‫الكيمياء الحيوية السريرية‬ ‫جامعة الشام الخاصة‬

‫السنة الرابعة‬ ‫كلية الصيدلة‬

‫‪............................................................................................‬‬

‫معايرة سكر الدم‬

‫تعريف الداء السكري ‪: Diabetes Mellitus‬‬

‫اضطراب استقالبي مزمن يتميز بمستويات غلوكوز دموية عالية ‪ ،‬ينتج عن مقاومة األنسجة‬
‫لألنسولين و‪/‬أو نقص إفراز األنسولين‪ ،‬له نمطان ‪:‬‬

‫‪ :Type 1 ‬يسمى السكري الشبابي أو السكري المعتمد على األنسولين‪ :‬ينتج عن تخرب‬
‫مناعي ذاتي لخاليا ‪ β‬في جزر النغرهانس في البنكرياس مما يؤدي إلى نقص أو غياب‬
‫األنسولين‪ ،‬يحدث عادة بعمر الشباب ( > ‪ 30‬سنة)‪.‬‬
‫‪ : Type 2 ‬يعرف بالسكري الكهلي أو السكري غير المعتمد على األنسولين‪ :‬يحدث‬
‫نتيجة مقاومة األنسجة لعمل األنسولين ‪ ،‬يتطور عند البالغين (< ‪ 40‬سنة)‪.‬‬
‫يعد من األمراض الوراثية ‪ ،‬وتعد البدانة وقلة النشاط الجسدي من أهم العوامل المؤهبة‬
‫لحدوثه‪.‬‬
‫هناك العديد من االختالطات الناجمة عن الداء السكري قد تكون حادة كالحماض‬
‫الكيتوني ونقص سكر الدم وفرط األسمولية ‪ ،‬أو مزمنة كاألمراض القلبية الوعائية ‪ ،‬تلف‬
‫الشبكية ‪ ،‬القصور الكلوي ‪ ،‬واالعتالل العصبي‪.‬‬

‫تشخيص ومراقبة الداء السكري ‪:‬‬

‫‪ .1‬معايرة الغلوكوز الدموي الصيامي ‪: fasting blood glucose measurement‬‬

‫يعاير الغلوكوز في الدم بعد صيام لمدة ال تقل عن ‪ 8‬ساعات وتفسر النتائج كمايلي‪:‬‬

‫مشخص لداء السكري‬ ‫تركيز الغلوكوز ≥ ‪126 mg/dL‬‬

‫ما قبل السكري ( ‪) prediabetes‬‬ ‫تركيز الغلوكوز ‪) 100-125 ( mg/dL‬‬
‫طبيعي‬ ‫تركيز الغلوكوز > ‪100 mg/dL‬‬
‫بشكل عام يفضل تحليل عينتين في فترات متباعدة من أجل التشخيص الدقيق للداء السكري‪.‬‬

‫‪1‬‬
 ‫‪ .2‬معايرة الغلوكوز الدموي في عينة عشوائية ‪Random blood glucose‬‬
‫‪: measurement‬‬

‫إذا كان تركيز الغلوكوز≥ ‪ 200 mg/dL‬فإن ذلك يعد مشخصا للداء السكري ‪ ،‬لكن يفضل‬
‫معايرة الغلوكوز في عينة صيامية لتأكيد التشخيص‪.‬‬

‫‪ .3‬اختبار تحمل الغلوكوز الفموي ‪: Oral glucose tolerance test‬‬

‫في البداية يعاير الغلوكوز على الريق ثم يعطى المريض ‪ 75 g‬غلوكوز عن طريق الفم‬
‫ويعاير الغلوكوز بعد ساعة وبعد ساعتين ‪ ،‬تفسر النتائج كما يلي‪:‬‬

‫مشخص لداء السكري‬ ‫تركيز الغلوكوز بعد ساعتين ≥ ‪200 mg/dL‬‬

‫مؤهب للسكري‬ ‫تركيز الغلوكوز بعد ساعتين ‪) 140-200 ( mg/dL‬‬
‫طبيعي‬ ‫تركيز الغلوكوز > ‪140 mg/dL‬‬

