Machine Translated by Google

Xem siêu dữ liệu, trích dẫn và các bài báo tương tự tại core.ac.uk mang đến cho bạn bởi CORE

do Viện Khoa học Công nghệ và Giáo dục Quốc tế (IISTE) cung cấp: Tạp chí điện tử

Tạp chí Sinh học, Nông nghiệp và Y tế ISSN www.iiste.org

2224-3208 (Báo) ISSN 2225-093X (Trực tuyến)

Tập 6, Số 5, 2016

Tái sinh in vitro cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.)

Vai trò của Metatopoli, Benzyladenine và Casein thủy phân

Hussein KZ Al-Kaaby Khoa

Sinh học, Đại học Giáo dục Khoa học Thuần túy, Đại học Basrah, Basrah- Iraq

trừu tượng

Ảnh hưởng của việc bổ sung riêng lẻ metatopoli (mT), benzyladenine (BA) vào môi trường dinh dưỡng ở nồng độ mol bằng nhau
(1 mM) và tương tác của chúng với ba nồng độ (0,1, 0,3 & 0,5 gl-1) của dịch thủy phân casein ( CH ) trong tái sinh ống
nghiệm của Cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.) cv. Super marmande đã được nghiên cứu. mT làm tăng đáng kể số lá và số
chồi bất định so với BA, trong khi BA vượt mT đáng kể về chiều dài chồi. Kết quả cho thấy không có sự khác biệt đáng kể
giữa mT và BA về số lượng rễ và chiều dài rễ. Cả BA và mT đều gây ra mô sẹo ở gốc của vi chồi. CH ở 0,1 gl-1 và sự tương
tác của nó với mT gây ra sự gia tăng đáng kể về số lá và số chồi ngẫu nhiên trong khi tương tác của nó với BA gây ra sự gia
tăng đáng kể về chiều dài chồi.

Tăng nồng độ CH và tương tác của nó với mT hoặc BA làm giảm dần trọng lượng tươi của mô sẹo khi so sánh với đối chứng.

Từ khóa: Metatopoli, Benzyladenine, Casein thủy phân, Cà chua, Chồi bất định, Rễ, Mô sẹo.

1. Giới thiệu Cà

chua (lycopersicon esculentum Mill.) là một loại cây rau họ Cà quan trọng được trồng trên khắp thế giới vì những công dụng
đa dạng của nó. Nó là một trong những loại thực phẩm bảo vệ quan trọng nhất vì nó chứa một lượng đáng kể vitamin và khoáng
chất và đôi khi được gọi một cách chính đáng là quả cam của người nghèo (Devi et al. 2008). Ở Iraq, cà chua là cây rau
quan trọng được trồng khắp cả nước quanh năm.
Kể từ khi phát hiện ra topoli dưới dạng các cytokinin thơm tự nhiên (CK), chúng đã nổi lên như những lựa chọn
thay thế thực sự cho các CK tồn tại lâu dài như benzyladenine, zeatin và kinetin trong nuôi cấy mô thực vật (Aremu et al.
2012 ) . Topoli, đặc biệt là metatopoli (mT) và các dẫn xuất của nó đã được sử dụng để bắt đầu nuôi cấy, tối ưu hóa quy
trình và để chống lại các rối loạn sinh lý do in vitro khác nhau ở nhiều loài. Tuy nhiên, trong quá trình vi nhân giống
của nhiều loài thực vật, thường gặp phải các rối loạn sinh lý như chậm phát triển, biến đổi biểu sinh và soma (Bairu et
al. 2011; Smulders và de Klerk 2011). Những vấn đề này làm giảm ứng dụng thương mại của quy trình nuôi cấy mô thực vật
(PTC) ở một số loài thực vật.
Hơn nữa, việc lựa chọn CK vẫn rất quan trọng đối với sự thành công hay thất bại của bất kỳ nỗ lực vi nhân giống nào
(Werbrouck, 2010; Amoo et al. 2011). Các nhà nghiên cứu đang liên tục tìm kiếm các CK mới cũng như ưu việt.
Kể từ khi phát hiện ra mT và các dẫn xuất của nó dưới dạng CK thơm tự nhiên ở một số loài thực vật (Jones et al. 1996;
Tarkowska et al. 2003), tỷ lệ nhân chồi, giảm bớt rối loạn sinh lý, thích nghi tốt hơn và tạo rễ đang làm cho topoli trở
nên phổ biến trong mô thực vật nhà văn hóa.
Mặc dù 6-benzyladenine (BA) là cytokinin được sử dụng phổ biến nhất trong các quy trình nuôi cấy mô, nhưng ngày
càng có nhiều ấn phẩm cho thấy hiệu quả của topoli trong việc tối ưu hóa các quy trình để tăng sản xuất chồi và kiểm soát
các vấn đề do nuôi cấy mô thường gặp khi sử dụng Cử nhân (Werbrouck và cộng sự 1995, 1996).

