You are on page 1of 43

Національний фармацевтичний університет

Кафедра мікробіології, вірусології та імунології

Лекція з мікробіології з основами імунології


спеціальності 7.12020101 Фармація

Фітопатогенні
мікроорганізми.
Мікробіологічний контроль
лікарської сировини та
готових ліків. Лектор
доцент каф. мікробіології,
вірусології та імунології
План лекції
1. Фітопатогенні мікроорганізми. Визначення.
2. Шляхи проникнення фітопатогенних мікроорганізмів у
рослини.
2.1. Мікози у рослин, їх ознаки.
2.2. Бактеріози у рослин, їх ознаки.
2.3. Вірусні інфекції у рослин, їх ознаки.
2.4. Мікоплазменні інфекції у рослин, їх ознаки.
3. Основні заходи боротьби з хворобами рослин.
4. Мікробна контамінація (забруднення) готових лікарських
засобів.
4.2. Наслідки мікробної контамінації ліків
4.3. Об'єкти мікробіологічного контролю
5. Мікробіологічна чистота лікарського засобу
6. Вимоги фармакопеї до мікробіологічної чистоти лікарського
засобу.

Питання для самостійного вивчення:


Фітопатогенні мікроорганізми та їх розповсюдження.
Рекомендована література
1. Мікробіологія: Підр. для студ. / І. Л.Дикий, І. Ю.Холупяк, Н. Ю.
Шевельова, та ін. 2-е вид.– Х. : Профессионал, 2006. – 433 с.

2. Микробиология: Руководство к лабораторным занятиям. Учеб.


пособие для студентов высших учебных заведений / И.Л. Дикий,
И.И Сидорчук, И.Ю. Холупяк, Н.Е. Шевелёва, М.М. Великая, Н.А.
Волкова, Л.Ф. Силаева, О.П. Стрилец, О.Г. Гейдерих, В.Е. Литаров.
– Х.: Изд-во НфаУ; Золотые страницы, 2002.- 444 с.

3. Микробиология. Методические рекомендации для студентов


фармацевтических высших учебных заведений / И.Л. Дикий, И.Ю.
Холупяк, М.М. Великая, Н.Е. Шевелева и др. – Х., 2004. – 144 с.

4. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и


иммунологии: Учебн. пособ. для студ. мед. вузов / Под. ред. А. А.
Воробьева, А. С. Быкова. – М. : Медицинское информационное
агентство, 2003. – 236с.
Фітопатогенні мікроорганізми —
це мікроорганізми, які
вспричиняють захворювання
рослин
 Основним джерелом мікрофлори є грунт
(природнє середовище існування).
 Вони можуть бути також у воді, повітрі, звідки потрапляють на всі частини
рослин (стебло, листя, плоди).
ІНФЕКЦІЙНІ ХВОРОБИ РОСЛИН

Перше місце за кількістю захворювань рослин належить


грибам;

Друге - бактеріям і вірусам;


Третє - віроїдам, актиноміцетам, мікоплазмам.

•Мікози
•Актиномікози
•Бактеріози
•Вірусні
•Мікоплазменні інфекції
Механізми пошкоджуючої дії фітопатогенів

Ферменти - гідролітичні (целюлази, протеїнази,


пектиназу), які спричиняють мацерацію
(розм'якшення) рослинної тканини і руйнування
клітинних оболонок, що дозволяє мікроорганізму
проникати в клітину.
Такий шлях проникнення і розповсюдження по
рослинному організму називається інтрацелюлярним.
Проникнувши в клітину, фітопатогенний мікроорганізм
порушує процеси дихання і фотосинтезу, що
призводить до її загибелі.
ОЗНАКИ МІКОЗІВ
враження кореневої системи в цілому
або загнивання окремих коренів,
розвиток пухлин;
поява наростів на стовбурах і гілках;
при ураженні листя відзначають
плямистість, кучерявість,
скручування, в'янення;
на плодах і бульбах спостерігається
плямистість, гнилизна, бородавки і
нальоти різного кольору;
у насінні змінюється консистенція
(ущільнення або розм'якшення).
БАКТЕРІОЗИ

