CÁC GLYCOSIDE STILBENE ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ

PHẦN RỄ CỦ CỦA POLYGONUM MULTIFLORUM

THUNB. VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HOÁ CỦA NÓ
TRÊN IN VITRO.
L.V. LI-SHUANG1, XIAOHONG GU1, CHI-TANG HO2,3 and JIAN TANG1
1
Key Laboratory of Food Science and Safety
Ministry of Education, Southern Yangtze University
Wuxi, Jiangsu, 214036, China
2
Department of Food Science
Rutgers University, 65 Dudley Road
New Brunswick, NJ 08901-8520
Submitted for Publication October 26, 2005
Revised Received and Accepted November 14, 2005

I/ Tóm tắt:

Các Stilbene Glycoside (SG) được phân lâ ̣p bằng cách chiết phần rễ củ của
cây Polygonum multiflorum (PM) Thunb. với cồn Ethanol, thu được 3 mẫu: Cao
thô (crude extract), Phần được phân tách bằng macroporous resin, và tinh thể
2,3,5,4-tetrahydroxystilbene 2-O-b-D-glucopyranoside tinh khiết. Cấu trúc của các
tinh thể được xác định bằng phương pháp khối phổ và cô ̣ng hưởng từ hạt nhân.
Hoạt tính chống OXH của 3 mẫu vâ ̣t trên chứa SG được đánh giá bằng các test
chống OXH khác nhau, bao gồm loại bỏ các gốc tự do (free radical scavenging),
loại bỏ anion superoxide, loại bỏ gốc tự do hydroxyl và ức chế sự hình thành lipid
peroxide ở các cơ quan (Gan, tim và não) ở chuô ̣t in vitro. Hoạt tính chống OXH
khác nhau được so sánh với resveratrol, mô ̣t chất có cấu trúc hoá học tương tự như
SG của PM. Các kết quả chỉ ra rằng cả 3 mẫu đều cho thấy hoạt tính chống OXH,
trong đó SG tinh khiết có hoạt tính cao nhất. Giá trị IC50 của các hợp chất trong
viê ̣c loại bỏ anion superoxide, loại bỏ gốc tự do hydroxyl lần lượt: 2,3,5,4-
tetrahydroxystilbene 2-OD-glucopyranoside là 8,06, 2,75 và 0,57 mg / mL đối
với viê ̣c loại bỏ 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH). Giá trị IC50 đối với 2,3,5,4-
tetrahydroxystilbene 2-O-b-D-glucopyranoside trong việc ức chế sự hình thành
lipid peroxide ở gan, tim và não tương ứng là 13,68, 16,34 và 17,62 mg / mL. Nó
đã chỉ ra rằng SG từ PM có khả năng chống oxy hóa tốt hơn so với resveratrol.
 L.V. LI-SHUANG ET AL.

II/Giới thiêu:
̣
Reactive oxygen species (ROS), bao gồm các gốc tự do như gốc anion superoxide (O2-), gốc hydroxyl (·
OH) và các hợp chất không phải gốc tự do như H2O2 và oxy đơn bô ̣i (1O2), là các dạng oxy hoạt hóa khác
nhau (Yildirim et al . 2000). Tầm quan trọng của các gốc tự do và ROS ngày càng thu hút sự chú ý trong
thập kỷ qua. Những phân tử này là yếu tố làm trầm trọng thêm sự tổn thương tế bào, quá trình lão hóa
(Lai và cộng sự 2001) và các bệnh, chẳng hạn như ung thư (Muramatsu và cộng sự 1995), xơ vữa động
mạch (Steinberg và cộng sự 1989), loét dạ dày (Das và cộng sự 1997) và các tình trạng bê ̣nh khác (Oliver
et al. 1987; Babizhayev and Costa 1994; Smith et al. 1996). Nhiều hợp chất chống oxy hóa tự nhiên trong
các nguồn thực vật đã được xác định là gốc tự do hoặc chất oxy hoạt tính (Yen và Duh 1994; Duh 1998).

