2022 年 1 月 第 47 卷第 2 期 Vol. 47，No.

2 January，2022

·经典名方研究专题·

经典名方“竹茹汤 ”的物质基准量值传递分析
1 1 1 1 1 1 1 2
王璐 ，谢辉 ，赵晓莉 ，彭梅梅 ，屈凌芸 ，毛春芹 ，李林 ，郭勇 ，
2 1* 1*
侯金才 ，陆兔林 ，戴小斌
（ 1． 南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210023； 2． 神威药业集团有限公司，河北 石家庄 051430）

［摘要］ 为阐明竹茹汤物质基准的关键质量属性，制备 18 批物质基准对应实物，建立竹茹汤物质基准指纹图谱及其含量测

定的检测方法，明确其指纹图谱共有峰的色谱峰归属，相似度范围，浸出物范围，指标性成分葛根素、甘草苷和甘草酸的含量
以及转移率范围。结果表明，
18 批竹茹汤物质基准对应实物共标定 25 个共有峰，指纹图谱相似度均大于 0. 95。汇总特征峰
信息可知，葛根、甘草、生姜分别贡献 21、
3、1 个色谱峰； 18 批物质基准对应实物的浸出物 18. 45% ～ 25. 29%； 不同批次物质基
准对应实物的指标性成分含量和转移率： 葛根素质量分数 2. 20% ～ 3. 07%，转移率 38. 5% ～ 45. 9%； 甘草苷质量分数0. 24% ～
0. 85%，转移率 15. 9% ～ 37. 5%； 甘草酸质量分数 0. 39% ～ 1. 87%，转移率 16. 2% ～ 32. 8%。该实验采用浸出物、指纹图谱及指
标性成分含量测定相结合的模式，对经典名方竹茹汤物质基准的量值传递过程进行分析，初步建立了科学稳定的物质基准质
量评价方法，为经典名方竹茹汤的后续开发及相关制剂的质量控制提供依据。
［关键词］ 经典名方； 竹茹汤； 物质基准； 指纹图谱； 量值传递

Quality value transmitting of substance benchmarks of

Zhuru Decoction

WANG Lu1 ，XIE Hui 1 ，ZHAO Xiao-li 1 ，PENG Mei-mei 1 ，QU Ling-yun1 ，MAO Chun-qin1 ，LI Lin1 ，GUO Yong2 ，
HOU Jin-cai 2 ，LU Tu-lin1* ，DAI Xiao-bin1*
（ 1. School of Pharmacy，Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210023，China；
2. Shineway Pharmaceutical Group Co．，Ltd．，Shijiazhuang 051430，China）

［Abstract］ A total of 18 batches of Zhuru Decoction samples were prepared． Chromatographic fingerprints were established for Zhuru
Decoction and single decoction pieces，the content of which was then determined． The extraction rate ranges，content，and transfer rate
ranges of puerarin，liquiritin，and glycyrrhizic acid，together with the common peaks and the similarity range of the fingerprints，were
determined to clarify key quality attributes of Zhuru Decoction． The 18 batches of Zhuru Decoction samples had 25 common peaks and
the fingerprint similarity higher than 0. 95． Puerariae Lobatae Ｒadix，Glycyrrhizae Ｒadix et Ｒhizoma，and Zingiberis Ｒhizoma Ｒecens
had 21，3，and 1 characteristic peaks，respectively． The 18 batches of samples showed the extraction rates within the range of 18. 45%-
25. 29%． Puerarin had the content of 2. 20%-3. 07% and the transfer rate of 38. 5%-45. 9%； liquiritin had the content of 0. 24%-
0. 85% and the transfer rate of 15. 9%-37. 5%； glycyrrhizic acid had the content of 0. 39%-1. 87% and the transfer rate of 16. 2%-
32. 8%． In this paper，the quality value transmitting of substance benchmarks of Zhuru Decoction was analyzed based on chromato-
graphic fingerprints，extraction rate，and the content of index components． A scientific and stable method was preliminarily established，
which provided a scientific basis for the quality control and formulation development of Zhuru Decoction．

［收稿日期］ 2020-11-27
［基金项目］ 国家重点研发计划项目（ 2018YFC1707000） ； 江苏省研究生科研与实践创新训练计划项目（ KYCX21-1773）
［通信作者］ *
陆兔林，教授，博士生导师，主要从事中药炮制及中药饮片质量标准研究，E-mail： lutuling2005@ 126．com； * 戴小斌，讲师，主要
从事制药工程研究，E-mail： antswang@ 163．com
［作者简介］ 王璐，硕士研究生，E-mail： wangluann@ foxmail．com

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 王璐等： 经典名方“竹茹汤”的物质基准量值传递分析

［Key words］ classical prescription； Zhuru Decoction； substance benchmarks； chromatographic fingerprint； quality value transmit-
ting
DOI： 10. 19540 / j．cnki．cjcmm．20210302. 304