спричиняють фітопатогенні бактерії


родів Erwinia, Pseudomonas,
Xantomonas, Аgrobacterium,
Acetobacter.
Це грамнегативні, рухливі палички,
утворюють капсулу, спороутворюючі
види зустрічаються рідко.
Характеризуються аеробним типом
дихання і високою ферментативною
активністю.
ОЗНАКИ БАКТЕРІОЗІВ

гнилизна (розм'якшення і
руйнування клітин
рослин, в основному
плодів, бульб, цибулин),
плямистість,
опіки (супроводжуються
некрозом стебел, листя,
квіток),
вілт (зів'янення).
БАКТЕРІАЛЬНИЙ ВІЛТ

• уражає лише трав'янисті


рослини,
• при цьому бактерії проникають
у судини ксилеми, що приводить
до загибелі рослин.
Бактеріальна
плямистість листя

Судинний бактеріоз Кореневий рак


БАКТЕРІАЛЬНІ ОПІКИ
БАКТЕРІОЗ ГІАЦИНТІВ
ВІРУСНІ ІНФЕКЦІЇ

Поширюються в
основному
безхребетними
(комахами і
нематодами), які
переносять вірус з
соком, який вони
витягають із флоеми
або клітин
епідермісу.
вірус мозаїчної хвороби тютюну
ОЗНАКИ
 некрози,
 мозаїчність (цятки, плями або смуги
різного кольору) на листі або інших
зелених частинах рослини. Інколи
інфікована рослина може бути
світлішою, ніж здорова. При цьому
вражається в основному паренхіма,
що призводить до зниження кількості
хлоропластів.
 карликовість,
 зів'янення,
 закуклювання,
 строкате
забарвлення квітів.
МІКОПЛАЗМОВІ ІНФЕКЦІЇ

викликають мікоплазми,
які переносяться в
основному комахами
(цикадами).
ОЗНАКИ УРАЖЕННЯ

 карликовість,
 припинення плодоносіння,
 мозаїчний малюнок на
листі,
 позеленіння квіток,
 зміна форми листя,
пагонів, квіток,
 «відьмині мітли» (з одного
вузла розростає багато
дрібних бокових пагонів).
ВІДЬМИНІ МІТЛИ
Найбільш схильні до мікробного псування –
плоди, кореневища, багаті цукристими
речовинами;
найменш — сухе листя, кора і коріння.
Ознаки мікробного псування сировини:
зміна кольору,
зміна консистенції,
поява невластивого запаху,
пліснявіння,
загнивання.
Норми при зберіганні лікарської сировини:

вологість 30-40%; температура 18-20°С.


Основні заходи боротьби з
хворобами рослин
 Агротехнічні заходи (якість насіння, оптимальні терміни посіву,
боротьба з бур'янами та ін.);
 Хімічні заходи (протруювання насіння, внесення хімікатів в грунт);
 Боротьба з комахами-переносниками;
 Селекція стійких сортів рослин;
 Отримання посадкового і посівного матеріалу, вільного від патогенів
(напр. вірусів);
 Підвищення стійкості рослин до захворювань шляхом пророщування
насіння в екстрактах фітопатогенних грибів;
 Внесення в грунт мікробів-антагоністів фітопатогенів;
 Створення імунітету у рослин;
 Введення карантину;
 Механічне видалення хворих рослин;
 Лікування рослин.
КРИТЕРІЇ ПРИДАТНОСТІ СИРОВИНИ
ЗА МІКРОБІОЛОГІЧНИМИ
ПОКАЗНИКАМИ

Відповідно до вимог Державної фармакопеї України


для лікарської рослинної сировини, яка
використовується для приготування настоїв, відварів
допускається не більше 107 бактерій, не більше 105
грибів і не більше 102 кишкових паличок.
Якщо для сировини рослинного і тваринного
походження антимікробна обробка (напр., термічна)
неможлива, в ній допускається не більш 104 бактерій,
не більше 2*103 плісеневих і дріжджових грибів
сумарно, не більше 102 ентеробактерій за відсутності
кишкових паличок і сальмонел.
Не допускається присутність стафілококів і
синьогнійної палички.
МІКРОБНА КОНТАМІНАЦІЯ
(ЗАБРУДНЕННЯ) ГОТОВИХ
ЛІКАРСЬКИХ ЗАСОБІВ
Первинна контамінація здійснюється в процесі їх
приготування (виробництва),
вторинна - при зберіганні і використанні.
Джерела мікробної контамінації класифікують на
екзогенні і ендогенні.
 До екзогенних відносяться забруднені мікрофлорою
повітря приміщень, устаткування, інвентар,
технологічний одяг і руки персоналу.
До ендогенних відносяться сировина, допоміжні
матеріали, вода, первинна упаковка.
До 60-80% всіх випадків мікробної контамінації
лікарських засобів пов'язують з екзогенними
джерелами.
НАСЛІДКИ МІКРОБНОЇ
КОНТАМІНАЦІЇ ЛІКІВ