Gần đây, sự quan tâm đến việc tìm kiếm các chất chống oxy hóa tự nhiên để sử dụng trong thực phẩm
hoặc nguyên liệu thực vật để thay thế các chất chống oxy hóa tổng hợp đang bị hạn chế vì các tác dụng
phụ của chúng như đã tăng đáng kể khả năng gây ung thư (Ito et al. 1983; Zheng và Wang 2001). Chất
chống oxy hóa tự nhiên có thể bảo vệ cơ thể con người khỏi các gốc tự do và làm chậm sự tiến triển của
nhiều bệnh mãn tính, cũng như sự ôi thiu do oxy hóa lipid trong thực phẩm (Pryor 1991; Kinsella et al.
1993; Lai et al. 2001).

Rễ khô của Polygonum multiflorum (PM) Thunb đã được sử dụng như một loại thuốc bổ và một chất
chống lão hóa trong nhiều bài thuốc y học cổ truyền (Chen và Li 1993; Huang 1993). Các nghiên cứu
dược lý gần đây đã chứng minh rằng chiết xuất PM thô có thể tạo ra tác dụng hạ lipid trong máu ở chuột
(Zhang và cộng sự 1983) và tác dụng dãn mạch trên động mạch chủ chuột được thử nghiê ̣m(Chang và
cộng sự 1990). Với sự tham gia của các phản ứng qua trung gian gốc tự do trong sự phát triển của các rối
loạn tim mạch liên quan đến tuổi tác, bao gồm xơ vữa động mạch và tăng huyết áp (Halliwell và
Gutteridge 1990, 1999), tác dụng của PM trong điều trị các bệnh liên quan đến tuổi tác này có thể là do
khả năng chống oxy hóa của cây này (Ip et al. 1997). Hoạt động chống oxy hóa của PM in vivo và in vitro
đã được chứng minh (Ip et al. 1997). Nghiên cứu chỉ ra rằng PM tăng cường hoạt động chống oxy hóa tế
bào (Xiao et al. 1993) và chức năng của superoxide dismutase (SOD), ức chế đáng kể sự hình thành các
lipid oxy hóa (Xiao et al. 1993) và ngăn chặn sự peroxy hóa lipid trong ty thể tim chuột (Hong et al. năm
1994). Một nghiên cứu gần đây hơn cho thấy rằng stilbene glycoside (SGs) từ PM có khả năng loại bỏ
mạnh mẽ các gốc 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) (Chen và cộng sự 1999). Mục tiêu của nghiên
cứu này là xác định các thành phần chống oxy hóa trong PM và điều tra hoạt động chống oxy hóa của các
thành phần được phân lập từ PM.
III/ Nguyên liêụ và các phương pháp:

1. Nguyên liêu:
̣

Rễ củ khô đã qua chế biến của cây PM được lấy từ Quý Châu, Trung Quốc. Tất cả
các hoá chất đều đạt tiêu chuẩn hoá chất phân tích (Analytical grade).

2. Quy trình chiết và phân lâ ̣p:

Chuẩn bị cao thô. Rễ khô của PM được nghiền nhỏ và chiết bằng ethanol 60%,
với tỷ lệ dung dịch và chất rắn là 1:10 (v/w), ở nhiệt độ phòng trong 2 ngày. Phần
bã được lọc bỏ, và các chất chiết xuất từ ethanolic được kết hợp và cô đặc dưới áp
suất thấp bằng thiết bị bay hơi quay (Büchi Rotavapor R-114, Büchi Labourtechnik
AG, Flawil, Thụy Sĩ). Chiết xuất được đă ̣t tên là “Cao thô của PM-SG” (Crude
PM-SG.).

Điều chế chiết xuất Stilbene bằng phân đoạn resin. Dịch chiết khô thu được sau
đó được đưa vào sắc ký cột mở (CC) được nhồi bằng nhựa macroporous resin (Nhà
máy hóa chất của Đại học Nam Đài, Thiên Tân, Trung Quốc). Cột được rửa giải
từng bước với mỗi năm nồng độ ethanol trong nước khác nhau (10, 20, 30, 40 và
50%). Sau đó, phân đoạn rượu nước 40% được cô đặc dưới áp suất thấp bằng thiết
bị bay hơi quay và được đă ̣t tên là “PM-SG được phân đoạn bằng resin ” (RF-PM-
SG) cho các nghiên cứu sau.