竹茹汤（ Zhuru Decoction，ZＲD） 出自宋朝许叔微 经典名方竹茹汤的后续开发及相关制剂的质量控制

［12-15］
所著《普济本事方》，原方记载： “干葛三两，甘草三分 提供参考 。
（ 炙） ，
半夏三分（ 姜汁半盏，
浆水一升煮耗半） ”，其处 1 材料
方用法： 将上述 3 味饮片混合粉碎成粗末后，每次称 1. 1 仪器
取其中的五钱，
再加水二盏，加入生姜三片，竹茹一弹 岛津 LC-20A 高效液相色谱仪，日本岛津公司；
［1］
大，
枣一个，同煎至一盏，去滓温服 。 本方使用半 Agilent 1200 高 效 液 相 色 谱 仪，美 国 Agilent 公 司；
夏、
竹茹、生姜以安胃止呕，同时发挥甘草、大枣利脾 Waters 2695 高效液相色谱仪，沃特世 科 技 有 限 公
健气，调和诸药的功效。葛根能升阳祛风，重用以升 司； MS-105D 电子分析天平（ d = 0. 01 mg） ，瑞士梅特
清降浊， 生津清热，《神农本草经》谓其主“身大热、呕 勒-托利多公司； FA1104N 型电子分析天平 （ d = 0. 1
［2］
吐” 。诸药合用，共奏清热化痰，和胃止呕之功，对 mg） ，上海菁海仪器有限公司； FZ102 型微型植物试
［3］
于胃热呕吐，
服之即时愈 。现代研究表明异黄酮类 样 粉 碎 机，北 京 市 永 光 明 医 疗 仪 器 有 限 公 司；
成分是葛根的主要有效成分，具有较强的生理活性， H21S011 型多功能红外炉，广东美的生活电器制造
其中 3'-甲氧基葛根素、葛根素、
3'-羟基葛根素、大豆 有限公司； 砂锅，江西舒雅陶瓷有限公司； Milli-Q In-
苷、
葛根芹菜糖苷等异黄酮类成分具有解酒、 降血糖、 tergral 水纯化系统，美国 Millipore 公司。
增强免疫力、
缓解腹泻、 改善骨质疏松、
抗心脑血管疾 1. 2 试药
［3-10］
病等药理作用 。 葛根、半夏、甘草、竹茹、生姜、大枣药材具体信
2018 年 4 月，国家中医药管理局会同国家药品 息见表 1，经南京中医药大学药学院陈建伟教授鉴
监督管理局公布了第一批《古代经典名方目录 》，竹 定。葛根、竹茹、生姜、大枣均按《中国药典 》2020 年
茹汤为 100 首经方之一。 随后发布的《古代经典名 版炮制成符合要求的饮片，甘草、半夏按课题组前期
方复方制剂物质基准申报资料要求 （ 征求意见稿 ） 》 研究制定的《水炙甘草工艺及质量标准 》（ 草案 ） 、
中明确提出，在整个经典名方研究过程中，应以浸出 《姜汁浆水制半夏工艺及质量标准 》（ 草案 ） 炮制成
物、含量测定、指纹图谱等指 标，全 面 考 察 药 材-饮 符合要求的饮片。
片-中间体-对应实物的相关性，关注对应实物制备 葛根素 （ 批号 110752-201615，纯度 95. 4%） 购
［11］
过程中关键质量属性的量值传递等 。 于中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院。 甘 草 苷 （ 批 号
目前，关于竹茹汤的研究尚少，仅有少量文献考 P29M6Ｒ7、20120131，纯 度 ≥ 98%） 、甘 草 酸 单 铵 盐
证，其水煎液量值传递的分析研究尚未见报道 。 对 （ 批号 Z01027BA14、20120911，纯度≥98%） 、6-姜辣
竹茹汤进行处方考证时发现，方中葛根的剂量几乎 素（ 批号 Y12A8H41703，纯度≥98%） 均购于上海源
占全方的一半，甘草的前期研究较多，且二者在复方 叶生物科技有限公司。
中的质量控制研究有一定基础，竹茹的高效液相色 乙腈（ 色谱纯） ，默克股份两合公司； 甲醇 （ 色谱
谱法（ high performance liquid chromatography，HPLC） 纯） ，江 苏 汉 邦 科 技 有 限 公 司； 无 水 乙 醇 （ 批 号
研究鲜见文献报道，而复方中半夏、大枣的质量控制 20180510） ，国药集团化学试剂有限公司； 甲酸 （ 批
研究一直是个难点，尚未建立较好的质量研究方法， 号 20131107） ，上 海 凌 峰 化 学 试 剂 有 限 公 司； 磷 酸
因此本研究主要聚焦方中葛根和甘草的质量研究 。 （ 批号 20150203） ，国药集团化学试剂有限公司； 其
本研究通过制备 18 批竹茹汤物质基准对应实物，建 他试剂均为分析纯，山东禹王实业有限公司化工分
立竹茹汤物质基准对应实物的 HPLC 指纹图谱和含 公司。
量测定的检测方法，对 18 批物质基准对应实物进行 2 方法与结果
相似度分析并对其特征峰进行归属，初步确定其浸 2. 1 18 批竹茹汤物质基准对应实物的制备
出物、指标性成分含量及转移率的质量控制范围 ，为 采用随机数表法，对不同批次葛根、半夏 （ 姜汁
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表1 竹茹汤单味药材的产地及购买厂商 供试品溶液的制备 精密量取竹茹汤物质