Виникнення лікарських інфекцій в разі


присутності в препараті патогенної або умовно-
патогенної мікрофлори
(ентеробактерії,
синьогнійна паличка,
вульгарний протей,
золотавий стафілокок).

Біодеградація препарату, що спричиняється в


основному сапрофітними мікроорганізмами, яка
супроводиться зміною його фізико-хімічних
властивостей з втратою фармакологічної
активності, а інколи придбанням токсичних
властивостей.
ОЗНАКИ МІКРОБНОГО
ПСУВАННЯ ПРЕПАРАТІВ
 Рідких лікарських форм:
 Зміна кольору
 Каламутність
 Поява плівки, осаду, невластивого запаху.
 М'яких:
 Розшарування
 Пліснявіння
 Спучення.
 Твердих:
 Зміна консистенції
 Зміна кольору.
ОБ'ЄКТИ МІКРОБІОЛОГІЧНОГО
КОНТРОЛЮ

лікарські засоби,
вода,
допоміжні матеріали,
сировина,
первинна упаковка,
повітря приміщень,
устаткування,
інвентар,
технологічний одяг,
руки персоналу.
Ін'єкційні розчини і очні краплі мають бути
стерильними, тобто в них недопустимо
присутність мікроорганізмів.

До нестерильних лікарських препаратів


пред'являють вимоги
«мікробіологічної чистоти» - це якісні і
кількісні показники його мікробіологічної
безпеки, включаючи недопустимість присутності
одних мікроорганізмів (патогенних і умовно-
патогенних) і обмеження присутності
сапрофітних мікроорганізмів залежно від
лікарської форми препарату.
У лікарських формах, які застосовуються
місцево,
трансдермально,
інтравагінально,
в порожнину вуха, носа, ротової порожнини,
для інгаляцій
допускається:
не більше 100 бактерій та грибів сумарно
в 1 г (мл) препарату.
У лікарських формах для приймання
усередину (пігулки, гранули, рідкі засоби);
для ректального введення
допускається
не більше 1000 бактерій і 100 грибів (плісеневих
і дріжджових сумарно) в 1 г (мл) препарату;
Виняток становлять препарати, до складу яких входить
сировина, яку неможливо піддати антимікробній обробці
і для якого допускається рівень мікробного забруднення
понад 1000 бактерій в 1 г (мл).
Для цієї групи препаратів допускається присутність не
більше 10000 бактерій, 100 грибів і 100 ентеробактерій
(за відсутності кишкових паличок і сальмонел).
В лікарських засобах для дітей

у віці до 1 року - не більше 50 бактерій


і грибів сумарно,
старше за рік — не більше 500 бактерій
і 50 грибів.
Незалежно від виду лікарської
форми препарату
не допускається присутність:
ентеробактерій,
синьогнійної палички,
золотавого стафілококу.
Асептика
комплекс заходів, направлених на запобігання
попаданню мікроорганізмів в ліки.

Асептичні умови досягаються шляхом використання:


 дистильованої води,
 стерильного посуду,
 інструментарію,
 знезараження повітря приміщень за допомогою
бактерицидних ламп,
 вологого прибирання з дезинфікуючим розчином,
 дотриманням гігієни співробітниками аптек.
Однією з умов виробництва якісної стерильної продукції і торгівлі
нею на вітчизняному і зарубіжному фармацевтичних ринках є
забезпечення якості препаратів за рахунок виконання, в першу
чергу, принципів і правил належної виробничої практики
(GMP – Good manufacturing practice).