Ứng dụng của các chất phụ gia như than hoạt tính (AC), casein thủy phân (CH), nước cốt dừa (CM) & bạc nitrat
(AgNO3) & tác động của chúng được điều chỉnh phù hợp với nhu cầu văn hóa (Vinod et al. 2009) tức là mục tiêu của các nghiên
cứu thực nghiệm như vi nhân giống, tái sinh, biệt hóa tế bào, androgenesis, sinh tổng hợp các chất chuyển hóa thứ cấp và
biến đổi sinh học của tế bào cũng như các loài thực vật cụ thể được lấy.
Casein hydrolysate (CH) là một chất bổ sung nitơ hữu cơ có chứa hỗn hợp các axit amin. Là một nguồn
nitơ khử tốt, nó đã được sử dụng rộng rãi như một chất phụ gia cho môi trường nuôi cấy phôi (Narayanswamy,
2007). Nó đã chứng tỏ hiệu quả vượt trội so với tác dụng kết hợp của các axit amin. CH có thể là nguồn cung cấp
canxi, phốt phát, một số nguyên tố vi lượng, vitamin và quan trọng nhất là hỗn hợp lên đến 18 axit amin (George
và de Klerk, 2008). Một số nhà điều tra đã kết luận rằng bản thân CH có hiệu quả hơn đối với việc nuôi cấy thực
vật so với việc bổ sung các axit amin chính mà nó cung cấp. Trong hỗn hợp chuẩn bị của các axit amin tương tự
như trong CH, sự ức chế cạnh tranh giữa một số thành phần thường được quan sát thấy (Monlar et al. 2011).
Tác giả đã phát hiện ra một cái hồ trong các nghiên cứu về tác động của mT và tương tác của nó với CH đối với
cà chua ở Iraq và nghiên cứu này có thể là nghiên cứu đầu tiên đề cập đến chủ đề này. Vì vậy, nghiên cứu hiện tại nhằm mục
đích điều tra vai trò của mT và BA riêng lẻ ở nồng độ mol bằng nhau và sự tương tác của chúng với CH đối với các giai đoạn
tái sinh in vitro khác nhau của cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.) cv. Siêu marmande.

7
Machine Translated by Google

Tạp chí Sinh học, Nông nghiệp và Y tế ISSN www.iiste.org

2224-3208 (Báo) ISSN 2225-093X (Trực tuyến)

Tập 6, Số 5, 2016

2. Vật liệu và phương pháp

2.1 Hóa chất

Chất điều hòa sinh trưởng thực vật (PGRs) 6-benzyladenine (BA), metatopoli [6-(3-hydroxybenzylamino) purine (mT)],
bột MS (Murashige và Skoog, 1962), vitamin Gamborg (Gamborg et al.1968), Casein hydrolysate (CH), Agar, Tween 20 được
lấy từ Phòng thí nghiệm Công nghệ thực vật, Hoa Kỳ.

2.2 Nguyên liệu

thực vật Hạt cà chua (Lycopersicon esculentum Mill.) cv. Super marmande được lấy từ Danh mục Nông nghiệp, tỉnh Basrah.
Hạt được rửa kỹ dưới vòi nước chảy và khử trùng bề mặt bằng cồn 70% (v/v) trong 1 phút, sau đó là natri hypochlorite
2% (v/v) với Tween 20 trong 20 phút. sau đó tráng 3 lần trong nước cất vô trùng trước khi chuyển sang các ống nghiệm
Pyrex (150x20 mm) chứa 10 ml môi trường cơ bản MS đã được làm đông đặc với 6 gm.l-1 agar. Các đầu chồi được cắt ra
từ cây con một tuần tuổi (Hình 1A) trong điều kiện vô trùng trong tủ thổi khí tầng của phòng sinh trưởng và được sử
dụng làm mẫu cấy trong các thí nghiệm tiếp theo.

