Professional Documents
Culture Documents
บทคัดย่อ
งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาฤทธิ์ต้านออกซิเดชัน ปริมาณฟีนอลิก ฟลาโวนอยด์และแอลคาลอยด์
รวมของสารสกัดลาต้นนกกระลิงแดงที่สกัดด้วยเฮกเซน ไดคลอโรมีเทน แอซิโตนและเมทานอล ทาการตรวจสอบ
ฤทธิ์ต้านออกซิเดชันโดยวิธี DPPH พบว่าสารสกัดแอซิโตนมีความสามารถในการต้านออกซิเดชันสูงที่สุด (IC50 =
2.12 0.01 mg/ml) และมีฤทธิ์สูงกว่าสารมาตรฐาน BHT (IC50 = 14.05 0.05 mg/ml) ประมาณ 6.6 เท่า
การหาปริ ม าณฟี น อลิ ก ฟลาโวนอยด์ แ ละแอลคาลอยด์ วิ เ คราะห์ ด้ ว ยวิ ธี Folin-Ciocalteu Colorimetric
aluminium chloride และ Bromocresol Green method ตามลาดับ ผลการวิจัยพบว่าปริมาณสาร
ฟีนอลิกรวมของทุกสารสกัดไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสาคัญ (p 0.05) ส่วนปริมาณฟลาโวนอยด์รวมสูงสุดพบใน
สารสกัดเฮกเซนมีค่า 140.0 0.01 มิลลิกรัมสมมูลเควอซิทินต่อกรัมสารสกัด ซึ่งแตกต่างจากสารสกัดชนิดอื่น
อย่างมีนัยสาคัญทางสถิติ (p 0.05) และปริมาณแอลคาลอยด์สูงสุดพบในสารสกัดแอซิโตน คือ 1,684.95 ± 0.02
มิลลิกรัมสมมูลของอะโทรพีนต่อกรัมสารสกัด จากผลการวิจัยครั้งนีพ้ บว่าความสามารถในการต้านออกซิเดชันของ
สารสกัดลาต้นนกกระลิงแดงมีความสัมพันธ์โดยตรงกับปริมาณสารฟีนอลิกและแอลคาลอยด์รวมที่ค่าสัมประสิทธิ์
สหสัมพันธ์ r เท่ากับ 0.991 และ 0.686 ตามลาดับ แต่มีความสัมพันธ์เชิงลบกับปริมาณฟลาโวนอยด์รวมของสาร
สกัดซึ่งมีค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์เป็น 0.966
532 KKU Science Journal Volume 45 Number 3 Research
ABSTRACT
This research aims to study the antioxidant activity, total phenolic, flavonoid and
alkaloid contents of hexane, dichloromethane, acetone and methanol extracts from dried stem
of Capparis kerrii Craib. The antioxidant activity was evaluated by DPPH assays. The results
showed that acetone extract (IC50 = 2.120.01 mg/ml) exhibited higher antioxidant potential
than BHT standard (IC50 = 14.050.05 mg/ml) about 6.6 times. Total phenolic, flavonoid and
alkaloid contents were investigated using Folin-Ciocalteu, colorimetric aluminium chloride assays
and Bromocresol green method, respectively. The results showed that there was no significant
difference on the total phenolic contents (p 0.05) in all extracts. The highest total flavonoid
content found in hexane extract (p0.05) was 140.0 0.01 mg QE/g crude extract and the
highest total alkaloid in extracts of acetone was 1,684.95 ± 0.02 mg AE/g crude extract. In
addition, the positive correlation coefficients were observed between the antioxidant potential
and total phenolic content (r = 0.991) and alkaloid content (r = 0.686), respectively. However,
the negative correlation coefficients were found (r = 0.966) between the antioxidant activity and
total flavonoid content.
