‫الكشف عن الفيروسات التاجية؟‬

‫فيروسات كورونا هي فصيلة فيروسات واسعة االنتشار يُعرف أنها تسبب أمراضا ً تتراوح من نزالت البرد الشائعة إلى األمراض األشد‬
‫حدةً‪ ،‬وهناك عدة أنواع معروفة من فيروسات كورونا تسري بين الحيوانات دون أن تصيب عدواها البشر حتى اآلن‪.‬‬

‫مؤخرا‪ ،‬مع ظهور فيروس تاجي جديد‪ ،‬ألول مرة في الصين وانتشر بعدها عبر العالم‪ ،‬وجدت منظمة الصحة العالمية نفسها امام أحد‬
‫أصعب التحديات التي مرت بها وأعلنت عنه فيما بعد كحالة وباء‪ .‬إذ أنه إلى حدود ‪ 2222-22-22‬كانت ‪ 11877‬حالة مؤكدة مصابة‬
‫ب كوفيد‪ 71-‬و‪ 2272‬حالة وفاة‪.‬‬

‫حمض نووي ريبوزي‪ ARN‬الفيروس ‪ SARS-COV 2‬هي الطريقة المفيدة لمعرفة حالة‬ ‫ٍ‬ ‫خالل هذه الجائحة الوبائية‪ ،‬الكشف عن‬
‫اإلصابة‪ ،‬هل مؤكدة أم سلبية‪ .‬لذلك أصبح الكشف السريع والدقيق عن الفيروس التاجي مه ًما بشكل متزايد‪.‬‬
‫مع التقدم الملحوظ الذي شهدته التكنولوجيا البيولوجيا الجزئية ‪ ,Molecular Biology technology‬طرق الكشف عن الحمض‬
‫النووي عرفت بدورها تطورا سريعا و أصبحت تعد من التكنولوجيا الثورية للكشف عن الفيروسات ‪Revolutionary technology‬‬
‫‪for virus detection.‬‬

‫خصوصا تقنية ‪ PCR: Polymerase Chain Reaction‬التي تتميز بسرعة رصدها للحمض النووي الفيروسي‪ ،‬حساسيتها الفائقة‬
‫وقدرة معرفة النوعية ‪ ،Specificity‬هذه المميزات جعلت منها المعيار الذهبي للكشف عن الفيروسات‪ .‬في فرنسا مثال‪ ،‬الكشف عن‬
‫الحمض النووي ل ‪ COVID-19‬يتم عبر تقنية ‪ RT-PCR‬التي تستغرق ما يقارب ‪ 4‬ساعات لمعرفة النتيجة‪.‬‬

‫‪ PCR‬هي تقنية أنزيمية تستعمل إلنتاج نسخ بكميات مهمة لجينوم واحد من خالل فصل شريطي للحمض النووي ‪ ADN‬التي تحتوي‬
‫على قطعة من الجين‪ ,‬ثم يتم تعليم موقع القطعة كمرحلة تمهيدية‪ ,‬بعدها يستخدم ‪ ADN polymérase‬لتجميع القطع و بشكل مستمر‬
‫تنسخ كل نسخة و هكذا‪.‬‬

‫ونظرا لالستعماالت الدارجة ل ‪ ،PCR‬حساسيتها الفائقة وقدرتها العالية لمعرفة الخصائص التسلسلية أصبحت واحدة من التقنيات‬
‫الروتينية المعتمدة للكشف عن الفيروسات التاجية‪.‬‬

