AGLUTİNASYON

TESTLERİ - 1
Serolojik Tanı Yöntemleri
• Aglutinasyon

– Tüm bakteri aglutinasyonu

– Lateks aglutinasyonu
– Koaglutinasyon
– Direkt hemaglutinasyon
– İndirekt (pasif) hemaglutinasyon (İHA)
 Aglutinasyon

• Partikül halindeki Ag - özgül Ab

çapraz bağlar (kafes)
oluşturarak kümeleşmesi
esasına dayanır

• Aglutinasyon oluşturan
antikorlar = aglutininler

• IgM ve IgG etkin

Aglutinasyonu etkileyen faktörler
• Isı
• pH
• İyon konsantrasyonu
• Örnekteki Ag ya da Ab konsantrasyonu

• Her çalışmada pozitif ve negatif kontrol

konmalı
 Aglutinasyon çeşitleri

• Bakteri –Tüm bakteri aglutinasyonu

• S. aureus (Cowan I suşu) – Koaglutinasyon
• Eritrosit – Hemaglutinasyon
• Kalitatif yada kantitatif yapılabilir.
Tüm bakteri aglutinasyonu

• Partikül; bakteri hücresi

• Üretilmiş, kimyasal yöntemlerle
öldürülmüş bakteri
• Tüpte ya da lamda
yapılabilir
Tüp aglutinasyon testi
• Serum dilüsyonları
hazırlanır
• Standart bakteri
süspansiyonu eklenir
• 1 gece etüvde bekletilir

• Bulanıklık değerlendirilir

• Tüplerin çalkalanması ile

“kar yağdı manzarası”
Aglutinasyon çeşitleri
• Lam aglutinasyon
Lateks aglutinasyon (LA)
• Serum, BOS ve idrarda antijeni bulunan
bakterinin doğrudan tespit edilmesi
• • S. pneumoniae, B grubu streptokoklar, N.
meningitidis, E. coli, H. influenzae tip b
• Gram boyasına eşit veya daha düşük duyarlılıkta
• Yalancı pozitif olabilir
• Pahalı ve zahmetli
• 1 µm çapında, polistren yapıda lateks partikülleri
kullanılır
• Genellikle lam ya da özel karteksler üzerinde
yapılır
• Partiküller Ag aranacaksa – Ab ile, Ab aranacaksa
Ag ile kaplanır
• 1+ ile 4+ arası değerlendirilir
 LA ile çalışılan bazı testler

• Grup A streptokokal farenjit (S. pyogenes)

• Clostridium difficile toksin A,B
• Rotavirus gastroenteriti
• Bakteriyel menenjit (H. İnfluenzae tip b,
S. pneumoniae, N. meningitidis, S. agalactiae)
• Gebelik testi
 Koaglutinasyon (CoA)

• Partikül; Öldürülmüş
Staphylococcus aureus
(Cowan I suşu) kullanılır

• Hücre duvarında bulunan

“protein A” büyük
miktarda Ab bağlar

• Ab’lar; bakteriye Fc kısmı

ile bağlanır
Koaglutinasyon
• Sadece antijen aranması amacı ile kullanılır
• Örnek; Bakteriyel menenjit tanısında kullanılabilir
(H. influenzae tip b, S. pneumoniae, N. meningitidis,
S. agalactiae)

• Özgüllüğü LA’dan yüksek, duyarlılığı daha

düşüktür
Hemaglutinasyon
• İnsan eritrositleri, bazı bakteri veya
virüslerla birlikte bulundukları zaman bir
kümeleşme gösterirler ki, bu fenomene
kanın aglütinasyonu anlamına
gelen hemaglutinasyon (HA) adı
verilir.
Hemaglutinasyon
• Partikül; eritrosit

• 1. Direkt hemaglutinasyon

• 2. İndirekt hemaglutinasyon
 Direkt hemaglutinasyon
• Bazı enfeksiyonlarda eritrosit yüzeyindeki
antijenlere karşı oluşan antikorların tespitinde
kullanılır.

• Hızlı tanı

• Özgüllük ve duyarlılıkları düşük

Direkt hemaglutinasyon testleri

• Soğuk aglutinasyon testi

• Heterofil antikor (Paul Bunnel)

testleri
Direkt hemaglutinasyon

• Örn; Soğuk aglutinasyon testi; Mycoplasma

pneumoniae enfeksiyonlarında, insan
eritrositlerini soğukta aglutine eden soğuk
aglutininlerin tespitinde kullanılır.

• Örn; Paul Bunnel testi; Akut enfeksiyoz

mononükleozda koyun eritrositlerini aglutine
eden heterofil antikorların tespitinde kullanılır.
 İndirekt (Pasif) Hemaglutinasyon (IHA)
• Antikor saptanmasında kullanılır

• 96 kuyucuklu U tabanlı pleytlerde uygulanır

• Çeşitli antijenler (bakteriyel, fungal, viral, paraziter)

tannik asit ile eritrosit yüzeyine bağlanır
(duyarlılaştırma)

• Hasta serumu üzerine duyarlılaştırılmış eritrositler

eklenir.

• Pozitiflik hemaglutinasyon, negatiflik düğme gibi

çökme
İndirekt hemaglutinasyon testi (IHA)
IHA
• Her testte
• Hasta serumu kontrolü –
• Eritrosit kontrolü +

• Hasta serumunda kontrolünde

hemaglutinasyon olması +
Hemaglutinasyon
Hemaglutinasyon önlenim testi
• Hasta serumu sulandırımları yapılır
• Virus antijeni eklenir
• 1 saat beklenir
• Virusun aglutine ettiği eritrosit
süspansiyonu eklenir
• Özgül antikor varsa hemaglutinasyon
önlenir
• Eritrositler kendiliğinden çöker
Hemaglutinasyon önlenim (inhibisyon) testi

• Bazı viruslar
hemaglutinasyon (+)
• Kabakulak, kızamık,
parainfluenzae 1-4,
RSV, Rubella,
İnfluenza, arboviruslar,
adenovirus, reovirus…
• Bu viruslara karşı özgül
antikor varlığı
araştırılır.
• Virusla enfekte hücre

• Eritrositlerin bağlanması
 Eritrosit
Virusa spesifik antikorlar
Viral antijenler

1 3

2 4
• https://www.youtube.com/watch?v=6A
9JFaeU7Io

• https://www.youtube.com/watch?v=EM
ThHM-YD5k
TEŞEKKÜRLER