‫‪ .4‬قياس الخضاب السكري ‪: glycated haemoglobin measurement‬‬

‫عند ارتفاع تركيز الغلوكوز في الدم يرتبط مع الخضاب بشكل غير عكوس وبالتالي يستمر‬
‫هذا االرتباط حتى تدرك الهيموغلوبين ‪.‬‬

‫يعبر قياس مستوى الخضاب السكري ‪ HBA1c‬عن تركيز السكر في الدم خالل ‪3-2‬‬
‫األشهر الماضية ( نصف عمر الهيموغلوبين) ‪ ،‬حيث يكون تركيز الخضاب السكري في‬
‫الحالة الطبيعية أقل من ‪ ، 5.6%‬يستخدم هذا االختبار لمراقبة الداء السكري‪.‬‬

‫التغيرات المرضية لغلوكوز المصل ‪:‬‬

‫‪ ‬يرتفع غلوكوز المصل في الحاالت التالية‪:‬‬

‫‪ -1‬ارتفاع فيزيولوجي بعد تناول الطعام والتدخين و ‪ stress‬ومع التقدم بالعمر‪.‬‬
‫‪ -2‬الداء السكري‬
‫‪ -3‬التهاب البنكرياس المزمن‬
‫‪ -4‬كل األمراض التي تؤدي إلى زيادة الهرمونات الرافعة لسكر الدم (مثال زيادة الكورتيزول‬
‫في داء كوشنغ ‪ ،‬زيادة األدرينالين في ورم القواتم ‪ ،‬ضخامة األطراف واألورام المفرزة‬
‫لهرمون النمو)‪.‬‬

‫‪2‬‬
 ‫‪ -5‬تناول بعض األدوية التي ترفع سكر الدم مثل حاصرات ‪ ، β‬موانع الحمل الفموية ‪،‬‬

‫الكورتيكوستيروئيدات ‪.‬‬
‫‪ -6‬السكري الحملي ‪ :Gestational diabetes‬خاصة في األشهر األخيرة بسبب ازدياد‬
‫تركيز االستروجينات والبروجستينات التي تزيد مقاومة األنسجة لعمل األنسولين‪.‬‬
‫‪ ‬ينخفض غلوكوز المصل في الحاالت التالية‪:‬‬
‫‪ -1‬عوز أنزيم ‪ glucose-6-phosphatase‬الذي يحرر الغلوكوز من الكبد إلى الدم‪.‬‬
‫‪ -2‬ورم ‪ ( Insulinoma‬ورم في البنكرياس يترافق مع فرط األنسولين) ‪.‬‬
‫‪ -3‬جرعة زائدة من األنسولين عند مرضى السكري‪.‬‬

‫مالحظة ‪ :‬عند ظهور الغلوكوز في البول من الضروري معايرة غلوكوز المصل ‪ ،‬وذلك للتفريق‬
‫بين البيلة الغلوكوزية الناجمة عن ارتفاع سكر الدم بمقدار يتجاوز العتبة الكلوية إلعادة‬
‫االمتصاص وهي ‪ ، 180 mg/dL‬وبين البيلة الغلوكوزية الناجمة عن خلل وظيفة الكلية (حيث‬
‫يظهر الغلوكوز في البول رغم أن مستواه في الدم طبيعي)‪.‬‬

‫طرق معايرة الغلوكوز‪:‬‬

‫‪ -1‬طريقة فوالن – فو ‪:‬‬

‫تعتمد هذه الطريقة على الخاصية اإلرجاعية للغلوكوز ‪ ،‬حيث يقوم الغلوكوز بإرجاع‬
‫كبريتات النحاس في وسط قلوي فيترسب أكسيد النحاسي ‪ ،‬ثم يعالج أكسيد النحاسي‬
‫بحمض الفوسفومولبيدي مع التسخين فيتشكل معقد أزرق تقاس امتصاصيته‪.‬‬

‫تتطلب هذه الطريقة تجريد المصل من البروتينات باستخدام تنغستات الصوديوم وحمض‬
‫الكبريت ‪ ،‬من مساوئ هذه الطريقة ‪:‬‬

‫غير نوعية بسبب تدخل مواد مرجعة أخرى ‪ ،‬عدم ثبات اللون األزرق بسبب أكسدته في‬
‫الهواء(اليتبع قانون بيير المبرت)‪.‬‬

