal scaffolds, including electrospinning and surface modification methods.
Daniel Iglesias, et al., in Chapter 9, entitled Short Peptide Self-Assembled Nanostructures for
Therapeutics Innovative Delivery, described the high innovation potential offered by self-assembling
short peptides in the field of drug delivery. Several options for such use are possible, ranging from
physical drug entrapment in the hydrogel matrix, through drug noncovalent binding to the supramo-
lecular structure by the covalent binding of the drug to the self-assembling building block.
Avneet Saini et al., in Chapter 10, entitled Peptoids: Tomorrow’s Therapeutics, summarize the
recent research efforts in the field of peptoid biopolymers from synthesis to folded structural motifs.
Also, the authors present their major biological applications discovered in the last two decades.
Chapter 11, prepared by N.S. Sampath Kumar, Electrospinning of Collagen Nanofiber Scaffolds for
Tissue Repair and Regeneration, provide information about tissue repair and regeneration using biomi-
metic scaffolds and a brief overview of state-of-the-art methods for fabricating nanofibrous scaffolds,
including phase-separation, freeze-drying, self-assembly, and electrospinning.
Chapter 12, entitled Nanostructured Therapeutic Systems With Bioadhesive and Thermoresponsive
Properties, prepared by Marcos Luciano Bruschi et al., discussed the importance, applications, and
perspectives of Mucoadhesive Thermoresponsive Systems as potentially useful therapeutic approach.
Chapter 13, entitled Design Considerations in the Development of Wound Healing Bionanoma-
terials, prepared by Parvez Alam et al., provide a comprehensive overview about fundamental con-
siderations in the design of bionanomaterials with a focus on skin properties, material types, surface
structures and methods for nanofabrication.
In the Chapter 14, Role of Nanostructure Molecules in Enhancing the Bioavailability of Oral Drugs,
prepared by Muhammad Ahmed Azmi et al., the main focus is on the role of nanostructured molecules
in the enhancement of the bioavailability of drugs. The authors show recent results for different com-
pounds, which are promising candidates for anti-inflammatory, immunosuppressive, antifertility, anti-
cytogenesis, and anticancer responses.
Chapter 15, prepared by Ulvan Ozad, entitled Improvement Steps of Plastic Surgery to Tis-
sue Engineering by Nanotechnology, give an overview about the application of nanotechnol-
ogy in plastic and reconstructive surgery field. The effects of nanotechnology are observed in
numerous such procedures; ranging from the nanomaterials used in implantable materials to
wound closure, wound healing, and wound dressing, emphasizing on tissue engineering and
regeneration.
Eliana D. Farías et al., in Chapter 16, entitled Dendrimers and Dendronized Materials as Nanocar-
riers, describe general characteristics of dendrimers and dendronized materials, synthetic methodolo-
gies and their properties. Successful applications of dendrimers and novel dendritic structures to obtain
efficient nanocarriers are also discussed.
Petar A. Atanasov, in Chapter 17, entitled Gold Nanostructures: Preparation, Properties, Applica-
tion in SERS, and Biophotonics, present an up to date overview about the development of several ad-
vanced methods for fabrication of nanoparticles and nanosized arrays and examples of their application
in SERS and biophotonics. Also, advanced laser systems which are used for controlling and manipulat-
ing the properties of the structures are presented and dissected.
Chapter 18, entitled Quantum Dots for Bioimaging and Therapeutic Applications, prepared by
George Vlasceanu et al., presents an up to date review about Quantum Dots synthesis methods and bio-
xxxii Preface
imaging techniques, with the focus on the latter. Bioimaging emerged as a relatively recent field, as the
integration of chemistry, physics, and biology in an intricate overlapping. This intriguing field proved
a great impact in modern therapeutics and the potential for future therapy seems endless.
Nily Dan et al., in Chapter 19, entitled Lipid-Based Synthetic Gene Carriers, review the equilibrium
properties of lipoplexes and the kinetics pathways for their formation. Better understanding of lipo-
plex formation can not only lead to the design of effective nucleic acid lipoplex-based gene delivery
or silencing agents, but is also of interest as a fundamental multicomponent, multilength scale, and
multitime scale process.
Chapter 20 prepared by Corinne Dejous et al., Using Microsensors to Promote Development of
Innovative Therapeutic Nanostructures, gives an overview of the existing micro- and nanosensors, and
their principles and describe microsensors that can be developed for fast evaluation of efficiency and
toxicity of innovative therapeutic nanostructures. The authors also describe their key applications
and analytical techniques employed.
D. Schipper et al., in Chapter 21, entitled The effect of Nanostructured Surfaces on Stem Cell Fate,
present details about the chemical structure of various nanomaterials used as scaffolds for stem cell
differentiation including bulk and surface properties and corresponding analytical methods for surface
characterization. Furthermore, the authors present recently developed methods for the design of tai-
lored nanomaterials used in stem cell differentiation.
Chapter 22, prepared by Sepideh Khoee, entitled Applications of Aptamers for the Diagnosis and
Therapy of Different Diseases, gives an up to date overview about aptamers and their application as biotech-
nological tools in biosensor development and therapeutic agents for drug delivery and diagnosis of diseases.
Chapter 23, entitled Recent Progress in Therapeutic Diagnosis Using Photonic Crystal Nanostruc-
tures, prepared by Saeed Olyaee, discusses about photonic crystals and their properties, as well as the
fabrication procedure. The chapter presents several demonstrations using photonic crystals and their
laser biosensors module, as lab on chip devices.
Chapter 24, prepared by Surbhi Dubey, entitled Novel Carriers and Approaches: Insight for
Psoriasis Management, presents recent progress in the field of psoriasis in terms of pathogenesis, role
of cytokines, currently available treatment options pertaining to mode of action, pharmacokinetics,
major hindrances in psoriasis treatment, side effects of individual antipsoriatic drugs, and recent devel-
opments in the delivery of various antipsoriatic drugs through lipid-based novel colloidal drug carriers.
Recent nano-based approaches bring a new light in the management of this disease.
Jalpa Soni et al., in Chapter 25, entitled Use of Nanostructures Based on Noble Metals in Nanobio-
medicine, present new developments in the nanobiotechnology with a general overview on the impact
of various types of nanostructures based on noble metals for various biomedical applications.
Chapter 26, entitled Innovative Nonviral Vectors for Small-Interfering RNA Delivery and Therapy,
prepared by Danielle Campiol Arruda, introduces the biological barriers to siRNA delivery in vivo and
discusses recent advances in material sciences, nanotechnology, and nucleic acid chemistry that have
yielded promising nonviral delivery systems, some of which are currently undergoing testing in clini-
cal trials. The diversity of these systems highlights the recent progress of siRNA-based therapy using
nonviral approaches.
Ali Rastegari et al., in Chapter 27, entitled siRNA-Based Nucleoceuticals for Tissue Regeneration,
provide an in-depth discussion of the development of siRNA-based nucleoceuticals for tissue engineer-
ing applications.
Preface xxxiii
Paula V. Messina et al., in Chapter 28, entitled Bone Tissue Regenerative Medicine Via Bioactive
Nanomaterials, summarize the most recent developments related to the application of nanomaterials
to the bone regenerative medicine and discusses their commercialization projection in consideration to
their toxicological risks.
Chapter 29, prepared by Stefana Iosub et al., entitled Toxicity of Nanostructures—A General
Approach, provides a general picture of the toxicological responses that nanomaterials can generate.
Beside the size and the concentration of nanoparticles, there are several factors that influence their cy-
totoxicity, such as: aggregation state, shape, chemistry, biodistribution, etc. However, the toxic effects
could be diminished by capping or coating the nanoparticles with various molecules to enhance their
biocompatibility, which also may increase their specificity.
Chapter 30, entitled Role of Excipients in Formulation Development and Biocompatibility of Lipid
Nanoparticles, prepared by Slavomira Doktorovova, discusses the role of excipients in the production
of lipid nanoparticles. An overview of commonly used and upcoming promising excipients, which
can facilitate the development of lipid nanoparticles and lipid-based formulations, is presented. A re-
view of new research outcomes and market status of lipid nanoparticles is also addressed in this chapter.
Denisa Ficai
Alexandru M. Grumezescu
CHAPTER
NOVEL APPROACHES
FOR PREPARATION
OF NANOPARTICLES
Bolla G. Rao, Deboshree Mukherjee, Benjaram M. Reddy
1
CHAPTER OUTLINE
1 Introduction........................................................................................................................................ 1
1.1 Evolution of Metal Nanoparticles in Pharmacy and Biotechnology......................................2
2 Synthetic Methods for Preparation of Metal Nanoparticles.................................................................... 5
2.1 Thermal Decomposition Method.....................................................................................5
2.2 Sol–Gel Method............................................................................................................8
2.3 Hydrothermal and Solvothermal Method........................................................................10
2.4 Microwave-Assisted Method.........................................................................................13
2.5 Polyol Method............................................................................................................15
2.6 Sonochemical Method.................................................................................................17
2.7 Liquid–Liquid Interface Method...................................................................................17
2.8 Phase-Transfer Method................................................................................................21
2.9 Biosynthesis Method...................................................................................................22
2.10 Template-Directed Synthetic Method............................................................................24
3 Application of Metal Nanoparticles in Theranostics............................................................................27
3.1 Diagnosis and Drug Delivery........................................................................................27
4 Conclusions......................................................................................................................................31
References..............................................................................................................................................31
1 INTRODUCTION
Since the beginning of the 21st century, with the rising concern of multidrug resistance and scarcity of
new antibiotics, the use of metal nanoparticles (NPs) in medicine is undergoing renaissance. In con-
trast to bulk, nanomaterials exhibit huge surface area per unit volume and tunable optical, electronic,
magnetic, and biological properties. Metal NPs can be engineered to have different sizes, shapes, and
surface characteristics. The size and shape tunable properties of metal nanoparticles and their wide
scope of applicability in pharmacy and biotechnology have drawn global attention toward their size
and shape-controlled synthesis. However, while dealing with metal nanoparticle synthesis, few things
should be considered seriously. First, the chosen method must be simple, less expensive, ecofriendly,
Nanostructures for Novel Therapy

