Molekularna detekcija trombofilije

Muhic Adis

Sarajevo, 2018. godine

 ŠTA JE TROMBOFILIJA?

• TROMBOFILIJA je sklonost nastanka

krvnog ugruška ili tromba zbog postojanja
urođenog ili stečenog poremećaja
zgrušavanja krvi. Nastali krvni ugrušak
može da dovede do začepljenja krvnog
suda tj. tromboze.
• Pored urođene ili stečene trombofilije,
dodatni faktor rizika su:
• Najčešći naslijedni faktori ili predispozicije za
nastanak krvnih ugrušaka su genske promjene
(MUTACIJE) faktora koagulacije kao što su:
Faktor V (Leiden) i
Faktor II (Protrombin)
• Ostale naslijedne trombofilije uključuju manjak
proteina C, proteina S i antitrombina III
 ZNAČAJ FAKTORA
• Faktor V djeluje kao kofaktor koji u
procesu zgrušavanja omogučava
aktivaciju trombina koji cijepa fibrinogen u
fibrin zatim polimerizira i tako zgrušava krv
kako nebi došlo do njenog gubitka Ovaj
poremećaj najčešći je genski faktor rizika
za porodičnu sklonost venskoj trombozi.
• Mutacija na Factoru V u kombinaciji sa
pušenjem ili nekim drugim faktorom rizika,u
velikom broju izaziva i akutni infarkt miokarda.
• Kod žena se tokom trudnoće i nakon porođaja
četiri puta povećava rizik od nastanka venske
tromboembolije.
• Oko 1-2% slučajeva venske tromboze
završava smrću.

Sva ova stanja nasljeđuju se

autosomalno dominantno što
znači da je za povećan rizik
dovoljna mutacija jednog gena.
• Autosomalnim u genetici
označavamo hromosome koji ne
pripadaju spolnim hromosomima.

• To znači da osobe koje su Faktor V

mutaciju naslijedile samo od jednog
roditelja imaju već 5 do 10 puta veću
vjerovatnoću razvijanja tromboze.
Ako oba roditelja prenose na dijete
ovu mutaciju kod dijeteta će postojati
50-100 puta veća vjerovatnoća
obolijevanja od tromboze.
• Faktor II (protrombin) je faktor koagulacije
Mutacija u genu za ovaj faktor povećava se
koncentracija protrombina u plazmi, te se
kao poslijedica javlja povećano zgrušavanje
krvi koje može dovesti do pojave krvnog
ugruška (TROMBA)
Činjenica da neka osoba ima gensku
predispoziciju ne znači da će sigurno imati
krvni ugrušak
Vrlo je važno da te osobe izbjegavaju faktore
rizika koji u interakciji s genskom
predispozicijom mogu biti okidać za nastanak
krvnog ugruška.
KO SE TREBA TESTIRATI NA
TROMBOFILIJU?
• Sve žene imaju rizik od
nastajanja krvnog
ugruška tokom trudnoće,
a taj rizik je znatno veći
kod žena koje su
naslijedile trombofiliju.
• Te žene imaju povečan
rizik određenih
komplikacija tokom
trudnoće
(spontani pobačaj ,mrtvorođeno dijete)
 PREDNOSTI GENETIČKOG
TESTIRANJA !!!
• Genetsko testiranje ne koristi samo osobi
kod koje je otkrivena mutacija već i drugim
članovima uže rodbine koji potencijalno
mogu postati bolesnici.
• Saznanje o genetskoj predispoziciji može
spriječiti izlaganje faktorima koji mogu
pospiješiti razvoj trombofilije. Te pomoći u
promjeni životnih navika kako bi smanjili
rizik od nastanka krvnog ugruška.
 Rezultat genetičkog
testiranja može utjecati
na doktorsku odluku o
potrebi koriščenja
lijekova za
razrijeđivanje krvi
tokom trudnoće.

Genetičko testiranje ima

važnu ulogu kod
operativnog zahvata i post-
operativnog oporavka
• Analizom DNA koriščenjem nove
tehnologije koja se naziva
pirosekvenciranje moguće je
pouzdano utvrditi postojanje
genetskih polimorfizama koji
povečavaju rizik od nastajanja
trombofilije.
• Uzorak periferne krvi-EDTA
epruveta.

• DNA izolacija: QIAamp DNA Mini

Kit.

• PCR amplifikacija: SNP

Detective CVD-1 Panel v.2.1
(GENOMED, Turkey).
• Analiza podataka: ABI
PRISM® 3130
sequencer/GeneMapper v.4.0.
 NO MU
R T

HETEROZIGOT
HOMOZIGOT MUTIRANI
MUTIRANI
HOMOZIGOT
(NOSILAC NORMALAN
MUTACIJE )
(MUTACIJA )
 INTERPRETACIJA NALAZA
Izmjenjena
Normalni varijanta Aktivnost
Naziv faktora proteina
genotip genotipa

pola količine
GA normalno,
Faktor V pola povećano
GG
Leiden
AA Povećano
pola količine
Faktor II GA normalno,
GG pola povećano
Protrombin
AA povećano
 Zaključak:
• Trombofilije su poremećaji hemostaze koji mogu u
znatnoj mjeri povećati rizik od
tromboza,tromboembolijskih komplikacija i čitavog niza
komplikacija. Postoje jasni dokazi da visokorizične
urođene trombofilije, a posebno antifosfolipidni sindrom
kao stečena trombofilija mogu biti povezane sa gubitkom
trudnoće.
• Sve to nameće potrebu da treba izdvajati rizične grupe
pacijenata, kako bi bili testirani na trombofilije.
• Samo tako se na vrjeme može pravovremeno profilaktički
i terapijski djelovati i dati najbolja šansa za prevenciju
tromboembolijskih komplikacija