Machine Translated by Google

QUỐC TẾ

TIÊU CHUẨN ISO3596

Ấn bản đầu
tiên 2000-07-01

Mỡ và dầu động vật và thực vật —

Xác định chất không xà phòng hóa —
Phương pháp sử dụng chiết xuất ether dietyl

Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination de la teneur

en matières insaponi iables — Méthode par extract à l'oxyde diéthylique

Số tham chiếu
ISO 3596:2000(E)

© ISO 2000
Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

Tuyên bố miễn trừ trách nhiệm PDF

Tệp PDF này có thể chứa các kiểu chữ được nhúng. Theo chính sách cấp phép của Adobe, tệp này có thể được in hoặc xem nhưng sẽ không được chỉnh sửa trừ khi
các kiểu chữ nhúng được cấp phép và cài đặt trên máy tính thực hiện chỉnh sửa. Khi tải xuống tệp này, các bên chấp nhận trách nhiệm không vi phạm chính sách
cấp phép của Adobe. Ban thư ký trung tâm ISO không chịu trách nhiệm pháp lý trong việc này
khu vực.

Adobe là thương hiệu của Adobe Systems Incorporated.

Chi tiết về các sản phẩm phần mềm được sử dụng để tạo tệp PDF này có thể được tìm thấy trong Thông tin chung liên quan đến tệp; các tham số tạo PDF đã được
tối ưu hóa để in. Mọi sự thận trọng đã được thực hiện để đảm bảo rằng tệp phù hợp để các tổ chức thành viên ISO sử dụng. Trong trường hợp hiếm khi phát hiện
ra vấn đề liên quan đến nó, vui lòng thông báo cho Ban Thư ký Trung ương theo địa chỉ được cung cấp bên dưới.

©ISO 2000

Đã đăng ký Bản quyền. Trừ khi có quy định khác, không phần nào của ấn phẩm này có thể được sao chép hoặc sử dụng dưới bất kỳ hình thức nào hoặc bằng bất kỳ
phương tiện nào, điện tử hoặc cơ khí, bao gồm cả sao chụp và vi phim, mà không có sự cho phép bằng văn bản của ISO tại địa chỉ bên dưới hoặc cơ quan thành viên
của ISO tại quốc gia của người yêu cầu.

Văn phòng bản quyền

ISO Trường hợp bưu điện 56 CH-1211 Geneva
20 Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47 E-

mail copyright@iso.ch Trang

web www.iso.ch

In tại Thụy Sĩ

ii
© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền
Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

Lời tựa

ISO (Tổ chức Tiêu chuẩn hóa Quốc tế) là một liên đoàn toàn cầu của các cơ quan tiêu chuẩn quốc gia (các cơ quan thành viên của ISO).
Công việc soạn thảo Tiêu chuẩn quốc tế thường được thực hiện thông qua các ủy ban kỹ thuật của ISO. Mỗi cơ quan thành viên quan tâm
đến một chủ đề mà ủy ban kỹ thuật đã được thành lập có quyền được đại diện trong ủy ban đó. Các tổ chức quốc tế, chính phủ và phi
chính phủ, liên kết với ISO, cũng tham gia vào công việc. ISO hợp tác chặt chẽ với Ủy ban Kỹ thuật Điện Quốc tế (IEC) về mọi vấn đề
tiêu chuẩn hóa kỹ thuật điện.

Các tiêu chuẩn quốc tế được soạn thảo theo các quy tắc được đưa ra trong Chỉ thị ISO/IEC, Phần 3.

Dự thảo Tiêu chuẩn Quốc tế được thông qua bởi các ủy ban kỹ thuật được chuyển đến các cơ quan thành viên để bỏ phiếu.
Việc xuất bản dưới dạng Tiêu chuẩn quốc tế cần có sự chấp thuận của ít nhất 75% các cơ quan thành viên bỏ phiếu.

Cần chú ý đến khả năng một số yếu tố của tiêu chuẩn quốc tế này có thể là đối tượng của quyền sáng chế. ISO sẽ không chịu trách
nhiệm xác định bất kỳ hoặc tất cả các quyền bằng sáng chế như vậy.

Tiêu chuẩn quốc tế ISO 3596 do Ban kỹ thuật ISO/TC 34, Nông sản thực phẩm, Tiểu ban SC 11, Dầu mỡ động vật và thực vật biên soạn.