วั ต ถุ ป ระสงค์ เ พื่ อ ศึ ก ษาฤทธิ์ ก ารต้ า นออกซิ เ ดชั น พ.ศ.2557 ผ่ า นการตรวจเอกลั ก ษณ์ แ ละชื่ อ
ปริมาณสารประกอบฟีนอลิก ฟลาโวนอยด์และแอลคา- วิทยาศาสตร์โดยการเปรียบเทียบกับตัวอย่างพันธุ์ไม้
ลอยด์ของสารสกัดจากลาต้นนกกระลิงแดง เนื่องจาก และเก็บตัวอย่างพันธุ์ไม้แห้งที่สานั กงานหอพรรณไม้
หากสารสกั ด จากล าต้ น นกกระลิ ง แดงมี ฤ ทธิ์ ต้ า น กร ม อุ ท ย า นแ ห่ งชา ติ สั ต ว์ ป่ า แ ล ะพั น ธุ์ พื ช โ ด ย
ออกซิเดชันที่ดีและปริมาณสารต้านออกซิเดชัน สูงจะ ผศ. นันท์นภัส สุวรรณสินธุ์
เป็นแหล่งของสารต้านออกซิเดชันที่ดีสามารถใช้เป็นยา การเตรียมสารสกัด
หรื อ ผลิ ต ภั ณ ฑ์ เ สริ ม อาหารเพื่ อ หลี ก เลี่ ย งการ นาลาต้นของนกกระลิงแดงมาหั่ นให้มีขนาด
เกิ ด ปฏิ กิ ริ ย าออกซิ เ ดชั น ของเซลล์ ใ นร่ า งกายได้ เล็กและผึ่งลมให้แห้ง บดให้ละเอียดด้วยเครื่องบด ชั่งผง
(Lamien-Meda et al., 2008) อีกทั้งอาจใช้เป็นข้อมูล ลาต้นนกกระลิงแดงหนัก 250 กรัม บรรจุในขวดแก้วที่
เชิงวิชาการเพื่อสนับสนุนการนาสมุนไพรท้องถิ่นไปใช้ แห้ ง และสะอาด สกั ด ด้ ว ยเฮกเซนโดยการแช่ ห มั ก
ประโยชน์ตามภูมิปัญญา สาหรับการป้องกันหรือรักษา (maceration) พืชเป็นเวลา 3 วันที่อุณหภูมิห้อง กรอง
โรคหัวใจและหลอดเลือด มะเร็งและเบาหวาน เป็นต้น ด้ ว ยกระดาษกรอง ระเหยตั ว ท าละลายด้ ว ยเครื่ อ ง
หรือแม้แต่การนาข้อค้นพบจากการวิจัยไปต่อยอดเชิง ระเหยแบบหมุน (rotary evaporator) ทาซ้า 3 ครั้งจะ
ลึกในอนาคต ได้สารสกัดเฮกเซน นากากพืชมาแช่หมักต่อด้วยตัวทา
ละลายที่ มี ส ภาพขั้ ว สู ง ขึ้ น ได้ แ ก่ ไดคลอโรมี เ ทน
วิธีการดาเนินการวิจัย แอซิโตนและเมทานอล จะได้สารสกัดไดคลอโรมีเทน
เครื่องมือและสารเคมี แอซิโตนและเมทานอล ตามลาดับ เก็บสารสกัดที่แห้ง
เครื่องมือสาคัญที่ใช้ในการวิจัย ได้แก่ rotary ไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส เพื่อใช้ในการทดลอง
evaporator (Buchi B-500, Switzerland) เครื่อง ขั้นตอนต่อไป
UV-Visible spectrophotometer (Shimadza UV- การทดสอบฤทธิ์ ต้ า นออกซิ เ ดชั น โดยวิ ธี DPPH
1601, Australia) สารเคมีที่สาคัญ ได้แก่ DPPH (2,2- assay ซึ่งเป็นความสามารถของสารสกัดที่ดักจับอนุมูล
diphenyl-1-picrylhydrazyl) BCG (Bromocresol อิสระ DPPH โดยดัดแปลงมาจากวิธีของ Karagozler
Green) เควอซิทิน (quercetin) กรดแกลลิก (gallic et al. (2008) โดยใช้ BHT เป็นสารมาตรฐาน มีวิธีการ
acid) และอะโทรพี น (Atropine) ซื้อจากบริษั ท ทดลองดังนี้ เตรียมสารละลาย DPPH ในเอทานอลที่
Sigma-Aldrich (USA) โซเดียมคาร์บอเนต (Na2CO3) ความเข้มข้น 0.05 มิลลิกรัม/มิลลิลิ ตร ลงในหลอด
โซเดี ยมไนไทรท์ (NaNO2) และอลู มิเนี ยมคลอไรด์ ทดลองขนาดเล็ ก ให้ ไ ด้ ป ริ ม าตรรวมสุ ด ท้ า ยเป็ น 6
(AlCl3) ซื้อจากบริษัท Univar (Australia) และ BHT มิลลิลิตร แบ่งชุดการทดสอบเป็น 3 ชุด (ชุด A, B และ
(Butylated hydroxytoluene) จากบริ ษั ท Fluka C) ดังนี้
(Germany) และตัวทาละลายทุกชนิดที่ใช้ในงานวิจัยนี้ ชุด A (สารตัวอย่าง) = สารตัวอย่าง