Tinh chế PM-SG bằng phương pháp sắc ký. Dịch chiết khô thu được sau đó
được nhồi trong CC mở với polycaprolactam (Huangyan Resin Chemical Corp.,
Huang Yan, Trung Quốc). Cột được rửa giải từng bước với thể tích gấp năm lần
thể tích của cột, ở mỗi nồng độ trong số bốn nồng độ khác nhau của dung dịch
EtOH trong nước (10, 20, 30 và 40%), thu và chia thành bốn phần. Các phân đoạn
được thu thập bởi các dung dịch nước-etanol 20 và 30% được kết hợp và một lần
nữa được đưa vào CC mở được nhồi bằng polycaprolactam. Phần mới thu được
bằng dung dịch nước-etanol 30% sau đó được đưa vào tủ lạnh, thu được tinh thể
hình kim . Các tinh thể được kết tinh lại để thu được “SG” (PM-SG) tinh khiết cho
các thử nghiệm chống oxy hóa.

Xác định cấu trúc của SG

Sắc ký lỏng hiệu năng cao-MS. Phân tích sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) -MS
được thực hiện bằng cách sử dụng máy đo khối phổ tứ cực đơn Waters ZQ2000,
mô-đun phân tách Waters Alliance 2690 được gắn với hệ thống detector 996
Waters PDA (Waters, Elstree, Vương quốc Anh). Cột C18 bằng thép không gỉ
250,0 x 2,1 mm i.d. và hạt có kích thước 5 mm (Lichrospher, Merck, Darmstadt,
Đức) được sử dụng, và pha động là metanol / nước /% axit axetic, được rửa giải
từng bước trong 0,3 mL / phút. Mẫu được ion hóa bằng đầu dò ion hóa tia điện cực
dương (ESI), ở chế độ ion dương, sử dụng quá trình ion hóa hóa học áp suất khí
quyển (APCI) trong các điều kiện nguồn sau: (1) nhiệt độ nguồn, 120C; (2) thế
mao dẫn, 3,88 kV; và (3) điện thế mẫu hình nón , 30 V. Khối phổ thu được trong
phạm vi quét 200–800 m / z.

Hưởng từ hạt nhân. Một thiết bị cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) của Bruker 400
MHz (Bruker BioSpin Corporation, Fallanden, Thụy Sĩ) đã được sử dụng. Dung
môi được sử dụng là axeton-d6. Hoạt tính chống oxy hóa dọn sạch các gốc tự do
DPPH của các chất chiết xuất, trên cơ sở hoạt động loại bỏ gốc DPPH, được xác
định bằng phương pháp đã được công bố (Blois 1958; Braca et al. 2001). Tóm lại,
0,5 mL metanol chứa một chế phẩm SG riêng lẻ được trộn trong một ống nghiệm
với 2,5 mL metanol chứa 6,5 x 10-5 mol/L DPPH (Sigma-Aldrich Co., St. Louis,
MO). Độ hấp thụ ở bước sóng 517 nm được xác định sau khi đă ̣t trong bóng tối ở
nhiệt độ phòng 30 phút. Dung dịch DPPH được chuẩn bị mới hàng ngày, bảo quản
trong bình cầu, đậy nắp và để trong bóng tối ở 4C giữa các lần đo. Tất cả các phép
đo được thực hiện ba lần. Đường chuẩn sau đây, được lập với DPPH giữa 6,5 x 10-
6 và 2,5 x 10-4 mol / L, được sử dụng để tính nồng độ DPPH (mg / mL) trong môi
trường phản ứng theo: A515 nm = 9523,2 [DPPH] t - 0,0006, hệ số tương quan r =
0,9997 và phần trăm hoạt động ức chế được tính như sau:

Tỉ lê ̣ DPPH bị loại bỏ (%) = [DPPH0 - DPPHt] x 100 / DPPH0

Hoạt tính loại bỏ các gốc tự do Hydroxyl:

Khả năng loại bỏ gốc tự do hydroxyl của SG được đánh giá trên máy đo phát
quang hóa học SH-G (BCM) (Nhà máy Thiết bị Đo lường Thượng Hải, Thượng
Hải, Trung Quốc). BCM bao gồm ba phần: một giá đỡ mẫu tự động xoay, trong đó
có thể đặt 12 ô lấy mẫu (ống thủy tinh, đường kính = 10 mm, chiều cao = 20 mm),
một màn hình phát quang hóa học và một bộ xử lý dữ liệu. Mỗi ô mẫu có thể xoay
và qua màn hình trong một khoảng thời gian đã định theo chương trình tự đặt.
Trong quá trình thử nghiệm, cường độ phát quang hóa học (CL) của hệ thống phản
ứng có thể được ghi lại trong bộ xử lý dữ liệu tại khoảng thời gian đã đặt.