Copyright © 2017 Elsevier Inc. All rights reserved.
1
2 CHAPTER 1 Novel approaches for preparation of nanoparticles
and commercially viable. Second, the simultaneous control of particle size and shape along with their
uniformity is another key objective (Kwon and Hyeon, 2008). Moreover, the NPs are kinetically unsta-
ble, they should be stabilized against aggregation into larger particles (Richter et al., 2010). Micelles,
polymers, and coordinative ligands are frequently used as stabilizers to control the growth of NPs (Kim
et al., 2004). Solution-based nanofabrication methods usually offer more control and reproducibility
over the metal NPs. A wide range of nanofabrication methods, including precipitation, deposition-
precipitation, sol–gel, liquid–liquid interface technique, hydrothermal and solvothermal syntheses,
microwave-assisted processes, polyol method, template-directed synthesis, ionic-liquid assisted meth-
ods, and so on are reported in the literature. In this chapter, the frequently used fabrication techniques
are addressed in detail with appropriate literature references. A careful study of their usefulness and
drawbacks with special importance on the laboratory scale synthesis has also been discussed with ap-
propriate illustrations.
1.1 EVOLUTION OF METAL NANOPARTICLES IN PHARMACY AND BIOTECHNOLOGY

Medicinal application of metals is already known from the ancient time. The Ebers Papyrus from
1500 BC is the earliest written account of the use of metals for treatment and describes more than 800
recipes. It has mentioned the use of copper to reduce inflammation and the use of iron to treat anemia.
Sushruta Samhita, the ancient book on Indian Ayurvedic treatment methodology written around 7th
century BC, mentioned the use of some primary metals like gold, silver, copper, lead, tin, zinc, and
iron in medicines (Prakash, 1997). Sodium vanadate has also been used since the early 20th century to
treat rheumatoid arthritis. Antimicrobial properties of metals are also known, and have been in use for
thousands of years. For example, copper and silver vessels have been used for water disinfection and
food preservation since the time of the Persian kings. This practice was later adopted by the Phoeni-
cians, Greeks, Romans, and Egyptians (Alexander, 2009). Settlers of North America used to drop Ag
coins into transport containers to preserve water, wine, milk, and vinegar, and a similar strategy was
used by Japanese soldiers during the Second World War to prevent the spread of dysentery (Borkow and
Gabbay, 2009). The medicinal use of metals was prevalent until the discovery of antibiotics by Nobel
laureate Sir Alexander Fleming in the 1920s.
Reducing the metal particle size to nanorange (<100 nm), however, has been demonstrated as
an efficient and reliable tool for improving biocompatibility (Taton et al., 2000). Earlier studies have
shown that antimicrobial formulations in the form of NPs could be used as effective bactericidal ma-
terials (Fresta et al., 1995). Later on, it was revealed that highly reactive metal oxide NPs exhibit
excellent biocidal action against Gram-positive and Gram-negative bacteria (Stoimenov et al., 2002).
Zero-valent metal nanoparticles like, Au, Ag, and FeNPs, as well as, metal oxide NPs like, zinc oxide
(ZnO), titanium dioxide (TiO2), magnesium oxide (MgO), etc., exhibit bactericidal activity and have
been found to be stable and safe for human beings (Lemire et al., 2013). The intrinsic properties and
related possible applications of different metal NPs are mainly dependent on their size, shape, com-
position, crystallinity, and morphology (Dickson and Lyon, 2000). NP toxicity may arise from several
attributes, which include the traits that are specific to the properties of the NPs, such as size, shape,
or surface charge, and traits that control the release of metal ions (El Badawy et al., 2011; Morones
et al., 2005; Pal et al., 2007). The toxic mode of action of NPs has also been connected with the
generation of reactive oxygen species (ROS) and membrane disruption (Fig. 1.1) (Bandyopadhyay
et al., 2012; Gunawan et al., 2011). A striking capability that has been reported for many NPs is their
FIGURE 1.1 Antibacterial Mechanisms of Metal Toxicity
(A) Metals can lead to protein dysfunction. (B) Production of reactive oxygen species (ROS) and depletion of
antioxidants. (C) Certain metals have been shown to impair membrane function. (D) Interference with nutrient
assimilation. (E) They can also be genotoxic. Solid arrows represent elucidated biochemical mechanism, whereas,
dashed arrows represent a route of toxicity for which the underlying biochemical mechanism is unclear. ALAD, δ-
Aminolevulinic acid dehydratase; FbaA, fructose-1,6-bisphosphate aldolase; NQR, NADH; quinone oxidoreductase;
PDF, peptide deformylase; PvdS, a σ-factor (σ24) from Pseudomonas aeruginosa.
Reprinted with permission from Lemire, J.A., Harrison, J.J., Raymond, J., 2013. Antimicrobial activity of metals: mechanisms,
molecular targets and applications. Nat. Rev. Microbiol. 11, 371–384. Copyright 2013, Macmillan Publishers Limited.
FIGURE 1.2
(A) The figure shows cryo-TEM image of a single cell planktonic Fe-reducing bacterium isolated from groundwater
at a site in Rifle, Colorado, USA. (B) A 3-D construction of nanoaggregates [orange (mid-gray in print version)]
attached to the groundwater bacterium cell wall (Luef et al., 2013).
Reprinted with permission from Bao, Y., An, W., Turner, C.W., Krishnan, K.M., 2010. The critical role of surfactants in the growth of
cobalt nanoparticles. Langmuir 26, 478–483. Copyright 2013, International Society for Microbial Ecology.
ability to physically interact with the cell surfaces of some bacteria. For example, Fe-reducing bacteria
that naturally accumulate NPs of ferric oxyhydroxide at their cell surface (Fig. 1.2) can be exploited in
targeting a specific bacterial cell (Luef et al., 2013). However, a large number of reports in the literature
indicate that the driving force behind the antimicrobial properties of antibacterial NPs is the release of
ions (Xiu et al., 2012). Tactically designed NPs, which release ions in a controlled manner or can be
targeted to specific bacterial cells, have numerous antimicrobial applications and bagged a business of
US$17.5 billion in the year 2011 in global market (Lemire et al., 2013).
Metal and metal oxide NPs have also found applications in advanced techniques of therapeutics, di-
agnosis, and drug delivery. For example, there are a wide range of paramagnetic metal NPs, mostly but
not exclusively based on iron; when an external magnetic field is applied, these NPs become magnetic
themselves, and align themselves with the direction of the external field, showing up as a hypoexposed
region on an MRI scan (Edmundson et al., 2003). Iron-based magnetic NPs, such as Feridex, have
mostly been used in in vitro or in vivo experiments, for example, in tracking the movement of stem cells
implanted into a wound site (Okada et al., 2005). In recent times, nanometer-sized crystals made of
metallic or semiconductor materials, known as quantum dots have gained much popularity in synthetic
biology (Nath and Banerjee, 2013).
Shape-dependent optical activity of the metal NPs has brought a revolution in the field of bioimag-
ing and diagnosis. Huang and coworkers demonstrated that due to longitudinal absorption band in the
near infrared (NIR), Au-nanorods are effective in acoustic imaging and are suitable as photothermal
agents for hyperthermia therapy of cancer cells. Small diameter Au-nanorods are being used as pho-
tothermal converters of near infrared radiation (NIR) for in vivo applications due to their high absorp-
tion cross-sections beyond the tissue absorption spectra (Huang et al., 2006a,b). Gold nanocages and
nanoframes developed by Xia and coworkers also exhibit potential biomedical applications due to their
desirable optical properties and cargo-holding hollow structures (Skrabalak et al., 2008). Silica-gold
2 Synthetic Methods for Preparation of Metal Nanoparticles 5
core–shell NPs, or gold nanoshells, have attracted much attention due to their interesting optical prop-
erties and numerous biomedical applications. Aden and Kerker (1951) predicted that concentric spheri-
cal particles could exhibit tunable plasmon resonance which vary as a function of the ratio of shell
thickness to core radius. Other gold nanostructures, such as Au-nanoshells, Au-nanocages, and spheri-
cal AuNPs have also demonstrated effective photothermal destruction of cancer cells and tissue (Conde
et al., 2011). Novel optical properties of other related structures, such as asymmetric “nanoeggs” and
quadruply concentric “nanomatryushkas” have also been explored (Wang et al., 2007).
2 SYNTHETIC METHODS FOR PREPARATION OF METAL NANOPARTICLES

2.1 THERMAL DECOMPOSITION METHOD
Thermal decomposition method is an excellent synthetic route to fabricate metal NPs. This method is
facile and involves single step process. It is inexpensive, environmentally benign, and provides higher
quality of metal NPs in terms of morphology, size, and particle-size distribution (Luo et al., 2009).
It is a well-known fact from literature that, nucleation step and particle growth are the crucial fac-
tors to achieve monodisperse NPs (Kashchiev and van Rosmalen, 2003). The size and shape of the
NP can be tuned in thermal decomposition method by controlling the previously mentioned factors
by the use of appropriate surfactants. This method involves thermal decomposition of organome-
tallic precursor, like metal carbonyls and metal surfactant complex in solution resulting in metallic
NPs (Kwon and Hyeon, 2008). For example, Bao et al. (2010) have synthesized monodisperse cobalt
NPs using CO2(CO)8 as the precursor and oleic acid (OA), tri-n-octylphosphine oxide (TOPO), and
di-n-octylamine (DOA) as the surfactants. Fig. 1.3 shows the TEM images of CoNPs at different time
periods in the presence of OA and TOPO surfactants. The particle size was found to rapidly increase
with respect to time period. Growth pathway was also investigated in terms of the influence of the sur-
factant. Combination of OA and TOPO provides diffusional growth pathway, whereas OA and DOA
combination and TOPO alone allowed aggregation and ripening growth pathways, respectively. In a
similar way, metallic Cu and PdNPs were prepared using precursors, copper cupferronate Cu(cupf)2
complex, and Pd–trioctylphosphine complex, respectively in the presence of trioctylphosphine (TOP)
and DOA surfactant. The concentration of stabilizing or capping agent (TOP) played a vital role in
controlling the particle size (Diab et al., 2011; Kim et al., 2003).
Chen et al. (2007) have reported the preparation of monodisperse spherical NiNPs via thermal de-
composition of nickel (II) acetylacetonate (Ni (acac)2) complex in the presence of various alkyl amines.
Reaction temperature and solvent type exhibit profound influence on the crystalline phase of NiNPs,
whereas, surfactants played a significant role in controlling the particle size as well as morphology.
Kura et al. (2010) successfully synthesized monodisperse FeNPs with high saturation magnetization
from Fe(CO)x-OAm precursor, in which CO ligands are partially replaced with OAm. During the
course of the reaction the precursor decomposed and yielded monodispersed FeNPs. However, OAm
played a significant role as a ligand and surfactant to produce small Fe particles by covering the surface
of the metal particle.
Kim et al. (2007) have reported the synthesis of hollow iron nanoframes by thermal decomposition
of Fe (II)–oleate complex, yielding uniform size Fe nanocubes in the presence of oleic acid. Fig. 1.4
shows various morphologies of iron and inset shows the HRTEM image of FeNPs. However, the addi-
tion of a little amount of sodium oleate to the reaction solution, resulted in a remarkable change in the
FIGURE 1.3 TEM Images of Co Nanoparticles (NPs) in the Presence of Surfactants OA and TOPO at Different
Stages
(A) 1, (B) 5, (C) 10, (D) 15, and (E) 30 min. (F) High resolution of TEM image of Co NPs.
Reprinted with permission from Bao, Y., An, W., Turner, C.W., Krishnan, K.M., 2010. The critical role of surfactants in the growth of
cobalt nanoparticles. Langmuir 26, 478–483. Copyright 2010, American Chemical Society.
morphology of FeNPs, that is, nanocubes to nanoframes. Therefore, it is believed that sodium oleate
played a significant role in controlling the morphology of the Fe NPs and the obtained Fe nanoframes
showed exceptional biomedical applications, especially in drug delivery. A wide variety of bimetallic
NPs have also been prepared by thermal decomposition method (Samia et al., 2006). For instance,
Cu–Pt bimetallic NPs with 1.2-nm size were synthesized by thermolysis of corresponding metal pre-
cursors—Pt(acac)2 and Cu(acac)2 at 498 K under oleylamine (Zheng et al., 2003). EXAFS studies
revealed that, Pt atoms occupied the Cu sites. Charge transfer from Cu to Pt was observed during the
formation of Cu–Pt bimetallic system. Kang and Murray (2010) have reported the synthesis of Mn–Pt
bimetallic nanocubes using [Mn(acac)2] or Mn2(CO)10 with platinum acetylacetonate [Pt(acac)2] in the
presence of oleylamine and oleic acid stabilizers.
FIGURE 1.4 TEM Images of FeNPs

