Professional Documents
Culture Documents
Liverpool
Liverpool
Maturski rad
(Porodica Enterobacteriaceae)
Mentor: Kandidat:
Mr. Amela Brina Ahmed Barui
SADRAJ
UVOD...................................................................................................................... 1
1. Osobine Enterobacteriaceae................................................................................ 2
1.1 Bolesti koje izazivaju Enterobacteriaceae........................................................2
1.2 Podloge za izolaciju Enterobacteriaceae..........................................................2
2. Identifikacija Enterobacteriaceae..........................................................................4
2.1 Identifikacija na podlogama.............................................................................4
2.2. Otkrivanje kontaminacije................................................................................ 6
3. Escherichia coli.................................................................................................... 7
3.1. Bolesti uzrokovanjem Eschericia Coli.............................................................9
3.2 Otpornost Eschericie Coli.............................................................................. 10
3.3 Kulturelne osobine........................................................................................ 10
3.4 Biohemijske osobine..................................................................................... 10
4. Salmonella........................................................................................................ 11
4.1. Salmoneloze................................................................................................ 11
4.2. Graa Salmonelle........................................................................................ 12
4.3. Tipovi Salmonelle......................................................................................... 12
5. Shigella............................................................................................................. 13
5.1 Dospijevanje putem infekcije.........................................................................13
5.2. Uzimanje uzorka vode za pie i slanje na potpuni bakterioloki pregled .........13
ZAKLJUAK........................................................................................................... 16
LITERATURA.......................................................................................................... 17
UVOD
1. Osobine Enterobacteriaceae
3
Serratia, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter i Erwinia. Prisustvo enterobakterija u
namirnicama je indikator fekalnog zagaenja, tj. nedovoljne higijene tokom proizvodnje,
uvanja i manipulacije sa hranom. Namirnice u kojima se ustanovi prisustvo enterobakterija
se smatraju zdravstveno neispravnim.
4
2. Identifikacija Enterobacteriaceae
2.1Identifikacija na podlogama
Slika br. 1 Krvni agar pozitivan Slika br. 2 Krvni agar negativan
5
Endo Agar:
SS Agar:
6
2.2. Otkrivanje kontaminacije
U probavnom sistemu ljudi i ivotinja nalazi se nekoliko vrsta mikroorganizama koji mogu
posluiti kao indikatori fekalne kontaminacije (Slika br. 7). Njihova prisutnost u pitkim
vodama, u broju koji prelazi doputenu razinu, signalizira kontaminaciju fekalnog porijekla.
Zajedniki se ti mikroorganizmi nazivaju koliformni. Oni su aerobni ili fakultativno
anaerobni, gram negativni asporogeni tapii koji fermentiraju laktozu i tvore CO 2 i kiselinu
tokom 24 48 sati, kada rastu pri temperaturi 35 37 C . Ta skupina ukljuuje razliite vrste
Escherichiacoli, Enterobacter aerogenes iKlebsiella pneumoniae. Ti su mikroorganizmi
normalna mikroflora probavnog sistema sisavaca gdje se nalaze u velikim koliinama, a u
vodi preivljavaju mnogo due od nekih drugih patogenih bakterija. Prisutnost velikog broja
koliforma u vodi po pravilu pokazuje nedavnu kontaminaciju, a relativno niski broj odraava
naknadne probleme kontaminacije.
7
3. Escherichia coli
Rod Escherichia pripada porodici Enterobacteriaceae i jedina vrsta iz tog roda je Escherichia
coli. Ovu bakteriju otkrio je njemaki pedijatar i bakteriolog Theodor Escherich 1885. godine.