Gốc hydroxyl được tạo ra bởi phản ứng Haber – Weiss xúc tác đồng, với zymosan
được sử dụng làm bộ khuếch đại CL (Rowley 1983; Wen et al. 2001). Khoảng 10
mg chế phẩm SG khác nhau được hòa tan trong 100 mL etanol, và sau đó được pha
loãng với dung dịch đệm (NaH2PO4 / Na2HPO4, pH 7,8) để thu được các mẫu ở
20, 40, 60, 80 và 100 mg / mL. Ngoài ra, 200 mL dung dịch axit L-ascorbic (Vc) (2
mM) (Sinoreagent Corp., Thượng Hải, Trung Quốc), 400 mL dung dịch CuSO4 (2
mM), 100 mL dung dịch zymosan (75 mg / mL) (Angel Zymosan Corp., Yichang,
Hồ Bắc, Trung Quốc), 50 mL dung dịch luminol (0,1 mM) (Sigma-Aldrich Co.),
100 mL mẫu và 550 mL dung dịch cân bằng photphat (PBS) đã được thêm vào,
theo thứ tự đã cho (các mẫu được thay thế bằng dung dịch đệm tương ứng trong
nhóm đối chứng) vào cuvet thủy tinh thử nghiệm. Đầu tiên, một ô mẫu đã được
nạp hỗn hợp được đặt vào BCM như một đối chứng. Khi tế bào vượt qua màn
hình, 600 mL H2O2 (68 mM) được tiêm vào tế bào ngay lập tức. Các tín hiê ̣u phát
quang được ghi lại đồng thời trong bộ xử lý cứ sau 6 s một lần (PBS thay thế mẫu
trong đối chứng). Tỷ lệ loại bỏ gốc tự do thu được theo công thức:

Tỉ lê ̣ loại bỏ gốc tự do (%) = (CL [control] - CL [mẫu]) x 100 / CL [control]

Hoạt tính loại bỏ Anion Superoxide

Khả năng thu gom anion superoxide của SG cũng được đánh giá trên SH-G
BCM. Đối với thử nghiệm anion superoxide (Goldestein và cộng sự, 1979; Yu và
cộng sự 2001; Zhao và cộng sự 2003), anion superoxide được tạo ra bằng cách tự
oxy hóa pyrogallol. Hỗn hợp phản ứng chứa 50 mL pyrogallol (1 x l0-3 M) (Công
ty TNHH Sinoreagent), 700 mL dung dịch đê ̣m cacbonat (CBSS) có pH = 10,2
(Sinoreagent Corp.) và 20 mL luminol (1 x l0 -3 M). Đầu tiên, một ô mẫu đã được
nạp hỗn hợp được đặt vào BCM. Khi tế bào vượt qua màn hình, một nồng độ đã
biết của mẫu được tiêm vào tế bào ngay lập tức. Hóa chất sinh học được ghi lại
đồng thời trong bộ xử lý 6 s một lần (CBSS thay thế mẫu trong đối chứng). Tỷ lệ
loại bỏ gốc tự do thu được theo công thức:

Tỉ lê ̣ loại bỏ gốc tự do (%) = (CL [control] - CL [mẫu]) x 100 / CL [control]
Hoạt tính ức chế peroxy hóa lipid

Tất cả các mẫu đều được đánh giá về khả năng ức chế quá trình peroxy hóa lipid
theo các quy trình được mô tả bởi Ng et al. (2000) với một số sửa đổi. Não, gan và
tim của chuột Sprague-Dawley (SD) (Nhân giống Pukou

