Tạp chí Môi trường quốc tế

Các chất chuyển hóa của este hữu cơ photphat trong nước tiểu ở Hoa Kỳ:
sự thay đổi nồng độ theo thời gian và đánh giá mức độ phơi nhiễm
Yu Wang , Wenhui Li , María Pilar Martínez-Moral , Hongwen Sun ,
a,b a,c a b

Kurunthachalam Kannan a,d,*

a
Trung tâm Wadsworth, Bộ Y tế Bang New York, Albany, New York 12201, Hoa Kỳ
b
Phòng thí nghiệm trọng điểm của MOE về các quá trình ô nhiễm và tiêu chí môi trường, Trường Cao đẳng Khoa
học và Kỹ thuật Môi trường, Đại học Nam Đài, Thiên Tân 300350, Trung Quốc
c
Trường Kỹ thuật Xây dựng và Môi trường, Đại học Khoa học và Công nghệ, Bắc Kinh 100083, Trung Quốc
d
Khoa Khoa học Sức khỏe Môi trường, Trường Y tế Công cộng, Đại học Bang New York tại Albany, New York
12201, Hoa Kỳ

Từ khóa: Tóm tắt:

Các este hữu cơ photphat (OPE) được sử dụng rộng rãi làm chất chống cháy và chất làm
Este hữu cơ photphat dẻo trong các sản phẩm tiêu dùng, góp phần làm cho con người được tiếp xúc rộng rãi.
Chất chuyển hóa trong nước tiểu Các chất chuyển hóa OPE diester trong nước tiểu đã được sử dụng làm dấu ấn sinh học
Sự thay đổi theo thời gian về mức độ phơi nhiễm của con người với các hóa chất này. Tuy nhiên, người ta còn biết
Đánh giá phơi nhiễm
ICC
rất ít về sự xuất hiện và sự thay đổi nồng độ theo thời gian trong nước tiểu của các chất
chuyển hóa OPE ở người. Trong nghiên cứu này, 11 chất chuyển hóa OPE được xác định
trong 213 mẫu nước tiểu được thu thập từ 19 tình nguyện viên từ Albany, New York,
Hoa Kỳ, cách nhau 3 ngày trong 5 tuần để nghiên cứu sự thay đổi nồng độ theo thời gian
trong nước tiểu. Diphenyl phosphate (DPHP) và bis (1,3- dichloro-2-propyl) phosphate
(BDCIPP) là các chất chuyển hóa OPE chính, được phát hiện trong tất cả các mẫu nước
tiểu ở nồng độ đã điều chỉnh trọng lượng riêng (SG) (trung bình hình học, GM) tương
ứng là 1060 và 414 pg / mL và nồng độ điều chỉnh creatinine (Cr) (GM) là 404 và 156 ng
/ g. Sự thay đổi về nồng độ giữa các ngày của chất chuyển hóa OPE trong nước tiểu ở 19
người được đánh giá bằng hệ số tương quan nội hàm (ICC). Sự thay đổi về nồng độ chất
chuyển hóa OPE giữa các ngày được điều chỉnh bằng Cr (ICC: 0,31–0,67) thấp hơn so
với nồng độ được điều chỉnh SG (ICC: 0,19–0,71) và nồng độ trong nước tiểu không
điều chỉnh (ICC: 0,24–0,74). Nồng độ BDCIPP (ICC: 0,68) và bis (2-chloroethyl)
phosphate (BCEP) (ICC: 0,67) cho thấy độ tin cậy từ trung bình đến cao trong khoảng
thời gian lấy mẫu, trong khi chín chất chuyển hóa OPE khác thể hiện độ tin cậy trung
bình (ICC: 0,31 –0,55). Các mẫu nước tiểu được phân loại theo giới tính, tuổi tác, dân
tộc và chỉ số khối cơ thể (BMI).2) so với nữ và các loại BMI khác (p < 0,01). ICC tương
đối cao, cho thấy sự thay đổi giữa các ngày thấp, ở nam (ICC: 0,35–0,71) từ 30–40 tuổi
(ICC: 0,34–0,87) với BMI bình thường (ICC: 0,28– 0,64). Lượng tiếp xúc hàng ngày với
OPE được ước tính từ nồng độ trong nước tiểu của các chất chuyển hóa OPE tương ứng.
Liều lượng ước tính của triphenyl phosphate (TPHP) và triethyl phosphate (TEP), dựa
trên nồng độ trung bình trong nước tiểu của các chất chuyển hóa của chúng, là 19,4 và
24,0 ng / kg bw/ ngày, và lượng tiếp xúc với tổng OPE được ước tính là 65,3 ng / kg bw /
ngày. Nhìn chung, kết quả của chúng tôi cho thấy ICC cao đối với nồng độ nước tiểu
được điều chỉnh bằng Cr của 11 chất chuyển hóa OPE trong nước tiểu.