2.3 Phương pháp xử lý và điều kiện sinh

trưởng Đầu chồi (Hình 1 B) được cấy trên môi trường bao gồm muối cơ bản MS bổ sung vitamin Gamborg (1 mg.l-1),
sucrose (30 gl-1), BA hoặc mT ở nồng độ mol bằng nhau (1mM) và CH (0,1, 0,3, 0,5gl -1). Xử lý đối chứng là môi trường
chứa BA hoặc mT không chứa CH.
Môi trường được điều chỉnh đến pH 5,8 với 0,1 M KOH hoặc HCl trước khi thêm chất tạo gel (6 gl-1 agar)
và hấp khử trùng ở 121°C và 0,1 MPa trong 20 phút. Các ống nuôi cấy có đường kính lớn (50X100 mm) chứa 25 ml môi
trường MS (Hình.1C) và 10 lần lặp lại cho mỗi lần xử lý đã được sử dụng. Việc cấy truyền được thực hiện sau 4 tuần
và các vi chồi được tạo ra được chuyển vào lọ thủy tinh (65x130 mm) có nắp đậy bằng nhựa (Hình.1D) và mô sẹo (được
hình thành ở gốc của các vi chồi) được cắt ra và cân. Thí nghiệm tiếp tục cho đến khi hình thành các cây con, mỗi cây
con được chuyển vào các ống nghiệm Pyrex (150x20 mm, Hình 1E) chứa 10 ml môi trường có cùng các thành phần được mô tả
trước đó, ngoại trừ lượng thạch được giảm thiểu xuống còn 3 gl để cố định rễ thông suốt. Thí nghiệm tiếp tục trong
1
12 tuần sau đó dữ liệu được ghi lại.

2.4 Các thông số thí nghiệm

Các thông số sau đây được tính trung bình cho mỗi nghiệm thức và được tính khi kết thúc thí nghiệm (sau 12 tuần)
ngoại trừ khối lượng tươi của mô sẹo được tính sau 4 tuần.
- Cân tươi callus (g) bằng cân điện tử Sartorius BL2105.
-Có nghĩa là số lá của cây con.

-Số chồi bất định của cây con trung bình.

-Chiều dài chồi con trung bình (cm).
-Số rễ bất định của cây con trung bình.
-Chiều dài rễ cây trung bình (cm).

2.5 Phân tích thống kê

Thí nghiệm được thiết kế theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên nhân tố 2 yếu tố (loại nồng độ PGR X CH ) với 10 lần
nhắc lại cho mỗi nghiệm thức. Dữ liệu được phân tích phương sai hai chiều (ANOVA) bằng chương trình Genstat, nghĩa
là được so sánh bằng cách sử dụng Chênh lệch nhỏ nhất đáng kể đã sửa đổi (RLSD) với P <0,05.

3. Kết quả
3.1 Ảnh hưởng của mT, BA và tương tác của chúng với CH đến:
3.1.1 Số lá trung bình: Bảng 1

cho thấy ảnh hưởng của mT, BA và tương tác của chúng với CH đến số lá trung bình. Số lượng lá cao nhất (29,5) được
quan sát thấy trong tương tác giữa mT và 0,1 gl-1 CH vượt trội đáng kể so với tất cả các nghiệm thức khác. Số lượng
lá tăng đáng kể được ghi nhận ở mức 0,1 gm.l-1 CH (26,45) có ý nghĩa đối với xử lý PGRs trong khi 0,5 gl-1 CH gây
ra sự giảm đáng kể số lượng lá khi so sánh với đối chứng. mT làm tăng đáng kể số lá khi so sánh với BA (24,25 &
21,15 tương ứng).

số 8
Machine Translated by Google

Tạp chí Sinh học, Nông nghiệp và Y tế ISSN www.iiste.org

2224-3208 (Báo) ISSN 2225-093X (Trực tuyến)

Tập 6, Số 5, 2016

3.1.2 Số chồi trung bình và chiều dài chồi trung

bình: Kết quả trong bảng 2 cho thấy mT làm tăng đáng kể số chồi ngẫu nhiên trung bình (6,02) khi so sánh với BA
(4,55). CH ở mức 0,1 gl-1 làm tăng đáng kể số chồi trung bình so với đối chứng. Số chồi cao nhất được ghi nhận ở
tương tác giữa 0,1 gl-1 CH và mT.

