Al-sham Private University

Faculty of Pharmacy

2 ‫علم األحياء الدقيقة‬

)‫(القسم العملي‬

Practical Microbiology 2
(Laboratory diagnostic of Parasites & Fungi)

Directed by:
Dr. Maisaa Abd-alkareem
 ‫الجلسة العملية األولى‬

‫الفحص العام للبراز‬

‫يعتمد التشخيص المخبري للطفيليات المعوية على فحص عينة من البراز ورؤية الطفيلي بشكله‬
‫الكامل مثل وحيدات الخلية (النواشط واألكياس) أو رؤية بيوض الديدان‪.‬‬
‫الفحص العام للبراز (هام بسبب انتشار الطفيليات الهضمية)‬

‫‪-1‬طريقة جمع العينات وشروطها‪:‬‬

‫‪-‬ينصح بإجراء أكثر من فحص واحد للبراز إما خالل ‪ 3‬أيام متتالية أو بفاصل زمني بين كل فحص‬
‫وآخر‪ ،‬وذلك بسبب عدم انتظام في طرح البيوض أو األكياس‪.‬‬
‫‪-‬تجمع العينات في عبوات نظيفة‪-‬غير قابلة للتسريب‪-‬قابلة للعنونة‬
‫‪-‬يفضل أن يفحص البراز وهو طازج وبخاصة عند البحث عن وحيدات الخلية‪ ،‬أما عند فحص‬
‫البيوض فيمكن حفظ البراز لفترة زمنية محددة ضمن محاليل حافظة‪.‬‬
‫‪-‬يجب التوقف عن تعاطي بعض األدوية التي تعيق الفحص المجهري مثل مركبات البزموت والفحم‬
‫والباريوم والمسهالت الزيتية (يمكن استخدام مسهل ملحي مثل كبريتات المغنزيوم)‪.‬‬
‫‪-‬يفضل التوقف عن تناول الصادات الحيوية قبل أخذ العينة ألنها تؤثر على األكياس‬

‫‪-2‬الفحص العياني للبراز‪:‬‬

‫‪-‬القوا م‪ :‬يالحظ قوام البراز (سائل‪ ،‬صلب‪ ،‬لين)‪ .‬حيث تتواجد األشكال النشيطة لألوالي في البراز‬
‫السائل‪ ،‬بينما تتواجد بيوض الديدان وأكياس األوالي في البراز الصلب‪.‬‬
‫‪-‬اللون‪ :‬طبيعي‪ ،‬مدمى (دم قاني يدل غالبا ً على نزف بواسير‪ ،‬مدمى مخاطي (يدل على وجود‬
‫إصابة بالمتحول الزحاري (طفيليات أوالي)‪.‬‬
‫– يمكن أن تظهر الطفيليات بشكل كامل في البراز (مثل ديدان الحرقص) أو تظهر قطع من الديدان‬
‫الشريطية‪.‬‬
‫‪-3‬الفحص المجهري‪:‬‬
‫أ‪ -‬فحص مباشر أو ما يسمى بالفحص العبيط‪ :‬حيث يتم فحص البراز مباشرة بدون ملونات‪( .‬براز‬
‫سائل‪ -‬براز صلب)‪ :‬فإذا كان البراز سائل يوضع قطرة منه مباشرة على صفيحة زجاجية وتغطى‬
‫بساترة وتفحص تحت المجهر وتالحظ البيوض واألشكال المتحركة‪ ،‬أما إذا كان البراز صلب‬
‫فيجب تمديده بالمصل الفيزيولوجي‪ :‬حيث توضع قطرة من المصل الفيزيولوجي على صفيحة‬
‫زجاجية وتؤخذ عينة من البراز بواسطة عود خشبي وتمزج على الصفيحة مع القطرة وتغطى‬
‫بساترة وتفحص تحت المجهر‪.‬‬

‫‪2‬‬ ‫د‪.‬ميساء عبد الكريم‬

‫ب – فحص بعد التلوين‪ :‬يساعد التلوين في الكشف عن أكياس الحيوانات األولية‪ .‬حيث يمكن‬
‫استعمال محلول لوغول (اليود اليودي) لتلوين األكياس‪ ،‬والهيماتوكسيللين‪ ،‬والتريكروم‪ .‬ولكن‬
‫تتخرب األشكال النشيطة بالتلوين‪ ،‬لذلك يتم التلوين بعد إجراء فحص مباشر بدون تلوين للتحري‬
‫عن النواشط‪.‬‬

‫فحص بعد تكثيف البراز‪( :‬في حال عدد الطفيليات قليل)‪ ،‬حيث يهدف إلى تكثيف العناصر الطفيلية‬
‫النادرة لتسهيل كشفها بالفحص المباشر‪.‬‬