1. Giới thiệu

Các este hữu cơ photphat (OPE) nhận được sự cháy và chất làm dẻo trong các sản phẩm
quan tâm đáng kể trong những năm gần đây tiêu dùng, bao gồm đồ nội thất, dệt may và
do được sử dụng rộng rãi làm chất chống điện tử (van der Veen và de Boer, 2012).
OPE là chất thay thế cho chất chống cháy
brom hóa (BFR) (Wei và cộng sự, 2015) và
đã được báo cáo là có trong không khí trong
nhà (Fromme và cộng sự, 2014; Hartmann
và cộng sự, 2004), khí quyển (Rauert và
cộng sự, 2018), bụi (Wang và cộng sự,
2018; Xu và cộng sự, 2016; Zheng và cộng
sự, 2015), đất (Cui và cộng sự, 2017; Wang
và cộng sự, 2018), trầm tích (Wang và cộng
sự, 2017), nước (Kim và cộng sự, 2017;
Kim và Kannan, 2018; Lee và cộng sự,
2016), và sinh vật (Hallanger và cộng sự,
2015). Các nghiên cứu về chất độc đã cho
thấy việc phơi nhiếm OPE với các tác động
về sinh sản và phát triển (Behl và cộng sự,
2015), gây độc gen (Du và cộng sự, 2016),
và các ảnh hưởng nội tiết (Chen và cộng sự,
2015). Do đặc tính gây ung thư và độc tố
thần kinh của OPEs (van der Veen và de
Boer, 2012), việc con người tiếp xúc với các
hóa chất này là một vấn đề đáng quan tâm.
Sau khi tiếp xúc, OPE, chẳng hạn như
triphenyl phosphate (TPHP) và tris (1,3-
dichloro-2-propyl) phosphate (TDCIPP),
được thủy phân trong cơ thể người để tạo ra
các chất chuyển hóa diester, được bài tiết
qua nước tiểu (Cequier và cộng sự, 2015).
Do đó, các chất chuyển hóa OPE diester
trong nước tiểu đã được sử dụng làm dấu ấn
sinh học của phơi nhiễm OPE (Dodson và
cộng sự, 2014;Hoffman và cộng sự, 2014).
Các nghiên cứu gần đây đã báo cáo sự xuất
hiện của các chất chuyển hóa OPE trong
nước tiểu ở trẻ em (Butt và cộng sự, 2016;
Chen và cộng sự, 2018; Zhang và cộng sự,
2018), người lớn (Meeker và cộng sự, 2013;
Lu và cộng sự, 2017), và phụ nữ mang thai
(Romano và cộng sự, 2017) từ khắp nơi trên
thế giới. Diphenyl photphat (DPHP), dietyl
photphat (DEP) và bis (1,3-dichloro-2-
propyl) photphat (BDCIPP) là các chất
chuyển hóa OPE chiếm ưu thế được báo cáo
trong các nghiên cứu sinh học ở người (Anh
và cộng sự, 2018; Ospina và cộng sự, 2018;
Sun và cộng sự, 2018). Trên cơ sở nồng độ
các chất chuyển hóa OPE diester trong nước
tiểu, lượng bài tiết nước tiểu hàng ngày và
phần mol của chất chuyển hóa được bài tiết,
liều lượng phơi nhiễm của con người với
các triesters OPE ban đầu đã được ước tính
(Fromme và cộng sự, 2014). Ví dụ, phơi
nhiễm với tri-n-butyl phosphat (TNBP) ở trẻ
em được ước tính từ các nghiên cứu dibutyl
phosphat (DNBP) trong nước tiểu với liều
tiếp xúc với TNBP là 1,03 μg / kg bw / ngày
(Fromme và cộng sự, 2014). Nói chung, các
nghiên cứu báo cáo sự thay đổi hàng ngày
về nồng độ chất chuyển hóa OPE trong
nước tiểu là rất hiếm. Những nghiên cứu
như vậy là cần thiết để đánh giá giá trị của
dữ liệu được thu thập và phân tích từ một
mẫu nước tiểu riêng lẻ đối với những nghiên
cứu dịch tễ học. Tương quan nội hàm (ICC)
có thể được sử dụng để đánh giá tính nhất
quán hoặc độ tái lập của các phép đo định
lượng được thực hiện theo thời gian trên trục
dọc ở cùng một cá thể.
Thời gian bán hủy của OPE ở người
không được biết rõ, và nồng độ các chất
chuyển hóa OPE diester trong nước tiểu có
thể khác nhau ở cùng một đối tượng, tùy
thuộc vào thời gian lấy mẫu. Sự thay nồng
độ theo thời gian là dấu ấn sinh học như vậy
có thể tạo ra sự không chắc chắn trong đánh
giá phơi nhiễm (Perrier và cộng sự, 2016).
Một số nghiên cứu đã kiểm tra khả năng tái
lặp và sự thay đổi giữa các ngày của nồng
độ bisphenol và chất chuyển hóa phthalate
trong nước tiểu (Dewalque và cộng sự,
2015;Vernet và cộng sự, 2018). Sự thay đổi
theo thời gian ở hai nồng độ chất chuyển
hóa OPE trong nước tiểu, BDCIPP và
DPHP, đã được báo cáo (Hoffman và cộng
sự, 2014; Hoffman và cộng sự, 2015;
Meeker và cộng sự, 2013). Các nghiên cứu
đã báo cáo sự thay đổi về nồng độ bis (2-
chloroethyl) phosphate (BCEP) trong nước
tiểu (Romano và cộng sự, 2017) và bis
(metylphenyl) photphat (BMPP) (Tao và
cộng sự, 2018). Tuy nhiên, sự biến thiên
nồng độ theo thời gian của DEP, DNBP, bis
(butoxyethyl) phosphate (BBOEP) và bis
(1-chloro-2-propyl) phosphate (BCIPP),
chưa được nghiên cứu, đặc biệt là ở những
người trưởng thành khỏe mạnh. Trong
nghiên cứu này, 11 chất chuyển hóa OPE
được phân tích trong 213 mẫu nước tiểu
hàng ngày, được thu thập ba ngày một lần
trong năm tuần từ 19 tình nguyện viên ở
Albany, New York, Hoa Kỳ, để nghiên cứu
sự thay đổi nồng độ giữa các ngay trong
nước tiểu và ước tính mức độ phơi nhiễm
OPE.
2. Vật liệu và phương pháp
2.1. Dung dịch chuẩn và thuốc thử
DEP được mua từ AccuStandard (New
Haven, CT, US). Dipropyl phosphate
(DPRP), DNBP, diisobutyl phosphate
(DIBP), BBOEP, bis (2- ethylhexyl)
phosphate (BEHP), BCEP, BCIPP,
BDCIPP, DPHP và BMPP được mua từ
Toronto Research Chemicals (North York,
ON, Canada). Chín hợp chất OPE được sử
dụng làm chất nội chuẩn, bao gồm dibutyl
phosphate-d18 (DNBPd18), diisobutyl
phosphate-d14 (DIBP-d14), bis
(butoxyethyl) phosphate-d8 (BBOEP-d8),
bis (2- ethylhexyl) phosphate -d34 (BEHP-
d34), bis (2-cloetyl) photphat-d8 (BCEP-
d8), bis (1-clo-2-propyl) photphat-d12