Về kết quả chiều dài chồi trung bình trong bảng 3 chỉ ra rằng BA vượt quá mT đáng kể ở chiều dài chồi
trung bình của cây con.
Chiều dài chồi cao nhất được ghi nhận khi tương tác giữa BA và 0,1 gl-1 CH (10,6 cm). CH ở mức cao
nồng độ (0,3 & 0,5 g-1) làm giảm đáng kể chiều dài chồi so với đối chứng.
3.1.3 Số rễ trung bình và chiều dài rễ trung bình:
Bảng 4 cho thấy sự khác biệt giữa mT và BA là không đáng kể về số rễ trung bình. Việc bổ sung CH vào môi trường
dinh dưỡng và sự tương tác giữa PGRs và CH cũng không đáng kể đối với số lượng rễ trung bình.

9
Machine Translated by Google

Tạp chí Sinh học, Nông nghiệp và Y tế ISSN www.iiste.org

2224-3208 (Báo) ISSN 2225-093X (Trực tuyến)

Tập 6, Số 5, 2016

Kết quả trong Bảng 5 chỉ ra rằng CH ở mức 0,1 gl-1 làm tăng đáng kể chiều dài rễ và giảm đáng kể ở
0,5 gl-1 khi so sánh với đối chứng. Bảng cũng cho thấy rằng sự khác biệt giữa mT và BA và sự tương tác giữa
PGRs và CH là không đáng kể về chiều dài gốc.
3.1.4 Khối lượng tươi của mô sẹo (g)

Kết quả trong bảng 4 cho thấy không có sự khác biệt đáng kể giữa BA và mT về trọng lượng tươi trung bình của
mô sẹo được tạo ra. Việc bổ sung CH làm giảm đáng kể khối lượng tươi của mô sẹo, đặc biệt là ở mức 0,5 g-1
khi so sánh với đối chứng.

4. Thảo luận
Trong nghiên cứu hiện tại, số lượng lá lớn hơn (bảng 1), số chồi bất định (bảng 2) được tạo ra bằng mT so với
BA ở nồng độ cân bằng cho thấy rằng mức độ của các cytokinin được cô lập không thuận nghịch thấp hơn ở các
cây được xử lý bằng mT (Moyo et al.2011).
Tái sinh và nhân chồi trong quá trình vi nhân giống bị ảnh hưởng bởi loại và nồng độ của PGRs được
áp dụng, đặc biệt là CK do tầm quan trọng của chúng trong quá trình phân chia tế bào và hình thành cơ quan
(Howell et al. 2003). BA vẫn là một trong những CK hiệu quả nhất giúp thúc đẩy tái sinh chồi in vitro và nhân
giống các loài thực vật. Tuy nhiên, trong nỗ lực giải quyết các vấn đề sinh lý và phát triển khác nhau liên
quan đến CK nói chung và BA nói riêng, các CK khác đang được thử nghiệm (Arema et al.2012).
Các nghiên cứu khác nhau về nhiều loài thực vật đã làm nổi bật tiềm năng của topolis như một chất
thay thế cho các CK thường được sử dụng. Sử dụng nồng độ cân bằng mol (10,0 µM) của mT hoặc BA, Werbrouck et
al. (1996) đã quan sát thấy sự cân bằng chồi-rễ tốt hơn với các cây con Spathiphyllum floribundum được xử lý
bằng mT . Tương tự, mT ở các nồng độ khác nhau tạo ra nhiều chồi hơn so với BA hoặc Zeatin trong quá trình
vi nhân giống Aloe polyphylla (Bairu et al. 2007). Trong chuối cv. 'Williams', việc sử dụng topolis (mT, mTR,
MemT, MemTR) ở 7,5, 15 và 30 µM có tỷ lệ nhân chồi cao hơn BA (Bairu et al. 2008).
Kết quả ở bảng 4 và 5 cho thấy sự khác biệt giữa mT và BA về số lượng rễ và chiều dài rễ là không
đáng kể. Cảm ứng của các gốc bất định là một quá trình quan trọng và phức tạp trong

10
Machine Translated by Google

Tạp chí Sinh học, Nông nghiệp và Y tế ISSN www.iiste.org

2224-3208 (Báo) ISSN 2225-093X (Trực tuyến)

