COLORANTES

COLORANTES
Todas las células y tejidos de origen animal son incoloros salvo que contengan
algún tipo de pigmento, en ese caso adoptan el color que el pigmento les
proporciona, por ejemplo la melanina en la piel o la hemoglobina en la sangre.
 COLORANTES
Todos los cuerpos que observamos no poseen color por si mismos, todos los
cuerpos que observamos son grises con diferentes tonalidades.
 COLORANTES
Cada cuerpo gris que observamos tiene la propiedad de absorber y reflejar
Fotones (partículas que conforman la luz y cuyo tamaño: Longitud de Onda
determina su color)
 COLORANTES
La luz natural o artificial emite partículas denominadas FOTONES que son
estructuras ondulantes que presentan diversos tamaños que se denominan:
LONGITUD DE ONDA.
 COLORANTES
La Retina humana puede percibir colores cuyas Longitudes de Onda se
encuentren comprendidas entre los 380 y 780 nanómetros.
 COLORANTES
Cuando un cuerpo iluminado por la luz, refleja todos los Fotones que recibe, la
Retina lo percibe de color blanco.
 COLORANTES
Cuando un cuerpo iluminado por la luz, absorbe todos los Fotones que recibe,
la Retina lo percibe de color negro.
 COLORANTES
Cuando un cuerpo iluminado por la luz, absorbe parcialmente todos los
Fotones que recibe, la Retina percibe el color no absorbido o el color reflejado.
 COLORANTES
En 1714, Van Leeuwenhoek, fue el primero que empleó una solución de
Azafrán en Vino para observar fibras musculares estriadas.
En 1856, producto del desarrollo de la industria textil, se producen los
primeros colorantes de origen natural o artificial, los cuales son aprovechados
para la coloración de cortes histológicos.
 COLORANTES
Dentro de los Colorantes Naturales tenemos por ejemplos los provenientes de
plantas: Hametoxylum campechanum (Hematoxilina) y los provenientes de
animales Dactylopius cocus costa (Carmin).
Dentro de los Colorantes Artificiales tenemos a todos aquellos producidos
químicamente y cuya naturaleza mencionamos a continuación:
 COLORANTES
Naturaleza Química: El origen químico de todos los colorantes es la molécula
de BENCENO que se presenta en forma de “Anillo Aromático”, conformada
por 6 átomos de carbono, 3 3nlaces simples y 3 enlaces dobles.

Benceno

Anillo Aromático de Benceno Anillo Aromático de Benceno

 COLORANTES
Naturaleza Química:Estos Anillos Aromáticos de Benceno presentan enlaces
dobles inestables entre sus átomos de carbono y pueden ser reordenados lo que
da origen a la gran diversidad de colorantes.

Anillo Aromático de Benceno Anillo Aromático de Benceno

 COLORANTES
Naturaleza Química: El BENCENO es una sustancia incolora pero que si al
reaccionar con “Radicales Químicos” logra la fijación de sus dobles enlaces,
puede absorber y reflejar radiación luminosa (fotones) y mostrar color.
Los Radicales Químicos se denominan “GRUPOS CROMÓFOROS”

Benceno
 COLORANTES
Naturaleza Química: Los Radicales Químicos que fijan los dobles enlaces de la
molécula de Benceno originando que esta muestre color se denominan
“GRUPOS CROMÓFOROS”

Grupo Cromóforo

Grupo Cromóforo

Grupo Cromóforo
Benceno
 COLORANTES
Naturaleza Química: Cuando los dobles enlaces de un “Anillo Aromático de
Benceno” se encuentran fijados por los GRUPOS CROMÓFOROS, se forma una
nueva molécula con capacidad de mostrar color denominada: CROMÓGENO

Grupo Cromóforo

Benceno CROMÓGENO
 COLORANTES
Naturaleza Química: El CROMÓGENO no es un COLORANTE
El CROMÓGENO tiene la capacidad de mostrar color, pero no tiene la
capacidad de unirse a los tejidos.
El COLORANTE tiene la capacidad de mostrar color, y también tiene la
capacidad de unirse a los tejidos.