(BCIPP-d12), bis (1,3-điclo- 2-propyl)
photphat-d10 (BDCIPP-d10), diphenyl
photphat-d10 (DPHPd10) và bis
(metylphenyl) photphat-d14 (BMPP-d14).
Tất cả các chất nội chuẩn đều được mua từ
Toronto Research Chemicals. Tất cả các
dung dịch chuẩn được chuẩn bị trong
axetonitril HPLC-grade. Nước cất HPLC-
grade (JT Baker, Centre Valley, PA, US),
acetonitril (JT Baker), và methanol (Fisher
Scientific, Fair Lawn, NJ, US) được sử
dụng trong phân tích. Các đặc tính hóa lý
của hóa chất được cung cấp trong bảng S1
2.2 Thu thập mẫu
Các mẫu được lấy từ các tình nguyên
viên được thu thập từ tháng 2 đến tháng 4
năm 2018 từ 19 tình nguyện viên khỏe
mạnh sống ở Albany, New York, Hoa Kỳ.
Mỗi tình nguyện viên cung cấp thông tin về
giới tính (nam, n = 11; nữ, n = 8), tuổi (33,8
± 12 tuổi), dân tộc (người Châu Á, n = 13;
người da trắng, n = 6), trọng lượng cơ thể
(67,6 ± 17 kg), chiều cao (1,68 ± 0,1 m), và
thói quen hút thuốc (không có ai là người
hút quá nhiều thuốc) (Bảng S2). Những tình
nguyện có học vấn tốt với> 89% có bằng Cử
nhân hoặc cao hơn và không có trường hợp
nào cho thấy có bất kỳ sự tiếp xúc nghề
nghiệp nào với OPE. Các mẫu lưu trữ, ban
đầu được thu thập cho một nghiên cứu khác
và được bảo quản ở -20 ° C. Mỗi tình
nguyện viên lấy mẫu nước tiểu sáng sớm 3
ngày một lần trong 5 tuần để trong các
thùng chứa bằng polypropylene (PP) đã
được làm sạch trước bằng methanol. Vì lý
do cá nhân, khoảng thời gian thu thập của
một vài mẫu dao động từ 2 đến 10 ngày, và
số lượng mẫu của mỗi tình nguyện viên dao
động từ 6 đến 14. Tổng cộng, 213 mẫu nước
tiểu đã được phân tích trong nghiên cứu này.
Hội đồng đánh giá của Bộ Y tế Bang New
York đã phê duyệt để phân tích các mẫu.
2.3 Chiết
Các mẫu nước tiểu được chiết theo
phương pháp đã được công bố trước đây
(Sun và cộng sự, 2018). Tóm tắt, các mẫu
nước tiểu (1 mL) được trộn với hỗn hợp
chất nội chuẩn (2 ng mỗi mẫu), và điều
chỉnh pH bằng cách thêm 1 mL đệm amoni
axetat (10mM, pH = 5,0). Sau khi lắc1 phút,
mẫu được đựng vào lọ màu nâu STRATA-
X-AW (60 mg 3 cm3; Phenomenex Inc.,
Torrance, CA, US) các mẫu được trung hòa
với 2,0 mL metanol và 2,0 mL nước. Sau
khi nạp mẫu vào lọ đựng mẫu dùng 1ml
nước cất tráng lọ, và chất đượ hòa tan bằng
2 mL amoni hydroxit 5% trong MeOH. Các
chất được cô đặc đến gần khô dưới dòng
nitơ nhẹ và được thêm bằng 100 μL
axetonitril. Sau khi ly tâm (bộ lọc nylon
0,22 μm, Spin-X; Costar, Corning Inc.,
Corning, NY, US), chuyển mẫu phân tích
bằng HPLC-MS / MS.
2.4. Thiết bị phân tích
Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC, dòng
Agilent 1260; Agilent Technologies Santa
Clara, CA, US), kết hợp với khối phổ (API
QTRAP 4500, ESI-MS / MS; Applied
Biosystems, Foster City, CA. US), được sử
dụng trong việc xác định và định lượng các
2.5 Đảm bảo chất lượng (QA) và kiểm soát chất lượng (QC)
Các chất chuẩn hiệu chuẩn ở nồng độ trong
khoảng từ 0,01 đến 100 ng / mL (với hỗn
hợp chất nội chuẩn 20 ng / mL) được sử
dụng trong tính toán nồng độ hóa chất trong
mẫu. Hệ số tương quan hồi quy của đường
chuẩn> 0,99. Các mẫu trắng được phân tích
để kiểm tra mức độ nhiễu nền. DEP, DNBP,
DIBP, BBOEP, BEHP và DPHP được tìm
thấy ở dạng vết trong mẫu trắng (2,1-9,8
ng / L). Nồng độ chất chuyển hóa OPE
trong các mẫu phân tích trừ mẫu trắng. Đối
với
những chất phân tích không được tìm thấy
trong các mẫu trắng, các giới hạn phát hiện
của phương pháp (MDL) được tính theo tỷ
hợp chất cần phân tích. Mười một chất
chuyển hóa diester OPE và 9 chất nội chuẩn
được phân tách bằng cột HILIC (100 mm ×
2,1 mm, 5 μm; Thermo, Waltham, MA, US)
được kết hợp với cột tách Betasil C18 (20
mm × 2,1 mm, 5 μm; Thermo). Pha động
bao gồm nước HPLC-grade (10 mM amoni
axetat): metanol (2: 3 v / v) (A) và
axetonitril (B), được sử dụng với tốc độ
dòng 200 μL / phút. Lưu lượng dòng pha
động ban đầu được đặt ở 96,5%. Sau khi giữ
2 phút, giảm xuống 88,5% trong 1,5 phút và
sau đó xuống 86,0% trong 3 phút, giữ trong
8. 5 phút trước khi về điều kiện ban đầu
trong 0,5 phút và để cân bằng trong 9,5
phút, với tổng thời gian chạy là 25 phút.
Chế độ ion hóa âm điện cực (ESI) và nhiều
chế độ theo dõi phản ứng (MRM) được sử
dụng để xác định và định lượng các chất
chuyển hóa OPE. Các thông số MS /MS chi
tiết được sử dụng trong phân tích các chất
chuyển hóa OPE được thể hiện trong Bảng 3
lệ tín hiệu trên nhiễu là 10 (của điểm thấp
nhất của chất chuẩn hiệu chuẩn) bằng cách
tính đến khối lượng mẫu và hệ số nồng độ .
Đối với những chất phân tích được tìm thấy
trong các mẫu trắng theo quy trình, MDL
được tính bằng ba lần độ lệch chuẩn (SD)
của các giá trị mẫu trắng và các yếu tố thể
tích và nồng độ mẫu được tính đến. Độ thu
hồi
chất trong nước tiểu ở mức cao (25
μg / L) và thấp (5 μg / L) lần lượt là 74,8–
104% và 84,5–113%. Độ thu hồi của các
chất nội chuẩn trong mỗi mẫu là từ 80% đến
108%. Chi tiết thêm về các thông số QA /
QC được trình bày trong Bảng S4
 Bảng 1: Sự phân bố nồng độ chất chuyển hóa organophosphate ester (OPE) được điều
chỉnh theo trọng lượng riêng (SG) và creatinine (Cr) được điều chỉnh trong nước tiểu (n =
213) được thu thập 3 ngày một lần trong 5 tuần từ 19 người đến từ Albany, New York,
Hoa Kỳ

