Treponema pallidum

Treponema pallidum spada u tanke gram negativne bakterije, spiralnog oblika

svrstane u red(familija) Spirochaetales.

Rod Vrsta Medicinski znacaj

Treponema T. Pallidum spp. Sifilis

Pallidum
T. Pallidum spp. Endemski sifilis
endemicum
T. Pallidum spp. Povratna groznica
pertenue epidemijski oblik
T. carateum Pinta
Treponema pallidum spp.
Pallidum – Sifilis
Izazivac sifilisa, T. pallidum ssp. pallidum, je bakterijska vrsta patogena samo
za ljude. Vrlo je tanka, svega
0.1 mm, a duzina spiralno uvijene celije varira od 5 do 15 mm. Ne moze se
kultivisati in vitro na bakterioloskim
hranljivim podlogama.
Sifilis pripada grupi seksualno prenosivih bolesti, kontinuirano se smanjuje od
uvodjenja penicilina u terapijsku primenu. Smatra se jednom od najznacajnih
seksualno
prenosivih bolesti, zajedno sa gonorejom i infekcijama izazvanih hlamidijama.
T. pallidum ssp. pallidum je jako osetljiva u spoljnoj sredini i brzo gubi
vijabilnost,
isusivanjem ili usled dejstva dezinfekcionih sredstva. Zbog toga je seksualni
kontakt
dominantan put prenosenja.
Klinicki se mogu razlikovati: 1. Primarni 2. Sekundarni
3. Tercijarni 4. Kongenitalni
Primarni stadijum se odlikuje formiranjem tvrdog “sankra” na mestu prodora
T. pallidum, kao i razvojem bezbolne regionalne limfadenopatije. Ulcerozna
promena stalno zarasta posle dva meseca. Tokom ovog perioda prisustvo
uzrocnika bolesti se moze dokazati u eksudatu kozne lezije i u punktatu limfnih
zlezda. T. pallidum je vec tokom prve nedelje bolesti, limfotokom i krvotokom
izvrsila invaziju svih tkiva, sto predstavlja osnovu za razvoj sekundarnog
stadijuma sifilisa. Oboljenje se odlikuje glavoboljom, povisenom temperaturom,
gubitkom apetita, bolovima u misicima, generalizovanom lemfadenopatijom i
pojavom ospe na kozi i sluzokozama. Osip je znacajan klinicki znak za
prepoznavanje sekundarnog sifilisa, osipje znacajan i zbog toga sto su lezije na
kozi infektivne i sto se u eksudatu moze dokazati T. pallidum. Simptomi se
postepeno povlace i nestaju posle nekoliko nedelja ili meseci. Tercijarni oblik
oboljenja:
Ovaj stadijum se odlikuje hronicnom inflamacijom gotovo svih organa ili tkiva
koja je pracena nastankom granulomatoznih lezija (guma). Prisustvo uzrocnika je
voma tesko dokazati ali se u serumu obolelih nalaze odgovarajuca antitela koja se
mogu detektovati seroloskim reakcijama.
Kongenitalni sifilis dovodi do:

1. Intrauterine smrti ploda

2. Nastanka kongenitalnih malformacija
3. Razvoja latentne infekcije

Vecina beba sa latentnom infekcijom se radja bez znakova oboljenja, a zatim

dolazi do nastanka rinitisa i makulopapulozne ospe pracene deskvamacijom.
Mikrobioloska dijagnoza se moze postaviti detekcijom uzrocnika u eksudatu
koznih promena ili seroloskim reakcijama.

Mikrobioloska dijagnoza sifilisa

Kao i u slucaju ostalih oboljenja bakterijske etiologije, mikrobioloska dijagnoza za

sifilis se postavlja ispitivanjem specificnih osobina uzrocnika – T. pallidum ssp.
pallidum.
Uzimanje uzoraka za analizu :

Eksudat povrsinskih lezija se uzima brisom. Ako su promene na kozi suve,

natapaju se fizioloskim rastvorom i bris se uzima uz jaci pritisak na dno lezije.
T. pallidum se moze naci i u punktatu regionalnih limfnih zlezda u primarnoj
fazi sifilisa, kao i u gotovo svim zlezdama u slucaju postojanja generalizovane
limfadenopatije u tercijarnoj fazi oboljenja. Antitela u serumu bolesnika se
pojavljuju u ranoj fazi patogeneze siflisa i mogu se dokazati primenom razlicitih
seroloskih testova.