E. coli je gram negativna, aerobno i fakultativno anaerobna, tapiasta bakterija. E. coli
posjeduje veliku fermentativnu i oksidativnu sposobnost. U anaerobnim uvjetima nastaje
laktat, sukcinat, etanol, acetat i CO2. Ne proizvodi H2S. Seroloki se razlikuju tipovi na
osnovu O, K i H antigena. E. coli dobro raste na svim hranjivin podlogama. Razmnoava se
pri temperaturama od 10 do 46C, a optimalno se razmnoava na 37C. Neke vrste mogu rasti
i na 4C, a veina vrsta preivljava temperature znatno nie od 0 C. Ameriki naunici
ispitivali su mogunost preivljavanja E. coli na temperaturama iznad 45 C, i dokazali su da
na temperaturama oko 45C mogu preivjeti oko 5 minuta u 0,1 M KCl. Dokazano je i da
neke mutagene vrste mogu vrlo kratko izdrati na temperaturama iznad 49 C, ali na tim
temperaturama nemaju sposobnost rasta i razvoja. Termikom obradom namirnicama na
temperaturi od 60C u trajanju od 15 minuta moemo biti sigurni da su unitene sve elije E.
coli. Minimalni aw za njihovo razmnoavanje je 0,93, a minimalan pH je 4,3. E. coli je
osjetljiva na hlor i hlorove spojeve, dok prema razliitim antibioticima vrlo brzo postaje
rezistentna. Prirodno stanite ove bakterije je probavni sistem ovjeka i ivotinja. E. coli je
dio normalne crijevne flore ovjeka, i neophodna je za proces probave, kao i sintezu nekih
supstanci neophodnih za normalno funkcioniranje organizma, kao to je vitamin K. Postoji i
odreena podjela sojeva E. coli s obzirom na njihovu patogenost; tako imamo enteropatogenu
E. coli (EPEC), enterotoksikogenu E. coli (ETEC), enteroinvazivnu E. coli (EIEC),
enterohemoraginu E. coli (EHEC) i enteroagregativnu 5 E. coli (EAEC) (Nataro i Kaper,
1998.). Iako se smatra kako E.coli nije opasna i dio je prirodne mikroflore probavnog sistema
ljudi i drugih toplokrvnih ivotinja (inei manje od 1% mikroflore, odnosno kod ljudi 108 po
gramu; Smith, 1961.), postoje odreeni sojevi odgovorni za brojne bolesti, od kojih neke
mogu rezultirati i smru. Proizvodnja citotoksina je zajedniko svojstvo za VTEC (Vero
citotoksigene E.coli) koje se jo nazivaju i proizvoaima Shiga toksina (STEC) i
enterohemoragine E. coli (EHEC). Kod novoroenadi E. coli se javlja ve par dana nakon
roenja. Dijete veinom unese bakteriju fekalno-oralnim putem od majke, ali i iz okoline.
Rezultati oralnih eksperimenata odraslih osoba pokazuju da je razina od 105 do 1010 EPEC
dovoljna da izazove dijareju, 108 do 1010 ETEC potrebno je za infekciju i dijareju, a razina
8
od 108 EIEC uzrokuje pojavu simptoma dijareje kod odraslih osoba. Meutim, ti podaci
variraju, a ovise o jaini eluane kiseline pojedinaca (Doyle i Padhye, 1989.; Sussman,
1997.). S druge strane, epidemioloka istraivanja pokazuju kako infektivna doza VTEC
moe biti i vrlo mala, npr. manje od 100 stanica (Savjetodavni odbor za mikrobioloku
sigurnost hrane, 1995.). VTEC mogu izazvati i hemolitiki uremiki sindrom (HUS), kojeg
karakterizira akutno zatajenje bubrega, hemolitika anemija i trombocitopenija (smanjeni broj
trombocita u perifernoj krvi), a obino se javlja kod djece mlae od 5 godina. Danas je u hrani
vrlo niska infektivna razina VTEC-a, posebno VTEC O157:H7, to ukazuje na to kako se u
poljoprivrednoj praksi odravaju najvii mogui standardi i proizvoai hrane pridravaju se
visoko higijenskih uvjeta procesa proizvodnje hrane koji se temelje na naelima HACCP-a
(Hazard Analysis and Critical Control Point). Nadalje, vrlo je vano obratiti panju i na
odravanje istoe i visokih higijenskih uvjeta u svim fazama proizvodnje hrane kako bi se
mogli kontrolirati mogui zaostaci E. coli i kako bi se sprijeila potencijalna opasnost za
potroae. U prehrambenoj industriji se E. coli uobiajeno ukljuuje u propise koji se odnose
na sirove materijale i gotove prehrambene proizvode kao indikator zdravstvene ispravnosti
hrane. To se posebno odnosi na E.coli O157:H7, jer, ako je i prisutna u hrani, poeljno je da to
bude u vrlo niskim koncentracijama u sirovinama i gotovim proizvodima. 6 Usporeena je
DNA kod E. coli i DNA kod nekih drugih rodova porodice Enterobacteriaceae, posebno nekih
znaajnijih ljudskih patogena (Brenner, 1984.), te, na osnovu DNA homologije, Jones (1988.)