‫‪Bouizgma Keltoum‬‬
‫بشكل عام‪ ،‬يتم تحويل ‪ ARN‬الفيروس التاجي إلى ‪ cDNA‬أي حمض نووي متمم عبر الترجمة العكسية‪ ،‬ثم يليها الكشف عن نوعية‬
‫المنتوج أي ما تمت ترجمته وذلك من خالل طرق وأدوات كشف مخصصة ك ‪ Gel Visualisation‬و‪ Squencing‬اللذان يعتبران‬
‫من الطرق التقليدية للكشف عن الفيروسات التاجية‪ .‬لكن ونظرا ألن هذه العمليات تستغرق وقتا طويال وتكلفة عالية فتظل غير صالحة‬
‫لالستعماالت للعينات السريرية‪.‬‬
‫‪Real Time reverse Transcriptase-PCR:‬تعتبر من أهم التقنيات المفضلة للكشف عن فيروس كورونا و ذلك بفضل مجموعة‬
‫من المزايا الخاصة و الكمية البسيطة المستعملة خالل الكشف‪ .‬عالوة على ذلك فهي أكثر حساسية من ‪ PCR‬االعتيادية وهذا ما يساعد‬
‫كثيرا التشخيص المبكر للعدوى‪ .‬لذلك وإلى حين ال يزال هذا اإلختبار هو الطريقة السائدة للكشف عن جميع أنواع الفيروسات التاجية‪.‬‬
‫رغم ذلك فالزالت مجهودات ضخمة تبذل للتحسين من تقنية ‪ ،RT-PCR‬ألنها عرضة للتلوث وتتطلب مناولة العينات وقتا طويال‪ .‬إذ‬
‫أنه تم التوصل إلى تعديل بسيط حيث تستخدم مجسات ‪ TaqMan‬بطريقة مزدوجة‪ ،‬وهذا ما ساهم في خلق حساسية مفرطة للكشف‬
‫عن ‪ SARS-COV‬وذلك باستخدام نسخة واحدة من ‪ ARN‬لكل تفاعل وهذا ما هو مطلوب بشدة‪.‬‬

‫تفاعل البوليميراز المتسلسل هو أداة بحثية قوية وعملية للغاية‪ .‬يمكن التعرف على تسلسل مسببات غير معروفة للعديد من األمراض‬
‫من خالله‪ .‬قد تساعد التقنية في تحديد تسلسل الفيروسات غير المعروفة سابقًا والمتصلة بالفيروسات المعروفة مسبقًا ما يحقق فه ًما‬
‫تقص حساسة غير إشعاعية‪ ،‬فإن تفاعل‬ ‫ٍ ٍّ‬ ‫أفضل للمرض بحد ذاته‪ .‬في حال وجود إمكانية لتبسيط اإلجراء أكثر أو تطوير أنظمة‬
‫البوليميراز المتسلسل سيحتل مكانة بارزة في المختبرات السريرية‪ ،‬وهذا ما تحاول فعله الكثير من الدول للكشف السهل والسريع‪.‬‬
‫يوجد تقنيات أخرى ك‪:‬‬
‫‪1. PCR based methods‬‬
‫‪2. Isothermal nucleic acid amplification-based methods‬‬
‫‪a. Regular LAMP-based methods‬‬
‫‪b. Sequence – specific LAMP-based methods‬‬
‫‪c. Rolling circle amplification- based methods‬‬
‫‪3. Microarray based methods‬‬
‫)‪4. Newly developed methods (The RNA targeting CRISPR associated enzyme Cas13‬‬

‫خالصة هي أن كل هذه التقنيات المذكورة آنفا لها مميزاتها وقيودها‪ .‬إال أن ‪ PCR‬تعد من التقنيات المنتشرة على نطاق واسع للكشف‬
‫عن الفيروسات بدقة عالية ونوعية‪ ،‬رغم أنها تستلزم أدوات مخبرية خاصة ومتنوعة‪ ،‬إضافة إلى أن المخبري يجب أن يكون ملم وعلى‬
‫دراية كافية تخول له ممارسة هذه التقنية‪ ،‬وهذا ما ال يمكن تحقيقه إال من قبل مختبر كفء وراسخ‪.‬‬

‫‪M. Shen et al., Recent advances and perspectives of nucleic acid detection for coronavirus, Journal of Pharmaceutical‬‬
‫‪Analysis, https://doi.org/10.1016/j.jpha.2020.02.010‬‬

‫‪https://en.wikipedia.org/wiki/Human_coronavirus_NL63‬‬

‫‪Bouizgma Keltoum‬‬