Ấn bản đầu tiên này của ISO 3596 hủy bỏ và thay thế ISO 3596-1:1988 và Bản sửa đổi 1:1997 của nó, trong đó nó tạo thành một bản sửa
đổi nhỏ.

Phụ lục A của tiêu chuẩn này chỉ dành cho thông tin.

© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền iii

Machine Translated by Google
Machine Translated by Google

TIÊU CHUẨN QUỐC TẾ ISO 3596:2000(E)

Dầu mỡ động vật và thực vật – Xác định chất không xà phòng
hóa – Phương pháp chiết bằng ete dietyl

1 Phạm vi

Tiêu chuẩn này quy định phương pháp chiết bằng ete dietyl để xác định hàm lượng chất không xà phòng hóa của dầu mỡ động
vật và thực vật.

Phương pháp này không áp dụng được cho sáp và hơn nữa, cho kết quả gần đúng với một số chất béo có hàm lượng chất không
xà phòng hóa cao, ví dụ như chất béo có nguồn gốc từ động vật biển.

Có thể sử dụng phương pháp nêu trong ISO 18609 khi điều kiện khí hậu hoặc quy định không cho phép sử dụng dietyl ete.

2 Tài liệu tham khảo quy chuẩn

Tài liệu quy chuẩn sau đây chứa các điều khoản, thông qua tham chiếu trong văn bản này, cấu thành các điều khoản của Tiêu
chuẩn Quốc tế này. Đối với các tài liệu tham khảo đã ghi ngày tháng, các sửa đổi hoặc sửa đổi tiếp theo đối với bất kỳ
ấn phẩm nào trong số này đều không áp dụng. Tuy nhiên, các bên tham gia thỏa thuận dựa trên Tiêu chuẩn Quốc tế này được
khuyến khích nghiên cứu khả năng áp dụng phiên bản mới nhất của tài liệu quy chuẩn được nêu dưới đây. Đối với các tài
liệu viện dẫn không ghi ngày tháng, áp dụng phiên bản mới nhất của tài liệu quy chuẩn được viện dẫn. Các thành viên của
ISO và IEC duy trì sổ đăng ký các Tiêu chuẩn Quốc tế hiện có hiệu lực.

ISO 661, Dầu mỡ động vật và thực vật-Chuẩn bị mẫu thử.

3 Thuật ngữ và định nghĩa

Đối với mục đích của tiêu chuẩn quốc tế này, thuật ngữ và định nghĩa sau được áp dụng.

3.1 chất không xà phòng

hóa tất cả các chất có trong sản phẩm, sau khi xà phòng hóa chất này bằng kali hydroxit và chiết xuất bằng một dung môi
xác định, không bay hơi trong các điều kiện vận hành quy định

4 nguyên tắc

Chất béo hoặc dầu được xà phòng hóa bằng cách đun sôi hồi lưu với dung dịch kali hydroxit trong etanol. Chất không xà
phòng hóa được chiết ra khỏi dung dịch xà phòng bằng dietyl ete. Dung môi được làm bay hơi và phần còn lại được cân sau
khi sấy khô.

5 thuốc thử

Chỉ sử dụng các thuốc thử đạt chất lượng phân tích đã được công nhận và nước cất hoặc nước đã khử ion hoặc nước có độ tinh khiết tương đương.

5.1 Dietyl ete, mới chưng cất, không chứa peroxit và cặn.

© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền 1

Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

5.2 Axeton.

5.3 Kali hydroxit, dung dịch trong etanol, c(KOH) 1 mol/l.

Hòa tan 60 g kali hydroxit trong 50 ml nước và pha loãng thành 1 000 ml bằng etanol 95 % (theo thể tích). Dung dịch phải
không màu hoặc có màu vàng rơm.

5.4 Kali hydroxit, dung dịch nước, c(KOH) 0,5 mol/l.

5.5 Phenolphtalein, dung dịch 10 g/l trong etanol 95 % (theo thể tích).

6 Bộ máy

Các thiết bị phòng thí nghiệm thông thường và cụ thể như sau.