(A) 23-nm sized spheres with slightly faceted shape, (B) 21-nm sized nanocubes, (C) 21-nm sized nanoframes (inset
HRTEM), (D) 17-nm sized particles with intermediate shape between solid and hollow nanocubes (inset HRTEM),
(E) the overall shape evolution of the Fe nanoparticles.
Reprinted with permission from Kim, D., Park, J., An, K.,Yang, N.K., Park, J.G., Hyeon, T., 2007. Synthesis of hollow iron
nanoframes. J. Am. Chem. Soc. 129, 5812–5813. Copyright 2007, American Chemical Society.
2.2 SOL–GEL METHOD

Sol–gel method is one of the well-established synthetic approaches to prepare novel metal oxide NPs
as well as mixed oxide composites. This method has potential control over the textural and surface
properties of the materials. Sol–gel method mainly undergoes in few steps to deliver the final metal
oxide protocols and those are hydrolysis, condensation, and drying process. The formation of metal
oxide involves different consecutive steps, initially the corresponding metal precursor undergoes rapid
hydrolysis to produce the metal hydroxide solution, followed by immediate condensation which leads
to the formation of three-dimensional gels. Afterward, obtained gel is subjected to drying process, and
the resulting product is readily converted to Xerogel or Aerogel based on the mode of drying. Sol–gel
method can be classified into two routes, such as aqueous sol–gel and nonaqueous sol–gel method
depending on the nature of the solvent utilized.
If water is used as reaction medium it is known as aqueous sol–gel method; and use of organic
solvent as reaction medium for sol–gel process is termed as nonaqueous sol–gel route. The reaction
pathway for the production of metal oxide nanostructures in the sol–gel method is shown in Fig. 1.5.
In the sol–gel approach, nature of metal precursor and solvent plays a remarkable role in the synthesis
of metal oxides NPs.
2.2.1 Aqueous sol–gel method

In aqueous sol–gel method, oxygen is necessary for the formation of metal oxide, which is supplied
by the water solvent. Generally, metal acetates, nitrates, sulfates, chlorides, and metal alkoxides are
employed as the metal precursors for this method. However, metal alkoxides are widely used as the
FIGURE 1.5 The Reaction Pathway for the Production of Metal Oxide Nanostructures in the Sol–Gel Method
precursors for the production of metal oxide NPs, due to high reaction affinity of alkoxides toward water
(Bradley et al., 2001; Turova and Turevskaya, 2002). However, some difficulties are associated with the
aqueous sol–gel method. The key steps, such as hydrolysis, condensation, and drying take place simul-
taneously in a number of cases resulting in difficulty in controlling particle morphology, and reproduc-
ibility of the final protocol during the sol–gel process (Corriu and Leclercq, 1996). The aforementioned
difficulties, however, do not affect much of the synthesis of metal oxides in bulk, but strongly affect the
preparation of nanooxides. Therefore, it is believed that the aqueous sol–gel route is highly recommend-
ed for the synthesis of bulk metal oxides rather than their nanoscale counterparts (Niederberger, 2007).
2.2.2 Nonaqueous sol–gel method

Nonaqueous or nonhydrolytic sol–gel method is devoid of some of the major drawbacks found in
aqueous sol–gel method. In nonaqueous sol–gel process, oxygen required for the formation of metal
oxide is supplied from the solvents, such as alcohols, ketones, aldehydes, or by the metal precursors.
Furthermore, these organic solvents not only serve as oxygen providers but also offer a versatile tool
for tuning several key components like morphology, surface properties, particle size, and composition
of the final oxide material. Although, nonaqueous sol–gel approach is not as popular as aqueous sol–gel
method; nonaqueous sol–gel routes have shown excellent impact on the production of nanooxides com-
pared to that of aqueous sol–gel route. The nonaqueous sol–gel route can be divided into two important
methodologies, namely, surfactant-controlled and solvent-controlled approaches for the production of
metal oxide NPs. Surfactant-controlled strategy involves direct transformation of metal precursor into
the respective metal oxide at higher temperature range in hot injection method. This method permits
outstanding control over the shape, growth of the NP, and avoids the agglomeration of particles. Few
examples of surfactant-controlled synthesized NPs are mentioned here for understanding. Song and
Zhang (2004) have demonstrated the simple nonhydrolytic route to synthesize high-quality spherical-
shaped CoFe2O4 NPs with 8-nm size. However, the spherical morphology can be changed to cubic
shape with 10-nm edge length during the seed-mediated growth. Heating rate and growth temperature
played a pivotal role in controlling the shape of CoFe2O4 nanomaterial (Fig. 1.6A–B).
The resulting materials were subjected to shape-dependent magnetic properties. Zeng et al. (2004)
have extensively studied the shape-controlled synthesis of MnFe2O4 nanomaterial. The relative ratio
between surfactant and Fe(acac)3 showed a remarkable role in controlling the final morphology of Mn-
Fe2O4. TEM analysis revealed the formation of cube-like or polyhedron-type morphology for MnFe2O4
(Fig. 1.6C–D). In addition, size of MnFe2O4 particle is dependent on the concentration of metal precur-
sors. Novel cone-shaped ZnO was obtained by decomposition of TOPO–Zn(OAc)2 complex resulting
in the formation of hierarchically ordered spheres of cone-shaped ZnO nanocrystals (Joo et al., 2005).
Li et al. (2006) fabricated titanium oxide nanorods with 3.3-nm diameter and a length of 25 nm using
appropriate amounts of reaction ingredients, such as titanium butoxide, triethylamine, linoleic acid,
and cyclohexane. Reaction temperature, time, and concentration of the reactant were found to show
huge effect on the shape and size of the TiONPs. Preparation of high-quality single crystalline MnO
multipods with homogeneous size and shape, involved decomposition of Mn(oleate)2 in the presence
of oleic acid and n-trioctylamine (Fig. 1.6E) (Zitoun et al., 2005). Tungsten oxide nanorods were gen-
erated by treatment of WCl4 with oleylamine and oleic acid (Fig. 1.6F) (Seo et al., 2005). Solvent-
controlled sol–gel route, involves the reaction between metal halide and alcohols to produce metal
oxide nanostructures. For example, porous SnO2 NPs were prepared by the addition of tin chloride to
benzylalcohol under stirring condition, which was immediately dispersed in THF solution, producing
FIGURE 1.6
TEM images of (A) 8-nm sized spherical CoFe2O4 NPs and (B) cube-like CoFe2O4 NPs. TEM images of (C) cube-
like and (D) polyhedron-shaped MnFe2O4NPs. (E) TEM image of MnO multipods (inset, hexapod). (F) TEM image
of Tungsten oxide nanorods.
Part (A–B): Reproduced from Song, Q., Zhang, Z.J., 2004. Shape control and associated magnetic properties of spinel cobalt ferrite
nanocrystals. J. Am. Chem. Soc. 126, 6164–6168. Copyright 2004, American Chemical Society. Part (C–D): Reprinted from Zeng,
H., Rice, P.M., Wang, S.X., Sun, S.H., 2004. Shape-controlled synthesis and shape-induced texture of MnFe2O4 nanoparticles.
J. Am. Chem. Soc. 126, 11458–11459. Copyright 2004, American Chemical Society. Part (E): Reproduced from Zitoun, D.,
Pinna, N., Frolet, N., Belin, C., 2005. Single crystal manganese oxide multipods by oriented attachment. J. Am. Chem. Soc. 127,
15034–15035. Copyright 2005, American Chemical Society. Part (F): Reproduced from Seo, J.-W., Jun, Y.-W., Ko, S.J., Cheon, J.,
2005. In situ one-pot synthesis of 1-dimensional transition metal oxide nanocrystals. J. Phys. Chem. B. 109, 5389–5391. Copyright
2005, American Chemical Society.
sol. The subsequent addition of block polymer to sol allowed mesoporous nanostructure for SnO2 by
the elimination of solvent molecule (Ba et al., 2005).
2.3 HYDROTHERMAL AND SOLVOTHERMAL METHOD