ND: không phát hiện

GM: trung bình hình học
AM: trung bình số học
DF: tần suất phát hiện
MDL: giới hạn phát hiện phương pháp

2.6 Phân tích thống kê

Nồng độ chất chuyển hóa OPE trong nước
tiểu được hiệu chỉnh trọng lượng riêng (SG)
và creatinine (Cr). Chỉ các phân tích có tần
số phát hiện (DF)> 50% mới được xem xét
trong phân tích thống kê. Giá trị 1/2 MDL
được sử dụng cho những hợp chất nằm dưới
giới hạn phát hiện (Anh và cộng sự, 2018;
Sun và cộng sự, 2018) và không phát hiện
(nd) được gán giá trị bằng không. Kiểm tra
thống kê phi tham số (Mann-WhitneyU thử
nghiệm và Kruskal-Wallis H test) được sử
dụng để so sánh sự khác biệt về nồng độ
chất chuyển hóa OPE riêng lẻ với các nhóm
như giới tính, tuổi, chỉ số khối cơ thể (BMI;
bình thường: 18,5–25, thừa cân: 25,1–30,
béo phì:> 30) và dân tộc. Phân tích thứ hạng
tương quan của Spearman được sử dụng để
kiểm tra các mối quan hệ giữa nồng độ chất
chuyển hóa OPE trong nước tiểu. Thông kê
có ý nghĩa đặt p < 0,05. Tất cả các phân tích
thống kê được thực hiện bằng phần mềm
SPSS (Phiên bản 22.0, SPSS Inc., Armonk,
 NY, US). Sự thay đổi theo thời gian về nồng
độ trong nước tiểu của 11 chất chuyển hóa
OPE được đánh giá bằng hệ số tương quan
nội hàm(ICC) bằng cách sử dụng mô hình
ANOVA (Vernet và cộng sự, 2018). Tất cả
các mẫu nước tiểu của mỗi tình nguyện viên
(6–14 mẫu nước tiểu mỗi người) được sử
dụng để tính ICC. Giá trị ICC gần bằng 0
cho thấy sự thay đổi giữa các ngày cao và ít
độ tin cậy hơn để dự đoán nồng độ trong
một khoảng thời gian, trong khi các giá trị
gần bằng một cho thấy ít biến đổi hơn và độ
tin cậy cao để dự đoán nồng độ theo thời
gian (ICC> 0,80 được coi là cao, 0,40–0,79
là trung bình và <0,40 là độ tin cậy thấp)
(Sakhi và cộng sự, 2018). Giá trị ICC phủ
định không thể tính được trong mô hình
hiện tại (Vernet và cộng sự, 2018). Để mô tả
tính chất biến đổi giữa các cá nhân, chúng
tôi định nghĩa ICC là tỷ lệ giữa phương sai
nội bộ cá nhân với tổng phương sai (tổng
phương sai giữa và phương sai nội bộ) và
được đánh giá bằng các mô hình tương tự
như đánh giá biến thiên theo thời gian. Liều
lượng phơi nhiễm của OPE ban đầu (DP)
được tính toán từ nồng độ trong nước tiểu
của các chất chuyển hóa OPE. Các nghiên
cứu về động học gây độc và sự chuyển hóa
của các OPE còn hạn chế. Tỷ lệ bài tiết qua
nước tiểu của các chất chuyển hóa DNBP và
BDCIPP ở chuột tiếp xúc qua đường miệng
Hình 1. Sự thay đổi nồng độ theo thời gian được điều chỉnh bằng Cr (ng / g) của DPHP trong
nước tiểu được thu thập 3 ngày một lần từ 19 cá nhân được phân nhóm theo giới tính, tuổi tác,
dân tộc và BMI (n = số người tham gia). Các dấu chấm biểu thị trung bình số học và râu biểu thị
độ sai chuẩn (SE).
đã được báo cáo (Lynn và cộng sự, 1981;
Suzuki và cộng sự, 1984). Phần mol (FUE)
giá trị DNBP bài tiết qua nước tiểu là 0,18
(Suzuki và cộng sự, 1984) và BDCIPP là
0,63 (Lynn và cộng sự, 1981) đã được sử
dụng để tính toán DP của các chất chuyển
hóa OPE khác theo phương trình (Phương
trình (1)) (Chen và cộng sự, 2018; Fromme
và cộng sự,2014)
Trong đó: Cm là nồng độ chưa điều chỉnh
của chất chuyển hóa OPE trong nước tiểu
(nG/mL) và UV là lượng bài tiết nước tiểu
excr
hàng ngày ở mức 20 mL / kg bw / ngày đối
với người lớn và 22.2 mL / kg bw/ ngày đối
với trẻ em (Chen và cộng sự, 2018;
Wittassek và cộng sự, 2011). FUE là phần mol
của chất chuyển hóa trong nước tiểu được
bài tiết (0,18 đối với DEP, DPRP, DNBP,
DIBP, BBOEP và BEHP; 0,63 đối với
BCEP, BCIPP, BDCIPP, DPHP và BMPP)
(Lynn và cộng sự, 1981; Suzuki và cộng sự,
1984), và MWP và MWNS lần lượt là trọng
lượng phân tử của các chất chuyển hóa ban
đầu và các chất chuyển hóa tương ứng.
 3. Kết quả và thảo luận
3.1. Nồng độ của các chất chuyển hóa OPE trong nước tiểu
Trong số 11 chất chuyển hóa OPE được đo,
DEP, DIBP, BDCIPP và DPHP được tìm
thấy trong tất cả các mẫu nước tiểu (DF =
100%), tiếp theo là DNBP, BEHP, BBOEP,
BCEP, DPRP và BCIPP, được tìm thấy ở
mức DF là 64% đến 98% (Bảng 1). BMPP
chỉ được tìm thấy trong <19% số mẫu, và do
đó, hợp chất này đã bị loại bỏ khỏi các phân
tích thống kê sâu hơn. Nồng độ trong nước
tiểu của các chất chuyển hóa OPE được báo
cáo trong các nghiên cứu trước đây là giá trị
SG đã được điều chỉnh hoặc chưa được điều
chỉnh. Chúng tôi đã so sánh nồng độ OPE
được điều chỉnh SG của chúng tôi với nồng
độ được báo cáo trong tài liệu. Nồng độ
(trung bình hình học; GM) của DPHP (1060
pg / mL), BDCIPP (414 pg / mL), BCEP
(354 pg / mL), và DEP (348 pg / mL) cao
hơn
đáng kể so với các chất chuyển hóa OPE
khác được đo lường trong nghiên cứu này
(Bảng 1). BCIPP được tìm thấy ở nồng độ
83,8 pg / mL, và các chất chuyển hóa OPE
còn lại được tìm thấy dưới 50 pg / mL. Một