Tập 6, Số 5, 2016

vi nhân giống bị ảnh hưởng chủ yếu bởi loại và nồng độ của auxin được sử dụng (Hatzilazarou et al.
2006). Sự hình thành rễ bất định dưới tác động của auxin có liên quan đến quá trình khử biệt hóa, trong đó các
tế bào chuyển sang một con đường phát sinh hình thái mới và tạo ra mầm rễ (Hatzilazarou et al. 2006). Trong khi
auxin được biết là thúc đẩy sự ra rễ, thì vai trò của cytokinin trong quá trình hình thành rễ vẫn còn gây tranh
cãi, mặc dù chúng thường được coi là chất ức chế ra rễ (Feito et al. 1996).
Một số nghiên cứu về các loài khác nhau đã báo cáo rằng loại và nồng độ của CK có ảnh hưởng sâu sắc
đến khả năng thích nghi với khí hậu của thực vật in vitro (Moncalea´n et al. 2001; Bairu et al. 2008; Valero
Aracama et al. 2010). Ngoài ra, một số tác giả đã báo cáo rằng CK thường có tác dụng ức chế sự ra rễ, dẫn đến tỷ
lệ thích nghi với khí hậu kém sau đó (Werbrouck et al. 1995; Bairu et al. 2008). Sự tương tác của CK với auxin
luôn là một yếu tố quan trọng được xem xét trong PTC.
Về trọng lượng tươi của mô sẹo, kết quả trong bảng 6 chỉ ra rằng không có sự khác biệt đáng kể giữa BA
và mT trong việc tạo mô sẹo. Tuy nhiên, đã quan sát thấy giảm đáng kể phản ứng của mô sẹo với dịch thủy phân
casein . Kết quả tương tự cũng thu được ở cà chua bởi Bhatia và Ashwath (2008).
CH đặc biệt ở nồng độ 0,1 gl và nó tương tác với mT có ảnh hưởng tích cực đến số lá, số chồi và chiều
dài chồi. CH là một chất bổ sung nitơ hữu cơ có chứa hỗn hợp các axit amin, nó đã được sử dụng rộng rãi như một
chất phụ gia trong nuôi cấy (Bansal và Gokhale, 2012). Nó đã chứng minh hiệu quả vượt trội so với tác dụng kết
hợp của hỗn hợp axit amin (Narayanswamy, 2007). Người ta cho rằng sự thiếu hụt nitơ có thể được bù đắp bằng cách
bổ sung nó một cách rẻ tiền (Al-Khayri, 2011).
Có lẽ nó chứa một số yếu tố kích thích chưa được xác định. CH làm giảm trọng lượng tươi của mô sẹo và
không có ảnh hưởng đáng kể đến số lượng rễ và chiều dài rễ, điều này có thể là kết quả của việc bổ sung auxin
ngoại sinh có hiệu quả trong quá trình hình thành rễ và calugenesis. Tác dụng hiệp đồng của PGR và các chất phụ
gia đã được chứng minh trong một số cây thuốc, một báo cáo về stevia (Sridhar, và Aswath, 2014) việc củng cố CH
tái sinh dẫn đến phản ứng tái sinh tốt và sự nhân lên của chồi tăng gấp đôi. Kết quả nghiên cứu tương tự đã được
báo cáo về tái sinh Oroxyllum indicum (Bansal. và Gokhale, 2012) sử dụng CH làm phụ gia tăng trưởng. CH tăng
cường khả năng tái sinh chồi trực tiếp và số lượng chồi được tìm thấy tăng gấp 9,34 lần so với các phương pháp
xử lý đối chứng ở 20 mg/L CH đã được ghi nhận rõ ràng. CH cũng đã được tìm thấy hữu ích trong các nghiên cứu in
vitro Anogeissus pendula và A. latifolia (Saxena, và Dhawan, 2001) . Tác dụng hiệp đồng của PGR và các chất phụ
gia đã được chứng minh trong một số cây thuốc.

