Generalitat de Catalunya

Departament d’Educació
Institut Pedraforca

UF Núm. 2 Nom i Cognoms: Laura Miguel Garrido

PRÀCTICA Núm. 14 Data: 15-02-2024

TÍTOL: Comptatge de plaquetes

OBJECTIU/S:

➢ Conèixer els mètodes bàsics de comptatge cel·lular.

➢ Familiaritzar-se amb les cambres de comptatge de tipus Neubauer.
➢ Realitzar el comptatge de plaquetes per veure si la mostra està dins els valors de referència.

FONAMENTS TEÒRICS:

➢ Per fer el comptatge de plaquetes amb cambra, primer s’ha de diluir la mostra en un líquid adient, per
lisar els eritròcits i donar color a les plaquetes.
➢ Posteriorment, es diposita una quantitat de la mostra diluïda en la cambra, i es compten les cèl·lules
presents en alguns dels quadrats del reticle.

MATERIAL:

• Cambra de Neubauer/ N. Millorada.

• Cobreobjectes adaptat a la cambra.
• Mostra de sang venosa anticoagulada amb EDTA. ( Nª 6455 )
• Liquid de dilució
• Capil·lar sense heparina.
• Eppendorf.
• Micropipetes
• Puntes de pipeta.
• Microscopi.
REACTIUS:

Fem servir “Platelet counting fluid” per a la dilució. Dona color a les plaquetes i els hi dóna una capacitat
reflectant per distingir-los de la brossa. També fa la funció de lisar els eritròcits.

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

PROCEDIMENT:

1. Homogeneïtzar la sang.
2. Amb una micropipeta, pipetejar 10 µl de sang a un tub Eppendorf.
3. Afegir-hi 990 µl de “Platelet counting fluid”.
4. Homogeneïtzar la mescla.
5. Col·locar el cobreobjectes damunt la cambra de recompte.
6. Omplir la cambra de recompte amb un capil·lar sense heparina o amb una micropipeta.
7. Deixar que la sang se sedimenti durant uns 15’ abans de fer el comptatge, per tal que les cèl·lules es
dipositin al fons. Aquesta estona de repos es fara en una cambra humeda. Fem servir una placa de petri
amb papael de cel.lulosa humit al fons i a sobre colocarem la cambra de neubauer per matenir la humitat
aquests 15’ .
8.Possem la mostra al microscopi. Enfocar amb l’objectiu de 4X, i busquem a on son de la cambra.
9. Enfocar el quadrat gran central amb l’objectiu de 10X.
10. Si la cambra és de 5x5 (Neubauer millorada), s’han de comptar les plaquetes dels 4 quadrats mitjans
de les cantonades i del quadrat central mitjà.
11. Enfocar cada quadrat mitjà i fer el comptatge amb l’objectiu de 40X.

CALCULS

• PLQ : Nombre de plaquetes/ml de sang.

• H: Nombre total de plaquetes comptades en 5 quadrats mitjans dels quadrat gran central.
• Cambra de Neubauer millorada. Al quadrat gran central hi ha 25 quadrats mitjans. Com que hem
comptat les plaquetes que hi ha en 5 d’aquests quadrats mitjans, hem de multiplicar per 5, per saber les
plaquetes que hi haurà en total.
• La longitud de cada costat del quadrat gran és de 1 mm, i l’espai que queda entre la retícula i el
cobreobjectes és de 0,1 mm. El volum de sang que hi cap és, per tant, de 0,1 mm³. Per saber el nombre
de plauqetes/mm³, haurem de multiplicar per 10.
• D: Factor de dilució.

PLQ = H x 5 x 10 x D
PLQ = x 5 x 10 x 100 =

RESULTATS:

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

Quadrat Esquerra a dalt

0 0 2 1

2 4 2 3

1 1 0 1

1 0 2 0
TOTAL : 20
Quadrat Dreta a dalt

2 1 1 0

3 3 1 2

3 4 1 2

1 0 3 0
TOTAL : 27
Quadrat Esquerra a sota

2 1 1 2

1 0 2 1

1 0 1 1

3 1 0 1
TOTAL : 18
Quadrat Dreta a sota

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

2 0 0 1

3 2 1 3

0 2 1 1

1 1 1 0
TOTAL : 19
Quadrat del mig

1 3 1 2

2 1 2 4

3 1 0 1

3 3 0 1
TOTAL : 28

TOTAL DE PLAQUETES : 20+27+18+19+28 = 112

FORMULA : PLAQUETES = 112 x 5 X 10 X 100 = 560.000
RESULTAT AYESHA : 380.000
MITJANA DELS DOS RESULTATS = 380.000 + 560.000 : 2 = 470.000 PLAQUETES

VALORACIÓ DELS RESULTATS/CONCLUSIONS:

Un recompte normal de plaquetes està entre 150.000 i 400.000 plaquetes per microlitre de sang. Un

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24
 Generalitat de Catalunya
Departament d’Educació
Institut Pedraforca

recompte alt de plaquetes és de més de 450.000 plaquetes per microlitre de sang. Un recompte baix de
plaquetes és de menys de 150.000 plaquetes per microlitre de sang.

Una vegada analitzats els nostres resultats i tenint en compte els valors de referencia indicats en la taula
de a sobre, diriem que la nostra mostra estaria per sobre dels valors de normalitat. Tenint en compte que
la dilucio la hem fet amb 1ml de sang + 10 microlitres de dilució es possible que el resultat sigui una mica
elevat per aquest motiu.

CFGS LABORATORI CLÍNIC I BIOMÈDIC

MP6 – Tècniques d’anàlisi hematològiques
Curs 2023-24