 Належна виробнича практика (НВП) –


це частина системи забезпечення якості, яка гарантує, що
продукція виробляється та контролюється за стандартами
якості, які вимагає торгова ліцензія, і відповідає її призначенню.
На даний час в Україні принятий до виконання варіант GMP ЄC.
Перехід до виробництва лікарських засобів у відповідності до
принципів і правил GMP з 01.01.2002 стає в Україні обов’язковим.
Фітопатогенні мікроорганізми Фітопатогенні мікроорганізми
викликають захворювання рослин, що відносяться до різних груп. Яка з них
призводить до псування лікарської найчастіше викликає захворювання
сировини. Назвіть основне місце лікарських рослин?
перебування фітопатогенів у природі? A. Гриби
A. Грунт B. Віруси
B. Вода C. Бактерії
C. Повітря D. Актиноміцети
D. Тварини E. Мікоплазми
E. Комахи

При зборі лікарської сировини (плоди Рослинну сировину слід обстежити на


бузини) на гілках рослин були виявлені наявність в ній дріжджоподібних грибів.
численні нарости й пухлини. Які Яке середовище слід використати для
фітопатогенні мікроорганізми з того, щоб забезпечити розвиток даного
найбільшою ймовірністю могли виду мікроорганізму, але щоб при
викликати такі ушкодження рослин? цьому супутня мікрофлора не
A. Гриби виростала або росла дуже повільно?
B. Актиноміцети A.Агар Сабуро
C. Мікоплазми B. Агар Ендо
D. Віруси C. Мя’со-пептонний агар
E. Бактерії D. Молочно-сольовий агар
E. Кров'яний агар
При мікробіологічному дослідженні Для боротьби з фітопатогенними
рослинної лікарської сировини мікроорганізмами, що псують лікарську
виявлені бактерії різних видів. Серед сировину, необхідно провести наступні
них до епіфітної мікрофлори заходи, за винятком:
відноситься: A. Використати мінеральні добрива
A. Erwinia herbicola B. Обробка насіння
B. Erwinia carotovora C. Обробка рослин
C. Erwinia amilofora D. Видалення уражених рослин
D. Pseudomonas syringae E. Знищення переносників
E. Xanthomonas beticola фітопатогенних мікроорганізмів