6.1 Bình cầu đáy tròn, dung tích 250 ml, có cổ mài.

6.2 Bộ sinh hàn hồi lưu, có khớp mài để lắp bình (6.1).

6.3 Phễu chiết, dung tích 500 ml, có khóa vòi và nút đậy bằng polytetra luoroetylen.

6.4 Nồi cách thủy đun sôi.

6.5 Tủ sấy, có khả năng duy trì ở 103 °C ± 2 °C.

7 Lấy mẫu

Lấy mẫu không phải là một phần của phương pháp quy định trong tiêu chuẩn này. Phương pháp lấy mẫu khuyến nghị được đưa
ra trong ISO 5555 [1].

Điều quan trọng là phòng thí nghiệm nhận được mẫu thực sự đại diện và không bị hư hỏng hoặc thay đổi trong quá trình vận
chuyển hoặc bảo quản.

8 Chuẩn bị mẫu thử

Chuẩn bị mẫu thử theo ISO 661.

9 Thủ tục

9.1 Phần mẫu thử

Cân khoảng 5 g mẫu thử (điều 8), chính xác đến 0,01 g, cho vào bình tam giác 250 ml (6.1).

9.2 Xà phòng hóa

Thêm 50 ml dung dịch kali hydroxit (5.3) và một ít hạt chống trào. Gắn sinh hàn hồi lưu (6.2) vào bình và đun sôi nhẹ
lượng chứa trong 1 h. Ngừng sưởi ấm. Thêm 100 ml nước qua đỉnh sinh hàn và xoáy.

Nếu quá trình chiết chất không thể xà phòng hóa được thực hiện nhằm xác định thành phần của tocopherol, thì việc bổ sung
pyrogallol là cần thiết và quá trình chiết phải được hoàn thành nhanh chóng (giả sử trong vòng 30 phút).

2 © ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền

Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

9.3 Chiết chất không xà phòng hóa

Sau khi làm nguội, chuyển dung dịch vào phễu chiết 500 ml (6.3). Tráng bình và các hạt chống trào vài lần bằng ete
dietyl (5.1), dùng hết 100 ml và đổ phần tráng này vào phễu chiết. Đậy nút và lắc mạnh trong 1 phút, định kỳ giảm áp
suất bằng cách đảo ngược phễu chiết và thận trọng mở khóa vòi.

Để yên cho đến khi hai pha tách hoàn toàn. Sau đó cho chảy hết lớp dưới cùng vào phễu chiết thứ hai.

Nếu nhũ tương được hình thành, hãy phá hủy nó bằng cách thêm một lượng nhỏ etanol hoặc dung dịch kali hydroxit hoặc
natri clorua đậm đặc.

Chiết dung dịch nước xà phòng trong etanol hai lần nữa, mỗi lần theo cùng một cách với 100 ml ete dietyl.
Thu ba dịch chiết ete vào một phễu chiết chứa 40 ml nước.

9.4 Rửa dịch chiết ete

Xoay nhẹ phễu chiết chứa các dịch chiết đã gộp lại và 40 ml nước.

THẬN TRỌNG - Lắc mạnh ở giai đoạn này có thể tạo ra nhũ tương.

Để các lớp tách hoàn toàn và rút lớp nước phía dưới. Rửa dung dịch ethereal hai lần nữa với mỗi phần 40 ml nước, lắc
mạnh mỗi lần và loại bỏ lớp nước phía dưới sau khi tách. Rút mỗi dung dịch rửa còn lại 2 ml, sau đó xoay phễu chiết
quanh trục của nó. Đợi vài phút để lớp nước còn lại thu lại. Rút cái này ra, đóng khóa vòi khi dung dịch ether chảy đến
lỗ của khóa vòi.

Rửa dung dịch ete lần lượt bằng 40 ml dung dịch kali hydroxit (5.4), 40 ml nước và một lần nữa bằng 40 ml dung dịch
kali hydroxit, sau đó rửa ít nhất hai lần nữa bằng 40 ml nước.

Tiếp tục rửa bằng nước cho đến khi nước rửa không còn màu hồng khi thêm một giọt dung dịch phenolphtalein (5.5).

9.5 Làm bay hơi dung môi

Chuyển định lượng dung dịch ethereal, từng ít một, qua đỉnh của phễu chiết vào bình cầu 250 ml (6.1), đã sấy khô trước
ở 103 °C trong tủ sấy (6.5), sau đó làm nguội và cân chính xác đến 0,000C. 1 mg. Làm bay hơi dung môi trên cách thủy
đun sôi (6.4).