2. 2. 2
Table 1 Origins and buyers of medicinal materials in Zhuru De- 基准对应实物、各药味药材、饮片单煎液 30 mL 于蒸
coction 发皿中水浴挥干，50% 甲醇复溶，定容至 10 mL，离
名称 产地 批次 来源
葛根 陕西商洛 171012011-17102015 河北神威药业集团有限公司
心取上清液过微孔滤膜，即得。
安徽 111708011-111708015 安徽美誉中药饮片公司 精密度考察 取同一供试品溶液，按 2. 2. 1
2. 2. 3
河南西峡 GG180321-GG180325 河北神威药业集团有限公司 项下，连续进样 6 次。以葛根素为参照峰，计算各共
半夏 贵州 171201-171205 四川新荷花中药饮片股份
有限公司
有峰相对保留时间和相对峰面积 ＲSD，结果各峰相
甘肃陇南 171206-171210 四川新荷花中药饮片股份 对保留时间 ＲSD＜ 0. 13%，相对峰面积 ＲSD＜ 4. 5%，
有限公司 相似度 ＞0. 95，表明仪器精密度良好。
甘肃天水 171211-171215 四川新荷花中药饮片股份
2. 2. 4 重复性考察 取同一批次竹茹汤物质基准 6
有限公司
江苏泰州 20180111 江苏华洪药业科技有限公司 份，
将供试品溶液按 2. 2. 1 项下进样。以葛根素为参
四川 111707282 安徽美誉中药饮片公司 照峰，计 算 各 共 有 峰 相 对 保 留 时 间 和 相 对 峰 面 积
甘草 新疆阿勒泰 180311-180315 河北神威药业集团有限公司
ＲSD，结果各峰相对保留时间 ＲSD＜0. 12%，相对峰面
内蒙古鄂尔多斯 180321-180325 河北神威药业集团有限公司
甘肃陇西 1804191-1804195 河北神威药业集团有限公司 积 ＲSD＜5. 0%，
相似度＞0. 95，
表明方法重复性良好。
竹茹 安徽岳西 1708311-1708315 河北神威药业集团有限公司 2. 2. 5 稳 定 性 考 察 取 同 一 供 试 品 溶 液，按 照
江西 111707221-111707225 安徽美誉中药饮片公司
2. 2. 1 项下色谱条件，分别于 0、2、4、8、12、24 h 进
四川 111707261-111707265 安徽美誉中药饮片公司
生姜 山东平邑 201802211-20180215 南京仙林市场 样。以葛根素为参照峰，计算各共有峰相对保留时
山东莱芜 201803131-201803135 南京仙林市场 间和 相 对 峰 面 积 ＲSD，结 果 各 峰 相 对 保 留 时 间
云南 201802271-201802275 网购
相对峰面积 ＲSD＜4. 8%，
ＲSD＜0. 12%， 相似度＞0. 95，
表
大枣 山西闻喜 1807161-1807165 河北神威药业集团有限公司
山东新泰 1807261-1807265 河北神威药业集团有限公司
明样品 24 h 内稳定性良好。
河北安国 1709061-1709065 河北神威药业集团有限公司 2. 3 竹茹汤物质基准对应实物指纹图谱传递规律
按上述指纹图谱条件，得到 18 批竹茹汤物质基
浆水制） 、甘草 （ 水炙 ） 、竹茹、生姜以及大枣等 6 味 准对应实物指纹图谱相似度均大于 0. 95，有 25 个
饮片进行随机组合。 根据前期工艺研究结果，称取 共有峰。将其与全方 6 味药的饮片指纹图谱信息比
葛根 13. 77 g，半夏 （ 姜汁浆水制 ） 3. 44 g，甘草 （ 水 对，进行各味药的峰归属，结果显示方中竹茹、半夏、
炙） 3. 44 g，3 味饮片粉碎过筛 （ 筛孔内径 1. 5 mm） 大枣在此条件下未检测到明显色谱峰，葛根、甘草、
后加入竹茹 3. 00 g，生姜 3. 00 g，大枣 3. 00 g 置于砂 生姜分别有 21、3、1 个色谱峰。 进一步追溯到 6 味
锅中，加 400 mL 水，浸泡 60 min，武火煮沸后转文火 药的药材指纹图谱信息，结果显示药材与饮片指纹
保持微沸煮至 200 mL 左右，过滤，调整体积至 250 图谱高度相似，表明竹茹汤物质基准主要成分可以
mL，即得 18 批竹茹汤物质 基 准 对 应 实 物，编 号 为 从药材-饮片-物质基准形成较为完整的传递，且归
ZＲD01 ～ ZＲD18。分别取处方量单味药材及饮片，同 属关系清晰。对 25 个特征峰峰面积进行分析，比较
法制备，即得各单味药药材和饮片的单煎水煎液 。 18 批物质基准对应实物及其各自单味药特征峰峰
2. 2 竹茹汤物质基准对应实物指纹图谱方法的建立 面积的均值，见图 1、2，表 2。 饮片中的成分在制备
2. 2. 1 色谱条件 Kromasil 100-5 C 18 色谱柱 （ 4. 6 成物质基准后，4、11、15 ～ 17、20、23、24 号峰面积有
mm × 250 mm，5 μm） ； 流动相 0. 1% 甲酸 （ A） -乙腈 所降低，其中 15、 24 号峰均属于甘草。
16、
（ B） ，梯度洗脱 （ 0 ～ 4 min，0. 5% ～ 8% B； 4 ～ 25 min， 2. 4 浸出物测定
8% ～ 10% B； 25 ～ 36 min，10% B； 36 ～ 38 min，10% ～ 精密量取 18 批竹茹汤物质基准对应实物 20 mL
14% B； 38 ～ 55 min，
14% ～ 16% B； 55 ～ 60 min，
16% ～ 于恒重后的蒸发皿中，水浴蒸干后 105 ℃ 干燥至恒
23% B； 60 ～ 70 min，
23% ～ 30% B； 70 ～ 85 min，
30% ～ 重，
记录质量。物质基准对应实物浸出物 = （ m × V） /
75% B； 85 ～ 89 min，75% ～ 100% B） ，流 速 1 mL· （ M ×v） ×100%，
式中 m 表示浸出物的质量（ g） ，v 表示
min －1 ，DAD 检 测 （ 280 nm） ，柱 温 25 ℃ ，进 样 体 积 取样体积（ mL） 即 20 mL，
M 表示饮片总质量（ g） ，
V表
10 μL。 示物质基准对应实物总体积（ mL） 即 250 mL， 见表 3。
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 王璐等： 经典名方“竹茹汤”的物质基准量值传递分析