Захворювання лікарських рослин, що При неправильному зберіганні


викликаються фітопатогенними рослинної лікарської сировини, в аптеці
бактеріями, відрізняються різноманіттям виявили ураження у вигляді м’якої
проявів. Укажіть основний симптом гнилі, вілту, плямистості, некрозу. Як
бактеріального вілту: називаються такі захворювання?
A. Зів'ялість A. Бактеріози
B. Плямистість B. Нематози
C. Пухлина C. Вірусні ураження
D. Гниль D. Мікози
E. Опік E. Мікоплазмози
При заготівлі рослинної сировини На фармацевтичне підприємство
необхідно враховувати, що рослини надійшла партія сировини рослинного
можуть бути добрим поживним походження для виготовлення
середовищем для розвитку багатьох фітопрепаратів. Який мікробіологічний
мікроорганізмів. Виберіть із наведених тест слід використати для оцінки якості
спосіб, який найчастіше цієї сировини ? Визначити.
використовується для попередження A. Загальну кількість мікроорганізмів в 1
розвитку мікроорганізмів на рослинах. г сировини
A. Висушування рослин B. Колі-титр
B. Обробка рослин антибіотиками C. Колі-індекс
C. Термічна обробка рослин (90-1000С) D. Антимікробну активність
D. Обробка рослин детергентами E. Пірогени
E. Ліофільне висушування
На плантації лікарських рослин Під час збору лікарської сировини на
поширилося захворювання, при якому плантаціях виявлено велику кількість
на листах утворюються жовті плями й рослин із мозаїчним забарвленням
ділянки некрозу. Сік хворих рослин листя. Виявлено різке зниження в цій
зберігає інфекційність при проходженні сировині кількості діючої речовини.
через бактеріальний фільтр, але при Який вірогідний агент спричинив таке
його посіві на живильні середовища ураження рослин?
ріст збудника не виявляється. До якої A.Фітопатогенні віруси
групи фітопатогенних мікроорганізмів B. Фітопатогенні бактерії
найбільш ймовірно належить збудник C. Токсичні речовини ґрунту
цього захворювання? D. Мікроскопічні кліщі
A.Віруси B. Гриби C. Актиноміцети E. Нематоди
D. Бактерії E. Мікоплазми
При мікробіологічному контролі Зібрані лікарські рослини мають
лікарської рослинної сировини було нетипове забарвлення листів і квіток -
зроблено посів на різні мозаїчно розташовані світлі плями.
диференціально-діагностичні З'ясувалося, що інфекційний агент,
середовища. Які мікроорганізми, що який викликав це захворювання, являє
викликають хвороби рослин, не можуть собою невеликі молекули РНК, не
бути визначені таким дослідженням? мають білкової оболонки. До якої групи
A.Віруси фітопатогенних мікроорганізмів
B. Бактерії найбільш імовірно належить цей
C. Мікоплазми збудник?
D. Гриби A. Віроїди B. Бактерії C. Пріони
E. Актиноміцети D. Гриби E. Актиноміцети
При огляді лікарської рослини Рослини часто вражаються
виявлене нехарактерне для нього мікроорганізмами, які змінюють їхні
розростання бокових пагонів (“відьмини фармакологічні властивості. Серед них
мітли”), припинення плодоносіння й - часто зустрічаються мікоплазми.
ряд інших ознак інфекційного Ознаками мікоплазменної інфекції у
захворювання. Для якої групи рослин є:
фітопатогенних мікроорганізмів A.Карликовість, пожовтіння,
характерні дані прояви? припинення плодоносіння
A.Мікоплазми B. Маленькі, світло-зелені плями на
B. Гриби листах
C. Актиноміцети C. Гниття кореневої системи
D. Віруси D. Розвиток пухлин кореневої системи
E. Віроїди E. Плями на листях, квітах, плодах,
опіки, м'яка гнилизна
Пошкоджуюча дія мікроорганізмів на Свіжозібрані лікарські рослини
рослини, серед іншого, обумовлена виявилися заражені бактеріями роду
дією певних ферментів. Які групи Pseudomonas, які викликають
ферментів дозволяють фітопатогенним мацерацію рослинних тканин і
бактеріям проникати усередину руйнування клітинних оболонок. Яким
рослини? ферментом можуть бути обумовлені
A. Всі перелічені фітопатогенні властивості цього
B. Целюлази мікроорганізму?
C. Протеази A.Пектиназа B. Нітратредуктаза
D. Пектінази C. Каталаза D. ДНКаза
E. Гідролази E. Глюкозооксидаза

Інфікування лікарських рослин Фітопатогенні мікроорганізми можуть


мікроорганізмами виключає їхнє істотно впливати на врожайність
наступне використання лікарських рослин, зменшуючи їх
фармацевтичною промисловістю. біомасу, кількість активних речовин.
Інвазивні властивості фітопатогенних Одними з ознак ураження рослин
мікроорганізмів обумовлені такими фітопатогенними мікроорганізмами є
ферментами: поява гнилі на органах і тканинах,
A. Гідролітичні багатих на воду, зі зміною кольору,
B. Оксідоредуктази смаку, появою запаху. Які з
C. Ізомерази мікроорганізмів найчастіше спричиняє
D. Ліази появу гнилі?
E. Трансферази A. Гриби і бактерії B. Віруси і рикетсії
C. Мікоплазми і віроїди D. Мікоплазми і
рикетсії E. Віруси і бактерії
Багато хвороб лікарських рослин Під час збирання лікарської сировини
обусмовлюють бактерії роду виявилося, що в неї виражена
Pseudomonas. Виберіть серед мозаїчність листя. Які мікроорганізми
перерахованих бактерій те, які спричиняють це захворювання?
належать до цього роду: A. Віроїди
A. Синьогнійна паличка B. Найпростіші
B. Сікрококи C. Бактерії
C. Протей D. Мікроскопічні гриби
D. Кишкова паличка E. Віруси
E. Микоплазма