số nghiên cứu trước đây đã báo cáo sự
chiếm ưu thế của DPHP và BDCIPP trong
các mẫu nước tiểu (Ospina và cộng sự,
2018; Thomas và cộng sự, 2017; Tao và
cộng sự, 2018). Trong nghiên cứu của
chúng tôi, nồng độ DPHP trong nước tiểu
(1060 pg / mL) cao hơn so với nồng độ
được báo cáo ở người lớn và trẻ em ở Trung
Quốc (32,4–280 pg/mL) (Sun và
cộng sự, 2018; Tao và cộng sự, 2018) (Bảng
S5), có thể so sánh với báo cáo cho
người lớn Hoa Kỳ (1200 pg / mL) (Butt và
cộng sự, 2016), và trẻ em Hoa Kỳ
(845 pg / mL) (Ospina và cộng sự, 2018) và
Na Uy (1000 pg / mL) (Cequier và cộng sự,
2015). Một số nghiên cứu báo cáo nồng độ
DPHP trong nước tiểu cao hơn đáng kể ở
người lớn (1800–2990 pg / mL) (Preston và
cộng sự, 2017) và trẻ em (3000–8200 pg /
mL) ( Butt và cộng sự, 2014; Thomas và
cộng sự, 2017) từ nồng độ BDCIPP của Hoa
Kỳ
đo được trong nghiên cứu này (414 pg / mL)
tương đương với nồng độ được báo
cáo trước đây đối với người lớn ở Hoa Kỳ
(130–408 pg / mL) (Carignan và cộng sự,
2013; Meeker và cộng sự, 2013) và trẻ em
từ miền Trung Trung Quốc (230 pg / mL)
(Tao và cộng sự, 2018) nhưng thấp hơn
đáng kể so với tỷ lệ được báo cáo ở phụ nữ
(2400–3300 pg / mL) (Butt và cộng sự,
2014; Butt và cộng sự, 2016) và trẻ em
(2700–10,900 pg / mL; 856 pg / mL) (Butt
và cộng sự, 2016; Thomas và cộng sự,
2017; Ospina và cộng sự, 2018) ở Hoa Kỳ
Nồng độ trong nước tiểu của các chất
chuyển hóa OPE không phải DPHP và
BDCIPP hiếm khi được báo cáo trong y
văn.
Một số nghiên cứu báo cáo nồng độ DEP,
DNBP, BBOEP và BCEP trong mẫu nước
tiểu (Dodson và cộng sự, 2014; Petropoulou
và cộng sự, 2016; Sun và cộng sự,
2018;Ospina và cộng sự, 2018). Nồng độ
DEP (348 pg / mL) được xác định trong
nghiên cứu của chúng tôi tương tự với nồng
độ được báo cáo từ Trung Quốc (376
pg / mL) (Sun và cộng sự, 2018), trong khi
nồng độ DNBP (16,8 pg / mL) và BCEP
(354 pg / mL) thấp hơn nồng độ được báo
cáo ở Trung Quốc (Chen và cộng sự,
2018) và Mỹ (Ospina và cộng sự, 2018).
Sự xuất hiện của nồng độ DPHP cao trong
các mẫu nước tiểu cho thấy sự tiếp xúc với
TPHP hợp chất gốc của nó, và các hợp chất
khác được chuyển hóa thành DPHP.TPHP
và 2-ethylhexyl diphenyl phosphate
(EHDPP) được tìm thấy trong các mẫu bụi
trong nhà ở Hoa Kỳ (Clark và cộng sự,
2017; Hoffman và cộng sự, 2017a). Hơn
nữa, sự chuyển hóa trao đổi chất của một số
aryl-OPE, chẳng hạn như t-butylphenyl
diphenyl phosphate (BPDP), cresyl diphenyl
phosphate (CDDP), isodecyl diphenyl
phosphate (IDDP) và resorcinol bis
(diphenyl phosphate) (RDP), được sử dụng
rộng rãi trong bọt xốp polyurethane, chất
lỏng thủy lực và nhựa polyvinyl clorua
(PVC) (van der Veen và de Boer, 2012), có
thể sinh ra DPHP. Nói chung, tris (2-
chloroisopropyl) photphat (TCIPP) và tris
(2-butoxyetyl) photphat (TBOEP) được tìm
thấy ở nồng độ cao nhất trong chất nền phi
sinh học (Wei và cộng sự, 2015), trong khi
các chất chuyển hóa của chúng, BCIPP và
BBOEP, được tìm thấy ở nồng độ thấp hơn
nồng độ của DPHP trong nước tiểu. Ngược
lại, triethyl phosphate (TEP) và TDCIPP
được tìm thấy ở nồng độ vừa phải trong chất
nền phi sinh học, nhưng các chất chuyển hóa
của chúng DEP và BDCIPP lại có nhiều
trong mẫu nước tiểu. ArylOPE bị thủy phân
nhanh hơn so với alkyl- và clo hóa (Su và
cộng sự, 2016); hơn nữa, BDCIPP bài tiết
qua nước tiểu cao hơn (0,63) so với DNBP
(0,18) (Lynn và cộng sự, 1981; Suzuki và
cộng sự, 1984). Do đó, sự khác biệt trong
cấu hình của OPE ban đầu trong các mẫu
phi sinh học và các chất chuyển hóa trong
nước tiểu cho thấy sự khác biệt trong
chuyển hóa trao đổi chất và bài tiết nước
tiểu. Nồng độ trong nước tiểu được điều
chỉnh bằng Cr của các chất chuyển hóa OPE
(Hình 1, Hình 2, Bảng S6) được so sánh
giữa các nhóm giới tính, dân tộc, tuổi và
BMI. Nồng độ DPHP trong nước tiểu của
nữ giới (p < 0,001), BDCIPP (p < 0,001) và
DEP (p < 0,001) cao hơn đáng kể so với
nam giới, trong khi nồng độ BEHP (p =
0,925) và BCIPP (p = 0,259) là tương tự
giữa nữ và nam. Nồng độ DPHP trong nước
tiểu (p < 0,001) và BDCIPP (p < 0,001) của
người da trắng cao hơn đáng kể so với
người châu Á. Trong số các nhóm tuổi, các
cá nhân từ 20 đến 30 tuổi có nồng độ DPHP
và BDCIPP trong nước tiểu cao hơn đáng kể
(p < 0,05) so với các nhóm tuổi khác.
Tương tự, các nồng độ chất chuyển hóa
OPE khác nhau đáng kể giữa ba loại BMI (P
≤ 0,001–0,023). Nồng độ DPHP trong nước
tiểu (p < 0,001), BDCIPP (p < 0,001) và
BCIPP (p < 0,001) ở những người béo phì
(BMI> 30 kg / m2) cao hơn so với những
người có BMI bình thường (18,5–25 kg /
m2), trong khi nồng độ DEP trong nước tiểu
(p = 0,012), BBOEP (p = 0,023) và BEHP
(p = 0,004) ở người béo phì thấp hơn những
người có BMI bình thường.