Thêm 5 ml axeton (5.2) và làm bay hơi hoàn toàn dung môi dễ bay hơi trong luồng không khí nhẹ, giữ nghiêng bình trong
khi xoay bình trên nồi cách thủy đang sôi.

9.6 Làm khô cặn và xác định

9.6.1 Sấy khô phần cặn trong tủ sấy (6.5) ở 103 °C trong 15 phút, với bình ở vị trí gần như nằm ngang. Để nguội trong
bình hút ẩm và cân chính xác đến 0,1 mg.

Lặp lại quá trình sấy trong các khoảng thời gian 15 min liên tiếp cho đến khi khối lượng hao hụt giữa hai lần cân liên
tiếp nhỏ hơn 1,5 mg. Nếu không đạt được khối lượng không đổi sau ba giai đoạn làm khô, thì chất không xà phòng hóa có
thể bị nhiễm bẩn và phép xác định phải được lặp lại.

LƯU Ý Nếu có sẵn, có thể sử dụng thiết bị cô quay chân không, đặc biệt nếu cần kiểm tra chất không xà phòng hóa
thêm.

9.6.2 Nếu cần hiệu chỉnh axit béo tự do, thì sau khi cân cặn, hòa tan nó trong 4 ml ete dietyl (5.1) rồi thêm 20 ml
etanol đã được trung hòa trước đó thành màu hồng nhạt với sự có mặt của phenolphtalein. (5.4) làm chỉ báo. Chuẩn độ
bằng dung dịch kali hydroxit trong etanol tiêu chuẩn,

© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền 3

Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

c(KOH) = 0,1 mol/l, đến cùng màu cuối cùng. Tính khối lượng của axit béo tự do dưới dạng axit oleic và hiệu chỉnh khối
lượng của phần còn lại cho phù hợp (xem điều 10).

9.7 Số phép xác định

Tiến hành hai phép xác định trên cùng một mẫu thử.

9.8 Phép thử trắng

Tiến hành phép thử trắng, sử dụng cùng quy trình và cùng lượng thuốc thử, nhưng bỏ phần mẫu thử. Nếu dư lượng vượt quá
1,5 mg, kiểm tra kỹ thuật và thuốc thử.

10 Biểu thị kết quả

Hàm lượng chất không xà phòng hóa, được biểu thị bằng phần trăm khối lượng của mẫu, bằng

100 mmm g
b 12 3 %
m 0

Ở đâu

m0 là khối lượng của phần mẫu thử, tính bằng gam;

m1 là khối lượng của cặn, tính bằng gam;

m2 là khối lượng của phần còn lại thu được từ mẫu trắng, tính bằng gam;

m3 là khối lượng của axit béo tự do, nếu có (xem 9.6.2), tính bằng gam, và bằng 0,28 Vc

Ở đâu

V là thể tích, tính bằng mililit, của dung dịch kali hydroxit trong etanol chuẩn được dùng để
phép chuẩn độ;

c là nồng độ chính xác, tính bằng mol trên lít, của dung dịch kali hydroxit trong etanol thể tích chuẩn.

Lấy kết quả là trung bình cộng của hai lần xác định.

11 Độ chính xác

Chi tiết về các phép thử liên phòng thử nghiệm về độ chụm của phương pháp được tóm tắt trong phụ lục A. Các giá trị thu được từ
các phép thử liên phòng thử nghiệm này có thể không áp dụng được cho các dải nồng độ và chất nền khác với các giá trị đã cho.

12 Báo cáo thử nghiệm

Báo cáo thử nghiệm phải nêu rõ:

tất cả thông tin cần thiết để nhận dạng đầy đủ mẫu;

phương pháp lấy mẫu được sử dụng, nếu biết;

phương pháp thử đã sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này;

4 © ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền

Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

tất cả các chi tiết thao tác không được quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc được coi là tùy chọn, cùng với các chi tiết
về bất kỳ sự cố nào có thể ảnh hưởng đến (các) kết quả thử nghiệm;

(các) kết quả thử nghiệm thu được, hoặc, nếu độ lặp lại đã được kiểm tra, thì nêu kết quả cuối cùng thu được.

© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền 5

Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

Phụ lục
A (tham khảo)

Kết quả thử nghiệm liên phòng

A.1 Một thử nghiệm hợp tác quốc tế liên quan đến 51 phòng thí nghiệm ở 16 quốc gia đã được thực hiện trên

Mẫu A: dầu đậu nành tinh chế, tẩy trắng, khử mùi, và

Mẫu B: khô, dầu đậu nành thô tách nước,

bằng phương pháp dietyl ete.