navodi da bi se E. coli i etiri soja roda Shigella trebale smatrati kao zasebna vrsta. Do sredine
1940-tih godina, razvijena je shema serogrupa na osnovu koje E.coli moe biti podijeljena na
vie od 170 razliitih serogrupa koje se baziraju na njenim somatskim (O) antigenima
(Kauffmann,1947.). Nadalje, postoji preko 50 flagelarnih (H) antigena te oko 100 kapsularnih
(K) antigena na osnovu kojih se E. coli dalje dijeli na seotipove. Zahvaljujui serogrupama i
serotipovima, te ostalim informacijama o bakterijama koje su dobivene istraivanjima, kao to
su biotip i proizvodnja enterotoksina, danas je olakano razlikovanje pojedinih vrsta koje su
sposobne izazvati zarazne bolesti kod ljudi i ivotinja (Linton i Hinton, 1988.)
9
E. coli izazivaju razliita oboljenja: lokalna oboljenja tkiva i organa, ljetni prolivi (mala
djeca), epidemijski proliv: coli- enteritis.Izvor zaraze su najee izmet i mokraa oboljelih
ljudi i ivotinja. Najee se prenosi namirnicama, vodom i prljavim rukama, ali moe i preko
predmeta, pa ak i zrakom. Dobro se razvija u mesu, ribama, mesu peradi, mlijeku i
mlijenim proizvodima, povru, rii i dr. ivotnim namirnicama.Najee sijelo infekcija
bakterijom E. coli jeste mokrani sistem. Smatra se da vie od 90% svih nekompliciranih
urinarnih infekcija uzrokuje upravo ovaj uzronik, a u 44% oboljelih se unutar 12 mjeseci
infekcija ponovi. Do infekcije dovode tzv. uropatogeni sojevi E. coli koji imaju sposobnost
vezanja za elije mokranog trakta, pokazuju otpornost na imunoloku reakciju domaina, a
imaju i druge imbenike virulencije kao to su siderofore i citotoksini. Vaan faktor su i tri
razliita tipa fimbrija (najee P fimbrije, ali i fimbrije tipa 1 te S fimbrije) kojima se u
poetku infekcije veu za epitelne elije mokranog sistema. Infekcijama donjeg mokranog
sustava su sklonije ene jer imaju kratku mokranu cijev koja se nalazi u blizini zavrnog
dijela debelog crijeva.Infekcije mokranog trakta kreu se u rasponu od asimptomatske
bakteriurije koja je karakterizirana prisutnou bakterija u mokrai bez simptoma, cistitisa
gdje je infekcija ograniena na mokrani mjehur, pa sve do pijelonefirtisa gdje je zahvaen
bubreg. Glavni simptomi i znakovi infekcije su poviena tjelesna temperatura te povien broj
leukocita u krvnoj slici. Cistitis uobiajeno prolazi bez posljedica, dok pijelonefritis moe
ostaviti trajne posljedice, pa ak i rezultirati smrtnim ishodom. Komplicirane klinike slike
ee se viaju u starijih pacijenata sa strukturalnim abnormalnostima mokranog sustava ili u
kateteriziranih pacijenata.
10
Premda veina ovih sojeva izaziva proljev koji ne zahtijeva posebnu terapiju, EHEC moe
dovesti do vrlo ozbiljne klinike slike zbog toga to otputa jedan ili vie toksina poznatih pod
nazivom Shiga-like toksini.Velik broj sluajeva novoroenakog meningitisa uzrokovan je
upravo bakterijom E. coli, a sojevi koji sadre kapsularni antigen K1 povezuju se i s
novoroenakom sepsom. U odraslih je meningitis uzrokovan ovim uzronikom rijedak, no
moe se javiti kao rezultat neurokirurkih zahvata, traume mozga ili hiperinfekcije
parazitom Strongyloides stercoralis koja zahvaa sredinji nervnisistem. Infekcije disajnog
sistema ovim uzronikom su rijetke i gotovo uvijek povezane s infekcijom mokranog trakta,
a glavni imbenici rizika su eerna bolest, alkoholizam i hronina opstruktivna pluna bolest
(KOPB). E. coli se kao rijedak uzronik moe pronai i u septinom artritisu, gnojnoj upali
titne lijezde, upali sinusa, upali ui, endokarditisu, prostatitisu, infekcijama koe i mekog
tkiva te sepsi.