Hình 2. Sự thay đổi về nồng độ theo thời gian được điều chỉnh bằng Cr (ng / g) của BDCIPP
trong nước tiểu được thu thập 3 ngày một lần từ 19 cá nhân được phân nhóm theo giới tính,
tuổi tác, dân tộc và BMI (n = số người tham gia). Các dấu chấm biểu thị trung bình số học và
râu biểu thị độ sai chuẩn (SE)

3.2. Sự thay nồng độ theo thời gian trong nước tiểu của các chất chuyển hóa OPE

Các ICC được tính toán cho nồng độ chất chuyển hóa OPE được đo trong các mẫu
nước tiểu được thu thập theo trục dọc (ba
ngày một lần) từ 19 người trong năm tuần
(bảng 2). Sự thay đổi giữa các ngày đối với
nồng độ chất chuyển hóa OPE chưa điều
chỉnh là vừa phải đối với phần lớn các hợp
chất được phân tích (ICCs = 0,40–0,74),
ngoại trừ DPRP (0,24; KTC 95%: 0,09–
0,52), DIBP (0,25; KTC 95%: 0,10–0,53),
và BEHP (0,20; KTC 95%: 0,06–0,48), cho
thấy sự thay đổi nồng độ cao trong giai đoạn
lấy mẫu (bảng 2). Giá trị ICC cao hơn nhiều
được quan sát đối với BDCIPP (0,69; KTC
95%: 0,51–0,87) và BCIPP (0,74; KTC
95%: 0,0,57–0,89), điều này cho thấy nồng
độ của các hợp chất này thay đổi rất ít theo
thời gian. Nhìn chung, những kết quả này
chỉ ra rằng các chất chuyển hóa OPE trong
nước tiểu dạng vết trong khoảng thời gian 5
tuần đảm bảo độ tin cậy từ trung bình đến
cao (ngoại trừ DPRP, DIBP và BEHP).
Nồng độ hiệu chỉnh SG và hiệu chỉnh Cr
của các chất chuển hóa OPE được trình bày
trong bảng 2. ICC của nồng độ chất chuyển
hóa OPE không cải thiện đáng kể sau khi
điều chỉnh SG, trong khi ICC của DEP
(0,19; 95% CI: 0,05–0,46) và DIBP (0,16;
95%CI: 0,03–0,42) giảm. Tuy nhiên, việc
điều chỉnh Cr của nồng độ chất chuyển hóa
OPE đã cải thiện ICC của DPRP, DIBP và
BEHP. Tương quan thứ hạng đáng kể của
Spearman giữa nồng độ chất chuyển hóa
OPE và creatinine giải thích lý do cải thiện
ICCs sau khi điều chỉnh Cr (Bảng S7). Để
phân tích dữ liệu sâu hơn, chúng tôi sử dụng
nồng độ chuẩn hóa Cr của các chất chuyển
hóa OPE, được thảo luận bêndưới.
Giữa hai giới tính, ICC của nồng độ chất
chuyển hóa OPE ở nam là> 0,35, trong khi
của DEP, DPRP, DIBP, và BEHP ở nữ là từ
0,05 đến 0,19, cho thấy nồng độ trong nước
tiểu của các chất chuyển hóa OPE ở nữ thay
đổi nhiều hơn nam (Bảng S8). Nồng độ OPE
trong nước tiểu ở người Châu Á cho thấy sự
thay đổi cao hơn (ICC: 0,20–0,26) so với
người da trắng (ICC: 0,32–0,67). Không có
sự khác biệt đáng kể (p = 0,437) về sự thay
đổi nồng độ chất chuyển hóa OPE giữa các
nhóm tuổi từ 30–40 (ICC: 0,34–0,87) và>
40 tuổi (ICC: 0,17–0,70). Tuy nhiên, nồng
độ DEP (0,03; KTC 95%: 0–0,51), DPRP
(0,03; KTC 95%: 0–0,52) và BCIPP (0,05;
KTC 95%: 0–0,56) thể hiện sự thay đổi cao
hơn ở nhóm tuổi trong 20–30 tuổi. Những
người có BMI> 25 kg / m 2 cho thấy ICC
thấp đối với BBOEP (ICC: 0,04), điều này
cho thấy rằng những người thừa cân hoặc
béo phì có xu hướng thay đổi cao về nồng
độ chất chuyển hóa OPE trong nước tiểu.
Một số nghiên cứu đã kiểm tra sự thay đổi
theo thời gian về nồng độ phenol môi
trường trong nước tiểu (Koch và cộng sự,
2014; Vernet và cộng sự, 2018) và chất
chuyển hóa phthalate (Dewalque và cộng
sự, 2015; Fisher và cộng sự, 2015).
Sự thay đổi được tính toán về nồng độ chất
chuyển hóa OPE trong nước tiểu cao
hơn so với những báo cáo đối với bisphenol
A (ICC: 0,6, KTC 95%: 0,3–0,89), methyl
paraben (ICC: 0,84, KTC 95%: 0,69–1,0),
và triclosan ( ICC: 0,89, KTC 95%: 0,78–
1,0) (
Vernet và cộng sự, 2018). Sự biến thiên
theo thời gian trong mono-ethylhexyl
phthalate (MEHP) (ICC: 0,16–0,22, KTC
95%: 0,15–0,45) (Dewalque và cộng sự,
2015; Fisher và cộng sự, 2015) cao hơn so
với tìm thấy đối với các chất chuyển hóa
OPE trong nước tiểu. Theo hiểu biết của
chúng tôi, không có nghiên cứu nào trước
đây điều tra sự thay đổi giữa các ngày về
nồng độ trong nước tiểu của các chất
chuyển hóa OPE, ngoại trừ BDCIPP, DPHP
và BCEP. Các biến động giữa các ngày
được tính toán cho DPHP (ICC: 0,54, KTC
95%: 0,37–0,74) tương tự như các báo cáo
trong nước tiểu của phụ nữ mang thai (ICC:
 0,6, KTC 95%: 0,4–0,7) (Hoffman và cộng quả được báo cáo trong tài liệu (Hoffman và
sự, 2014), người lớn khỏe mạnh (ICC: 0,51, cộng sự, 2014;Meeker và cộng sự, 2013;
KTC 95%: 0,43–0,63) (Hoffman và cộng Romano và cộng sự, 2017). Nhìn chung
sự, 2015) và phụ nữ (ICC: 0,42, KTC 95%: nồng độ chất chuyển hóa OPE trong nước
0,36–0,50) (Romano và cộng sự, 2017) ở tiểu cho thấy độ tái lặp theo thời gian vừa
Hoa Kỳ tương tự, kết quả của chúng tôi đối phải và việc điều chỉnh Cr đã cải thiện sự tái
với ICC cho BCIPP tương đương với kết lặp.
Bảng 2: Sự thay đổi nồng độ giữa các ngày của chất chuyển hóa ester hữu cơ photphat trong
các mẫu được thu thập 3 ngày một lần trong 5 tuần từ 19 người

