You are on page 1of 55

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NAM CẦN THƠ


KHOA DƯỢC – BỘ MÔN DƯỢC LIỆU


BÀI BÁO CÁO MÔN


PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU DƯỢC LIỆU

Đề tài: XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU LÁ


TÍA TÔ (Perilla Frutescens (L.) Britt)

Cần Thơ, 2017


BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NAM CẦN THƠ
KHOA DƯỢC – BỘ MÔN DƯỢC LIỆU


BÀI BÁO CÁO MÔN


PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU DƯỢC LIỆU

Đề tài: XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU LÁ


TÍA TÔ (Perilla Frutescens (L.) Britt)

GVHD: Ths. Thái Thị Cẩm Sinh viên thực hiện: Lê Nhi Xuân

Lớp: DH13DUO02

MSSV: 1331100159

SĐT: 01224026114

Mail: nhixuanle@gmail.com

Cần Thơ, 2017


Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

LỜI CẢM ƠN


Trong suốt quá trình thực hiện bài báo cáo, em đã nhận được nhiều sự quan tâm, giúp
đỡ của quý thầy cô, gia đình và bạn bè.
Trước hết, em xin chân thành cảm ơn cô Thái Thị Cẩm đã tạo cơ hội và hướng dẫn em
trong thời gian thực hiện bài báo cáo.
Em cũng xin gửi lời cảm ơn đến các anh chị trong phòng thí nghiệm Dược liệu, trường
Đại học Nam Cần Thơ đã nhiệt tình giúp đỡ, đóng góp ý kiến để em có thể hoàn thành
tốt bài báo cáo.
Chân thành cảm ơn gia đình và bạn bè đã động viên, hỗ trợ về cả tinh thần lẫn vật chất.

Cần Thơ, ngày 8 tháng 12 năm 2017


Người thực hiện
Lê Nhi Xuân
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN ..................................................................................................................3


DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ............................................................................... iv
DANH MỤC CÁC HÌNH ...............................................................................................v
DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ ....................................................................... vii
ĐẶT VẤN ĐỀ .................................................................................................................1
CHƯƠNG I......................................................................................................................2
TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU .......................................................................................2
1 Tổng quan về thực vật học ......................................................................................2
1.1 Tên gọi ...............................................................................................................2
1.2 Nguồn gốc xuất xứ .............................................................................................2
1.3 Phân loại .............................................................................................................3
1.4 Đặc điểm hình thái .............................................................................................4
1.4.1 Thân .............................................................................................................4
1.4.2 Lá .................................................................................................................4
1.4.3 Hoa ..............................................................................................................6
1.4.4 Quả ..............................................................................................................7
1.5 Phân bố, sinh thái và thu hái ..............................................................................8
1.6 Bộ phận dùng .....................................................................................................9
1.7 Thành phần hóa học trong lá Tía tô ...................................................................9
1.8 Tác dụng dược lý của lá Tía tô ........................................................................11
1.8.1 Tác dụng ức chế vi khuẩn .........................................................................11
1.8.2 Tác dụng chống oxy hóa ...........................................................................11
1.8.3 Tác dụng chống ung thư ............................................................................11
1.8.4 Tác dụng kháng nấm .................................................................................12
1.8.5 Tác dụng điều vị ........................................................................................12
1.8.6 Tác dụng kháng viêm và chống dị ứng .....................................................12
1.8.7 Tác dụng khác ...........................................................................................13
1.9 Công dụng của lá Tía tô ...................................................................................13

i
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

1.10 Tính vị và quy kinh của lá Tía tô ..................................................................13


1.11 Liều dùng ......................................................................................................13
1.12 Kiêng kỵ .......................................................................................................13
1.13 Các bài thuốc và chế phẩm từ lá Tía tô ........................................................14
1.13.1 Các bài thuốc từ Tía tô ...........................................................................14
1.13.2 Các chế phẩm từ lá Tía tô ......................................................................14
2 Tiêu chuẩn chất lượng trong DĐVN IV và các phương pháp tiến hành ...............15
2.1 Vi phẫu .............................................................................................................15
2.2 Khảo sát bột dược liệu .....................................................................................15
2.3 Phân tích định tính ...........................................................................................15
2.4 Phân tích định lượng ........................................................................................16
2.5 Các chỉ tiêu khác ..............................................................................................16
2.5.1 Độ ẩm ........................................................................................................16
2.5.2 Tạp chất .....................................................................................................17
2.5.3 Dư lượng thuốc bảo vệ thực vật ................................................................17
2.5.4 Tro toàn phần ............................................................................................17
2.5.5 Tỷ lệ vụn nát..............................................................................................17
2.5.6 Chế biến.....................................................................................................17
2.5.7 Bào chế ......................................................................................................17
2.5.8 Bảo quản ....................................................................................................17
2.5.9 Tính vị, quy kinh .......................................................................................17
2.5.10 Công năng, chủ trị ..................................................................................17
2.5.11 Cách dùng, liều lượng ............................................................................17
2.5.12 Tương kỵ ................................................................................................17
CHƯƠNG 2 ...................................................................................................................18
KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM.........................................................................................18
1 Mô tả thực vật ........................................................................................................18
2 Đặc điểm vi học .....................................................................................................20
2.1 Vi phẫu lá Tía tô ..............................................................................................20
2.1.1 Lá ...............................................................................................................20

ii
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

2.1.2 Phiến lá ......................................................................................................23


2.1.3 Cuống lá ....................................................................................................23
2.2 Bóc tách biểu bì lá Tía tô .................................................................................25
2.3 Soi bột lá Tía tô ................................................................................................26
3 Phân tích thành phần hóa thực vật .........................................................................30
3.1 Chiết xuất dược liệu .........................................................................................30
3.2 Phân tích sơ bộ thành phần hóa học .................................................................31
3.2.1 Dịch chiết ether .........................................................................................31
3.2.2 Dịch chiết cồn ...........................................................................................32
3.2.3 Dịch chiết nước .........................................................................................33
3.3 Định tính tinh dầu bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng ..................................37
3.3.1 Chiết tinh dầu lá tía tô ...............................................................................37
3.3.2 Định tính tinh dầu lá tía tô bằng sắc ký lớp mỏng ....................................38
4 Độ ẩm của bột dược liệu lá tía tô...........................................................................39
Chương 3 .......................................................................................................................40
XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU LÁ TÍA TÔ .............................................40
1 Định nghĩa .............................................................................................................40
2 Đặc điểm cảm quan ...............................................................................................40
3 Đặc điểm vi phẫu ...................................................................................................40
3.1.1 Lá ...............................................................................................................40
3.1.2 Phiến lá ......................................................................................................40
3.1.3 Cuống lá ....................................................................................................40
4 Đặc điểm bột lá tía tô.............................................................................................41
5 Đặc điểm bóc tách biểu bì lá tía tô ........................................................................41
6 Định tính tinh dầu lá tia tô bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng ..........................41
7 Độ ẩm bột dược liệu lá tía tô .................................................................................41
CHƯƠNG 4 ..................................................................................................................42
NHẬN XÉT ...................................................................................................................42
TÀI LIỆU THAM KHẢO .............................................................................................44

iii
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT




DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl.
TNF – α Yếu tố hoại tử khối u – α.
IL 6 Interleukin – 6.
IL-1β Interleukin - 1 beta.
IL-8 Interleukin - 8.
RA Rosmarinic acid.
PMNL Polymorphonuclear leukocytes.
SAR Seasonal allergic rhinoconjunctivitis - viêm giác mạc dị ứng theo mùa.
IgE Quantitative immunoglobulin E - globulin miễn dịch.
TFA Acid trifluorooctetic.
HPLC High Performance Liquid Chromatography - sắc ký lỏng hiệu năng
cao.
TT Thuốc thử.
ĐĐ Đậm đặc.
DD Dung dịch.

iv
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

DANH MỤC CÁC HÌNH



Hình 1:Thân và cành vuông, có nhiều lông (thực tế). ................................................ 4
Hình 2: Cấu tạo mặt trên và mặt dưới lá tía tô ........................................................... 5
Hình 3:Chiều dài và chiều rộng lá tía tô ..................................................................... 5
Hình 4: Chiều dài cuống lá và lá mọc đối chéo chữ thập. ......................................... 5
Hình 5: Hoa không đều, mẫu 5 và có lá bắc hình trứng, đầu nhọn. ........................... 6
Hình 6: Cụm hoa mọc ở ngọn hoặc ở nách lá. ........................................................... 6
Hình 7: Hoa mọc đối chéo hình chữ thập .................................................................. 7
Hình 8: Hoa thức và hoa đồ cây tía tô ........................................................................ 7
Hình 9: Cấu tạo quả tía tô ........................................................................................... 8
Hình 10: Trà lá tía tô ................................................................................................ 14
Hình 11: Sen sấy lá tía tô .......................................................................................... 14
Hình 12: Nước tía tía tô ............................................................................................ 14
Hình 13: Bột lá tía tô ................................................................................................ 14
Hình 14: Nước sốt hương chanh và tía tô ................................................................. 14
Hình 15: Lá mọc đối chéo hình chữ thập, lá non màu tím. ...................................... 18
Hình 16: Đặc điểm cảm quan lá tía tô ...................................................................... 19
Hình 17: Chiều rộng và chiều dài lá tía tô ............................................................... 19
Hình 18: Chiều dài cuống lá và cấu tạo mặt trên - dưới lá tía tô.............................. 19
Hình 19: Lá tía tô phơi khô ...................................................................................... 20
Hình 20: Cấu tạo vi phẫu lá tía tô ............................................................................ 21
Hình 21: Lông tiết và lông tiết hình bán nguyệt....................................................... 21
Hình 22: Lông che chở đa bào và tinh thể calci oxalat hình kim. ............................ 22
Hình 23: Lớp cutin mỏng có răng cưa và mô mềm đạo. .......................................... 22
Hình 24: Mô dày góc và lỗ khí ở lá tía tô ................................................................. 22
Hình 25: Cấu tạo libe - gỗ của lá tía tô ..................................................................... 23
Hình 26: Cấu tạo phiến lá ......................................................................................... 23
Hình 27: Cấu tạo vi phẫu cuống lá tía tô. ................................................................. 24
Hình 28: Cấu tạo libe - gỗ cuống lá tía tô................................................................. 25

v
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 29: Cấu tạo libe - gỗ phụ cuống lá tía tô ......................................................... 25


Hình 30: Lỗ khí kiểu trực bào (mặt trên lá).............................................................. 25
Hình 31: Lỗ khí kiểu trực bào (mặt dưới lá) ............................................................ 25
Hình 32: Bột lá tía tô ................................................................................................ 26
Hình 33: Lông che chở đa bào và đứt gãy. ............................................................... 26
Hình 34: Mạch vạch và mạch mạng. ........................................................................ 26
Hình 35: Mạch xoắn và tinh thể calci oxalat hình khối............................................ 27
Hình 36: Tinh thể calci oxalat hình cầu gai và biểu bì phiến lá mang ..................... 27
Hình 37: Lông tiết đầu đa bào, cuống rất ngắn và mảnh biểu bì gân lá. .................. 27
Hình 38: Cấu tạo vi phẫu lá tía tô (vẽ tay). .............................................................. 28
Hình 39: Cấu tạo vi phẫu cuống lá tía tô (vẽ tay) ..................................................... 28
Hình 40: Các cấu tử trong bột lá tía tô (vẽ tay). ....................................................... 29
Hình 41: Bóc tách biểu bì lá tía tô (vẽ tay)............................................................... 29
Hình 42: Kết quả định tính carotenoid........................................................................31
Hình 43: Kết quả định tính triterpenoid......................................................................31
Hình 44: Kết quả định tính tinh dầu............................................................................32
Hình 45: Kết quả định tính flavonoid trong dịch chiết cồn.........................................32
Hình 46: Kết quả định tính chất khử...........................................................................33
Hình 47: Kết quả định tính anthocyanosid..................................................................33
Hình 48: Kết quả định tính proanthocyanidin.............................................................34
Hình 49: Kết quả định tính polyphenol.......................................................................34
Hình 50: Kết quả định tính flavonoid trong dịch chiết nước......................................35
Hình 51: Hệ thống chiết tinh dầu................................................................................38
Hình 52: Sản phẩm tinh dầu lá tía tô...........................................................................38
Hình 53: Cân sấy ẩm hồng ngoại OHAUS MB23 và kết quả đo độ ẩm bột dược
liệu...............................................................................................................................39

vi
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ

Bảng 1: Hàm lượng tinh dầu lá tía tô thu hái tại hai thời điểm. ................................ 9
Bảng 2: Các chỉ tiêu hóa lý của tinh dầu lá tía tô. .................................................. 10
Bảng 3: Các thành phần bay hơi chính trong tinh dầu lá tía tô. .............................. 10
Bảng 4: Thành phần của các hợp chất polyphenol có nguồn gốc từ P.frutescens. . 16

Sơ đồ 1: Mô tả quy trình chiết xuất dịch chiết từ dược liệu lá Tía tô (Perilla frutescens
(L.) Britt)....................................................................................................................30
Sơ đồ 2: Mô tả quy trình chiết tinh dầu lá tía tô (Perilla frutescens (L.) Britt) bằng
phương pháp cất kéo theo hơi nước ................................................................. ........37

vii
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

ĐẶT VẤN ĐỀ


Hiện nay con người đang có xu hướng sử dụng thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên
để hạn chế các tác dụng phụ hay gặp phải khi dùng thuốc tân dược. Việt Nam
nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa nóng ẩm, mưa nhiều, cây cối tươi tốt
quanh năm, vốn nổi tiếng về nguồn dược liệu phong phú và đa dạng. Trong số
hàng trăm loài cây thuộc họ Hoa môi (Lamiaceae) ở nước ta, tía tô là một trong
những loài dược liệu đã được sử dụng từ rất lâu đời ở nước ta. Tía tô (Perilla
frutescens (L.) Britt) hay còn được gọi là tử tô, tử tô tử, tô ngạnh, trong dân gian
chúng được sử dụng rộng rãi trong trị cảm cúm, ho, giải độc, giúp tiêu hóa..v.v.
Ngoài ra lá tía tô còn được dùng làm gia vị và rau ăn sống hàng ngày. Nhận thấy
được giá trị tuyệt vời trong chữa bệnh và có nguồn nguyên liệu phong phú, rẻ
tiền. Các nhà khoa học đã có nhiều công trình nghiên cứu về tác dụng dược lý của
lá tía tô nhằm ứng dụng vào nền y học nước nhà. Từ đó cho thấy tía tô là loài cây
có tiềm năng phát triển mạnh mẽ và có giá trị ứng dụng cao trong nền y học hiện
đại. Tuy nhiên, vấn đề về việc phát triển rộng rãi và xây dựng một tiêu chuẩn chất
lượng cho cây tía tô tại nước ta chưa được xem trọng. Thêm vào đó, điều kiện
trồng trọt ở mỗi vùng miền khác nhau sẽ cho giá trị dinh dưỡng khác nhau. Từ
những vấn đề trên việc xây dựng một tiêu chuẩn chất lượng cho cây tía tô tại mỗi
vùng miền là thật sự cần thiết. Trong đề tài này tôi chọn cây tía tô tại ấp Hòa
Khánh, xã Hòa An, thành phố Cao Lãnh, tỉnh Đồng Tháp để làm đối tượng
nghiên cứu.
Mục tiêu của đề tài này là mô tả tổng quan về cây tía tô, đặc điểm vi học và vi hóa
của lá tía tô. Từ đó xây dựng được một tiêu chuẩn dược liệu về lá tía tô để bổ
sung vào Dược điển Việt Nam IV nhằm nâng cao công tác kiểm nghiệm và chất
lượng của dược liệu, góp phần đảm bảo sức khỏe cho người sử dụng.

1
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

CHƯƠNG I
TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU
1 Tổng quan về thực vật học
1.1 Tên gọi
- Tên khác: tử tô, tử tô tử, tô ngạnh.
- Tên khoa học: Perilla frutescens (L.) Britt thuộc họ Hoa môi (Lamiaceae).
- Tên đồng nghĩa: Ocimum frutescens L., Perilla ocymoides L., Melissa cretica
auct. non L.: Lour., Mentha perilloides auct. non L.: Lamk.
- Tên nước ngoài: Perilla, Purple common perrilla (Anh), Pérille (Pháp), ‘zisu’
(Trung Quốc), ‘shiso’ (Nhật Bản), ‘deulkkae’ (Hàn Quốc), ‘khao poon’
(Lào).[2, 17, 18, 19]

1.2 Nguồn gốc xuất xứ


- Họ Hoa môi hay họ Húng, họ Bạc Hà (Lamiaceae hay Labiatae) có khoảng 263 chi
với khoảng 6.900 – 7.173 loài.
- Nguồn gốc bản địa của Chi tía tô (Perilla) trải rộng từ Ấn Độ đến Đông Nam Á.
- Loài cây Tía tô (Perilla frutescens) được xác định có nguồn gốc ở vùng núi
Himalayas đến vùng Đông Nam Á.
 Ở Trung Quốc cây tía tô được trồng ít nhất 500 năm trước Công nguyên.
 Ở Nhật Bản cây tía tô được trồng vào khoảng từ thế kỷ thứ 7 – 9 sau Công
nguyên.
 Loài cây được du nhập vào Mỹ để trồng làm cảnh và đã trở thành loài thực
vật xâm lấn.
- Đây là loài cây được trồng phổ biến ở Châu Á với nhiều thứ và dạng như sau:
 Perilla frutescens var. auriculato dentata.
 Perilla frutescens var. crispa (Đồng nghĩa Perilla frutescens thứ
nankinensis, Perilla ocymoides thứ crispa)
 Perilla frutescens form crispidiscolor.
 Perilla frutescens var. laciniata (Đồng nghĩa Perilla laciniata).

2
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

 Perilla frutescens var. purpurascens (Đồng nghĩa: Perilla ocymoides var.


purpurascens).
 Perilla ocimoides form citriodora (Đồng nghĩa: Perilla citriodora).
- Trong đó quan trọng là các phân loài:
 Tía tô lá tím (P.frutescens var. crispa): gốc Trung Quốc và Nhật Bản.
 Tía tô lá xanh (P.frutescens var. frutescens): được gọi là mè hoang dại ở
Hàn Quốc.
 Tía tô hai màu (P.frutescens var. crispa forma) là dạng lá phía trên màu
xanh, phía dưới màu tím.
 Tía tô mép lá quăn (P.frutescens L. var. bicolorlaciniata) có giá trị sử dụng
cao hơn.
- Còn có loài tía tô lá quăn (Perilla ocymoides L. var. bicolorlaciniata) có giá trị sử
dụng cao hơn.
- Cần phân biệt với thứ tía tô có lá màu tím hung là Perilla ocymoides var.
purpurascens, không có mùi thơm của tía tô.[2, 17, 18, 19]
1.3 Phân loại
Vị trí cây Tía tô (Perilla frutescens (L.) Britt) trong hệ thống phân loại thực vật [17]:

Ngành ngọc lan


(Magnoliophyta)

Lớp ngọc lan (Magnoliopsida)

Phân lớp hoa môi (Lamiidae)

Bộ hoa môi (Lamiales)

Họ hoa môi (Lamiaceae)

Chi (Perilla)

3
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

1.4 Đặc điểm hình thái


- Mô tả chung: cây thân thảo, cao 0.5 – 1 m, mọc đứng, phân nhánh nhiều, có rãnh
dọc, toàn cây có mùi thơm và có nhiều lông.[6]
1.4.1 Thân
- Thân và cành vuông, lõm ở cạnh, màu xanh hay tím, có nhiều lông.[3, 6]

Hình 1:Thân và cành vuông, có nhiều lông (thực tế).


1.4.2 Lá
- Lá đơn, mọc đối chéo chữ thập, phiến mỏng, hình trứng rộng, kích thước 7-13 x 5-
9 cm, đỉnh lá nhọn, gốc tròn, mép lá có răng cưa nhọn, hai mặt lá có màu xanh
hoặc tím nhạt; những lá ở ngọn thường có màu tím mặt trên, khi lá già mặt lá trở
thành màu xanh; gân ở giữa có màu tím, gân bên 6 – 8 đôi. Cuống lá dạng sợi, dài
2 – 5 cm, đường kính 1,5 – 2 mm, màu tím xanh. [3], [17].

4
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 2: Cấu tạo mặt trên và mặt dưới lá tía tô

Hình 3:Chiều dài và chiều rộng lá tía tô

Hình 4: Chiều dài cuống lá và lá mọc đối chéo chữ thập.

5
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

1.4.3 Hoa
- Cụm hoa dạng chùm ở ngọn cành hoặc nách lá, dài 5 – 20 cm, mỗi đốt mang 2 hoa
mọc đối hình chữ thập.
- Hoa không đều, lưỡng tính, mẫu 5. Lá bắc hình trứng rộng, dài hơn hoa, đầu nhọn,
kích thước 2,5-3 x 3 cm, màu xanh, có lông dài, tồn tại đến khi hoa thành quả.
Cuống hoa dài 1 – 3 mm. Đài hình chuông, màu xanh cỡ 3-4 x 2-3 mm, có 10 gân
dọc, có vòng lông trắng dài ở họng, 2 môi: môi trên 3 thùy ngắn; môi dưới 2 thùy
nhọn xẻ sâu và dài hơn môi trên, đài tồn tại và phát triển đến khi quả đã khô và
rụng, có kích thước 5-8 x 3-4 mm.

Hình 5: Hoa không đều, mẫu 5 và có lá bắc hình trứng, đầu nhọn.

Hình 6: Cụm hoa mọc ở ngọn hoặc ở nách lá.

6
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 7: Hoa mọc đối chéo hình chữ thập

- Tràng hợp thành ống màu trắng, dài 3 – 4 mm ở phía dưới, có vòng lông ở họng, 2
môi 2/3: môi trên chia 2 thùy cạn; môi dưới có thùy giữa lớn hơn 2 thùy bên. Nhị
4, đính ở 1/3 phía trên ống tràng; xen kẽ với cánh hoa, không nhô hẳn ra ngoài, 2
nhị dưới dài hơn 2 nhị trên. Chỉ nhị dạng sợi, bao
phấn màu tím, 2 ô song song, nứt dọc, hướng trong,
đính đáy. Hạt phấn gần như hình cầu, nhiều rãnh
ngoằn ngoèo, đường kính 40 – 45 µm.
- Lá noãn 2, bầu 2 ô sau có vách giả chia thành 4 ô,
mỗi ô 1 noãn, đính đáy. Bầu noãn đường kính 2 mm,
hình vuông, góc tròn. Ở một số bầu noãn có khi chỉ 2
hoặc 3 noãn phát triển thành quả, các noãn còn lại
không phát triển. Vòi nhụy dạng sợi dài 2 – 2,5 mm,
nửa dưới màu trắng, nửa trên màu tím nhạt, 2 đầu
Hình 8: Hoa thức và hoa đồ
nhụy thò ra ngoài.[17] cây tía tô
1.4.4 Quả
- Quả bế tư, hình trứng hoặc gần hình cầu, gốc quả hơi nhọn, gồm 4 hạch nhỏ, mỗi
hạch chứa 1 hạt. Khi chưa chín màu trắng ngà, đường kính mỗi quả khoảng 1 – 1,5
mm, cả “tứ bế quả” khoảng 3 mm. Lúc chín, quả khô lại và có màu nâu đen, có vân
mạng lưới, dễ dàng rơi ra khỏi đài từng quả riêng rẽ. Vỏ quả mỏng, giòn, dễ vỡ.
Hạt có mùi thơm nhẹ khi vỡ, vị cay.[17]

7
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 9: Cấu tạo quả tía tô


1.5 Phân bố, sinh thái và thu hái
- Trên thế giới chi Perilla L. có một số loài ở châu Á. Nguồn gốc có thể từ vùng núi
của Ấn Độ và Trung Quốc, sau được nhân giống trồng khắp nơi ở châu lục. Cây
cũng được trồng ở vùng có khí hậu ôn hòa của Châu Âu. Ở Mỹ và Ukraina còn
thấy cây mọc trong trạng thái hoang dại (PROSEA; 1999. No 13 – spice; 166 –
170).[6]
- Tại Việt Nam tía tô được trồng ở khắp nơi để làm rau gia vị và làm thuốc.
- Cây ưa sáng và ẩm, thích hợp với đất phù sa. Tía tô ra hoa cho quả nhiều, sau khi
quả già, cây tàn lụi, hạt giống phát tán ra xung quanh, đến mùa mưa ẩm năm sau
mới nảy mầm. Cây được trồng bằng hạt, chọn những cây to khỏe không sâu bệnh,
gieo vào tháng 1 – 2. Vào tháng 3 – 4 có thể thu hái lá lần thứ nhất, sau đó khoảng
1 tháng, có thể thu hái lứa thứ hai. Sau lần hái đầu tiên, cần chăm sóc bằng cách
tưới nước tiểu pha loãng hoặc dùng khô dầu giã nhỏ bón vào gốc. Mỗi cây có thể
thu hái 2 – 3 lần lá. Khi thu hái lá, cành về phải phơi trong mát hay sấy nhẹ để giữ
hương vị.[1, 2]

8
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Bảng 1: Hàm lượng tinh dầu lá tía tô thu hái tại hai thời điểm [7].
Độ ẩm Hàm lượng tinh dầu
Thời điểm thu hái
(%) (% chất khô)
Chuẩn bị ra hoa 82,00 0,76
Ra hoa rộ 80,66 0,67

1.6 Bộ phận dùng


- Tử tô tử (tô tử, hắc tô tử - Fructus Perillae) là quả chín phơi hay sấy khô của cây tía
tô.
- Tử tô (Herba Perillae) là cành non có mang lá của cây tía tô phơi hay sấy khô.
- Tử tô diệp (Folium Perillae) là lá phơi hay sấy khô.
- Tô ngạnh (tử tô ngạnh – Caulis Perillae) là cành non hoặc cành già phơi hay sấy
khô.[1]
1.7 Thành phần hóa học trong lá Tía tô
- Lá tía tô chứa 0,3 – 1,3% lượng tinh dầu theo chất khô. Tinh dầu trong lá tía tô có
hơn 30 hợp chất đã được xác định, trong đó thành phần bay hơi có 4 loại chính là
monoterpene, sesquiterbene, phenylpropanoid và furylketone. Theo Đỗ Tất Lợi
(2003) và Yu et al. (2010), loại tinh dầu này chứa thành phần chủ yếu là perilla
aldehyde, limonene, α-pinene, β-caryophyllene, linalool và perilla alcohol,...Trong
đó, dẫn xuất của perilla aldehyde có tên là perillartine. Chất này có vị ngọt gấp
2.000 lần đường mía và có calo rất thấp.
- Chất màu trong lá tía tô là do este của chất xyanin clorit C27H31O16Cl. Ngoài các
chất trên, trong tía tô còn chứa adenin C5H5N5 và acginin C6H14N4O2.[7]

9
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Bảng 2: Các chỉ tiêu hóa lý của tinh dầu lá tía tô [7].
Các chỉ tiêu hóa lý Kết quả
0,941
Tỷ trọng d20 20
1,496
Chỉ số khúc xạ, nD20
0,94
Chỉ số acid (mg KOH/g)
Màu vàng sáng, vị cay, hương đặc
Đánh giá cảm quan
trưng

Bảng 3: Các thành phần bay hơi chính trong tinh dầu lá tía tô [7].
Thời gian lưu
STT Thành phần Hàm lượng (%)
(phút)
1 Hexenal <2E> 4,11 0,49
2 Hex-3-en-1-ol <Z> 4,14 0,71
3 Α-pinene 5,81 0,17
4 Benzaldehyde 6,43 2,04
5 Octen-3-ol 6,85 1,80
6 Octanol 7,30 0,22
7 Limonene 8,32 5,95
8 Benzyl alcohol 8,41 0,30
9 Benzenea cetaldehyde 8,74 0,52
10 Linalool 10,74 2,32
11 Phenyl ethyl alcohol 10,90 0,26
12 Unknow (93, 154, RI, 1282) 16,16 4,91
13 Perilla aldehyde 16,34 37,38
14 Perila alcohol 17,02 0,88
15 Eugenol 18,93 1,66
16 Α-copaene 19,58 0,30
17 Caryophylene 20,97 5,55
18 Humulene 22,03 0,84

10
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

19 Muurolene 22,86 1,59


20 Zingiberene 23,21 2,38
21 Myristicine 24,09 26,39
22 Unknow (32, 278, RI, 2125) 39,25 0,66
Total 97,32

1.8 Tác dụng dược lý của lá Tía tô


1.8.1 Tác dụng ức chế vi khuẩn
- Các hợp chất perilla aldehyde, phenylpropanoid và β-caryophyllene trong tinh dầu
lá tía tô có tác dụng ức chế các loại vi khuẩn gây ngộ độc thực phẩm như:
Sallmonella, tụ cầu khuẩn, trực khuẩn lị, trực khuẩn đại tràng....[7, 9]
1.8.2 Tác dụng chống oxy hóa
- Trong nghiên cứu các chất chiết xuất từ lá tía tô, các hợp chất polyphenolic có hoạt
tính chống oxy hóa. Trong đó, các dẫn xuất acid cinnamic (acid coumaroyl tartaric,
acid caffeic và acid rosmarinic), flavonoid (apigenin 7-O-caffeoylglucoside,
scutellarein 7-O-digglucuronit, luteolin 7-O-diglucuronit, apigenin 7-O-diglucuronide,
luteolin 7-O-glucuronit và scutellarein 7-O-glucuronid) và các anthocyanins ( chủ yếu là
cis-shisonin, shisonin, malonylshisonin và cyanidin 3-O-(E)-cafloylglucoside-5-O-
malonylglucoside) được định lượng và hoạt tính chống oxy hóa dựa trên sự ức chế
của gốc tự do 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). Những kết quả này có tương
quan cao trong một số hợp chất polyphenolic o-dihydroxylated và sự chống oxy
hóa.[13]

1.8.3 Tác dụng chống ung thư


- Theo Ripple et al. (2004), perilla alcohol và limonene có tác dụng ức chế sự tăng
trưởng của các khối u vú, khối u gan, ung thư phổi ở chuột.
- Trong nghiên cứu về tác dụng ức chế của cao tía tô và những thành phần phenolic
trên sự tăng sinh tế bào màng nâng cuộn mao mạch nuôi cấy của chuột gây bởi
cytokin, đã nhận xét thấy cao tía tô ức chế sự tổng hợp DNA của tế bào màng nâng
cuộn mao mạch được kích thích bởi yếu tố sinh trưởng từ tiểu cầu 10 mg/ml, hoặc
yếu tố hoại tử khối u – α (100 U/ml). Các thành phần hoạt chất được phân lập từ

11
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

cao tía tô là acid caffeic, methyl caffeat, acid rosmarinic và lutein-7-O-glucuronid-


6-methyl ester. Trong các flavonoid phân lập từ tía tô, luteolin có hoạt tính chống
tăng sinh mạnh nhất.[6]
1.8.4 Tác dụng kháng nấm
- Dịch chiết methanol có tác dụng kháng nấm Candida albicans. Một hoạt chất kháng
khuẩn và kháng nấm là perillaldehyde citral.
1.8.5 Tác dụng điều vị
- Trong thành phần tinh dầu lá tía tô có chứa một dẫn xuất của perilla aldehyde có
tên là perillartine, chất này có vị ngọt gấp 2.000 lần đường mía và có calo rất thấp.
Nó được sử dụng là chất tạo ngọt thay thế. Đặc biệt, đây còn là phụ gia quan trọng
trong ngành sản xuất thuốc lá để giảm mùi hăng cay.[1]
1.8.6 Tác dụng kháng viêm và chống dị ứng
- Tác dụng kháng viêm và chống dị ứng của luteolin có trong các loài Perilla được
nghiên cứu trên các mô hình dị ứng thực nghiệm trên động vật gậm nhấm. Luteolin
ức chế phản ứng da gồm hai giai đoạn (giai đoạn phản ứng tức thì và giai đoạn
phản ứng chậm), trung gian bởi kháng thể IgE ở chuột nhắt trắng. Tuy vậy, luteolin
không ảnh hưởng đến phản ứng da gây bởi yếu tố hoạt hóa tiểu cầu. Trong một
nghiên cứu in vitro, luteolin ức chế sự giải phóng histamin trung gian bởi IgE từ
dưỡng bào tủy xương và dưỡng bào phúc mạc chuột cống trắng nuôi cấy. Luteolin
cũng ức chế sự sản sinh TNF – α (yếu tố hoại tử khối u – α) và IL 6 (interleukin –
6) từ dưỡng bào tủy xương chuột cống trắng nuôi cấy.[6, 11]
- Trong một nghiên cứu khác, các nhà khoa học nhận thấy rằng chiết xuất Perilla
frutescens giàu rosmarinic acid (RA), các hợp chất polyphenolic có khả năng ức
chế đáp ứng miễn dịch dị ứng và viêm do bạch cầu đa nhân hạt
(polymorphonuclear leukocytes - PMNL) ở chuột. Tuy nhiên, một vài thử nghiệm
lâm sàng có đối chứng giả dược đã kiểm tra tính hiệu quả và an toàn của hợp chất
polyphenolic phytochemicals để điều trị các bệnh viêm dị ứng ở người. Nghiên cứu
xác định việc bổ sung đường uống của acid rosmarinic là một can thiệp hiệu quả
cho bệnh nhân bị viêm giác mạc do dị ứng theo mùa (seasonal allergic
rhinoconjunctivitis - SAR). Trong nghiên cứu này, bệnh nhân được điều trị với RA

12
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

hoặc giả dược trong 21 ngày. Bệnh nhân được ghi lại các triệu chứng hàng ngày, đo
nồng độ eotaxin, IL-1β, IL-8 và histamin trong dịch mũi, nồng độ IgE huyết thanh
và xét nghiệm máu cũng được kiểm tra. So với việc bổ sung giả dược, bổ sung RA
làm giảm đáng kể số lượng bạch cầu trung tính và bạch cầu ái toan trong dịch mũi
(P<0,05) và không có các dấu hiệu bất thường nào trong xét nghiệm máu. Từ đó
cho thấy rằng rosmarinic acid có thể can thiệp hiệu quả đối với bệnh nhân bị SAR
bởi sự xâm nhập của PMNL. Sử dụng biện pháp điều trị thay thế này có thể giảm
chi phí điều trị cho các bệnh dị ứng.[8, 10, 12, 14, 15, 16]
1.8.7 Tác dụng khác
- Với tác dụng kháng khuẩn và tạo hương, tinh dầu lá tía tô được sử dụng nhiều
trong sản xuất nước hoa, kem trị mụn, xà bông, sữa dưỡng thể, xông hơi, massage
làm giảm căng thẳng, mệt mỏi, giúp cơ thể luôn tươi trẻ (Board, 1999).[7]
- Ngoài ra, tía tô còn có tác dụng gây trấn tĩnh, hạ nhiệt, làm toát mồ hôi, ức chế co
thắt cơ trơn ruột gây bởi histamin và acetylcholin và gây cảm ứng đối với
interferon.[6]
1.9 Công dụng của lá Tía tô
- Trị cảm mạo phong hàn, ho, khí suyễn buồn nôn, ngạt mũi, nhức đầu, đau bụng, có thai
nôn mửa, chữa trúng độc cua cá....[1, 6]
1.10 Tính vị và quy kinh của lá Tía tô
- Tính vị: vị cay, tính ôn.
- Quy kinh: phế và tỳ.
- Tác dụng: làm ra mồ hôi, chữa ho, giúp tiêu hóa, giảm đau, giải độc, chữa cảm
mạo, còn có tác dụng chữa trị ngộ độc nôn mửa, đau bụng do ăn cua cá.[1, 6]
1.11 Liều dùng
- Ngày 3 – 10 g lá và hạt, 6 – 20 g cành, dạng thuốc sắc và xông. Có thể uống nước
hãm 15 – 20 g lá tươi, hoặc thái nhỏ 10 g lá tươi trộn với cháo nóng ăn.[6]
1.12 Kiêng kỵ
- Ho khan, ho ra máu không được dùng.[6]

13
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

1.13 Các bài thuốc và chế phẩm từ lá Tía tô


1.13.1 Các bài thuốc từ Tía tô
- Lá tươi thái nhỏ với hành, ăn với cháo nóng chữa cảm cúm. Làm rau ăn hàng ngày
giúp tiêu hóa, giải cảm, giải nóng.
- Nước vắt từ lá tươi hoặc nước sắc từ lá khô (10 – 20 g) giải độc cua cá.
- Lá tươi ngâm giấm, uống mỗi lần 2 thìa cà phê trị nhức đầu, nóng lạnh, ho khò khè.
- Sâm tô ẩm: lá tía tô, nhân sâm, trần bì, chỉ xác, cát cánh, cam thảo, mộc hương, bán
hạ, can khương, tiền hồ mỗi vị 2 g, nước 600 ml. Sắc còn 200 ml, chia 3 lần uống
trong ngày. Công dụng: chữa cảm mạo, sốt, nhức đầu, đau các khớp xương.
- Tử tô giải độc thang: lá tía tô 10 g, sinh khương 8 g, sinh cam thảo 4 g, nước 600
ml. Sắc còn 200 ml, chia 3 lần uống trong ngày, uống khi thuốc còn đang nóng.
Công dụng: chữa trúng độc đau bụng do ăn phải cua cá.[1]
1.13.2 Các chế phẩm từ lá Tía tô

Hình 12: Nước tía tía tô Hình 11: Sen sấy lá tía tô Hình 10: Trà lá tía tô

Hình 13: Bột lá tía tô Hình 14: Nước sốt hương


chanh và tía tô

14
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

2 Tiêu chuẩn chất lượng trong DĐVN IV và các phương pháp tiến hành
2.1 Vi phẫu
- Biểu bì trên và dưới gồm một lớp tế bào dẹt và nhỏ. Có nhiều lỗ khí ở biểu bì dưới.
Lông tiết nằm trong những chỗ lõm của biểu bì. Lông che chở đa bào một dãy. Mô
dày nằm ở những chỗ lồi của gân giữa. Mô mềm vỏ. Bó libe – gỗ hình cung ở giữa
gân lá gồm có cung gỗ ở phía trên, cung libe ở phía dưới.
- Phiến lá gồm có mô mền giậu chứa chất màu vàng, chiếm 2/3 phiến lá ở phía trên,
mô mềm khuyết mỏng ở phía dưới.[5]
2.2 Khảo sát bột dược liệu
- Màu nâu, mùi thơm. Soi kính hiển vi thấy: lông che chở đa bào, bề mặt lấm tấm.
Lông tiết đầu đa bào, cuống rất ngắn. Mảnh biểu bì trên và dưới gồm tế bào thành
ngoằn ngoèo, có lỗ khí và lông tiết. Phiến lá gồm tế bào chứa diệp lục, có tinh thể
calci oxalat hình cầu gai nhỏ. Mảnh mạch mạng, mạch vòng, mạch xoắn.[5]
2.3 Phân tích định tính
A. Phản ứng trên bề mặt lá: Một số tế bào biểu bì chứa khối chất màu tím. Màu đỏ
xuất hiện ngay khi nhỏ lên mặt dưới lá vài giọt dung dịch acid hydrocloric 10%
(TT); hoặc khi nhỏ lên mặt dưới lá vài giọt dung dịch kali hydrocloric 5% (TT) sẽ
xuất hiện màu lục sáng, sau đó chuyển thành màu lục vàng.[5]
B. Phương pháp sắc ký lớp mỏng
- Bản mỏng: Silica gel G
- Dung môi khai triển: Dùng lớp trên của hỗn hợp dung môi gồm ether dầu hỏa ( 60
- 90oC) - ethyl acetat (19 : 1).
- Dung dịch thử: Lấy 0,7 g bột thô dược liệu vào bình cầu, thêm 250 ml nước, trộn
đều, lắp bình vào dụng cụ cất tinh dầu, tiến hành cất tinh dầu theo phương pháp 2,
Phụ lục 12.7, thêm 1,5 ml ether dầu hoả (60 - 90oC) (TT) thay cho xylen, đun sôi
nhẹ trong 2 giờ, để nguội, tách riêng phần ether dầu hoả làm dung dịch thử.
- Dung dịch đối chiếu: Lấy 0,7 g bột thô lá tía tô, tiến hành chiết tương tự như đối
với dung dịch thử.
- Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 10 µl mỗi dung dịch trên. Triển khai
sắc ký đến khi dung môi đi được khoảng 15 cm, lấy bản mỏng ra, để khô trong

15
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

không khí, phun dung dịch dinitrophenylhydrazin (TT), để yên cho đến khi hiện rõ
vết. Trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải có các vết cùng giá trị Rf và màu sắc với
các vết trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu.[5]
2.4 Phân tích định lượng
- Chiết xuất tinh dầu: lá tía tô tươi được chiết xuất với 1% w/v acid citric ở 90oC
trong 30 phút. Dịch chiết được cô đặc và đưa vào một cột mở Diaion HP2MG
(Mitsubishi Kasei Co., Tokyo, Japan). Cột này được tách từng bước một bằng
0,1% w/v acid trifluorooctetic (TFA) trong nước cất và methanol. Các phân tử
được tách ra bằng 0,1% w/v TFA chứa 20, 50 hoặc 80% v/v methanol được đem đi
đông khô và được sử dụng trong thí nghiệm.
- Điều kiện sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC): nồng độ các polyphenol (bao gồm:
acid caffeic, acid protocatecuic, leteolin và acid rosmarinic (RA)) được xác định
bằng HPLC sử dụng cột Develosil HG-5 với dung môi A (0,1% v/v TFA trong
nước cất) và dung môi B (0,1% v/v TFA trong acetonitrile), trong các điều kiện sắc
ký sau:
 Gradient tuyến tính 10 – 50% của A và B; tốc độ chảy 0,8 ml/phút; phát
hiện ở bước sóng 280 nm.[10]
Bảng 4: Thành phần của các hợp chất polyphenol có nguồn gốc từ P.frutescens.
Nồng độ w/w %
Phần 1 Phần 2 Phần 3
RA ND 10.70 40.05
Acid 0.10 0.10 ND
protocatechic ND 0.60 0.16
Acid caffeic 0.30 0.40 1.13
Luteolin
ND: not detected (không phát hiện)
2.5 Các chỉ tiêu khác
2.5.1 Độ ẩm
Không quá 13,0%.[5]

16
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

2.5.2 Tạp chất


Không quá 2%.[5]
2.5.3 Dư lượng thuốc bảo vệ thực vật
Benzen hexaclorid (BHC): không quá 0,2 ppm.[5]
2.5.4 Tro toàn phần
Không quá 9,0%.[5]
2.5.5 Tỷ lệ vụn nát
Qua rây có kích thước mắt rây 3,150 mm: không quá 5%.[5]
2.5.6 Chế biến
Thu hoạch vào mùa hạ, khi cành lá tía tô mọc xum xê, bỏ lá sâu, để riêng lá
hoặc nhánh non loại bỏ tạp chất, phơi trong bóng râm hoặc sấy nhẹ đến khô.[5]
2.5.7 Bào chế
Loại bỏ tạp chất và cành già, phun nước cho mềm, thái vụn, phơi khô.[5]
2.5.8 Bảo quản
Để nơi mát, khô.[5]
2.5.9 Tính vị, quy kinh
Tân, ôn. Vào các kinh phế, tỳ.[5]
2.5.10 Công năng, chủ trị
Giải biểu tán hàn, hành khí hoà vị, lý khí an thai. Chủ trị: Cảm mạo phong hàn,
ho, khí suyễn buồn nôn, có thai nôn mửa, chữa trúng độc cua cá.[5]
2.5.11 Cách dùng, liều lượng
Ngày dùng 5 - 9 g, dạng thuốc sắc.[5]
2.5.12 Tương kỵ
Ho khan, ho ra máu, người âm hư hàn nhiệt, hoặc nóng trong, mồ hôi ra nhiều
và không phải ngoại cảm phong hàn không nên dùng.[5]

17
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

CHƯƠNG 2
KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM
- Mẫu Tía tô (Perilla frutescens (L.) Britt) được thu hái tại ấp Hòa Khánh, xã Hòa
An, thành phố Cao Lãnh, tỉnh Đồng Tháp.
- Hái buổi sáng.
1 Mô tả thực vật
- Lá đơn, mọc đối chéo chữ thập, phiến mỏng, có lông, hình trứng rộng, đỉnh lá
nhọn, gốc tròn, kích thước 7-13 x 5-9 cm, mép lá có răng cưa nhọn, hai mặt lá
có màu xanh hoặc tím nhạt, những lá ở ngọn thường có màu tím mặt trên, khi lá
già mặt lá trở thành màu xanh, gân ở giữa có màu tím, gân bên 6 – 8 đôi. Cuống
lá dạng sợi, dài 2 – 5 cm, màu tím xanh. Đối với lá khô, phiến lá thường nhàu
nát, cuộn lại hoặc gãy, hai mặt lá đều có màu tía hoặc mặt trên màu lục, mặt
dưới màu tía, thể chất giòn. Có mùi thơm, vị hơi cay.

Hình 15: Lá mọc đối chéo hình chữ thập, lá


non màu tím.

18
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Đỉnh lá nhọn.

Mép lá có răng cưa.

Góc lá tròn.

Hình 18: Đặc điểm cảm quan lá


tía tô

Hình 17: Chiều rộng và chiều dài lá tía tô

Mặt trên Mặt dưới

Hình 16: Chiều dài cuống lá và cấu tạo mặt trên - dưới lá tía tô

19
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 19: Lá tía tô phơi khô


2 Đặc điểm vi học
2.1 Vi phẫu lá Tía tô
2.1.1 Lá
- Gân giữa lồi ít ở mặt trên, lồi nhiều ở mặt dưới. Biểu bì trên và dưới gồm 1 lớp tế
bào dẹt và nhỏ, cutin mỏng, có răng cưa rải rác, dưới chân một số lông che chở,
biểu bì phình to ra và nhô cao. Có lỗ khí, lông tiết và lông che chở. Lông che chở
to, đa bào 1 dãy từ 3-5 tế bào, thường chỉ có ở gân lá, mặt trên nhiều hơn mặt dưới.
Mô dày góc ở cạnh biểu bì tế bào hình đa giác, nhỏ. Mô mềm đạo, tế bào tròn,
không đều, chứa calci oxalat hình kim. Cung libe gỗ liên tục ở giữa, gỗ ở trên và
libe ở dưới, mô dày dưới libe, 2 bó libe gỗ phụ ở 2 bên, libe phụ ở trên và gỗ phụ ở
dưới.

20
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

1
2
3

4
5

10

Hình 20: Cấu tạo vi phẫu lá tía tô

1. Lông che chở đa bào 2. Biểu bì trên 3. Mô mềm giậu 4. Libe phụ 5. Gỗ phụ
6. Libe 1 7. Gỗ 1 8. Mô mềm đạo 9. Mô dày góc 10. Biểu bì dưới

Hình 21: Lông tiết và lông tiết hình bán nguyệt.

21
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 22: Lông che chở đa bào và tinh thể calci oxalat hình kim.

Hình 23: Lớp cutin mỏng có răng cưa và mô mềm đạo.

Hình 24: Mô dày góc và lỗ khí ở lá tía tô

22
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

libe phụ
gỗ phụ

gỗ 1

libe 1

Hình 25: Cấu tạo libe - gỗ của lá tía tô

2.1.2 Phiến lá
- Phiến lá gồm có mô mềm giậu, chiếm 2/3 phiến lá ở phía trên, mô mềm khuyết
mỏng ở phía dưới.

mô mềm giậu

mô mềm khuyết

Hình 26: Cấu tạo phiến lá

2.1.3 Cuống lá
- Cuống lá: 2 cánh lồi. Biểu bì trên và dưới gồm 1 lớp tế bào dẹt và nhỏ, cutin mỏng,
có răng cưa rải rác. Có lỗ khí, lông tiết và lông che chở. Ở cánh lồi, có mô dày góc
nhiều, những vị trí còn lại tạo thành vòng mô dày liên tục. Mô mềm đạo, tế bào đa
giác gần tròn, không đều. Cung libe gỗ chia thành 2 đoạn, gỗ ở trên và libe ở dưới,
cụm mô cứng ở trên bó libe. Ở 2 góc trên có thêm 2 bó libe gỗ phụ, libe bao bọc
gỗ, mô cứng phụ ở trên bó libe.

23
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

2
3
4

5
6

7
8

10

11

12

Hình 27: Cấu tạo vi phẫu cuống lá tía tô.


1. Lông che chở đa bào 2. Mô cứng phụ 3. Gỗ phụ 4. Libe phụ 5. Lỗ khí
6. Lông tiết 7. Cụm mô cứng 8. Gỗ 1 9. Libe 1 10. Mô mềm đạo 11. Mô dày góc
12. Biểu bì

24
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

1
1

2
2
3

Hình 28: Cấu tạo libe - gỗ Hình 28: Cấu tạo libe - gỗ phụ
cuống lá tía tô cuống lá tía tô
1. Cụm mô cứng. 1. Mô cứng phụ.
2. Gỗ 1. 2. Gỗ phụ 1.
3. Libe 1. 3. Libe phụ 1.

2.2 Bóc tách biểu bì lá Tía tô


- Lỗ khí kiểu trực bào, biểu bì dưới có các tế bào bạn uốn lượn ngoằn ngoèo hơn
biểu bì trên.

Hình 30: Lỗ khí kiểu trực bào (mặt Hình 29: Lỗ khí kiểu trực bào (mặt
dưới lá) trên lá)

25
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

2.3 Soi bột lá Tía tô


- Màu xanh đen, mùi thơm. Mảnh biểu bì gân
lá; mảnh biểu bì mang lỗ khí kiểu trực bào,
các tế bào bạn có vách uốn lượn. Lông tiết
lớn có đầu tròn, chân rất ngắn. Lông che chở
đa bào đứt gãy và có đốm lấm tấm, các mảnh
mạch xoắn, mạch vạch, mạch mạng. Tinh thể
calci oxalat hình khối, và hình cầu gai.

Hình 30: Bột lá tía tô

Hình 31: Lông che chở đa bào và đứt gãy.

Hình 32: Mạch vạch và mạch mạng.

26
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 33: Mạch xoắn và tinh thể calci oxalat hình khối.

Hình 34: Tinh thể calci oxalat hình cầu gai và biểu bì phiến lá mang
lỗ khí kiểu trực bào.

Hình 35: Lông tiết đầu đa bào, cuống rất ngắn và mảnh biểu bì gân lá.

27
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 36: Cấu tạo vi phẫu lá tía tô (vẽ tay).

Hình 37: Cấu tạo vi phẫu cuống lá tía tô (vẽ tay).

28
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

1. Lông che chở đa bào.


2. Lông tiết đầu to, chân
ngắn.
3. Mạch vạch.
4. Mạch xoắn.
5. Mảnh biểu bì mang lỗ
khí kiểu trực bào.
6. Tinh thể calci oxalat
hình khối.
7. Tinh thể calci oxalat
hình cầu gai.
8. Mảnh biểu bì gân lá.

Hình 39: Các cấu tử trong bột lá tía tô (vẽ tay).

Lỗ khí kiểu trực bào.

Hình 38: Bóc tách biểu bì lá tía tô (vẽ tay).

29
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

3 Phân tích thành phần hóa thực vật


3.1 Chiết xuất dược liệu

Mẫu thử

Ether ethylic/ sohxlet

Dịch chiết ether Bã dược liệu

Ethanol/ cách thủy

Dịch chiết cồn Bã dược liệu

Nước /cách thủy

Dịch chiết nước Bã dược liệu

Sơ đồ 2: Mô tả quy trình chiết xuất dịch chiết từ dược liệu lá Tía tô


(Perilla frutescens (L.) Britt)

- Chiết tách hỗn hợp các chất trong nguyên liệu thực vật thành 3 giai đoạn theo độ
phân cực tăng dần: kém phân cực, phân cực trung bình và phân cực mạnh bằng
cách chiết lần lượt với các dung môi: ether, ethanol và nước. Sau đó xác định các
nhóm hợp chất trong dịch chiết bằng các phản ứng đặc trưng hoặc bằng sắc ký lớp
mỏng.
- Trong trường hợp phản ứng bị ảnh hưởng nhiều bởi chlorophyll, có thể loại
chlorophyll ra khỏi dịch chiết bằng cách đun nóng với một lượng nhỏ than hoạt
tính và lọc lấy dịch chiết để thực hiện phản ứng.

30
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

3.2 Phân tích sơ bộ thành phần hóa học


3.2.1 Dịch chiết ether
- Định tính carotenoid: Lấy khoảng 5 ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc hơi nhẹ
tới cắn. Thêm vào cắn vài giọt H2SO4 đậm đặc. Dung dịch có màu xanh dương
đậm hay màu xanh lục ngả sang màu xanh dương : Có carotenoid.

Hình 42:Kết quả định tính carotenoid


Kết luận : có carotenoid trong lá tía tô ( + ).
- Định tính triterpenoid: Lấy khoảng 5 ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc hơi tới
cắn. Hòa tan cắn với 0,5 ml anhydrid acetic rồi thêm vào dung dịch 0,5 ml
chloroform. Chuyển dung dịch vào một ống nghiệm nhỏ, khô. Dùng pipet Pasteur
thêm cẩn thận 1-2 ml H2SO4 đđ lên thành ống nghiệm để nghiêng cho acid chảy
xuống đấy ống nghiệm. Nơi tiếp xúc giữa 2 lớp dung dịch có màu đỏ nâu hay đỏ
đến tím, lớp dung dịch phía trên dần dần chuyển thành màu xanh lục hay tím : Có
triterpenoid.

màu xanh lục


màu đỏ nâu

Hình 43: Kết quả định tính triterpenoid.


Kết luận: có triterpenoid trong lá tía tô ( + ).

31
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

- Định tính tinh dầu: Lấy khoảng 5 ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc hơi tới cạn.
Nếu cắn có mùi thơm nhẹ, thêm vào cắn một ít cồn cao độ rồi lại bốc hơi cho đến
cắn. Cắn có mùi thơm nhẹ đặc trưng : Có tinh dầu.

Hình 44: Kết quả định tính tinh dầu.


Kết luận: Có tinh dầu trong lá tía tô (+).
3.2.2 Dịch chiết cồn
- Định tính flavonoid: Lấy khoảng 5 ml dịch cồn cho vào chén sứ, bốc hơi còn
khoảng 2 ml và gạn dịch cồn vào 1 ống nghiệm nhỏ. Thêm vào dung dịch một ít
bột magiesi kim loại và 0,5 ml HCl đđ. Nếu dung dịch có màu từ hồng tới đó : Có
flavonoid

Dịch chiết cồn đã cắn Dịch cồn có magie DD có màu hồng đỏ

Hình 45: Kết quả định tính flavonoid trong dịch chiết cồn.
Kết luận: Có flavonoid trong lá tía tô (+).

32
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

- Định tính các chất khử: Lấy 5 ml dịch chiết cồn cho vào chén sứ, bốc hơi dịch
cồn đến cắn. Hòa cắn với 3 ml nước cất trên bếp cách thủy, để nguội và lọc qua
giấy lọc. Thêm vào dịch lọc 0.5 ml dung dịch Fehling A và 0.5 ml dung dịch
Fehling B. Đun cách thủy 5 phút. Nếu có kết tủa đỏ gạch dưới đáy ống nghiệm: Có
các hợp chất khử (chủ yếu là đường khử).

Kết tủa đỏ gạch dưới


đáy ống nghiệm

Hình 46: Kết quả định tính chất khử.


Kết luận: Có các hợp chất khử trong lá tía tô (+).
3.2.3 Dịch chiết nước
- Định tính anthocyanosid: Lấy 1 ml dịch chiết nước cho vào 1 ống nghiệm nhỏ.
Thêm 2 - 3 giọt dung dịch acid hydrocloric 10%. Nếu dung dịch có màu hồng đỏ
tới đỏ và chuyển sang màu xanh khi kiềm hóa bằng dung dịch natri hydroxid 10%:
Có anthocyanosid.
2 - 3 giọt HCl 10% Thêm NaOH 10%

Dịch chiết nước DD có màu hồng đỏ DD có màu xanh


Hình 47: Kết quả định tính anthocyanosid.

33
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Kết luận: Có anthocyanosid trong lá tía tô (+).


- Định tính proanthocyanidin: Lấy 5 ml dịch chiết nước vào ống nghiệm.
Thêm 2 ml dung dịch acid hydrocloric 10% và đun trong bếp cách thủy 10
phút. Nếu dung dịch có màu hồng đỏ tới đỏ: Có proanthocyanidin.
2ml HCl 10%

Dịch chiết nước DD có màu hồng đỏ

Hình 48: Kết quả định tính proanthocyanidin.


Kết luận: Có proanthocyanidin trong lá tía tô (+).
- Định tính polyphenol: Lấy 0.5 ml dịch chiết cho vào 1 ống nghiệm nhỏ. Thêm 2 -
3 giọt thuốc thử FeCl3 5%, lắc đều. Nếu dung dịch có màu xanh đen hay xanh rêu:
Có polyphenol.
2 - 3 giọt FeCl3 5%

Dịch chiết nước DD có màu xanh đen


Hình 49: Kết quả định tính polyphenol.
Kết luận: Có polyphenol trong lá tía tô (+).

34
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

- Định tính flavonoid: Lấy khoảng 5 ml dịch chiết nước cho vào chén sứ, bốc hơi
tới cắn. Hòa tan cắn trong khoảng 2 ml cồn 25%, lọc vào 1 ống nghiệm nhỏ. Thêm
vào dung dịch một ít bột magnesi kim loại và 0.5ml HCl đậm đặc (phản ứng
cyanidin). Nếu dung dịch có màu hồng đỏ tới đỏ: Có flavonoid (flavanon,
flavanonol, flavon, flavonol).

Dịch chiết nước Dịch nước có magiesi DD có màu hồng đỏ

Hình 50: Kết quả định tính flavonoid trong dịch chiết nước.
Kết luận: Có flavonoid trong lá tía tô (+).

35
BẢNG TÓM TẮT KẾT QUẢ PHÂN TÍCH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA THỰC VẬT

Kết quả định tính trên các dịch chiết


Kết quả
Thuốc thử Dịch Dịch chiết cồn Dịch chiết nước
Nhóm hợp chất Phản ứng dương tính định tính
Cách thực hiện chiết
Không thủy phân Không thủy phân chung
ete
Chất béo Nhỏ dd lên giấy Vết trong mờ - Không có
Carotenoid Carr-Price Xanh→ đỏ
H2SO4 Xanh dương hay lục→ xanh dương + Có
Tinh dầu Bốc hơi tới cắn Có mùi thơm + Có
Triterpenoid tự do Liebermann-Burchard Đỏ nâu-tím, lớp trên có màu xanh lục + Có
Alkaloid T/thử chung alkaloid Kết tủa - - - Không có
Coumarin Phát quang trong kiềm Phát quang mạnh hơn - - Không có
Anthraglycosid KOH 10% Dd kiềm có màu hồng tới đỏ - Không có
Flavonoid Mg/HCl đđ Dd có màu hồng tới đỏ - + + Có
Glycosid tim Thuốc thử vòng lacton Tím
T/thử đường 2-desoxy Đỏ mận
Anthocyanosid HCl Đỏ - + Nghi ngờ
KOH Xanh - + Nghi ngờ
Proanthocyanidin HCl/to Đỏ - + Nghi ngờ
Tannin Dd FeCl3 Xanh rêu hay xanh đen (Polyphenol) - + Nghi ngờ
Dd gelatin muối Tủa bông trắng (Tannin) - - Không có
Triterpenoid thủy
Liebermann-Burchard Đỏ nâu-tím, lớp trên có màu xanh lục
phân
Saponin Tt Liebermann Có vòng tím nâu
Lắc mạnh dd nước - - Không có
Acid hữu cơ Na2CO3 Sủi bọt - - Không có
Chất khử T/thử Fehling Tủa đỏ gạch + - Nghi ngờ
Hợp chất polyuronic Pha loãng với cồn 90% Tủa bông trắng – vàng nâu - Không có
(-) Không có (±) Nghi ngờ (+) Có ít (++) Có (+++) Có nhiều (++++) Có rất nhiều
Ghi chú: có thể phản ứng nhưng không thực hiện không có mặt của nhóm hợp chất trong dịch chiết.

36
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

3.3 Định tính tinh dầu bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng
3.3.1 Chiết tinh dầu lá tía tô

Nguyên liệu lá tía tô

Phơi khô nguyên liệu

Xay nguyên liệu

Tinh chiết tinh dầu bằng phương pháp cất kéo theo hơi nước
 DM: nước.
 DM hòa tan tinh dầu: 1 ml ether dầu hỏa (60oC - 90oC).
 Tỉ lệ nguyên liệu: 50 gram.
 Tỉ lệ dung môi: nước cách mặt nguyên liệu 2 - 3 cm.
 Nhiệt độ chiết: 60 - 70°C.
 Thời gian chiết: 3 giờ.

Rút tinh dầu

Loại nước bằng Na2SO4

Sản phẩm tinh dầu lá tía tô

Sơ. đồ 3: Mô tả quy trình chiết tinh dầu lá tía tô (Perilla Frutescens


(L.) Britt) bằng phương pháp cất kéo theo hơi nước

37
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Hình 51: Hệ thống chiết tinh dầu. Hình 52: Sản phẩm tinh dầu
lá tía tô.

3.3.2 Định tính tinh dầu lá tía tô bằng sắc ký lớp mỏng
- Dung môi khai triển: Ether dầu hỏa ( 60 - 90oC) : Ethyl acetat (16 : 4) và 2 giọt
amoniac, bão hòa dung môi khoảng 30 phút.
- Bản sắc ký: silica gel tráng sẵn F254 (Merck), 10 cm x 2,5 cm.
- Phát hiện bằng: soi đèn UV ở bước sóng 254 nm, sau đó phun dung dịch vanillin
1% trong acid sulfuric (TT), sấy bản mỏng ở 110oC đến khi hiện rõ vết.

Rf = 0,73

Rf= 0,52

Rf= 0,4
Soi đèn UV
254 nm.
Rf= 0,18

38
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

4 Độ ẩm của bột dược liệu lá tía tô


- Sử dụng cân sấy ẩm bằng hồng ngoại OHAUS MB23 (110g x 0.01g/0.1%) để
xác định độ ẩm dược liệu.
- Độ ẩm bột dược liệu đo được là: 7,6 %.

Hình 53: Cân sấy ẩm hồng ngoại OHAUS MB23 và kết quả đo độ ẩm
bột dược liệu.

39
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

Chương 3
XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN DƯỢC LIỆU LÁ TÍA TÔ

1 Định nghĩa
- Tên khác: tử tô, tử tô tử, tô ngạnh.
- Tên khoa học: Perilla frutescens (L.) Britt thuộc họ Hoa môi (Lamiaceae)
2 Đặc điểm cảm quan
- Lá đơn, mọc đối chéo chữ thập, phiến mỏng, có lông, hình trứng rộng, đỉnh lá
nhọn, gốc tròn, kích thước 7-13 x 5-9 cm, mép lá có răng cưa nhọn, hai mặt lá có
màu xanh hoặc tím nhạt, những lá ở ngọn thường có màu tím mặt trên, khi lá già
mặt lá trở thành màu xanh, gân ở giữa có màu tím, gân bên 6 – 8 đôi. Cuống lá
dạng sợi, dài 2 – 5 cm, màu tím xanh. Đối với lá khô, phiến lá thường nhàu nát,
cuộn lại hoặc gãy, hai mặt lá đều có màu tía hoặc mặt trên màu lục, mặt dưới màu
tía, thể chất giòn. Có mùi thơm, vị hơi cay.
3 Đặc điểm vi phẫu
3.1.1 Lá
- Gân giữa lồi ít ở mặt trên, lồi nhiều ở mặt dưới. Biểu bì trên và dưới gồm 1 lớp tế
bào dẹt và nhỏ, cutin mỏng, có răng cưa rải rác, dưới chân một số lông che chở,
biểu bì phình to ra và nhô cao. Có lỗ khí, lông tiết và lông che chở. Lông che chở
to, đa bào 1 dãy từ 3-5 tế bào, thường chỉ có ở gân lá, mặt trên nhiều hơn mặt dưới.
Mô dày góc ở cạnh biểu bì tế bào hình đa giác, nhỏ. Mô mềm đạo, tế bào tròn,
không đều, chứa calci oxalat hình kim. Cung libe gỗ liên tục ở giữa, gỗ ở trên và
libe ở dưới, mô dày dưới libe, 2 bó libe gỗ phụ ở 2 bên, libe ở trên và gỗ ở dưới.
3.1.2 Phiến lá
- Phiến lá gồm có mô mềm giậu, chiếm 2/3 phiến lá ở phía trên, mô mềm khuyết
mỏng ở phía dưới.
3.1.3 Cuống lá
- Cuống lá có 2 cánh lồi. Biểu bì trên và dưới gồm 1 lớp tế bào dẹt và nhỏ, cutin
mỏng, có răng cưa rải rác. Có lỗ khí, lông tiết và lông che chở. Ở cánh lồi, có mô
dày góc nhiều, những vị trí còn lại tạo thành vòng mô dày liên tục. Mô mềm đạo, tế

40
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

bào đa giác gần tròn, không đều. Cung libe gỗ chia thành 2 đoạn, gỗ ở trên và libe
ở dưới,cụm mô cứng ở trên bó libe. Ở 2 góc trên có thêm 2 bó libe gỗ phụ, libe bao
bọc gỗ, mô cứng phụ ở trên bó libe.
4 Đặc điểm bột lá tía tô
- Màu xanh đen, mùi thơm. Mảnh biểu bì gân lá, mảnh biểu bì mang lỗ khí kiểu trực
bào, các tế bào bạn có vách uốn lượn. Lông tiết lớn có đầu tròn, chân rất ngắn.
Lông che chở đa bào đứt gãy và có đốm lấm tấm, các mảnh mạch xoắn, mạch vạch,
mạch mạng. Tinh thể calci oxalat hình khối và hình cầu gai.
5 Đặc điểm bóc tách biểu bì lá tía tô
- Lỗ khí kiểu trực bào, biểu bì dưới có các tế bào bạn uốn lượn ngoằn ngoèo hơn
biểu bì trên.
6 Định tính tinh dầu lá tia tô bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng
- Lấy khoảng 50 g lá tía tô phơi khô cất lấy tinh dầu bằng phương pháp cất kéo theo
hơi nước, thêm 1 ml ether dầu hỏa (60 - 90oC), đun sôi nhẹ trong 3 giờ, để nguội,
tách riêng phần ether dầu hỏa và loại nước bằng Na2SO4 khan. Tinh dầu thu được
bảo quản trong lọ kín.
- Bản mỏng: bản mỏng sắc ký silica gel tráng sẵn.
- Dung môi khai triển: hỗn hợp dung môi gồm ether dầu hỏa ( 60 - 90oC) - ethyl
acetat (16 : 4) và 2 giọt dung dịch amoniac.
- Cách tiến hành: Chấm vết lên bản mỏng và triển khai sắc ký đến khi dung môi đi
được khoảng 9 cm, lấy bản mỏng ra, để khô trong không khí, soi vết bằng đèn UV
ở bước sóng 254 nm, sau đó phun dung dịch vanillin 1% trong acid sulfuric (TT),
sấy bản mỏng ở 110oC đến khi hiện rõ vết. Trên sắc ký đồ có các vết tách riêng biệt
và ghi nhận lại Rf.
7 Độ ẩm bột dược liệu lá tía tô
- Sử dụng cân sấy ẩm bằng hồng ngoại OHAUS MB23 (110g x 0.01g/0.1%) để xác
định độ ẩm dược liệu.
- Dùng 10 gram dược liệu khô đã cắt nhỏ.
- Độ ẩm bột dược liệu không quá 13.0 %.

41
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

CHƯƠNG 4
NHẬN XÉT

Trên đây là tiêu chuẩn xây dựng cho lá tía tô Perilla frutescens (L.) dựa trên thực
nghiệm được thực hiện tại phòng thực tập Dược Liệu - Bộ môn Dược Liệu - Khoa
Dược - Trường Đại học Nam Cần Thơ. Căn cứ vào kết quả thực nghiệm có thể thấy
được tiêu chuẩn trên có những đặc điểm sau:
- Về mô tả cảm quan: tiêu chuẩn đã đưa ra những đặc điểm thực vật đặc trưng của
lá tía tô, góp phần nhận dạng và chống nhầm lẫn với các dược liệu khác khi thu
mua cũng như sử dụng.
- Về vi phẫu: so với mô tả trong Dược điển Việt Nam IV thì trong quá trình thực
nghiệm đã phát hiện thêm một số bộ phận mới ở lá đồng thời vi phẫu cuống lá
và bóc tách biểu bì lá tía tô nhằm bổ sung vào tiêu chuẩn xây dựng dược liệu,
bởi các đặc điểm này góp phần phong phú thêm các tiêu chuẩn kiểm nghiệm
dược liệu.
 Lá: Bổ sung thêm các đặc điểm như tinh thể calci oxalat hình kim, lớp
cutin mỏng có răng cưa rải rác, bó libe gỗ phụ, lông che chở nằm nhiều ở
mặt trên gân lá.
 Cuống lá: Bổ sung các đặc điểm như trên phần xây dựng dược liệu lá tía
tô đã đề cập đến.
- Về soi bột: Các cấu tử đặc trưng của lá tía tô đều được tìm thấy. Hơn nữa trong
quá trình thực nghiệm, đã phát hiện thêm một số cấu tử sau: mảnh biểu bì gân
lá, mảnh biểu bì mang lỗ khí kiểu trực bào, các tế bào bạn có vách uốn lượn,
tinh thể calci oxalat hình khối. Với các phương pháp đơn giản, dễ thực hiện,
bước đầu góp phần đánh giá chất lượng của mẫu bột dược liệu khô, chống
nhầm lẫn và giả mạo.
- Về định tính tinh dầu bằng sắc ký lớp mỏng: dựa trên phần định tính bằng
SKLM trong Dược điển Việt Nam IV và sau khi khảo sát qua nhiều hệ dung
môi cũng như với nhiều tỉ lệ khác nhau thì nhận thấy rằng hệ dung môi ether
dầu hỏa : ethyl acetat (16:4) cho vết tách rõ và đẹp hơn so với các hệ còn lại.

42
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

- Về độ ẩm: so với Dược điển Việt Nam IV, tiêu chuẩn đưa ra yêu cầu thử độ ẩm
dược liệu bằng phương pháp cân sấy bằng hồng ngoại giúp cho việc thực hiện
được nhanh chóng, dễ làm và đạt độ chính xác.

43
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

TÀI LIỆU THAM KHẢO

Tài liệu tiếng việt

[1]. GS.TS Đỗ Tất Lợi (2004), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học,
Hà Nội, trang 648 – 649.
[2]. PGS. Võ Văn Chi (1991), Cây thuốc An Giang, NXB Ủy ban khoa học và kỹ
thuật An Giang, trang 529 – 530.
[3]. Trương Thị Đẹp (2007), Thực vật dược, NXB Giáo dục, Hà Nội, trang 90 – 100.
[4]. Bộ môn Dược liệu, trường Đại học Nam Cần Thơ (2017), “Giáo trình Phương
pháp nghiên cứu Dược liệu”.
[5]. “Dược điển Việt Nam IV”, chuyên luận Tía tô.
[6]. DSCKII. Đỗ Huy Bích (2004), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, tập
2, NXB Khoa học và kỹ thuật, Hà Nội, trang 943 - 949.
[7]. Nguyễn Thị Hoàng Lan, Bùi Quang Thuật, Lê Danh Tuyên, Ngô Thị Huyền
Trang, Đỗ Thị Trang (2014), “Nghiên cứu công nghệ trích ly tinh dầu từ lá Tía tô”,
Tạp chí Khoa học và Phát triển, tập 12, số 3, trang 404 – 411.
[8]. Tống Minh Tâm, Đỗ Thị Phương Khanh, Huỳnh Ngọc Trinh (2015). “Mô hình
viêm tai chuột trắng bằng dầu ba đậu - Khảo sát tác động kháng viêm của cao chiết từ
lá tía tô (Perilla frutescens L.), Tạp chí Dược học, tập 55, số 12.
[9]. Nguyen Thi Hoang Lan, Le Danh Tuyen, Bui Quang Thuat (2016). “Nghiên cứu
khả năng sử dụng tinh dầu lá tía tô trong bảo quản thịt lợn”. Tạp chí Khoa học Nông
nghiệp Việt Nam, tập 14, số 7, trang 1052 - 1059.
Tài liệu tiếng anh
[10]. Naomi Osakabe, Akiko Yasuda, Midori Natsume, Toshikazu Yoshikawa (2004),
“Rosmarinic acid inhibits epidermal inflammatory responses: Anticarcinogenic effect
of Perilla frutescens extract in the murine two-stage skin model”, Carcinogenesis, 25,
4, p 549 – 557.

44
Xây dựng tiêu chuẩn dược liệu - Lá Tía tô

[11]. Hiroshi Ueda, Chikako Yamazaki, and Masatoshi Yamazaki (2002), “Luteolin as
an Anti-inflammatory and Anti-allergic Constituent of Perilla frutescens”, Biological
and Pharmaceutical Bulletin, 25, 9, p 1197 – 1202.
[12]. Norihiro Banno, Toshihiro Akihisa, Harukumi Tokuda, Ken Yasukawa, Hiroshi
Higashihara, Motohiko Ukiya, Kenji Watanabe, Yumiko Kimura, Jun-Ichi Hasegawa,
And Hoyoku Nishino (2004), “ Triterpene Acids from the Leaves of Perilla frutescens
and Their Anti-inflammatory and Antiumor-promoting Effects”, Bioscience,
Biotechnology, and Biochemistry, 68, 1, p 85-90.
[13]. Linghua Meng 1,2,3, Yves F. Lozano 1,*, Emile M. Gaydou 2 and Bin Li 3
(2009), “Antioxidant Activities of Polyphenols Extracted from Perilla
frutescens Varieties”, Molecules, 14, 1, p 133-140.
[14]. Osakabe, N., Takano, H., Sanbongi, C., Yasuda, A., Yanagisawa, R., Inoue, K.
I., & Yoshikawa, T. (2004). “Anti‐inflammatory and anti‐allergic effect of rosmarinic
acid (RA); inhibition of seasonal allergic rhinoconjunctivitis (SAR) and its mechanism”.
Biofactors, 21(1‐4), 127-131.
[15]. Takano, H., Osakabe, N., Sanbongi, C., Yanagisawa, R., Inoue, K. I., Yasuda, A.,
… & Yoshikawa, T. (2004). “Extract of Perilla frutescens enriched for rosmarinic
acid, a polyphenolic phytochemical, inhibits seasonal allergic rhinoconjunctivitis in
humans”. Experimental Biology and Medicine, 229, 3, 247-254.
[16]. Ueda, H., Yamazaki, C., & Yamazaki, M. (2003). “Inhibitory effect of Perilla
leaf extract and luteolin on mouse skin tumor promotion”. Biological and
pharmaceutical bulletin, 26, 4, 560-563.

Tài liệu tham khảo trên web


[17]. http://ydvn.net/contents/alphabet/93.index.html.
[18]. https://sites.google.com/site/raurungvietnam/rau-than-thao-dhung/cay-tia-to.
[19]. http://vi.m.wikipedia.org/wiki.

45

You might also like