Metoda Zasada metody Czas trwania Łatwość Skuteczność metod Aparatura

wykonania identyfikacji

LAMP Do przeprowadzenia Proces bez LAMP jest o Granica Genie II

amplifikacji najczęściej zastosowania znacznie wykrywalności
wykorzystywana jest para starterów bardziej czuła testu LAMP w
starterów wewnętrznych zapętlający niż PCR, nie wykrywaniu L.
(internal primers– FIP i trwa około 50 trzeba monocytogenes w
BIP), para zewnętrzna minut, po ich stosować czystych
(outer primers– F3 i B3), dodaniu czas elektroforezy hodowlach
dodatkowo stosowana jest trwania do rozdziału wynosiła 2
para tak zwanych loop amplifikacji produktów. jtk/reakcję.
primers. Startery jest
zewnętrzne (F3 i B3) zredukowany
flankują regiony do zaledwie
amplifikowane przez 20 minut.
startery wewnętrzne. F3 i
B3 są krótsze i występują w
mieszaninie reakcyjnej w
mniejszym stężeniu, tak aby
wiązały się z matryca
wolniej niż startery
wewnętrzne i inicjowały
zastępowanie nici dupleksu
przez nowo syntezowaną
nić potomną.

PCR Metoda powielania 30 minut Nie wymaga Można otrzymać Termocykler

łańcuchów DNA polegająca znajomości bardzo dużo
na łańcuchowej reakcji skwencji kopii materiału
polimerazy DNA w wyniku badanego genetycznego.
wielokrotnego genu, metoda
podgrzewania i oziębiania czuła
próbki, w warunkach
laboratoryjnych.

Multiplex PCR Metoda polega na ok. 1 godzina Metoda W jednej reakcji FilmArray
jednoczesnej amplifikacji wysokowydajn multiplex można
kilku fragmentów DNA a, obniża uzyskać 13
różniących się wielkością. koszty amplikonów
W mieszaninie stosuje się stosowanych
kilka par starterów. odczynników.
Metoda
multipleks
pozwala na o
wiele
efektywniejsze
sprawdzenie
jakości
powielanej
sekwencji
docelowej.

ANSR Ten test oparty na DNA Ok 18-24 Ok 18-24 ANSR Listeria i ANSR for
polega na amplifikacji godziny godziny Testy ANSR L. Listeria
kwasu nukleinowego przez monocytogene s monocytogene
 reakcję opartą na można stosować s test
technologii amplifikacji oddzielnie lub w
enzymów nickingowych. połączeniu jako
część skutecznego
programu
testowania Listeria.
Próbki można
badać za pomocą
Listeria spp. test do
dostarczenia
wyników na
poziomie
wskaźnika, po
czym wyniki
pozytywne mogą
być ponownie
testowane

Real-Time PCR Metoda ta pozwala na na 12 minut Jest to metoda Pozwala na VIASURE 96

monitorowanie zmian szybka, czuła ilościowe oraz lub VIASURE
stężenia produktu PCR oraz jakościowe 48 (96 lub 48-
poprzez pomiar odtwarzalna. oznaczenie dołkowy).
fluorescencji materiału (dołkowe -
proporcjonalnej do jego genetycznego. płytki)
ilości w czasie trwania
reakcji. Stosowane
barwniki to bromek
etydyny, SYBR Green I
a sonda moleklarna to
np. TaqMan

Hybrydyzacja Hybrydyzacja in situ w 24 godziny Wysoka Pozwala na Biosan CH100

DNA miejscu naturalnego komplementar identyfikację wielu
występowania Znakowany ność oraz próbek na tym
polipeptyd stabilność samym filtrze oraz
tworzy hybrydę z formowanego ich ocenę
komplementarnymi dupleksu. półilościową.
sekwencjami znajdującego Pozwala na
się w komórce kwasu wykrycie
nukleinowego. Metoda ta sekwencji
pozwala wykryć powtórzonych.
poszukiwaną sekwencję
oraz zlokalizować jej
położenie w komórce i na
chromosomie.

Test Test zawierający 1,5 godziny Średnio Jeśli zostaną płytki 96

immunoenzyma specyficzne przeciwciała uzyskane wątpliwe dołkowe
tyczny Transia dla białka P60 L. wyniki należy
monocytgenes znakowane przeprowadzić
peroksydazą chrzanową badania
potwierdzające

Test na katalazę Katalaza to enzym, który Inkubacja Metoda bardzo Dobra - stwierdza Szkiełko
rozkłada toksyczny dla hodowli łatwa obecność L. podstawowe i
komórki H2O2 do zwykłego przez 24h i monocytogenes inkubator
H2) i O2. Na szkiełko kilka minut
 podstawowe należy nanieść trwania testu
kroplę 3% roztworu H2O2 i
zawiesić w niej pobraną
kolonię. Pęcherzyki gazu
wskazują na obecnośc
katalazy. L. monocytogenes
posiada zdolność do
wytwarzania katalazy

Polimorfizm Pozwala między innymi na 24 godziny Technika jest Wykrywa mutacje

pojedynczej uwidocznienie różnych alleli prostym i jednopunktowe
nici danego genu. Metoda skutecznym i inne zmiany
opiera się na założeniu, że sposobem na małą skalę
niewielkie zmiany w wykrycia zmian
sekwencji nukleotydów w sekwencji
mają wpływ na zmianę nukleotydów
struktury przestrzennej produktów
cząsteczki DNA co wpływa reakcji PCR.
na różnicę w migracji DNA
w żelu. Produkty reakcji
PCR po denaturacji
układają się we właściwe
dla swojej sekwencji
struktury przestrzenne.
DNA różniące się
sekwencją nukleotydową
różni się również strukturą
przestrzenną przez co
wykazuje inną ruchliwość
na żelu, widoczną jako
różnica w odległości
prążków.

Test zdolności Polega na wytwarzaniu Hodowla jest Prosta metoda Dobra - potwierdza Szalka
do rozkładu kwasów z cukrów. Do inkubowana obecność L. Petriego i
węglowodanów pożywki dodaje się przez 24h monocytogenes inkubator
ramnozę, ksylozę, purpurę
bromokrezolową i wykonuje
się posiew. Wynik dodatki to
zmiana barwy wskaźnika z
purpurowej na żółtą.
świadczy o zdolności do
rozkładu danego cukru. L.
monocytogenes nie
fermentuje ksylozy tylko
ramnozę