Trung tâm, Nam Kinh, Trung Quốc) đã được lấy ra và đồng nhất với Polytron
trong dung dịch đệm photphat lạnh (20 mM, pH 7,4) để tạo ra sự đồng nhất 1:10
(w/v) não, gan và mô tim. 0,20 mL chất thân nước ở phía trên được ủ với 0,50 mL
dung dịch PM-SG, RF-PM-SG và PM-SG thô (5–100 mg / mL) với sự có mặt của
0,05 mL FeSO4 1,00 mM ( AnalaR) và 0,02 mL L-Cys 0,01 mM (Sigma-Aldrich)
ở 37C trong 30 phút. Phản ứng được dừng lại bằng cách thêm 0,5 mL axit
trichloroacetic (TCA; 20%, w / v; Univar, Vancouver, Canada), sau đó ly tâm ở
4000 x g trong 10 phút để loại bỏ protein kết tủa. Một mililit phần nổi phía trên
được lấy trong cuvet, tiếp theo là 1 mL axit thiobarbituric (TBA; 0,67%, w / v;
Sigma), và hỗn hợp này sau đó được đun sôi trong 10 phút. Cường độ màu của
chất phản ứng axit thiobarbituric (TBARS) với TBA được đo bằng độ hấp thụ của
nó ở bước sóng 532 nm sử dụng máy quang phổ (Spectronic Genesys, Milton Roy
Co., Ivyland, PA). Resveratrol được sử dụng như một đối chứng tích cực. Tỷ lệ ức
chế (%) được tính theo công thức:

Tỉ lê ̣ (%) ức chế = [(A-B)/B]x100.

Với A và B lần lượt là đô ̣ hấp thụ quang (mâ ̣t đô ̣ quang D) của chất đối chứng
(control) và mẫu (sample)

Phân tích thống kê

Tất cả các thí nghiệm đều sử dụng thiết kế tạo khối được ngẫu nhiên hoá
hoàn toàn và các quá trình phân tích được thực hiện ba lần. Tất cả dữ liệu được
biểu thị dưới dạng giá trị trung bình ± SEM. Phân tích phương sai một chiều
(ANOVA; SPSS 10.0 cho Windows) được sử dụng để kiểm tra sự khác biệt giữa
các phương pháp xử lý mẫu. Ý nghĩa của sự khác biệt giữa các giá trị trung bình
được xác định ở (P 0,05).

III/ Các kết quả và thảo luâ ̣n:

Định danh các SG chính:

 Các SG chính từ rễ củ của PM được phân lập dưới dạng tinh thể hình kim và
được xác định là 2,3,5,4 -tetrahydroxystilbene 2-O-b-D-glucopyranoside (Hình 1).
Nó cho thấy một ion giả phân tử của m / z 405 [M-1] - bởi APCI MS. Dữ liệu 1H-
NMR (400 MHz, CD3COCD3): d: 7,8 (1H. D, J = 16,4, H-7); 7,49 (2H.d, J = 8,8,
H-3,5); 6,99 (1H. D, J = 16,4, H-8); 6,84 (2H. D, J = 8,6, H-2, 6); 6,69 (2H. D, J =
2,8, H-10); 6,30 (1H. D, J = 2,8, H-12); 4,54 (1H. D, J = 7,6, H-1) và dữ liệu 13C-
NMR (400 MHz, CD3COCD3): d: 157,3- (C1), 154,9- (C11), 150,9- (C14), 136,8-
(C13), 132,4- (C7), 120,7- (C8), 129,3- (C4), 128,7- (C9), 106,9- (C10), 101,3- (C12),
102,5- (C1’), 76,9- ( C3’), 76,7- (C5’), 74,2- (C2’), 69,8- (C4’) và 61,3- (C6’) phù
hợp với dữ liệu y văn (Nonaka et al.1982).

Hình 1: Cấu trúc của 2,3,5,4-TETRAHYDROXYSTILBENE 2-O--D-GLUCOPYRANOSIDE

Hoạt tính loại bỏ gốc tự do DPPH:

DPPH là một gốc tự do ổn định và nhận một nguyên tử hydro để trở thành một
phân tử nghịch từ ổn định. Sự chuyển màu từ tím sang vàng và độ hấp thụ quang
của nó giảm ở bước sóng 517 nm . Hình 2 minh họa sự giảm đáng kể (P 0,05) nồng
độ của gốc DPPH do khả năng loại bỏ gốc tự do của các chất chiết xuất từ PM và
resveratrol. Hoạt động thu dọn gốc tự do cũng tăng lên khi nồng độ dịch chiết tăng
lên. Trong hệ thống này, các hoạt động thu gom các gốc tự do của các loại SG theo
thứ tự PM-SG (IC50 8,06 mg / mL) resveratrol (IC50 9,21 mg / mL) RFPM-SG
(IC50 19,77 mg / mL) PM thô -SG (33,85 mg / mL). Những kết quả này chỉ ra
rằng cả hai chiết xuất PM đều có tác dụng đáng chú ý đối với việc loại bỏ các gốc

tự do. Kết quả có ý nghĩa thống kê (P 0,05).