A．物质基准； B．葛根； C．甘草； D． 半夏； E． 竹茹； F．生姜； G．大枣； 6．葛根

素； 15．甘草苷； 24．甘草酸（ 图 2 同） 。
图1 竹茹汤物质基准与单味饮片对照指纹图谱 图2 竹茹汤物质基准与单味药材对照指纹图谱
Fig．1 Chromatographic fingerprints of substance benchmarks of Fig．2 Chromatographic fingerprints of substance benchmarks of
Zhuru Decoction and its pieces Zhuru Decoction and its herbs

表2 竹茹汤物质基准对应实物与单味饮片汤剂对照指纹图谱中特征峰峰面积对比分析
Table 2 Comparison of the areas of characteristic peaks in the fingerprints of Zhuru Decoction and single decoction pieces
物质基准 峰面积
No． t Ｒ / min
相对保留时间 相对峰面积 物质基准 葛根饮片 甘草饮片 生姜饮片
1 13. 6 0. 395 0. 009 370. 8 338. 9 － －
2 14. 8 0. 430 0. 042 1 658. 7 1 461. 7 － －
3 19. 9 0. 578 0. 034 1 313. 6 1 162. 6 － －
4 22. 7 0. 657 0. 176 6 868. 6 6 885. 4 － －
5 29. 6 0. 858 0. 023 881. 5 695. 3 － －
6 34. 5 1. 000 1. 000 39 136. 8 36 830. 6 － －
7 40. 1 1. 161 0. 255 9 994. 1 9 769. 6 － －
8 41. 3 1. 196 0. 053 2 079. 4 1 858. 0 － －
9 42. 5 1. 233 0. 211 8 272. 0 7 371. 6 － －
10 43. 7 1. 268 0. 010 385. 4 363. 6 － －
11 45. 7 1. 323 0. 240 9 399. 5 9 699. 8 － －
12 48. 5 1. 405 0. 043 1 691. 4 1 520. 1 － －
13 50. 4 1. 460 0. 011 420. 9 377. 5 － －
14 51. 7 1. 499 0. 034 1 311. 4 1 090. 0 － －
15 56. 3 1. 632 0. 045 1 759. 2 － 3 371. 1 －
16 57. 1 1. 656 0. 018 721. 4 － 1 231. 6 －
17 61. 0 1. 767 0. 024 921. 4 937. 0 － －
18 62. 3 1. 805 0. 011 437. 5 357. 1 － －
19 63. 6 1. 842 0. 048 1 863. 4 1 292. 6 － －
20 66. 4 1. 925 0. 004 157. 5 205. 8 － －
21 68. 2 1. 977 0. 025 983. 3 974. 9 － －
22 69. 4 2. 012 0. 029 1 120. 1 829. 6 － －
23 71. 7 2. 077 0. 028 1 108. 6 1 379. 3 － －
24 78. 5 2. 276 0. 004 174. 2 － 276. 8 －
25 82. 7 2. 397 0. 002 81. 1 － － 79. 9