Otpornost Eerihije spadaju u otporne bakterije koje mjesecima mogu preivjeti u vodi,
zemlji, na predmetima. Otporne su na niske temperature dok su na visoke umjereno osetljive
unitavaju se na 60 stepeni Celzijusa za 30 minuta
3.3Kulturelne osobine
Na podlogama koje sadre triprofan, produkuju indol. Test metil reda je pozitivan kada je rN
ispod 4, dok je test po Voges-Proskaueru negativan (dokazivanje acetoina). Ne usvaja
amonijumov citrat. E. coli fermentie glukozu i manitol sa stvaranjem kiselina i gasa. Ne
stvara sumporvodonik. Ne hidrolizira ureu. Fenilalanin je negativan kao i KCN. Ne otapa
11
elatin.
4. Salmonella
4.1. Salmoneloze
Uzronici ove bolesti su gram negativne bakterije, salmonele. Salmoneloze su sve bolesti koje
prouzrokuju salmonele. Salmoneloza je infekcija uzrokovana upotrebomnedovoljno termiki
obraenog ili prijesnog mesa peradi, govedine ili svinjetine. Pored toga do infekcije
dolazikonzumiranjem inficiranih jaja, gdje se salmonele nalaze uglavnom na kori jajeta, jako
rijetko u jajetu. Sve namirnice koje su direktno ili indirektno u kontaktu sa klicom salmonele,
mogu biti uzronici infekcije salmonele, isto tako i namirnice koje u sebi sadre prijesna jaja
kao to su sladoled ili majoneza. Salmoneloze su u prvom redu bolesti ivotinja. Najvie
oboljevaju goveda, svinje, perad, takori i mievi. Izvor infekcije su bolesne ivotinje,
odnosno njihovi produkti, zatim bolesnici i kliconoe. Bolest se prenosi inficiranom hranom
koja se jede sirova ili nedovoljno termiki obraena, zatim kontaktom sa bolesnicima i
kliconoama.
12
tifusa i paratifusa (Sallmonela Typhi i SallmonelaParatyphi) pripadaju ovoj velikoj grupi
bakterija.
5. Shigella
13
Shigella je gram negativna, tapiasta bakterija koja ne formira spore, slabo je pokretna,
laktoza negativna i ima malu otpornost na toplotu. igela uglavnom nije otporna na uticaje
okruenja. Ovi fakultativni, anaerobni mikroorganizmi rastu na temperaturama od 6 do 48C,
sa optimalnom temperaturom od 37C. Opseg pH koji pogoduje igeli je od 4,9 do 0,3.
Zahteva minimalnu aw od 0,94, sa maksimalnim sadrajem soli od 4,0 do 5,0%
igela je vrlo zarazan mikroorganizam, poto i unos od manje od 100 ovih bakterija moe
izazvati bolest. Schigella spp. proizvodi toksin koji ima enterotoksino, neurotoksino i
psihotoksino dejstvo, i odgovoran je pojavu upalnih procesa u crevima.
Shigella vrste koje najee izazivaju bolesti kod ljudi su Shigella dysenteriae, S. flexneri, S.
boydii i S. sonnei. Shigella dysenteriae je poznata kao izaziva dizenterije, S. flexneri je sa
60% najzastupljenija od Shigella vrsta u zemljama u razvoju, a S. sonnei izaziva oko 77%
bolesti u razvijenim zemljama i oko 15% u zemljama u razvoju Fekalno-oralna kontaminacija
je tipina za Shigellu. U fecesu inficirane osobe nalazi se Shigella. One u fecesu mogu
preivjeti dui vremenski period, i tako se u uslovima loe higijene dalje mogu prenositi preko
14
insekata, glodara i drugih ivotinja. Ukoliko ove bakterije imaju dovoljno hranjivih materija
mogu preiveti i do dvije nedjelje na temperaturi oko 20C. Jednostavnim postupkom, tj.
redovnim pranjem ruku stepen kontaminacije Shigella vrstama moe se znatno smanjiti.