Hydrothermal or solvothermal method is one of the most common and effective synthetic routes to
fabricate the nanomaterial with a variety of morphologies. In this method, the reactants are placed into
an autoclave filled with water or organic compound to carry out the reaction under high temperature
and pressure conditions. If the nonaqueous solvents are utilized as reaction medium, it is termed as
solvothermal method; whereas, in case the preparation is carried out in the presence of water, it is
known as hydrothermal process (Cushing et al., 2004; Wu et al., 2002). Different kinds of autoclaves
and their functions are deeply discussed in the literature (Hakuta et al., 2005; Rabenau, 1985). Gener-
ally, Teflon-lined autoclaves are capable of working at high temperature and pressure. In addition, it
sustains alkaline media and exhibits a strong resistance to hydrofluoric acid when compared to glass
and quartz autoclaves. Therefore, Teflon-lined autoclave is chosen as an ideal container to perform the
reaction under desired conditions. Precise control in hydrothermal process is the key factor that enables
the synthesis of various nanostructured inorganic materials (Shi et al., 2013). This method can facilitate
and accelerate the reaction among the reactants, promote hydrolysis, followed by crystal growth result-
ing in self-assembly of nanomaterials in the solution. Moreover, the properties, morphology, size, and
structure of nanomaterials can be tailored easily by varying the different reaction parameters, such as
reaction time, temperature, reaction medium, pressure, pH, and concentration of the reactants and filled
volume of autoclave. This method can be suitable for the preparation of nanomaterials with a variety of
shapes as compared to other methodologies.
Yan et al. (2008) have fabricated ceria nanooctahedrons and nanorods without assistance of surfactant
or template via simple and facile hydrothermal approach. High quality of ceria nanorods with 20-nm
width and few hundred nanometer length were produced by treating Ce(NO3)2.6H2O with Na3PO4.6H2O
in water medium (Fig. 1.7A). The change in the morphology of the ceria NPs was achieved by tuning the
hydrothermal reaction time. It was demonstrated that, Na3PO4 played a crucial role in the formation of
FIGURE 1.7 TEM image of (A) CeO2 nanorod. (B) TEM image of CeO2 hollow sphere.
Part (A): Reprinted with permission from Yan, L., Yu, R., Chen, J., Xing, X., 2008. Template-free hydrothermal synthesis of CeO2
nanooctahedrons and nanorods: investigation of the morphology evolution. Cryst. Growth Des. 8, 1474–1477. Copyright 2008,
American Chemical Society. Part (B): Reprinted with permission from Yang, Z., Han, D., Ma, D., Liang, H., Liu, L., Yang, Y., 2010.
Fabrication of monodisperse CeO2 hollow spheres assembled by nanooctahedra, Cryst. Growth Des., 10, 291–295. Copyright 2010,
American Chemical Society.
ceria nanostructures. A simple hydrothermal method has been developed to prepare ceria nanocubes and
octahedra by employing Ce(NO3)2.6H2O, Na3PO4.6H2O, and NaOH as precursors. The obtained nano-
structured ceria was effectively studied for CO oxidation reaction. Interestingly, after the exposure of these
nanoshapes to CO oxidation at 673 K, they have retained their original shape without losing their indi-
vidual nanoshape, indicating that these nanostructures are thermally stable up to 673 K (Zili et al., 2012).
Yang et al. (2010) have demonstrated that nanooctahedra are the building blocks for the production
of monodisperse ceria hollow spheres that are obtained by mild hydrothermal route (Fig. 1.7B). H2O2
played a significant role in the production of novel hollow sphere nanostructures, whereas polyvinylpyr-
rolidone (PVP) played an important role in promoting the nucleation of nanocrystals during the course
of reaction. The alignment of hollow sphere nanostructure of ceria was explained based on the Ostwald
ripening mechanism. Van et al. (2012) have reported the synthesis of Fe2O3 nanostructure with a variety
of morphologies by using capping agents like sodium carboxymethyl cellulose (CMC) and hydrazine
(N2H4) assisted hydrothermal method (Fig. 1.8). Capping agents can produce different morphologies,
such as spheres and truncated hexagonal pyramid-shaped Fe2O3 nanocrystals. However, without the aid
of capping agent dendrite shape of Fe2O3 nanocrystals were obtained. Therefore, it is believed that cap-
ping agents play a vital role in controlling the morphology of final nanomaterial. Magnetic and optical
properties of nanostructured hematite phase Fe2O3 nanocrystals were extensively studied.
FIGURE 1.8 Morphology of α-Fe2O3 With Various Reactants Under Hydrothermal Conditions at 433 K for 8 h
(A) K3[Fe(CN)6], 0.02 M, in the absence of CMC and N2H4; (B) K3[Fe(CN)6], in the absence of CMC, 3.5 gL−1;
(C) K3[Fe(CN)6], 0.02 M, with the addition of CMC, 3.5 gL−1 and N2H4, 1.5 wt.%; (D) K3[Fe(CN)6], 0.02 M, with
the addition of CMC, 3.5 gL−1, and N2H4, 4.5 wt.%; (E) K3[Fe(CN)6], 0.02 M, with the addition of CMC, 3.5 gL−1,
and N2H4, 6.0 wt.%; (F) K3[Fe(CN)6], 0.02 M, with the addition of CMC, 3.5 gL−1, and N2H4, 8.0 wt.%.
Reprinted with permission from Van, T.-K., Cha, H.G., Nguyen, C.K., Kim, S.-W., Jung, M.-H., Kang, Y.S., 2012. Nanocystals of
hematite with unconventional shape-truncated hexagonal bipyramid and its optical and magnetic properties. Cryst. Growth Des. 12,
862–868. Copyright 2011, American Chemical Society.
2.4 MICROWAVE-ASSISTED METHOD

Generally, solution-based approaches utilize conventional heating, which is the driving force for chemical
reactions. In this process, heat energy is transferred from the source to the solvent and then transferred
to reactants during the course of the reaction. However, conventional heating process inevitably suffers
from various drawbacks, including high thermal gradient effects, slow reaction kinetics, nonconsistent
and undesirable reaction conditions throughout the bulk (Gerbec et al., 2005). Particularly, for large-scale
production of NPs, the aforesaid problematic aspects, such as inhomogeneity, poor crystallization, and
thermal gradient effects may be magnified tremendously resulting in poor nucleation and wide-size distri-
bution (Hu et al., 2008; Hu and Yu, 2008). From this point of view, microwave method is one of the excel-
lent alternative routes to address the previously mentioned issues raised in conventional heating process.
Microwaves are nothing but electromagnetic energy with frequency in the range of 300 MHz to
300 GHz. Generally, interaction of microwaves with materials during the reaction is based on two
important mechanisms: dipole interactions and ionic conduction. However, these two mechanisms can
effectively work, when coupling takes place between components of target compound and oscillat-
ing electric field of microwave. Fig. 1.9 depicts the production of heat energy during the interaction
of microwaves with polar water molecule (Tsuji et al., 2005). In microwave frequency range, water
molecules try to orient with the electric field and the two polar ends try to reorient with respect to the
oscillating electric field, as a result they lose energy in the form of heat by molecular collision and
friction. Other polar molecules, such as alcohols, DMF, ethylene glycol are used as ideal solvents for
microwave-assisted synthesis of metal NPs, due to their high dielectric loss and high reduction ability.
Microwave method received considerable attention as a new, promising, and environmental friendly
method to synthesize the metallic nanostructures as well as metal oxides with a variety of morpholo-
gies. In addition, microwave strategy offers several benefits, such as high efficiency in the utilization
of heat. Moreover, it is clean, cheap, and produces higher yields of desired materials within shorter
reaction times. Fast and uniform heating of reaction mixture throughout the solution are the beneficial
factors. These factors always allow the rapid decomposition of respective metal precursors followed
by the nucleation and subsequent growth to obtain the required nanostructures (Gerbec et al., 2005).
A wide variety of metal NPs and metal oxide NP with control over size and morphology of the NPs to
tailor their properties have been synthesized by adopting the microwave-assisted method.
Mohamed et al. (2010) have explored various morphologies, such as spherical, truncated prisms,
and hexagons for AuNP by using HAuCl4 in HCl as gold precursor via microwave-assisted strategy
FIGURE 1.9 Production of Heat Energy by Microwave Irradiation of Water Molecule