18 批 竹 茹 汤 物 质 基 准 对 应 实 物 的 浸 出 物 为 min，
13% ～ 15% A； 40 ～ 48 min，15% A； 48 ～ 55 min，
18. 45% ～ 25. 29%，平均浸出物为 22. 00%，各批次浸 15% ～ 45% A； 55 ～ 60 min，
45% ～ 50% A； 60 ～ 65 min，
出物都处于均值的 70% ～ 130%。 50% ～ 9% A） ，流速 1 mL·min －1 ，
50% A； 65 ～ 67 min，
2. 5 葛根素、甘草苷及甘草酸含量测定 DAD 检测（ 237 nm） ，柱温 25 ℃ ，进样体积 10 μL。
2. 5. 1 葛 根 素、甘 草 苷、甘 草 酸 色 谱 条 件 汉 邦 最终含量测定色谱图见图 3。
Kromasil C 18 色谱柱（ 4. 6 mm × 250 mm，5 μm） ，流动 2. 5. 2 葛根素、甘草苷、甘草酸混合对照品溶液的
相乙腈 （ A） -0. 05% 磷 酸 水 （ B） ，梯 度 洗 脱 （ 0 ～ 10 制备 精密称取葛根素、甘草苷、甘草酸对照品适
－1
min，
9% ～ 12% A； 10 ～ 27 min，12% ～ 13% A； 27 ～ 40 量，加 50% 乙醇制得含葛根素 1. 456 mg·mL 、甘草

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表3 竹茹汤物质基准对应实物浸出物测定 表4 竹茹汤及其物质基准对应实物中葛根素、甘草苷及甘
Table 3 The extraction rates of substance benchmarks in Zhuru 草酸的含量测定方法学考察
Decoction samples % Table 4 Methodological study of the determination of puerarin，
No． 浸出物 No． 浸出物 liquiritin，and glycyrrhizic acid in Zhuru Decoction
ZＲD1 25. 29 ZＲD10 21. 25 ＲSD / % 加样回
ZＲD2 23. 65 ZＲD11 18. 45 成分 线性关系
精密度 重复性 稳定性 收率 / %
ZＲD3 23. 22 ZＲD12 22. 00 葛根素 Y = 1 611. 6X － 435. 42 0. 61 0. 61 0. 18 99. 47
ZＲD4 22. 84 ZＲD13 20. 29 （ Ｒ 2 = 0. 999 9）
ZＲD5 24. 30 ZＲD14 20. 93 甘草苷 Y = 1 080. 8X － 12. 996 1. 2 0. 58 2. 6 100. 7
ZＲD6 23. 98 ZＲD15 20. 83 （ Ｒ 2 = 0. 999 6）