Tất cả các mẫu nước tiểu được thu thập 3 ngày một lần trong 5 tuần từ 19 cá thể.
ICC (hệ số tương quan nội hàm ) được tính toán từ nồng độ chất chuyển hóa OPE được biến đổi
theo log10.
CV = hệ số biến thiên.
SG = trọng lượng riêng.
Cr = creatinin.
CI = khoảng tin cậy.
3.3. Sự biến đổi nồng độ giữa các cá nhân và thành phần của các chất chuyển hóa
OPE
Phương sai giữa các cá thể (được Nồng độ DPHP và BDCIPP lần lượt chiếm
điều chỉnh bằng Cr) và hệ số biến thiên (CV 30–85% và 5–25% trong tổng nồng độ của
%) về nồng độ DEP, BDCIPP và DPHP 11 chất chuyển hóa (Hình S1). Thành phần
trong số 19 người là 207 (98%) ng / g, 270 cấu tạo của các chất chuyển hóa OPE tương
(107%) ng / g, và 620 (100%) ng / g, tương tự như báo cáo trước đó trong nước tiểu ở
ứng (Hình 3, Bảng S9). Nồng độ cao nhất Hoa Kỳ, với DPHP chiếm 35–41% tổng
của BCIPP (102 ng / g) và DPHP (1540 nồng độ (Dodson và cộng sự, 2014; Ospina
ng /g) được tìm thấy ở một cá nhân có BMI và cộng sự, 2018), và Úc (DPHP 84%), (Anh
cao nhất (Bảng S2). Nồng độ cao nhất của và cộng sự, 2018) nhưng khác với báo
DEP (391 ng / g), DPRP (28,3 ng / g), DNBP cáonTrung Quốc, nơi BCEP (60%) là chất
(24,7 ng / g), DIBP (72,1 ng / g) và BEHP chuyển hóa mạnh nhất (Chen và cộng sự,
(17,6 ng / g) được tìm thấy ở một phụ nữ da 2018). Sự khác biệt theo khu vực trong hồ sơ
trắng 56 tuổi với chỉ số BMI bình thường. thành phần chất chuyển hóa OPE trong nước
tiểu có thể chỉ ra các kiểu tiếp xúc khác
3.4. Đánh giá phơi nhiễm
Lượng tiếp xúc với OPE ban đầu được tính
toán dựa trên nồng độ chất chuyển hóa trong
nước tiểu chưa điều chỉnh (bảng số 3). Trung
vị và phân vị 95th tổng lượng phơi nhiễm
OPE lần lượt là 65,3 và 355 ng / kg thể trọng
/ ngày. Nữ (81,9 ng / kg thể trọng / ngày),
người da trắng (114 ng / kg thể trọng / ngày)
và những người béo phì (BMI> 30 kg /
tháng2) (165 ng / kg bw / ngày) cao hơn tổng.
Lượng phơi nhiễm OPE so với các loại khác.
Lượng tiếp xúc trung bình và phân vị 95th
của TEP lần lượt là 24,0 và 79,8 ng / kg thể
trọng / ngày, trong khi đó của TPHP là 19,4
và 118 ng / kg bw / ngày, cao hơn đáng kể so
với các OPE khác được phân tích. Sơn móng
tay đã được báo cáo là một nguồn phơi
nhiễm TPHP (Mendelsohn và cộng sự,
2016), có thể góp phần làm tăng mức phơi
nhiễm ở nữ (24,8 ng / kg bw / ngày) so với
nam (15,7 ng / kg bw/ ngày).
Các mức rủi ro tối thiểu (MRLs) là 20 μg /
kg bw đối với TDCCIP, 200 μg / kg bw đối
với tris (2-chloroethyl) phosphate (TCEP) và
80 μg / kg bw đối với TNBP đã được báo cáo
(ATSDR, 2012). Tương tự, lượng tham
chiếu (RfD) là 50 μg / kg/bw đã được đề xuất
cho TBOEP (NSF, 2012). Các liều phơi
nhiễm được tính toán trong nghiên cứu của
chúng tôi đối với TDCIPP, TCEP, TNBP và
TBOEP thấp hơn 3–4 bậc độ lớn dưới MRLs
hoặc RfD. Trung vị được tính toán và tổng
lượng tiếp xúc với OPE thấp hơn so với liều
lượng được báo cáo đối với trẻ em từ Trung
Quốc (Chen và cộng sự, 2018). Liều lượng
tiếp xúc trung bình và liều lượng cao của
TCEP tương tự như liều lượng được báo cáo
đối với phụ nữ mang thai ở California
(Castorina và cộng sự, 2017). Lượng
TDCIPP ước tính thấp hơn so với liều lượng
nhau.
được báo cáo cho trẻ sơ sinh Hoa Kỳ
(Hoffman và cộng sự, 2017b). Tương tự,
lượng phơi nhiễm ước tính của TNBP thấp
hơn đáng kể so với liều lượng được báo cáo
đối với trẻ em từ Đức (Fromme và cộng sự,
2014).
Mặc dù nghiên cứu này trình bày thông tin
mới về mức độ phơi nhiễm OPE và sự thay
đổi theo thời gian, kết quả sẽ được giải thích
một cách thận trọng. Tất cả các mẫu nước
tiểu được thu thập trong nghiên cứu này chỉ
từ 19 cá nhân. Ngoài ra, không có mẫu nước
tiểu trong ngày để tính toán sự biến thiên
trong ngày về nồng độ chất chuyển hóa OPE.
Hơn nữa, do thiếu thông tin về phần bài tiết
mol qua nước tiểu của các chất chuyển hóa
OPE, việc tính toán liều tiếp xúc nên được
coi là một ước tính. Cũng cần lưu ý rằng
chúng tôi không sử dụng enzym
glucuronidase trong quá trình chiết mẫu và
do đó kết quả của chúng tôi có thể phản ánh
các dạng chất chuyển hóa OPE có sẵn tự do
trong nước tiểu. Một số nghiên cứu trước đó
đã đo lường các chất chuyển hóa OPE mà
không có sự phân hủy liên kết của enzym
trong nước tiểu (Butt và cộng sự, 2014; Sun
và cộng sự, 2018; Tao và cộng sự, 2018).
Mặc dù các nghiên cứu thử nghiệm đã được
thực hiện trong phòng thí nghiệm của chúng
tôi để so sánh hai phương pháp chiết xuất (có
và không có enzyme), chúng tôi không tìm
thấy sự khác biệt đáng kể về nồng độ chất
chuyển hóa OPE giữa hai phương pháp, mặc
dù nồng độ DNBP, DIBP và BBOEP trong
nước tiểu cao hơn một chút sau khi liên hợp
enzyme nhưng sự khác biệt giữa hai phương
pháp là dưới 30%. Nồng độ chất chuyển hóa
OPE khác trong nước tiểu có thể so sánh
giữa hai phương pháp chiết. Do đó, việc tách
mẫu bằng enzym hoặc thiếu chúng, không hóa OPE được báo cáo
ảnh hưởng đáng kể đến nồng độ chất chuyển

