NASTAVNA TEMA: BAKTERIOLOŠKE

HRANJIVE PODLOGE
 Predmet: MIKROBIOLOGIJA
 Smjer : ZLT, ST, FT

 Pripremila: Ines Mišetić Lašić,bacc.med.lab dijagnostike

 BAKTERIOLOŠKE
HRANJIVE PODLOGE
PONOVIMO: ISHODI KOJE SMO DO SADA
USVOJILI !
 Razlog uzgoja bakterija u laboratoriju je taj da se iz
biološkog uzorka izolira i identificira patogena bakterija
koja je uzrokovala infekciju.
 Drugi važan razlog je da se ispita osjetljivost izolirane
bakterije na lijekove antibiotike zbog terapije za
pacijenta.
 Da bi uzgojili bakteriju u laboratoriju potrebni su
određeni uvjeti a jedan od njih je pripremiti
odgovarajuća hranilišta (bakteriološke podloge)za uzgoj.
 Pogledajmo kako se to radi?
ŠTO SU BAKTERIOLOŠKE
PODLOGE?
 hranjivi medij koji svojim sastavom omogućuje rast
bakterija
 osnovna namjena je uzgoj bakterija u
laboratorijskim uvjetima
Zašto uzgajamo bakterije??
o Identifikacijom bakterija postavljamo dijagnozu
o Proučavamo njihove osobine
o Provjeravamo osjetljivost prema antibioticima
SASTAV HRANJIVIH PODLOGA
- Bakterije za svoj rast i razvoj trebaju hranjive
podloge različitog sastava:
 voda

 bjelančevine

 ugljikohidrati

 vitamini

 purini

 mineralne soli,elemente u tragovima, velike količine

destilirane vode
PREMA PODRIJETLU, BAKTERIOLOŠKE
HRANJIVE PODLOGE MOGU BITI:
1)PRIRODNE HRANJIVE PODLOGE
- u izvornom obliku se nalaze u prirodi, a povoljan
sastav omogućuje rast i razmnožavanje bakterija
(krvni serum,mlijeko)

2)SINTETIČKE HRANJIVE PODLOGE

- standardizirane, kemijski sastav točno određen

3)POLUSINTETIČKE HRANJIVE PODLOGE

- kombiniranje sastojaka prirodnih i sintetičkih
hranjivih podloga
PREMA KONZISTENCIJI RAZLIKUJEMO:
 1) TEKUĆE HRANJIVE PODLOGE- bujon- za uzgoj uzoraka sa samo 1 vrstom
bakterija
 2) POLUKRUTE (POLUTEKUĆE) HRANJIVE PODLOGE- nastaju dodavanjem
male količine agara tekućoj podlozi. Agar je ekstrakt morske alge koji ne utječe
na hranjivu vrijednost podloge već joj daje čvrstoću. Osobina agara je da se na
temperaturi preko 100 stupnjeva otopa a hlađenjem prelazi u kruto stanje.
 3) KRUTE HRANJIVE PODLOGE- agar- omogućuju rast različitih bakterijskih
vrsta i raspoznavanje kolonija
PREMA NAMJENI BAKTERIOLOŠKE
PODLOGE MOŽEMO PODIJELITI NA:
1) HRANJIVE PODLOGE ZA IZDVAJANJE BAKTERIJA IZ
MATERIJALA
 Obiluju hranjivim tvarima, na njih se nasađuju primarno sterilni
uzorci ˝zahtjevnijih˝ bakterijskih vrsta

2) SELEKTIVNE HRANJIVE PODLOGE

 Omogućuju bolji rast jedne vrste bakterija, a inhibiraju rast ostalih
vrsta, obično iz primarno nesterilnih uzoraka
 Postizanje selektivnosti dodatkom inhibicijskih tvari za neke vrste
bakterija (antibiotici,soli,boje)

3) DIFERENCIJALNE HRANJIVE PODLOGE

 Služe za razlikovanje pojedinih bakterijskih vrsta
 Ne sadrže inhibirajuće tvari
4) HRANJIVE PODLOGE ZA ODREĐIVANJE BIOKEMIJSKIH
OSOBINA

5) HRANJIVE PODLOGE ZA ČUVANJE BAKTERIJSKIH

KULTURA
namjena: da se bakterije na njima uzgoje i što duže održe
živima

6) HRANJIVE PODLOGE ZA POSEBNE NAMJENE

za dokazivanje osjetljivosti bakterija prema antimikrobnim
tvarima npr-. Mueller-Hintonov agar

7) TRANSPORTNE HRANJIVE PODLOGE

OSNOVNE HRANJIVE PODLOGE
 HRANJIVI BUJON= osnovna tekuća hranjiva
podloga
 GLUKOZNI BUJON= nastaje dodavanjem glukoze,
a SERUMSKI BUJON dodavanjem seruma
osnovnoj podlozi
 HRANJIVI AGAR= osnovna kruta hranjiva podloga

