1. Đĩa LAP là một xét nghiệm nhanh để phát hiện enzyme leucine amino peptidase.

Đĩa được tẩm leucine-ß-naphthylamide, được thủy phân bởi enzyme leucine
aminopeptidase, được tạo ra bởi các sinh vật dương tính với LAP. Hoạt động của
enzym này dẫn đến việc giải phóng ß-naphthylamine, chất này kết hợp với thuốc
thử p-dimethylaminocinnamaldehyde, khi nó được thêm vào, để tạo thành bazơ
Schiff màu đỏ rất dễ nhìn thấy.
VIDEO YOUTUBE : https://www.youtube.com/watch?v=cvigSvHoKPY

Viết bởi Acharya Tankeshwarin Bacteriology Cập nhật lần cuối vào ngày 6 tháng 8 năm
2022
Thử nghiệm Leucine Aminopeptidase (LAP) được sử dụng để xác định các cầu khuẩn
gram dương có catalase. Cụ thể, nó phân biệt Aerococcus và Leuconostoc với
Streptococcus, Enterococcus, Lactococcus và Pediococcus.

Thử nghiệm LAP chủ yếu được sử dụng để xác định đặc điểm sơ bộ của các sinh vật
giống Streptococcus. Xét nghiệm LAP chỉ là một trong những xét nghiệm hữu ích để xác
định các cầu khuẩn Gram dương, âm tính với catalase. Ví dụ: bảng nhận dạng liên cầu
(API Rapid Strep) cũng chứa một bài kiểm tra LAP.

Nguyên tắc
Đĩa LAP là một xét nghiệm nhanh để phát hiện enzyme leucine aminopeptidase. Đĩa tẩm
leucine-beta-naphthylamide đóng vai trò là chất nền để phát hiện leucine aminopeptidase.
Sau khi thủy phân cơ chất bằng enzym, beta-naphtylamin thu được tạo ra màu đỏ khi
thêm thuốc thử cinnamaldehyde.

Kiểm soát chất lượng

Trước khi sử dụng, thực hiện QC trên mỗi lô hoặc lô hàng mới của đĩa LAP và thuốc thử
màu. Vì xét nghiệm được thực hiện không thường xuyên và hầu hết các cầu khuẩn Gram
dương đều dương tính với LAP, hãy xác minh hiệu lực bằng cách kiểm tra đối chứng
dương tính mỗi khi thu được xét nghiệm âm tính bằng cách sử dụng các sinh vật thử
nghiệm.

Enterococcus faecalis ATCC 29212 — LAP dương tính

Aerococcus viridans ATCC 11563 — LAP âm tính
Phương pháp
Trước khi ủ, làm ẩm nhẹ đĩa LAP bằng nước cấp thuốc thử. Không làm quá bão hòa đĩa.
Sử dụng que bôi bằng gỗ, chà một lượng nhỏ vài khuẩn lạc của mẫu cấy tinh khiết từ 18
đến 24 giờ lên một vùng nhỏ của đĩa LAP.
Ủ ở nhiệt độ phòng trong 5 phút.
Sau thời gian ủ, thêm 1 giọt thuốc thử cinnamaldehyde.
Kết quả mong đợi
Dương tính: Phát triển từ màu đỏ đậm đến đỏ tía trong vòng 3 phút sau khi thêm thuốc
thử cinnamaldehyde.
Các phản ứng yếu có màu hồng.
Âm tính: Không thay đổi màu sắc hoặc chuyển sang màu vàng nhẹ.
Kết quả kiểm tra LAP
Kết quả xét nghiệm LAP của một số cầu khuẩn Gram dương, âm tính với catalase như
sau:

LAP âm tính: Leuconostoc

LAP dương tính: Streptococcus, Enterococcus, Lactococcus và Pediococcus
Biến LAP: Aerococcus
Hạn chế
Xét nghiệm LAP là một trong những xét nghiệm hữu ích để xác định cầu khuẩn Gram
dương, âm tính với catalase và hữu ích nhất khi xét nghiệm kit cho kết quả nhận dạng
không phổ biến hoặc kết quả nhuộm Gram không cho thấy cầu khuẩn trong chuỗi.
Nếu chất cấy không đủ, có thể thấy kết quả âm tính giả.

Tài liệu tham khảo và các bài đọc thêm

Sổ tay Quy trình Vi sinh Lâm sàng, Tái bản lần thứ tư. (2016). Trong Sổ tay Quy trình Vi
sinh Lâm sàng, Tái bản lần thứ Tư. Hiệp hội Vi sinh học Hoa Kỳ.
https://doi.org/10.1128/9781555818814
Tập bản đồ màu và Sách giáo khoa về vi sinh chẩn đoán, Koneman, tái bản lần thứ 5

- https://microbeonline.com/leucine-amino-peptidase-lap-test-principle-procedure-
results/
( TRONG NÀY CÓ MỘT VÀI HÌNH ẢNH CÓ THỂ SỬ DỤNG )