Hình 3. Nồng độ được điều chỉnh bằng Cr (ng / g) của DEP, DNBP, DIBP, BBOEP,
BDCIPP và DPHP trong nước tiểu được thu thập 3 ngày một lần trong năm tuần từ 19 cá
nhân. Đường kẻ ngang màu đen bên trong mỗi hộp đại diện cho trung vị, các hộp biểu thị
cho 25th và 75th, râu thể hiện giá trị 1,5∗ SD và các dấu chấm biểu thị cho các giá trị bất
thường
4. Kết luận

Nhìn chung, việc thu thập các mẫu nước
tiểu từ 19 cá nhân theo trục dọc trong 5
tuần cho phép phân tích sự thay đổi giữa
các ngày ở 11 nồng độ chất chuyển hóa
OPE. DEP, BDCIPP và DPHP là các
chất chuyển hóa OPE chủ yếu được tìm
thấy trong nước tiểu. ICC của các chất
chuyển hóa OPE cho thấy sự thay đổi
giữa các ngày thấp hơn và độ tái lập cao
hơn của các nồng độ được điều chỉnh
bằng Cr. Tuổi, giới tính và BMI có ảnh
hưởng đến sự thay đổi giữa các ngày của
nồng độ chất chuyển hóa OPE. Ước tính
liều lượng phơi nhiễm của OPE cho thấy
rủi ro tối thiểu so với mức độ phơi
nhiễm hiện tại
Sự thừa nhận
Chúng tôi cảm ơn các tình nguyện viên đã
cho tặng mẫu nước tiểu. Nghiên cứu được
báo cáo trong ấn phẩm này một phần
được hỗ trợ bởi Viện Khoa học Sức khỏe
Môi trường Quốc gia của Viện Y tế Quốc
gia
theo Giải thưởng số U2CES026542-01 và
một phần của Bộ Giáo dục Trung Quốc
(Số T2017002). Toàn bộ nội dung được
các tác giả chịu trách nhiệm và không
nhất thiết đại diện cho quan điểm chính
thức của
Viện Y tế Quốc gia.
Bảng 3: Liều lượng tiếp xúc ước tính hàng ngày với este hữu cơ (OPE) được tính toán từ
nồng độ của các chất chuyển hóa trong nước tiểu ở Hoa Kỳ

Lượng ước tính cho giới tính, dân tộc, tuổi và BMI được tính toán dựa trên giá trị trung vị
nồng độ trong nước tiểu (chưa điều chỉnh).
Tài liệu tham khảo