Згідно з вимогами ВООЗ та Фармакопеї У відповідності з вимогами ВООЗ та


в різних лікарських формах Фармакопеї України у вушних краплях
нестерильних препаратів допускається кількість мікроорганізмів в 1 мл
певна кількість бактерій та грибів. Яка препарату не повинне перевищувати:
кількість сапрофітних бактерій та грибів A. 100 мікробних клітин (бактерій та
в 1 г (мл) перорального препарату грибів)
гарантує його безпечність? B. 10 мікробних клітин (бактерій та
A. 1000 бактерій та 100 плісеневих грибів)
грибів C. 1000 мікробних клітин (бактерій та
B. 500 бактерій та 50 плісеневих грибів грибів)
C. 250 бактерій та 25 плісеневих грибів D. 10 000 мікробних клітин (бактерій та
D. 500 бактерій та 200 плісеневих грибів)
грибів E. 100 000 мікробних клітин (бактерій
E. 1500 бактерій та 150 плісеневих та грибів)
грибів
У аптеці по рецепту приготували вушні Для лікування екземи лікар виписав
краплі. Яка максимальна кількість пацієнтові лікарський засіб, який слід
мікробних клітин допустима в 1 мл цих використовувати трансдермально. Яка
крапель відповідно до вимог ВООЗ і максимальна кількість мікробних клітин
фармакопеї ? допустима в 1 г цього засобу
A. Не більше 100 відповідно до вимог ВООЗ і
B. Не більше 50 фармакопеї?
C. Не більше 1000 A. 100 бактерій і грибів сумарно
D. Не більше 500 В. 100 бактерій і 50 грибів
E. Не більше 150 C. 1000 бактерій і грибів
D. 100 бактерій і 100 грибів
E. 500 бактерій і грибів
Лікувальні препарати для місцевого В аптечних умовах хворому
використання (трансдермального, приготували мазь для зовнішнього
інтравагінального й ін.) не вимагають використання. Яка кількість
стерильності. Однак припустима мікроорганізмів може перебувати в
сумарна кількість мікробних клітин і одному грамі відповідно до вимог
грибів в 1 г (мл) препарату не повинне Фармакопеї?
перевищувати: А. До 100 бактерій і грибів разом
A. 100 В. До 10000 бактерій і грибів разом
B. 1000 С. До 1000 бактерій і грибів разом
C. 10 0000 D. До 5000 бактерій і грибів разом
D. 500 E. До 500 бактерій і грибів разом
E. 10
Дитині шести місяців лікар призначив Якість лікарських препаратів оцінюють
лікарський препарат для вживання за показниками, включаючи
внутрішньо. Яка максимальна кількість "мікробіологічну чистоту". Укажіть
бактерій і грибів допустима в 1 г цього лікарські форми, у яких допускається
препарату у відповідності з вимогами значно більша в порівнянні з іншими
ВООЗ і фармакопеї? формами кількість сапрофітних
А. Не більш 50 бактерій і грибів бактерій ?
сумарно A.Настої
B. Не більш 500 бактерій і грибів B. Аерозолі
сумарно C. Супозиторії
C. Не більш 1000 бактерій і грибів D. Очні краплі
сумарно E. Ін'єкційні розчини
D. Не більш 1000 бактерій і 100 грибів
E. Не більш 500 бактерій і грибів
Бактеріологічний контроль Згідно фармакопейних вимог лікарські
нестерильних лікарських засобів препарати для місцевого застосування
припускає можливість присутності повинні підлягати контролю на
незначної кількості груп "мікробіологічну чистоту". Виявлення
мікроорганізмів. Яких саме? яких мікроорганізмів свідчить про
A. Сарцини непридатність цієї групи препаратів у
B. Кишкова паличка медичній практиці?
C. Синьогнійна паличка A.Золотавих стафілококів
D. Золотавий стафілокок B. Дріжджових грибів
E. Гемолітичний стрептокок C. Сапрофітних стафілококів
D. Плісеневих грибів
Висновки
 Первинна контамінація здійснюється в процесі їх приготування
(виробництва),
 вторинна - при зберіганні і використанні.
Джерела мікробної контамінації класифікують на екзогенні і ендогенні.
 До екзогенних відносяться забруднені мікрофлорою повітря приміщень,
устаткування, інвентар, технологічний одяг і руки персоналу.
 До ендогенних відносяться сировина, допоміжні матеріали, вода,
первинна упаковка.
 До 60-80% всіх випадків мікробної контамінації лікарських засобів
пов'язують з екзогенними джерелами.
Дякую за увагу!

You might also like