Veoma je bitno od malena, kod djece razviti navike redovnog pranja ruku. U uslovima loe
higijene moe doi i do kontaminacije vode i hrane za pie ovim bakterijama. Hrana se moe
kontaminirati ukoliko sa njom manipulira osoba sa loim higijenskim navikama, preko
kontaminirane vode ili preko insekata i glodara. Da bi se izbegle infekcije Shigella vrstama
potrebno je hranu kontrolisati, ali i adekvatno pripremati i uvati. Shigella vrste se unitavaju
pri temperaturi od 60C u trajanju od 30 min. Osjetljive su i na alkalije i kiseline.
Stepen oboljenja koje ove bakterije izazivaju kod ljudi zavisi od starosti i opteg stanja
organizma, a za infekciju i razvoj bolesti nekada je u tijelo domaina dovoljno uneti svega 5-
10 elija ovih bakterija. Kada preko kontaminirane hrane ili vode Shigella dospije u tijelo
domaina (slika br. 8), prodire i napada epitelne elije digestivnog trakta domaina. Najei
simptomi su diareja, poviena temperatura, povraanje i grevi u stomaku. este su pojave da
se u stolici nau krv i gnoj. Simptomi bolesti najee nastaju 2-4 dana nakon unosa ovih
bakterija u organizam, a nekada se mogu ispoljiti tek nakon njedelju dana. Simptomi
uglavnom traju nekoliko dana, ali mogu i due. igeloze, bolesti izazvane Shigella vrstama,
lijee se antibioticima, a najee se u terapiji koristi ampicilin. Sa terapijom je potrebno
poeti na vrijeme i pod nadzorom ljekara. Ukoliko se sa terapijom ne pone na vrijeme ili se
15
antibiotici uzimaju nekontrolisano, moe doi do pojave rezistentnosti na antibiotike. Ukoliko
se nekontrolisano uzimaju i sredstva protiv dijareje, mogu se pojaviti kontraindikacije i tako
pogorati bolest. Osobe koje obole od dijareje izazvane Shigella vrstama, uglavnom se
potpuno oporave. Da bi se u potpunosti povratila funkcija creva i obnovila mikroflora
potrebno je od nekoliko dana pa ak i nekoliko nedelja. Oko 3% ljudi koji se inficiraju S.
flexneri mogu dobiti Rajtnerov sindrom iji su simptomi bolovi u zglobovima, bol pri
mokrenju i iritacija oiju. Ovi simptomi mogu trajati i do godinu dana, a mogu prei i u
hronini artritis-zapaljenje zglobova koji se veoma teko lijei. Nekontrolisane igeloze kod
djece, starosti do dvije godine, mogu izazvati ak i pojavu epilepsije (Gaston, 2003). Shigella
vrste lue Shiga toksin, koji je slian verotoksinu E. coli. Shiga toksin kada dospije u eliju
domaina inhibira sintezu proteina i izaziva hemolitiko uremiki sindrom.
16
ZAKLJUAK
Posljednja bakterija koju je potrebno spomenuti jeste Shigella. To je gram negativna, tapiata
bakterija koja nema sposobnost formiranja spore, karakteristina po slaboj pokretljivosti i
slaboj otpornosti na toplotu. Prenosi se na ovjeka putem ljudskih prenosilaca te
kontaminirane vode. igela gastroenteritis je infekcija iji period inkubacije traje 1 do 7 dana,
te traje 5 do 6 dana. Simptomi koji se javljaju kod zaraenih osoba varijaju, ali u nekim
sluajevima je mogua i pojava krvne dijareje, mukozne sekrecije, dehidratacije i sl. Najei
simptomi jesu povraanje, temperatura, dijareja i grevi u stomaku.
17
18
LITERATURA
http://www.tehnologijahrane.com/enciklopedija/patogene-bakterije-u-hrani-12
https://repozitorij.ptfos.hr/islandora/object/ptfos%3A41/datastream/PDF/view
http://www.maturski.net/seminarski-radovi/escherichia-coli
19