CHỌN GIỐNG BẰNG

CÔNG NGHỆ GEN

I. CÔNG NGHỆ GEN
1. KHÁI NIỆM CÔNG NGHỆ GEN
• - Nguyên liệu:

+ Gen cần chuyển.

+ Thể truyền(vec tơ chuyển gen): là một

phân tử ADN đặc biệt được sử dụng để đưa
một gen từ tế bào này sang tế bào khác.

+ Enzim: Enzim cắt giới hạn (restrictaza)

và enzim nối (ligaza).
 Quy trình chuyển gen
• Bước 1: Tạo ADN tái tổ hợp
+ Tách chiết thể truyền và gen cần chuyển ra khỏi tế bào.
+ Dùng enzim cắt giới hạn (restrictaza) để tạo ra cùng một loại đầu dính.
+ Dùng enzim ligaza để gắn gen cần chuyển vào thể truyền ADN tái tổ hợp.
• Bước 2: Đưa ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận
+ Phương pháp biến nạp: Dùng muối canxi clorua hoặc xung điện cao áp làm giãn màng sinh chấtcủ a tế
bào để ADN tái tổ hợp dễ dàng đi qua.
+ Phương pháp tải nạp: dùng thể truyền là virut lây nhiễm vi khuẩn mang gen cần chuyển xâm nhập vào
tế bào vật chủ. Khi đã xâm nhập vào tế bào vật chủ, ADN tái tổ hợp sẽ điều khiển tổng hợp loại prôtêin đặc
thù đã được mã hóa trong nó.
• Bước 3: Phân lập dòng tế bào chứa ADN tái tổ hợp
+ Chọn thể truyền có gen đánh dấu.
+ Bằng các kỹ thuật nhất định (ví dụ sử dụng mẫu dò đánh dấu phóng xạ) nhận biết được sản phẩm đánh
dấu và nhân dòng tế bào này để sản xuất ra sản phẩm mong muốn
II. ỨNG DỤNG CÔNG NGHỆ GEN TRONG
TẠO GIỐNG BIẾN ĐỔI GEN