5. Kết luận
Việc tăng cường môi trường nuôi cấy bằng các chất điều hòa sinh trưởng thực vật khác nhau như auxin và cytokinin
là không đủ để tái sinh cây với hiệu quả cao. Loại môi trường nuôi cấy này trong một số trường hợp có thể được
cải thiện bằng cách sử dụng loại và nồng độ PGR thích hợp, kết hợp các chất phụ gia trong môi trường do các hoạt
động thúc đẩy tăng trưởng và phát triển của chúng. Trong nghiên cứu hiện tại, chất phụ gia được sử dụng là CH
dẫn đầu ở nồng độ 0,1 g-1 và tương tác với 1mM mT để tăng cường số lượng lá, tái sinh chồi ngẫu nhiên và giảm số
lượng mô sẹo được tạo ra ở gốc cây con dẫn đến ức chế tăng trưởng hơn nữa . Vì vậy, chúng tôi nhận thấy rằng
việc sử dụng mT làm cytokinin có ưu thế hơn BA và sự tương tác giữa 1mM mT với CH ở 0,1 gl-1 có tầm quan trọng
rất lớn trong quá trình vi nhân giống cà chua với hiệu quả cao thông qua quá trình phát sinh cơ quan.

Hình 1. 1-Các giai đoạn microprpagation của cà chua cv. Siêu nhân. A- cây con 7 ngày tuổi. Mẹo bắn chồi B-Exci.
C- Mô sẹo ở đáy vi chồi. D- Chồi non phát sinh lá và rễ. E- Cây con cuối thí nghiệm.

11
Machine Translated by Google

Tạp chí Sinh học, Nông nghiệp và Y tế ISSN www.iiste.org

2224-3208 (Báo) ISSN 2225-093X (Trực tuyến)

Tập 6, Số 5, 2016

Tài liệu tham

khảo Amoo, S., Finnie, JF & Van Staden, J. (2011), Vai trò của metatopolis trong việc giảm bớt các vấn đề về vi nhân giống.

Quy định tăng trưởng thực vật. 63:197–206.

Aremu,OA, Bairu, MW, Dolezal, K., Finine, F. & Van Staden J. (2012), Topolins: Thuốc chữa bách bệnh cho mô thực vật

những thách thức về văn hóa?. Tiss tế bào thực vật. tổ chức Giáo phái.,108:1-16.

Bansal, YK & Gokhale, M. (2012), Ảnh hưởng của chất phụ gia đối với quá trình vi nhân giống của một loại dược liệu có nguy cơ tuyệt chủng

cây Oroxylum indicum L. Thông hơi. Trong: Những tiến bộ gần đây về nuôi cấy thực vật trong ống nghiệm, 183-196.

Bairu, MW, Stirk, WA, Dolezˇa,l K & Van Staden, J. (2007), Tối ưu hóa quy trình vi nhân giống cho loài Aloe polyphylla có nguy cơ tuyệt chủng:

metatoolin và các dẫn xuất của nó có thể dùng thay thế cho benzyladenine và zeatin không? Giáo phái tế bào mô thực vật 90:15–23

Bairu, MW, Stirk, WA, Dolezˇal, K, & Van Staden, J. (2008), Vai trò của topoli trong quá trình vi nhân giống và biến dị dòng soma của các

giống chuối 'Williams' và 'Grand Naine' (Musa spp. AAA). Tiss tế bào thực vật. tổ chức Giáo phái 95:373–379.

Bairu, MW, Aremu AO & Van Staden, J. (2011), Biến dị dòng Soma ở thực vật: nguyên nhân và cách phát hiện
tôi nghĩ . Plant G ro wt h R egul .63:147-173.

Feito, I., Gea, MA, Ferna´ndez, B. & Rodr´ıguez, R. (1996), Chất điều hòa sinh trưởng thực vật nội sinh và khả năng ra rễ của các mô quả óc

chó khác nhau. Quy định tăng trưởng thực vật. 19:101–108.

Gamborg, OL, Miller, RA & Ojima, K. (1968), Nhu cầu dinh dưỡng của nuôi cấy huyền phù tế bào rễ đậu tương.

hết hạn Tế bào Res. 50:151-158.

George, EF & de Klerk, GJ (2008), Các thành phần của môi trường nuôi cấy mô thực vật I: Chất dinh dưỡng vĩ mô và vi mô.

Trong George, EF, Hall, MA, de Klerk GJ, eds., Nhân giống cây trồng bằng nuôi cấy mô, tái bản lần thứ 3, Tập. 1.

Bối cảnh. Springer-Verlag, Dordrecht, trang 65-113.