Reprinted with permission from Tsuji, M., Hashimoto, M., Nishizawa, Y., Kubokawa, M., Tsuji, T., 2005. Microwave-assisted
synthesis of metallic nanostructures in solution. Chem. Eur. J. 11, 440–452. Copyright 2005, Wiley-VCH.
FIGURE 1.10
TEM image of (A) AuNPs prepared using pure amine, (B) AuNPs prepared in 70% oleic acid, (C–D) AuNPs formed
using 9 and 36 mM of HAuCl4, respectively.
Reprinted with permission from Mohamed, M.B., AbouZeid, K.M., Abdelsayed, V., Aljarash, A.A., Samy El-Shall, M., 2010. Growth
mechanism of anisotropic gold nanocrystals via microwave synthesis: formation of dioleamide by gold nanocatalysis. ACS Nano 4,
2766–2772. Copyright 2010, American Chemical Society.
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Egli non volle disturbare il loro giuoco leggiadro. Trovandosi presso
un muro diroccato, vi si nascose dietro rapidamente, e aspettò che le
fanciulle fosser passate. Il cane irsuto e nero, che lo aveva visto,
venne a fiutarlo con diffidenza, e, come rassicurato, riprese il suo
cammino, senz’abbajare; egli udì i passi grevi e cadenzati delle tre
bestie batter su i ciottoli della strada vicino a lui e allontanarsi. Le
risa delle fanciulle risonarono in fine più prossime, stridule,
acutissime, strozzate dall’affanno della corsa.
— Sì, sì: lo so, — una diceva, fuggendo: — Tonio è il tuo amoroso!
— Stupida! Stupida! — gridava l’altra che la rincorreva.
— Io lo so. Il mio fratellino m’ha detto d’avervi incontrati soli, sul
tardi, vicino al camposanto....
— Stupida! Non è vero!
— È vero! E m’ha detto che vi siete baciati....
— Non è vero!
— E che avete preso la strada dei monti....
— Stupida! Stupida! Se ti piglio....
Le grida si confusero, s’affievolirono, si spensero presto nel silenzio
del bosco.
Quando fu sicuro di non esser veduto, Aurelio uscì dal nascondiglio,
e riprese la sua via a passo più veloce, quasi volesse sottrarsi al
fascino della scena inaspettata. Le parole audaci di quelle fanciulle,
il suono delle loro voci, i loro scoppii nervosi d’ilarità, quella fuga
ninfale su l’erba fiorente tra i fusti muscosi delle querce, gli avevan
dato un senso d’ebrezza, che non gli era del tutto ignoto e lo
sgomentava. Dentro di lui la scena aveva risvegliato il ricordo
d’un’altra somigliante: la prima improvvisa apparizione di Flavia e di
Luisa su la scalea marmorea, negli estremi chiarori del vespero, e la
fantastica fuga nella pineta. Anche la commozione provata allora
rassomigliava assai a quella da cui si sentiva posseduto in questo
momento: una specie d’alterazione indefinibile, una violenza di cose
soffocate, come un vaneggiamento leggero che non gli permetteva
di distinguer nettamente dentro né intorno a sè. Ma questa volta la
commozione era men chiara, più complessa, più aspra: pareva
avvelenata da alcunchè di sgradevole e quasi di doloroso.
«L’Amore, sempre l’Amore!» egli si ripeteva cercando di dominare la
strana inquietudine dello spirito, mentre camminava a grandi passi
tra le siepi arborescenti della via. E le due visioni l’accompagnavano
ostinate e moleste, come un profumo troppo forte che lo avesse
investito.
Più d’una volta rimase.
Nulla omai si moveva nella selva: saliva il romore delle onde morte
sul greto, simile a un lento respiro affannoso; e qualche fronda alta
stormiva.
Ah, quella solitudine e quel silenzio e quella mitezza di clima e di
paese! Ah, l’implacabile educazione dell’eterna Natura, che
seducendo ordina e impera!
«Io sono infelice!» mormorò d’un tratto il giovine, arrestandosi
attonito, girando gli occhi intorno a sè per le vòlte capricciose del
bosco, dove il sole irrompeva a fasci, a sprazzi, a scintille,
dispensatore di vivido oro su le foglie polite e su i rami vellutati di
muschi e di licheni. La frase gli era misteriosamente sgorgata dalle
viscere profonde, ed egli l’aveva detta senz’averne coscienza, per
un bisogno irresistibile quasi di liberazione. Non l’anima sua l’aveva
suggerita; aveva parlato in lui l’oscuro Genio della Specie; ed era, la
sconsolata frase, una delle innumeri espressioni di lamento delle
creature che si senton sole e sterili e vane, il grido d’angoscia che
l’Avvenire strappa a queste reclamando le sue vittime in pericolo di
non essere. Non diversamente il cervo solitario gitta al silenzio della
foresta il suo triste bramito; non diversamente dall’eccelse vette degli
alberi l’usignuolo, alato poeta della notte, piange e chiama la
compagna lontana e sconosciuta.
Aurelio alzò lentamente le spalle, parve riflettere un poco; poi ripetè
una seconda volta, con tutt’altro accento: «Io sono infelice!»
Sogghignò, per irridere a sè medesimo, e riprese al passo concitato
di prima il suo cammino.
Il sentiere, dopo essere alquanto disceso, usciva alfine dalla
boscaglia e costeggiava la spiaggia del lago, a pena protetto da una
siepe di mori prugnoli che i fanciulli avevan qua e là abbattuta. Il sole
lo inondava tutto di luce, un bel sole estivo non ancora alto, non
ancora cocente, sospeso in un cielo opalino, d’una singolare purità.
Una calma estatica teneva il lago; avevan le acque tal lucidezza che
ripetevan con perfetta similitudine qualunque imagine. Le montagne
della riva di Piemonte, popolate di villaggi, s’ergevan nette, gaje,
luminose, come spiccando da un tersissimo specchio.
Uscendo dall’ombra a quella luce suprema, parve al giovine di
sottrarsi a un malefizio e di riprendere d’un tratto la sua personalità.
Il turbamento s’acquetò; il suo cuore riprese a pulsare con la
regolarità consueta; le torbide visioni, che lo avevano occupato, a
poco a poco si dissiparono; ed egli potè novamente impadronirsi del
governo del suo pensiero. Senza indugio, per natural reazione dello
spirito violentato, egli sentì il bisogno di formular da capo il suo
grande principio di condotta, d’enunciare a sè stesso il programma
della sua vita com’egli voleva che fosse, d’affermare con una sintesi
stringente la solidità del suo piano e la forza della sua volontà.
«La vita è breve», egli pensava; «occorre affrettarsi. Occorre
sviluppare la propria individualità in tutta la sua potenza; allargarla
fin dove le resistenze esterne lo concedono; giungere possibilmente
fino al punto lontano che gli occhi del pensiero vedono e segnano
come una mèta. Ecco dunque il dovere: non distoglier mai lo
sguardo da quel punto; non deviare mai dal diretto cammino che
conduce a quel punto.» — Poichè il Destino non aveva voluto ch’ei
possedesse terre, servi e cavalli, doveva per altra più ardua via (ed
Esso glie ne aveva fornito i mezzi e le attitudini), raggiungere un alto
fine vitale. Gli uomini della sua stirpe, anche nei tempi meno propizii,
non erano stati a nessuno secondi: l’avolo suo Gian Franco,
nell’amor della patria; il padre Alessandro, nello splendore del fasto
e dell’eleganza. E lo sventurato esule, morto nelle prigioni dello
Spielberg, sognando in una estrema visione profetica l’Italia liberata,
doveva nel mondo delle ombre tendere pietoso la mano al figliuolo
demente che, negli anni torpidi della pace, aveva cercato di salvare il
lustro del Nome, sacrificandogli la fortuna e la salute. Egli veniva
terzo: egli, povero e oscuro, sentiva pur sempre nel sangue lo stesso
sfrenato orgoglio, che aveva già trascinato in turbini diversi le anime
de’ suoi maggiori. Compire e coronare l’opera iniziata dall’avolo,
ecco il suo grande disegno; ed egli, per affrettare l’evento
favorevole, sognava a sua volta, per la patria ormai risorta e già
minacciata da ruina, un dominio d’uomini nobili e possenti, che ne
rialzassero e assicurassero le sorti maravigliose, mostrando al
mondo l’indistruttibile preminenza del più puro sangue latino. «Un
popolo fedele, guidato da un’aristocrazia degna, attiva e sapiente»,
egli pensava, «ha nell’età nostra, tra popoli inquieti retti dal
malgoverno plebeo, tutte le probabilità di trionfare e d’imporsi.»
E Aurelio Imberido si sentiva pronto e capace di mettersi alla testa
d’un’agitazione schiettamente aristocratica nel grigio e turbolento
diluvio delle odierne democrazie. Egli, libero da ogni giogo, forte
d’un’antica eredità d’ambizioni, sorretto da una vasta dottrina
positiva, avrebbe trovato, nella lotta viva contro i preconcetti politici e
morali del tempo, il mezzo più sicuro e più nobile per dare alla sua
esistenza un particolare significato e uno scopo superiore; per
estendere la sua personalità oltre i limiti ristretti e oscuri che
s’impongono ai più; per divenire un uomo, nel senso più alto della
parola, e tentare anche l’erta della Grandezza. «Combattere per
un’idea, o, sia pure, per un sogno,» diceva l’Imberido: «ecco l’opera
che sola affranca dall’umiltà delle nostre origini, e fa men grave la
coscienza della nostra vita precaria.» Ma, perché potesse egli
attuare il suo programma, era necessario che ad esso consacrasse
intera la propria attività, era necessario che facesse a sua volta una
rinunzia suprema: non certo quella vile dell’individualità e d’ogni
sano impulso agonistico, che le presenti ambigue tendenze spirituali
tristamente sembrano esaltare; ma bensì quell’altera rinunzia d’ogni
sentimento volgare e d’ogni timida fede e d’ogni morbosa pietà, che
inizia l’uomo all’esercizio delle più feconde virtù e lo dirige sicuro alla
prova delle imprese più memorabili.
Così il giovine, meditando sotto il sole benefico, si tracciava
novamente la prediletta linea di condotta, e ritrovava a poco a poco
la sua volontà adamantina e insieme con questa il geloso tesoro
delle sue speranze di gloria. L’opera futura, ch’egli avrebbe dovuto