OSOBINE UZROCNIKA POSTUPAK ISPITIVANJA

Mikroskopske Tamno polje, imunofluorescenija
Kulturelne Ne ispituju se
Fiziolosko - biohemijske Ne ispituju se
Antigenske Detekcija antitela u serumu:
- Nespecificni testovi
- Specificni testovi
Mikroskopski preparat

Od uzoraka uzetih obolelih osoba se najcesce priprema nativni preparat.

Transport materijala do laboratorije mora biti brz uz sprovodjenje obaveznih mera
zastite. Mikroskopiranje se obavlja svetlosnim mikroskopom uz primenu tehnike
tamnog polja. U vidno polju se traze pokretljive bakterije spiralnog oblika.
STADIJUM BOLESTI VRSTA MATERIJALA
Primarni stadijum - Bris
- Punktat regionalnih limfnih zlezda
Sekundarni stadijum - Eskudat is osipnih promena na
kozi
- Krv za seroloske analize
Tercijarni stadijum - Punktat limfnih zlezda
- Isecci tkiva
- Likvor
- Krv za seroloske analize
Kongenitalni sifilis - Eskudat is osipnih promena na
kozi
- Krv za seroloske analize
Potrebno je naglasiti, da je za dijagnosticki postupak neophodna poseba strucnost,
zbog moguce kontaminacije uzorka drugim spiralnim bakterijama iz sastava
fizioloske mikroflore . Pri tome manji problem predstavlja uzorak primarne lezije
na spoljnim genitalnim organima, jer se kao moguci kontaminant pojavljuje najcesce
T. refringens koju je lako razlikovati od T. pallidum. Dijagnozu je teze postaviti
pregledom nativnog preparata napravljenog od zenskih genitalija ili sa usana i iz
usne duplje, broj mogucih kontaminanata je veci i neke je veoma tesko razlikovati
mikroskopiranjem u tamnom polju
Fiksirani preparati

Tehnika dugo nije imala primenu zbog nemogucnosti bojenja T. pallidum. Kasnije
je ravijena tehnika markiranja specificnih antigena T. pallidum antitelima
konjugovanim sa fluorescentom bojom. Ovako pripreljemni preparati mogu se
posmatrati fluorescentnim mikroskopom i imaju dve vazne prednosti:

1. Fiksirani preparat je pogodniji za transportovanje do laboratorije, ne mora se

posmatrati odmah
2. Olaksava prepoznavanja T. pallidum od nepatogenih spiralnih bakterija
fizioloske mikroflore

Isecci tkiva se tako se mogu koristit za postavljanje dijagnoze.

Seroloski testovi

Detekcija odgovarajucih antitela u serumu bolesnika ima najvecu vrednost u

postavljanju mikrobiloske dijagnoze sifilisa. Postoje specificni i nespecificni
testovi.

Nespecificni testovi :

Ovim testom se ispituje prisustvo antitela cije dejstvo je usmereno na lipide

oslobodjene iz ostecenih celija domacina u ranoj fazi patogeneze sifilisa. Kao
antigenska komponenta u reakcijama nespecificnih seroloskih testova se ne koriste
pravi antigeni vec lipidna frakcija ekstrakta govedjeg srca. Procedura izvodjenja
nespecificnih testova se zaniva na :

1. Reakciji vezivanja komplementa

2. Reakciji flokulacije
Reakcija vezivanja komplementa

Koristi se u dijagnostifikovanju sifilisa i prvi je opisao Wassermann. Antigen se priprema kao

vodeni ekstrakt jetre fetusa inficiranih sifilisom. Ova reakcija se pokazala kao veoma koristan
i pouzdan metod za laboratorijsku dijagnozu sifilisa. Za izvodjenje testa koriste se cetiri
reagensa:

1. Antigen
2. Serum bolesnika
3. Titrirani komplement
4. Senzibilisani eritrociti

Rekacija se moze izvoditi kvantitativno ili kvalitativno

Flokulacioni testovi

Su takodje zasnovani na reakciji kardiolipinskog antigena i antikardiolipinskih

antitela prisutnih u serumu bolesnika. Podesavanjem uslova reakcije formira se
antigen – antitelo kompleks i ispoljava se nastavkom flokula koje se vide golim
okom. Ovi testovi su jednostavniji za izvodjenje i samim tim podesniji za rutinski
rad. Reakcija se izvodi samo sa dva reagensa:

1. Serum bolesnika
2. Rastvor antigena
Specificni seroloski testovi

NAZIV TESTA ZNACENJE SKRACENICE MEHANIZAM REAKCIJA

TPI TREPONEMA PALLIDUM, ANTITELIMA IZAZVANA
IMOBILIZACIONI TEST INHIBICIJA
POKRETILJIVOSTI
FTA - ABS FLUORESCENT MARKIRANJE ANTIGENA
TREPONEMAL ANTIBODY TREPONEMA,
– APSORBED TEST ANTITELIMA SA
VEZANOM
FLUORESCENTNOM
BOJOM
TPHA TREPONEMA PALLIDUM REAKCIJA
HEMAGLUTINATION TEST HEMAGLUTINACIJE
ELISA ENZIME LINKED MARKIRANJE ANTIGENA
IMMUNOSRBENT ASSEY TREPONEMA ANTITELIMA
SA VEZANIM ENZIMOM
Treponema pallidum spp. Endemicum- Endemski sifils

Ovo oboljenje se javlja u Africi i Aziji, prenosi se priborom za jelo, postoje tri
faze bolesti, pri cemu se primarne lezije( najcesce usna duplja) retko
zapazaju

Treponema pallidum spp. Pertenue - Frambezija

Oboljenje se ispoljava u prvoj fazi granulomatoznma, a zatim destruktivnim

promenama na kozi,limfnim cvorovima i kostima. Prenosi se direktnim
kontaktom sa koznim lezijama,.

Treponema pallidum spp. Carateum- Pinta

Pinta je kozno oboljenje, inkubacioni period od 1 do 3 nedelja a ispoljava se

pojavom sitnih papula. Neposredno po pojavljivanju, papule se polako
uvecavaju, a zatim perzistiraju, mesecima ili godinama. Pinta se prenosi
direktnim kontaktom.
Mikrobioloska dijagnoza

Prisustvo treponema u koznim lezijama,I punktatu limfnih zlezdi( endemski

sifilis) moze se dokazati mikroskopskim preparatom. Nativni preparat se posmatra
primenom tehnike tamnog polja, dok se fiksirani prepati, koji se tretira
fluorescentno obelezenim antitelima i posmtra pod fluorescentnim mikrskop.
Nativni preparat se ne koristi za analizu uzorka uzetog iz usne duplje, zbog
nemogucnosti razlikovanja morfoloskih karakteristika patogenih treponema od
nepatgenih vrsta.
Vecina seroloskih testova se moze koristiti za dijagnozu, zahvaljujuci ukrstenoj
antigenskoj reaktivnosti.
To znaci da se diferencijalna dijagnoza sifilisa i drugih bolesti izazvanih
pathogenim treponemama ne moze postaviti samo na osnovu seroloskih testova
ili mikroskopskih preparata. Zbog toga se pravilno postavljanje dijagnoze ovih
bolesti zasniva na deekciji precizno definisanih klinickih statusa, koji se zatim
povezuju i analiziraju u kombinaciji sa pozitivnim ili negativnim labaratorijskim
nalazom.
HVALA NA PAZNJI