Thử nghiệm được tổ chức bởi Liên đoàn các Hiệp hội Dầu, Hạt và Chất béo (FOSFA Quốc tế) vào tháng 6 năm 1995 và các kết quả
thu được đã được phân tích thống kê theo ISO 57251) để đưa ra dữ liệu về độ chụm như trong Bảng A.1 .

Bảng A.1

dầu đậu nành

MỘT b

Số phòng thí nghiệm tham gia sau khi loại bỏ các giá trị ngoại lệ 49 50

Giá trị trung bình, % (theo khối lượng) 0,58 0,69

Độ lệch chuẩn lặp lại, sr, % 0,025 0,027

Giới hạn lặp lại r (2,8sr), % 0,07 0,08
Hệ số biến thiên của độ lặp lại, % 4,3 3,9

Độ lệch chuẩn tái lập, sR, % 0,22 0,24

Giới hạn tái lập R (2,8sR), % 0,62 0,67
Hệ số biến thiên của độ tái lập, % 37,9 34,7

A.2 Một thử nghiệm hợp tác quốc tế khác có sự tham gia của 43 phòng thí nghiệm ở 17 quốc gia đã diễn ra vào tháng 7 năm 1989 đối
với dầu cá thô của Nhật Bản.

Phép thử được tổ chức bởi Liên đoàn các Hiệp hội Dầu, Hạt và Chất béo (FOSFA Quốc tế) và các kết quả thu được đã được phân
tích thống kê theo ISO 57251) để đưa ra dữ liệu về độ chụm như trong Bảng A.2.

1) ISO 5725:1986 (hiện đã bị hủy bỏ), được sử dụng để lấy dữ liệu về độ chụm.

6 © ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền

Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

Bảng A.2

Dầu cá

Số phòng thí nghiệm tham gia sau khi loại bỏ các giá trị ngoại lệ 37

Giá trị trung bình, % (theo khối lượng) 0,81

Độ lệch chuẩn lặp lại, sr, % 0,02

Giới hạn lặp lại r (2,8sr), % 0,06
Hệ số biến thiên của độ lặp lại, % 2,46

Độ lệch chuẩn tái lập, sr, % 0,29

Giới hạn tái lập R (2,8sR), % 0,81
Hệ số biến thiên của độ tái lập, % 35,8

A.3 Phép thử hợp tác quốc tế lần thứ ba có sự tham gia của 10 phòng thí nghiệm được IUPAC tổ chức từ năm 1976 đến năm 1997.
Các kết quả thu được được phân tích thống kê theo ISO 57251) để đưa ra dữ liệu về độ chụm như trong Bảng A.3.

Bảng A.3

tinh chế mỡ động Dầu

dầu đậu nành vật tinh chế hạt cải thô

Số phòng thí nghiệm tham gia sau khi loại bỏ các giá trị ngoại lai 10 10 10

Có nghĩa là giá trị,% (theo khối lượng) 0,630 0,253 1,432

Độ lệch chuẩn lặp lại, sr, % 0,032 0,024 0,068

Giới hạn lặp lại r (2,8sr), % 0,089 0,067 0,19
Hệ số biến thiên của độ lặp lại, % 5,0 9,3 24,7

Độ lệch chuẩn tái lập, sR, % 0,140 0,154 0,137

Giới hạn tái lập R (2,8sR), % 0,397 0,435 0,389
Hệ số biến thiên của độ tái lập, % 22,3 60,9 9,6

© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền 7

Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

Thư mục

[1] ISO 5555, Dầu mỡ động vật và thực vật-Lấy mẫu.

[2] ISO 5725:1986, Độ chính xác của các phương pháp thử nghiệm-Xác định độ lặp lại và độ tái lập đối với phương pháp thử
tiêu chuẩn bằng các phép thử liên phòng thí nghiệm.

[3] ISO 18609, Mỡ và dầu động vật và thực vật-Xác định chất không xà phòng hóa-Phương pháp sử dụng chiết xuất hexan.

số 8
© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền
Machine Translated by Google
Machine Translated by Google

ISO 3596:2000(E)

ICS 67.200.10
Giá dựa trên 8 trang

© ISO 2000 – Bảo lưu mọi quyền