Hatzilazarou, SP, Syros, TD, Yupsanis, TA, Bosabalidis, AM & Economou, AS (2006), Peroxidases, ligin và giải phẫu học trong quá trình tạo rễ

in vitro và ex vitro của vi chồi cây dành dành (Gardenia jasminoides Ellis ) . J. Sinh lý thực vật. 163:827–836

Howell, SH, Lall, S. & Che, P. (2003) Cytokinin và sự

phát triển chồi. Xu hướng khoa học thực vật. 8:453–

459.

Jones, L., Martinkova´, H., Strnad, M. & Hanke, D. (1996), Sự xuất hiện của các cytokinin thơm trong cọ dầu (Elaeis

guineensis Jacq.). J Quy định Tăng trưởng Thực vật.l 15:39–

49.

Molnar, Z.,Virag, E.& Ordog,V. (2011), Các chất tự nhiên trong môi trường nuôi cấy mô thực vật bậc cao. Acta Biologica Szegediensis, 55,

123-127.

Moncalea´n, P., Rodr´ıguez, A. & Ferna´ndez, B. (2001), Phản ứng in vitro của các mẫu cấy Actinidia deliciosa đối với các giai đoạn ủ BA khác

nhau. Giáo phái mô tế bào thực vật 67:257–266.

Moyo, M., Finnie, JF& Van Staden, J. (2011), Các hiệu ứng ngoan cố liên quan đến sự phát triển của mô giống như mô sẹo cơ bản đối với quá

trình tạo vảy và tạo rễ ở Sclerocarya birrea. Quy định tăng trưởng thực vật. 63:187–195.

Murashige, T. & Skoog, F. (1962), Môi trường sửa đổi để tăng trưởng nhanh và thử nghiệm sinh học với nuôi cấy mô thuốc lá.

vật lý. Thực vật. 15:473–

497.

Narayanswamy, S. (2007), Dinh dưỡng mô - Hormone tăng trưởng. Nuôi cấy mô tế bào thực vật. Tata McGraw-Hill Publishing Company Ltd, New Delhi

trang 22-50.

Sridhar, TM & Aswath,, CR (2014), Ảnh hưởng của các chất phụ gia đến việc tăng cường nhân chồi in Vitro của Stevia rebaudiana (Bert.) - Một

cây thuốc quan trọng chống bệnh tiểu đường. Mỹ. J. Khoa học thực vật, 5, 192-199.

Saxena,, S. & Dhawan,, V.(2001), Sản xuất quy mô lớn Anogeissus pendula và Anogeissus latifolia bằng vi nhân giống. Tế bào trong ống nghiệm.

Phát triển. Biol., 37, 586-591.

Schmu lling T, Sandberg, G. & Strnad, M. (2003), Xác định các cytokinin thơm mới trong lá Arabidopsis thaliana và Populus canadensis bằng LC-

(+)ESI-MS và sắc ký lỏng mao quản/bắn phá nguyên tử nhanh khối phổ. vật lý. Thực vật. 117:579–590.

Smulders, M. & de Klerk, G. (2011), Di truyền biểu sinh trong nuôi cấy mô thực vật. Quy định tăng trưởng thực vật. 63:137–146.

Valero-Aracama, C., Kane, M, Wilson, S. & Philman, N. (2010), Thay thế benzyladenine bằng metatopolin trong quá trình nhân chồi làm tăng khả

năng thích nghi của các kiểu gen khó và dễ thích nghi của yến biển (Uniola paniculata L. ) . Quy định tăng trưởng thực vật, 60:43–

49.

Vinod, K., Parvatam, G. & Gokare, AR (2009), AgNO3 – Một chất điều hòa tiềm năng của chất điều hòa sinh hoạt động của ethylene và

trưởng thực vật. Trúng tuyển. J. công nghệ sinh học.12:1-15.

Werbrouck, S., Van der Jeugt, B., Dewitte, W., Prinsen, E., Van Onckelen, H. & Debergh, P. (1995), Sự chuyển hóa của benzyladenine trong

Spathiphyllum floribundum 'Schott Petite' liên quan đến các vấn đề về ma sát accli. Plant Cell Rep., 14:662–665.

Werbrouck, S., Strnad, M., Van Onckelen, HA & Debergh, PC (1996), Metatopoli, một chất thay thế cho benzyladenine trong nuôi cấy mô? vật lý.

Plant., 98:291–
297.

Werbrouck S. (2010), Ưu điểm và hạn chế của các cytokinin thơm mới trong nuôi cấy mô thực vật. Acta Hortic.,
865:103–
108.

12