Hoạt động loại bỏ gốc tự do Hydroxyl:

Các tác động loại bỏ gốc tự do của SG đối với gốc tự do hydroxyl được thể hiện
trong Hình 3. Bốn mẫu có hoạt tính loại bỏ gốc hydroxyl mạnh với một ý nghĩa
thống kê (P 0,05). IC50 của PM-SG, resveratrol, RFPM-SG và PM-SG thô lần lượt
là 2,75, 3,05, 3,37 và 3,93 mg / mL.
Hoạt động loại bỏ Superoxide Anion:

Superoxide anion có nguồn gốc từ quá trình tự oxy hóa pyrogallol. Kết quả của
chúng tôi đã chứng minh rằng SG đã ức chế các gốc oxy tự do theo cách phụ thuộc
vào liều lượng. Như thể hiện trong Hình 4, IC50 của SG tinh khiết (PM-SG) thể
hiện hoạt tính chống oxy hóa mạnh hơn sáu lần so với cao thô (PM-SG thô). Hoạt
động thu gom anion Superoxide của các mẫu này cho thấy thứ tự sau: PM-SG
(IC50 0,57 mg / mL) resveratrol (IC50 0,73 mg / mL) RFPM-SG (IC50 0,82 mg /
mL) PM-SG thô (IC50 3,36 mg / mL). Kết quả có ý nghĩa thống kê (P 0,05).
Hoạt động ức chế Lipid Peroxide

Lipid peroxit được tạo ra từ quá trình oxy hóa của các chuỗi axit béo không bão
hòa đa do một quá trình tạo ra các gốc tự do. Trong điều kiện sinh lý bình thường,
nồng độ thấp của peroxit lipid được tìm thấy trong các mô. Dưới tác đô ̣ng của
stress oxy hóa, các gốc tự do phản ứng với lipid trong các mô, dẫn đến tăng cường
hình thành lipid peroxit (Girotti 1985). Hình 5, 6 và 7 cho thấy tỷ lệ phần trăm ức
chế peroxit lipid trong mô gan, tim và não của chuột, tương ứng. Ngoại trừ PM-SG
thô, không có sự ức chế hình thành peroxide trong mô tim. Trong tất cả các thử
nghiệm khác, có một sự ức chế đáng kể sự hình thành lipid peroxide phụ thuộc vào
nồng độ đối với tất cả các mẫu ở tất cả các mô. Ngoài ra, PM-SG tinh khiết thể
hiện các tác dụng ức chế khác nhau đối với các mô cơ quan khác nhau. Chưa rõ tại
sao sự ức chế peroxit lipid trong mô gan lại cao hơn ở tim và não. Hình 5 cho thấy
tác dụng ức chế của các chế phẩm PM glycoside đối với sự hình thành lipid
peroxide trong mô gan, IC50 của PM-SG, resveratrol, RF-PM-SG và PM-SG thô
lần lượt là 13,68, 13,91, 15,43 và 40,50 mg / mL. . Có sự khác biệt có ý nghĩa
thống kê (P 0,05) giữa giá trị IC50 đối với việc ức chế lipid peroxit, ngoại trừ giữa
PM-SG và resveratrol (P 0,05). Hình 6 cho thấy tác dụng ức chế của các chế phẩm
PM glycoside đối với sự hình thành lipid peroxide trong mô tim, IC50 của PM-SG,
resveratrol và RF-PM-SG tương ứng là 16,34, 18,96 và 27,90 mg / mL, và những
khác biệt này có ý nghĩa thống kê (Tr 0,05). Hình 7 cho thấy tác dụng ức chế của
các chế phẩm PM glycoside đối với sự hình thành lipid peroxide trong các mô não;
IC50 của PM-SG, resveratrol và RF-PM-SG lần lượt là 17,62, 21,23 và 21,75 mg /
mL. Có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (P 0,05) giữa giá trị IC50 để ức chế lipid
peroxit, ngoại trừ giữa RF-PM-SG và resveratrol (P 0,05). Đối với PM-SG thô, ở
nồng độ 40 mg / mL, chỉ có 28,95% sự ức chế peroxit lipid được quan sát thấy.
IV/ Kết luâ ̣n:
SG, và dạng tinh thể tinh khiết của nó, 2,3,5,4 -tetrahydroxystilbene 2-O-b-
Dglucopyranoside, lần đầu tiên được phân lập từ gốc PM bởi Kimura et al. (1983).
Trong nghiên cứu này, kết quả từ các thử nghiệm chống oxy hóa khác nhau cho
thấy SG từ PM có hoạt tính chống oxy hóa cao. Chúng tôi cũng đã phát triển một
phương pháp đơn giản sử dụng nhựa để điều chế phân đoạn SG với kết quả là hoạt
tính chống oxy hóa cao. Do tính tiện lợi và chi phí chuẩn bị thấp, phương pháp này
có thể được sử dụng để điều chế phân đoạn SG từ PM như một thành phần dinh
dưỡng hoặc thực phẩm chức năng.