เป็นเกรดสาหรับการวิเคราะห์ (AR grade) 3 มิลลิลิตร + สารละลาย DPPH 3 มิลลิลิตร
แหล่งที่มาของตัวอย่างพืช ชุด B (สารไร้สิ่งตัวอย่าง) = สารตัวอย่าง
ตัวอย่างลาต้นของนกกระลิงแดงเก็บจากป่า 3 มิลลิลิตร + เอทานอล 3 มิลลิลิตร
โป่งสลอด อ.บ้านลาด จ.เพชรบุรี เมื่อเดือ นเมษายน
งานวิจัย วารสารวิทยาศาสตร์ มข. ปีที่ 45 เล่มที่ 3 535
ตารางที่ 1 ลักษณะทางกายภาพและปริมาณของสารสกัดลาต้นนกกระลิงแดง
สารสกัด ลักษณะทางกายภาพ นาหนัก (กรัม) ร้อยละโดยนาหนักa
เฮกเซน ของเหลวหนืด สีเหลืองอ่อน 1.98 0.79
ไดคลอโรมีเทน ของเหลวหนืด สีน้าตาลอ่อน 2.30 0.92
แอซิโตน ของเหลวหนืด สีน้าตาลอมแดง 3.38 1.35
เมทานอล ของเหลวหนืด สีน้าตาลเข้ม 11.21 4.48
a หมายถึง ร้อยละโดยน้าหนักของสารสกัดเทียบกับน้าหนักพืชแห้ง
จากตารางที่ 4 พบว่ า ปริ ม าณฟี น อลิ ก นี้ พ บว่ า ปริ ม าณสารฟี น อลิ ก มี ค วามสั ม พั น ธ์ กั บ
ฟลาโวนอยด์และแอลคาลอยด์มีความสัมพันธ์กับฤทธิ์ ความสามารถในการต้ า นออกซิ เ ดชั น สอดคล้ อ งกั บ
ต้านออกซิเดชัน โดยค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ระหว่าง รายงานของ Pourmorad et al.(2006) ที่พบว่าสาร
ฤทธิ์ต้านออกซิเดชันกับปริมาณฟีนอลิก ฟลาโวนอยด์ สกัดที่มีปริมาณสารฟีนอลิกสูงจะมีฤทธิ์ต้านออกซิเดชัน
และแอลคาลอยด์ คือ 0.991 (เชิงลบ) 0.966 (เชิงบวก) สูงด้ วย เนื่ องจากสารประกอบฟี นอลิ กเป็ นสารต้า น
และ 0.686 (เชิงลบ) ตามลาดับ เนื่องจากฤทธิ์ ต้าน ออกซิเดชันที่ทาหน้าที่เป็น free radical terminators
ออกซิ เ ดชั น รายงานเป็ น ค่ า IC50 (mg/mL) โดย (Abdel-Hameed, 2009) ที่ มี โ ครงสร้ า งหลั ก
พิจารณาจากค่าที่มีค่ าน้อยจะมีค วามสามารถในการ ประกอบด้วยวงอะโรมาติก (aromatic ring) แทนที่
ต้ า นออกซิ เ ดชั น สู ง แสดงว่ า ปริ ม าณฟี น อลิ ก และ ด้วยหมู่ไฮดรอกซิล (hydroxyl group) ที่สามารถใช้ดัก
แอลคาลอยด์มีบทบาทสาคัญต่อฤทธิ์ต้านออกซิเดชันซึ่ง จั บ อนุ มู ล อิ ส ระได้ ดั งนั้ น เมื่ อ สารสกั ด มี ป ริ ม าณสาร
สอดคล้องกับรายงานของ Stajic และคณะ (2013) ฟีนอลิกสูงจึงส่งผลให้มีแนวโน้มในการต้านออกซิเดชัน
และพบว่าปริมาณฟีนอลิกมีผลต่อประสิทธิภาพในการ ได้ สู ง ด้ ว ย แต่ พ บว่ า ปริ ม าณฟลาโวนอยด์ ร วมที่
ต้ า นออกซิ เ ดชั น มากกว่ า แอลคาลอยด์ จ ากค่ า วิเคราะห์ได้มีความสัมพันธ์เชิงลบกับความสามารถใน
สัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ที่สูงกว่า แสดงว่าเมื่อปริมาณ การต้านออกซิเดชัน เมื่อสารสกัดมีปริมาณฟลาโวนอยด์
ฟี น อลิ ก สู ง จะส่ ง ผลให้ ป ระสิ ท ธิ ภ าพในการ ต้ า น สู ง ขึ้ น แต่ ท าให้ มี ฤ ทธิ์ ต้ า นออกซิ เ ดชั น ลดต่ าลง ซึ่ ง
ออกซิเดชันเพิ่มสูงขึ้นด้วย แต่ปริมาณฟลาโวนอยด์ไม่มี แตกต่างจากรายงานของ Pourmorad et al.(2006) ที่
ผลต่อประสิทธิภาพในการต้านออกซิเดชัน จากงานวิจัย พบว่าสารสกัดที่มีปริมาณฟีนอลิกและฟลาโวนอยด์ใน
540 KKU Science Journal Volume 45 Number 3 Research
Malaysia young ginger (Zingiber officianle Pourmorad, F., Hosseinimehr, S.J., and Shahabimajd, N.