‫هناك عدة طرق لتكثيف البراز أهمها طريقة ‪:Formalin-Ether sedimentation‬‬

‫‪-1‬نمزج جزء من البراز مع ‪ 10‬مل من المصل‬
‫الفيزيولوجي‪.‬‬
‫‪-2‬نرشح المزيج على أنبوب تثفيل‪.‬‬
‫‪-3‬نثفل بسرعة ‪ 200‬دورة‪/‬الدقيقة لمدة ‪ 10‬دقائق‪.‬‬
‫‪-4‬يطرح السائل الطافي‪ ،‬ويغسل الراسب بالمصل‬
‫الفيزيولوجي‪.‬‬
‫‪-5‬يعاد التثفيل والغسيل بالمصل الفيزيولوجي حتى يصبح‬
‫السائل الطافي رائقاً‪.‬‬
‫‪-6‬بعد رمي السائل الطافي الرائق يضاف ‪ 10‬مل من‬
‫الفورمالين ‪ %10‬وتمزج وتترك حوالي ‪ 5‬دقائق للتثبيت‪.‬‬
‫‪-7‬يضاف ‪ 2-1‬مل من محلول اإليتر وتمزج جيداً‪.‬‬
‫‪-8‬نثفل المزيج بسرعة ‪ 1500‬دورة‪/‬الدقيقة فنحصل على ‪ 4‬طبقات‪:‬‬
‫في األعلى اإليتر‪ ،‬وفي األسفل ثفالة البراز‪.‬‬
‫‪-9‬يرمى السائل الطافي وتفحص قطرة من الثفالة فحص مباشر وبعد التلوين‪.‬‬

‫حفظ عينات البراز‪:‬‬

‫يفضل فحص البراز مباشرة‪ ،‬ولكن قد نضطر أحيانا ً لحفظ البراز لفترات طويلة وخاصة ألهداف‬
‫تعليمية في المختبرات‪ .‬وهناك عدة محاليل تستخدم لحفظ البراز أهمها‪:‬‬
‫‪-1‬محلول الفورمالين‪ :‬يستخدم بتركيز ‪ %5‬أو ‪ ،%10‬حيث يحضر من الفورمالدهيد التجاري ذو‬
‫التركيز ‪.%40‬‬
‫يمزج حجم من البراز إلى ‪ 3‬حجوم من الفورمالين في وعاء محكم اإلغالق‪ ،‬ونحتاج إلى تلوين‬
‫البراز عند الفحص للبراز المحفوظ‪.‬‬
‫‪-2‬محلول ميرتيوالت فورمالدهيد اليودي ‪ :MIF‬يحتوي على مرتيوالت‪ ،‬فورمالدهيد‪ ،‬غليسرين‪،‬‬
‫ماء‪ .‬ويستخدم كحافظ وملون لعينات البراز (ال داعي لتلوين العينة عند الفحص)‪.‬‬

‫‪3‬‬ ‫د‪.‬ميساء عبد الكريم‬

 ‫نتائج فحص البراز‪:‬‬
‫الهدف من فحص البراز هو البحث عن األشكال الممرضة وتفريقها عن غير الممرضة‪.‬‬

‫أشكال طبيعية‪ :‬كالخاليا النباتية‪ ،‬ألياف السيللوز‪ ،‬أوبار نباتية‪ ،‬ألياف لحمية مهضومة‪ ،‬حبات‬
‫النشاء‪ ،‬قطرات زيتية‪.......‬إلخ‪.‬‬

‫أشكال مرضية‪ :‬مثل بيوض األسكاريس‪ ،‬بيوض الشريطيات‪ ،‬بيوض الوريقات‪ ،‬يرقات‬
‫اإلسطوانية البرازية‪ ،‬أكياس المتحول الزحاري‪ ،‬نواشط الجيارديا‪.............‬إلخ‪.‬‬

‫األشكال المشابهة للطفيليات في البراز‬

‫مقارنة األشكال الطبيعية والمرضية تحت المجهر‬
‫‪Stool Artifacts‬‬

‫الكريات الدهنية ‪Fat Globules‬‬ ‫فقاعات الهواء ‪Air Bubbles‬‬

‫ألياف لحمية مهضومة‬

‫‪4‬‬ ‫د‪.‬ميساء عبد الكريم‬

‫‪5‬‬ ‫د‪.‬ميساء عبد الكريم‬
‫‪6‬‬ ‫د‪.‬ميساء عبد الكريم‬
‫‪7‬‬ ‫د‪.‬ميساء عبد الكريم‬
 ‫الجزء العملي‪:‬‬

‫‪-1‬يتعلم الطالب كيفية تحضير عينة البراز للفحص المباشر سواء العبيط أو بعد التلوين‪.‬‬
‫‪-1‬يقوم الطالب بفحص عينات براز طبيعي ورؤية األشكال الطبيعية في البراز‪.‬‬
‫‪-2‬يرسم الطالب األشكال الطبيعية المشاهدة تحت المجهر ويضع عليها المسميات‪.‬‬
‫‪-3‬يقوم كل مجموعة من الطالب بتطبيق طريقة الفورمالين واإليتر في تكثيف عينة براز (تحوي‬
‫أشكال مرضية) وفحص الثفالة تحت المجهر‪.‬‬

‫‪8‬‬ ‫د‪.‬ميساء عبد الكريم‬