CROMÓGENO COLORANTE

CROMÓGENO
 COLORANTES
Naturaleza Química: El CROMÓGENO no es un COLORANTE
Las moléculas que permiten la fijación del CROMÓGENO a los tejidos se
denominan: GRUPOS AUXOCROMOS
Los GRUPOS AUXOCROMOS convierten un CROMÓGENO en un COLORANTE.
Los GRUPOS AUXOCROMOS son cargas eléctricas Positivas o Negativas.

Grupo Auxocromo

CROMÓGENO COLORANTE
 COLORANTES
Naturaleza Química: En Histotecnología se define COLORANTE como:

“Sustancia líquida que puesta en contacto con un tejido se une a él, de

forma perdurable, transmitiéndole su color”

COLORANTE Auxocromo
Cromóforo

Benceno
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS: Son 8 grupos:

A) Nitrados B) Azoicos
C) Derivados de la Antraquinona D) Derivados de la Acridina
E) Derivados de la Imina Quinónica F) Derivados del Trifenilmetano
G) Derivados del Xanteno H) Derivados de la Ftalocianina
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
A) Colorantes Nitrados
Presenta el Cromóforo Nitro (-NO2) en el Anillo derivado del Benceno.

Ejemplo: Ácido Pícrico

Cromóforo Nitro

Benceno

Acido Pícrico
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
B) Colorantes Azóicos
Presenta el Cromóforo Azóico (-N=N-) vinculando Anillos adyacente derivados
del Benceno. Pueden ser Monoazóicos o Diazóicos
Ejemplo: Orange G (Monoazóico) y Rojo Congo (Diazóico)

Cromóforo Azóico

Benceno
Benceno
Rojo de Congo

Orange G

Pardo de Bismark Y
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
C) Colorantes derivados de la Antraquinona
Presenta el Cromóforo Carbonilo (>C=O) en un producto de la oxidación del
Antraceno.
Ejemplo: Rojo de Alizarina S

Antraceno
Benceno
Cromóforo Carbonilo

Rojo de Alizarina

Antraquinona
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
D) Colorantes derivados de la Acridina
Presenta el Cromóforo Imino (>C=N) en un producto de la nitración del
Antraceno.
Ejemplo: Naranja de Acridina

Antraceno
Benceno

Cromóforo Imino

Naranja de Acridina

Acridina
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
E) Colorantes derivados de las Iminas Quinónicas
Presenta dos Cromóforos y pueden ser de 3 tipos:
Oxacínicos: Grupo Imino (>C=N) y Carbonilo (>C=O), ejemplo: Violeta de Cresilo
Tiacínicos: Grupo Imino (>C=N) y Tiazólico (>C=S), ejemplo: Azul de Metileno
Acínicos: Grupo Imino (>C=N) e Imino (>C=N), ejemplo: Safranina
Cromóforo Imino Cromóforo Imino Cromóforo Imino

Oxacína Cromóforo Carbonilo Tiacína Cromófor Tiazólico Acína Cromóforo Imino

Violeta de Cresilo
Azul de Metileno
Safranina
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
F) Colorantes derivados del Trifenilmetano
Presenta el Cromóforo (>C=NH) en un producto de la nitración del Antraceno.

Ejemplo: Light Green

Benceno

Cromóforo >C=NH
Light Green
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
F) Colorantes derivados del Xanteno
Presenta el Cromóforo Carbonilo (>C=O) en un producto de la oxidación del
Antraceno.
Ejemplo: Eosina Yellow

Antraceno
Benceno

Eosina Yellow

Xanteno Cromóforo Carbonilo

 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS CROMOFOROS:
F) Colorantes derivados de las Ftalocianinas
Presenta el Cromóforo Imino (>C=N) uniendo 4 grupos Isoindol (Benceno +
Pirrol) en cuyo centro se ubica un átomo metálico.
Ejemplo: Alcian Blue