compire, gli si veniva per tal modo disegnando e precisando dentro
al pensiero nelle sue diverse possibili estrinsecazioni, — opera di
franca propaganda per mezzo del libro, del giornale, della parola,
anche, se fosse occorso, dell’azione diretta. E le due formule
rigorose su cui poggiava l’edificio della sua concezione
riscintillavano d’avanti a lui, come fossero incise a lettere di fuoco
dovunque il suo sguardo cadeva. «L’umanità resta e progredisce,
non ostante ogni scempio più doloroso de’ suoi individui.» E l’altra:
«L’unico ideale degno d’un uomo intelligente è l’aspirazione a
un’umanità superiore, a un’evoluzione della Specie spinta più che
sia dato verso il cielo. Fermarsi a rendere felici quelli che esistono
non è e non può essere che un ingenuo e vano desiderio
sentimentale.»
Un improvviso entusiasmo l’assalì. Dov’erano omai tutti gli
sbigottimenti e le ansie e le fosche imagini che lo avevano prima
oscurato? Dov’erano gli obliqui desiderii e i disgusti e le insidiose
memorie? Egli non si ricordava più di nulla. Il suo spirito erasi
liberato dai fantasmi, aveva disperso le nebbie che l’attorniavano.
Pareva che un altro principio di vita fosse entrato in lui; pareva che
qualcuno fosse uscito da lui, segretamente, e avesse portato seco il
triste fardello dei dubbii, degli scoramenti, delle debolezze. Egli
riacquistava la fiducia in sè stesso.
A capo alto e raggiante nel viso, Aurelio rientrò in Cerro. Sotto l’arco
caliginoso, che sta in guisa di porta all’inizio del villaggio, trovò
Camilla, frettolosa, tutta rossa e con gli occhi gonfii, la quale gli
venne in contro singhiozzando, coprendosi la faccia col fazzoletto.
— Che c’è di nuovo? — egli chiese stupito.
— La signora.... La signora.... — balbettò a stento la ragazza, e non
potè continuare, interrotta come fu da uno scoppio di pianto.
— La signora?... Ebbene?... Che è avvenuto?...
Aurelio cominciava a inquietarsi. Sempre in timore per la salute della
nonna, egli supponeva già ch’ella avesse avuto un attacco più atroce
del suo male; e un leggero tremito aveva per il corpo e nella voce,
mentre interrogava la cameriera che muta e a viso coperto gli
singhiozzava d’innanzi.
Poi che questa non accennava ancora a rispondere, egli richiese più
vivamente, quasi con ira:
— Ebbene?... Che è avvenuto?.... Parla in nome di Dio!
— Io non ho colpa.... Io non ho fatto nulla.... Pretendeva che avessi
percosso il bambino del guardiano, e non era vero.... Non era vero,
glie lo giuro, signor Aurelio! Il bambino è caduto per caso.... Io non
l’ho visto cadere.... E la signora m’ha licenziata in malo modo....
— Ah, è per questo che piangi? — fece Aurelio, senza lasciarla
continuare, dopo aver tratto un gran respiro.
Ella affermò a pena, col capo.
— Sempre la stessa storia! — mormorò il giovine, stringendosi nelle
spalle. Poi si rivolse ancora a lei: — E dove te ne andavi or ora con
tanta fretta?
— Andavo a Laveno.
— A Laveno? E per che fare?
— Per cercarmi un posto....
— Così sùbito?!.. Via, non far sciocchezze, Camilla! Adesso torna a
casa: avrai tempo più tardi per pensare ai fatti tuoi.
E s’incamminò, sorridendo con un poco d’amarezza, verso il
palazzo.
Presso la porta il guardiano, un vecchio robusto e sanguigno dalla
folta capigliatura grigiastra e dagli occhi di volpe, era seduto sopra
una delle lastre di granito infisse nella parete, intento ad affilare il
falcetto, e fischiava allegramente.
— Olà, Giuseppe! — gli gridò Aurelio, salendo i gradi del rialto. — È
vero che il vostro piccino s’è fatto male?
— Oh, signor conte, una cosa da nulla! Il monellaccio è ruzzolato
mentre correva per il cortile.... Che vuole? Non può stare un
momento quieto! Lo si sorveglia tutto il santo giorno; ma non serve.
Egli sa trovar sempre il momento buono per farne qualcuna delle
sue!...
— Voi, Giuseppe, eravate presente quando è caduto?
— Sicuro! Era anch’io in cortile con lui.... Fortuna volle che questa
volta non si sia fatto quel male che avrebbe potuto! Una leggera
ammaccatura su la testa.... cosa da nulla, le dico, signor conte.
— Tanto meglio! — concluse il giovine e, salutato il guardiano, entrò
risoluto in casa.
La sala da pranzo, con le persiane chiuse, era avvolta in una
mezz’ombra glauca, appena rotta qua e là da alcune lamine sottili di
sole, a traverso le quali i pulviscoli dell’aria si vedevano
incessantemente roteare. In un angolo, presso l’ultima finestra,
donna Marta era seduta, come d’abitudine, sul suo seggiolone
d’avanti al tavolino da lavoro tutto ingombro di fili, di gomitoli, di
ritagli, di minuti arnesi muliebri.
Il giovine s’avvicinò lentamente a lei. Ella, il capo arrovesciato su la
spalliera, le mani penzolanti dai bracciuoli, giaceva abbandonata e
inerte, come affranta da un immane sforzo; e ansimava. I suoi
lineamenti alterati dalla collera e dal dolore avevano l’immobilità, la
rigidezza, il pallor d’un cadavere: e gli occhi, quei grandi occhi
giovenili, saettavano in giro sguardi sinistri, all’ombra delle
sopracciglia irte e aggrottate.
— Mamma, che hai? Sei così pallida... — mormorò il giovane con la
voce dolce, quando le fu presso.
— Che ho? — ella proruppe. — Sono stanca, capisci? Non ne posso
più! Finirò per commettere una follia, se si continua così. Intanto
t’avverto che ho messo alla porta quella tua serva esemplare, ed era
tempo, per Dio!
— Tu l’hai messa alla porta...?
— E come! L’avessi sentita...! Che lingua! M’ha risposto in un tal
tono che per poco non m’ha spinta all’estremo di cacciarla a
ceffoni!.. E tutta la colpa è tua, perchè sei stato tu a non volere ch’io
me ne liberassi a Milano, prima di partire per la campagna.
— Ma infine, mamma: che è successo? Che cosa ha fatto costei?
— Ah, che cosa ha fatto?... Ha percosso a sangue il povero piccino
del guardiano...
— Non è vero, — asserì Aurelio con la stessa voce dolce, fissando
l’avola negli occhi.
Ella ebbe un sussulto repentino. Quasi per un prodigio, parve che il
suo corpo esanime ritornasse d’un tratto alla vita. Si levò ritta a
sedere e, affrontando violentemente lo sguardo di lui:
— Come, non è vero? — gli gridò con tutta la sua forza. — Oseresti
anche smentirmi per difendere quella sguajata?!
— Mamma, via, non arrabbiarti così, — Aurelio s’affrettò a
soggiungere in tono anche più blando, persuasivo: — non è proprio il
caso. Parliamo un poco con calma. Si tratta d’assodare un fatto; non
di discutere. Ora tu affermi, che Camilla ha battuto quel bambino. Lo
affermi forse perchè l’hai sentito piangere. Ebbene, credimi,
t’inganni: il guardiano stesso, ch’era presente, m’ha assicurato che
suo figlio è caduto mentre correva nel cortile. E nota che Camilla non
l’ha visto neanche cadere!
Donna Marta ascoltò queste parole, contenendo a stento l’ira che le
bolliva dentro. In verità, ella era così certa della sua supposizione
che ogni più valida prova negativa non sarebbe riuscita a insinuarle
la punta d’un dubbio. Abituata sin dai tempi di suo marito a un
imperio incontrastato su tutti quanti l’avvicinavano, resa anche più
irritabile dai nervi impoveriti di sangue, ella non poteva ormai
tollerare una contradizione, sotto qualunque forma le venisse rivolta;
e s’adombrava, e inviperiva, e perdeva, nello sdegno per l’offesa,
ogni senso d’equità e di misura. Quando poi l’opposizione contro di
lei partiva proprio da suo nipote, che ella considerava come un
vassallo per tema di dover sopportare come un padrone, la rivolta
del suo spirito indisciplinato era così folle e veemente che l’ultimo
bagliore di ragione andava nel tumulto miseramente perduto.
— Tu dunque l’hai vista? — ella disse, mordendosi le labbra. — Tu
hai parlato con lei?...
— Sì, mamma. Ho parlato anche con lei.
— Capisco. Hai voluto ricever l’imbeccata!... E, come sempre, hai
preferito credere a una serva che non a me...
— Oh, Dio, mamma... — esclamò Aurelio, che cominciava a
impazientirsi. — Se debbo parlarti schietto, ti dirò che non ho
creduto né all’una né all’altra. Si trattava di sapere se una cosa fosse
avvenuta o no. Capirai bene che non era il caso di far distinzioni di
grado o d’autorità o di merito tra le persone che contendevano. Ho
ricorso alle testimonianze e mi son persuaso che non era avvenuta.
Vuoi forse che ti affermi ora il contrario, per compiacerti?
Donna Marta ebbe un sogghigno, e disse con sarcasmo feroce,
sillabando quasi le parole:
— Peccato davvero che tu non abbia fatto l’avvocato.... ma non di
queste cause, s’intende!... All’enfasi che metti nel difendere la tua
protetta, si direbbe...
— Che cosa? — interruppe con forza Aurelio, guardandola
fissamente.
— Oh! Oh! Credi forse di farmi paura con quegli occhi?
— Ti prego di spiegarti, mamma. Che hai voluto dire?
Ella non rispose sùbito; alzò sdegnosamente le spalle, mentre il
sogghigno di prima le ritornava anche più mordente su le labbra. Il
giovine fece un passo avanti, e ridomandò quasi per violenza:
— Via, rispondi, mamma. Lo esigo! Che hai voluto dire?
— Ebbene: ho voluto dire che al tono, con cui tu ora mi parli, si
crederebbe che costei sia la tua amante!
Aurelio illividì. Benchè alla prima reticenza avesse già imaginato il
pensiero dell’avola, l’enunciazione aperta e brutale di questo lo colpì
atrocemente quasi un colpo di maglio nel mezzo del petto. Insulto
più grave non gli si sarebbe, no, potuto scagliare; egli, il puro, il
casto, l’insensibile era d’un tratto accusato d’amoreggiare
trivialmente con la propria cameriera. Il giovine non ebbe tempo per
riflettere; sentì il soffio ingiurioso passar su la fronte, e la vista gli si
ottenebrò.
— Come sei volgare! — disse sordamente, stringendo i pugni e
