Nanoemulze (typicky průměr kapiček < 1 μm) jsou běžné v potravinách a bylo o nich široce uváděno,

že vykazují antimikrobiální aktivitu, avšak mechanismus není dobře definován a některé studie
neuvádějí žádný účinek. Na základě přehledu literatury existují silně protichůdné zprávy týkající se
antimikrobiálního účinku nanoemulzí, a to i ve vztahu k podobným mikrobiálním druhům a
formulacím. Antimikrobiální účinek nanoemulzí byl přisuzován jejich samotné struktuře a kapičkám o
velikosti nano. Když se nanoemulze tvoří pod vysokými smykovými silami (např. sonikace,
vysokotlaká homogenizace nebo vysokosmykové míchání), při svém vzniku získávají značné
množství energie. Nanokapky jsou termodynamicky řízeny k fúzi s mikroorganismy obsahujícími
lipidy a energie, která byla uložena během tvorby nanoemulze, je uvolňována, což destabilizuje
lipidovou dvojvrstvu membrány, což vede k lýze a smrti buňky. [1]
Pokud jsou bakterie enkapsulovány v oleji nebo emulzi, mohou přežívat různě dlouhou dobu v
závislosti na konkrétních podmínkách. Výzkum ukázal, že přežití a růst bakterií v nanoemulzích
nebyly významně ovlivněny velikostí olejových kapiček, což naznačuje, že přítomnost olejových
kapiček nepoškodila bakteriální membrány ani neovlivnila stabilitu emulze.[1] Na rozdíl od jiných
zpráv bylo tedy ve studii [1] zjištěno, že přežití a růst nebylo ovlivněno bakterií velikostí kapiček
oleje, při průtokové cytometrii nebylo evidentní žádné poškození bakteriální membrány a stabilita
emulze nebyla ovlivněna přítomností bakterií během 7 dnů skladování. Dále byla srovnávána
antimikrobiální aktivita kyseliny kaprylové (CA) mezi O/W hrubými a nanoemulzemi, přičemž se
měnila koncentrace hydrofilní povrchově aktivní látky Tween80. Aktivita CA byla podobná v
nanoemulzi a hrubé emulzi; byl však vyšší než v oleji ve velkém a byl snížen se zvyšující se
koncentrací Tween80, což naznačuje, že jeho účinnost je dána složením spíše než velikostí kapiček
oleje. Výsledky neprokázaly žádnou zvýšenou antimikrobiální aktivitu kvůli nano-velkým kapičkám
oleje a že závěry o nanoemulzích je třeba brát s opatrností. Proto lze usoudit, že antimikrobiální
aktivita nanoemulzí uváděných v několika případech v literatuře lze připsat pouze antimikrobiálním
činidlům, které nesou, a žádná taková aktivita nemůže být důsledkem vysokého povrchového napětí a
difúze kapiček o nano velikosti buněčnou stěnou.[1]

Tabulka (souhrn): antimikrobiální aktivita nanoemulzí korelovala s jejich průměrem a velikostí

kapek, složkami (olejová fáze, stabilizátory, antimikrobiální látky) a mikroorganismy testovány proti.
Dopad nanoemulze je klasifikován jako pozitivní (+), když pak kapky o nano velikosti zlepšují
antimikrobiální aktivitu s ohledem na kontrolu, jako zápornou (-) při snížení antimikrobiální aktivity a
neutrální (±), když není pozorována žádná významná změna nebo byla pozorována významná změna
pouze díky začlenění antimikrobiálních látek a ne kvůli nano kapičkám. Metoda emulgace je uvedena
jako: HPH – vysokotlaká homogenizace, HSH – vysokosmyková homogenizace, US – ultrazvuk,
MFZ—mikrofluidizér, CPI—Catastrophic Phase Inversion.
Schopnost neporušených bakteriálních buněk stabilizovat emulze olej-voda bez inhibice koalescence
kapiček naznačuje, že bakteriální buňky mohou přilnout k rozhraní olej-voda, což zvyšuje stabilitu
emulze. Navíc typ použitého emulgátoru a olejové frakce může ovlivnit bakteriální růst, přičemž vyšší
olejové frakce vedou ke snížení celkového objemu vody dostupného pro bakteriální růst v emulzi.[2]
Proto optimální podmínky pro bakteriální růst v oleji nebo emulzi zahrnují faktory, jako je přítomnost
biosurfaktantů, schopnost bakteriálních buněk stabilizovat emulze a specifický typ emulgátoru a
olejová frakce přítomná v prostředí. Přežití bakterií enkapsulovaných v oleji nebo emulzi může být
udržováno po významnou dobu, ovlivněné faktory, jako je složení, velikost kapiček a specifické
antimikrobiální vlastnosti emulze. Optimální podmínky pro růst bakterií v oleji nebo emulzi zahrnují
různé faktory, jak je uvedeno v poskytnutých zdrojích. [2]
Enkapsulace bakterií v oleji nebo emulzi nabízí několik výhod, jak je zdůrazněno v poskytnutých
zdrojích. Mezi tyto výhody patří:

 Ochrana a životaschopnost: Zapouzdření do emulzí olej ve vodě pomocí technik, jako je

mikroenkapsulace, může chránit bakterie před vnějšími faktory, jako je teplota, pH a
enzymatický rozklad, a zajistit jejich životaschopnost během skladování a průchodu
gastrointestinálním traktem.[3]
 Vylepšená stabilita: Zapouzdření v emulzích typu olej ve vodě poskytuje bakteriím stabilní
prostředí, chrání je před nepříznivými podmínkami a udržuje jejich životaschopnost v průběhu
času.[4]
 Zlepšené dodávání: Zapouzdření v emulzích umožňuje řízené uvolňování bakterií, což
umožňuje nepřetržitý přísun živin z vnější vodné fáze do vnitřní fáze, což může být přínosné
pro různé aplikace, jako jsou probiotika a studie biofilmu.[3]
 Zvýšená biologická dostupnost: Emulze zvyšují biologickou dostupnost bakterií zvětšením
plochy rozhraní olej-voda, což usnadňuje interakci s okolním prostředím a potenciálně
zlepšuje jejich funkčnost.[5]
 Aplikace na míru: Zapouzdření v emulzích umožňuje přizpůsobení dodávacích systémů, což
umožňuje navrhnout specifické formulace tak, aby splňovaly požadavky různých aplikací,
například v potravinářském průmyslu pro probiotika.[4]
Celkově vzato, zapouzdření bakterií v oleji nebo emulzi poskytuje ochranné a stabilní prostředí,
zvyšuje biologickou dostupnost, umožňuje řízené uvolňování a umožňuje přizpůsobené aplikace, což z
něj činí cennou strategii pro různé oblasti včetně potravinářské vědy, biotechnologie a farmacie.
Faktory, které ovlivňují skladovatelnost bakterií v oleji nebo emulzi, zahrnují stabilitu enkapsulační
matrice, přítomnost ochranných činidel, formulaci emulze a podmínky skladování. Enkapsulace ve
stabilních matricích, jako je alginát nebo želatina, může chránit bakterie před vnějšími faktory a zlepšit
jejich přežití během skladování a průchodu gastrointestinálním traktem.[5]
K zapouzdření bakterií v oleji bez jejich poškození lze použít metodu jako mikroenkapsulace. Tato
technika zahrnuje použití emulgace oleje ve vodě k vytvoření ochranných mikrokapslí, které chrání
bakterie před vnějšími faktory, jako je teplota, pH a enzymatické trávení. Použitím materiálů, jako je
alginát nebo želatina jako enakapsulačních činidel, mohou být bakterie bezpečně zabudovány do
těchto matric, což zajišťuje jejich životaschopnost a ochranu během skladování a například při
průchodu gastrointestinálním traktem.[6]
Dále přítomnost ochranných činidel, jako jsou neiontové povrchově aktivní látky, jako je
polyglycerolpolyricinoleát (PGPR) a polysorbát 80 (Tween 80), může také ovlivnit skladovatelnost
tím, že poskytuje ochranné prostředí pro bakterie v emulzi.[3] Kromě toho může složení emulze,
včetně typu použitého emulgátoru a přítomné olejové frakce, ovlivnit stabilitu a životaschopnost
bakterií v průběhu času.
Kromě toho může složení emulzí, včetně koncentrace oleje a emulgátorů, hrát roli při určování
ochranného prostředí poskytovaného zapouzdřeným bakteriím, což zase ovlivňuje jejich
skladovatelnost. Proto je koncentrace oleje nebo emulze kritickým faktorem, který může ovlivnit
stabilitu, životaschopnost a v konečném důsledku životnost bakterií v zapouzdřené formě. [1]
Optimální koncentrace oleje nebo emulze pro zapouzdření bakterií se může lišit v závislosti na
konkrétní aplikaci a požadovaných výsledcích. Kromě toho může být stabilita a životaschopnost
bakterií v emulzích ovlivněna faktory, jako je koncentrace hydrofilních a lipofilních povrchově
aktivních látek, stejně jako objem vnitřní vodné fáze. [1] Studie ukázaly, že uvolňování bakterií z
emulzí voda-v-olej-ve-vodě (V/O/V) lze výrazně zvýšit vyššími koncentracemi určitých složek, jako
je NaCl a nižším množstvím povrchově aktivních látek, jako je Tween 80. [1]
Proto může být nutné stanovit optimální koncentraci oleje nebo emulze pro bakteriální enkapsulaci na
základě specifických požadavků procesu enkapsulace, požadované kinetiky uvolňování a stability
enkapsulovaných bakterií. [1]
Pro stanovení optimální koncentrace oleje nebo emulze pro zapouzdření bakterií se používají různé
metody. Mezi tyto metody patří:

 Mikrofluidní techniky: Využití mikrofluidních zařízení k vytváření dvojitých emulzí voda-v-

olej-ve-vodě (V/O/V) umožňuje přesnou kontrolu velikosti kapiček a účinnosti zapouzdření,
což umožňuje studium dynamiky a stability mikrobiálního uvolňování v emulzích.[3]
 Analýza účinnosti zapouzdření: Měření účinnosti zapouzdření probiotik v různých
matricích, jako je alginát nebo želatina, poskytuje náhled na optimální koncentraci oleje nebo
emulze potřebné k dosažení vysokých rychlostí zapouzdření a stability.[5]
 Studie kinetiky uvolňování: Provádění experimentů kinetiky uvolňování sledováním
uvolňování vnitřních fází z emulzí v průběhu času pomáhá určit vliv koncentrace oleje nebo
emulze na řízené uvolňování bakterií a jiných bioaktivních látek.[1]
 Hodnocení stability zapouzdření: Vyhodnocení stability dvojitých emulzí zapouzdřujících
bakterie během růstu, metabolické aktivity a uvolňování poskytuje cenné informace o tom, jak
různé koncentrace oleje nebo emulze ovlivňují celkovou stabilitu zapouzdřených bakterií.[5]
Využitím těchto metod lze získat cenné poznatky o optimální koncentraci oleje nebo emulze potřebné
pro účinnou bakteriální enkapsulaci, která zajišťuje zvýšenou životaschopnost, stabilitu a řízené
uvolňování bakterií v různých aplikacích.
Literatura:
1. Kadri, H.E.; Devanthi, P.V.P.; Overton, T.W.; Gkatzionis, K. Do Oil-in-Water (O/W) Nano-
Emulsions Have an Effect on Survival and Growth of Bacteria? Food Research International
2017, 101, 114–128, doi:10.1016/j.foodres.2017.08.064.
2. Dorobantu, L.S.; Yeung, A.K.C.; Foght, J.M.; Gray, M.R. Stabilization of Oil-Water Emulsions by
Hydrophobic Bacteria. Appl Environ Microbiol 2004, 70, 6333–6336,
doi:10.1128/AEM.70.10.6333-6336.2004.
3. Mohd Isa, N.S.; El Kadri, H.; Vigolo, D.; Gkatzionis, K. Optimisation of Bacterial Release from a
Stable Microfluidic-Generated Water-in-Oil-in-Water Emulsion. RSC Adv. 2021, 11, 7738–7749,
doi:10.1039/D0RA10954A.
4. Zhang, Y.; Xie, Y.; Liu, H.; McClements, D.J.; Cheng, C.; Zou, L.; Liu, W.; Liu, W. Probiotic
Encapsulation in Water-in-Oil High Internal Phase Emulsions: Enhancement of Viability under
Food and Gastrointestinal Conditions. LWT 2022, 163, 113499, doi:10.1016/j.lwt.2022.113499.
5. Da Silva, S.Â.D.; Batista, L.D.S.P.; Diniz, D.S.; Nascimento, S.S.D.C.; Morais, N.S.; De Assis,
C.F.; Passos, T.S.; De Sousa Júnior, F.C. Microencapsulation of Probiotics by Oil-in-Water
Emulsification Technique Improves Cell Viability under Different Storage Conditions. Foods
2023, 12, 252, doi:10.3390/foods12020252.
6. Da Silva, S.Â.D.; Batista, L.D.S.P.; Diniz, D.S.; Nascimento, S.S.D.C.; Morais, N.S.; De Assis,
C.F.; Passos, T.S.; De Sousa Júnior, F.C. Microencapsulation of Probiotics by Oil-in-Water
Emulsification Technique Improves Cell Viability under Different Storage Conditions. Foods
2023, 12, 252, doi:10.3390/foods12020252.