Isoindol
Benceno

Cromóforo Imino

Ftalocianina Alcian Blue

 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS AUXOCROMOS: Son 5 grupos:

A) ÁCIDOS
B) BÁSICOS
C) NEUTROS
D) INDIFERENTES
E) METACROMÁTICOS
CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS AUXOCROMOS:
A) ÁCIDOS
Son aquellos producto de la unión entre un Cromógeno débilmente Básico (+)
con Grupos Auxocromos fuertemente Ácidos (-) que le confieren carga global
negativa al colorante. Tiñen estructuras básicas contenidas mayormente en los
citoplasmas celulares.
CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

Por ejemplos: Eosina, Fucsina Ácida, etc.

 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS AUXOCROMOS:
B) BÁSICOS
Son aquellos producto de la unión entre un Cromógeno débilmente Ácido (-)
con Grupos Auxocromos fuertemente Básicos (+) que le confieren carga global
positiva al colorante. Tiñen estructuras ácidas contenidas mayormente en los
núcleos celulares. Por ejemplo la Hematoxilina, Fucsina Básica, etc.
CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

Por ejemplos: Hematoxilina, Fucsina Básica, etc.

 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS AUXOCROMOS:
C) NEUTROS
Son aquellos producto de la unión entre un Colorante Ácido y uno Básico en
disolución alcohólica lo que les permite formar una asociación estable
confiriéndole carga global neutra al colorante. Tiñen estructuras ácidas o
básicas cuando los colorantes son disociados al inestabilizarlos con agua .
CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

OH
OH

OH OH
OH OH

OH
OH
NUCLEO

OH OH
OH OH

OH
OH

OH OH
OH OH

OH
OH

Por ejemplos: Giemsa, etc.

 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS AUXOCROMOS:
D) INDIFERENTES
Son aquellos cuyo mecanismo de tinción no depende de las cargas ácidas o
básicas. Por ejemplo: Impregnación, Inmunohistoquímica, etc.

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

Por ejemplos: Impregnación, Inmunohistoquímica, etc.

 COLORANTES
CLASIFICACIÓN SEGÚN SUS GRUPOS AUXOCROMOS:
E) METACROMÁTICOS
Son aquellos que tiñen el tejido de un color distinto al que presentan debido a
que varían el espectro de luz que reflejan dependiendo de su estado
monomérico o polimérico. Por ejemplo: Azul de Metileno, Azul de Toluidina, etc.

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO

Por ejemplos: Azul de Metileno, Azul de Toluidina etc.

COLORACIONES
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.- El uso secuencial de Colorantes nos

brinda una Coloración, las cuales se clasifican:
•Según su Naturaleza de Unión
•Según el Objeto de Estudio
•Según el Uso de Mordientes
•Según el Tiempo de Coloración
CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión: Pueden ser de 3 tipos:
•De Carácter Físico
•De Carácter Químico
•De Carácter Inmunológico

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión:
•De Carácter Físico: Puede ser de 2 subtipos:
oDisolución
oImpregnación

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión:
•De Carácter Físico: Puede ser de 2 subtipos:
oDisolución: El colorante es mas soluble en el tejido que en el disolvente del
colorante de forma que las moléculas colorantes pasan de su solución hacia el
tejido. Por ejemplo: Sudan Red

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión:
•De Carácter Físico: Puede ser de 2 subtipos:
oImpregnación: La sustancia insoluble formada en una disolución debido a
una reacción química, precipita sobre determinadas estructuras tisulares. Por
ejemplo: Impregnación Argéntica

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión:
•De Carácter Químico: Puede ser de 2 subtipos:
oAtracción Electrostática
oTensión Superficial

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión: Pueden ser de 3 tipos:
•De Carácter Químico: Puede ser de 2 subtipos:
oAtracción Electrostática: Las moléculas colorantes se unen selectivamente a
determinadas estructuras tisulares de carga eléctrica contraria. Por ejemplo:
Hematoxilina Eosina