atteggiando il volto a un’espressione di profondo dispregio. Poi, per
non aggiungere altro, con un moto subitaneo volse le spalle a donna
Maria, e uscì correndo dalla stanza.
Udì dietro di sè un urlo soffocato, quindi un fiotto impetuoso di parole
aspre, terribili: «Infame! Infame! Egli osa anche insultarmi! A questo
si doveva giungere... Io vado via sùbito... Caschi il mondo, non mi
vedrà più...!» Attraversò in fretta il cortile, ascese rapidamente le
scale, entrò nella propria camera e vi si rinchiuse a due mandate di
chiave, come se la vecchia avesse potuto inseguirlo con le sue
minacce.
Poi che fu solo, sottratto alla presenza impositrice dell’avola, nel
luogo dedicato agli studii, la sua eccitazione, invece di scemare,
aumentò. Tutti i pensieri, che già durante la scena eran passati per
la sua mente, gli tornarono alla memoria; tutte le parole che per
prudenza o per rispetto aveva dovuto reprimere, tutte
incominciarono di nuovo a fluirgli alle labbra con insolita irruenza. Ed
egli, con una specie di amaro sorriso interiore, si piacque di
ricostruire il diverbio, aggiungendo quello che avrebbe voluto dire, i
ragionamenti e le objezioni e le proteste sdegnose, senza più
blandizie, senza più eufemismi, senza rispetto o prudenza alcuna.
Così rievocò l’intera scena, accompagnando le parole con una
mimica vivace, percorrendo la camera per il lungo e per il largo a
grandi passi. Quando però giunse all’ingiuria, che l’avola gli aveva
lanciata, ristette perplesso, come se ne avesse afferrato per la prima
volta il senso preciso; e la risposta violenta, che poc’anzi aveva
taciuta, non venne.
Un nuovo ordine di pensieri, più calmo ma non meno ingrato, si
svolse allora nel suo cervello: perchè sua nonna lo aveva tacciato di
essere l’amante di Camilla? Come, come aveva potuto imaginare
una simile assurdità? Non certo perchè egli, col suo contegno e
anche con le sue difese, le avesse mai dato un appiglio per
sospettarlo. Non certo perchè la possibilità di una siffatta tresca
fosse una sola volta balenata nella mente di lei che conosceva
troppo bene le sue idee in proposito e il suo rigido orgoglio e le sue
«abitudini d’orso», come celiando si compiaceva di chiamarle.
Doveva esser dunque un’altra intenzione nella calunnia sanguinosa.
Or quale poteva essere questa intenzione?... Era chiaro: ella lo
aveva voluto affliggere, offendere, umiliare, anche a prezzo d’una
bugìa. Inviperita contro il nipote, perchè era sorto in difesa altrui a
ribattere le sue accuse, ella aveva opportunamente usato di un
argomento ad hominem per liberarsi con un sol colpo del molesto
contradittore. Il fatto in sè non era grave, ma pur troppo non era
nuovo né raro: quasi ogni giorno, o per un motivo o per un altro, ella
trovava il modo di rivolgergli frasi consimili, in cui sempre l’identico
sprezzo insisteva, come una nota tenuta a fondamento d’accordi
diversi. Aurelio ne rammentava ora una serie innumerevole; anche
Aurelio rammentava che quelle frasi tendevan tutte a colpirlo dove
più delicata era la sua sensibilità: ne’ suoi ideali, nelle sue
predilezioni, nelle sue stesse virtù, nelle sue stesse rinunzie. Si
sarebbe detto ch’ella traesse dalle mortificazioni a lui inflitte, una
specie di strazio divinamente piacevole; o, meglio, che una volontà
superiore, in mano della quale ella non era se non lo strumento
doloroso, glie le suggerisse per uno scopo oscuro e fatale. Ma, quale
scopo?
«Ah, le donne! Le donne!» esclamò il giovine improvvisamente,
tratto come di consueto a generalizzare le sue considerazioni.
«Madri, sorelle, mogli, amanti, esse non si smentiscono mai, mai!
Che cosa sono per esse i nostri sogni, le nostre speranze, i nostri
sacrifici, la nostra coscienza, in somma tutta l’anima nostra? Nulla,
meno che nulla. Esse non comprendono che gli uomini comuni,
mediocri, normali, quegli uomini che lavorano indefessamente per
vivere, generano figliuoli, li allevano, e lasciano a questi il posto,
quando il loro malinconico cammino è giunto alla mèta. Gli altri tutti,
sono per le donne altrettanti mostri paurosi, che bisogna distruggere,
redimere o avvilire; ed esse li distruggono, li redimono o li
avviliscono, perchè tale è il loro dovere. Non hanno esse forse, nel
misterioso equilibrio della Natura, la missione di conservare le
tradizioni della razza? di mantenerla strettamente legata alle origini?
d’impedire che i caratterismi del tipo umano si perdano o si
trasformino? Non sono esse le sacre custodi della essenza prima di
nostra Specie? Vigilare affinchè questa non traligni, non strisci o non
voli: ecco il segreto potere della anima loro, ecco la base di tutta la
loro psicologia.» Egli soggiunse: «Liberi, liberi dunque bisogna
essere dalla tirannia di queste vilificatrici d’ogni personalità, di
queste nemiche implacabili d’ogni tendenza elevata e d’ogni slancio
sublime! Liberi bisogna essere, per divenire qualcuno e poter fare
qualche cosa — prima della morte!»
Egli si mosse, di nuovo; andò alla finestra, l’aperse, lasciò
ch’entrasse la trionfante luce del giorno.
Il giardino splendeva nel sole, con le sue bianche scalee, con le sue
statue bianche, come intagliate nel verde cupo della pineta. Il
poggio, sopra, aveva un chiarore metallico, come fosse tutto
cosperso d’una polvere d’oro.
Quella visione, dopo lo sfogo benefico, gli ricondusse lo spirito alta
calma, gli ridiede la coscienza piena di sè stesso. Valeva forse la
pena di crucciarsi per quelle futili questioni? Non aveva egli altro di
meglio e di più serio da pensare o da fare? Egli richiuse le persiane,
e venne a sedersi d’avanti alla scrivania. Molti fogli vi erano sparsi in
disordine, quasi tutti vergati, per intero o in parte, a caratteri grandi,
decisi, piuttosto oblunghi, un po’ inclinati da sinistra verso destra: le
cancellature frequenti e risolute mettevano sul nitor della carta vaste
ombre oscure. Tra quella moltitudine di fogli, dov’egli era solito
d’abbozzare i suoi lavori o di fermare le idee utili, emergevano qua e
là alcuni grossi libri aperti e le pagine fitte di qualche rivista nostrale
o forestiera. Sul piano del palchetto eran poi raccolti i frammenti
delle sue tre opere in corso: un enorme fascio di carte, chiuso in una
custodia di pergamena su cui si leggeva il titolo in inchiostro rosso:
L’avvenire delle società umane; un altro fascio meno voluminoso,
rattenuto da un semplice foglio piegato a mo’ di busta, sul quale era
scritto: La Morale dell’Evoluzionismo, critiche all’opera di Erberto
Spencer e conclusioni; e infine un terzo fascicolo, alquanto esiguo,
con la dizione: Socialismo e Cristianesimo.
Aurelio prese quest’ultimo dal palchetto della scrivania, e se lo pose
dinnanzi. Era uno studio sintetico e impressionante su le comuni
aspirazioni delle nuove idee sociali e della vecchia morale cristiana,
il quale tendeva a dimostrare come la fusione delle due teorie non
potesse esser lontana, e voleva mettere in guardia gli studiosi e i
pensatori contro le fatue lusinghe e i gravi conseguenti pericoli che
un siffatto connubio avrebbe portati con sè. L’Imberido s’era accinto
a scriverlo nell’ultimo mese passato a Milano, avendo intenzione di
pubblicarlo in diverse riprese su la sua Rivista; poi, siccome dal suo
arrivo a Cerro s’era immerso totalmente nella grande opera
L’avvenire delle società umane, lo aveva abbandonato, e, sebbene
fosse già presso a concludere, non s’era più dato pensiero per
ultimarlo. In quel momento, forse perchè ricordava le sollecitazioni
che lo Zaldini gli aveva fatte la mattina precedente, o perchè non si
sentiva di riprendere un lavoro troppo intenso e faticoso, Aurelio fu
spinto involontariamente a continuare il breve studio interrotto.
Egli sfogliò il fascicolo lentamente, scorrendo con lo sguardo su le
pagine, già fatte giallognole dal tempo, quasi volesse risvegliare la
memoria precisa di quanto aveva scritto. Come giunse alla
interruzione, indugiò alquanto per rileggere attentamente gli ultimi
periodi; e li rilesse a voce alta, ascoltandosi.
«E questi saranno gli estremi e i più fervidi adoratori di Cristo, non
forse molto dissimili da quelli che primi lo adorarono. Così le
Scritture saranno compite, e così la parabola terminerà com’era
incominciata.
«L’attacco sarà certo formidabile. Il fanatismo dà un coraggio che le
persone calme non hanno e non possono avere. Se dalla parte dei
Ribelli non ci sarà un soverchio equilibrio morale, ci sarà per
compenso il Genio nelle sue più acute manifestazioni. Uomini
grandi, uomini terribili sorgeranno in questa sollevazione disperata,
da questo ibrido connubio di misticismo e d’animalità: spiriti
tumultuosi, dotati d’un potere magnetico irresistibile, dominatori e
affascinatori delle masse, i quali troveranno vie insospettate per
trascinarvi perdutamente i cervelli e i cuori. E a questi s’uniranno con
entusiasmo tutti gli spostati dalle assurde e magiche idealità, e le
anime guaste dall’odio o dalla cupidigia, e i perpetui adolescenti, e i
perversi e i degenerati e i pazzi!
«Con queste bandiere, con queste reclute, con questi capitani, la
parte inferiore della Umanità insorgerà contro la superiore, tenterà lo
sforzo supremo per arrestare il fenomeno fatale della civiltà e
dell’evoluzione. Chi trionferà nel gigantesco cimento?»
Così il manoscritto bruscamente s’interrompeva.
Aurelio Imberido, dopo esser rimasto alcuni minuti pensieroso,
fissando lo spazio d’avanti a sè, prese con un atto improvviso la
penna, e continuò.
IV.
L’Albero del Bene e del Male.
Il dì successivo, Aurelio, avendo concluso l’articolo, discese in

