REPLIKACIJA

REPLIKACIJA
 DNK molekul

rasplitanje DNK
molekula
nukleotid
stari lanac

novi lanac
parentalni razdvajanje lanaca komplementarno dva
molekul pri čemu će svaki sparivanje baza novonastala
DNK poslužiti kao molekula DNK
matrica za sintezu
novog lanca
KONZERVATIVNI SEMIKONZERVATIVNI DISPERZNI
MODEL MODEL MODEL
 EKSPERIMENT MESELSON-STAHL-a
parentalni lanci prva replikacija druga replikacija
sintetisani na 15 N na 14 N na 14 N

+ + + +

H H H L L H H L LL LL LH

H = (15 N) L = (14 N)
 15
N 15
N

15
N 14
N 14
N 15
N

15
N 14
N 14
N 14
N 14
N 14
N 14
N 15
N

15
N 14N 14
N 14
N
14
N 15N
 KONZERVATIVNI SEMIKONZERVATIVNI DISPERZNI
MODEL MODEL MODEL

I
L
I I
H

II
L

I I
 5’ kraj 3’ kraj

5’ fosfat

3’ hidroksilna
grupa

3’ kraj 5’ kraj
 3’
replikaciona viljuška 5’
5’
3’
3’
pravac pomeranja replikacione viljuške 5’
3’
5’

5’
3’
3’

5’

vodeći lanac 3’
5’

5’ zaostajući lanac
3’
3’

Okazaki fragmenti 5’
 Oridžin replikacije

replikaciona viljuška
replikaciona viljuška

zaostajući lanac
vodeći lanac

vodeći lanac zaostajući lanac

 3’

5’
SSB proteini

3’ DNK

HELIKAZA

5’
 DNK POLIMERAZA III

odmotavanje DNK
heliksa brzinom od 50
obrtaja u sekundi
replikacija koja se odvija
brzinom od 500
nukleotida u sekundi
 DNK topoizomeraza I
sa tirozinom na aktivnom
mestu
topoizomeraza se
kovalentno vezuje za
fosfat na DNK i raskida
fosfodiestarsku vezu na
jednom lancu

jedan kraj DNK

heliksa rotira

ponovno
uspostavljanje
fosfodiestarske veze
prekid 1

prekid 2
prekursor
 ODLIKE DNK POLIMERAZA E. coli

DNK polimeraza

I II III
5’ - 3’ polimerizaciona
aktivnost + + +
3’ - 5’ egzonukleazna
aktivnost + + +

-
5’ - 3’ egzonukleazna
aktivnost + -
broj molekula po ćeliji 400 ? 10-20
 ‘’PROOFREADING’’ AKTIVNOST DNK POLIMERAZE

T T T T C*
5’ P P P OH P P P OH

3’ P P P P P P
A A A A A A A

T T T T C
5’ P P P P OH

3’ P P P P P P
A A A A A A A
C
P OH
T T T T T
5’ P P P OH P P P OH

3’ P P P P P P
A A A A A A A
 3’

5’

3’ DNK

5’
 3’

5’

PRIMAZA
3’ DNK

5’
 3’

5’

3’ DNK

5’
 PRAJMER
3’

5’

5’
5’

3’ DNK PRIMAZA

5’
 3’

5’

5’
5’

3’ DNK

5’
 3’

5’

5’
5’

3’ DNK
DNK POLIMERAZA III

5’
 3’

5’

5’

3’ DNK

3’

5’
 3’

5’

5’

3’ DNK

3’
HELIKAZA

5’
 3’

5’

5’

3’
5’

5’
 3’

5’
DNK POLIMERAZA III

5’

3’

PRIMAZA
3’

5’
 3’

5’

5’

3’

3’
PRAJMER

5’
 3’

5’

5’

3’

DNK POLIMERAZA III 3’

5’
 3’

5’

5’

3’

3’

5’
 3’

5’

5’

DNK POLIMERAZA I
3’

3’

5’
 3’

5’

5’ dezoksiribonukleozid-trifosfat

ribonukleotid
3’

3’

5’
 3’

5’

5’
dezoksiribonukleozid-trifosfat

3’ ribonukleotid

3’

5’
 3’

5’

5’

3’
LIGAZA

3’

5’
 3’

5’

5’

3’

3’

spajanje Okazaki
5’
fragmenata
 vodeći
lanac
parentalna DNK
Okazaki fragmenti

zaostajući
DNK polimeraza III lanac

DNK ligaza
 oridžin replikacije
parentalni lanac novi lanac

sočivasta struktura replikaciona viljuška

 ODLIKE DNK POLIMERAZA U ĆELIJAMA SISARA

DNK polimeraza


mesto u ćeliji:
jedro + + - + +
mitohondrije - - + - -
5’ - 3’ polimerizaciona
aktivnost
+ + + + +

- - + + +
3’ - 5’ egzonukleazna
aktivnost

udružena sa
primazom
+ - - - -
 5’ 3’
3’ 5’

5’ 3’
3’ 5’

5’ 3’
3’ 5’

5’ 3’
3’ 5’

5’ 3’
3’ 5’

5’ 3’
3’ 5’

5’ 3’
3’ 5’
telomerazni ponovci

praznina nastala
uklanjanjem prajmera

telomeraza

RNK prajmer