‫‪ -2‬تشكيل مشتقات فورفورالية ‪:‬‬

‫يؤدي التسخين في وسط حمضي إلى نزع الماء من الغلوكوز فنحصل على مشتق‬
‫فورفورالي هو هيدروكسي ميتيل فورفورال يتكاثف بدوره مع أمين عطري مثل‬

‫‪3‬‬
‫األورتوتوليدين ‪ O- toluidine‬فيعطي لون أزرق مخضر تقاس امتصاصيته عند طول‬
‫موجة ‪. 630 n.m‬‬

‫تحتاج هذه الطريقة أيضا إلى تجريد المصل من البروتينات باستخدام ثالثي كلور‬
‫حمض الخل ‪ ،‬ويضاف كبريت البولة إلى كاشف ‪ O- toluidine‬لتثبيته ومنع أكسدته‬
‫بالهواء‪.‬‬

‫‪-3‬التفاعالت األنزيمية للغلوكوز‪ :‬يمكن معايرة الغلوكوز باستخدام أنزيم ‪Glucose‬‬

‫‪ ( oxidase‬كما سيرد الحقا)‬

‫أو باستخدام أنزيم ‪ Hexokinase‬حيث يتم التفاعل كما يلي‪:‬‬

‫تقاس االمتصاصية عند طول موجة ‪ 340 n.m‬حيث يعبر قياس معدل تشكل ‪NADPH‬‬
‫عن تركيز الغلوكوز في العينة‪.‬‬

‫العمل المخبري‪:‬‬

‫معايرة غلوكوز الدم بالطريقة األنزيمية‪:‬‬

‫مبدأ المعايرة ‪: Principle‬‬

‫في المرحلة األولى تتم أكسدة الغلوكوز إلى غلوكونات وينتج الماء األكسيجيني الذي يتفاعل في‬
‫المرحلة الثانية مع الفينول و‪ 4-aminoantipyrin‬فينتج ‪ Quinoneimine‬ذو اللون الزهري‬
‫حيث تتناسب شدة اللون مع تركيز الغلوكوز في العينة‪.‬‬

‫‪4‬‬
 ‫العينة ‪: Sample‬‬

‫مصل أو بالزما ‪ ،‬لكن يجب فصل المصل أو البالزما عن الكريات الحمر مباشرة لمنع تحلل‬
‫السكر‪( ،‬يفضل جمع الدم على أنبوب حاوي على الفلورايد ألنه يثبط عملية تحلل السكر)‪.‬‬

‫يبقى الغلوكوز ثابتا في العينة لمدة ‪ 5‬أيام في البراد )‪.(2-8°‬‬

‫الكواشف ‪: Reagents‬‬

‫‪(:S‬عياري) بتركيز ‪100 mg/d‬‬ ‫‪:A‬محلول الكشف ( جاهز للعمل) يتكون من‪:‬‬

‫‪phosphate‬‬
‫‪phenol‬‬
‫‪4-aminoantipyrin‬‬
‫‪Glucose oxidase‬‬
‫‪peroxidase‬‬
‫طريقة العمل ‪:‬‬
‫‪Pipette into cuvette‬‬
‫‪Blank‬‬ ‫‪sample‬‬ ‫‪Standard‬‬
‫‪Sample‬‬ ‫_‬ ‫‪10 µl‬‬ ‫_‬
‫)‪Standard(S‬‬ ‫_‬ ‫_‬ ‫‪10 µl‬‬
‫)‪Reagent(A‬‬ ‫‪1 ml‬‬ ‫‪1 ml‬‬ ‫‪1 ml‬‬

‫يتم المزج والحضن لمدة ‪ 10‬دقائق بدرجة ح اررة الغرفة أو لمدة ‪ 5‬دقائق بالدرجة ‪ 37°C‬ثم تق أر‬
‫االمتصاصية مقابل البالنك عند طول موجة ‪ ،500 n.m‬حيث يحسب تركيز الغلوكوز في العينة‬
‫كما يلي ‪:‬‬

‫)‪) mg/dL( C =A (sample) X C (standard‬‬

‫)‪A (standard‬‬

‫د‪.‬عبير رجب‬

‫‪5‬‬
6