Parazitologie potravin a parazitologick laboratorn metody ZS 2008 IV.

Biologie a vznam Toxoplasma gondii a kokcidi rodu Sarcocystis

Prof. MVDr. Betislav Koudela, CSc. stav parazitologie FVL Veterinrn a farmaceutick univerzita Brno koudelab@vfu.cz
27.10.2008 PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza 1

Upozornn

Tento soubor obsahuje obrzky z knih a internetu, u nich nebylo dno o souhlas autora i nakladatele. Je uren vhradn pro intern potebu v rmci ppravy ke zkouce z pedmtu Parazitologie potravin a parazitologick laboratorn metody. Jeho en je zakzno.

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

Struktura pednky biologick charakteristika Toxoplasma gondii

humnn toxoplazmza
epidemiologie/epizootologie toxoplasmzy metody diagnostiky toxoplasmzy toxoplasmza a hygiena potravin kongenitln toxoplasmza epidemie toxoplazmzy na Morav 1994 biologick charakteristika Sarcocystis spp. sarkocystza a hygiena potravin detekce sarkocyst v mase smovn problematiky toxoplasmzy a sarkocystzy v EU
PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza 3

27.10.2008

Taxonomie kokcidi Kmen: Apicomplexa Tda: Coccidea d: Eimeriida (Eucoccidiorida) ele: Eimeriidae Rod: Eimeria (4-2) ele: Sarcocystidae

Isospora (2-4)
Caryospora (1-8) Tyzzeria (0-8)

Wenyonella (4-4).

Taxonomie heteroxennch (vcehostitelskch) kokcidi Kmen Tda d ele Rod Apicomplexa Coccidea (Coccidiasina) Eimeriida (Eucoccidiorida) Sarcocystidae Toxoplasma

Neospora Hammondia Sarcocystis

Frenkelia

Besnoitia
fakultativn heteroxenn obligtn heteroxenn

Vvojov cyklus Toxoplasma gondii

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

Vvojov cyklus Toxoplasm a gondii

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

Biologick charakteristika Toxoplasma gondii DH - kokovit elmy

MH - teplokrevn obratlovci
ti typy infeknch vvojovch stdi: tachyzoity - tachos=rychl, endodyogonie, neprav cysty bradyzoity - brady=pomal, endopolygonie, prav cysty sporozoity - ve vysporulovan oocyst

tachyzoity/bradyzoity - vliv imunitnho systmu (IFN-)

Toxoplasma gondii
mistr imunologickho boje zoonza sroprevalence: 40-60 % lidsk populace u zvat aborty (ovce, kozy) u lid kongenitln toxoplasmza, encefalitidy u imunodeficitnch pacient

manipulan teorie

Monosti infekce Toxoplasma gondii mon zpsoby penosu: z DH na MH z DH na DH z MH na DH z MH na MH fakultativn heteroxenn charakter Toxoplasma gondii: me se it bez DH

me se it bez MH
Toxoplasma gondii je velmi spnm parazitem

Toxoplasma gondii - stdia tachyzoity bradyzoity v cystch

27.10.2008

oocyst y

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

11

Toxoplasma gondii - kultivace

endodyogoni e

uvolovn tachyzoit
27.10.2008 PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza 12

Toxoplasma gondii - tachyzoity

nativ

IFAT
27.10.2008 PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza 13

Vskyt Toxoplasma gondii u lid celosvtov globln 1/3 populace sroprevalence (0-100 %) ovlivnna pedevm: vkem sledovanch jedinc

geograficky
sociln a sociologicky stravovacmi nvyky sledovanch pouitmi srologickmi metodami cca u 10% infikovanch pznaky onemocnn: zven teplota, zduen mandl, on onemocnn..

Toxoplazmza imunodeficitnch pacient loha imunitnho systmu - bunn imunita, klov role INF- exacerbace infekce (z bradyzoit na tachyzoity) diseminovan toxoplazmza

toxoplazmov encefalitida u 40% AIDS pacient

profylaxe TMX- Sulfa (trimetoprim-sulfametoxazol)

Genotypy Toxoplasma gondii

Zdroje infekce Toxoplasma gondii z hlediska hygieny potravin

ti infekn vvojov stdia:

tachyzoity bradyzoity sporozoity

monosti infekce lovka tachyzoity v mlce tkovmi cystami s bradyzoity oocystami se sporozoity

Ad) tachyzoity T. gondii v mlce tachyzoity prokzny v mlce ovc, koz a krav v akutn fzi infekce pedpoklady pro toxoplazmzu po poit mlka s tachyzoity: akutn infekce (parazitmie)

tachyzoity citliv na teplotu - nepasterizovan mlko

tachyzoity citliv na nzk pH a pepsin - penetrace sliznic stn dutiny a jcnu vznam infekce tachyzioty v mlce je minimln (pouze 3-5 publikac)

Ad) tkov cysty s bradyzoity cysty se vyvjej ji za tden po infekci jsou infekn po celou dobu ivota MH u rznch MH rzn lokalizace cyst a rozdln poet cyst ebek dle etnosti cyst T. gondii:

1. prase, ovce, koza

2. krlk, hrabav drbe 3. kon 4. skot

Ad) tkov cysty s bradyzoity

sroprevalence u hospodskch zvat v R (Hejlek, Literk et al. 1979-1990)

prase: 10 % (KFR), 31 % (SFDT) ovce: 40 % (KFR), 55 % (SFDT) koza: 21 % (KFR), 61 % (SFDT) krlk: 53 % (SFDT) hrabav drbe: 1-5 % (SFDT)

kon: 8 % (SFDT)
skot: 1-4 % (KFR), 22 % (SFDT)

Ad) tkov cysty s bradyzoity

sroprevalence u voln ijcch zvat v R (Hejlek, Literk et al. 1979-1990)

divok prase: 15 % (SFDT) srn zv: 14-100 % (SFDT) zajc: 5% - T. gondii zpsobuje letln infekce

Ad) tkov cysty s bradyzoity pevn tkovch cyst v mase - nzk teploty pi teplot 1 a 4 C - 3 tdny pi teplot -1 a -8 C - tden pi teplot -12 C bradyzoity v tkovch cystch hynou okamit pevn tkovch cyst v mase - vysok teploty pi teplot 67 C bradyzoity v tkovch cystch hynou okamit pi teplot 60 C bradyzoity v tkovch cystch hynou za 4 minuty pi teplot 56 C bradyzoity v tkovch cystch hynou za 10 minut

Ad) tk cysty s bradyzoity pevn tkovch cyst v mase - solen 6% roztok NaCl - bradyzoity v tkovch cystch hynou okamit 3% roztok NaCl - bradyzoity v tkovch cystch hynou za 21 dn pevn tkovch cyst v mase - uzen pevaj studen uzen pevn tkovch cyst v mase - ozaovn (USA) g zen - 1 kGy - bradyzoity v tkovch cystch hynou okamit

Ad) tkov cysty s bradyzoity

Opaten ke snen monosti infekce tkovmi cystami

zamezen infekce T. gondii u hospodskch zvat

in-door chovy zamezen pstupu koek, hlodavc, ptk a hmyzu do chovnch objekt tepeln oeten krmivo Toxoplasma-free chovy realn provediteln pouze vkrm prasat a drbee

Ad) tkov cysty s bradyzoity zamezen konzumace syrovho nebo tepeln nedostaten upravenho masa hygienick a technologick pedpisy zamezujc vrobu, distribuci a prodej potravin ze syrovho nebo tepeln

nedostaten upravenho masa (tatarsk bifteky,

krvav bifteky, speciln uzeniny) hygienick zsady pi manipulaci se syrovm masem kitchen hygiene

Ad) oocysty se sporozoity infekce koek T. gondii asymptomatick sroprevalence - 74 % dosplch koek sroprevalence vy u koek na vesnici ne ve mst prepatentn perioda po pozen tkovch cyst 3-10 dn

prepatentn perioda po pozen oocyst 18-50 dn

za patentn periodu vylou jedna koka a 106 oocyst patentn peroida 10 dn, vtina oocyst vylouena v prbhu 2-3 dn sporulace ukonena za 2-5 dn, zahrabvn trusu

Ad) oocysty se sporozoity oocysty T. gondii velmi odoln - dezinfekce ? pevn oocyst T. gondii - nzk teploty pi teplot 4 C (lednika) - 54 msc pi teplot -10 C - 106 dn

pevn oocyst T. gondii - vysok teploty

pi teplot 55 C a 60 C sporozoiti v oocystch hynou za 1-2 minuty

pevn oocyst T. gondii ve stev al a koprofgnho hmyzu a 3 tdny

Ad) oocysty se sporozoity Opaten ke snen monosti infekce oocystami koprologick vyetovn koek? srologick vyeten koek - prokzan protiltky = informace o tom, e vyluovn u bylo

in-door koky - denn odklzen trusu, hygiena

in-door krmen tepeln oetenm krmivem out-door koky - zamezen defekace do pskovi a zhon

Zvr ve vztahu k hygien potravin dodrovn technologickch postup, kter spolehliv devitalizuj tkov cysty T. gondii respektovn biologickch vlastnost T. gondii pi posuzovn technologickch postup novch masnch vrobk zamezen monosti kontaminace potravin oocystami T. gondii osvta a informace

Kongenitln toxoplazmza
pokud dojde k infekci T. gondii 4-6 msc ped graviditou protektivn imunita chrn ped transplacentrn (vertikln) infekc plodu pokud dojde k infekci v prbhu gravidity -pomnoen tachyzoit v placent a nsledn infekce plodu nejrizikovjm obdobm je prvn trimestr incidence kongenitln toxoplazmzy 1-100 na 10 000 narozench dt

nejednotn nzor na len kongenitln toxoplazmzy

Kongenitln toxoplazmza

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

31

Kongenitln toxoplazmza

From Dubey JP, and Beattie CP. Toxoplasmosis of animals and Man. CRC Press, Baca Raton, 1988
27.10.2008 PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza 32

Maso jako hlavn zdroj infekc Toxoplasma gondii u lid

Maso jako hlavn zdroj infekc Toxoplasma gondii u lid v Evrop uskutenny 3 velk studie

BMJ 2000;321:142-147 Sources of Toxoplasma infection in pregnant women Objective: To determine the odds ratio and population attributable fraction associated with food and environmental risk factors for acute toxoplasmosis in pregnancy Design: Case-control study Setting: Six large European cities Participants: Pregnant women with acute infection (cases) detected by seroconversion or positive for anti-Toxoplasma gondii IgM were compared with pregnant women seronegative for toxoplasma (controls) Main outcome measures: Odds ratios for acute infection adjusted for confounding variables; the population attributable fraction for risk factors

BMJ 2000;321:142-147 Sources of Toxoplasma infection in pregnant women

AMJ 2005;118: 212-216 Toxoplasmosis in pregnancy

Epidemiologie toxoplazmzy v R klinick toxoplazmza diagnostikovna do poloviny 60. let sporadicky pozdji zlepen diagnostika (poet diagnostickch laborato ped rokem 1966 - 3, v roce 1999 - 82) morbidita na 100 000 obyvatel za msc 1970: 1975: 1980: 1985: 0,084 0,357 0,279 0,569 1990: 0,600 1994: 1,658 1995: 1,221 1999: 0,695

Epidemiologie toxoplazmzy v R EPIDAT - Ministerstvo zdravotnictv Vybran infekn nemoci v R v letech 1998-2007 absolutn Toxoplazmza (kd B58)

Rok
Poet

1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007
777 857 670 516 646 455 319 347 328 231

Epidemie toxoplazmzy na Morav 1994 zaala souasn v nkolika okresech Moravy na potku roku 1994 (v prosinci 1993) trvala do dubna 1994 epidemie mla vrazn lokln charakter celkov poet infikovanch nestanoven zjitno 722 ppad klinick toxoplazmzy v prbhu prvnch t msc roku 1994

Epidemie toxoplazmzy na Morav 1994 Okres Poet obyvatel Poet Morbidita ppad 1994 198221,36 19,61 15,57 12,36 11,06 7,58 7,22 6,12 6,01 12,89 0,26 0,83 1,61 0,23 0,25 2,36 0,98 0,35 0,30 0,91

1991 Brno-msto Olomouc Opava Blansko Prostjov Karvin Perov Nov Jin 526 34 Krom Brno-venkov
Celkov

390 112 250 226 091 133 181 976 85 107 885 40 111 490 37 285 903 65 138 472 30 160 7,06 1,07 108 917 20 155 208 28 1 866 580 722

Epidemie toxoplazmzy na Morav 1994

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

42

Epidemie toxoplazmzy na Morav 1994 Vsledky dotaznkov akce: 25 % - konzumace syrovho masa nebo obilnin, kontakt s kokami, fast-food, nvtva pbuznch na vesnici ve vnonm obdob 1993

kolem 50 % - konzumace masa a vrobk z domc zabijaky, prce na zahrad (zimn obdob ???)
vce ne 90 % - konzumace rozinek, oech, majonzy, unky v obdob vnonch svtk 1993 pouze 2,2 % - vegetrini

Epidemie toxoplazmzy na Morav 1994 typick profil pacienta s klinickou toxoplazmzou obyvatel msta (Brno, Olomouc) ena (68,6 %) mlad 32 rok (75 %) 60 % rodinn vskyt popsn ppad osmilenn rodiny, ve kter est len prodlalo klinickou toxoplazmzu

klinick prbh - lymfadenopatie dlouh angna

Epidemie toxoplazmzy na Morav 1994

zdroj infekce neprokzn hypotza - zdrojem infekce rozinky, oechy. kontaminovan koim trusem s oocystami Toxoplasma gondii

pedevm ve mst
vnon obdob lokln vskyt (1-2 distribun firmy)

druh nejvt prokzan epidemie

vt epidemie - water-borne toxoplasmosis v Kanad 1995 (2900-7700 ppad)

Biologick charakteristika Sarcocystis spp. obligtn heteroxenn stovky druh DH - masorav a verav obratlovci MH - teplokrevn i studenokrevn obratlovci oocysty isosporovho typu, sporulace in situ extraintestinln merogonie endotelu cv, RES nebo hepatocytech svalov cysty - sarkocysty metrocyty - cystozoity terminologie Sarcocystis bovicanis/Sarcocystis cruzi u potravinovch zvat (MH) vce druh (Bos 3, Sus 3, Ovis 4)

Vvojov cyklus Sarcocystis cruzi

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

47

Morfologie stdi Sarcocystis spp. oocysty/ sporocyst y

TEM

H&E SEM

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

48

Patologie sarkocystzy pro mezihostitele

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

49

Vznam sarkocystzy ve vztahu k potravinm smyslov zmny masa S. gigantea jcen ovce S. miescheriana (suiscanis) divoci Sarcocystis sp. divok kachny

jako pvodce onemocnn lovka stevn sarkocystza svalov sarkocystza

Humnn stevn sarkocystza lovk jako DH po pozen tepeln neopracovanho masa stravovac zvyklosti

Sarcocystis suihominis, Sarcocystis bovihominis (hominis) aj.

v R ojedinle prjmov onemocnn s horekami intermitujc vyluovn sporocyst od 5. - 12. dne po pozen masa zvanj prbh u dtskch pacient

zpravidla bez terapie

Human intestinal sarcosporidiosis

Frequency:

Internationally: Most cases of human sarcosporidiosis occur

in Southeast Asia. The incidence of intestinal Sarcocystis infection in Thai laborers was measured at 23%. A study of autopsy specimens of patients in Southeast Asia showed a prevalence rate of 21% in 100 consecutive patients evaluated. The seroprevalence of sarcosporidiosis in Malaysia was estimated at 19.8%.

Humnn svalov sarkocystza

lovk jako MH po pozen sporocyst (kontaminovanovan potraviny/voda) Sarcocystis lindemanni a dal druhy v R doposud nediagnostikovna v odborn literatue popsno necelch sto ppad

podrobn kazuistika u 7 americkch vojku v Malajsii

Humnn svalov sarkocystza

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

54

Human sarcosporidiosis
Frequency: In the US: Sarcosporidiosis has worldwide distribution. In the United States, more than 60 cases of muscle involvement by Sarcocystis species have been described, mostly in collections of case reports of 5-10 cases. Since this finding is often incidental, many more undetected cases probably exist.

Human sarcosporidiosis
Mortality/Morbidity: Although sarcosporidiosis can involve the heart, no deaths specifically related to its myocardial involvement have been documented. Painful muscle swellings, fever, and weakness

can occur with skeletal muscle involvement.

Sarcosporidiosis has not been described as causing a chronic diarrhea or malabsorptive state.

Detekce sarkocyst v mase pm detekce velmi omezen vyuit nativ trypsinace histologicky, histochemicky mal citlivost PCR nepm detekce srologicky nek nic o infeknosti bradyzoit v cystch biologick pokus velmi omezen vyuit

Dal zdroje informac Volf P., Hork P. a kol.: Paraziti a jejich biologie. Triton 2007, 318 s. Hui Y. H. et al. Foodborne Diseases Handbook, Marcel Dekker Inc. 2001, vol. 2, 516 s. OrtegaY.: Foodborne Parasite. Springer 2006, 289 s. http://www.wikipedia.org/

27.10.2008

PP IV. Toxoplasmza a sarkocystza

58