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión: Pueden ser de 3 tipos:
•De Carácter Químico: Puede ser de 2 subtipos:
oTensión Superficial: Los colorantes generan fuerzas de atracción con
estructuras tisulares muy cercanas por lo que es necesario concentrar la
solución colorante (dispersión coloidal), a fin de disminuir la distancia que los
separa . Por ejemplo: Alcian Blue
CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según su Naturaleza de Unión: Pueden ser de 3 tipos:
•De Carácter Inmunológico: La molécula colorante y la célula reaccionan
químicamente siendo la intermediaria de esta unión un Anticuerpo que permite la
localización microscópica de determinadas sustancias. Por ejemplo: Inmunohistoquímica

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Objetivo de la Coloración: Pueden ser de 3 tipos:
•Topográfica
•Estructural

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Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Objetivo de la Coloración: Pueden ser de 3 tipos:
•Topográfica: Se utiliza para proporcionar una visión de conjunto del tejido de forma
que es posible distinguir todos sus componentes arquitecturales. Por ejemplo:
Hematoxilina - Eosina

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Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Objetivo de la Coloración: Pueden ser de 3 tipos:
•Estructural: Se utiliza para resaltar determinadas estructuras tisulares (núcleos, fibras
elásticas, fibras reticulares, mitocondrias, etc.). Por ejemplo: Tricromica de Masson

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según la Secuencia de Colorantes: Pueden ser de 3 tipos:
•Sucesiva
•Simultanea

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Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según la Secuencia de Colorantes: Pueden ser de 3 tipos:
•Sucesiva: Se emplean los colorantes uno a continuación del otro sin mezclarlos en
ningún caso. Por ejemplo: Hematoxilina - Eosina

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según la Secuencia de Colorantes: Pueden ser de 3 tipos:
•Simultánea: Se emplean todos los colorantes que componen la coloración en un solo
paso (colorantes mezclados). Por ejemplo: Giemsa

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Uso de Mordientes: Pueden ser de 2 tipos:
•Directa
•Simultanea

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Uso de Mordientes:
•Directa: Cuando no se necesita la acción de un Mordiente para provocar la tinción de
un tejido. Por ejemplo: Eosina Yellow

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Uso de Mordientes:
•Indirecta: Cuando se necesita la acción de un Mordiente para provocar la tinción de un
tejido. Puede ser:
•En 1 Tiempo
•En 2 Tiempos

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Uso de Mordientes:
•Indirecta en 1 Tiempo: Cuando la Molécula Colorante y el Mordiente actúan
simultáneamente sobre el tejido y se encuentran en una misma solución: Por ejemplo:
Hematoxilina Harris.

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Uso de Mordientes:
•Indirecta en 2 Tiempos: Cuando la Molécula Colorante y el Mordiente actúan
separadamente sobre el tejido y no se encuentran en una misma solución. Por ejemplo:
Wrghit

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Tiempo de Coloración: Pueden ser de 3 tipos:
•Progresiva
•Regresiva
•Terminal

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Tiempo de Coloración:
•Progresiva: Se deja actuar la molécula colorante solo hasta colorear la estructura con
la intensidad de tinción deseada. No se elimina el exceso de moléculas colorantes
(“Decoloración”) porque no hay exceso. Los tiempos de tinción son estrictos. Por ejemplo:
Eosina Yellow

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Tiempo de Coloración:
•Regresiva: Se deja actuar la molécula colorante hasta sobrecolorear la estructura. Se
elimina el exceso de moléculas colorantes hasta alcanzar la intensidad de tinción
deseada: “Decoloración”. Los tiempos de tinción no son estrictos. Por ejemplo:
Hematoxilina de Harris.

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
 COLORANTES

Clasificación de las Coloraciones.-

Según el Tiempo de Coloración:
•Terminal: La molécula colorante actúa independientemente hasta colorear la
estructura. No se elimina el exceso de moléculas colorantes (“Decoloración”) porque no
hay exceso. Los tiempos de tinción no son estrictos. Por ejemplo: Sudan.

CITOPLASMA

Membrana Celular– Membrana Celular – Membrana Celular

NUCLEO
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