V/ Tài liêụ tham khảo

BABIZHAYEV, M.A. and COSTA, E.B. 1994. Lipid peroxide and reactive
oxygen species generating systems of the crystalline lens. Biochim. Biophys. Acta
1225, 326–337.
BLOIS, M.S. 1958. Antioxidant determination by the use of a stable free radical.
Nature 181, 1119–1200.

BRACA, A., DE TOMMASI, N., DI BARI, L., PIZZA, C., POLITI, M. and
MORELLI, I. 2001. Antioxidant principles from Bauhinia terapotensis. J. Nat.
Prod. 64, 892–895.
CHANG, C.W., HUANG, H.C., CHIU, T.H. and CHAO, P.D.L. 1990.
Vasorelaxant anthraquinones from Polygonum multiflorum thunb. J. Chin. Med. 1,
94–101.
CHEN, K.Y. and LI, F. 1993. Tonics and astringents. In Clinical Guide to Chinese
Herbs and Formulae (S.Y. Chen, F. Li, S. Chen and F. Diebschlaq, eds.) pp. 75–
78, W.B. Saunders Co, New York, NY.
CHEN, Y., WANG, M.F., ROSEN, R.T. and HO, C.-T. 1999. 2,2-Diphenyl-1-
picrylhydrazyl radical-scavenging active components from Polygonum
multiflorum thunb. J. Agr. Food Chem. 47, 2226–2228.
DAS, D., BANDYOPADHYAY, D., BHATTACHARJEE, M. and BANERJEE,
R.K. 1997. Hydroxyl radical is the major causative factor in stress-induced gastric
ulceration. Free Radical Bio. Med. 23, 8–18.
DUH, P.D. 1998. Antioxidant activity of burdock (Arctium lappa linne): Its
scavenging effect on free radical and active oxygen. J. Am. Oil Chem. Soc. 75,
455–465.

GIROTTI, M.W. 1985. Mechanisms of lipid peroxidation. Free Radical Bio.

Med. 1, 87–95.
GOLDESTEIN, I.M., KAPLAN, H.B., EDELSON, H.S. and WEISSMAN, G.
1979. Ceruloplasmin: A scavenger of superoxide anion radicals. J. Biol. Chem.
254, 4040–4045.
HALLIWELL, B. and GUTTERIDGE, J.M. 1990. Role of free radicals and
catalytic metal ions in human disease: An overview. Method. Enzymol.
186, 1–85.
HALLIWELL, B. and GUTTERIDGE, J.M. 1999. Free Radicals in Biology and
Medicine. Oxford University Press, Oxford, U.K.
HONG, C.Y., LO, Y.C., TAN, F.C., WEI, Y.H. and CHEN, C.F. 1994. Astragalus
membranceus and Polygonum multiflorum protect rat heart mitochondria against
lipid peroxidation. Am. J. Chinese Med. 22, 63–70.
HUANG, K.C. 1993. The Pharmacology of Chinese Herbs, pp. 101–102, CPC
Press, Boca Raton, FL.
IP, S.P., TSE, A.S.M., POON, M.K.T. and KO, K.M. 1997. Antioxidant activities
of Polygonum multiglorum thunb, in vivo and in vitro. Phytother. Res. 11, 42–44.
ITO, N., FUKUSHIMA, S., HASEGAWA, A., SHIBATA, M. and OGISO, T.
1983. Carcinogenecity of butylated hydroxy anisole in F344 rats. J. Natl. Cancer I.
70, 343–347.
KIMURA, Y., OHMINAMI, H., OKUDA, H., BABA, K., KOZAWA, K. and
ARICHI, S. 1983. Effects of stilbene components of roots of Polygonum spp. on
liver injury in peroxidized oil-fed rats. Planta Med. 49, 13–19.
KINSELLA, J.E., FRANKEL, E., GERMAN, B. and KANNER, J. 1993. Possible
mechanism for the protective role of the antioxidant in wine and plant foods. Food
Technol. 47, 85–89.
LAI, L.S., CHOU, S.T. and CHAO, W.W. 2001. Studies on the antioxidative
activities of Hsian-tsao (Mesona procumbens Hemsl) leaf gum. J. Agr. Food
Chem. 49, 963–968.
MURAMATSU, H., KOGAWA, K., TANAKA, M., OKUMURA, K., KOIKE, K.,
KUGA, T. and NIITSU, Y. 1995. Superoxide dismutase in SAS human tongue
carcinoma cell line is a factor defining invasiveness and cell motility. Cancer Res.
55, 6210–6214.
NG, T.B., LIU, F. and WANG, Z.T. 2000. Antioxidative activity of natural
products from plants. Life Sci. 66, 709–723.
NONAKA, G.I., MIWA, N. and NISHIOKA, I. 1982. Stilbene glycoside gallates
and proanthocyanidins from Polygonum multiflorum Thunb. Phytochemistry 21,
429–432.
OLIVER, C.N., AHN, B., MOERMAN, E.J., GOLDSTEIN, S. and
STADTMAAN, E.R. 1987. Age-related changes in oxidized protein. J. Biol.
Chem. 262, 5488–5491.