giardino, e s’inoltrò nella pineta per cercare ombra e riposo.
Era un pomeriggio sereno, d’una serenità incandescente, caldo ma
temperato da qualche soffio d’aria. Per tutto quel giorno egli sapeva
che non avrebbe ripreso la penna, come sempre quando terminava
un lavoro o una determinata parte di lavoro; e, libero e sodisfatto di
sè, seguiva distrattamente i sentieri tortuosi sotto l’ampio padiglione
verde, guardandosi d’intorno, aspirando la diffusa fragranza delle
resine riscaldate dal sole, ascoltando rapito il fruscìo alterno del
vento tra le fronde o il susurro d’un ruscello nascosto.
Nella pineta era una luce pacata e raccolta, come in un tempio. Per il
denso intrico, che formavano i rami, premendosi, intrecciandosi,
confondendosi nella loro antica e tenace espansione, ogni lembo di
cielo veniva occultato. Una parete opaca si distendeva a similitudine
d’un velario sopra la terra; e solo, a traverso gli interstizii dei tronchi,
un chiarore aureo o rancio o verde, a fasci nettamente visibili,
s’insinuava, quel chiarore innaturale che lascian cadere nell’ombra le
finestre a vetri variopinti. Un sentimento mistico e solenne emanava
dal luogo, come da un santuario a pena illuminato, saturo di vapori
d’incenso.
Tra quei profumi, in quella pace, il giovine camminava a rilento,
senza un pensiero, abbandonandosi al fascino che gli veniva dalle
apparenze esteriori. Tutto assorto nella ottusa contemplazione, egli
si perdeva ad accompagnar con lo sguardo il volo d’un insetto
nell’aria o il viluppo appassionato dell’edera intorno a un fusto
impassibile: s’arrestava ogni tratto attonito per ammirare qualche
cespo di ciclamini o di violette sbucante come per prodigio dalle
cavità del tufo. Lo spettacolo d’un ragno in atto d’avvolgere la preda
nel suo sudario mortale lo tenne fermo lungo tempo, sospeso,
attratto, commosso quasi fosse al cospetto d’una rappresentazione
tragica. E il suo spirito si mantenne così semplice durante
l’osservazione del minuscolo conflitto per la Vita, ch’egli non sentì
altro impulso se non quello d’intervenire a favore del debole,
predestinato al sacrificio, contro il forte che pure esercitava il suo
pieno diritto all’esistenza.
D’improvviso una voce acuta risonò dietro le sue spalle.
— Buon giorno!
Egli si volse bruscamente. La bionda Luisa, che discendeva in corsa
sul medesimo sentiere con un gran mazzo di fiori in pugno, lo aveva
raggiunto senza ch’egli si fosse accorto della sua presenza.
— Buon giorno, signorina! — egli rispose, arrossendo un poco.
Ella s’era fermata vicino a lui, e lo fissava con quegli occhi
chiarissimi e ardenti, in cui la luce pareva concentrarsi come nel
fuoco d’una lente.
— Bella giornata, oggi, — ella disse sùbito, poi che Aurelio immobile
d’avanti a lei non accennava a continuare.
— Bella, davvero.
— E che delizioso rifugio è questa pineta! Io ci passerei la vita....
L’estate qui dentro è dolce come un autunno.
— Se non erro, ella è stata a raccolta, signorina....?
— Sì, di fiori, — interruppe Luisa con vivacità; — di fiori selvaggi,
come piacciono a me. Ma adesso bisogna che torni a casa e in
fretta, perchè l’ora del pianoforte è già scoccata e la zia è
severissima....
Sorrise lievemente, socchiudendo a pena le palpebre ma senza
distogliere gli sguardi dagli occhi del giovine. Poi, chinando il capo in
segno di saluto, con un atto assai leggiadro:
— Con permesso, — soggiunse; e riprese in corsa la sua strada.
Prima d’oltrepassare il gomito del sentiere, si volse ancora verso di
lui per gridargli:
— Se s’inoltra appena un po’ nella pineta, trova Flavia.... A rivederla!
E, così dicendo, la giovinetta scomparve.
Aurelio, che non aveva avuto il tempo di rispondere, era rimasto
fermo e attonito, con gli occhi inerti, alla svolta della viottola.
Quell’incontro gli era stato insolitamente gradito. Sorpreso dalla
comparsa subitanea della fanciulla, egli aveva prodigato a questa la
stessa benevolenza curiosa e quasi tenera, che gli abondava in quel
momento nello spirito e aveva espansa su le mute manifestazioni del
bosco. Le poche parole scambiate non avevan potuto certo
risvegliare in lui un’idea o un sentimento nuovo, diverso da quello
ond’era invaso. Avevan parlato della beltà del giorno, della pineta
ospitale, di fiori, delle cose miti e piacevoli, al cui incanto l’anima sua
dolcemente si concedeva. E la frase, che Luisa gli aveva gittata da
lontano, era giunta fino a lui senza che potesse afferrarne bene il
significato. Egli a pena l’intuì, ripensandoci. Ebbe un attimo di
perplessità: doveva seguitare e farsi incontro a Flavia? Doveva
retrocedere ed evitarla? Inconsciamente il suo pensiero rifuggì da
ogni indagine sul senso esatto della frase, si ribellò a qualunque
sforzo a fin di prendere una risoluzione. Egli proseguì per inerzia la
sua passeggiata contemplativa nel bosco, dove il silenzio era tornato
quasi più grave e più vasto che prima non fosse.
Passò la grotta artificiale, irta di stalattiti superbe, onde alcune gocce
perennemente cadevano su la terra fradicia; arrivò al crocicchio dei
due sentieri che tagliavan la pineta nelle due direzioni principali;
s’arrestò un poco d’avanti all’erma che dominava il luogo, un gran
busto nudo di donna su cui l’assidua carezza del tempo era passata,
corrodendo e levigando il sembiante, ma lasciando rigidi e intatti i
seni, come gonfii d’un desiderio immortale. Procedette poi a passo
più spedito verso l’altura, quasi lo chiamasse, da quell’ombra, il
vivido raggio di sole che illuminava a traverso un pertugio la sommità
del sentiere.
Flavia era là, sola nella luce. Saliva lentamente l’erta d’un prato
contiguo alla pineta. Al di là l’orto incominciava, tutto lussureggiante
di piante pallide, da cui si vedevan pendere i frutti ancora acerbi o
alcuni grappoli vermigli di ciliege. Sopra l’orto, il poggio coltivato a
vigneti s’elevava in una succession di scaglioni petrosi, intorno ai
quali le viti avevan disegnato come un greve merletto verde.
Ella saliva quella distesa inclinata su cui l’erba cresceva foltissima e
intonsa con una maravigliosa chioma di fioretti d’oro. La sua
persona, un po’ curva in avanti, appariva dal ginocchio in su tra la
verzura profonda, lasciando dietro di sè un mobile solco di fili
prosternati. A volte rimaneva per cogliere con la mano un fiore
sopreminente; a volte s’inchinava alquanto verso il suolo, e scrutava
assorta i misteri di quella selva minuta. Come più s’allontanava, ella
facevasi più lenta, indugiando a ogni passo sul pendìo lubrico ed
erto, arrestandosi, col capo levato in alto, per fissare l’orto o il poggio
solatìo, quasi fosser la mèta del suo cammino. Quando fu presso al
limite estremo, improvvisamente le forze le mancarono, ed ella,
mettendo un piccolo grido, si volse e s’abbandonò tutta quanta,
distesa su l’erba come su un letto.
— Lei, conte?! — esclamò Flavia turbata ma sorridente, poichè vide
il giovine fermo allo sbocco della viottola; e s’alzò di scatto a sedere.
Aurelio senz’aprir bocca la salutò, levandosi il cappello.
— È venuto a sorprendermi, eh?
— Confesserò — egli rispose — che senza volerlo sono stato
spettatore di tutta l’ascensione.
— Male, assai male! Doveva avvertirmi della sua presenza...
— L’avrei desiderato, ma come fare? Potevo prendermi la libertà di
chiamarla per nome?
Ella gridò, ridendo:
— Gran che!.... Del resto non occorreva: bastava tossire, tossire con
molta violenza.... Io, che ho buon cuore, mi sarei sùbito impensierita
per la sua salute e naturalmente, volgendomi, l’avrei scoperto....
— È vero! Mi scusi.. non ci ho pensato!
Risero entrambi. Ella così forte che un’eco lontana rispose; e agitò le
mani, e battè l’una contro l’altra palma in un fresco trasporto di
giocondità.
— Non è indiscrezione domandare dov’era mai diretta per sì mali
passi la signorina? — chiese Aurelio.
— Non so precisamente. Ero stanca di star là giù seduta a lavorare:
e m’è nata la cattiva ispirazione di salire verso l’orto a traverso
questo prato.
— Ah, ella vien fin qui a passare le ore calde della giornata?
— Sì, noi lavoriamo quasi sempre all’aria aperta. Si vuole avere il
gran cielo per testimonio che l’ozio non è tra le nostre abitudini...
Come può vedere, quello è appunto il nostro laboratorio, quando
almeno il tempo ce lo consente.
Il giovine si volse verso il punto che Flavia indicò. All’ombra degli
ultimi abeti del bosco, in una specie di nicchia verde, era disteso su
l’erba un ampio scialle a mo’ di tappeto, tutto coperto di scatole,
scatolette, astucci, astuccini, cestelli, e d’una infinità di gomitoli
colorati; due telaretti per ricamo e due sediuole portatili compivano
quell’improvvisato luogo di lavoro.
— È un rifugio da poeti, questo! — disse Aurelio, rivolgendosi a lei.
— Dove, per buona ventura, poesie non se ne fanno, e né pure se
ne leggono mai! Io odio cordialmente i versi e i verseggiatori.... Non
è per caso tra questi, signor Imberido?
— No, signorina, pur troppo!
— Pur troppo?...
— Sì, perché vorrei esser poeta.
— E a che pro?
— A che pro...?! — ripeté il giovine, fissandola, un po’ impacciato.
La domanda l’obbligava a una lunga esplicazione e non agevole.
Egli ammirava profondamente le opere estetiche: tra tutte le arti, la
poesia e la musica eran quelle che prediligeva come le più perfette
espressioni della bellezza ideale. Pensava anzi che l’arte fosse, con
la filosofia, l’eccelsa fioritura della mente umana, un privilegio degli
spiriti eletti, un titolo tra i più validi e più legittimi nelle nuove
aristocrazie intellettuali. Per lui l’artista era un uomo nobile, e uomo
nobile non poteva essere chi rimaneva estraneo e chiuso al fascino
del bello, alle pure ebrezze dell’intelligenza. Queste cose egli
avrebbe voluto esprimere, e le parole gli salirono spontaneamente
alle labbra. Ma invece rispose:
— Per celebrar le sue lodi, signorina!
Ella lo guardò, come se dalla pausa avesse indovinato i suoi pensieri
e dubitasse della sincerità di quella risposta. Quindi, per non
insistere su l’argomento in cui sentiva esser tra loro una discordia
d’opinioni, domandò:
— E lei, dove andava da queste parti?
— Io? Non so... Verso l’alto, come sempre... Perchè a me piace
salire, continuamente salire... La montagna m’attira con una
prodigiosa potenza. Quando mi metto per una via che tende in su,
non posso più fermarmi, proseguo come un automa sospinto da
un’energia ignota, accelero il passo man mano che l’erta si fa più
scoscesa, non rimango se non ho superato un culmine. Non so
perchè: questa strana sensazione d’ansia e di piacere, l’ho provata
dalla prima volta che ho visto la montagna, quando ero ancor
bambino.
Flavia ascoltò grave e attenta, or corrugando e ora spianando la
fronte, tenendo lo sguardo fisso su di lui, ma non ne’ suoi occhi. D’un

Textbook Nanostructures For Novel Therapy Synthesis Characterization and Applications A Volume in Micro and Nano Technologies Alexandru Mihai Grumezescu and Denisa Ficai Eds Ebook All Chapter PDF

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Alexandru Mihai Grumezescu

Copyright © 2017 Elsevier Inc. All rights reserved.

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Publisher: Matthew Deans

Typeset by Thomson Digital

ABOUT THE SERIES (VOLUMES I–V)

Nanostructures for Novel Therapy﻿

1.1 EVOLUTION OF METAL NANOPARTICLES IN PHARMACY AND BIOTECHNOLOGY

2 SYNTHETIC METHODS FOR PREPARATION OF METAL NANOPARTICLES

FIGURE 1.4 TEM Images of FeNPs

2.2 SOL–GEL METHOD

2.2.1 Aqueous sol–gel method

2.2.2 Nonaqueous sol–gel method

2.3 HYDROTHERMAL AND SOLVOTHERMAL METHOD

2.4 MICROWAVE-ASSISTED METHOD

FIGURE 1.9 Production of Heat Energy by Microwave Irradiation of Water Molecule

Il dì successivo, Aurelio, avendo concluso l’articolo, discese in

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