ZＲD7 21. 06 ZＲD16 21. 28 甘草酸 Y = 341. 73X － 20. 6 0. 97 0. 25 0. 58 99. 11

（ Ｒ 2 = 0. 999 8）
ZＲD8 20. 98 ZＲD17 21. 84
ZＲD9 21. 46 ZＲD18 22. 28
含量，W 表示饮片中指标性成分的含量，见表 5。
竹茹汤物质基准对应实物中葛根素的平均质量
分数为 2. 58%，平均转移率为 40. 6%，不同批次物
质基准对应实物的葛根素质量分数均在 2. 20% ～
3. 07%，转移率均 在 38. 5% ～ 45. 9%。 不 同 批 次 物
质基准对应实物的葛根素质量分数在其质量分数均
值的 85% ～ 120%，转移率在其转移率均值的 90% ～
115%，根据相关规定，不同批次物质基准的指标性
1．葛根素； 2．甘草苷； 3．甘草酸。 成分质量分数及转移率应控制在其均值的 70% ～
图3 竹茹汤含量测定色谱图 130%。本实验中 18 批竹茹汤物质基准的葛根素质
Fig．3 Chromatogram of components in Zhuru Decoction 量分数及转移率均在 70% ～ 130%，且波动较小。 从
葛根素的转移率方面分析，竹茹汤物质基准的制备
－1 －1
苷 0. 097 mg·mL 、甘草酸 0. 150 mg·mL 的混合对 工艺稳定，不同批次物质基准对应实物的葛根素转
照品溶液，置于 4 ℃ 冰箱中，备用。精密量取混合对 移率符合要求，说明实验前期葛根的产地选择、质量
照品储备液 0. 2、
0. 3、 0. 5、0. 6、1 mL 置于 1 mL
0. 4、 控制与物质基准的制备工艺可以实现竹茹汤中葛根
量瓶中，并用 50% 乙醇定容至刻度，制成系列对照 素含量的稳定传递。
品溶液。 竹茹汤物质基准对应实物中甘草苷的平均质量
供试品溶液制备 精密量取竹茹汤物质基
2. 5. 3 分数为 0. 41%，平均转移率为 27. 7%，不同批次物
准对应实物 10 mL 于蒸发皿中水浴挥干，50% 乙醇 质基 准 对 应 实 物 的 甘 草 苷 质 量 分 数 为 0. 24% ～
复溶，定 容 至 10 mL，离 心 取 上 清 液 过 微 孔 滤 膜， 0. 85%，转移率为 15. 9% ～ 37. 5%； 甘草酸的平均质
即得。 量分数为 0. 90%，平均转移率为 23. 8%，不同批次
2. 5. 4 葛根素、甘草苷、甘草酸含量测定方法学的 物质基准的甘草酸质量分数为 0. 39% ～ 1. 87%，转
考察 根据 2. 5. 1 项下色谱条件建立竹茹汤物质基 移率为 16. 2% ～ 32. 8%。部分批次物质基准的甘草
准对应实物中葛根素、甘草苷及甘草酸的含量测定 苷以及甘草酸质量分数、转移率未在其质量分数均
方法，方法学考察内容及见表 4。 结果显示竹茹汤 值和转移率均值的 70% ～ 130%，分析原因可能是竹
及其物质基准中葛根素、甘草苷及甘草酸含量测定 茹汤中甘草仅占全方的 11. 6%，误差范围较大，且
方法线性、仪器精密度、方法重复性、样品稳定性及 手工炒制的水炙甘草饮片含量存在一定差异 ，在量
方法加样回收率均良好。 少的情况下体现更为明显。 另有研究表明，甘草木
2. 6 葛根素、甘草苷、
甘草酸含量及其转移率的考察 质部、韧皮部及木栓层中总黄酮含量及甘草苷含量
计算指标性成分转移率，转移率 = w / W × 100%， 存在显著性差异，这也会导致不同批次甘草中甘草
［16］
其中，w 表 示 物 质 基 准 对 应 实 物 中 指 标 性 成 分 的 苷和甘草酸含量差异较大 。
310
 王璐等： 经典名方“竹茹汤”的物质基准量值传递分析

表5 竹茹汤物质基准对应实物中葛根素、甘草苷、甘草酸含量及转移率
Table 5 The contents and transfer rates of puerarin，liquiritin，and glycyrrhizic acid in Zhuru Decoction %
葛根素 甘草苷 甘草酸
No．
物质基准 饮片 转移率 物质基准 饮片 转移率 物质基准 饮片 转移率
ZＲD01 3. 07 7. 98 38. 5 0. 55 1. 88 29. 3 0. 85 5. 21 16. 2
ZＲD02 2. 52 6. 16 40. 9 0. 55 3. 46 15. 9 1. 04 4. 42 23. 4
ZＲD03 2. 81 7. 13 39. 3 0. 35 1. 16 30. 3 1. 10 3. 45 31. 8
ZＲD04 2. 85 7. 13 39. 9 0. 48 1. 70 27. 9 0. 87 3. 99 21. 9
ZＲD05 2. 54 6. 24 40. 7 0. 85 2. 86 29. 7 1. 50 4. 65 32. 4
ZＲD06 2. 69 6. 91 38. 9 0. 38 1. 03 36. 7 1. 19 4. 80 24. 8
ZＲD07 2. 20 4. 94 44. 6 0. 44 2. 54 17. 5 0. 63 3. 67 17. 0
ZＲD08 2. 69 6. 91 39. 0 0. 27 0. 97 28. 3 0. 51 2. 32 22. 0
ZＲD09 2. 64 6. 59 40. 1 0. 24 0. 89 27. 3 0. 92 3. 13 29. 4
ZＲD10 2. 77 7. 06 39. 2 0. 25 0. 89 28. 5 0. 64 3. 13 20. 6
ZＲD11 2. 40 5. 85 41. 0 0. 36 0. 97 37. 5 0. 64 2. 32 27. 7
ZＲD12 2. 70 6. 95 38. 8 0. 31 0. 85 37. 0 0. 40 2. 16 18. 5
ZＲD13 2. 28 4. 97 45. 9 0. 45 1. 83 24. 7 1. 87 5. 71 32. 8
ZＲD14 2. 54 6. 24 40. 7 0. 58 2. 21 26. 2 1. 01 4. 28 23. 7
ZＲD15 2. 33 5. 65 41. 2 0. 28 1. 53 18. 2 1. 22 5. 18 23. 5
ZＲD16 2. 56 6. 50 39. 4 0. 24 0. 85 28. 2 0. 39 2. 16 17. 9
ZＲD17 2. 39 5. 81 41. 1 0. 50 1. 67 29. 9 0. 87 3. 56 24. 4
ZＲD18 2. 41 5. 90 40. 9 0. 27 1. 00 26. 4 0. 46 2. 20 21. 0
平均值 2. 58 6. 38 40. 6 0. 41 1. 57 27. 7 0. 89 3. 69 23. 8