 KRVNI AGAR- smjesi hranjivog agara se doda

sterilna ovčja krv
DIFERENCIJALNE HRANJIVE
PODLOGE
1) KRVNI AGAR-kruta hranjiva
podloga,služi za nasijavanje
briseva ždrijela,uha,nosa,rana...
Bakterije mogu stvoriti alfa,beta ili
gama hemolizu.
2) URI SELECT- žuta kruta podloga za nasijavanje
urina i izoliranje patogenih bakterija koje uzrokuju
urinarne infekcije

3) VRBG- VIOLET RED GLUKOZA AGAR- kruta

roza podloga,za izolaciju bakterija iz hrane
SELEKTIVNE HRANJIVE PODLOGE

 1) LOWENSTEIN JENSENOVA PODLOGA-kosi agar

svijetlozelene boje u epruveti, za nasijavanje sputuma i
uzgoj bacila tuberkuloze

 2) SS AGAR-SALMONELA,SHIGELA AGAR- selektivna

svijetlosmeđa podloga za izolaciju Salmonele i Shigele iz
fecesa i namirnica

 3) ENDO AGAR- kruta podloga roze boje za uzgoj E.coli

i ostalih gram negativnih bakterija

 4) KARMALI AGAR- za nasijavanje fecesa i uzgoj

Campylobacter
LOWENSTEIN JENSENOVA PODLOGA
LIJEVO SA PORASLOM KULTUROM
DESNO _STERILNA PODLOGA
ENDO AGAR SS AGAR
Campylobacter na KARMALI AGRU
BIOKEMIJSKE HRANJIVE PODLOGE

 1) DVOSTRUKI
ŠEĆER PO
KLIGLERU- kosi agar
crvene boje, služi za
ispitivanje biokemijskih
osobina bakterija
 2) SIMMONSOVA (CITRAT) PODLOGA- kosi agar
zelene boje u epruveti
PODLOGA ZA POSEBNE NAMJENE

 MUELLER HINTONOV agar

PRIPREMA BAKTERIOLOŠKIH
HRANJIVIH PODLOGA
 podloge u laboratoriju dolaze u dehidriranom obliku -
industrijski proizvedene podloge u prahu
 pripremaju se po uputama proizvođača

 POSTUPAK PRIPREME:

 ODVAGA ODREĐENE KOLIČINE PRAHA

 OTAPANJE U DESTILIRANOJ VODI

 ZAGRIJAVANJE DO VRENJA uz povremeno

miješanje
 STERILIZACIJA SMJESE PO UPUTAMA
PROIZVOĐAČA
 RAZLIJEVANJE U sterilne Petrijeve zdjelice u
sterilnoj sobi.
SMJESA ZA PRIPREMU HRANJIVOG
AGARA
RAZLIJEVANJE HRANJIVIH PODLOGA U
STERILNOJ SOBI
PRIBOR – ZA PRIPREMU PODLOGA
VJEŽBA: PRIPREMA HRANJIVE
PODLOGE
 Praktični zadatak za učenike na vježbama :Pripremiti hranjivi
agar po uputama sa deklaracije proizvođača

PRIBOR I MATERIJAL:
1. Dehidrirana hranjiva podloga _hranjivi agar
2. Žlica
3. Digitalna vaga
4. kuhalo
5. Posuda za vaganje smjese
6. Erlenmayerova tikvica
7. Stakleni štapić
8. Rukavice
9. Destilirana voda
10. Petrijeve zdjelice
POSTUPAK:

1. Pripremiti radno mjesto i potreban pribor

2. Odvagati potrebnu količinu praha hranjivog agara.
3. Prebaciti prah u tikvicu i miješanjem dodati destiliranu vodu i
otopiti zagrijavanjem na električnom kuhalu.
4. Povremeno promiješati sadržaj u tikvici
5. Otopiti zagrijavanjem pri 100°C ,kada smjesa prokuha
prekinuti zagrijavanje
6. Sterilizirati smjesu prema uputama proizvođača
7. Razliti sterilnu smjesu u Petrijeve zdjelice (sterilna soba s
UV lampama)
8. Hlađenje podloga na sobnoj temperaturi
9. Ako se podloge isti dan ne koriste čuvamo ih u hladnjaku na
+4°°C do mjesec dana.
PONOVIMO UKRATKO:

 Bakteriološke hranjive podloge služe za uzgoj

mikroorganizama u laboratoriju
 Dolaze u dehidriranom obliku i pripremamo ih po
uputama proizvođača
 Podloge moraju biti sterilne pa ih nakon pripreme
steriliziramo
 Po konzistenciji ih dijelimo na tekuće,polutekuće i krute.

 Po namjeni se dijele na:

diferencijalne,selektivne,transportne,biokemijske, za
čuvanje bakterijskih kultura i hranjive podloge za posebne
namjene.
HVALA NA PAŽNJI !
Ines Mišetić Lašić