PROTOKOL Č.

Meno: Catherine Susan Roman

Téma: Dôkaz bielkovín

Princíp:

Bielkoviny sú makromolekulové látky zložené z α-aminokyselín, ktoré sú

viazané peptidovou väzbou.
Dôkazom peptidovej väzby -CO-NH- je Biuretova reakcia (10% NaOH, 0,1%
CuSO4) - bielkoviny dávajú v alkalickom prostredí s iónmi Cu2+ farebný
komplex. Intenzita zafarbenia závisí od molekulovej hmotnosti bielkoviny
(polypeptidy - fialová, menšie peptidy - červená). Pozitívnu reakciu dáva aj
biuret, ktorý vzniká reakciu dvoch molekúl močoviny(H2N–CO–NH2),
pričom sa uvoľňuje amoniak.

Postup:

1. Zobrala som si 2 skúmavky.

2. Do 1. skúmavky som si dala asi 1 cm³ roztoku bielkoviny (roztok vaječného
bielka)
3. Pridala som 1 cm³ 10% roztoku hydroxidu sodného NaOH a po kvapkách
som postupne pridávala 0,1% roztok síranu meďnatého CuSO4.
4. Zobrala som si 2 skúmavky, namiesto bielkoviny som pridala destilovanú
vodu H20 (urobila som slepý pokus) a pridala som roztok ako v 1.
skúmavke.
5. Na dôkaz peptidovej väzby by mi malo vzniknúť ružové až fialové
sfarbenie.
6. Pridaním nadbytku roztoku síranu meďnatého CuSO4 sa môže vyzrážať
modrý roztok hydroxidu meďnatého Cu(OH)₂.

Pomôcky: skúmavky, kahan, stojan s príslušenstvom

Záver: