Cơ hội và thách thức trong việc xử lý Cơ hội và thách thức trong việc xử lý

lignocellulose tạo sp acid lactic.

Hoàn:
Hoàn:
tổng quan cơ chất
tổng quan cơ chất
so sánh: 4 nguồn cơ chất
so sánh: 4 nguồn cơ chất
Cụ thể lignocellulose: bảng so sánh=> lõi ngô cao
Cụ thể lignocellulose: bảng so sánh=> lõi ngô
quy trình xử lý về bã ngô
cao
Sp phụ
quy trình xử lý về bã ngô
Pp lên men
Sp phụ
Pp lên men
Highlights:
- Challenges for efficient production of optically
Điểm nổi bật:
pure lactic acid are highlighted.
- Những thách thức để sản xuất hiệu quả axit
- Robust microbial lactic acid producers are
lactic tinh khiết.
isolated and developed.
- Các chủng vi sinh vật sản xuất axit lactic
- Fermentation scheme affect lactic acid
mạnh mẽ được phân lập và phát triển.
concentration and productivity.
- Sơ đồ lên men ảnh hưởng đến nồng độ và
- Metabolic engineering improves lactic acid
năng suất axit lactic.
concentration, yield and productivity.
- Kỹ thuật trao đổi chất cải thiện nồng độ axit
- Genome shuffling overcomes several obstacles
lactic, năng suất và hiệu suất.
in the lactic acid production process.
- Đột biến gen khắc phục một số trở ngại trong
quá trình sản xuất axit lactic.
1. Giới thiệu
1-Introduction
2- Hạn chế và thách thức trong sản xuất axit
2- Limitations and challenges in microbial lactic lactic vi sinh vật
acid production
2.1 Việc sử dụng carbohydrate thực phẩm
2.1 The use of food carbohydrates as substrates làm cơ chất
2.2 Indirect utilization of polymeric sugars => lignocelluse.
(cellulose and xylan)
2.2 Sử dụng gián tiếp các loại đường polymer
2.3 Sensitivity to inhibitory compounds formed (cellulose và xylan)
during treatment of lignocellulosic biomass
2.4 Decreased lactic acid concentration due to
substrate inhibition
2.5 Decreased lactic acid yield due to the
formation of by products
2.6 Inefficient utilization of mixed sugars
2.7 Decreased lactic acid productivity due to end
product inhibition
2.8 Low pH inhibition and increased use of
neutralizing agents
2.9 Contamination due to the mesophilic nature of
most lactic acid producers
2.10 Decreased optical purity of lactic acid
3. Concluding remarks.
4. References
Lactic acid (LA) is a valuable chemical platform
that has extensive applications in the food,
cosmetics, textiles, pharmaceutical, and chemical
industries. Demand for LA has grown dramatically
in recent years, owing to its great potential as a
building block for the production of poly-lactic
acid (PLA) materials, which are environmentally
friendly biodegradable agro based alternatives to
petroleum-based plastics (AbdelRahman et al.,
2013a). Global LA and PLA demands were
estimated to be 714.2 and 360.8 kilo tons in 2013,
and these are expected to grow annually by 15.5%
=> chủng đột biến
2.3 Nhạy cảm với các hợp chất ức chế hình
thành trong quá trình xử lý cơ chất
lignocellulose.
=> quá trình xử lý cơ chất bã ngô
2.4 Giảm nồng độ axit lactic do ức chế cơ
chất.
2.5 Sản lượng axit lactic giảm do sự hình
thành của sản phẩm phụ.
2.6 Sử dụng không hiệu quả các loại đường hỗn
hợp
2.7 Giảm năng suất axit lactic do ức chế sản
phẩm cuối cùng.
2.8 Ức chế do pH thấp và tăng sử dụng các chất
trung hòa.
2.9 Độ tinh sạch giảm do bản chất ưa ấm của
hầu hết các chủng sản xuất axit lactic
2.10 Giảm độ tinh khiết quang học của axit
lactic
3. Nhận xét kết luận.
4. Tài liệu tham khảo
Lactic acid (LA) là một sản phẩm hóa học có
giá trị, có ứng dụng rộng rãi trong các ngành
công nghiệp thực phẩm, mỹ phẩm, dệt may,
dược phẩm và hóa chất. Nhu cầu về LA đã tăng
mạnh trong những năm gần đây, nhờ tiềm năng
lớn của nó như là nguyên liệu để sản xuất vật
liệu axit poly-lactic (PLA), là chất thay thế
nông nghiệp có thể phân hủy sinh học thân
thiện với nhựa dựa trên dầu mỏ (AbdelRahman
et al. , 2013a). Nhu cầu LA và PLA toàn cầu
được ước tính là 714,2 và 360,8 tấn trong năm
and 18.8% to reach 1,960.1 and 1,205.3 kilo tons,
respectively by 2020
(http://www.grandviewresearch.com/press-
release/global-lactic-acid-and-poly-lacticacid-
market).
Optically pure LA (L- or D-isomer) is more
valuable than racemic DL-LA, and each form has
specific applications (Grabar et al., 2006). In
addition, high optical purity is a prerequisite for
synthesis of poly-L-LA and poly-D-LA. The
physical properties of PLA can be modulated for
specific purposes by controlling the ratio of poly-
L-LA and poly-D-LA, and DL-LA is not suitable
for PLA production for use in the food, drink, and
pharmaceutical industries, because D-LA can
cause metabolic problems and is toxic to humans
(Jem et al., 2010). Although LA can be produced
by chemical synthesis or microbial fermentation,
optically pure LA can be only produced by
microbial fermentation processes, depending on
the selected microbial strain, while chemical
synthesis generates racemic DL-LA. Microbial
fermentation processes have additional advantages
in that they utilize renewable substrates, and
require mild production conditions and low energy
consumption, in comparison with petroleum-based
chemical synthesis of LA (Reddy et al., 2015).
However, more cost-effective production of
optically pure LA is needed to meet the current
huge demand. Fermentative LA production is
currently driven by lactic acid bacteria (LAB),
Bacilli, and some genetically modified strains,
including Escherichia coli and Corynebacterium
(Abdel-Rahman et al., 2013b). In addition, refined
sugars and starch are widely used for commercial
LA production, which competes with food
resources and feed supply. Therefore, alternative
inexpensive, non-food substrates, such as
lignocellulosic biomass are recommended for
2013, và những dự kiến này sẽ tăng hàng năm
15,5% và 18,8% để đạt 1.960,1 và 1.205,3 tấn,
tương ứng vào năm 2020
Về mặt quang học LA (L- hoặc D-isomer) có
giá trị cao hơn so với DL-LA, và mỗi dạng có
các ứng dụng cụ thể (Grabar et al., 2006).
Ngoài ra, độ tinh khiết quang học cao là điều
kiện tiên quyết để tổng hợp poly-L-LA và poly-
D-LA. Các tính chất vật lý của PLA có thể
được điều chỉnh cho các mục đích cụ thể bằng
cách kiểm soát tỷ lệ poly-L-LA và poly-D-LA,
và DL-LA không phù hợp để sản xuất PLA để
sử dụng trong các ngành công nghiệp thực
phẩm, đồ uống và dược phẩm, bởi vì D-LA có
thể gây ra các vấn đề về trao đổi chất và gây
độc cho con người (Jem et al., 2010). Mặc dù
LA có thể được sản xuất bằng phương pháp
tổng hợp hóa học hoặc lên men vi sinh vật, LA
tinh khiết về mặt quang học chỉ có thể được
tạo ra bởi các quá trình lên men vi sinh vật,
tùy thuộc vào chủng vi sinh vật được chọn,
trong khi tổng hợp hóa học tạo ra sp DL-LA.
Các quá trình lên men vi sinh vật có những
lợi thế bổ sung ở chỗ chúng sử dụng các cơ
chất có thể tái sử dụng và yêu cầu điều kiện
sản xuất đơn giản và tiêu thụ năng lượng
thấp, so với tổng hợp hóa học dựa trên dầu
mỏ của LA (Reddy et al., 2015). Tuy nhiên,
việc sản xuất LA tinh khiết hiệu quả hơn về
mặt chi phí là cần thiết để đáp ứng nhu cầu
lớn hiện nay. Lên men LA hiện đang được sản
xuất bởi vi khuẩn lactic (LAB), Bacilli và một
số chủng biến đổi gen, bao gồm Escherichia
coli và Corynebacterium (Abdel-Rahman et
al., 2013b). Ngoài ra, đường tinh chế và tinh bột
được sử dụng rộng rãi cho sản xuất LA thương
effective fermentation (Kuo et al., 2015). mại, cạnh tranh với nguồn thực phẩm và nguồn
However, the use of these materials requires cung cấp thức ăn. Do đó, các cơ chất phi thực
pretreatments that may produce mixed sugars and phẩm rẻ tiền thay thế, như sinh khối
unwanted compounds (e.g., furfural, 5- lignocellulose được khuyến nghị để lên men
hydroxymethylfurfural, and some organic acids) hiệu quả (Kuo et al., 2015). Tuy nhiên, việc sử
that are inhibitory to the production strain dụng các vật liệu này đòi hỏi tiền xử lý có thể
(Jönsson and Martin, 2016). tạo ra đường hỗn hợp và các hợp chất không
mong muốn (ví dụ: furfural, 5-
hydroxymethylfurfural và một số axit hữu cơ)
gây ức chế cho chủng sản xuất (Jönsson và
Martin, 2016).
The effective utilization of mixed sugars can be
hindered by carbon catabolite repression (CCR), Việc sử dụng hiệu quả các loại đường hỗn hợp
which is an issue for most microbial producers. In có thể bị cản trở bởi sự ức chế dị hóa carbon
addition, the sugar mixtures generally contain (CCR), đây là một vấn đề đối với hầu hết các
significant amounts of pentoses, which cannot be nhà sản xuất vi sinh vật. Ngoài ra, hỗn hợp
fermented by the majority of producer strains. đường thường chứa một lượng pentose đáng kể,
Even if pentoses can be utilized, LA producers không thể lên men bởi phần lớn các chủng sản
ferment pentose heterofermentatively (heterolactic xuất. Ngay cả khi pentose có thể được sử dụng,
acid fermentation), which results in the formation các chủng sản xuất LA sẽ lên men pentose dị
of by-products, such as acetic acid and ethanol hóa (lên men axit dị vòng), dẫn đến sự hình
which decrease the LA yield (Abdel-Rahman et thành các sản phẩm phụ, như axit axetic và
al., 2015b). Decreased optical purity of LA may ethanol làm giảm sản lượng LA (Abdel-
also occur during fermentation, either owing to the Rahman et al., 2015b). Độ tinh khiết quang học
characteristics of the production strain itself or as a
của LA giảm cũng có thể xảy ra trong quá trình
result of a change in fermentation conditions (Kuo lên men, do các đặc tính của chính chủng sản
et al., 2015). Moreover, the majority of microbial xuất hoặc là kết quả của sự thay đổi trong điều
producers are mesophilic or neutrophilic, and kiện lên men (Kuo et al., 2015). Hơn nữa, phần
therefore grow in conditions that facilitate the lớn các chủng sản xuất vi sinh vật là mesophilic
survival of common contaminating organisms (ưa ấm) hoặc neutrophilic (ưa pH trung tính), và
which negatively affect the overall fermentation do đó phát triển trong điều kiện tạo điều kiện
process (Abdel Rahman et al., 2015a). All of these cho sự sống của các sinh vật gây nhiễm phổ
issues represent major obstacles and challenges biến ảnh hưởng tiêu cực đến quá trình lên men
that need to be overcome in order to meet the tổng thể (Abdel Rahman et al., 2015a). Tất cả
ultimate objective of enabling cost-effective những vấn đề này đại diện cho những trở ngại
fermentative production of optically pure LA. và thách thức lớn cần phải vượt qua để đáp ứng
Some of the obstacles are illustrated in Fig.1. mục tiêu cuối cùng là cho phép sản xuất lên
men hiệu quả chi phí của LA tinh khiết quang
The main objective of this review is to address and
học. Một số trở ngại được minh họa trong hình
discuss the problems associated with microbial LA
1.
production. Possible solutions and opportunities to
overcome these challenges, using fermentation
techniques or metabolic engineering approaches,
are introduced, with an ultimate goal of improving
the LA fermentation process to achieve high LA
concentration, yield, and productivity.
2- Limitations and challenges in microbial lactic
acid production
In this section, several limitations and drawbacks
of current microbial LA fermentation processes
will be introduced. This includes the use of food
carbohydrates as substrates, indirect utilization of
polymeric sugars (cellulose and xylan), sensitivity
to inhibitory compounds formed during treatment
of lignocellulosic biomass, decreased LA
concentration due to substrate inhibition,
decreased LA yield due to the formation of by-
products, inefficient utilization of mixed sugars,
decreased LA productivity due to end product
inhibition, low pH inhibition and increased use of
neutralizing agents, contamination due to the
mesophilic nature of most LA producers, and
decreased optical purity. The opportunities to
overcome these limitations will be discussed.
Decreased lactic acid yield due to the formation
of by-products
Glucose and xylose are the major sugar
constituents of lignocellulosic biomass materials.
Most LA producers, including LAB, utilize hexose
(glucose) homofermentatively via the EMP- or
pentose phosphate (PP)-pathways, yielding only
LA as a final product (Abdel-Rahman et al.,
2013a). However, some LA producers utilize
hexoses heterofermentatively. In contrast, pentose
sugars (e.g., xylose and arabinose) are metabolized
heterofermentatively via the phosphoketolase
(PK)-pathway by the majority of LA producers
Mục tiêu chính của đánh giá này là giải quyết
và thảo luận về các vấn đề liên quan đến sản
xuất LA của vi sinh vật. Các giải pháp khả thi
và cơ hội để vượt qua những thách thức này, sử
dụng các kỹ thuật lên men hoặc phương pháp
trao đổi chất, được giới thiệu, với mục tiêu cuối
cùng là cải thiện quá trình lên men LA để đạt
được nồng độ, năng suất và năng suất LA cao.
2- Hạn chế và thách thức trong sản xuất axit
lactic vi sinh vật
Trong phần này, một số hạn chế và hạn chế của
quá trình lên men vi khuẩn LA hiện tại sẽ được
giới thiệu. Điều này bao gồm việc sử dụng
carbohydrate thực phẩm làm cơ chất, sử dụng
gián tiếp các loại đường polymer (cellulose và
xylan), độ nhạy cảm với các hợp chất ức chế
hình thành trong quá trình xử lý sinh khối
lignocellulose, giảm nồng độ LA do ức chế cơ
chất, giảm năng suất LA do sự hình thành của
các sản phẩm phụ, sử dụng đường hỗn hợp
không hiệu quả, giảm năng suất LA do ức chế
sản phẩm cuối, ức chế pH thấp và tăng sử dụng
các chất trung hòa, nhiễm bẩn do tính chất ưa
nhiệt của hầu hết các chủng sản xuất LA và
giảm độ tinh khiết quang học. Các cơ hội để
khắc phục những hạn chế này sẽ được thảo
luận.
Decreased lactic acid yield due to the
formation of by-products
Glucose và xylose là thành phần đường chính
của sinh khối lignocellulose. Hầu hết các
chủng sản xuất LA, bao gồm LAB, sử dụng
hexose (glucose) đồng hình thông qua các chu
trình EMP- hoặc pentose phosphate (PP), chỉ
mang lại LA là sản phẩm cuối cùng (Abdel-
Rahman et al., 2013a). Tuy nhiên, một số chủng
sản xuất LA sử dụng hexoses dị hình (không
đồng nhất). Ngược lại, pentose (ví dụ, xylose và
(especially LAB), which leads to the generation of
various by-products, such as acetic acid, ethanol,
and carbon dioxide, in addition to LA.
This reduces the LA yield, with a maximum
theoretical yield of 0.60 g/g of consumed pentose
(Tanaka et al., 2002) and has a negative impact on
the separation and purification costs of LA (Guo et
al., 2014). Several methods have been explored to
reduce by-product formation during LA
production, including isolation of novel strains,
modification of cultivation conditions, and genetic
modification of existing strains (Table 2: Some
strategies adapted for improvement of lactic acid
yield reported in the literature).
Lactococcus lactis IO-1 was reported to utilize the
phosphoketolase pathway (PK- pathway) and
pentose phosphate pathway (PP-pathway) for
xylose fermentation and produced LA at high
molar ratio of 1.22 mol per mol of xylose, when
cultivated in fermentation media containing high
concentrations (≥ 50 g/l) of xylose (Tanaka et al.,
2002). A newly isolated E. mundtii strain, QU 25,
used only the PP-pathway for LA production at
xylose concentrations ≥ 50 g/l; however, this strain
utilized both PP- and PK-pathways when xylose
concentrations were < 50 g/l (Abdel Rahman et
al., 2011c).
Therefore, LA fermentations with these strains
under controlled xylose concentrations could
improve LA yields and reduce the formation of
by-products. Very recently, Enterococcus faecium
QU 50 has been reported to ferment xylose
homofermentatively, producing LA at a high yield
of 1.0 g/g-xylose consumed, even at low xylose
concentrations (Abdel-Rahman et al., 2015a).
Formation of by-products could also be decreased
arabinose) được chuyển hóa dị hình qua đường
phosphoketolase (PK) bởi phần lớn các chủng
sản xuất LA (đặc biệt là LAB), dẫn đến việc tạo
ra các sản phẩm phụ khác nhau, như axit axetic,
ethanol và carbon dioxide, ngoài LA.
Điều này làm giảm năng suất LA, với năng
suất lý thuyết tối đa là 0,60 g / g pentose tiêu
thụ (Tanaka et al., 2002) và có tác động tiêu
cực đến chi phí tách và tinh chế LA (Guo et al.,
2014). Một số phương pháp đã được khám phá
để giảm sự hình thành sản phẩm phụ trong quá
trình sản xuất LA, bao gồm phân lập các
chủng mới, sửa đổi điều kiện nuôi cấy và đột
biến gen của các chủng hiện có (Bảng 2: Một
số chiến lược thích nghi để cải thiện năng
suất axit lactic được báo cáo trong tài liệu).
Lactococcus lactis IO-1 đã được báo cáo sử
dụng con đường phosphoketolase (con đường
PK-) và con đường pentose phosphate (con
đường PP) để lên men xylose và tạo ra LA với
tỷ lệ mol cao 1,22 mol mỗi mol xyloza, khi
được nuôi cấy trong môi trường lên men nồng
độ cao (≥ 50 g / l) của xyloza (Tanaka et al.,
2002). Một chủng E. mundtii mới được phân
lập, QU 25, chỉ sử dụng con đường PP để sản
xuất LA ở nồng độ xyloza > 50 g / l; tuy nhiên,
chủng này sử dụng cả con đường PP và PK khi
nồng độ xylo <50 g / l (Abdel Rahman et al.,
2011c).
Do đó, quá trình lên men LA với các chủng này
dưới nồng độ xyloza được kiểm soát có thể
cải thiện năng suất LA và làm giảm sự hình
thành các sản phẩm phụ. Gần đây,
Enterococcus faecium QU 50 đã được báo cáo
để lên men xyloza đồng hóa, sản xuất LA với
năng suất cao 1,0 g / g-xyloza tiêu thụ, ngay cả
ở nồng độ xyloza thấp (Abdel-Rahman et al.,
by changing the fermentation conditions. A
metabolic shift from the homofermentative mode
is observed at different pH values (Abdel-Rahman
et al., 2011c, 2015a), substrate concentrations
(Abdel-Rahman et al., 2011c; Tanaka et al., 2002),
and aerobic conditions (Lopez et al., 1998; Neves
et al., 2002).
Efforts to improve LA yield and engineer
homolactic acid production by redirecting the
carbon flow for LA production have been reported
. The complete abolition of enzymes with
phosphoketolase activity, combined with the
introduction of enzymes that function as bridges to
the PP-pathway, achieved homolactic acid
production from pentose sugars by some LAB
strains (Okano et al., 2009a).
Okano et al. disrupted the PK pathway in L- LDH
gene (ldhL1)-deficient Lactobacillus plantarum by
deleting the phosphoketolase 1 gene (xpk1) and
establishing the PP-pathway by introduction of the
transketolase gene (tkt) from Lc. lactis. The
resulting mutant exhibited homolactic
fermentation with production of 38.6 g/l of D-LA
from 50 g/l of arabinose (Okano et al., 2009a), and
41.2 g/l of D-LA from 50 g/l of xylose (Okano et
al., 2009b). Similarly, Shinkawa et al. (2011)
achieved homo L-LA production from xylose by
knocking out the xpk gene and introducing the
xylRAB genes and the tkt gene into Lb. lactis IL
1403. The resulting strain produced 50.1 g/l of L-
LA from xylose at high yield of 1.58 mol/mol-
xylose consumed, which is very close to the
theoretical maximum value of 1.67 mol/mol for
xylose.
Zhang et al. (2016b) constructed a recombinant
plasmid for xylose assimilation and introduced it
into Lb. plantarum NCIMB 8826 ΔldhL1. The
2015a).
Sự hình thành các sản phẩm phụ cũng có thể
được giảm bằng cách thay đổi các điều kiện
lên men. Một sự thay đổi chuyển hóa từ chế độ
lên men đồng hình được quan sát ở các giá trị
pH khác nhau (Abdel-Rahman et al., 2011c,
2015a), nồng độ cơ chất (Abdel-Rahman et al.,
2011c; Tanaka et al., 2002) và điều kiện hiếu
khí ( Lopez và cộng sự, 1998; Neves và cộng
sự, 2002).
Những nỗ lực cải thiện năng suất LA và kỹ
thuật sản xuất axit lactic đồng hình bằng cách
chuyển hướng dòng carbon cho sản xuất LA
đã được báo cáo. Việc loại bỏ hoàn toàn các
enzyme có hoạt tính phosphoketolase, kết hợp
với việc thêm các enzyme có chức năng làm
cầu nối với con đường PP, đã đạt được sản
lượng axit homolactic từ đường pentose bởi một
số chủng LAB (Okano et al., 2009a).
Okano và cộng sự. phá vỡ con đường PK trong
Lactobacillus plantarum thiếu gene L- LDH
(ldhL1) bằng cách loại gen phosphoketolase 1
(xpk1) và thiết lập con đường PP bằng cách
thêm gen transketolase (tkt) từ Lc. Lactis. Kết
quả đột biến thể hiện quá trình lên men đồng
hình với sản lượng 38,6 g / l D-LA từ 50 g / l
arabinose (Okano et al., 2009a) và 41,2 g / l D-
LA từ 50 g / l xyloza (50 g / l xyloza) Okano và
cộng sự, 2009b). Tương tự, Shinkawa et al.
(2011) đã đạt được sản xuất L-LA đồng hình từ
xyloza bằng cách loại bỏ gen xpk và đưa gen
xylRAB và gen tkt vào Lb. Lactis IL 1403.
Chủng tạo ra 50,1 g / l L-LA từ xyloza với năng
suất cao 1,58 mol / mol-xyloza tiêu thụ, rất gần
với giá trị tối đa lý thuyết là 1,67 mol / mol đối
với xyloza.
resulting recombinant strain, Lb. plantarum Zhang và cộng sự. (2016b) đã chế tạo một
NCIMB 8826 ΔldhL1-pLEM xylAB, produced D- plasmid tái tổ hợp để đồng hóa xyloza và đưa
LA from xylose at a yield of 0.53 g/g. nó vào Lb. platarum NCIMB 8826 ldhL1. Các
chủng tái tổ hợp kết quả, Lb. plantarum
This material thus represents a promising
NCIMB 8826 ldhL1-pLEM xylAB, sản xuất D-
candidate as an alternative substrate for the
LA từ xyloza với năng suất 0,53 g / g.
biotechnological production of commodity
chemicals. Lignocellulose is composed mainly of Do đó, vật liệu này đại diện cho một ứng cử
cellulose (40 to 50%), hemicellulose (25 to 30%), viên đầy triển vọng như một chất nền thay thế
and lignin (10 to 20%) (54). Lignin is a cho sản xuất công nghệ sinh học của hóa chất
noncarbohydrate polyphenolic compound. hàng hóa. Lignocellulose có thành phần chủ yếu
Cellulose hydrolysates comprise glucose and là cellulose (40 đến 50%), hemiaellulose (25
various levels of cellobiose and other glucose đến 30%) và lignin (10 đến 20%) (54). Lignin
oligomers. On the other hand, hemicellulose là một hợp chất polyphenolic không mang
hydrolysates are more complex mixtures as they carbohydrate. Cellulose thủy phân bao gồm
include several hexoses (glucose, galactose, and glucose và các mức độ khác nhau của
mannose) and pentoses (xylose and arabinose) cellobiose và các oligome glucose khác. Mặt
(53). Despite the fact that typical lignocellulosic khác, thủy phân hemiaellulose là hỗn hợp phức
carbohydrate fractions are composed primarily of tạp hơn vì chúng bao gồm một số hexose
glucose, typical pentose fractions represent a (glucose, galactose và mannose) và pentose
nonnegligible portion of the sugar fraction of (xyloza và arabinose) (53). Mặc dù thực tế là
lignocellulosic biomass, as they reach the 5 to các phân đoạn carbohydrate lignocellulose điển
20% range for xylose and 1 to 5% for arabinose hình được cấu tạo chủ yếu từ glucose, các phân
(1). As a result, the capability to efficiently utilize
đoạn pentose điển hình chiếm một phần không
pentoses is a key attribute of microbial converters đủ điều kiện trong phần đường của sinh khối
for optimizing the economics of lignocellulose- lignocellulose, khi chúng đạt đến mức 5 đến
based processes (28). Several fungi and bacteria 20% cho xyloza và 1 đến 5% cho arabinose
have been shown to grow aerobically on xylose, (1) . Do đó, khả năng sử dụng hiệu quả các
but relatively few wild-type strains can utilize pentose là một thuộc tính quan trọng của các bộ
xylose as a fermentable substrate.(21) chuyển đổi vi sinh vật để tối ưu hóa tính kinh tế
của các quá trình dựa trên lignocellulose (28).
Một số loại nấm và vi khuẩn đã được chứng
Lignocellulose is one of the most abundant minh là phát triển trên xyloza, nhưng tương đối
biomass resources and therefore could be used as a ít các chủng loại hoang dã có thể sử dụng
sustainable non-food feedstock for the production xyloza làm chất nền có thể lên men (21).
of biofuels and chemicals such as lactic acid. The
Lignocellulose là một trong những nguồn sinh
process of utilizing lignocellulosic biomass as the
khối dồi dào nhất và do đó có thể được sử dụng
carbon source for fermentation include
làm nguyên liệu phi thực phẩm bền vững để sản
pretreatment and hydrolysis to degrade plant cell
xuất nhiên liệu sinh học và hóa chất như axit
wall and release sugar.
lactic. Quá trình sử dụng sinh khối
However, most industrial strains of lignocellulose lignocellulose làm nguồn carbon cho quá trình
are unable to ferment the hydrolysate efficiently. lên men bao gồm tiền xử lý và thủy phân để làm
One of the major problems for its utilization is the suy giảm thành tế bào thực vật và giải phóng
fact that sugars derived from the biomass are a đường.
mixture of glucose and xylose. Xylose is not
Tuy nhiên, hầu hết các chủng lignocellulose
fermentable by most lactic acid bacteria. A large
công nghiệp không thể lên men thủy phân một
number of lactic acid producing strains have been
cách hiệu quả. Một trong những vấn đề chính
screened or developed in the past decades for
đối với việc sử dụng nó là thực tế là đường có
pentose utilization (Picataggio et al. 1998; Patel et
nguồn gốc từ sinh khối là một hỗn hợp của
al. 2006; Bai et al. 2008; Ilmen et al. 2007; Wang
glucose và xyloza. Xyloza không thể lên men
et al. 2011). However, in most cases, the pentose
bởi hầu hết các vi khuẩn axit lactic. Một số
catabolism was suppressed by the glucose also
lượng lớn các chủng sản xuất axit lactic đã
present in the mixture (Zhang et al. 2007; Dien et
được sàng lọc hoặc phát triển trong những thập
al. 2001; Iyer et al. 2000). The selective and
kỷ qua để sử dụng pentose (Picataggio et al.
sequential utilization of mixed sugars by most
1998; Patel et al. 2006; Bai et al. 2008; Ilmen et
microbes not only makes the fermentation process
al. 2007; Wang et al. 2011; ). Tuy nhiên, trong
complex, it also often reduces the yield and
hầu hết các trường hợp, quá trình dị hóa pentose
productivity (Kim et al. 2010a). Moreover, a
bị ức chế bởi glucose cũng có trong hỗn hợp
number of toxic compounds are often formed
(Zhang và cộng sự 2007; dien et al. 2001; Iyer
during the pretreatment process of lignocellulosic
et al. 2000). Việc sử dụng có chọn lọc và tuần
materials, besides the sugars. These compounds
tự các loại đường hỗn hợp của hầu hết các vi
inhibit the growth of most microbes. In fact, many
khuẩn không chỉ làm cho quá trình lên men trở
excellent lactic acid producing strains, such as
nên phức tạp, mà còn thường làm giảm năng
Escherichia coli (Shoemaker 2004) and Bacillus
suất và năng suất (Kim et al. 2010a). Hơn nữa,
coaglulans (Gorichem 2007), were sensitive to the
một số hợp chất độc hại thường được hình
inhibitors.
thành trong quá trình tiền xử lý vật liệu
lignocellulose, bên cạnh đường. Các hợp chất
này ức chế sự phát triển của hầu hết các vi
khuẩn. Trên thực tế, nhiều chủng sản xuất axit
lactic tuyệt vời, như Escherichia coli
(Shoemaker 2004) và Bacillus coaglulans
Lactobacillus brevis was found to be a promising
(Gorichem 2007), rất nhạy cảm với các chất ức
strain for use in lactic acid production in a
chế.
lignocellulosic biorefinery, because of its excellent
performance in simultaneous utilization of Con đường chuyển hóa xylose thành lactat
xylose/glucose, and its strong ability to resist toxic
Lactobacillus brevis đã được tìm thấy là một
compounds generated by the pretreatment of
chủng có triển vọng để sử dụng trong sản xuất
lignocelluloses (Guo et al. 2010; Kim et al. 2010b;
axit lactic trong nhà máy sinh học
Winkler and Kao 2011).
lignocellulose, vì hiệu quả tuyệt vời của nó
Different from most xylose utilizing strains that trong việc sử dụng đồng thời xyloza / glucose
ferment mixed carbohydrate sequentially, L. và khả năng mạnh mẽ của nó để chống lại các
brevis exhibited a relaxed control of sugar hợp chất độc hại được tạo ra bởi quá trình tiền
utilization. It simultaneously consumed numerous xử lý lignocellulose al. 2010; Kim và cộng sự
sugars, such as xylose, glucose, and arabinose 2010b; Winkler và Kao 2011).
without carbon catabolite repression (Guo et al.
Khác với hầu hết các chủng sử dụng xyloza lên
2010; Kim et al. 2009). However, the theoretical
men hỗn hợp carbohydrate tuần tự, L. brevis thể
yield of lactic acid from pentose or hexose was
hiện sự kiểm soát thoải mái việc sử dụng
only 1.0 (mol/mol) in L. brevis, as the consumed
đường. Nó đồng thời tiêu thụ nhiều loại đường,
carbons were partly lost in the form of acetic acid
chẳng hạn như xyloza, glucose và arabinose mà
and ethanol through the hetero fermentative
không có sự ức chế dị hóa carbon (Guo et al.
pathway.
2010; Kim et al. 2009). Tuy nhiên, năng suất lý
It was reported that there were two different thuyết của axit lactic từ pentose hoặc hexose chỉ
pathways for xylose metabolism existing in lactic là 1,0 (mol / mol) trong L. brevis, vì các nguyên
acid bacterium Lactococcus lactis IO-1 (Tanaka et tử cacbon được tiêu thụ đã bị mất một phần
al. 2002; Shinkawa et al. 2011); one was dưới dạng axit axetic và ethanol thông qua con
phosphoketolase (PK) pathway đường lên men hetero.
(heterofermentative pathway) and another was
Nó đã được báo cáo rằng có hai con đường
pentose phosphate (PP)/glycolytic pathway
khác nhau để chuyển hóa xylo tồn tại trong vi
(homo-fermentative pathway). The PK pathway
khuẩn axit lactic Lactococcus lactis IO-1
catalyzes the cleavage of D-xylulose-5-phosphate
(Tanaka et al. 2002; Shinkawa et al. 2011); một
to equal-molar amounts of glyceraldehyde 3-
là con đường phosphoketolase (PK) (con đường
phosphate and acetylphosphate; hence, the yield
dị hợp tử) và một con đường khác là con đường
coefficients of lactate from xylose or glucose in
pentose phosphate (PP) / glycolytic (con đường
strains that possess only this pathway do not
lên men homo). Con đường PK xúc tác sự phân
exceed 1.0 mol/mol. The PP/glycolytic pathway
cắt D-xylulose-5-phosphate thành lượng mol
converts xylose or glucose to lactate as sole
glyceraldehyd 3-phosphate và acetylphosphate
product, and the theoretical yield coefficient of
bằng nhau; do đó, hệ số năng suất của lactate từ
lactate from xylose or glucose in strains that
xyloza hoặc glucose trong các chủng chỉ có con
possess only PP/glycolytic pathway will be 1.67 or
đường này không vượt quá 1,0 mol / mol. Con
2.00 mol/mol. But in strains that possess the two
đường PP / glycolytic chuyển đổi xyloza hoặc
pathways, such as L. lactis IO-1, the yield
glucose thành lactate thành sản phẩm duy nhất
coefficient of lactate from pentose will be between
và hệ số năng suất lý thuyết của lactate từ
1.0 and 1.67 mol/mol. Hence, the yield coefficient
xyloza hoặc glucose trong các chủng chỉ có con
of lactate from xylose or glucose is dependent on
đường PP / glycolytic sẽ là 1,67 hoặc 2,00 mol /
the proportion of carbon flux distribution between
mol. Nhưng trong các chủng có hai con đường,
the two pathways. Higher proportion of carbon
chẳng hạn như L. lactis IO-1, hệ số năng suất
flux to the PP/glycolytic pathway will result in
của lactate từ pentose sẽ nằm trong khoảng từ 1
higher lactate yield.
đến 1,67 mol / mol. Do đó, hệ số năng suất của

Enhanced D-lactic acid production from
renewable resources using engineered
Lactobacillus plantarum
D-lactic acid is used as a monomer in the
production of poly-D lactic acid (PDLA), which is
used to form heatresistant stereocomplex poly-
lactic acid. To produce costeffective D-lactic acid
by using all sugars derived from biomass
efficiently, xylose assimilating genes encoding
xylose isomerase and xylulokinase were cloned
into an L-lactatedeficient strain, Lactobacillus
plantarum. The resulting recombinant strain,
namely L. plantarum NCIMB 8826 ΔldhL1-
pLEM-xylAB, was able to produce D-lactic acid
(at optical purity >99 %) from xylose at a yield of
0.53 g g−1.
Simultaneous utilization of glucose and xylose to
produce Dlactic acid was also achieved by this
strain, and 47.2 g L−1 of D-lactic acid was
produced from 37.5 g L−1 glucose and 19.7 g L−1
xylose. Corn stover and soybean meal extract
(SBME) were evaluated as cost-effective medium
components for D-lactic acid production.
Optimization of medium composition using
response surface methodology resulted in 30 %
reduction in enzyme loading and 70 % reduction
in peptone concentration. In addition, we
successfully demonstrated D-lactic acid
fermentation from corn stover and SBME in a fed-
batch fermentation, which yielded 61.4 g L−1 D-
lactic acid with an overall yield of 0.77 g g−1. All
these approaches are geared to attaining high D-
lactic acid production from biomass sugars to
lactate từ xyloza hoặc glucose phụ thuộc vào tỷ
lệ phân phối thông lượng carbon giữa hai con
đường. Tỷ lệ thông lượng carbon cao hơn trong
con đường PP / glycolytic sẽ dẫn đến sản lượng
acid lactic cao hơn.
Enhanced D-lactic acid production from
renewable resources using engineered
Lactobacillus plantarum
Axit D-lactic được sử dụng như một monome
trong sản xuất axit lactic poly-D (PDLA), được
sử dụng để tạo thành axit poly-lactic
stereocomplex. Để tạo ra axit D-lactic không
tốn kém bằng cách sử dụng tất cả các loại
đường có nguồn gốc từ sinh khối một cách hiệu
quả, gen đồng hóa xyloza mã hóa enzyme
xyloza isomerase và xylulokinase đã được
chuyển vào một chủng L-Lactobacillus
plantarum. Chủng tái tổ hợp thu được, cụ thể là
L. plantarum NCIMB 8826 ldhL1-pLEM-
xylAB, có thể tạo ra axit D-lactic (với độ tinh
khiết quang học> 99%) từ xyloza với năng
suất 0,53 g g – 1.
Việc sử dụng đồng thời glucose và xyloza để
tạo ra axit D-lactic cũng đã đạt được nhờ chủng
này và 47,2 g L − 1 axit D-lactic được sản xuất
từ 37,5 g L − 1 glucose và 19,7 g L − 1 xyloza.
(0.872 g g – 1). Bã ngô và chiết xuất bột đậu
nành (SBME) được đánh giá là thành phần môi
trường hiệu quả về chi phí để sản xuất axit D-
lactic. Tối ưu hóa thành phần môi trường bằng
phương pháp phản ứng bề mặt dẫn đến giảm
30% enzyme loading (lượng enzyme được thêm
vào sinh khối lignocellulose thủy phân) và giảm
70% nồng độ peptone. Ngoài ra, chúng tôi đã
chứng minh thành công quá trình lên men axit
D-lactic từ thân cây ngô và SBME trong quá
trình lên men theo lô, cho ra 61,4 g L-1 axit D-
produce low-cost, highly thermostable
biodegradable plastics.
D-lactic acid yield increased to 16 and 72 %,
respectively, compared with the yield obtained by
using homofermentative strain L. delbrueckii and
the xylose assimilation gene provider strain L.
brevis (Zhang and Vadlani 2013; 2015).
lactic với năng suất tổng thể là 0,77 g.g 1. Tất
cả các phương pháp này đều hướng đến việc
sản xuất axit D-lactic cao từ đường sinh khối để
sản xuất nhựa có khả năng phân hủy sinh học
cao, có khả năng chịu nhiệt cao.
Sản lượng axit D-lactic tăng lên lần lượt là 16
và 72%, so với năng suất thu được bằng cách sử
dụng chủng homofermentative L. delbrueckii và
chủng cung cấp gen đồng hình xylose L. brevis
(Zhang và Vadlani 2013; 2015).