3 讨论 水、乙腈-0. 1% 甲酸水。结果发现，乙腈-水为流动相
3. 1 竹茹汤物质基准供试品溶液考察 时基线平稳，峰表征较为全面，且受溶剂峰和杂质峰
竹茹汤的指纹图谱研究中，由于组方中君药葛 的影响较小。 乙腈-水中加入甲酸可以优化峰形和
根与其余药味处方量相差较大，且除葛根外，《中国 改善分离效果，出峰信息较未加酸前更加丰富。 因
药典》2020 年版收录含量测定方法的甘草及生姜出 此将乙腈-0. 1% 甲酸水定为流动相。
峰不明显，故考虑将原液浓缩，或用萃取的方法使其 竹茹汤含量测定的流动相兼顾考虑方中剂量较
可以与葛根在同一条件下出峰。 对比“竹茹汤 30 小的甘草苷和甘草酸，故选择《中国药典 》2020 年版
mL 于蒸发皿挥干，分别用 50% 甲醇、70% 乙醇复溶 甘草含量测定项下流动相即乙腈-0. 05% 磷酸水，此
定容至 10 mL； 竹茹汤 30 mL 加 30 mL 乙醚萃取，乙 方法对葛根素含量影响不大。
醚液挥干，分别用甲醇、70% 乙醇、水复溶定容至 10 3. 3 物质基准特征峰归属
mL； 竹茹汤 30 mL 加 30 mL 乙醚萃取，水液挥干， 18 批竹茹汤物质基准对应实物指纹图谱相似
50% 乙醇复溶定容至 10 mL”这 6 种不同供试品处 度良好（ ＞ 0. 95） ，汇总特征峰信息可知，葛根有 21
理方法，最终选择第 1 种———竹茹汤 30 mL 于蒸发 个特征峰，甘草有 3 个特征峰，生姜有 1 个特征峰。
皿挥干，
50% 甲醇复溶定容至 10 mL，在此条件下色 本研究在半夏、竹茹、大枣的成分提取方面仍存在一
谱峰出峰较多，且葛根、甘草、生姜均有响应，指纹图 定的不足之处，这也是复方研究共同的难点之一 ，大
谱信息较为丰富。 枣和竹茹中主要含有多糖类成分，故课题组另外研
竹茹汤的含量测定研究中，分别考察了 30% 乙 究了大类成分的整体控制方法，以期弥补这 2 位药
醇、 70% 乙醇的复溶效果，结果表明，50%
50% 乙醇、 在 HPLC 研究中的缺失。本课题组会持续关注问题
乙醇复溶得到的供试品葛根素、甘草苷、甘草酸含量 研究进展并进行多方面的深入研究 。
均最高，故含量测定选取 50% 乙醇 作 为 样 品 的 复 饮片与物质基准对应实物的指纹图谱传递及
3. 4
溶剂。 浸出物、含量测定转移率
3. 2 竹茹汤物质基准流动相选择 在饮片与物质基准的特征图谱传递过程中，葛
在竹茹汤指纹图谱建立过程中，考察了以下几 根饮片贡献 21 个共有峰，表明葛根饮片中的物质群
种不同流动相组成对色谱峰出峰个数、峰形及分离 能较好的传递到物质基准，甘草次之，贡献 3 个共有
度的影响，包括乙腈-水、甲醇-水、乙腈-0. 05% 甲酸 峰，生姜贡献 1 个共有峰。在此条件下，其余饮片对
311
2022 年 1 月 第 47 卷第 2 期 Vol. 47，No. 2 January，2022