Roscoe). Molecules 15: 4324-4333. (2006). Antioxidant activity, phenol and
Harmed, A.R., Abdel-Shafeek, K.A., Abdel-Azim, N.S., flavonoid contents of some selected Iranian
Ismail, S.I., and Hammouda, F.M. (2007). medicinal plants. African Journal of
Chemical investigation of some Capparis Biotechnology 5(11): 1142-1145.
species growing in Egypt and their anti- Rathee, S., Rathee, P., and Kumar, V. (2011).
oxidant activity. Evidence-Based Comple- Phytochemical and pharmacological
mentary & Alternative Medicine 4: 25-28. potential of kair (Capparis decidua).
Karagozler, A.A., Erdag, B., Emek, Y.C. and Uygun, D.A. International Journal Phytomedicine 2: 10-
(2008). Antioxidant activity and proline 17.
content of leaf extracts from Dorystoecha- Singleton, V.L., and Rossi, Jr. J.A. (1965). Colorimetry of
shastata. Food Chemistry 111: 400-407. total phenolics with phosphomolybdic-
Lamien-Meda, A., Lamien, C. E., Compaor, M. M. Y., phos-phortungstic acid reagents. American
Meda, R. N. T., Kiendrebeogo,M., Zeba, B., et Journal of Enology and Viticulture 16: 144-
al. (2008). Polyphenol content and 158.
antioxidant activity of fourteen wild edible Stajić, M., Vukojević, J., Knežević, A., Laušević, S.D.,
fruits from Burkina Faso. Molecules 13: 581– and Milovanović, I. (2013). Antioxidant
594. protective effects of mushroom
Lu, J.M., Lin, P.H., Yao, Q., and Chen, C. (2010) metabolites. Current Topics in Medicinal
Chemical and molecular mechanisms of Chemistry13: 2660–2676.
antioxidants: experimental approaches and Sudta, P., Prapasanobol, V. and Suwansin, N. (2015).
model systems. Journal of Cellular and Phytochemicals and cytotoxic activity of
Molecular Medicine 14: 840–860. some capparis plants . In Proceeding the 9th
Mali, R., Hundiwale, J., Sonawane, R., Patil, R., and Rambhaibarni Research National Conference.
Hatapakki, B. (2004). Evaluation of Capparis (pp. 306-316). Thailand : Chantaburi.
decidua for anthelmentric and anti- Suwansin, N. (2010). Flora in Pongsalood forest at
microbial activities. Indian Journal of Natural Phetchaburi province. Phetchaburi Rajabhat
Products 20: 10-13. University.Thailand : Phetchaburi. (in Thai)
Mourao, F., Umeo, S. H., Takemura, O. S., Linde, G. A., Temple, N.J. (2000). Antoxidant and disease: more
and Colauto, N. B. (2011). Antioxidant questions than answers. Nutrition Research
activity of Agaricus brasiliensis basidiocarps 20: 449–459.
on different maturation phases. Brazilian Wiriyakarun, S., Thammathaworn, A., Chantaranothai,
Journal of Microbiology 42(1): 197–202. P. (2002). Comparative leaf anatomy of
Pieniz, S., Colpo, E., Oliveira, V. R., Estefanel, V., and capparidaceae in Thailand. KKU Research
Andreazza, R. (2009). Avaliacao in vitro do Journal (Graduate studies) 2: 69-71. (in Thai)
potencial antioxidante de frutase hortalias.
Cienciae Agrotecnologia 33(2): 552–559.
542 KKU Science Journal Volume 45 Number 3 Research
Yu, Y., Gao, H., Tang., Z., Song, X., and Wu, L. (2006). Zhishen, J., Mengcheng, T., Jianming, W. (1999).
Several phenolic acids from the fruit of Determination of flavonoid contents in
Capparis spinose. Asian journal of traditional mulberry and their scavenging effects on
medicines 1: 1-4. superoxide radicals. Food Chemistry 6: 555-
559.