PRYOR, W.A. 1991. The antioxidant nutrient and disease prevention – what do we
know and what do we need to find out? Am. J. Clin. Nutr. 53, 391–393.
ROWLEY, D.A. and HALLIWELL, B. 1983. Superoxide-dependent and
ascorbate-dependent formation of hydroxyl radicals in the presence of copper salts:
A physiologically significant reaction? Arch. Biochem. Biophys. 225, 279–284.
SMITH, M.A., PERRY, G., SAYRE, L.M., ANDERSON, V.E., BEAL, M.F. and
KOWALL, N. 1996. Oxidative damage in Alzheimer’s. Nature 382, 120–121.
STEINBERG, D., PARTHASARATHY, S., CAREW, T.E., KHOO, J.C. and
WITZTUM, J.L. 1989. Beyond cholesterol modification of low density lipoprotein
that increase its atherogenicity. New Engl. J. Med. 320, 915– 924.
WEN, M.X., PEI, X.X. and QING, L. 2001. Antioxidant activity of watersoluble
chitosan derivatives. Bioorg. Med. Chem. Lett. 11, 1699– 1701.
XIAO, P.G., XING, S.T. and WANG, L.W. 1993. Immunological aspects of
chinese medicinal plants as anti-aging drugs. J. Ethnopharmacol. 38, 167–175.
YEN, G.C. and DUH, P.D. 1994. Scavenging effect of methanolic extracts of
peanut hulls on free radical and active oxygen. J. Agr. Food Chem. 42, 6–29.
YILDIRIM, A., OKTAY, M., KaRa, A.A., ALGUR Ö.F. and Bilaloglu, V.
2000. Comparison of antioxidant and antimicrobial activities of tilia (Tilia argenta
Desf Ex DC), sage (Salvia triloba L.) and black tea (Camellia sinensis) extracts. J.
Agr. Food Chem. 48, 5030–5034.
YU, W., ZHAO, Y., XUE, Z., JIN, H. and WANG, D. 2001. The antioxidant
properties of lycopene concentrate extracted from tomato paste. J. Am. Oil Chem.
Soc. 78, 697–701.
ZHANG, Z., ZHUANG, Q.Q. and MEI, M.Z. 1983. Effects of some drugs on
plasma and liver lipoprotein lipase activities and plasma cholestesterol levels in
rats. Acta Pharmacol. Sin. 18, 468–471.
ZHAO, Y., YU, W., WANG, D., LIANG, X. and Hu, T. 2003.
Chemiluminescence determination of free radical scavenging abilities of “tea
pigments” and comparison with “tea polyphenols”. Food Chem. 80, 115–118.
ZHENG, W. and WANG, S.Y. 2001. Antioxidant activity and phenolic
compounds in selected herbs. J. Agric. Food Chem. 49, 5165–5170.