物质基准指纹图谱几乎无贡献。 nopharmacol，2005，96（ 1） ： 133．

［5］ 郑强，李超，王平，等．葛根素纯化工艺及其解酒效应［J］．食品
因指纹图谱和含量测定的传递已从定性定量 2
工业科技， 39（ 16） ： 166．
2018，
个方面充分体现经典名方表征成分的传递规律 ，而
［6］ KAMIYA T，NAGAMINE Ｒ，SAMESHIMA-KAMIYA M，et al．
关于浸出物的转移率，已有研究意见不一，未达成共 The isoflavone-rich fraction of the crude extract of the Puerariae
识，且 难 以 体 现 传 递 规 律，故 本 研 究 未 对 其 进 行 flower increases oxygen consumption and BAT UCP1 expression
探讨。 in high-fat diet-fed mice［J］． Glob J Health Sci，2012，4（ 5） ：
147．
指标性成分含量及转移率结果中，葛根素的平
［7］ 曹燕，党婷，李雯，等．葛根水提物对链脲佐菌素致 2 型糖尿病
均 转 移 率 为 40. 6%，甘 草 苷 的 平 均 转 移 率 为
小鼠的降血糖作用研究［J］．海峡药学， 30（ 5） ： 10．
2018，
27. 7%，甘草酸的平均转移率为 23. 8%，3 种成分转 ［8］ GE B，ZHANG Z，ZUO Z． Ｒadix Puerariae lobatae （ Gegen）
移率的高低也反映了成分间水溶性的差异 ，也可能 suppresses the anticoagulation effect of warfarin： a pharmacoki-
由于不同药味成分间相互作用从而导致溶解性发生 netic and pharmacodynamics study［J］． Chin Med，2016，11
（ 1） ： 1．
变化。甘草苷和甘草酸的转移率较低，说明其经过
［9］ 钟凌云，马冰洁，叶喜德，等．葛根主要药效成分止泻作用研究
煎煮等处理过程含量损失较大，可能因为与其他药
［17］
［J］．世界科学技术（ 中医药现代化） ， 17（ 1） ： 109．
2015，
味配伍，成分发生了反应导致含量的下降 ，体现 ［10］ LIU M，LIU Ｒ，WU H，et al． Ｒadix Puerariae extracts amelio-
了甘草调和诸药的作用。分析部分物质基准中甘草 rate paraquat-induced pulmonary fibrosis by attenuating follista-
苷、甘草酸转移率未能达到 70% ～ 130% 原因，较大 tin-like 1 and nuclear factor erythroid 2p45-related factor-2 sig-

可能是实验室小试水炙甘草的饮片取样量少 ，含量 nalling pathways through downregulation of miＲNA-21 expression

［J］．BMC Complement Altern Med，2016，16： 11．
分布不均，根据《古代经典名方中药复方制剂物质
［11］ 古代经典名方中药复方制剂简化注册审批管理规定［N］． 中
基准的申报资料要求 （ 征求意见稿 ） 》中相关要求， 国中医药报，
2018-6-4（ 2） ．
后续需进行中试级别的测定，可一定程度解决上述 ［12］ 莫雨佳，王彦，齐琪，等．经典名方散偏汤 HPLC 指纹图谱的建
问题。此外将甘草饮片大小及部位严格分等、取样 立及川芎的量值传递研究［J］． 中国中药杂志，2020，45（ 3） ：

均匀或采取不同批次甘草饮片混批投料方式 ，也能 572．

［13］ 黄嘉怡，张琦，杨艳玲，等．经典名方清胃散的物质基准量值传
增强经典名方竹茹汤物质基准对应实物质量的稳定
［18-19］ 递分析［J］．中国中药杂志， 46（ 4） ： 792．
2021，
性 。本实验采用指纹图谱、浸出物及指标性成
［14］ 杨艳玲，刘彩凤，黄嘉怡，等．经典名方桃红四物汤的物质基准
分含量测定相结合的模式，对经典名方竹茹汤物质 量值传递分析［J］．中国中药杂志， 46（ 4） ： 801．
2021，
基准的量值传递过程进行分析，初步建立了科学稳 ［15］ 张晴，罗菊元，胡文均，等．经典名方厚朴温中汤的物质基准量
定的物质基准质量评价方法，以期为经典名方竹茹 值传递分析［J］．中国中药杂志， 46（ 4） ： 810．
2021，
［16］ 王汉卿，雍婧姣，肖东，等．宁夏产甘草不同组织部位成分差异
汤的后续开发及相关制剂的质量控制提供依据 。
比较［J］．中华中医药杂志， 34（ 6） ： 2672．
2019，
［参考文献］
［17］ 陈艳琰，曹玉洁，唐于平，等． 基于化学成分相互作用研究大
［1］ 许叔微．普济本事方［M］． 北京： 中国中医药出版社，
2007．
黄-甘草配伍应用的物质基础［J］．世界科学技术（ 中医药现代
［2］ 吴普．神农本草经［M］． 北京： 人民卫生出版社，
1982．
化） ， 21（ 11） ： 2443．
2019，
［3］ 李翠娟．许叔微《普济本事方》论治呕吐经验探析［J］． 陕西中
［18］ 张钰明，杜守颖，白洁，等．经典名方真武汤的物质基准量值传
医学院学报， 35（ 5） ： 25．
2012，
递分析［J］．中国中药杂志， 46（ 4） ： 820．
2021，
［4］ JIANG Ｒ W，LAU K M，LAM H M，et al． A comparative study
［19］ 唐晓章，林美斯，周菲，等．经典名方芍药甘草汤的物质基准量
on aqueous root extracts of Pueraria thomsonii and Pueraria loba-
值传递分析［J］．中国实验方剂学杂志， 25（ 14） ： 62．
2019，
ta by antioxidant assay and HPLC fingerprint analysis［J］． J Eth-
［责任编辑 孔晶晶］

312