12.

OTÁZKA
Corynebacterium diphtheriae, Legionella pneumophila

Corynebacterium diphtheriae
-patří do rodu Corynebacterium
Charakteristika: G+ tyčky – rovné nebo mírně zahnuté (kyjovitý tvar), nesporulující, aerobní, uspořádané v ostrých
úhlech = koryneformní, nepohyblivé

- kataláza +, oxidáza +
- odolné proti vyschnutí – měsíce přežívá v prachu
- v kultivační půdě redukuje teluričitan na telurit a telur, a proto je dobrý záchyt na speciálních kultivačních půdách s
přídavkem teluričitanu, který též působí jako inhibiční látka pro útlum jiných mikroorganismů
- obsahuje metachromatická granula, která slouží jako zásobárna energie (Barví se odlišně od použitého barviva:
methylenovou modří se barví načervenale)
- není invazivní = neproniká do oběhu, ale produkuje nekrotoxin (exotoxin),(dostává do krve a poškozuje srdce)
- nekrotoxin produkují jen bakterie napadené fágem, který vnáší do bakterie gen pro jeho tvorbu (pro tvorbu nekrotoxinu).
Existují tak toxigenní kmeny i netoxigenní kmeny. Je jen jeden antigenní typ toxinu

- způsobuje onemocnění - ZÁŠKRT (difterie)

● akutní infekční onemocnění vyvolané toxigenními kmeny
● onemocnění rozvojových zemí
● hlavně u dětí - příčina úmrtí
● působeno toxinem = toxinóza
● zdroj: člověk (nosič)
● přenos:
- přímo kapénkami
- nepřímo vzduchem či kontaminovaným prachem (kožní forma záškrtu)
● toxin nekrotizuje epitelie ve sliznici - sliznice se pokrývají fibrinem, erytrocyty, leukocyty a vzniká tak
pseudomembrána= difterická pablána, která je připojena k podslizniční vrstvě a obsahuje hlavně na spodině i
mikroorganismy, které stále produkují toxin, toxin pak proniká do krevního oběhu
● příznaky: bolest v krku, pablány na mandlích i okolí (uvula, farynx, larynx, nosní sliznice u malých dětí), edém
kolem krčních mízních uzlin
- vzácně se také vyskytuje postižení spojivek, zvukovodu, genitálu žen nebo i kožní forma
● při přežití toxin působí na vzdálených místech - poškozuje myokard, periferní nervy, ledviny, játra
Formy záškrtu:
A. Krční forma: pablány na mandlích i okolí (čípek měkkého patra, hltan, hrtan) - (šedavé, zelené, pod nimi bakterie
- na spodině) zmenšují průchod vzduchu dýchacího systému =dušení, bolest v krku, zvětšení mízních uzlin
- postihuje zejména děti
B. Nosní forma - hnis z nosu (výtok)
C. Kožní forma - na chodidlech (z prachu)- vzácně
+ Komplikace: myokarditis (zánět srdečního svalu), poškození nervů- neuropatie,
- dušení, selhání srdce (příčiny smrti)
- dnes kolem 50 případů za rok (Evropa) věk: 15-24 let
Diagnostika:
materiál: výtěr z pod pablány, celé pablány, výtěr z nosu, hltanu či jiných postižených sliznic, v krvi (toxin), materiál z
okrajových zón kožních lézí
- odebírá se více tamponů pro rychlejší současné zpracování
1) Mikroskopie:
- Gram (G+ kyjovité tyčky)
- barvení na metachromatická granula : Albertovo barvení (Neisser) - připomíná rozsypaný čaj
2) Kultivace:
- KA - β-hemolýza
- půdy s K2TeO3 (teluričitanem draselným) 0,04% : Claubergova, Tinsdalova, Součkova, Manzulova, Lefflerovo
sérum (pokud do 2-3 dní na půdách nic nevyroste - opakovat odběr)
- pomnožení na tekutých selektivních půdách

3) Precipitace: Elekův testování

- precipitační průkaz toxinu
- na agar se naočkují C.diphtheriae a umístíme proužek filtračního papíru s antitoxinem
→ precipitační linie
4) Biochemicky: kataláza +

5) Metoda PCR, MALDI - neprokážou produkci toxinu (PCR může prokázat gen pro toxin)
(6) Sérologicky- ELISA)

Léčba:
- (anti) sérum – antitoxin (hyperimunní globulin)
- Antibiotika: PNC, Makrolidin, Claritromycin
- ATB záškrt neléčí, jen brání množení korynebakterií
Prevence:
- vakcína (hexavakcína)

Legionella pneumophila
-patří do rodu Legionella (zahrnují asi 55 druhů, nejznámnějsší je Legionella pneumophila
Charakteristika: G -, nesporulující, aerobní (kapnofilní), pohyblivá, tyčka
Citlivost: k UV, chloru, 70% ethanolu
Výskyt:
● voda – pitná i užitková, průmyslová
● usazeniny rzi v nádržích
● klimatizační zařízení hotelů a nemocnic, ale i domácnosti
● hotelové sprchy,
● chladící věže
● pomnožují se i ve vodních zdrojích - v buňkách améb
- proto je zdrojem nejen člověk, ale i voda = HYDROTELURICKÝ ZDROJ
Onemocnění:
Legionářská nemoc - jedná se o pneumonii (dlouhé horečky, bolesti kloubů a svalů, postižený orgán jsou plíce → těžký
zápal plic)
(jiné druhy legionel vyvolávají Pontiackou horečku – lehčí chřipkové onemocnění)

Postižení: oslabení, častěji muži

Šíření: kapénkami a nepřímo kapičkami klimatizace vzdušnou cestou až 2 km od zdroje
Vstupní brána: dýchací systém
Infekce: většinou nozokomiální
Diagnostika:
materiál: sputum, sekrety dýchacích cest, pleurální exsudát, krev, plicní tkáň, pitevně plicní tkáň
- vzorky mohou být kontaminovány nežádoucí vedlejší mikroflórou
1) Přímo mikroskopicky: patrné G- tyčky, špatně se barví, dlouhé 4 - 5 μm, nesporulující
2) Biochemicky: tvoří - katalázu, gelatiázu, β- laktamázu - nefungují PNC
3) Přímo kultivačně:
- Muller-Hintonův agar
- BCYE agar s dřevěným uhlím a kvasničním extraktem (buffered, charcoal, yeast, extract)
- speciální pufrované půdy

- Po 3-5 dnech ( 35°C, s 2,5% CO2) vyrůstají bělavě zelené až zelené kolonie 2- 3 mm, luminiscence v UV světle
na speciálních půdách
4) Přímou imunofluorescencí: pozitivní IF hlavně v 1. týdnu onemocnění
5) Nepřímo sérologicky: nepřímý IF test, RVK, hemaglutinace, ELISA
- nemá velký význam
6) Průkaz antigenu z moči
- imunochromatograficky (negativní výsledek nevylučuje pozitivitu - čekáme na kultivaci)
7) PCR
8)MALDI
Terapie: antibiotika - makrolidy (clarithromycin ( KLACID ), azithromycin ( AZITROX ) – 3 denní)
- fluorochinolony (ciprofloxacin, ofloxacin)
(Legionely jsou rezistentní k beta- laktamovým antibiotikům PNC)